i
VALIDASI METODE ANALISIS UNTUK PENETAPAN KADAR TABLET
FLOATING PROPRANOLOL HCl SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi
RADIKA AFIKO PRADESTI 1308010098
PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2017
v
MOTTO
“ Fighting has been made obligatory for you, much to your dislike. It is quite possible that you dislike a thing which is good for you and that you love a thing which is bad for you.
God knows, and you do not “ (Al Baqarah : 216)
Never put any limitation since you want to start something, but if you have done, you will know your limitation.
“ Karena sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan “
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat ALLAH SWT atas segala rahmat, hidayah serta inayahNya, sehingga dapat menyelesaikan penelitian skripsi yang berjudul Validasi Metode Analisis Untuk Penetapan Kadar Tablet floating
Propranolol HCl Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Skripsi ini disusun untuk memenuhi syarat dalam memperoleh gelar S1 Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak, penulis tidak dapat menyelesaikan tugas ini dengan baik. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. Selaku Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto
2. Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt. selaku Dekan sekaligus Pembimbing I Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto
3. Wahyu Utaminingrum Msc., Apt Selaku Ketua Program Studi S1 Farmasi yang telah memberi berbagai informasi dan bimbingan tentang tatalaksana penyusunan skripsi
4. Erza Genatrika,Msc.,Apt. selaku dosen pembimbing II yang telah memberikan arahan, masukan dan bimbingan dalam penyusunan skripsi. 5. Dr. Pri Iswati, M.Si., Apt dan seluruh dosen Fakultas Farmasi UMP yang
telah memberikan ilmunya sehingga dapat membantu penulis dalam menyelesaikan penulisan skripsi.
6. Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil,M.Si yang telah memberikan berbagai pertanyaan untuk menguji kelayakan sebagai sarjana Farmasi
7. Arif Budiman, MPH., Apt. yang telah memberikan berbagai pertanyaan untuk menguji kelayakan sebagai sarjana Farmasi
8. Rochmadi Budi S, A. Md. (Pak Mamat), pak heri, bu Titi dan Bu Sari selaku Laboran Laboratorium Biologi Farmasi, Teknologi farmasi, Farmakologi, dan kimia terimakasih atas bimbingan dan arahannya selama berada di laboratorium.
vii
9. Kedua orang tua tercinta yang selama ini telah memberikan doa dan dukungan dari segala aspek
10. Agnes Putri dan Annisa Mirah selaku Partner penelitian yang telah berjuang bersama dalam setiap proses penelitian hingga saat ini
11. Semua pihak yang telah membantu yang tidak dapat saya sebutkan satupersatu.
Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kata sempurna, untuk itu penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi perbaikan penelitian di masa mendatang. Semoga Allah SWT senantiasa membalas amal baik yang telah Bapak/Ibu/Saudara berikan, dan harapan penulis semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi penulis sendiri pada khususnya dan bagi semua pihak yang membutuhkan..
Purwokerto, Mei 2017 Penulis
PERSEMBAHAN
Skripsi ini saya persembahkan untuk :1. Mamahku tercinta (Ibu Fifi) yang tidak pernah berhenti memberikan doa, dukungan serta semangat dalam setiap proses yang penulis jalani. Terimakasih kepada papah tersayang (Bpk. Joko) yang selalu mendoakan dan memberikan dukungannya agar penulis selalu gigih dan sabar, terimakasih atas semua yang kalian berikan, tak pernah cukup penulis membalas sayang dan cinta kalian sampai kapanpun. Adiku tersayang Nadya Latifa tetaplah semangat untuk mengejar cita-citamu dan tuntutlah ilmu setinggi-tingginya. Terimakasih kepada mbah uti ( Ibu Hj. Sumirah) nenek kesayangan yang tidak pernah berhenti menemani serta mendoakan.
2. Keluarga besar tercinta : Om, Tante, Eyang dan semuanya yang tentunya tidak bisa disebutkan satu persatu yang selalu memberikan doa dan dukungannya.
3. Terimakasih kepada Wahyu Ramadhan,S.Farm.,Apt yang selalu memberi dukungan, semangat, menjadi partner sharing dan diskusi untuk segala hal. Kepada sahabat-sahabat tersayang Prasetyati Wirianti, Roro Rosalina, Nindya indah, Laras Wening, Aprilliana Widiastuti, Alfi nur Asyifa, Senja Nur, Mahardika Kencana, dek Andi Nurul ,dek Fadhilah, dan teman-teman angkatan 2013 yang tak dapat disebutkan satu per satu disini, suka duka kita lalui bersama terima kasih atas bantuan, doa dan dukungan kalian selama ini sehingga telah mewarnai perjalanan hidup penulis.
4. Teman-teman kelompok praktikum selama dibangku perkuliahan (Remaja Masjid), Sulkhi danu, Nauval Muzaki, Ulfi Fariah, Maryam Makhmudah, Atia Askarima, Sri Mardiyani, Ade Firmansyah terimakasih atas kerja sama dan kekompakannya selama ini
5. Teman-teman Organisasi BEM, IMM dan KOPMA Lulu habibah, Iin Wahyuni, Susmiatun, Marathun Mufadillah, Anissa Mirrah, Grevi, mba Putri, mba Siska, mba Eva Rosmawati, mba Yusni, mba Latiffah Febriana, mba Galuh, mba Aulya khanifatunissa, mas Lukni, mas Fandi atas arahan dan nasehat yang diberikan
ix
RIWAYAT HIDUP
Nama : Radika Afiko Pradesti
Tempat, Tanggal Lahir : Mataram, 14 Desember 1994
Nama Orang Tua : Ir. Joko Cahyono (Ayah), Musfiroh (Ibu)
Riwayat Pendidikan
a. Sekolah Dasar : SDN 1 Pucang
b. Sekolah Menengah Pertama : SMP Negeri 1 Bawang c. Sekolah Menengah Atas : SMA Negeri 1 Banjarnegara
d. Perguruan Tinggi : Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Kegiatan Ilmiah Mahasiswa
- Program Kreatifitas Mahasiswa bidang Penelitian dengan judul“Tingkat Pengetahuan Ibu Tentang Obat Bebas dan Obat Bebas Terbatas dalam Upaya Swamedikasi di Kecamatan Purwokerto Barat“ (Didanai DIKTI, 2015)
Keanggotaan Organisasi
- Anggota Bidang Pengembangan Sumber Daya Mahasiswa Badan Eksekutif Mahasiswa Fakultas Farmasi UMP (2013-2014)
- Anggota Ikatan Senat Mahasiswa Farmasi Seluruh Indonesia (ISMAFARSI - Komisariat UMP) (2013-2014)
- Anggota Bidang Immawati IMM Komisariat Farmasi UMP (2013-2014) - Anggota Bidang Humas dan Pengembangan Koperasi Mahasiswa “LEBAH”
(2013 - 2016)
Pelatihan yang diikut :
- Trainning BEST Universitas Muhammadiyah Purwokerto (2013)
- Pelatihan KOPMA “Berwirausaha yang Kreatiff dan Inovatif Melalui Prinsip Koperasi (2013)
- Latihan Kepemimpinan Managerial Mahasiswa Farmasi 1 (LKMMF-1) (2013) - Trainning SMART Universitas Muhammadiyah Purwokerto (2014)
- Job Seeking Training “Menggali Potensi Diri dalam Meraih Peluang Kerja” (2016)
- Pelatihan Penulisan “Creative Writing” (2016)
- Trainning SUCCESS Universitas Muhammadiyah Purwokerto (2017)
Pengalaman
- Asisten Praktikum Farmakokinetik-Laboratorium Farmakologi (2015) - Asisten Praktikum Analisis Farmasi-Laboratorium Kimia (2016)
- Asisten Praktikum Sediaan Semi Solid-Laboratorium Teknologi Farmasi (2016)
Validasi Metode Analisis untuk Penetapan Kadar Tablet Floating Propranolol HCl secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Radika Afiko Pradesti, Agus Siswanto dan Erza Genatrika
ABSTRAK
Propranolol HCl merupakan agen pemblok beta adrenergik non-selektif yang digunakan secara luas untuk penanganan hipertensi. Metode analisis yang telah dikembangkan untuk menentukan kadar propranolol HCl salah satunya adalah Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Tujuan dari penelitian ini adalah mendapatkan metode yang valid untuk penetapan kadar propranolol HCl dalam tablet. Validasi dilakukan dengan detektor UV pada panjang gelombang 289 nm dengan kolom C-18 (150 mm x 4,6 mm i.d 5 µm) sistem kromatografi fase terbalik menggunakan campuran asetonitril dan dapar fosfat 0,1 M pH 4,5 (30:70), kecepatan alir 1 ml/menit dan diatur pada tekanan 140 sampai 150 kg/cm2. Hasil penelitian menunjukan metode tersebut linier dengan r = 0,997 konsentrasi 2,5-15 µg/ml, Batas deteksi = 1,192 µg/ml sedangkan Batas kuantitasi = 3,975 µg/ml. Nilai koefisien variasi yang diperoleh sebesar 1,222% dengan ketelitian alat 98,778%, dan persen perolehan kembali yang diperoleh dalam penelitian ini sebesar 97,56% ± 0,027 (RSD 0,727%) dengan rata-rata kadar propranolol HCl dari tablet floating yaitu 103,062%. Berdasarkan hasil penelitian diatas, dapat disimpulkan bahwa metode KCKT merupakan suatu metode analisis yang spesifik, sensitif dan akurat untuk analisis propranolol HCl dalam tablet. Kata kunci : KCKT, Propranolol HCl, Validasi, Penetapan kadar
Validation of High Performance Liquid Chromatography (HPLC) Method for Determination of Propranolol HCl in Tablets
xi
Radika Afiko Pradesti, Agus Siswanto and Erza Genatrika
ABSTRACT
Propranolol HCl is a nonselective ß-adrenergic receptor blocking agent widely used for treatment of hypertension. Analytical method have been developed to determine concentration of propranolol HCl one of them is using High Performance Liquid Chromatography (HPLC). This research conducted to aprove that the HPLC method is valid to define assay of propranolol HCl tablets. Chromatographic determination was performed with UV detector analyzed in 289 nm on a reversed phase C-18 column system (150mm x 4,6mm i.d 5µm) using a mixture of acetonitril and 0,1M pH 4,5 potassium dihydrogen phosphate buffer (30:70) at a flow rate of 1ml/min and maintained at a pressure of 140 to 150 kg/ cm2. Linierity test results show the value of r = 0,997 in concentration 2,5-15 µg/ml, limit of detection = 1,192 µg/ml then limit of quantitation = 3,975 µg/ml. The result of coefisien variation is 1,222% with the sensitifity of instrumen 98,778%, and for the recovery is 97,56% ± 0,027 (RSD 0,727%) with the result of assay from propranolol HCl is 103,062%. Based on the above results it can be concluded that the HPLC method is valid to analyze propranolol HCl in tablets. Key words : HPLC, Propranolol HCl, Validation, Assay
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
LEMBAR PERSETUJUAN ... ii
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
LEMBAR PERNYATAAN ORISINALITAS ... iv
MOTTO ... v KATA PENGANTAR ... vi PERSEMBAHAN ... viii RIWAYAT HIDUP ... ix ABSTRAK ... x ABSTRACT ... xi
DAFTAR ISI ... xii
DAFTAR TABEL ... xv
DAFTAR GAMBAR ... xvi
DAFTAR LAMPIRAN ... xvii
BAB I PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang... 1
B. Perumusan Masalah ... 2
C. Tujuan Penelitian ... 2
D. Manfaat Penelitian ... 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 3
A. Landasan Teori ... 3
1. Propranolol HCl ... 3
2. Floating Sistem ... 4
3. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) ... 5
4. Parameter Kromatografi ... 8
5. Validasi ... 10
a. Ketepatan (Akurasi) ... 12
b. Ketelitian (Presisi) ... 13
xiii
d. Linieritas ... 14
e. Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) ... 14
BAB III METODE PENELITIAN ... 16
A. Jenis dan Rancangan Penelitian... 16
B. Variabel Penelitian ... 16
C. Waktu dan Tempat Penelitian ... 16
D. Bahan dan Alat ... 16
E. Prosedur Penelitian ... 17
1. Persiapan bahan ... 17
2. Tahap Pelaksanaan ... 17
a. Penentuan panjang gelombang maksimal ... b. Preparasi komposisi fase gerak ... c. Preparasi KCKT ... d. Validasi Metode Analisis ... 17 17 18 18 F. Analisis Hasil... 21
1. Persamaan Kurva Baku ... 21
2. Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) ... 21
3. Presisi ... 21
4. Ketepatan (Akurasi) ... 22
5. Penetapan Kadar Propranolol HCl dalam tablet ... 22
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 23
A. Panjang Gelombang Maksimum Propranolol HCl ... B. Perbandingan komposisi Fase gerak ... C. Validasi Metode Analisis ... 1. Uji Linieritas ... 2. Uji Ketelitian (Presisi) ... 3. Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) ... 4. Ketepatan (Akurasi) ... 5. Penetapan Kadar Propranolol HCl dalam tablet ... a. Keseragaman Bobot ... b. Kekerasan Tablet ... c. Kerapuhan Tablet ... 23 24 28 28 30 33 34 35 35 36 37
d. Waktu Hancur Tablet ... 37
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 40
A. Kesimpulan ... 40 B. Saran ... 40 DAFTAR PUSTAKA ... LAMPIRAN ... 41 44 DAFTAR TABEL
xv
Halaman
Tabel 2.1 Data yang diperlukan untuk uji validasi ... 11
Tabel 2.2 Karakteristik utama dalam validasi metode analisis ... 12
Tabel 3.1 Sistem KCKT yang digunakan dalam penelitian ... 18
Tabel 3.2 Formula optimum tablet floating propranolol HCl ... 22
Tabel 4.1 Hasil optimasi fase gerak ... 27
Tabel 4.2 Data hasil pengukuran larutan baku propranolol HCl ... 30
Tabel 4.3 Data hasil uji presisi propranolol konsentrasi 10 µg/ml ... 33
Tabel 4.4 Data hasil persen perolehan kembali (Akurasi) ... 35
Tabel 4.5 Data hasil perhitungan % penyimpangan pada setiap tablet floating propranolol HCl ... 36
Tabel 4.6 Data evaluasi kekerasan tablet floating propranolol HCl ... 37
Tabel 4.7 Data evaluasi kerapuhan tablet floating propranolol HCl ... 37
Tabel 4.8 Data evaluasi waktu hancur tablet floating propranolol HCl 38 Tabel 4.9 Data hasil perhitungan untuk penetapan kadar ada tablet floating propranolol HCl ... 38
Halaman
Gambar 2.1 Rumus struktur propranolol HCl ... 3
Gambar 2.2 Komponen KCKT ... 5
Gambar 2.3 Profil puncak yang dihasilkan pada KCKT ... 10
Gambar 4.1 Spektrum UV-Vis propranolol HCl ... 24
Gambar 4.2 Kromatogram hasil optimasi fase gerak dapar fospat– asetonitril, fase diam RP-C18 dan laju alir 1ml/menit dengan sistem isokratik. Perbandingan fase gerak dapar fospat – asetonitril : (a) 50:50; (b) 60:40; (c) 70:30; (d) 85:15 ... 26
Gambar 4.3 Kromatogram hasil penetapan kurva baku propranolol ... 29
Gambar 4.4 Kurva Kalibrasi Propranolol ... 30
Gambar 4.5 Kromatogram hasil uji presisi ... 32
Gambar 4.6 Kromatogram hasil uji akurasi metode adisi dengan dua konsentrasi berbeda ... 34
xvii
Halaman
Lampiran 1. Perhitungan Uji Presisi ... 44 Lampiran 2. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)
Propranolol HCl ... 46 Lampiran 3 . Perhitungan Persen Perolehan Kembali (Akurasi) ... 47 Lampiran 4 . Perhitungan Analisis Kuantitatif pada Tablet floating Propanolol
