i
PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE ANALISIS
TABLET ATORVASTATIN SECARA KROMATOGRAFI CAIR
KINERJA TINGGI (KCKT)
Disusun Oleh :
ARDIAN DEWANGGA
M0613009SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi sebagian
persyaratan mendapatkan gelar Sarjana Farmasi
PROGRAM STUDI S1 FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
ii
HALAMAN PENGESAHAN
Skripsi dengan judul : Pengembangan dan Validasi Metode Analisis Tablet Atorvastatin Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Yang ditulis oleh
Nama : Ardian Dewangga
NIM : M0613009
Telah diuji dan dinyatakan lulus oleh dewan penguji pada :
Hari : Jumat
Tanggal : 21 Juli 2017 Dewan Penguji :
1. Ketua Sidang/Pembimbing I
Adi Yugatama, S.Farm., M.Sc.,Apt.
NIP. 198801312014041001 ………
2. Pembimbing II
Sholichah Rohmani, S.Farm.,M.Sc.,Apt.
NIP. 1983112420130201 ………
3. Penguji I
Dr. rer.nat. Saptono Hadi S.Si,M.Si,Apt.
NIP. 197604032005011001 ………
4. Penguji II
Fea Prihapsara, S.Farm., M.Sc., Apt.
NIP. 1987060620140401 ………
Disahkan pada tanggal ………..
Oleh :
Kepala Program Studi S1 Farmasi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta
iii
PERNYATAAN
Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi saya yang berjudul PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE ANALISIS TABLET ATORVASTATIN SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT) belum pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga belum pernah ditulis atau dipublikasikan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Apabila di kemudian hari dapat ditemukan adanya unsur penjiplakan maka gelar yang telah diperoleh dapat ditinjau dan/ dicabut.
Surakarta, 12 Juni 2017
iv
PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE ANALISIS TABLET ATORVASTATIN SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI
(KCKT)
ARDIAN DEWANGGA
Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret
ABSTRAK
Atorvastatin menjadi pilihan utama dalam terapi dislipidemia. Dengan berakhirnya masa paten atorvastatin, mengakibatkan industri farmasi membuat copy obat tersebut. Oleh karena itu, pengembangan metode untuk uji kualitas tablet yang menyangkut kadar atorvastatin pada tablet perlu dilakukan. Tujuan dari penelitian ini adalah mengembangkan serta melakukan validasi metode analisis tablet atorvastatin secara KCKT yang lebih sederhana.
Pada penelitian ini, digunakan sistem KCKT terdiri dari fase diam kolom fase terbalik Cosmosil C18 (150 x 4,6 mm, 5 µm), fase gerak campuran metanol dan air pH 3 (80 : 20 v/v), kecepatan alir 1 mL/menit dengan detektor UV 245 nm. Validasi metode analisis yang dilakukan meliputi: selektivitas, linearitas, akurasi, presisi, limit of detection (LOD), dan limit of quantitation (LOQ).
Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa metode yang dikembangkan memiliki validasi yang baik meliputi selektivitas, linearitas, akurasi, presisi, LOD, dan LOQ untuk analisis kadar tablet atorvastatin. Nilai LOD dan LOQ sebesar 0,2 dan 0,7 ng/mL, serta rentang linearitas berada pada 20 – 120 ng/mL. Hasil keseragaman kadar atorvastatin dalam tablet atrorvastain generik yaitu pada rentang 96,93 – 105,09 %.
v
DEVELOPMENT AND VALIDATION OF ATORVASTATIN TABLET ANALYSIS METHOD BY HIGH PERFORMANCE LIQUID
CHROMATOGRAPHY (HPLC)
ARDIAN DEWANGGA
Pharmacy Department, Mathematics and Sciences Faculty Sebelas Maret University
ABSTRACT
Atorvastatin is the primary choice for dyslipidemia treatment. Due to patent expiration of atorvastatin, the pharmaceutical industry makes copy of the drug. Therefore, the development methods for tablet quality tests involving atorvastatin levels on tablets needs to be performed. The purpose of this research is to develop and validate the simple atorvastatin tablet analytical method by HPLC.
HPLC system used in this experiment consisted of column Cosmosil C18 (150 x 4,6 mm, 5 µm) as the stationary reverse phase chomatography, a mixture of methanol-water at pH 3 (80 : 20 v/v) as the mobile phase, flow rate of 1 mL/min, and UV detector at wavelength of 245 nm. Validation methods were including: selectivity, linearity, accuracy, precision, limit of detection (LOD), and limit of quantitation (LOQ).
The results of this study indicate that the developed method has good validation including selectivity, linearity, accuracy, precision, LOD, and LOQ for analysis of atorvastatin tablet content. LOD and LOQ were 0.2 and 0.7 ng/mL, and the linearity range were 20 - 120 ng/mL. Results uniformity of atorvastatin levels in generic atrorvastatin tablets are in the range 96.93 - 105.09 %.
vi MOTTO
“Percaya, Semua Pasti Ada Jalannya”
“Yang Penting Selalu Yakin”
vii
PERSEMBAHAN
Skripsi ini kupersembahkan untuk papa,
viii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis haturakan kepada Tuhan YME karena berkat karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan penulisan Skripsi dengan judul
“PENGEMBANGAN DAN VALIDASI METODE ANALISIS TABLET
ATORVASTATIN SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)” dengan baik.
Skripsi merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi S1 Farmasi di Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta. Dalam penulisan Skripsi ini tidak akan selesai tanpa adanya bantuan dari banyak pihak, karena itu penulis menyampaikan terima kasih kepada:
1. Prof. Ir. Ari Handono Ramelan, M.Sc.(Hons), Ph.D, selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta.
2. Dr. rer. nat Saptono Hadi S.Si., M.Si., Apt. selaku Kepala Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta.
3. Adi Yugatama S.Farm., M.Sc., Apt. dan Sholichah Rohmani, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku pembimbing atas ilmu yang diberikan dengan segala ketulusan, kesabaran, dan keikhasannya dalam memberikan arahan, saran, serta telah membiayai penelitian ini.
4. Bapak Ediyanto dan Ibu Artiningrum kedua orang tua yang selalu mendoakan, menasehati, membimbing dan mendorong untuk selalu semangat.
5. Estu Retnaningtyas N, S.TP., M.Si. selaku pembimbing akademik yang sabar membimbing dari awal kuliah sampai sekarang.
6. Segenap dosen pengajar Program Studi S1 Farmasi yang telah memberikan ilmu dan pelajaran untuk saya lebih maju.
ix
8. Mas Anton selaku admin prodi S1 Farmasi yang selalu memberikan waktu untuk mengurus masalah administrasi.
9. Teman-teman S1 Farmasi 2013 yang berjuang bersama selama berada di Farmasi UNS.
10.Teman-teman “LIVE THE LIFE” Fendi, Isham, Arifin, Bhisma yang selalu bersama saat belajar maupun bermain selama kuliah.
11.Teman-teman penelitian analisis Kiky, Andre, Bela, Erwin yang sering membantu melakukan penelitian.
12.Teman-teman grup riset “PHARMATECH RSC” yang selalu berbagi ilmu-ilmu seputar teknologi farmasi.
13.Teman-teman “KKN TANGGAN” yang selalu memberi hiburan disela -sela penulisan skripsi.
14.Teman-teman operator dari laboratorium MIPA Terpadu yang memberi banyak informasi tentang alat.
15.Bapak dan Ibu Sahuri selaku bapak dan ibu kos Arista Puri yang memberikan tempat tinggal selama empat tahun masa kuliah.
16.Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang telah membantu dalam Skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa banyak kekurangan dalam penulisan skripsi ini. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran untuk menyempurnakan karya ini. Namun demikian, penulis berharap semoga karya kecil ini bermanfaat bagi pembaca pada umumnya dan dapat menjadi bekal bagi penulis dalam pengabdian Sarjana Farmasi di masyarakat pada khususnya.
Surakarta, Juni 2017
x
METODOLOGI PENELITIAN ... 18
A. Metode Penelitian... 18
B. Tempat dan Waktu Penelitian ... 18
C. Alat dan Bahan ... 18
D. Prosedur Penelitian... 19
xi
2. Optimasi Metode Analisis ... 19
3. Validasi Metode Analisis ... 20
4. Prosedur Analisis Sampel Tablet Atorvastatin ... 22
E. Pengumpulan dan Teknik Analisis Data ... 22
BAB IV ... 23
HASIL DAN PEMBAHASAN ... 23
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ... 23
A. Optimasi Komposisi dan Kecepatan Alir Fase Gerak... 23
B. Uji Kesesuaian Sistem... 25
C. Validasi Metode Analisi ... 26
1. Penentuan Selektivitas ... 26
2. Penentuan Linearitas ... 28
3. Penentuan Akurasi dan Presisi ... 29
4. Penentuan LOD dan LOQ ... 31
D. Uji Keseragaman Kadar Tablet ... 33
BAB V ... 35
KESIMPULAN DAN SARAN ... 35
A. Kesimpulan ... 35
B. Saran ... 35
DAFTAR PUSTAKA ... 36
xii
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 1.Beberapa Metode Analisis Tablet Atorvastatin Menggunakan
KCKT ... 6
Tabel 2. Hasil Optimasi Perbandingan Komposisi Fase Gerak Metanol-Air pH 3 ... 24
Tabel 3. Hasil Optimasi Kecepatan Alir Fase Gerak ... 25
Tabel 4. Hasil Uji Kesesuaian Sistem KCKT untuk Analisis Atorvastatin 120 ng/mL dalam Larutan Fase Gerak... 26
Tabel 5. Nilai Recovery dan Koefisien Variasi (CV) ... 30
Tabel 6. Hasil injeksi berulang atorvastatin 0,2 ng/mL ... 33
Tabel 7. Nilai Recovery dan Koefisien Variasi (CV) pada penentuan LOQ ... 33
xiii
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar 1. Rumus Molekul Atorvastatin ... 4 Gambar 2. Spektrum UV Atorvastatin dalam Fase Gerak Metanol : Air
pH 3 (80:20, v/v) dengan Konsentrasi 100 µg/mL23 ... 23 Gambar 3. Profil Kromatogram : A) Standar Atorvastatin, B) Sampel Tablet
Atorvastatin, C) Pelarut Fase Gerak ... 27 Gambar 4. Kurva Hubungan Luas Area Kromatogram Atorvastatin
Terhadap Konsentrasi Atorvastatin Pada Penentuan Linearitas ... 29 Gambar 5. Profil Kromatogram Atorvastatin : A) Konsentrasi 0,05 ng/mL,
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Sertifikat Analisis Atorvastatin ... 40
Lampiran 2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ... 44
Lampiran 3. Profil Kromatogram Optimasi Perbandingan Komposisi Fase Gerak Metanol-Air pH 3. ... 45
Lampiran 4. Profil Kromatogram Optimasi Kecepatan Alir Fase Gerak... 48
Lampiran 5. Hasil Uji Kesesuaian Sistem KCKT untuk Analisis Atorvastatin 120 ng/mL ... 50
Lampiran 6. Profil Kromatogram Uji Selektivitas ... 51
Lampiran 7. Perhitungan Regresi Linier untuk Uji Linearitas ... 53
Lampiran 8. Nilai Recovery dan Koefisien Variasi CV (%) untuk penentuan Akurasi dan Presisi ... 54
Lampiran 9. Profil Kromatogram Uji LOD (Limit Of Detection) ... 56
Lampiran 10. Perhitungan Nilai LOQ (Limit Of Quantifitation) ... 58
xv
DAFTAR SINGKATAN
ATR = Atorvastatin
KCKT = Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
HPLC = High Performance Liquid Chromatography
UV = Ultraviolet
mg = miligram
µg = mikrogram
mL = mililiter
ng = nanogram
nm = nanometer
µL = mikroliter
ƛmax = Panjang Gelombang Maksimum
Rs = Resolusi
TF = Tailling Factor
Rt = Retention Time
SD = Standart Deviation
CV = Koefisien Variasi
LOD = Limit Of Detection
