AKTIVITAS INHIBISI TIROSINASE DARI EKSTRAK ETANOL
BUNGA KEMBANG SEPATU
(Hibiscus rosa-sinensis
L
)
SKRIPSI
Untuk memenuhi sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1
SITI NURYANTI
0908010033
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
PURWOKERTO
PERNYATAAN
Yang bertanda tangan dibawah ini, saya :
Nama : Siti Nuryanti
NIM : 0908010033
Program studi : Farmasi
Fakultas/Universitas : Farmasi/Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan dari hasil karya orang lain atau terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan disuatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Demikian pernyataan ini, apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggung jawabkan sesuai dengan ketentuan yang berlaku.
Purwokerto, Agustus 2013 Yang menyatakan,
Siti Nuryanti
ABSTRAK
SITI NURYANTI. Aktivitas Inhibisi Tirosinase Dari Ekstrak Etanol Bunga Kembang Sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L)
Dibawah bimbingan BINAR ASRINING DHIANI dan INDRI HAPSARI
Latar Belakang: Paparan sinar UV yang berlebih dapat mengakibatkan efek awal berupa pigmen kulit yang semakin gelap (pigment darkening) dan diikuti dengan kerusakan struktur kulit yang menyebabkan premature photoaging (penuaan dini). Pigmen gelap pada kulit disebabkan karena tubuh memproduksi melanin dalam jumlah yang banyak. Proses pembentukan melanin dikatalisis oleh enzim tirosinase. Penghambatan terhadap tirosinase dan senyawa antioksidan sangat diperlukan dalam sediaan kosmetik. Ekstrak etanol bunga kembang sepatu telah diketahui memiliki aktivitas antioksidan yang baik, tetapi belum pernah dilakukan penelitian terhadap penghambatan tirosinase.
Tujuan Penelitian: Untuk menentukan aktivitas inhibisi tirosinase dan nilai dari ekstrak etanol bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L).
Metode Penelitian: Jenis penelitian ini adalah eksperimental dengan rancangan
randomized block design dengan menguji konsentrasi ektrak etanol 50, 100, 200, 400
dan 800 µg/mL yang terlarut dalam DMSO terhadap aktivitas tirosinase. Penurunan aktivitas tirosinase ditandai dengan menurunnya intensitas warna coklat dari pembentukan dopakrom. Penurunan intensitas warna coklat dapat diukur absorbansinya menggunakan microplate reader pada panjang gelombang 490 nm. Hasil: Uji penghambatan terhadap tirosinase menunjukkan bahwa ekstrak etanol bunga kembang sepatu mempunyai aktivitas penghambatan yang rendah dibandingkan dengan kontrol positif hidrokuinon. Nilai dari ekstrak etanol bunga kembang sepatu yaitu 493,1 µg/mL sedangkan untuk hidrokuinon 16,34 µg/mL. Dari hasil uji analisis KLT menunjukkan ekstrak etanol bunga kembang sepatu tidak mengandung senyawa kuersetin, arbutin dan asam galat yang merupakan senyawa yang telah terbukti dapat menghambat aktivitas tirosinase.
Kesimpulan: Ekstrak etanol bunga kembang sepatu mempunyai aktivitas penghambatan yang rendah dengan nilai yaitu 493,1 µg/mL sedangkan untuk hidrokuinon 16,34 µg/mL
ABSTRACT
SITI NURYANTI. Tyrosinase Inhibition Activity of Ethanol Extract Hibiscus Flower
(Hibiscus rosa-sinensis L)
Under Supervision ofBINAR ASRINING DHIANI and INDRI HAPSARI
Background:Excessive exposure to UV rays can lead to the early effects of a pigment darkening and followed by structural damage which causes premature skin photoaging (premature aging). Pigment darkening caused bymelanin production in significant amounts. Melanin formationis catalyzed by the enzyme tyrosinase. Tyrosinase inhibitorand antioxidant compounds isnecessary in the cosmeticspreparation. Ethanol extract of Hibiscus flower has been known to be antioxidant agent, but there was noscientific reportson its inhibition of tyrosinase Objective: This research was aimed to determine the inhibitory activity of tyrosinase and the value of the ethanol extract of hibiscus flower (Hibiscus rosa-sinensis L). Methods: The study design was an experimental with randomized block design to test the concentration of ethanol extract 50, 100, 200, 400 and 800 µg/mL dissolved in DMSO ontyrosinase activity. Tyrosinase activity was by determined decreasing the intensity of the brown color which represented dopachrom formation. Decrease in the intensity of the color brown can be measured using a microplate reader with wavelength 490 nm.
Result:The results showed that the inhibition of tyrosinase ethanol extracts of hibiscus flowers have a low inhibitory activity compared to hydroquinone as positive control. value of the ethanol extract of the hibiscus flower 493.1 µg/mL, while for hydroquinone 16.34 ug / mL. TLC analysis showed that the ethanol extract of the hibiscus flower did not containedquercetin, gallic acid, arbutin which was reported as tyrosinase inhibitor.
Conclusion:The ethanol extract of the hibiscus flower has a low inhibitory activity with the value of 493.1 µg/mL, while for hydroquinone 16.34 ug/mL
Keywords:Hibiscus flowers, inhibition of tyrosinase, L-DOPA.
PERSEMBAHAN
Skripsi ini saya persembahkan kepada :
ALLAH SWT, atas segala kuasa dan kehendak_Nya skripsi ini dapat selesai pada waktunya.
Ayah (abdul munir) dan ibu (Halimah), yang selama ini tak henti-hentinya memberikan kasih sayang mereka, support dan dukungan baik moral maupun materi.
Muhlisin, mba tanti, jiyan dan masitoh, trimakasih atas dukungannya selama ini.
Lita, anggun trimakasih atas dukungan dan doanya.
Teman seperjuanganku, oyi dan amel, trimakasih atas kerja samanya,semangatnya selama penyusunan skripsi hingga skripsi ini selesai.
Untuk wina,trimakasih ya selama ini sudah mau mendengarkan keluh kesahku, trimakasih juga telah ikut membantu mencarikan bahan-bahan untuk penelitian skripsi.
Teman-teman farmasi angkatan 2009 dan juga teman-teman ASSASAINS yang tidak bisa aku sebutkan satu persatu namanya. Trimaksih atas kebersamaannya selama ini.
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat ALLAH SWT atas segala rahmat, hidayah serta inayahNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian (skripsi) yang berjudul “AKTIVITAS INHIBISI TIROSINASE DARI EKSTRAK ETANOL BUNGA KEMBANG SEPATU (Hibiscus rosa-sinensis L)”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi syarat dalam memperoleh gelar S1 di fakultas farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak, penulis tidak dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik. Oleh karena itu pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto
2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si.,Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
3. Binar Asrining Dhiani, M.Sc.,Apt selaku dosen pembimbing I, yang telah memberikan bimbingan, arahan dan petunjuk dalam penyusunan skripsi ini dengan penuh kesabaran, ketekunan, sehingga dapat diselesaikan dengan baik. 4. Indri Hapsari, M.Si.,Apt selaku dosen pembimbing II, yang telah memberikan
petunjuk dan motivasi yang tinggi, sehingga penyusunan skripsi ini dapat terlaksana hingga selesai.
5. Seluruh dosen Fakultas Farmasi UMP yang telah memberikan ilmunya sehingga dapat membantu penulis dalam menyelesaikan penulisan skripsi ini.
6. Seluruh laboran Fakultas Farmasi terutama Mas Mamat, Mas Heri dan Bu Titi terima kasih atas waktu, bantuan dan bimbingannya.
7. Bapak dan Ibu karyawan TU Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah membantu dalam hal administrasi.
8. Kedua orang tuaku tercinta yang telah memberikan dukungan moral, material dan spiritual.
9. Teman-teman satu angkatan farmasi 2009 dan juga teman-teman ASSASAINS terimakasih atas do’a, dukungan serta kebersamaannya selama ini dalam suka maupun duka dan untuk semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, terimakasih atas semua bantuannya.
Penulis telah berusaha semaksimal mungkin agar penyusunan skripsi ini dapat tersusun dengan sempurna, namun penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak penyusunan skripsi ini tidak akan berjalan baik. Dengan segala kerendahan hati dan lapang dada, penulis menerima kritik dan saran yang membangun dari para pembaca untuk kesempurnaan di masa datang.
DAFTAR ISI
HALAMAN PERSEMBAHAN ... vii
C. Inhibitor Tirosinase ... 7
C. Definisi Variabel Operasional ... 11
D. Waktu dan Tempat ... 13
G. Analisis Kualitatif dengan Menggunakan KLT ... 14
1. Identifikasi Senyawa Kuersetin... 14
2. Identifikasi Senyawa Arbutin... .. 15
3. Identifikasi Senyawa Asam galat... 15
H. Uji Penghambatan Melanin... 15
4. Pembuatan Buffer Fosfat 0,05M…... … 15
5. Pembuatan Larutan Tirosinase ...………….. 15
6. Pembuatan Larutan L-DOPA ... ………... 15
8. Pembuatan Larutan Kontrol Positif………. 16
9. Pengujian aktivitas Inhibisi Tirosinase……… 16
H. Analisis Data ... 17
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... ... 18
A. Determinasi Tanaman ... 18
B. Pengolahan Simplisia Bunga Kembang Sepatu ... 18
C. Pembuatan Ekstrak Bunga Kembang Sepatu ... 19
D. Organoleptis Ekstrak ... 20
E. Analisis Kualtitaif Dengan Menggunakan KLT... ... 20
1. Identifikasi senyawa kuersetin... ... 20
2. Identifikasi Senyawa Asam galat... 21
3. Identifikasi Senyawa Arbutin... 21
F. Uji Penghambatan Melanin ... ... 21
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... .... 28
A. Kesimpulan ... 28
B. Saran ... 28
DAFTAR PUSTAKA... ... 29
LAMPIRAN... 34
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 1 Persentase Inhibisi hidrokuinon dan ekstrak etanol bunga
kembang sepatu ... 23 Tabel 2 Persentase rendemen ekstrak etanol bunga kembang sepatu ... 38
DAFTAR GAMBAR
halaman Gambar 1 Bunga kembang sepatu ...4 Gambar 2. Skema pembentukan melanin ...7 Gambar 3. Hubungan log konsentrasi hidrokuinon dengan persen
inhibisi...25 Gambar 4. Hubungan log konsentrasi bunga kembang sepatu dengan
persen inhibisi ...25
DAFTAR LAMPIRAN
halaman Lampiran 1. Surat keterangan determinasi tanaman bunga
kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L) ... 35
Lampiran 2. Jalannya penelitian ... 37
Lampiran 3. Perhitungan rendemen ekstrak ... 38
Lampiran 4. Perhitungan pembuatan buffer fosfat pH 6,8 ... 39
Lampiran 5. Perhitungan pembuatan larutan L-DOPA ... 41
Lampiran 6. Perhitungan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Bunga Kembang Sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L) dan Hidrokuinon ... 42
Lampiran 7. Hasil absorbansi hidrokuinon dan ekstrak etanol bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L) ... 46
Lampiran 8. Perhitungan persentase inhibisi ... 48
Lampiran 9. Hasil perhitungan ... 59
