Efektivitas Pemberian Ekstrak Ethanol Daun Polyscias obtusa dan Elephantopus scaber terhadap Modulasi Sel T CD4+ dan CD8+ pada Mencit Bunting BALB/c
Roffico1), Muhammad Sasmito Djati2) 1),2)
Laboratorium Fisiologi Hewan, Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Brawijaya, Malang
1)
[email protected] dan 2)[email protected]
ABSTRAK
Tanaman yang memiliki potensi untuk digunakan sebagai obat dalam pengobatan tradisional adalah Kedondong Laut (Polyscias obtusa) dan Tapak Liman (Elephantopus scaber. L). Tanaman ini mengandung senyawa aktif yang dapat mempengaruhi mekanisme pertahanan tubuh. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui bagaimana efek dari ekstrak ethanol daun Polyscias obtusa dan Elephantopus scaber. L terhadap ekspresi sel T CD4+ dan CD8+ pada mencit bunting BALB/c. Hasil menunjukkan bahwa jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ tidak berbeda nyata (p> 0,05) dapat diketahui dari peningkatan dan penurunan yang terjadi pada setiap perlakuan dibandingkan dengan kontrol. Hal ini berarti, rata-rata jumlah relatif sel T tidak berbeda secara nyata untuk perlakuan yang diberikan pada mencit bunting BALB/c. Berdasarkan hasil output Tukey Test dan subset yang terbentuk terlihat bahwa jumlah relatif sel T tidak berbeda nyata untuk perlakuan yang diberikan pada mencit bunting BALB/c. Hasil juga menunjukkan jumlah relatif sel T memang berbeda secara nyata (p< 0,05) untuk waktu pembedahan. Namun, setelah dilakukan Tukey Test subset yang terbentuk menunjukkan bahwa jumlah relatif sel T tidak berbeda nyata (p> 0,05) terhadap waktu pembedahan. Kenaikan dan penurunan jumlah sel T CD4+ dan CD8+, kemungkinan karena aktivitas biologis senyawa yang terkandung dalam P. obtusa yaitu panaxidol dan stiqmasterol dalam E. scaber yang dapat bertindak sebagai imunosupresan dan imunomodulasi. Dosis optimum ekstrak ethanol daun P. obtusa dan E. scaber dalam peningkatan sel limfosit belum dapat ditentukan.
Kata kunci: Elephantopus scaber, limfosit, Polyscias obtusa ABSTRACT
Plants that have the potential to be used as a drug in traditional medicine are Kedondong Laut (Polyscias obtusa) and Tapak Liman (Elephantopus scaber. L), these plants contain active compounds that can affect the body's defense mechanisms. This study aims to determine how the effects of the ethanol extract of the Polyscias obtusa and Elephantopus scaber L. leaves on the expression of CD4+ and CD8+ T cells in pregnant mice strain BALB/c. The results showed that the relative amount of CD4+ and CD8+ T cells were not significantly different (p> 0.05) can be determined from the increase and decrease in each treatment compared with the control. This means that, on average the relative number of T cells was not significantly different for the treatment accorded to pregnant mice BALB/c. Based on the results of the Tukey test output and the subset that forms seen that the relative number of T cells was not significantly different for the treatment to be given to pregnant mice BALB/c. The results also show the relative number of T cells was significantly different (p <0.05) for the time of surgery. However, after the Tukey test showed that the subset that forms the relative number of T cells was not significantly different (p> 0.05) to the time of surgery. The increase and decrease in the number of CD4+ and CD8+ T cells, possibly due to the biological activity of the compounds contained in the P. obtusa is panaxidol and E. scaber is stiqmasterol in that can act as an immunosuppressant and immunomodulating. The optimum dose of ethanol extract of P. obtusa and E. scaber leaves can increase lymphocyte cells could not be determined.
Key words: Elephantopus scaber, lymphocytes, Polyscias obtusa
PENDAHULUAN
Kehamilan berhubungan erat dengan respon imun maternal. Terjadi reaksi penolakan yang dilakukan oleh sel-sel fagosit ketika antigen berada di saluran reproduksi. Hal ini disebabkan dari gen
paternal yang dianggap sebagai protein asing oleh tubuh maternal. Selama hamil, sistem kekebalan tubuh berubah. Ibu hamil jadi lebih rentan terhadap penyakit dan infeksi oleh bakteri dan virus. Hal ini karena janin memiliki separuh DNA dari sang
ayah, sehingga sistem kekebalan tubuh ibu mengenali sebagai antigen asing. Oleh karena itu, selama kehamilan sistem kekebalan tubuh berubah agar tidak membahayakan janin dalam kandungan [1].
Perubahan dalam sistem kekebalan tubuh ibu yaitu dengan berkurangnya aktivitas sel T. Sel ini yang membantu mengontrol infeksi virus, bakteri dan patogen lain. Akibat menurunnya fungsi sel T, ibu hamil jadi lebih rentan terhadap infeksi, seperti infeksi saluran kemih, infeksi dari bakteri seperti Salmonella penyebab demam tifoid. Sebagai contoh, infeksi dari bakteri seperti Salmonella juga tentu dapat membahayakan ibu hamil dan janin. Hal ini pasti menimbulkan dua
kekhawatiran yaitu apa penyakitnya bisa
membahayakan janin dan apa obat yang diminum berbahaya bagi janin. Beberapa penyakit infeksi selama kehamilan, memang lebih berisiko pada ibu, tapi juga bisa membahayakan janin, antara lain bisa menyebabkan keguguran, kelahiran prematur, bayi lahir dengan menderita kelainan atau
meninggal di dalam kandungan [1].
Sehingga penggunaan obat sintetik sebaiknya diminimalkan. Terdapat alternatif lain untuk menghindari penggunaan obat sintetik yang berdampak destruktif, yaitu dengan penggunaan obat herbal. Obat herbal ini berasal dari tumbuhan sehingga memberi efek sistemik pada tubuh tidak seperti obat aktif sintetik [2].
Salah satu contoh tumbuhan yang berpotensi sebagai obat herbal yaitu Polyscias obtusa dan Elephantopus scaber. Kedua tumbuhan ini dapat dijadikan alternatif untuk mengurangi penggunaan obat sintetik yang berdampak negatif bagi janin dan tubuh maternal. Tumbuhan Kedondong Laut
(Polyscias obtusa) dan Tapak Liman
(Elephantopus scaber. L) mengandung senyawa aktif yang mampu mempengaruhi mekanisme
pertahanan tubuh [3,13,14,15]. Mekanisme
pertahanan alamiah tubuh itu meliputi reaksi-reaksi spesifik maupun reaksi non-spesifik yang berperan dalam proses eliminasi penyebab penyakit dan mikroba [4]. Tanaman Tapak Liman juga diketahui dapat mengatasi berbagai penyakit radang seperti peradangan amandel, influenza, radang tenggorok, radang mata, radang ginjal akut dan kronis serta radang rahim [5]. Tumbuhan ini dimungkinkan dapat membangun kembali kondisi pemulihan dari tubuh maternal.
Salah satu alternatif untuk memahami manfaat suatu tanaman secara farmakologis dapat dilakukan dengan cara mengamati determinasi pertumbuhan hematopoietic stem cells (HSC), terutama mobilisasi HSC yang mengarah dalam terbentuknya sistem imun. Sistem imun terdiri dari sistem imun alamiah atau non spesifik dan sistem imun spesifik. Sistem imun spesifik terdiri dari sistem imun spesifik humoral dan selular. Bagian yang berperan dalam sistem imun spesifik selular adalah limfosit T. Sel T berfungsi sebagai regulator dan efektor, salah satu organ yang berperan dalam metabolisme sistem imun adalah limpa [4].
Sel limfosit T akan berproliferasi menjadi beberapa subpopulasi sel T, seperti sel T helper
(CD4+), sel T sitotoksik (CD8+), dan sel T memori.
Sel T berkembang menjadi dua subset: CD4+ Th
yang berkembang menjadi Th1, Th2 dan CD8+
CTL/Tc. Sel T juga mengekspresikan reseptor T spesifik yang berperan dalam proteksi terhadap infeksi virus dan infeksi intraseluler [6,13,14,15].
CD4 merupakan antigen yang
mengekspresikan sel pada subset timosit dan sel inflamasi sel T (sekitar 2/3 sel T perifer), monosit dan makrofag. CD4 berfungsi sebagai ko-reseptor
MHC kelas-II (Mayor Histocompatibility
Complex) dan mengikat Lck pada membran yang berhubungan dengan membran. Sedangkan CD8 adalah antigen yang mengekspresikan sel subset timosit, sel T sitotoksik. CD8 ini berperan sebagai ko-reseptor MHC kelas I dan mengikat Lck pada membran yang berhadapan dengan sitoplasma [6]. Tujuan penelitian ini yaitu ingin mengetahui bagaimana efek dari kombinasi ekstrak ethanol daun Polyscias obtusa dan daun Elephantopus scaber. L terhadap ekspresi sel T CD4+, CD8+ pada mencit bunting strain BALB/c.
METODE PENELITIAN
Percobaan ini dilaksanakan pada bulan November 2013 sampai dengan bulan Juni 2014. Pelaksanaan penelitian bertempat di Animal Room Laboratorium Biologi Molekuler dan Seluler, Laboratorium Fisiologi Hewan, Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya, Malang.
Desain Eksperimen. Hewan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu mencit betina bunting (Mus musculus) galur BALB/c berumur 6
minggu dengan kondisi sehat, bergerak aktif, rambut tidak rontok, dan tidak memiliki kecacatan. Penelitian ini menggunakan 4 perlakuan yaitu mencit kontrol non-bunting, mencit kontrol bunting diinfeksi Salmonella typhimurium, mencit bunting diinfeksi diberi ekstrak dosis I (ekstrak campuran daun E. Scaber 50 mg/g BB dan P. obtusa 0 mg/g BB), dan mencit bunting diinfeksi diberi ekstrak dosis II (ekstrak campuran daun E.scaber 25 mg/g BB dan P. obtusa 25 mg/g BB). Awalnya mencit betina estrus dikawinkan dengan mencit jantan dan pada pagi hari dilihat adanya vaginal plug. Mencit mulai diberi perlakuan oral ekstrak campuran daun E. Scaber dan P. obtusa pada hari kebuntingan ke-0 hingga hari ke-7 dan
dilakukan infeksi menggunakan Salmonella
typhimurium. Sebelum dilakukan infeksi
menggunakan bakteri Salmonella typhimurium, terlebih dahulu dilakukan uji konfirmasi dalam rangka untuk memastikan isolat yang digunakan adalah benar bakteri S. Typhimurium. Pemberian ekstrak secara oral tetap dilakukan hingga pembedahan pertama yaitu hari kebuntingan ke-14 dan pembedahan kedua hari kebuntingan ke-18.
Pembuatan Ekstrak Ethanol E. Scaber dan P. obtusa. Simplisia daun P.obtusa sebanyak
500 g direndam dengan 2,5 liter alkohol 96% selama 24 jam. Hasil rendaman diberi lagi dengan 2,5 liter alkohol 96% dan dibiarkan selama 24 jam. Hasil rendaman ditekan dengan press hidrolik dan diekstraksi hingga diperoleh pasta. Hasil akhir diperoleh pasta daun P.obtusa. Proses pembuatan pasta daun E.scaber juga sama dengan pembuatan pasta daun P.obtusa seperti penjelasan di atas. Kemudian pasta daun P.obtusa dan pasta daun
E.scaber dilarutkan dengan akuades untuk
membuat larutan stok. Ditimbang 0,5 g E.scaber, disiapkan 100 ml akuades hangat dicampur dengan pasta E.scaber. Diaduk dengan spatula hingga tercampur, dimasukkan dalam botol dan diberi label. Cara membuat larutan stok ekstrak P.obtusa juga sama seperti uraian di atas.
Preparasi Infeksi Salmonella
typhimurium. Setelah dilakukan uji konfirmasi
dan menunjukkan hasil positif, berarti isolat yang digunakan adalah benar bakteri S. Typhimurium dan bersifat patogen. Kemudian, disiapkan 10 ml media steril Nutrient Broth. Diambil 1 ose pada NA slant yang berisi S. Typhimurium dan
dimasukkan dalam 10 ml NB diinkubasi 37ºC selama 24 jam dalam inkubator, sehingga diperoleh inokulum aktif. Diambil 0,5 ml inokulum aktif, dicampur dengan 4,5 ml NB steril. Injeksi dilakukan pada jam ke-0 sampling. Mencit
diinjeksi secara intraperitoneal pada hari
kebuntingan ke-7 sebanyak 0,5 ml per mencit.
Isolasi Sel Limfosit dari Organ Spleen.
Mencit didislokasi leher terlebih dahulu, ditaruh pada papan sectio yang telah disemprot alkohol. Mencit dibedah pada bagian peritoneal, diisolasi organ berupa spleen. Dicuci dengan PBS steril 2-3 kali, organ spleen dimasukkan dalam cawan Petri
berbeda yang berisi PBS dan dipencet
menggunakan pangkal spuit searah jarum jam. Disaring dengan wire, dimasukkan dalam tabung propilen 15 ml, diberi PBS ± 5 ml pada saringan sel. Kemudian, suspensi sel disentrifugasi pada 2500 rpm suhu 4ºC selama 5 menit. Pelet diresuspensi dengan PBS sebanyak 1 ml dan dihomogenasi dalam eppendorf. Diambil 70 µl sel dan ditambah 500 µl PBS dimasukkan dalam microtube, dilakukan sentrifugasi pada 1500 rpm suhu 10ºC selama 5 menit. Pelet ditambah antibodi 50µl dan diinkubasi selama 15 menit dalam kondisi gelap di dalam ice box.
Analisis Kuantitatif Sel T CD4+ dan CD8+ Menggunakan Flowcytometry. Pelet hasil dari
isolasi spleen dalam eppendorf ditambahkan
antibodi monoklonal phycoerythrin
(PE)-conjugated anti-mouse CD8 dan fluorescein
isothiocyanate (FITC)-conjugated anti-mouse
CD4, lalu disimpan dalam ice box dan diinkubasi dalam kondisi gelap. Kemudian dilakukan koneksi antara komputer dengan flowcytometry pada keadaan “acquiring” dan setting software BD Cell Quest ProTM sesuai kebutuhan. Pelet dimasukkan dalam tabung kuvet pada flowcytometry dengan mikropipet, lalu ditambahkan 500µl PBS dan dihomogenkan dengan pipeting. Kuvet dipasang
pada nozzle BD Biosciences FACSCaliburTM
flowcytometry.
Analisis Data. Penelitian ini menggunakan
Rancangan Acak Lengkap (RAL) Faktorial dengan uji ANOVA selang kepercayaan 95%, data jumlah
relatif sel T CD4+, CD8+, pada organ spleen diuji
statistik dengan uji normalitas, uji homogenitas varian. Data yang telah terdistribusi normal dengan
variasi homogen, diuji dengan one-way ANOVA
dengan nilai α=0.05. apabila diperoleh p>0.05
maka tidak ada beda nyata antar perlakuan, sebaliknya jika p<0.05 maka ada beda nyata antar perlakuan. Kemudian dilakukan post-hoc test dengan uji Tukey HSD (High Significant Difference). Data diuji statistik menggunakan program SPSS 16.0 for Windows.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis Jumlah Relatif Sel T CD4+ dan CD8+. Analisis jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ dalam penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh aktifitas biologis dari pemberian ekstrak ethanol daun E. Scaber dan P. obtusa terhadap
peningkatan kuantitas sel CD4+ dan CD8+.
Peningkatan kuantitas sel CD4+ dan CD8+ dapat
digunakan untuk melihat karakter sistem imun yang dianalisis menggunakan Flowcytometry. Sel
CD4+ dan CD8+ berhubungan dengan respon imun
seluler, dimana sel CD4+ sebagai sel T helper dan
sel CD8+ sebagai sel T sitotoksik. Berikut di
bawah ini (Gambar 1) merupakan profil persentase
jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ pada
pembedahan hari ke-14 dan (Gambar 2)
merupakan profil persentase jumlah relatif sel T
CD4+ dan CD8+ pada pembedahan hari ke-18.
Gambar 1. Profil persentase jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ dari hasil analisis Flowcytometry pada organ spleen pembedahan hari ke-14
Gambar 2. Profil persentase jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ dari hasil analisis Flowcytometry pada organ spleen pembedahan hari ke-18
Hasil (gambar 1) di atas menunjukkan, jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ pembedahan hari ke-14 pada perlakuan kontrol lebih tinggi dibanding dengan perlakuan dosis I dan dosis II. Sel T CD4+ dan CD8+ pembedahan hari ke-14 mengalami peningkatan jumlah relatif sel pada perlakuan dosis I dibanding dengan perlakuan dosis II. Hal ini berbeda dengan hasil pada gambar 2. Jumlah relatif sel T CD4+ pembedahan hari
ke-18, pada perlakuan dosis II mengalami
peningkatan dibanding dengan dosis I dan perlakuan kontrol (Gambar 2). Sedangkan jumlah relatif sel T CD8+ pembedahan hari ke-18, pada
perlakuan dosis I mengalami peningkatan
dibanding dengan dosis II dan perlakuan kontrol. Data hasil Flowcytometry, kemudian dianalisis statistika (Gambar 3) menunjukkan jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ tidak berbeda nyata (p> 0,05) dengan perlakuan yang digunakan.
Gambar 3. Perubahan jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ terhadap perlakuan pada organ spleen. Keterangan: Kontrol = non-bunting; CD4
+
Kontrol Non-Bunting Kontrol Bunting Infeksi
Dosis I Dosis II 16,06% 10,26% 21,75% 9,47% 20,42% 7,69% 15,51 23,01% CD4+
Kontrol Non-Bunting Kontrol Bunting Infeksi
Dosis I Dosis II 11,74% 19,98% 6,17% 13,35% 12,20% 16,51% 10,89% 39,08%
Kontrol = bunting infeksi; Dosis I = 50 mg/g E. scaber dan 0 mg/g P. obtusa; Dosis II = 25 mg/g E. scaber dan 25 mg/g P. obtusa
Hasil uji statistik (gambar 4) menunjukkan bahwa jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ tidak berbeda nyata dengan waktu pembedahan hari ke-14 dan hari ke-18.
Gambar 4. Perubahan jumlah relatif sel T CD4+ dan CD8+ terhadap waktu pembedahan hari ke-14 dan hari ke-18 pada organ spleen
Berdasarkan hasil, terlihat bahwa percobaan ini menunjukkan tidak ada perbedaan yang nyata (p> 0,05) untuk perlakuan. Hal ini berarti rata-rata jumlah relatif sel T tidak berbeda secara nyata untuk perlakuan yang diberikan pada mencit bunting BALB/c. Berdasarkan hasil output Tukey Test dan subset yang terbentuk terlihat bahwa jumlah relatif sel T tidak berbeda nyata untuk perlakuan yang diberikan pada mencit bunting BALB/c. Kemudian, terlihat bahwa terdapat perbedaan secara nyata (p< 0,05) untuk waktu pembedahan. Hal ini berarti rata-rata jumlah relatif sel T memang berbeda secara nyata untuk tiap waktu pembedahan. Berdasarkan hasil output Tukey Test dan subset yang terbentuk terlihat bahwa jumlah relatif sel T tidak berbeda nyata terhadap waktu pembedahan.
Terdapat kemungkinan, senyawa yang
terkandung dalam ekstrak ethanol daun E.scaber
dan P.obtusa mampu berperan sebagai
imunostimulan, sehingga dapat meningkatkan proliferasi dan deferensiasi sel T naive menjadi
subset sel T CD4+. Peningkatan maupun
penurunan jumlah sel T CD4+ dan CD8+
kemungkinan akibat dari aktifitas biologis senyawa panaxidol yang terkandung dalam P.obtusa dan
senyawa stiqmasterol yang terkandung dalam E.scaber.
Senyawa tersebut mampu berperan sebagai imunostimulan dan imunosupresan. Senyawa tersebut mampu menjadi imunosupresan sel T
naive CD4+ CD8+ yang menghambat proliferasi
maupun diferensiasi sel T naive menjadi subset sel
T CD8+ yang spesifik sebagai sel Tc. Sel Tc ini
berperan dalam mengeliminasi antigen yang menginfeksi tubuh. Terjadi stimulasi proliferasi
dan deferensiasi sel T naive CD4+CD8+ menjadi
spesifik sel T CD4+ sebagai sel T efektor Th1
maupun Th2 [7,14]. Terjadinya diferensiasi sel T
CD4+ menjadi Th1 dan Th2 tergantung sitokin
yang diproduksi pada saat merespon mikroba yang memacu reaksi imunitas [8,13].
Mikroba yang dapat memacu produksi IL-12 secara tidak langsung, misalnya virus, beberapa parasit memacu sel NK untuk memproduksi IFN-gamma dan memacu makrofag mengeluarkan
IL-12. IL-12 berikatan dengan sel T CD4+ sehingga
memacu untuk menjadi sel Th1. IL-12 juga meningkatkan produksi IFN-gamma dan aktifitas sitolitik yang dilakukan oleh sel T sitotoksik dan sel NK sehingga memacu imunitas seluler. IFN-gamma yang diproduksi Th1 akan menghambat proliferasi sel Th2 sehingga meningkatkan dominasi sel Th1 [9,13,14].
Kemungkinan selanjutnya senyawa yang terkandung di dalam ekstrak ethanol daun E.scaber dan P.obtusa berperan sebagai imunostimulan yang mampu meningkatkan proliferasi dan deferensiasi sel T naive menjadi subset sel T
CD4+. Pada permulaannya, progenitor sel T dalam
timus tidak mengekspresikan CD8 dan CD4. Proses perkembangannya juga melalui beberapa
tahapan. Timosit yang belum matang
mengekspresikan CD8 dan CD4 dan sel ini akan
meningkatkan kematangan sel T yaitu CD4+,CD8-
atau CD4-,CD8+. Sel T yang mampu mengenal
pasti MHC ini akan dipilih untuk proses pematangan yang dikenali sebagai seleksi positif. MHC kelas I ini akan mengeluarkan sinyal instruksi untuk mengarahkan diferensiasi kepada jalur CD8 [10,15].
Sel T CD8+ naif memerlukan aktivasi dan
diferensiasi lanjut untuk menjadi sel T efektor yang bisa melisiskan sel target yang terinfeksi
antigen dan sel-sel tumor [11,15]. Sel T CD8+
mengenali antigen yang dipaparkan oleh molekul MHC I. Oleh karena, molekul MHC I dapat
ditemukan pada sel-sel tubuh yang memiliki
nukleus, maka sel T CD8+ dengan mudah
memonitor sel jika terjadi tanda-tanda infeksi [10,14].
Sel T CD8+ akan diaktifasi menjadi sel T
efektor setelah bertemu langsung dengan antigen pada APC profesional atau non-profesional dan menerima “second signal”, sehingga sitokin seperti IL-2, IFN-gamma dan TNF-alpha yang dilepaskan
oleh sel T helper CD4+ [12,13,14,15].
Pemberian perlakuan dosis untuk
mengetahui jumlah sel T CD4+ dan CD8+ masih
belum bisa ditentukan, berapa dosis optimum
untuk meningkatkan ekspresi sel T CD4+ dan
CD8+. Peranan sel T CD8+ sebagai sel T sitotoksik,
seharusnya mengalami peningkatan apabila tubuh terpapar antigen, bisa juga akibat adanya sel yang
dimungkinkan sel kanker. Berdasar hasil,
dimungkinkan adanya senyawa aktif panaxidol dalam P.obtusa mampu menstimulasi proliferasi
sel T CD4+ dan CD8+, namun ketika ekstrak
tersebut dicampur mampu menjadi imunosupresan,
sehingga hasilnya tidak ada beda nyata
resultantenya.
KESIMPULAN
Pemberian ekstrak ethanol daun E.scaber dan P.obtusa secara oral meningkatkan jumlah sel
T CD4+ pada Dosis I (50 mg/g E.scaber dan 0
mg/g P.obtusa) pembedahan hari ke-14 dan Dosis II (25 mg/g E.scaber dan 25 mg/g P.obtusa) pada pembedahan hari ke-18. Peningkatan jumlah sel T
CD8+, pada Dosis 1 (50 mg/g E.scaber dan 0 mg/g
P.obtusa). Dosis optimum ekstrak ethanol daun E.scaber dan P.obtusa dalam peningkatan sel limfosit belum dapat ditentukan.
DAFTAR PUSTAKA
[1] Saito S, Nakashima A, Shima T, Ito M.
2010. Th1/Th2/Th17 and regulatory T-cell paradigm in pregnancy. Am J Reprod Immunol 73: 601-610.
[2] Spelman, K., Burns J.J., Nichols D.,
Winters N., Ottersberg S., dan Tenborg M. 2006. Modulation of cytokine expression by traditional medicines: A review of
herbal immunomodulators. Alternative
Med. Rev. 11: 128 – 146.
[3] Pinca S, Djati, MS., Rifa’i M. 2013.
Analisis Mobilisasi Sel T CD4+ dan CD8+
pada Timus Ayam Pedaging Pasca Infeksi Salmonella typhimurium dan Pemberian Simplisia Polyscias obtusa. Biotropika 1 (1) : 27-32.
[4] Abbas, A.K., dan Lichtman, A.H. 2005.
Cellular and Molecular Immunology. Fifth Edition. W.B. Saunders Company.
California.
[5] Mohan V.R., Chenthurpandy P., dan
Kalidass C. 2010. Pharmacognostic and
phytochemical investigation of
Elephantopus scaber L. Journal of Pharmaceutical Science and Technology. 2 (3), 191-197.
[6] Baratawidjaya, K.G. 2000. Imunologi
Dasar. Balai Penerbit. FK UI: Jakarta.
[7] Rifa’i M, Shi Z, Zhang SY, Lee YH, Shiku
H, Isobe K, Suzuki H. 2008. CD8+CD12+
regulatory T cells recognize activated T
cells via conventional MHC class I-αβTCR
interaction and become IL-10 producing
active regulatory cells. International
immunology 20 (7), 937-947
[8] Rifa’i M. 2010. Andrographolide
ameliorate rheumatoid arthritis by
promoting the development of regulatory T cells. Journal of Tropical Life Science 1 (1), pp.5-8.
[9] Kung, C., Pingel J., Heikinheimo M.,
Klemola T. 2000. Mutations in The Tyrosine phosphatase CD45 Genes in
Child With Sever Combine
Immunodeficiency Disease. Nature
Medicine. 6(3): 343-5.
[10] Michael, H.R. 2006. Histology A Text
and Atlas 5 th Edition. Lippincott
William & Wilkins. Maryland.
[11] Rifa’i M. 2013. CD4+CD25+ Regulatory T
Cells Preventing Detrimental Autoimmune
Reactions. The Open Autoimmunity
Journal 5: 1-5.
[12] Rifa’i M, Kawamoto Y, Nakashima I,
Suzuki H. 2004. Essential roles of
CD8+CD122+ regulatory T cells in the
maintenance of T cell homeostasis. The Journal of experimental medicine 200 (9), 1123-1134.
[13] Farsely, M., Djati, MS., Rifa'i M. 2013.
Effectivity of Polyscias obtusa Simplicia as Immunomodulator on CaecaTonsil of Broiler Post Infection of Salmonella
typhimurium. The Journal of Experimental Life Science, 3(1): 20-24.
[14] Kurnianingtyas, E., Djati, MS., Rifa'i M.
2013. Aktivitas Imunomodulator Polyscias obtusa Terhadap Sistem Imunitas Pada Bone Marrow Broiler Setelah Pemberian Salmonella typhimurium. The Journal of Experimental Life Science, 3(1): 25-30.
[15] Pradana, A. R. A., Djati, MS., Rifa'i M.
2013. Mobilization of CD4+, CD8+, and B220+ on Broiler Chicken Spleen with Feed Contained Polyscias obtusa Post Infection of Salmonella typhimurium. The Journal of Experimental Life Science, 3(1): 7-12.
