hitung trombosit

(1)

HEMATOLOGI

HITUNG TROMBOSIT

OLEH:

Kelompok II Genap

Luh

Luh Kadek

Kadek Suciari

Suciari

!"#$%&"$&"$'(

!"#$%&"$&"$

'(

Ni

Ni !u)u

!u)u !uri

!uri Ar)ini

Ar)ini

!"#$%&"$&"$

!"#$%&"$&"$&(

&(

Ni

Ni Made

Made Andini

Andini *e+i

*e+i

!"#$%&"$&"$,(

!"#$%&"$&"$

,(

Thalia

Thalia An--rea

An--rea Noor

Noor

!"#$%&"$&"$

!"#$%&"$&"$.(

.(

/i)ri

/i)ri Ana0)a0ia

Ana0)a0ia Irian)o

Irian)o

!"#$%&"$&"'"(

!"#$%&"$&"'

"(

!OLITEKNIK KESEHATAN *EN!ASAR

1URUSAN ANALIS KESEHATAN

TAHUN '"$&2'"$3

(2)

HITUNG TROMBOSIT

I4 TU1UAN

a4 Tu5uan In0)ruk0ional Umum

1. Mahasiswa dapat memahami cara menghitung jumlah Trombositdarah probandus. 2. Mahasiswa dapat menjelaskan cara menghitung jumlah Trombosit darah probandus. 64 Tu5uan In0)ruk0ional Khu0u0

1. Mahasiswa dapatmelakukan cara menghitung Trombositdarah probandus.

2. Mahasiswa dapat mengetahui jumlah trombosit /mm3 _{darah probandus secara} langsung.

3. Mahasiswa dapat menginterpretasikan hasil jumlah Trombosit darah probandus.

II4 METO*E

Cara Langsung (ees dan !cker"

III4 !RINSI!

#arah diencerkan dengan suatu larutan $ang mengandung brilliantcres$l blue $ang akan mengenai trombosit menjadi berwarna agak biru muda. %emudian Trombositn$a dihitung dengan menggunakan kamar hitung.

I/4 *ASAR TEORI

Darah merupakan komponen esensial makhluk hidup, mulai dari binatang primitif sampai dengan manusia. Dalam keadaan fisiologik, darahselalu beraada dalam pembuluh darah sehingga dapat menjalankan fungsinyasebagai: (a) pembawa oksigen (oxsigen karier ); (b) mekanisme pertahanantubuh terhadap infeksi; dan (c) mekanisme hemostasis. (Bakta, 2007)

#arah merupakan jaringan cair $ang sangat penting bagi manusia $ang memiliki ban$ak kegunaan untuk menunjang kehidupan. Tanpa darah $ang cukup seseorang dapat mengalami gangguan kesehatan dan bahkan dapat mengakibatkan kematian. #arah terdiri atas dua bagian& bagian cair $ang disebut plasma dan unsur 'unsur padat $aitu selsel darah.#arah membentuk) sampai *+ dari berat badan tubuh total& ,olume darah secara keseluruhan kira ' kira - liter. Tiga jenis sel darah utama adalah sel darah merah (eritrosit"& sel darah putih (leukosit" dan keping darah (trombosit". Cairan kekuningan $ang membentuk medium cairan darah $ang disebut plasma darah membentuk --+ dari ,olume darah total. edangkan -+ sisan$aadalah sel darah. !ritrosit menempati bagian besar ,olumen$a $aitu sekitar 00+& trombosit (&) ' 1&+" dan leukosit (&2+". (onald .acher& ichard .Mcherson& 24 !,el$n C.earce& 1050"

(3)

a4 Trom6o0i)

Trombosit berasal dari 6ragmentasi sitoplasma megakariosit& suatu sel sumsum tulang dengan ukuran paling besar. Megakariosit matang ditandai proses endomitotik inti dan makin besarn$a ,olume sitoplasma. etiap megakariosit menghasilkan 2 trombosit. #i6erensiasi sel asal

sampai dihasilkann$a trombosit memakan waktu 1 hari.Trombosit matang berukuran 2 μm & berbentuk discoid tak berinti. etelah keluar dari sumsum tulang& sekitar 23 + trombosit mengalami sekuestrasi di limpa(%osasih& 2*". 7mur trombosit pada darah peri6er 51 hari (urwanto& 25".

#iameter trombosit berukuran 1 μm & mempun$ai dinding mukopolisakarida $ang

ber6ungsi dalam reaksi adesi dan agregasi trombosit. 8ungsi utama trombosit adalah pembentukan sumbat mekanis sebagai respon hemostatik normal terhadap luka ,ascular. roses pembentukan sumbat tersebut melalui adesi& pembebasan& agregasi dan 6usi& serta akti,itas prokoagulann$a.

!em6en)ukan Trom6o0i)

el trombosit berasal dari 6ragmentasi sitoplasma megakariosit sumsum tulang. rekursor megakariosit& megakarioblast& muncul melalui proses di6erensiasi dari sel induk hemopoetik. Megakariosit mengalami pematangan dengan replikasi inti endomitotik $ang sinkron& memperbesar ,olume sitoplasma sejalan dengan penambahan lobus inti menjadi kelipatan duan$a. ada berbagai stadium dalam perkembangann$a (paling ban$ak pada stadium inti delapan"& sitoplasma menjadi granular dan trombosit dilepaskan.

roduksi trombosit mengikuti pembentukan mikro,esikel dalam sitoplasma sel $ang men$atu membentuk membrane pembatas trombosit. tiap sel megakariosit menghasilkan 11- trombosit. ehingga diperkirakan akan dihasilkan 3-./ul trombosit per hari. 9nter,al waktu semenjak di6erensiasi sel induk sampai produksi trombosit berkisar sekitar 1 hari. :umlah sel trombosit $ang bersirkulasi dalam darah tepi sangat tergantung jumlah sel megakariosit& ,olume sitoplasma megakariosit& umur trombosit dan sekuestrasi oleh limpa. rogenitor megakariosit C87Mega meningkat atau menurun sebagai respon terhadap megakariosit. Trombopoetin adalah pengatur utama produksi trombosit& dihasilkan oleh hati dan ginjal. Trombosit mempun$ai reseptor untuk trombopoetin (CML" dan mengeluarkann$a dari sirkulasi& karena itu kadar trombopoetin tinggi pada trombositopenia akibta aplasia sumsum tulang. Trombopetin meningkatkan jumlah dan kecepatan maturasi megakariosit. :umlah trombosit mulai meningkat ) hari

(4)

S)uk)ur Trom6o0i)

;likoprotein

permukaan sangat

penting dalam reaksi

adhesi dan agregasi

trombosit. dhesi pada kolagen di6asilitasi oleh glikoprotein 9a (; 9a". ;likoprotein 9b dan 99b/999a penting dalam perlekatan trombosit pada ,on <illebrand 6actor (=<8" dan subendotel ,ascular. eseptor 99b/999a juga merupakan reseptor untuk 6ibrinogen $ang penting dalam agregasi trombosit.Membran plasma berin,aginasi ke bagian dalam trombosit untuk membentuk suatu sistem membrane (kanalikular" terbuka $ang men$ediakan permukaan reakti6 $ang luas tempat protein koagulasi plasma diabsorbsi secara selekti6. 8os6olipid membran (6aktor trombosit 3" sangat penting dalam kon,ersi 6aktor > menjadi >a dan protrombin (6aktor 99" menjadi thrombin (6aktor 99a". #i bagian dalam trombosit terdapat kalsium& nukleotida (terutama #&T dan serotonin" $ang terkandung dalam granula padat. ;ranula al6a mengandung antagonis heparin& 6aktor pertumbuhan (#;8"& ?tromboglobulin& 6ibrinogen& ,<8. @rganel spesi6ik lain meliputi

lisosom $ang mengandung enAim hi6rolitik& dan peroksisom $ang mengandung katalase. elama reaksi pelepasan& isi granula dikeluarkan ke dalam sistem kanalikular

64 7ara Hi)un- Trom6o0i)

Trombosit sulit untuk dihitung karena kecil& mudah pecah dan sulit dibedakan dengan Aat pengotor. Trombosit juga mudah melekat pada benda asing (adesi6" dan cenderung saling menempel satu sama lain (agregasi". emeriksaan harus dilakukan sesegera mungkin dan dianjurkan memakai peralatan $ang dilapisi silicon atau peralatan plastic.

Trombosit dapat dihitung secara langsung maupun tak langsung. Cara langsung dilakukan secara manual atau otomatis (automatic cell counter". Cara manual dapat

(5)

dilakukan dengan metode ees !cker atau BrecherCronkite. erhitungan tak langsung memakai 8onio.

enentuan kuantitati6 trombosit dengan cara otomatis sejauh ini masih dianggap paling akurat. itung trombosit metode otomatis mempun$ai koe6isien ,ariasi +& sedangkan manual 22+.

Macammacam metode hitung trombosit& $aitu D 1. Metode ees !cker

#arah diencerkan dengan larutan $ang terdiri atas BCB (Brilliant Cres$l Blue"& sehingga trombosit akan tercat terang kebiruan. Trimbosit dihitung dengan bilik hitung mikroskop. Cara manual $aitu dengan cara mengencerkan dan melisiskan eritrosit dalam darah dengan larutan ees  !cker& pengenceran di dalam pipet khusus kemudian dihitung menggunakan kamar hitung 9mpro,ed Eeubauer pada ,olume tertentu ( ;andasoebrata& 10)*" Cara pada metode ini menggunakan larutan ees !cker sebagai pengencer dan mikroskop caha$a biasa untuk perhitungan. Trombosit tampak re6raktil dan mengkilat& berwarna biru muda/ lila& serta berbentuk bulat& lonjong atau koma tersebar atau bergerombol. darah !#T diencerkan dengan larutan $ang mengandung Brilliant cres$l blue $ang mewarnai trombosit berwarna biru muda. '4 Metode BrecherCronkite

#arah diencerkan dengan ammonium oksalat 1+ $ang melisiskan sel darah merah. Trombosit dihitung dengan hemositometer dan mikroskop 6ase kontras. enggunaan ammonium oksalat 1+ lebih akurat dibanding 6ormol sitrat dalam melisiskan sel darah merah.

%edua cara diatas membutuhkan peralatan $ang bersih dan kering. #arah dan reagen $ang telah dicampur harus diperiksa sesegera mungkin.pabila hasil hitung trombosit rendah& pemeriksaan harus diulang dengan mengurangi pengenceran. ebalikn$a bila jumlah trombosit tinggi& pengenceran harus ditambah. lasma ka$a trombosit juga dapat dipakai untuk hitung trombosit $ang dicurigai rendah.

Metode ees !cker mempun$ai kemungkinan kesalahan 1)2-+& sedangkan BrecherCronkite *1+. %esalahan pokok dari hitung sel secara manual ini adalah dalam pengenceran dan perhitungan. asil $ang telah diperoleh dari kedua cara diatas tetap harus dikon6irmasi dengan #T (ediaan pusan #arah Tepi".

(6)

emeriksaan ini untuk menghitung trombosit tak langsung. Mulamula darah kapiler dicampur dengan magnesium sul6at 1+& kemudian dibuat #T dan dilakukan pengenceran ;iemsa. :umlah trombosit dihitung dalam 1 eritrosit. Cara ini lebih kasar dibanding cara langsung.

. Metode automatic cell counter

Metode ini memakai prinsip flow cytometry. rinsip tersebut memungkinkan sel sel masuk flow chamber untuk dicampur dengan diluents& kemudian dialirkan melalui aperture berukuran kecil $ang memungkinkan sel lewat satu persatu. liran $ang keluar ini akan dilewatkan melalui medan listrik untuk kemudian dipisahkan sesuai muatann$a (cell sorting".

#ua teknik dasar pengukuran sel dalam flow cytometry $aitu impedansi listrik (electrical impedance" dan pendar caha$a (light scattering".Teknik impedansi listrik didasarkan pada pengukuran besarn$a resistensi elektronik antara dua elektroda. Trombosit dihitung lalu dikalkulasikan dan ,ariasi ukuran sel ditampilkan dalam bentuk histogram. Contoh alat $ang memakai prinsip ini adalahSysmex KX-21.

Cara ini juga mempun$ai keuntungan& tidak melelahkan petugas laboratorium& jika harus ban$ak melakukan pemeriksaan menghitung jumlah trombosit. kan tetapi cara ini masih ada kelemahann$a karena trombosit $ang besar (giant trombosit" atau beberapa trombosit $ang menggumpal tidak bisa terhitung& hal ini men$ebabkan jumlah trombosit menjadi lebih sedikit sehingga perlu dikon6irmasi dengan cara

manual.

erhitungan trombosit dilakukan dengan menggunakan specimen darah $ang baru memakai antikoagulan !#T. #arah $ang diambil dari pembuluh darah ,ena menghasilkan perhitungan $ang lebih akrat daripada darah kapiler (:ono dan 7lomo& 2-".

c4 8ak)or 9an- dapa) mempen-aruhi pen-ama)an )rom6o0i)

1. %emoterapi dan sinar F dapat menurunkan hitung trombosit 2. engaruh obat (lihat pengaruh obat"

3. enggunaan darah kapiler men$ebabkan hitung trombosit cnderung lebih rendah. . engambilan sample darah $ang lamban men$ebabakan trombosit saling melekat

(7)

-. Tidak segera mencampur darah dengan antikoagulan atau pencampuran $ang kurang adekuat juga dapat men$ebabkan agregasi trombosit& bahkan dapat terjadi bahkan

). erbandingan ,olume darah dengan antikoagulan tidak sesuai dapat men$ebabkan kesalahan pada hasilD

• :ika ,olume terlalu sedikit G (!#T terlalu berlebihan". elsel eritrositn$a mengalami krenasi& sedangkan trombosit membesar dan mengalami disintegrasi

• :ika ,olume berakibat menurunn$a jumlah trombosit.

• enundaan pemeriksaan labih dari 1 jam men$ebabkan perubahan jumlah trombosit.

d4 Ma0alah Klini0

:umlah trombosit mungkin meningkat ataupun menurun. en$akit akibat peningkatan nilai trombosit disebut trombositosis atau trombositemia sedangkan penurunan nilai trombosit disebut trombositopenia.

en$ebab penurunan trombosit (trombositopenia" D en$ebab utama trombositopenia dapat diklasi6ikasikan menjadi dua $aitu kegagalan sumsum tulang untuk menghasilkan trombosit dalam jumlah $ang memadai dan peningkatan destruksi peri6er atau sekuestrasi trombosit. enurunan jumlah trombosit dapat dijumpai pada leukemia ( lim6ositik& mielositik& monositik& dan sel berambut"& m$eloma multiple& kanker (kanker tulang& saluran gastrointestinal& kanker otak"& anemia (anemia aplastik& de6isiensi besi& pernisiosa& de6isiensi ,itamin B12 atau asam 6olat& dan anemia sel sabit"& pen$akit hati& karsinoma dan pengaruh obat seperti ntibiotik& sul6amida& aspirin dan Huinidin.

en$ebab peningkatan jumlah trombosit (trombositosis atau trombositemia" D olisitemia ,era& trauma (6raktur& pembedahan"& paskasplenektomi& karsinoma metastatic& embolisme pulmonar$& dataran tinggi& tuberculosis& retikulositosis& latihan 6isik berat. Pengaruh obat D

epine6rin (adrenalin" /4 ALAT *AN BAHAN

a4 Ala)

• ipet thoma eritrosit

• %amar hitung 9mpro,ed Eeubauer • Mikroskop

(8)

• Counter Cell • Co,er glass

64 Bahan !emerik0aan:

• #arah %apiler atau darah =ena dengan anticoagulan (!#T" c4 Rea-en

• Larutan ess dan !cker

-

Ea citrat 3.*g

-

Lar. 8ormaldehid + 2ml

-

BCB 3 mg

-

Huadest ad 1 ml

/I4 7ARA KER1A

1. iapkan pipet

thoma $ang akan

digunakan

2. isap darah !#T dengan pipet Thoma sampai tanda .-.

(9)

. Campur baikbaik darah dan larutan pengencer

-. Buang - tetes larutan $ang ada dalam batang pipet Thoma

). Masukkan larutan darah dalam pipet Thoma ke dalam kamarhitung sampai mengisi dengan tepat seluruh area penghitungan& dan Biarkan trombosit $ang sudah berada dalam kamar hitung selama 1 menit dalam suhu kamar

/II4 7ARA !ERHITUNGAN

=olume bilik hitung pada seluruh kotak bidang kecil. T G 2- F &2F&2F&1 G &1 mm3 Besarn$a pengenceran trombosit dengan pipet ThomaG 2 F.

jumla htrombosit = jumlah sel yang di h itung

volumebilik hitung x pengenceran

#engan memasukkan ,olume bilik hitung dan pengenceran kedalam persamaan diatas diperoleh rumus sebagai berikutD jumlah trombosit G jumlah sel $ang dihitung F 2

/III4 NILAI RU1UKAN

ees !cker D 2. ' -. /mm3

Sum6er  0um6er ke0alahan :

erhitungan angka trombosit dengan metode ini mempun$ai sumber kesalahan $ang sama $ang men$angkut pen$iapan spesimen dan teknik& seperti pada perhitungan angka leukosit.

(10)

ebagai tambahan karena adan$a da$a agregasi dan adhesi $ang dimiliki oleh trombosit& maka trombosit ini cenderung untuk beraglutinasi dengan cepat dan sangat mudah.

7ntuk mencegah aglutinasi& dapat dilakukan dengan jalanD 1. ;unakan !#T sebagai anticoagulant

2. Buatlah spesimen dengan cepat& terutama bila menggunakan darah kapiler. 3. ;uankan alat gelas $ang betul ' betul bersih.

. %ocoklah spesimen darahn$a $ang telah diencerkan selama waktu $ang telah ditentukan. -. pabila dalam menghitung trombosit itu dijumpai adan$a pengelompokan trombosit& maka

harus diulang.

eggerombolan ini mungkin disebabkan kurang baikn$a pada waktu mencampur atau

(11)

*a;)ar !u0)aka

nonim. 212. Menghitung Trombosit. IonlineJ. TersediaD

httpD//digilib.unimus.ac.id/download.phpKidG50-2. IdiaksesD 13 Eo,ember 21-. 13D22 witaJ

Bakta& 9 Made. 25. ematologi klinik ingkas. :akarta. Buku %edokteran !;C.

iswanto. 213. emeriksaan Laboratorium ematologi. og$akartaD l6amedia %anal Medika