KARYA TULIS AKHIR
PENGARUH EKSTRAK ALPUKAT (Persea americana) TERHADAP PENURUNAN KADAR KOLESTEROL TOTAL PADA TIKUS PUTIH
JANTAN (Rattus Novergicus Strain Wistar) HIPERLIPIDEMIA
Oleh :
HIKMATUL MAGHFIROH 09020146
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2013
ii
PENGARUH EKSTRAK ALPUKAT (Persea americana) TERHADAP PENURUNAN KADAR KOLESTEROL TOTAL PADA TIKUS PUTIH
JANTAN (Rattus Novergicus Strain Wistar) HIPERLIPIDEMIA
KARYA TULIS AKHIR Diajukan kepada
Universitas Muhammadiyah Malang untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan
dalam Menyelesaikan Program Sarjana Fakultas Kedokteran
Oleh :
HIKMATUL MAGHFIROH 09020146
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2013
iii
LEMBAR PENGESAHAN KARYA TULIS AKHIR
Telah disetujui sebagai Karya Tulis Akhir Untuk memenuhi persyaratan Pendidikan Sarjana Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Malang Tanggal 29 Juli 2013
Pembimbing I
dr. Isbandiyah, Sp.PD
Pembimbing II
dr. Sulistyo Mulyo Agustini, Sp.PK
Mengetahui, Fakultas Kedokteran
Dekan,
iv
LEMBAR PENGUJIAN
Karya Tulis Akhir oleh Hikmatul Maghfiroh ini telah diuji dan dipertahankan di depan Tim Penguji pada tanggal 29 Juli 2013
Tim Penguji
dr. Isbandiyah, Sp.PD Ketua
dr. Sulistyo Mulyo Agustini, Sp.PK Anggota
v
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT karena atas berkat rahmat-Nya sehingga karya tulis akhir ini dapat penulis selesaikan dengan baik. Shalawat serta salam semoga senantiasa tercurah kepada junjungan besar Nabi Muhammad SAW, segenap keluarga, para sahabat, dan kita umatnya.
Karya tulis akhir ini berjudul ”Pengaruh Pemberian Ekstrak Buah Alpukat
(Persea americana) Terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total Pada Tikus Putih
Jantan (Rattus Norvegicus strain wistar) Hiperlipidemia”. Tujuan penulisan karya tulis akhir ini adalah sebagai syarat dalam menyelesaikan program sarjana di Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.
Karya tulis akhir ini dapat diselesaikan dengan baik berkat dukungan dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh sebab itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. dr. Irma Suswati, M.Kes, selaku Dekan Fakultas Kedokteran
2. dr. Meddy Setiawan, Sp.PD selaku Pembantu Dekan I Fakultas Kedokteran
3. dr. Fathiyah Safitri, M.Kes, selaku Pembantu Dekan II Fakultas Kedokteran
4. dr. Iwan Sys Indrawanto, Sp.KJ, selaku Pembantu Dekan III Fakultas Kedokteran
vi
5. dr. Isbandiyah Sp.PD, selaku Pembimbing 1 yang telah meluangkan waktu untuk membimbing, memberi saran, nasihat, koreksi, dan motivasi dalam proses penyelesaian karya tulis akhir ini
6. dr. Sulistyo Mulyo Agustini Sp.PK, selaku Pembimbing 2 yang telah meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan, memberi saran, nasihat, dan koreksi demi kesempurnaan karya tulis akhir ini
7. dr. Pertiwi Febriana C. M.Sc Sp.A, selaku Penguji yang telah sabar menguji dan memberikan saran yang sangat berharga demi kesempurnaan karya tulis akhir ini
8. Para dosen pengajar Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan bekal ilmu dan pengetahuan
9. Para staf laboratorium dan TU Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan kemudahan dalam proses belajar di perkuliahan selama ini
10.Seluruh keluarga besar angkatan 2009, keluarga besar Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang dan semua pihak yang secara langsung maupun tidak langsung membantu dalam penulisan karya tulis akhir ini
Penulis menyadari bahwa dalam penulisan karya tulis akhir ini masih terdapat kekurangan. Oleh karena itu, kritik dan saran yang bersifat membangun sangat penulis harapkan guna penyempurnaan karya tulis akhir ini. Penulis berharap karya tulis akhir ini dapat bermanfaat bagi pembaca sekalian.
Malang, Juli 2013 Penulis
vii
UCAPAN TERIMA KASIH
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih yang tak terhingga kepada:
1. Allah SWT dengan Ridho’ dan Tuntunan-Mu, sehingga karya tulis akhir ini dapat terselesaikan
2. Keluarga penulis, Ibu Maimunah, Ayah Ir. Imron Zuhdy, MH yang telah memberikan dukungan, motivasi dan doa, adikku M. Syauqi Firdaus dan keluarga lain yang tidak bisa penulis sebutkan satu-persatu, terimakasih atas dukungannya. Karya Tulis Akhir ini penulis dedikasikan untuk kalian semua.
3. Seluruh Dosen Pengajar Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan bekal ilmu pengetahuan serta Staf Tata Usaha (Pak Yono, Mas Didit, Mas Faisal, Bu Endang), Staf Laboratorium (Mas Miftha, Pak Kus) yang telah membantu menyediakan segala fasilitas dan membantu dalam melakukan penelitian.
4. Teman – teman dan sahabat penulis, alpukat’s group Rachma Susteriana (Nenek), Indah Kholisatul (Mami), Septian Kristiana (Tean), Purna Dwi S. (Kakek), terimakasih telah memberikan nasehat, saran, semangat, dan bantuan dalam penyelesaian karya tulis akhir ini. Teman sekandang tikus Gladiar Ayu P, anggota grup cacing (Hilman, Ayu PD, Sismi) yang telah membantu dalam urusan tikus-menikus. Teman-teman lain, Choirunizar ADF, Zulfahmi Irawan, Kharina F (KH), Heka Setyo, Devi Nur Fadjri, Heru Pratomo, Roisa Feriani yang telah memberikan semangat dan bantuan baik dalam hal penyelesaian karya tulis akhir maupun bantuan dalam hal ujian proposal serta hasil penelitian. Semua
teman-viii
teman lain, rekan sejawat keluarga besar FK-UMM angkatan 2009 yang tidak bisa penulis sebutkan satu-persatu, terutama yang sudah membantu. Terimakasih atas dukungan dan semangatnya.
5. Teman kost Riyanfita Lestari terimakasih atas bantuannya.
6. Semua pihak yang telah membantu tetapi terlewatkan tidak penulis sebutkan. Mohon maaf atas segala kekhilafan penulis dan terimakasih atas bantuannya.
ix ABSTRAK
Hikmatul, Maghfiroh, 2013, Pengaruh Pemberian Ekstrak Buah Alpukat (Persea
americana) Terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total Tikus Putih
Jantan (Rattus norvegicus strain wistar) Hiperlipidemia, Tugas Akhir Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Malang. Pembimbing (I) dr. Isbandiyah Sp.PD, Pembimbing (II) dr. Sulistyo Mulyo Agustini Sp.PK
Latar Belakang : Alpukat salah satu makanan yang kaya monounsaturated fatty acid (MUFA) dapat menurunkan kolesterol total serta meningkatkan high density
lipoprotein cholesterol (HDL-C). MUFA berfungsi menghambat absorbsi
kolesterol di usus sehingga dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah. Tujuan : Membuktikan pengaruh ekstrak alpukat terhadap penurunan kadar kolesterol total pada tikus putih jantan hiperlipidemia.
Metode : True experimental, dengan post test only control group design. Sampel 25 ekor tikus putih strain wistar dibagi 5 kelompok. Kelompok 1 : kontrol negatif (hanya diberi pakan standar), Kelompok 2 : kontrol positif (diet tinggi lemak tanpa ekstrak alpukat), kelompok 3,4 dan 5 diberi diet tinggi lemak + ekstrak buah alpukat dengan dosis 100, 200, dan 300 mg/ekor/hari selama 14 hari. Dianalisis menggunakan uji One way Anova, uji Tukey 5%, uji korelasi dan uji regresi linier. Hasil Penelitian: Pada kelompok 1 rerata kadar kolesterol total sebesar 69,2 mg/dl, kelompok 2 rerata kadar kolesterol total sebesar 95,6 mg/dl, kelompok 3 rerata kadar kolesterol total sebesar 79,6 mg/dl, kelompok 4 rerata kadar
kolesterol total sebesar 68,8 mg/dl, dan kelompok 5 rerata kadar kolesterol total sebesar 64,6 mg/dl. Hasil uji One way Anova didapatkan pengaruh yang
bermakna p = 0,010 (p < 0,05) antar kelompok perlakuan. Uji korelasi pearson didapatkan p = 0,001 (p < 0,05), arah korelasi negatif dengan kekuatan sebesar 0,669. Uji regresi menunjukkan nilai R2 = 44,8%.
Kesimpulan : Ekstrak alpukat terbukti dapat menurunkan kadar kolesterol kolesterol total.
Kata Kunci : ekstrak alpukat, MUFA, tikus putih jantan strain wistar, kolesterol total.
x ABSTRACT
Hikmatul, Maghfiroh, 2013, The Effect Of Avocado (Persea americana) Extract on the Decrease of Total Cholesterol on Hyperlipidemic Male White Rat
(Rattus novergicus strain wistar). Final Assignment Medical Faculty,
Univesity of Muhammadiyah Malang, Advisors : (I) dr. Isbandiyah Sp. PD (2) dr. Sulistyo Mulyo Agustini Sp. PK
Background : Avocados are rich food of monounsaturated fatty acids (MUFA) decrease total cholesterol and increase high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) level. MUFA inhibits the absorption of cholesterol in the intestine so it can lowering cholesterol levels in the blood.
Purpose : To prove the effect of avocado extract decrease total cholesterol in hyperlipidemic male white rat.
Methode : True experimental, with the post test only control group design. 25 samples strain wistar white rats were devided into 5 groups. Group 1 : negative control (only fed standar), group 2 : positive control (high-fat diet without avocado extracts), group 3,4 and 5 were given high-fat diet + treated by avocado extract with doses 100, 200, and 300 mg/rat/day for 14 day. Analyzed by One way Anova, Tukey test 5%, correlation and linear regression test.
Result : Group 1 the mean total cholesterol levels 69.2 mg/dl, group 2 the mean total cholesterol levels 95.6 mg/dl, group 3 the mean total cholesterol levels 79.6 mg/dl, group 4 the mean total cholesterol levels 68.8 mg/dl, and group 5 the mean total cholesterol levels 64.6 mg/dl. One way ANOVA test results showed a significant effect p = 0.010 (p < 0.05) between the treatment groups. Pearson correlation test showed p = 0.001 (p < 0.05), with positive way and strong correlation was 0,669. Regression test showed the value of R² = 44.8%. Conclusion : Avocado extract showed of decrease total cholesterol levels. Keyword : Avocado extract, MUFA, strain wistar male white rat, total cholesterol.
xi DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
LEMBAR PENGUJIAN ... iv
KATA PENGANTAR ... v
UCAPAN TERIMA KASIH ... vii
ABSTRAK ... ix
ABSTRACT ... x
DAFTAR ISI ... xi
DAFTAR TABEL ... xv
DAFTAR GAMBAR ... xvi
DAFTAR SINGKATAN ... xvii
DAFTAR LAMPIRAN ... xviii
BAB 1 PENDAHULUAN ... 1 1.1 Latar Belakang ... 1 1.2 Rumusan Masalah ... 2 1.3 Tujuan Penelitian ... 2 1.3.1 Tujuan Umum ... 2 1.3.2 Tujuan Khusus... 2 1.4 Manfaat ... 3 1.4.1 Manfaat Akademis ... 3 1.4.2 Manfaat Klinis ... 3 1.4.3 Manfaat Masyarakat ... 3
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ... 4
2.1 Alpukat ... 4
2.1.1 Sejarah Singkat ... 4
2.1.2 Taksonomi Alpukat ... 5
2.1.3 Deskripsi Tumbuhan Alpukat ... 5
2.1.4 Manfaat Alpukat ... 6
2.1.5 Sifat Kimiawi dan Efek Farmakologis ... 8
xii
2.2.1 Kolesterol Total ... 9
2.2.1.1 Pengertian Kolesterol Total ... 9
2.3 Metabolisme Lipoprotein ... 10
2.3.1 Jenis Lipoprotein ... 10
2.3.1.1 Kilomikron ... 10
2.3.1.2 Very Low Density Lipoprotein (VLDL) ... 11
2.3.1.3 Intermediate Density Lipoprotein (IDL) ... 11
2.3.1.4 Low Density Lipoprotein (LDL) ... 11
2.3.1.5 High Density Lipoprotein (HDL) ... 12
2.3.1.6 Lipoprotein (a) ... 13
2.3.2 Jalur Metabolisme Eksogen ... 13
2.3.3 Jalur Metabolisme Endogen ... 14
2.3.4 Jalur Reserve Cholesterol Transport ... 16
2.4 Hiperlipidemia ... 16
2.4.1 Hiperkolesterolemia ... 17
2.4.1.1 Penyebab Hiperkolesterolemia ... 18
2.4.1.2 Hiperkolesterolemia Poligenik ... 18
2.4.1.3 Hiperkolesterolemia Familial ... 19
2.4.1.4 Kebiasaan Diet Lemak Jenuh, Kurang Olahraga dan Kegemukan ... 19
2.5 Hubungan Ekstrak Buah Alpukat dengan Kolesterol ... 20
BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS PENELITIAN ... 22
3.1 Kerangka Konseptual Penelitian ... 22
3.2 Hipotesis ... 23
BAB 4 METODOLOGI PENELITIAN... 24
4.1 Rancangan Penelitian ... 24
4.2 Tempat dan Waktu Penelitian ... 24
4.3 Populasi dan Sampel ... 24
4.3.1 Populasi ... 24
4.3.2 Sampel ... 24
4.3.3 Teknik Sampling ... 24
xiii
4.3.5 Karakteristik Sampel Sampel ... 26
4.4 Variabel dan Definisi Operasional ... 26
4.4.1 Variabel ... 26
4.4.1.1 Variabel Bebas ... 26
4.4.1.2 Variable Tergantung ... 26
4.4.1.3 Definisi Operasional Variabel ... 26
4.5 Dasar Penentuan Dosis Alpukat ... 27
4.6 Alat dan Bahan Penelitian ... 28
4.6.1 Alat Pembuatan Ekstrak Alpukat ... 28
4.6.2 Alat Pemeliharaan Tikus ... 29
4.6.3 Alat lain ... 29
4.6.4 Bahan ... 29
4.7 Prosedur Penelitian ... 29
4.7.1 Pembagian Kelompok Tikus ... 29
4.7.2 Adaptasi ... 30
4.7.3 Pemberian Diet Tinggi Lemak ... 30
4.7.4 Pemberian Ekstrak Buah Alpukat ... 30
4.7.5 Cara Pembuatan Eksrak Buah Alpukat ... 30
4.7.5.1 Proses Pengeringan ... 30
4.7.5.2 Proses Ekstraksi ... 31
4.7.5.3 Proses Evaporasi ... 31
4.7.6 Proses Anestesi dan Pembedahan Hewan Coba ... 32
4.7.6.1 Proses Anestesi ... 32
4.7.6.2 Proses Pembedahan ... 32
4.7.6.3 Pemeriksaan Lipid Plasma ... 32
4.7.6.4 Pengamatan Hasil ... 34
4.7.6.5 Analisis Data ... 34
4.8 Alur Penelitian ... 35
BAB 5 HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA ... 36
5.1 Hasil Penelitian ... 36
xiv
5.2.1 Hasil Analisis Uji Normalitas, Homogenitas, dan One Way
Anova untuk Kadar Kolesterol Total Serum Tikus Putih Jantan .. 37
5.2.2 Hasil Analisis Uji Korelasi ... 39
5.2.3 Hasil Analisis Uji Regresi ... 39
BAB 6 PEMBAHASAN ... 42
BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN ... 46
7.1 Kesimpulan ... 46
7.2 Saran ... 46
DAFTAR PUSTAKA ... 48
xv
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
2.1 Kandungan buah alpukat ... 8 5.1 Rerata Kadar Kolesterol Total Serum pada Tikus Putih jantan (Rattus
novergicus strain wistar) ... 36 5.2 Hasil Uji Lanjut Tukey Honesty Significant Difference (HSD) 5%
Kolesterol Total ... 38 5.3 Hasil Uji Regresi ... 40
xvi
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Buah Alpukat (Persea americana) ... 4
2.2 Jalur Metabolisme Eksogen ... 14
2.2 Jalur Metabolisme Endogen ... 15
3.1 Skema Kerangka Konsep ... 22
4.1 Konversi Dosis Antara Spesies ... 28
4.2 Pengukuran Kadar Kolesterol Total ... 33
4.3 Alur Penelitian ... 35
5.1 Grafik Rata-Rata Kolesterol Total Tikus Putih jantan ... 37
5.2 Grafik Regresi Antara Dosis Ekstrak Alpukat dengan Penurunan Kadar Kolesterol Total Serum Tikus ... 40
xvii
DAFTAR SINGKATAN
ABC-1 : Adenosine triphosphate-Binding Cassette transporter-I Apo A1 : Apolipoprotein A1
Apo A2 : Apolipoprotein A2
CDC : Center of Disease Control and Prevention CETP : cholesterol ester transfer protein
FFA : Free Fatty Acid
HDL : High Density Lipoprotein
HDL-C : High Density Lipoprotein Cholesterol HMG-CoA : 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA LCAT : lecithin cholesterol acyltransferase LDL : Low Density Lipoprotein
LDL-C : Low Density Lipoprotein Cholesterol Lp (a) : Lipoprotein (a)
LPL : lipoprotein lipase
MUFA : Monounsaturated Fatty Acid NEFA : Non-Esteryfied Fatty Acid PUFA : Polyunsaturated Fatty Acid SR-A : reseptor scavenger-A TG : Trigliserida
xviii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
Uji Normalitas, Homogenitas dan Oneway ANOVA ... 48
Post Hoc Tests dan Uji Tukey HSD 5% ... 49
Means Plots dan Uji Korelasi ... 50
Uji Regresi ... 51
Surat Penelitian ... 52
Kartu Konsultasi Tugas Akhir ... 53
xix
DAFTAR PUSTAKA
Adam JMF, 2009, Dislipidemia, Dalam Buku Ajar Penyakit Dalam, Aru Ws, Bambang S, Idrus A, et al, Ed. 5, Jilid 3, FKUI, Jakarta, hal. 1984-1986. Adrian F, 2011, Khasiat Buah dan Sayur, Penebar Swadaya, Depok, hal.6-9. Anwar B, 2004, Dislipidemia Sebagai Faktor Resiko PJK, FK USU, Sumatra
Utara, hal. 1-3.
Brown CT, 2006, Penyakit Aterosklerotik Koroner, Dalam Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit, Sylvia Anderson Price, Lorraine Mc Carty Wilson, , Ed. 6, EGC, Jakarta, hal. 576-612.
Dalimartha S, 2011, Khasiat Buah dan Sayur, Penebar Swadaya, Depok, hal. 3-5. Fauzi, 2011, Fraksi Etil Ekstrak Metanol Rimpang Temu Giring terhadap Kadar
Kolesterol Total Darah, Yogyakarta : Bina Pustaka
Fadlina CS dkk, 2007, Efek Ekstrak Bulbus Bawang Putih (Allium sativum L.) dan Rimpang Kunyit (Curcuma domestika V.) terhadap Profil Lipoprotein dan Glukosa Model Hewan Hiperkolesterolemi-Diabetes, ITB, Bandung. Haryanti HW, 2011, Potensi Omega 9-Asam Oleat pada Daging Buah Alpukat
dalam Penurunan Kolesterol Serum dalam Darah, Jurusan Pendidikan Biologi, IKIP PGRI, Semarang, hal. 1-2.
Iman S, 2004, Jantung Koroner dan Serangan Jantung, Ed. 2, Gramedia Pustaka Utama, Jakarta, hal. 36.
Kumalasari ND, 2005, Pengaruh Berbasis Dosis Filtrat Daun Putri Malu (Mimosa
pudika) terhadap Kadar Glukosa Darah pada Tikus (Rattus Novergicus),
Program Studi Pendidikan Biologi, Jurusan MIPA FKIP UMM, Malang. Kusumawati D, 2004, Bersahabat dengan Hewan Coba, Gajahmada University
Pres, Yogyakarta, hal 106.
Maitra A, Kumar V, 2007, Penyakit Genetik dan Anak, Dalam Buku Ajar Patologi, Robbins, Prasetyo A, Pendit BU, Prilionoro T, Alih Bahasa. Assroruddin M, Hartanto H, Darmaniah N, Ed. 7, EGC, Jakarta, hal. 238-296.
Mandal A, 2013, Lipid, diunduh tanggal 7 Mei 2013, tersedia dari : http://www.news-medical.net/health/What-are-Lipid-(Indonesia).aspx Mikail B, Lusia KA, 2011, Definisi Kolesterol [online], diunduh tanggal 17
Oktober 2011, tersedia dari :
xx
Mayes PA, 2003, Sintesis Pengangkutan dan Ekskresi Kolesterol, Dalam Biokimia Harper, Murray RK, DK Granner, PA Mayes, et al, Ed. 24, EGC, Jakarta, hal. 277.
Novianti D, 2009, Pengaruh Pemberian Susu Kedelai Hitam terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total pada Tikus (Rattus novergicus) dengan Diet Tinggi Lemak, Program Studi Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga, Surabaya, hal. 6.
Oentoseno T, 2006, Pencegahan Primordial Penyakit Jantung Koroner [online], diunduh tanggal 10 Desember 2012, tersedia dari : http://old.pediatric.com/buletin/06224113606-2g3xih.pdf.
Pieterse Z, Johann J, Welma O, 2003, Avocados (monosaturated fatty acids),
Weigh Loss and Serum Lipid, South African Avocado Growers Association
Yearbook, Vol 3 No. 4, 26, pp. 65-71.
Povey R, 2002, How to Keep Your Cholesterol (terj) dalam Memantau kadar kolesterol Anda Wulandari, Widayanti D, Penerbit Arcan, Jakarta.
Pramono A, Finta W, 2008, Pengaruh Pemberian Kefir Susu Sapi terhadap Kadar Kolesterol Total Tikus Jantan Sprague Dawley, Program Studi Ilmu Gizi Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Vol.1, No.1, hal. 313-322.
Prihatman K, 2000, Alpukat/Avocado (Persea americana Mill / Persea gratissima
Gaerth), diunduh tanggal 21 September 2012, tersedia dari :
http://digilib.brawijaya.ac.id
Smith JB, 1998, Pemeliharaan, Perkembangbiakan, dan Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis, UI Press, Jakarta.
Supranto J, 2007, Teknik Sampling untuk Survey dan Eksperimen, Rineka Cipta, Jakarta, hal. 23.
Suyatna FD, 2008, Hipolipidemia, dalam Farmakologi dan Terapi, Rianto S, Nafrialdi, Ed. 5 FKUI, Jakarta, hal. 373-376.
Setyawardhani DA, Distantina S, Sulistyo H, et al, 2007, Pemisahan Asam Lemak Tak Jenuh dalam Minyak Nabati dengan Ekstraksi Pelarut dan Hidrolisa Multistage, Jurusan Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Negeri Sebelas Maret, Surakarta, Vol. 6, No. 2, hal. 59-64.
