Efek pemberian minuman stimulan terhadap
kelelahan pada tikus
Elly Herwana
*, Laurentia L. Pudjiadi*, Rachman Wahab*, Didi Nugroho**,
Tanu Hendrata*, Rianto Setiabudy***
*Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Trisakti **Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Trisakti
***Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia
ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk menilai efek minuman stimulan terhadap kelelahan akibat aktivitas fisik. Penelitian ini merupakan studi experimental in vivo menggunakan desain paralel silang (cross over) yang dilakukan pada 30 ekor tikus putih jantan galur Sprague Dawley dengan berat badan antara 180-200 g. Komposisi minuman stimulan mengandung taurin, ginseng, kafein, vitamin B1, B6, B12, madu, dan glukosa. Tikus dibagi dalam dua kelompok secara acak, satu kelompok diberi minuman stimulan dan kelompok yang lain diberi larutan akuades dengan volume yang sama sebagai kelompok kontrol. Dosis minuman stimulan yang diberikan besarnya 10 kali dari penggunaan manusia. Pada kedua kelompok dilakukan uji renang untuk mengetahui kemampuan struggling dan pengukuran kadar asam laktat dalam darah sebelum dan sesudah uji renang untuk mengetahui akumulasi asam laktat akibat aktivitas fisik. Hasil penelitian menunjukkan ada perbedaan yang bermakna terhadap kemampuan struggling (p<0,001) tetapi tidak ada perbedaan yang bermakna terhadap akumulasi asam laktat dalam darah (p>0,001) antara kelompok tikus perlakuan yang diberikan minuman stimulan dibandingkan dengan kelompok tikus kontrol.
Kata kunci: Minuman stimulan, struggling, kelelahan, asam laktat
The effect of stimulant drink administration on fatigue in rats
ABSTRACTThis study was designed to evaluate the effect of stimulant drink on fatigue induced by physical activity. This research was an in vivo experimental cross over design using 30 Sprague-Dawley furrow white rats in body weight between 180-200 g. The stimulant drink contained taurine, ginseng, caffeine, vitamins B1, B6, B12, honey, and glucose. The rats were randomized into two groups, one group receiving 2 ml of stimulant drink and the other group receiving aquadest in equal volume as a control group. The dosage of stimulant drink was ten times to that used in adult human. Swim test was done to both rat groups to measure their struggling capacity. Blood lactic acid concentration was measured twice, before and after the swim test. The increase of blood lactic acid concentration used to detect the accumulation of lactic acid induced by physical activity. The results showed that there was a significant difference in struggling capacity (p<0.001) between the group with stimulant drink administration and control group, but there was no significant difference in blood lactic acid accumulation (p>0.001).
PENDAHULUAN
Salah satu fungsi terpenting dari jaringan otot adalah untuk kontraksi. Dalam proses terjadinya kontraksi otot dibutuhkan transmisi neuromuskuler, ion kalsium, dan energi. Energi yang berasal dari makanan tidak dapat ditransfer langsung ke dalam sel untuk proses biologis, sekalipun makanan tersebut tersedia dalam bentuk nutrisi energi.(1,2) Kontraksi sel
o t o t m e m b u t u h k a n e n e rg i d a l a m b e n t u k
adenosine triphosphate (ATP). Selanjutnya
ATP akan dihidrolisis menjadi adenosine
d i p h o s p h a t e ( A D P ) d a n e n e r g i y a n g
digunakan untuk kontraksi. Proses ini dapat terus berlangsung selama persediaan ATP intrasel masih ada. Namun karena ATP yang tersedia jumlahnya sangat sedikit, akan habis terpakai untuk kontraksi otot dalam waktu yang sangat singkat.(1-3) Total persediaan ATP
di dalam tubuh juga jumlahnya sangat terbatas yaitu sekitar 80 sampai 100 g dan hanya mencukupi untuk aktivitas maksimal selama beberapa detik. Selanjutnya kebutuhan energi d i p e n u h i d a r i s i n t e s i s ATP m e l a l u i j a l u r o k s i d a t i f d a r i c re a t i n e p h o s p h a t e ( C P ) . Konsentrasi CP di dalam sel adalah sekitar empat sampai enam kali lebih besar dari persediaan ATP. Proses oksidatif ini sangat b e r g a n t u n g p a d a k e t e r s e d i a a n O2 d a n cadangan glikogen yang berasal dari glukosa. Energi yang diperoleh dari CP ini juga hanya mencukupi kebutuhan kontraksi otot untuk beberapa detik saja, dan untuk selanjutnya ATP akan dipenuhi melalui proses fosforilasi n o n o k s i d a t i f ( a n a e r o b ) .( 1 - 3 ) M e t a b o l i s m e
anaerob memanfaatkan glukosa dan glikogen m e l a l u i p r o s e s g l i k o l i s i s t a n p a O2 menghasilkan ATP dan sisa metabolisme berupa asam laktat.(1,4)
Dengan demikian, meskipun otot mampu berkontraksi dengan cepat, tetapi karena persediaan ATP adalah terbatas maka kerja
otot hanya dapat berlangsung singkat dan a k h i r n y a a k a n m e n i m b u l k a n k e l e l a h a n . K e l e l a h a n a t a u f a t i g u e m e r u p a k a n s u a t u keadaan di mana sel otot tidak mampu lagi untuk berkontraksi akibat kekurangan ATP,
n e u ro m u s c u l a r j u n c t i o n t i d a k m a m p u
meneruskan rangsang, disertai akumulasi asam laktat. Kelelahan akan menimbulkan rasa nyeri akibat iskemia jaringan otot.(3-4)
Minuman stimulan banyak dikonsumsi masyarakat luas sebagai minuman suplemen untuk menambah tenaga dan mengurangi kelelahan akibat kerja fisik sebagaimana dipromosikan oleh produsennya. Ada banyak j e n i s m i n u m a n s t i m u l a n , t e t a p i y a n g digunakan untuk penelitian ini mengandung taurin, vitamin B1, B6, B12, kafein, ginseng, m a d u , g l u k o s a , d a n b e b e r a p a z a t a d i t i f lainnya. Taurin adalah asam amino yang berperan dalam proses konjugasi asam empedu di dalam tubuh.(5) Taurin diindikasikan sebagai
ajuvan pada terapi hiperkolesterolemia dan g a n g g u a n k a r d i o v a s k u l e r.( 5 ) Vi t a m i n
merupakan zat yang dibutuhkan dalam jumlah kecil sebagai koenzim yang berperan dalam proses metabolisme tubuh, termasuk juga dalam metabolisme energi.(6)
Defisiensi vitamin B1, B6, dan B12 akan menimbulkan gejala pada saraf perifer berupa neuritis.(6) Hal ini menyebabkan banyak orang
mengkonsumsi vitamin B1, B6, dan B12 dalam jumlah yang berlebihan untuk meningkatkan m e t a b o l i s m e d a l a m s e l s a r a f , m e s k i p u n d i k e t a h u i b a h w a u n t u k p r o s e s i n i h a n y a dibutuhkan vitamin dalam jumlah kecil dan kelebihannya akan diekskresikan melalui u r i n e . K a f e i n y a n g j u g a t e r d a p a t p a d a minuman stimulan kopi, digolongkan sebagai o b a t s t i m u l a n s u s u n a n s a r a f o t a k .( 7 - 8 )
Penggunaan kafein dalam dosis terapi akan m e n i n g k a t k a n k e w a s p a d a a n , m e n g u r a n g i kantuk dan rasa lelah, mempercepat daya berpikir, namun berkurang dalam kemampuan
u n t u k p e k e r j a a n y a n g m e m b u t u h k a n k o o r d i n a s i o t o t y a n g h a l u s . M e s k i p u n demikian, penggunaan kafein dengan dosis yang berlebih atau pada orang yang sesnsitif dapat menimbulkan efek samping gelisah, gugup, insonmnia, tremor, palpitasi, dan k e j a n g .( 7 - 8 ) G i n s e n g b e r a s a l d a r i a k a r
tumbuhan ginseng dan mengandung saponin.(5)
Meskipun belum didukung dengan hasil uji k l i n i k y a n g c u k u p , g i n s e n g b a n y a k dimanfaatkan untuk meningkatkan daya tahan tubuh dan stimulan saraf pusat.(5) Madu dan
glukosa merupakan karbohidrat yang dapat digunakan sebagai sumber energi.(7-8)
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian minuman stimulan terhadap kelelahan dan akumulasi asam laktat pada tikus yang diinduksi dengan aktivitas fisik melalui uji renang.
METODE
Rancangan penelitian
P e n e l i t i a n i n i m e r u p a k a n u j i eksperimental in vivo dengan desain penelitian paralel silang (cross over).
Hewan coba dan besar sampel
Hewan coba yang digunakan adalah tikus putih jantan galur Sprague-Dawley dengan b e r a t b a d a n 1 8 0 - 2 0 0 g . B e s a r s a m p e l ditentukan berdasarkan perhitungan statistik rumus kelompok berpasangan.(9) Dari hasil
p e r h i t u n g a n i n i d i p e r o l e h n i l a i n = 2 8 . Penelitian ini menggunakan 30 ekor tikus.
Bahan dan alat
Bahan : mi n u m a n s t i m u l a n , a k u a d e s , reagen kering asam laktat (lactate pro stripe). Alat : Sonde, kaca objek, stop watch, bak renang, pelampung dari Styrofoam, Lactate
Pro Test Meter.
Cara kerja
Sebanyak 30 ekor tikus dibagi menjadi 2 kelompok secara acak menjadi kelompok p e r l a k u a n d a n k e l o m p o k k o n t r o l . P a d a kelompok perlakuan akan diberikan minuman stimulan sedangkan kelompok kontrol akan diberikan akuades. Untuk memicu terjadinya kelelahan pada tikus dilakukan uji renang (swim test). Pada kedua kelompok ini akan dilakukan uji renang dan pemeriksaan kadar a s a m l a k t a t d a l a m d a r a h .( 1 0 ) Ti k u s
d i p u a s a k a n s e l a m a 1 2 j a m s e b e l u m percobaan dilakukan, kemudian diperiksa kadar asam laktat dalam darah sebagai nilai awal asam laktat. Pada kelompok perlakuan diberikan 2 cc minuman stimulan yang dibuat d a r i 1 s a c h e t m i n u m a n s t i m u l a n y a n g dilarutkan dalam 25 cc akuades, sehingga dosis pemberian minuman stimulan adalah 10 kali dosis penggunaan pada manusia.(10) Pada
kelompok kontrol diberikan 2 cc akuades. P e m b e r i a n l a r u t a n d i l a k u k a n d e n g a n m e n g g u n a k a n s o n d e . S a t u j a m s e t e l a h pemberian minuman stimulan atau akuades, d i l a k u k a n u j i r e n a n g ( s w i m t e s t ) u n t u k memicu terjadinya kelelahan pada tikus, pelampung dari Styrofoam dipasang untuk menjaga agar tikus tetap terapung. Segera s e t e l a h u j i r e n a n g s e l e s a i d i l a k u k a n , diperiksa kadar asam laktat dalam darah. Setelah itu dilakukan wash out selama satu minggu, kemudian kedua kelompok tikus dipertukarkan dan dilakukan percobaan yang sama.
Uji renang
Uji renang dilakukan sebagai aktivitas fisik untuk memicu terjadinya kelelahan. (11-15) Pada uji renang akan dinilai kemampuan
struggling tikus. Definisi struggling adalah
p e r i o d e w a k t u d a l a m d e t i k s e l a m a t i k u s percobaan dalam keadaan berenang sekuat
tenaga dengan kepala dan kedua tungkai d e p a n b e r a d a d i a t a s p e r m u k a a n a i r( 1 0 , 1 2 )
selama 3 kali 5 menit periode pengamatan dengan interval masa istirahat selama 15 menit.(10,12)
Kadar asam laktat
S a m p e l d a r a h d i d a p a t d e n g a n c a r a memotong sedikit ujung distal ekor tikus. Sebanyak satu tetes darah diletakkan pada kaca objek kemudian langsung dilakukan p e n g u k u r a n k a d a r a s a m l a k t a t d e n g a n menggunakan reagen kering lactate pro test
s t r i p e ( A r k r a y ) d e n g a n a l a t L a c t a t e P ro M e t e r ( A r k r a y ). P e n g u k u r a n k a d a r a s a m
laktat dilakukan dua kali yaitu sebelum uji renang untuk mendapatkan nilai awal kadar asam laktat dalam darah, dan segera sesudah uji renang. Selisih kadar asam laktat dalam darah setelah uji renang dan nilai awal asam l a k t a t , d i g u n a k a n u n t u k m e n d e t e k s i t e r j a d i n y a a k u m u l a s i a s a m l a k t a t d a l a m darah akibat aktivitas fisik.(4,16)
Analisis data
D a t a d i a n a l i s i s s e c a r a s t a t i s t i k menggunakan uji-t berpasangan (paired
t-test)
HASIL PENELITIAN
Hasil pengamatan lama struggling tikus k o n t r o l r a t a - r a t a (±SD) adalah 265,27
(±119,02) detik, sedangkan pada kelompok t i k u s p e r l a k u a n y a n g d i b e r i m i n u m a n s t i m u l a n a d a l a h 4 3 3 , 4 3 (±129,64) detik. Berdasarkan perhitungan secara statistik, terdapat perbedaan yang bermakna (p<0,001) antara lama waktu struggling dari kelompok t i k u s y a n g d i b e r i k a n m i n u m a n s t i m u l a n dengan kelompok tikus kontrol (Tabel 1).
H a s i l p e n g u k u r a n k a d a r a s a m l a k t a t d a l a m d a r a h r a t a - r a t a (±SD) sebelum d i l a k u k a n u j i r e n a n g p a d a k e l o m p u k perlakuan dan kelompok kontrol adalah 3,19
± 1,12 mmol/L dan 3,19 ± 1,12 mmol/L.
B e r d a s a r k a n h a s i l p e r h i t u n g a n s e c a r a statistik tidak ada perbedaan yang bermakna (p>0,001) antara kadar asam laktat dalam d a r a h p a d a k e l o m p o k p e r l a k u a n d a n kelompok kontrol (Tabel 1).
Hasil pengukuran kenaikan kadar asam laktat diperhitungkan dari selisih kadar asam laktat dalam darah sesudah dan sebelum uji renang. Kenaikan kadar asam laktat dalam darah rata-rata (±SD) yang didapatkan pada tikus kelompok kontrol penelitian ini adalah 6,46 (±3,06) mmol/L, sedangkan untuk tikus kelompok perlakuan yang diberikan minuman s t i m u l a n a d a l a h 7 , 7 1 (±3,65) mmol/L. Berdasarkan hasil perhitungan statistik tidak ada perbedaan yang bermakna (p>0,001) terhadap kenaikan kadar asam laktat dalam darah antara tikus kelompok kontrol dan kelompok yang mendapat minuman stimulan (Tabel 1).
Tabel 1. Hasil pengamatan kemampuan struggling dan kenaikan kadar asam laktat dalam darah pada kelompok tikus kontrol dan kelompok tikus perlakuan
PEMBAHASAN
P a d a p e n e l i t i a n i n i d i g u n a k a n d u a parameter untuk mendeteksi kelelahan pada t i k u s y a i t u k e m a m p u a n s t r u g g l i n g d a n kenaikan kadar asam laktat dalam darah akibat aktivitas fisik. Untuk menginduksi kelelahan, metode yang digunakan adalah uji renang dengan menilai kemampuan struggling t i k u s c o b a . P a r a m e t e r s t r u g g l i n g t e l a h digunakan oleh beberapa peneliti(10-14) sebagai
induksi aktivitas fisik pada tikus. Meskipun tikus bukan merupakan binatang air, bilamana dimasukkan ke dalam bak air akan berenang sekuat tenaga untuk bertahan. Pada keadaan a k t i v i t a s y a n g b e r a t i n i , e n e r g i y a n g d i b u t u h k a n p e r u n i t w a k t u a k a n s a n g a t meningkat bila dibandingkan dengan keadaan istirahat, ini akan mengaktifkan metabolisme anaerob dalam sel otot untuk menghasilkan energi dan akan meningkatkan kadar asam laktat intrasel. Akumulasi asam laktat dalam s e l o t o t a k a n m e n y e b a b k a n a s i d o s i s intraseluler dan menimbulkan kelelahan. Asam laktat dalam sel otot akan berdifusi ke dalam darah dan meningkatkan kadar asam laktat plasma.(4,16) Peningkatan kadar asam laktat
d a l a m d a r a h b e r b a n d i n g l u r u s d e n g a n kemampuan struggling, karena makin berat a k t i v i t a s f i s i k y a n g d i l a k u k a n a k a n meningkatkan proses metabolisme anaerob sehingga kadar asam laktat juga meningkat. Hasil penelitian yang telah dilakukan ini m e n u n j u k k a n p e r b e d a a n y a n g b e r m a k n a terhadap kemampuan struggling antara tikus kelompok perlakuan yang diberikan minuman s t i m u l a n d a n k e l o m p o k t i k u s k o n t r o l , sementara terhadap kenaikan kadar asam laktat hasil perbedaannya tidak bermakna. Hal ini menunjukkan bahwa minuman stimulan e f e k t i f u n t u k m e n i n g k a t k a n k e m a m p u a n
s t r u g g l i n g t a n p a d i s e r t a i p e r b e d a a n
peningkatan kadar asam laktat dalam darah
yang bermakna pada kelompok tikus yang diberikan minuman stimulan dibandingkan dengan kelompok tikus yang hanya diberikan akuades.
Penelitian yang pernah dilakukan oleh Ikrar(9) terhadap efektifitas pemberian vitamin
B1, B6, B12 dosis tinggi sebagai antikelelahan, tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna t e r h a d a p k e m a m p u a n s t r u g g l i n g m a u p u n kenaikan kadar asam laktat dalam darah antara kelompok tikus yang diberikan vitamin B1, B6, B12 dosis tinggi dan kelompok tikus k o n t r o l . D a l a m h a l i n i v i t a m i n t e r s e b u t berperan sebagai koenzim dalam metabolisme a e r o b , s e m e n t a r a p a d a t i k u s c o b a d a l a m kondisi struggling yang terjadi terutama adalah glikolisis anaerob.
Peningkatan kemampuan struggling pada kelompok tikus yang diberikan minuman stimulan dibandingkan dengan kelompok kontrol dapat terjadi karena pada kelompok kontrol tikus dilakukan uji renang dalam k e a d a a n k e l a p a r a n , s e m e n t a r a m i n u m a n stimulan mengandung glukosa dan madu sebagai sumber energi. Kafein dan ginseng yang juga terdapat di dalam minuman stimulan ini merupakan perangsang saraf pusat yang d a p a t m e n i n g k a t k a n k e w a s p a d a a n p a d a kondisi terancam pada uji renang. Kafein d a p a t m e n i n g k a t k a n m o b i l i s a s i l e m a k kemudian mengisi cadangan glikogen di dalam otot. Pemberian kafein dapat meningkatkan k e m a m p u a n a k t i v i t a s f i s i k k a r e n a p e n g o s o n g a n g l i k o g e n a d a l a h s a l a h s a t u penyebab terjadinya kelelahan.(17) Namun
p e m b e r i a n k a f e i n t i d a k m e n i n g k a t k a n kemampuan kontraksi otot yang kuat dalam jangka waktu pendek karena pada kondisi ini kebutuhan energi terutama dipenuhi melalui jalur metabolisme anaerob. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian kafein tidak terbukti meningkatkan kemampuan aktivitas fisik maupun kemampuan fungsi pernapasan,
kalaupun ada efeknya tentu sangat kecil.(17)
Kafein juga termasuk substansi stimulan yang dilarang bagi atlit olahraga. (17)
Meskipun penelitian ini memberikan hasil yang positif, tidak berarti bahwa penggunaan minuman stimulan efektif dan aman untuk dikonsumsi dalam dosis berlebih atau terus menerus. Kafein dan mungkin juga ginseng m e r u p a k a n s t i m u l a n s a r a f p u s a t y a n g potensial menimbulkan efek samping yang dapat berbahaya seperti sensitisasi terhadap sistem kardiovaskuler.
KESIMPULAN
Pemberian minuman stimulan pada tikus terbukti dapat meningkatkan kemampuan
struggling dibandingkan dengan kelompok
kontrol, sementara peningkatan kadar asam laktat dalam darah tidak berbeda bermakna, sedangkan efek samping yang mungkin terjadi akibat minuman stimulan perlu diwaspadai. Untuk itu perlu dilakukan penelitian lebih l a n j u t t e r h a d a p p e n g a r u h p e n g g u n a a n minuman stimulan ini terutama terhadap s i s t e m k a r d i o v a s k u l e r s e p e r t i t e r h a d a p tekanan darah atau denyut jantung.
UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti mengucapkan terima kasih atas bantuan dana untuk penelitian ini kepada Pimpinan Fakultas Kedokteran Universitas Trisakti. Ucapan terima kasih juga kami sampaikan untuk Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Trisakti di mana penelitian ini telah dilaksanakan.
Daftar Pustaka
1. McArdle WD, Katch FL. Energy transfer in the body. In: Balado D, Vaughn VM, Eckhart C , e d i t o r s . E x e r c i s e p h y s i o l o g y : e n e rg y nutrition and human perfornance. 4th ed.
Philadelphia: Williams and Wilkins; 1996. p. 101-19.
2. Strojnik V, Komi PV. Neuromuscular fatigue a f t e r m a x i m a l s t r e t c h - s h o r t e n i n g c y c l e exercise. J Appl Physiol 1998; 84: 344-50. 3. S i l v e r t h o r n D U . S k e l e t a l m u s c l e . I n :
Berriman L, Reid AA, Dekel Z, editors. Human physiology: an integrated approach. 3rd ed. San Francisco: Daryl fox publisher;
2004. p. 391-412.
4. Billat LV. Use of blood measurements for prediction of exercise performance and for control of training. Sports Med 1996; 2: 57-75.
5. Mayes PA. Structure and function of water soluble vitamins. In: Murray RK, Granner D K , M a y e s PA , R o d w e l l V W, e d i t o r s . H a r p e r ’s B i o c h e m i s t r y. 2 7t h e d . N e w
York:McGran-Hill; 2000. p. 627-41. 6. B l o o m F E . N e u r o t r a n s m i s s i o n a n d t h e
central nervous system. In: Hardman JG, Gilman AG, editors. Goodman & Gilmans’s The pharmacological basis of therapeutics. 10th ed. New York: McGraw-Hill; 2001. p.
293-320.
7. Wa r d T N . Tr e a d m e n t o f n e u r o l o g i c disorders. In : Carruthers SG, Hoffman BB, M e l m o n K L , N i e r e n b e rg D W, e d i t o r s . M e l m o n a n d M o r r e l l i ’s C l i n i c a l pharmacology. 4th ed. New York:
McGraw-Hill; 2000. p. 401-10.
8. Browner WS, Black D, Newman TB, Hulley SB. Estimating sample size and power. In: H u l l e y S B , C u m m i n g s S R , e d i t o r s . D e s i g n i n g c l i n i c a l r e s e a r c h . 1s t e d .
Baltimore: Williams & Wilkins; 1998. p. 139-58.
9. Ikrar T. Efektivitas pemberian kombinasi v i t a m i n B 1 , B 6 , B 1 2 p e r o r a l u n t u k mengatasi kelelahan pada tikus (thesis). Jakarta:Universitas Indonesia; 2003. 10. Griffith JQ Jr, Jeffers WA, Roberts E. The
circulatory system. In: Farris EJ, Griffith JQ J r, e d i t o r s . T h e r a t i n l a b o r a t o r y i n v e s t i g a t i o n . N e w Yo r k : H a f n e r P r e s s ; 1949. p. 278-95.
11. S w a i n M G , M a r i c M . I m p r o v e m e n t i n c o l e s t a s i s - a s s o c i a t e d f a t i g u e w i t h a
serotonin receptor agonist using a novel rat model of fatigue assessment. Hepatology 1997;25:291-4.
12. Rachman IM, Unnerrstall JR, Pfaff DW, Cohen RS. Estrogen alters behaviors and f o r e b r a i n c - f o s t e x p r e s s i o n i n ovariectomized rats subjected to the forced swim test. Neurobiology 1998; 95: 13941-6.
13. Kirby LG, Lucki I. Interaction between the f o r c e d s w i m m i n g t e s t a n d f l u o x e t i n e t r e a t m e n t o n e x t r a c e l l u l a r 5 -droxytryptamine and 5-hydroxyndoleaceatic acid in rat. J Pharm and Expermimental Ther 1997; 282: 967-76.
14. Frye CA, Walf AA. Changes in progesterone m e t a b o l i t e s i n t h e h i p p o c a m p u s c a n
modulate open field an forced swim test behavior of proestrous rats. Hormons and Bahavior 2002; 41: 306-15.
15. Kirby LG, Allen AR, Lucki I. Regional defferences in the effect of forced swimming on extracellular levels of 5-hydrotryptamine a n d 5 - h y d r o x y n o d o l e a c e t i c a c i d . B r a i n Research 1995; 682: 189-96.
16. We s t e r b l a d H , A l l e n D G, L a n n e rg r e n J . Muscle fatigue: lactic acid or in organic phosphate the major cause? News Physiol Sci 2000; 17: 17-21.
17. Dekhuijzen PNR, Machiels HA, Heunks LMA, van der Heijden HFM, van Balkom RHH. Athletes and doping: effects of drugs on the respiratory system. Thorax 1999; 54: 1041-6.
