EFEK IMUNOMODULATOR EKSUDAT IKAN GABUS (Channa striata) TERHADAP AKTIVITAS, KAPASITAS MAKROFAG DAN JUMLAH
SEL LEUKOSIT,LIMFOSIT, NEUTROFIL PADA MENCIT JANTAN GALUR BALB/c
SKRIPSI
Untuk memenuhi sebagaian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1
Diajukan Oleh MEGA KARTIKASARI
1008010161
Kepada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Purwokerto Purwokerto
INTISARI
MEGA KARTIKASARI pada penelitian Efek Imunomodulator Eksudat Ikan Gabus (Channa striata) Terhadap Aktivitas, Kapasitas Makrofag dan Jumlah Sel Leukosit, Limfosit, Neutrofil Pada Mencit Jantan Galur Balb/c. Dibawah bimbingan NUNUK ARIES NURULITA dan SUPARMAN
Latar Belakang : Penelitian ikan gabus(Channa striata)mempunyai banyak manfaat untuk kesehatan. Dari data empiris ikan gabus biasanya untuk terapi tambahan setelah pasca operasi, untuk meningkatkan imunitas dari tubuh. Pada banyak penelitian Channa striata mempunyai asam lemak dan asam amino yang tinggi yang diduga berpengaruh menjadi imunomodulator. Asam arakidonat(PUFA), Zinc and Cu banyak ditemukan pada ekstrak Channa striata.
Objective: Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui potensi dari ikan gabus (Channa striata) sebagai imunomodulator yang dapat meningkatkan aktivitas dan kapasitas makrofag dan meningkatkan jumlah dari sel leukosit, lymfosit dan neutrofil.
Metode: Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah eksperimental dengan rancangan acak lengkap. Pengambilan eksudat Ikan gabus dengan oven pada temperature 100°C. Lima belas mencit Balb/c dibagi menjadi 5 kelompok. Kelompok perlakuan (Kelompok 1) diberi eksudat ikan gabus 3,9 mg/hari, Kelompok (II) diberi 2,6 mg/hari, Kelompok (III)diberi 1,3 mg/hari. Kelompok kontrol positif menerim Simuno dengan dosis 0,026 ml/ dan kontrol negatif minyak jagung 0,5 ml.Pada hari ke-8, diinfeksi dengan Staphylococcus aureus(SA) secara interaperitoneal. Aktivitas dan kapasitas makrofag dihitung pada cover slip dari cairan peironeal mencit. Perhitungan jumlah leukosit, limfosit, neutrofil dari darah mencit Balb/c dihitung dengan Heamtology analyzer.
Hasil: Kapasitas, aktivitas makrofag dari kelompok eksudat ikan gabus lebih tinggi dari kontrol positif dan negatif. Eksudat ikan gabus pada dosis 3,9 mg/hari lebih tinggi dari kelompok yang lain dan berbeda bermakna dari data statistic. Eksudat ikan gabus tidak meningkatkan jumlah sel leukosit, lymfosit, neutrofil dari darah mencit.
Kesimpulan: Eksudat ikan gabus meningkatkan aktivitas dan kapasitas makrofag cairan peritoneum model mencit Balb/c. Eksudat ikan gabus tidak meningkatkan jumlah leukosit, limfosit, neutrofil dari darah mencit Balb/c.Eksudat ikan gabus mempunyai potensi imunomodulator.
Kata Kunci: Eksudat Channa striata , imunomodulator, kapasitas dan aktivitas dari fagositosis, Staphylococcus aureus
ABSTRACT
Background: Study on snake head fish (Channa striata) resulted many advantage for health. Empirical data show that snake head fish usually used for supplementary therapy for several condition such as post surgical and deficiency of imun system. Many study on Channa striata have higher fatty acid (PUFA) Poly unsaturated fatty acid and amino acid were indicated as immunomodulator. Arachidonic acid (PUFA), Zinc and Cu in many study higher identify in extract Channa striata.
Objective: This research’s purpose is to know the potency of Channa striata as immunomodulator though it’s modulation on macrophage activity and capacity and immunomodulatory effect of Channa striata also determined though the charging of leukosit, lymfosit, and neutrofil count.
Methods: This study was experimentally research used randomized control group design. Snake head fish eksudat take with oven temperature on 100° C. Fiveteen Balb/c mice were divided into 5 equal group.The case group (Group I) received 3,9 mg/day, (Group II) received 2,6 mg/day, (Group III) received 1,3 mg/day. The positive control group received stimuno 0,026 ml/day. The negative control received corn oil 0,5 ml. On day 8, Staphylococcus aureus(SA) were injected intraperitoneally.The macrophages activitiesa and capacities were counted on slide smears of mice peritoneal fluid.The leukosit, lymfosit, neutrofil quantity from blood of mice.
Result: Macrophages activities or capacities were found. Channa striata eksudat 3,9 mg/days have higher result than group others and have different significant with statistic analytical. The lowest activity encounter on the negative control and positive control group. It’s not modulation of count leukosit, lymfosit, neutrofil.
Conclusion: Snake head fish eksudat can modulation capasity and activity of macropaghes of peritoneal mice. Snake head fish eksudat can’t modulation modulation leukosit, lymfosit, neutrofil count. Channa striata eksudat have potency of immunomodulatory.
Keywords: Channa striata eksudat , immunomodulator, capasity and activity of fagositosis, Staphylococcus aureus
PERSEMBAHAN
Dengan menyebut asma Allah SWT, Yang Maha Pengasih Lagi Maha Penyayang “ Saya bersyukur kepada Allah SWT atas rahmat dan KaruniaNya, sehingga penyusunan skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik”
Karya ini saya persembahkan kepada:
Bapak dan Ibu tercinta yang ikut berjuang bersamaku dengan menghangatkan impianku dengan selimut doa dan motivasi.
Sahabat terbaikku mas Lukman Hakim yang selalu mendukung, mencontohkan dan mendampingi perjuanganku dari aku mulai duduk di bangku perkuliahan Farmasi sampai aku bisa mendapat gelar S.Farm ini.
Sahabat-sahabat seperjuanganku teh Nurul, ita, firly, anjar, saly,yuvika, unggun, Rifky, agung, ipeh dengan tali persahabatan ini aku bisa sangat semangat menyelesaikan program studyku di S-1 Farmasi ini.
Kakakku Mbak dewi, mas tomi dan ponakanku dhek salwa .Tali persaudaraan yang menjagaku dari gelapnya jaman.
Keluarga yang di Purwokerto, Eyang kakung Alm. Suhaemi, Eyang putri, Tante Erni, Ohm Parjo, Bulek Has, dan adek- adeku di purwokerto yang selalu mendoakanku dan menemaniku di tanah perantauan menjadi sangat nyaman.
Keluarga besar IMM Komisariat Farmasi yang sangat setia mengiri perjuanganku di study ini, semangat yang sangat membara kuperjuangkan untukmu yang selalu mendidikku untuk selalu Fastabiqul Khairat.
Keluarga desa mitra CSPHM, Pekuncen dusun sindang khususnya keluarga Pak Darim, bu darim, dhek Cenna yang sangat lucu, mas Aris, mas Lukman yang selalu mengajariku untuk bersosialisasi dengan masyarakat dan bisa megamalkan ilmu untuk lingkungan sekitar.
MOTTO
Semangat Hidupku
Hidupku adalah perjuangan dengan harus bangkit melawan kebodohan dengan terus membaca dalam ikut serta membangun Bangsa tercinta, Hidupku selalu untuk beramal, dengan kesederhanaan hidup dan meluaskan pemikiran,
Sisa umurku harus benar-benar bermanfaat untuk orang banyak Hidupku untuk terus bersilaturahmi dan lillahita’ala
( mega, 2014)
Terus bersemangat dan tersenyum…karena ini kekuatanku
kepada umat manusia agar bersungguh-sungguh dalam melaksanakan suatu pekerjaan walaupun baru saja menyelesaikan pekerjaan yang lain, dengan menjadikan harapan senantiasa hanya tertuju kepada Allah Swt. Maka apabila kamu telah selesai (dari suatu urusan), kerjakanlah dengan sungguh-sungguh (urusan) yang lain (QS 94: 7).
Harus terus berbuat baik, dan selalu melihat ke bawah untuk selalu bersyukur dan melihat ke atas agar terus bersemangat dalam kesuksesan. Diatas langit masih ada langit. Hidup hanya sebentar saja, maka waktu adalah rejeki yang sangat luar biasa dari Allah untuk terus memperbaiki diri ( mega, 2014).
KATA PENGANTAR
Alhamdulillah, segala puji bagi Allah ,Pencipta seluruh Alam, dan salawat serta salam saya haturkan kepada junjungan kita semua Nabi Muhammad Saw.Sang Revolusioner sejati , membawa kita dari jaman yang tak tahu apa-apa ke jaman yang tahu segalanya. Atas segala pertolonganMu dan RidhloMu , sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian skripsi dengan judul” EFEK IMUNOMODULATOR EKSUDAT IKAN GABUS (Channa striata) TERHADAP AKTIVITAS, KAPASITAS MAKROFAG DAN JUMLAH SEL LEUKOSIT, LIMFOSIT, NEUTROFIL PADA MENCIT JANTAN GALUR BALB/c”. Penelitian ini digunakan sebagai salah satu syarat dalam mencapai derajat sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Penyelesaian skripsi ini tidak terlepas dari bantuan semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, untuk itu dengan kerendahan hati penulis menyampaikan rasa hormat dan terima kasih banyak kepada:
1. Dr. Nunuk Aries Nurulita M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto dan menjadi Pembimbing I, yang telah memberi kesempatan, menjadi motivator, inspirasi serta meluangkan waktu untuk bimbingan dan saran dalam menyelesaikan skripsi ini.
2. Bapak Suparman, M.Sc., Apt selaku Dosen Pembimbing II, pembimbing akademik yang telah memberi kesempatan, memotivasi meluangkan waktu untuk bimbingan dan saran dalam menyelesaikan skripsi ini.
3. Bapak dan Ibu Dosen Fakultas Farmasi yang telah mengamalkan ilmu, teladan bagi penulis selama menuntut ilmu di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
4. Bapak Rochmadi, bu sari, bu woro, bapak Heri selaku laboran di laboratorium Fakultas Farmasi yang membantu sampai selesainya skripsi ini. 5. Bapak ibu yang memberikan semangat, doa, pelajaran ikhtiar yang sangat
memotivasi dalam meraih cita-cita
6. Sahabat- sahabatku: Lukman Hakim, Nurul Maulaniah, Ita Suryani, Anjar Cahyuni, Firly N.,Ergina C., Saly Sagita, Rifky F., Unggun P, Zeanita A.,Yuvika N., Terima kasih atas semangat dan diskusi yang mendukung penyelesaian skripsi ini, silaturahmi yang dijaga ini terasa indah mewarnai dalam perjuangan cita-cita kita bersama.
7. Seluruh Warga Kost Hamdalah: Isti Etin, Rina T, Upin, Evi, Nurul, Fery, Liling, Febi,Vina,Uli.yang selama ini menghiasi hari hari dikala istirahat sejenak di kos.
Semoga Allah SWT memberikan balasan limpahan yang lebih baik atas semua yang di berikan kepada penulis. Semoga karya tulis dapat bermanfaat bagi pembaca.
Purwokerto, 18 Maret 2014
RIWAYAT HIDUP
Nama : Mega Kartikasari
Tempat, tanggal lahir : Ponorogo, 09 Agustus 1991 Riwayat Pendidikan : SDN I Pakunden , Ponorogo
SMP N 2 Ponorogo SMA N 1 Ponorogo
Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Email : meijikartika@yahoo.co.id
Organisasi : DEMA Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto 2012 (Anggota)
IMM Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto 2012-2013 (Sekertaris Umum)
IMM Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto 2013- 2014(Ketua Umum)
IMM Cabang Banyumas Ketua Bidang IMMawati (2014-2015)
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
HALAMAN PERSETUJUAN ... ii
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
SURAT PERNYATAAN ... iv INTISARI ... v ABSTRACT ... vi PERSEMBAHAN ... vii MOTTO ... viii KATA PENGANTAR ... ix RIWAYAT HIDUP ... xi
DAFTAR ISI ... xii
DAFTAR TABEL ... xiv
DAFTAR GAMBAR ... xv
DAFTAR LAMPIRAN ... xvi
BAB I PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang ... 1
B. Perumusan Masalah ... 2
C. Tujuan Penelitian ... 3
D. Manfaat Penelitian ... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 4
A. Ikan Gabus ... 4 B. Sistem Imun ... 7 C. Imunomodulator ... 9 D. Makrofag ... 10 E. Fagositosis ... 12 F. Staphylococcus aureus ... 12 G. Stimuno... 13
BAB III METODE PENELITIAN ... 14
A. Jenis dan Rancangan Penelitian... 14
C. Waktu dan Tempat Penelitian ... 14
D. Alat dan Bahan ... 14
1. Alat ... 14
2. Bahan ... 15
E. Cara Penelitian... 16
1. Pengeluaran Eksudat Ikan Gabus ... 16
2. Bakteri Uji ... 16
3. Penentuan Dosis Eksudat Ikan Gabus ... 16
4. Pemberian Bahan Uji Per Oral ... 17
5. Uji Fagositosis ... 17
a. Isolasi Makrofag ... 17
b. Fagositosis Makrofag dengan Latex Beads ... 18
6. Uji Pengaruh pemberian eksudat ikan gabus Terhadap jumlah Leukosit, neutofil dan Limfosit ... 19
7. Analisis Data ... 19
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 20
A. Pengumpulan Ikan Gabus ... 20
B. Pembuatan Eksudat Ikan Gabus ... 20
C. Penyiapan Bakteri Staphylococus aureus ... 20
D. Pemberian Bahan Uji Per Oral ... 21
E. Penyiapan medium RPMI untuk kultur sel makrofag ... 22
F. Uji Imunomodulator Menggunakan Metode Fagositosis Makrofag ... 23
G. Jumlah leukosit, limfosit dan neutrofil ... 29
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ... 34
A. Kesimpulan ... 34
B. Saran ... 34
DAFTAR PUSTAKA ... 35 LAMPIRAN
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Komponen Asam lemak dalam ekstrak ikan gabus (Channa striata) (Manan, 2012) ... 6 Tabel 2. Komponen Asam Amino dari ikan gabus (Channa striata)
(Mustafa, 2012) ... 6 Tabel 3. Kandungan Zn dari Ikan gabus dan makanan lain (mg/100g)
(Mustafa, 2012) ... 6 Tabel 4. Kapasitas Dan Persentase Aktivitas Makrofag ... 26 Tabel 5. Jumlah leukosit, Limfosit dan neutrofil ... 29
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Ikan Gabus (Channa striata) ... 4 Gambar 2. Sel makrofag yang dikultur dengan pengamatan mikroskop
(perbesaran 400X) ... 23 Gambar 3. Sel makrofag kelompok perlakuan, kelompok control, Sel
makrofag kelompok kontrol negative dengan pengamatan mikroskop (perbesaran 400X) ... 25
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Tabel jumlah leukosit, neutrofil dan limfosit ... 39 Lampiran 2 Tabel Perhitungan makrofag dengan Haemocytomter ... 40 Lampiran 3 Tabel. Kapasitas dan Aktivitas fagositosis ... 41 Lampiran 4 Perhitungan bakteri Staphylococcus aureus untuk menginfeksi
hewan uji mencit ... 42 Lampiran 5 Data Hasil Statistik ... 43