KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA
SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.)
DENGAN METODE DPPH
SKRIPSI
OLEH:
DESI TRISNAWATI
NIM 121501088
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA
SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.)
DENGAN METODE DPPH
SKRIPSI
Diajukan sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
DESI TRISNAWATI
NIM 121501088
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
iii
PENGESAHAN SKRIPSI
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA
SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.)
DENGAN METODE DPPH
OLEH:
DESI TRISNAWATI NIM 121501088
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 27 Juli 2016
Disetujui Oleh:
Pembimbing I, Panitia Penguji,
Sri Yuliasmi, S.Farm., M.Si., Apt. Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.
NIP 198207032008122002 NIP 195201041980031002
Pembimbing II, Sri Yuliasmi, S. Farm., M.Si., Apt.
NIP 198207032008122002
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt. Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195709091985112001 NIP 195112231980032002
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt.
NIP 195109081985031002
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala limpahan anugerah dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang berjudul “Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) dengan Metode DPPH”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Sri Yuliasmi, S.Farm., M.Si., Apt., dan Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., selaku pembimbing yang telah membimbing dengan penuh kesabaran, tulus dan ikhlas selama penelitian hingga menyelesaikan penulisan skripsi ini. Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt., selaku penasehat akademik yang memberikan motivasi dan bimbingan kepada penulis selama perkuliahan. Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.S., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan, arahan, kritik dan saran dalam penyusunan skripsi ini dan seluruh staf pengajar Fakultas Farmasi.
v
berkorban dengan tulus ikhlas memberikan dukungan baik moril maupun materil selama perkuliahan hingga penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan dalam penulisan skripsi ini, dengan itu sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua.
Medan, Agustus 2016 Penulis,
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertandatangan di bawah ini,
Nama : Desi Trisnawati
Nomor Induk Mahasiswa : 121501088
Program Studi : Reguler Farmasi
Judul Skripsi : Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) dengan Metode DPPH
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka. Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Utara, dan bukan menjadi tanggungjawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Agustus 2016 Yang membuat pernyataan,
vii
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAUN KETEPENG
(Senna alata (L.) Roxb.) DENGAN METODE DPPH
ABSTRAK
Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) merupakan salah satu jenis tumbuhan dari keluarga Leguminosae yang diketahui memiliki berbagai khasiat untuk pengobatan termasuk sebagai antioksidan. Daun ketepeng banyak digunakan oleh masyarakat secara tradisional untuk pengobatan kudis, sariawan dan cacingan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik simplisia, kandungan senyawa kimia dan aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi daun ketepeng.
Serbuk simplisia daun ketepeng dikarakterisasi dan diskrining, selanjutnya diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 80%. Ekstrak etanol difraksinasi dengan pelarut n-heksana dan etilasetat. Analisis kandungan kimia secara kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kertas (KKt) serta uji aktivitas antioksidan terhadap DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil) sebagai radikal bebas dengan mengukur absorbansi DPPH pada panjang gelombang 516 nm pada menit ke-60 setelah penambahan pelarut metanol. Kemampuan antioksidan diukur sebagai penurunan absorbansi larutan DPPH setelah penambahan ekstrak atau fraksi.
Hasil karakterisasi serbuk simplisia diperoleh kadar air 6,62%, kadar sari yang larut dalam air 20,46%, kadar sari yang larut dalam etanol 15,40%, kadar abu total 4,14%, dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,37%. Hasil skrining fitokimia daun ketepeng mengandung senyawa kimia golongan flavonoida, glikosida, tanin, antrakinon, saponin dan triterpenoid/steroid. Hasil KLT dan KKt ekstrak etanol diperoleh 6 senyawa tanin, 3 senyawa flavonoid dan 4 senyawa triterpenoid/steroid. Hasil pengujian aktivitas antioksidan dengan metode DPPH menunjukkan bahwa ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air dari daun ketepeng memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai inhibitory
concentration (IC50) yang diperoleh dari ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi
CHARACTERIZATION OF SIMPLISIA AND PHYTOCHEMICAL SCREENING AND ANTIOXIDANT ACTIVITY TESTING FROM
KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.) LEAVES EXTRACT USING DPPH
ABSTRACT
Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) is one species of the family Leguminosae which are known to have various benefits for treatment, including as an antioxidant. Ketepeng widely used by people traditionally for the treatment of scabies, ulcers and intestinal worms. The purpose of this study was to determine the characteristics of the simplisia, chemical compounds content and antioxidant activity of extracts and fractions of ketepeng.
Simplisia powder was characterized and screened, then extracted by maceration using ethanol 80%. Ethanol extract was fractionated with n-hexane and ethylacetate. Analysis of chemical compounds by thin layer chromatography (TLC) and papper chromatography and then the antioxidant activity of extracts were tested using DPPH (1,1diphenyl-2-picrylhydrazil) as free radical. Absorbance of DPPH was measured at 516 nm, at 60th minute after the addition of methanol solvent. Antioxidant activity was measured as a decrease in absorbance of DPPH solution after the addition of extracts or fractions.
The result of simplisia powder characterization gave the water content value 6.62%, the water soluble extract 20.46%, the ethanol soluble extract 15.40%, the total ash 4.14%, and the ash is not soluble in acid 0.37%. Results of phytochemical screening showed that ketepeng contained flavonoid, glycoside, tannin, antraquinon, saponin and triterpenoid/steroid. Result analysis by TLC and papper chromatography, ethanol extract obtained 6 tannins, 3 flavonoids and 4 triterpenoids/steroids. Results of antioxidant activity testing by DPPH method showed that the ethanol extract, fraction of n-hexane, fraction of ethylacetate and water fraction of ketepeng have antioxidant activity with a inhibitory concentration value (IC50) obtained from the ethanol extract, n-hexane fractions,
ethylacetate fractions and the water fractions amounted to 60.08, 127.27, 33.43 and 66.78 µg/ml.
2.1.5 Kegunaan ... 6 (1,1-diphenyl-2 picrylhydrazil) ... 20
3.6.1 Pemeriksaan alkaloid ... 30
3.6.7 Pemeriksaan triterpenoid/steroid ... 32
3.7 Pembuatan Ekstrak dan Fraksi ... 32
3.9 Pengujian Antioksidan dengan Spektrofotometer Visibel . 34 3.9.1 Prinsip metode penangkapan radikal bebas DPPH ... 34
3.9.2 Pembuatan larutan blanko DPPH ... 34
3.9.3 Pengukuran panjang gelombang serapan maksimum DPPH ... 34
3.9.4 Pembuatan larutan induk ekstrak dan fraksi ... 35
3.9.5 Penentuan waktu reaksi ... 35
3.9.6 Pengukuran aktivitas antioksidan sampel uji ... 35
3.9.7 Penentuan persen peredaman ... 35
3.9.8 Penentuan nilai IC50 ... 36
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 37
xiii
4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia ... 37
4.3 Hasil Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia ... 39
4.4 Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi ... 40
4.5 Profil Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Daun Ketepeng ... 40
4.6 Profil Kromatografi Kertas Ekstrak Etanol Daun Ketepeng ... 40
4.7 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Ekstrak dan Fraksi .. 41
4.7.1 Hasil penentuan panjang gelombang serapan maksimum ... 41
4.7.2 Hasil analisis peredaman radikal bebas DPPH oleh sampel uji ... 42
4.7.3 Hasil analisis aktivitas antioksidan ... 43
4.7.4 Hasil analisis nilai IC50 (Inhibitory Concentration) .. 44
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 45
5.1 Kesimpulan ... 45
5.2 Saran ... 45
DAFTAR PUSTAKA ... 46
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman 2.1 Struktur dasar steroida dan sistem penomorannya ... 10 2.2 Resonansi DPPH ... 21 2.3 Reaksi antara DPPH dengan atom H dari senyawa antioksidan ... 22 4.1 Kurva panjang gelombang maksimum DPPH dalam metanol ... 42 4.2 Grafik hasil analisis aktivitas antioksidan ekstrak etanol, fraksi
xv
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman 4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia daun ketepeng
(Senna alata (L.) Roxb.) ... 38 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia daun ketepeng ... 39 4.3 Data hasil analisis KKt ekstrak etanol daun ketepeng ... 41 4.4 Hasil analisis peredaman radikal bebas oleh ekstrak dan fraksi
daun ketepeng ... 42 4.5 Hasil persamaan regresi linier dan nilai IC50 dari ekstrak dan
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman 1 Hasil identifikasi tumbuhan ketepeng (Senna alata (L.)
Roxb.) ... 50
2 Gambar tumbuhan dan daun ketepeng ... 51
3 Gambar simplisia dan serbuk simplisia daun ketepeng ... 52
4 Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun ketepeng ... 53
5 Bagan kerja penelitian ... 54
6 Bagan pembuatan ekstrak etanol daun ketepeng ... 55
7 Bagan pembuatan fraksi n-heksana dan fraksi etilasetat daun ketepeng ... 56
8 Perhitungan karakterisasi simplisia daun ketepeng ... 57
9 Kromatogram dan data Rf hasil KLT ekstrak etanol daun ketepeng (EEDK) ... 61
10 Kromatogram hasil KKt ekstrak etanol daun ketepeng dengan berbagai fase gerak ... 63
11 Penentuan waktu kerja ... 67
12 Hasil uji antioksidan ... 71
13 Perhitungan nilai IC50 ... 84
