TESIS
PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA
SULKUS GINGIVA TIKUS YANG MENGALAMI
PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN JUMLAH SEL
FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN
PERIODONTAL LEBIH TEBAL
I GUSTI AGUNG SRI PRADNYANI 1290761001
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
EMBAR PENGESAHAN
TESIS INI TELAH DISETUJUI PADA TANGGAL 2 AGUSTUS 2016
Mengetahui Pembimbing I
Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M. Repro NIP 194612311969021001
Pembimbing II
Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M.Repro NIP 196404171996011001
Ketua Program Studi Ilmu Biomedik Program Pascasarjana
Universitas Udayana
Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc, Sp.GK NIP. 195805211985031002
Direktur Program Pascasarjana Universitas Udayana
TESIS
PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA
SULKUS GINGIVA TIKUS YANG MENGALAMI
PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN JUMLAH SEL
FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN
PERIODONTAL LEBIH TEBAL
I GUSTI AGUNG SRI PRADNYANI 1290761001
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA
SULKUS GINGIVA TIKUS YANG MENGALAMI
PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN JUMLAH SEL
FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN
PERIODONTAL LEBIH TEBAL
Tesis Untuk Memperoleh Gelar Magister
pada Program Magister, Program Studi Ilmu Biomedik Program Pascasarjana Universitas Udayana
I GUSTI AGUNG SRI PRADNYANI NIM : 1290761001
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
LEMBAR PENGESAHAN
TESIS INI TELAH DISETUJUI PADA TANGGAL 2 AGUSTUS 2016
Mengetahui Pembimbing I
Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M. Repro NIP 194612311969021001
Pembimbing II
Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M.Repro NIP 196404171996011001
Ketua Program Studi Ilmu Biomedik Program Pascasarjana
Universitas Udayana
Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc, Sp.GK NIP. 195805211985031002
Direktur Program Pascasarjana Universitas Udayana
Tesis Ini Telah Diuji
Tanggal 2 Agustus 2016
Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK RektorUniversitas Udayana,
No : 3457/UN14.4/HK/2016, Tanggal 22 Juli 2016
Ketua : 1. Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M.Repro
Anggota :
2. Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M. Repro
3. Prof. dr. Ketut Tirtayasa, MS., AIF
4. Dr.dr. I Wayan Putu Sutirta Yasa, M.Si
5. dr. I Gusti Ngurah Mayun, Sp. HK
UCAPAN TERIMA KASIH
Pertama-tama perkenankanlah penulis memanjatkan puji syukur ke hadapan Ida Sang Hyang Widhi Wasa / Tuhan Yang Maha Esa, karena hanya atas asungkertha waranugraha-Nya / karunia-Nya, tesis ini dapat diselesaikan.
Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M.Repro, pemimbing utama yang dengan penuh perhatian telah memberikan dorongan, semangat, bimbingan, dan saran selama penulis mengikuti program magister, khususnya dalam penyelesaian tesis ini. Terimakasih sebesar-besarnya pula penulis sampaikan kepada Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M. Repro, Pembimbing II yang dengan penuh perhatian dan kesabaran telah memberikan bimbingan dan saran kepada penulis. Ucapan yang sama juga ditujukan kepada Rektor Universitas Udayana, Prof. Dr. dr. I Ketut Suastika, Sp.PD (KEMD) atas kesempatan dan fasilitas yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan menyelesaikan pendidikan Program Magister di Universitas Udayana. Ucapan terimakasih ini juga ditujukan kepada Direktur Program Pascasarjana Universitas Udayana yang dijabat oleh Prof. Dr. dr. A. A. Raka Sudewi, SpS(K) atas kesempatan yang diberikan kepada penulis untuk menjadi mahasiswa Program Magister pada Program Pascasarjana Universitas Udayana. Tidak lupa pula penulis ucapkan terimakasih kepada Prof. Dr. dr. Putu Astawa, Sp.OT (K), M.Kes, Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Udayana atas ijin yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti pendidikan program Magister. Pada kesempatan ini, penulis juga menyampaikan rasa terimakasih kepada Dr. dr. I Dw. Made Sukrama, M.Si., Sp.MK(K), Kepala Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran Univrsitas Udayana. Ungkapan terimakasih penulis sampaikan pula kepada para penguji tesis, yaitu Prof. dr. Ketut Tirtayasa, MS., AIF, Dr.dr. I Wayan Putu Sutirta Yasa, M.Si, dr. I Gusti Ngurah Mayun, Sp. HK, yang telah memberikan masukan, saran, sanggahan, dan koreksi sehigga tesis ini dapat terwujud seperti ini.
Aditya Ananta Raharja dan calon bayi yang masih dalam kandungan atas pengertian, semangat dan kesempatan yang diberikan untuk lebih berkonsentrasi menyelesaikan tesis ini.
ABSTRAK
PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA SULKUS GINGIVA TIKUS YANG MENGALAMI PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN
JUMLAH SEL FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN PERIODONTAL LEBIH TEBAL
Periodontitis merupakan penyakit infeksi, apabila tidak dilakukan perawatan yang tepat dapat mengakibatkan tanggalnya gigi. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membuktikan pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% pada sulkus gingiva mengakibatkan jumlah sel fibroblas dan pembentukan kolagen pada ligamen periodontal lebih banyak yang ditandai dengan bertambahnya lebar ligamen periodontal tikus.
Telah dilakukan penelitian eksperimental Randomized Post Test Only
Control Group Design pada 32 ekor tikus putih jantan yang diinduksi
lipopolisakarida (LPS) selama 8 hari. Lalu tikus dibagi menjadi kelompok control yang diterapi dengan placebo dan kelompok perlakuan yang diterapi dengan tetrasiklin HCL gel 0,7%. Pada hari ke-10 tikus dieuthanasia untuk pengambilan mandibula dan dibuatkan preparat histologi dengan pengecatan HE. Data diuji normalitas dengan Shapiro-wilk dan dilanjutkan dengan independent t-test.
Dari hasil penelitian, rerata jumlah sel fibroblas kelompok perlakuan dengan pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% (148,38±5,11 unit) lebih tinggi dibandingkan dengan rerata kelompok kontrol (113,19±5,39 unit). Rerata peningkatan kolagen yang ditunjukkan ketebalan ligamen periodontal kelompok perlakuan dengan pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% (338,65±57,28 µm) lebih tinggi dibandingkan rerata kelompok kontrol (225,50±45,29 µm). Hasil rerata jumlah fibroblas dan ketebalan ligamen periodontal ini berbeda secara bermakna (p<0,05).
Disimpulkan bahwa pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% pada sulkus gingiva tikus yang mengalami periodontitis mengakibatkan jumlah sel fibroblas lebih banyak dan ligamen periodontal lebih tebal. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terhadap peran tetrasiklin gel sebagai conditioning agent pada permukaan akar gigi terhadap peningkatan kolagen ligamen periodontal melalui metode pemeriksaan lainnya, dan perlu dilakukan aplikasi tetrasiklin HCL gel pada pasien penderita periodontitis untuk melihat proses penyembuhan periodontitis secara klinis.
ABSTRACT
APPLYING 0.7% TETRACYCLINE HCL GEL ON RAT GINGIVAL SULCUS WITH PERIODONTAL DISEASES RESULT HIGHER NUMBER OF FIBROBLAST CELLS AND THICKER OF PERIODONTAL
LIGAMENT
Periodontal disease is an infectious disease, could be result loose of the teeth. The aim of this research is to prove that the applying 0,7% tetracycline hcl gel on rat gingival sulcus result higher number of fibroblasts and collagen synthesis which are marked by the thicker of rat periodontal ligament.
The study was a randomized post test only control group design experimental study on 32 white male rats which are inducted by lipopolyssaccaride (LPS) for 8 days. And then rats divided into control group were given placebo, and treatment group were given 0,7% tetracycline HCL gel. On 10th days, the rats were euthanazided for taken mandibula alveolar bone tissue sampling and histological preparations were made by HE (Harris Hematoxylin-Eosin) staining. The data were analyzed using SPSS program processed using Shapiro Wilk for normality test and then continued using independent t-test.
The result of this research is the mean number of fibroblasts at treatment group by administration of 0.7% tetracycline HCL gel (148.38±5.11 units) was higher than the control group (113.19±5.39 units). The mean of collagen synthesis were showed by the thickness of periodontal ligamen at group treated 0.7% tetracycline HCL gel (338.65±57.28 µm) was higher than the control group (225.50±45.29 µm). The mean number of fibroblast cell and thickness of periodontal ligament were statistically different (p<0.05).
Thus, it is conclude that 0.7% tetracycline HCL gel enhance the number of fibroblasts cell and the thickness of periodontal ligament in rat with periodontal disease.
DAFTAR ISI
SAMPUL DALAM ... i
PRASYARAT GELAR ... ii
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
PENETAPAN PANITIA PENGUJI ... iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT... v
2.1.2 Cementum ... 10
2.1.3 Periodontal Ligamet... 10
2.1.4 Alveolar Bone ... 11
2.2 Periodontitis ... 11
2.2.1 Histopatogenesis Gingivitis dan Periodontitis ... 14
2.2.2 Mekanisme Kerusakan Jaringan Pada Penyakit Periodontal 16 2.3 Fibroblas ... 19
2.5 Peran Fibroblas Dalam Sintesis Kolagen ... 27
2.6 Serat Kolagen Pada Ligamen Periodontal ... 30
2.7 Tetrasiklin ... 33
2.7.1 Sifat Kimia ... 36
2.7.2 Farmakologi ... 37
BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP PENELITIAN, DAN HIPOTESIS PENELITIAN ... 40
3.1 Kerangka Berpikir ... 40
3.2 Konsep Penelitian... 41
3.3 Hipotesis Penelitian ... 42
BAB IV METODE PENELITIAN ... 43
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ... 44
4.4.1 Klasifikasi variable... 46
4.4.2 Hubungan Antar Variabel ... 47
4.5 Definisi Operasional... 47
4.6 Bahan dan Alat Penelitian ... 48
4.6.1 Bahan Penelitian... 48
4.6.2 Alat Penelitian ... 49
4.7 Prosedur Penelitian... 49
4.7.1 Pembuatan Tetrasiklin HCL Gel ... 49
4.7.2 Perlakuan Pada Tikus ... 49
4.7.3 Pembuatan Sediaan Mikroskopis ... 51
4.7.4 Menentukan Sintesis Kolagen ... 52
4.8 Alur Penelitian ... 53
4.9 Analisis Data ... 54
BAB V HASIL PENELITIAN ... 55
5.1 Analisis Deskriptif ... 56
5.2 Uji Normalitas Data ... 56
5.4 Uji Komparabilitas ... 58
5.4.1 Analisis Komparabilitas Jumlah Fibroblas ... 58
5.4.2 Analisis Komparabilitas Ketebalan Ligament Periodontal ... 59
5.5 Gambaran Histologis Jumlah Fibroblas dan Ketebalan Ligamen Periodontal antar Kelompok ... 60
BAB VI PEMBAHASAN ... 63
6.1 Subjek Penelitian ... 63
6.2 Pembahasan Hasil Perbandingan Rerata Jumlah Fibroblas Antar Kelompok ... 63
6.3 Pembahasan Hasil Perbandingan Rerata Ketebalan Ligamen Periodontal ... 66
BAB VII SIMPULAN DAN SARAN ... 71
DAFTAR PUSTAKA ... 72
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1. Penampang sagital struktur jaringan periodontal pada gigi ... 9
Gambar 2.2. Struktur gigi beserta jaringan periodontal ... 9
Gambar 2.3. Keadaan gigi yang mengalami periodontitis pada rahang atas 13 Gambar 2.4. Progress penyakit periodontal ... 18
Gambar 2.5. Struktur mikroskopis fibroblas pada jaringan ikat longgar dengan pengecatan hematoksilin-eosin ... 28
Gambar 2.6. Peran fibroblas dalam membentuk dan meletakkan serat-serat dalam matrik, terutama serat kolagen ... 29
Gambar 2.7. Struktur kimia tetrasiklin ... 33
Gambar 5.1. Gambaran Histologis Sel Fibroblas ... 60
Gambar 5.2. Gambaran Histologis Tebal Ligamen Periodontal ... 60
Gambar L2.1 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok kontol. 80 Gambar L2.2 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok perlakuan I ... 80
Gambar L2.3 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok perlakuan II ... 81
Gambar L2.4 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok perlakuan III ... 81
Gambar L2.5 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Kontrol ... 82
Gambar L2.6 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Perlakuan I ... 82
Gambar L2.7 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Perlakuan II ... 83
Gambar L2.6 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Perlakuan III ... 83
Gambar L4.1. Lokal anastesi pada gingiva tikus ... 90
Gambar L4.2. Alat dan bahan yang digunakan ... 90
Gambar L4.3. Pembedahan Mandibula tikus... 91
DAFTAR TABEL
Tabel 5.1 Karakteristik subjek penelitian kelompok kontrol dan perlakuan ... 55
Tabel 5.2. Analisis deskriptif jumlah fibroblas dan ketebalan ligamen periodontal ... 56
Tabel 5.3. Hasil uji normalitas data jumlah fibroblas antar kelompok ... 57
Tabel 5.4. Hasil uji normalitas data ketebalan ligamen periodontal antar kelompok ... 57
Tabel 5.5. Hasil uji homogenitas data jumlah fibroblas dan ketebalan ligamen periodontal ... 58
Tabel 5.6. Rerata jumlah fibroblas antar kelompok ... 58
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 : Keterangan Kelaikan Etik... 74
Lampiran 2 : Hasil Penelitian Pendahuluan ... 75
Lampiran 3 : Analisis Data Dengan SPSS ... 80
DAFTAR SINGKATAN
CGF : Crevicular Gingival Fluid
CMC-Na : Carboxymethilcellulosa-Natrium
EDM : Extracelullar Dermal Matrix
Gly : Glycine
HCL : Hydrochloride
IFN : Interferon
IL : Interleukin
LPS : Lipopolisakarida
MCP : Monocyte Chemoattractant Protein
MIP : Macrophage Inflammatory Protein
MMP : Matriks metalloproteinase
mRNA : messenger Ribose Nucleic Acid
PGE2 : Prostaglandin E2
PMN : Polimorfonuklear
Pro : Prolina
RANTES : Regulated Activation Normal T cell Expressed and Secreted
TGF : Transforming growth factor
TIMP : Tissue Inhibitor of Metalloproteinase
TNF : Tumor Necrosis Factor
tRNA : transfer Ribose Nucleic Acid
