STANDARD OPERATING PROCESS (SOP) MENGEMBANGKAN BIBIT NATA DE COCO
BAGAIMANA MENGEMBANGKAN BIBIT
Pengertian ! Kul t ur murni F1 yang t el ah dibuat dal am sat u bot ol ukuran 630 ml ( bot ol sirup ABC) dapat dikembangkan menj adi 10 bot ol . Sepul uh bot ol t ersebut dikembangkan menj adi 100 bot ol dan set er usnya . Li hat di agr am ber i kut :
=1 10 bot ol = 2 100 bot ol = 3 1000 bot ol a. Penyiapan Formula
No. Bahan Jumlah
1. Air Kel apa 20 l it er
2. Za 67 gr
3. Gula 167 gr
4. Asam Aset at Pekat 83 ml
Cat at an :
? For mul a 20 l it er air kel apa membut uhkan bibit F1 : 3 – 4 bot ol .
? 20 l it er ramuan di at as dimasukkan dal am 34 bot ol masing- masing vol umenya 540 ml.
? Tiap bot ol (540 ml ) membut uhkan 60 ml bibit F1unt uk inokul asi .
? Tiap bot ol (600 ml ) bibit dipergunakan unt uk menginokul asi 5 l oyang dal am pembuat an nat a l empeng (t iap l oyang membut uhkan bibit sebanyak 120 ml ).
F 1
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
b. Kebut uhan Alat dan Bahan Pembant u
No. Jenis Alat Spesif ikasi Jumlah Ket erangan
1. Timbangan Kap. 1000 gr 1 Timbangan unt uk m enimbang bahan
di bawah 1000 gr
2. Kompor Gas/ minyak t anah
1 Alat unt uk memanaskan campuran bahan dengan bahan bakar minyak/ gas
3. Corong Plast ik 2 Alat unt uk memasukkan air kelapa
dan minyak t anah
4. Kain saring Ukuran 50 x 50 cm 1 Alat unt uk memisahkan f il t rat
hancuran nenas
5. Panci St ainless kap. 30 lit er 1 Wadah unt uk mendidihkan/ merebus
bahan
6. Pisau St ainless st eel 1 Alat unt uk memot ong
7. Kert as koran Ukuran 7 x 7 cm 34 Digunakan menut up bot ol pada saat
inkubasi
8. Bot ol Bot ol j enis sirup ABC 34 Wadah media pada saat inkubasi
9. Gelas ukur plast ik Kap. 1 lit er 1 Alat ukur volume
10. Sikat bot ol Plast ik 1 Alat unt uik membersihkan bot ol
11. Karet gelang Warna merah / coklat 34 Al at unt uk mengikat koran pada bot ol
12. Pengaduk Kayu 1 Alat unt uk mengaduk air kelapa pada
saat penggodogan
c. Penyiapan Bot ol
? Bot ol yang digunakan adal ah bot ol sirup 630 ml , diusahakan t idak cacat (bibir bot ol t idak pecah, ret ak, dan l ain-l ain), t idak t erdapat kot oran dan mi nyak di dal amnya, bot ol bening (t ransparan) dan bot ol warna gel ap (cokl at , hij au) t idak dianj urkan karena menyul it kan unt uk mengident if ikasi bibit yang baik.
? Bot ol yang sudah dipil ih, dir endam dan dicuci menggunakan sabun col ek dan air .
Cara pencuciannya, basahi t erl ebih dahul u dengan air dan cuci dengan sabun. Unt uk menghil angkan kot oran di dal am bot ol , gunakan si kat bot ol , kemudi an di kocok-kocok sampai bersih. Unt uk kot oran yang ada di l uar, digosok menggunakan sabut penggosok at au spon busa sampai t i dak t erdapat l agi kot oran yang menempel .
? Bil as dengan air bersih sampai t idak ada kot oran dan busa sabun. Bot ol yang t el ah dicuci dit empat kan di at as l oyang/ bak dengan posisi t erbal ik, bert uj uan unt uk mempercepat hil angnya air sisa dari pencucian . kemudi an di j emur .
? Bot ol kemudian dij emur di bawah sinar mat ahari sampai bet ul -bet ul kering dan t idak t erdapat t et esan air.
? Set el ah kering, dapat digunakan menj adi t empat bibit . Bil a bot ol yang sudah bersih t ersebut j uml ahnya banyak dan t idak semuanya di gunakan, bot ol dapat di si mpan dal am keadaan t erbal ik at au dapat j uga disimpan di t empat bersih dengan menut up bibir bot ol dengan kert as koran dan diikat dengan karet . Cara ini dimaksudkan unt uk menghindari kont aminasi debu yang dapat menghambat pert umbuhan mikroba yang diharapkan. ? Mencuci bot ol bekas bibit t erl ebih dahul u harus membuang l empengan nat a yang
t erdapat di dal am bot ol . Caranya gunakan kawat yang uj ungnya dibel okan. Kai t kan dan t arik sedikit -sedikit l empeng nat a sampai t erbuang semuan ya. Sel anj ut nya bot ol dibersihkan sepert i cara di at as.
d. Proses Pembuat an Bibit
? Air kel apa disaring dengan kain saring at au saringan pl ast ik agar bersih dari kot oran ampas kel apa, pot ongan daging kel apa, bat ok, sabut , kerikil dan l ain-l ain
? Ukur air kel apa sebanyak 20 l it er, t empat kan dal am panci (email / st ainl ess st eel ) dan panaskan sampai mendidih. Sel ama per ebusan t ut up panci dibuka. Buangl ah busa yang t erbent uk sel ama pemanasan dengan saringan pl ast ik. Tempat kan busa dan kot oran yang mengapung pada wadah t ersendiri.
? Siapkan bahan-bahan peramu (zat kimia) unt uk bibit sambil menunggu air kel apa mendidih. Takaran bahan kimia sesuai dengan f ormul a t abel di at as. Hat i-hat i menuangkan asam cuka gl asial . Jangan t umpah dan t erpercik di mat a.
? Set el ah air kel apa mendidih, masukkan bahan-bahan peramu (Za dan gul a ) kemudian diaduk sampai l arut . Asam cuka dimasukkan pal ing akhir. (hat i-hat i ! t imbul bau menyengat !). Mat ikan api dan angkat panci t ersebut .
? Isil ah (dengan bant uan corong dan gel as ukur pl ast ik ) 34 bot ol t ersebut dengan 540 ml ramuan bibit . Hindarkan menghirup uap panas berbau asam menyengat t erus menerus.
? Tut up segera dengan l embaran kert as koran di permukaan bot ol . Kor an sebel um di gunakan har us di j emur dan dipanaskan sebent ar diat as bara api Perl akuan ini bert uj uan unt uk mengurangi kont aminasi yang dapat menghambat pert umbuhan
Acet obact er xyl i num.
? Simpan sel ama 7 j am sampai suhu ruangan. Buka t ut up koran dan masukkan sebanyak 60 ml cairan dari bot ol bibit biakan murni yang t el ah disedi akan. Gunakan corong dan t akaran unt uk membagi. Ingat ! sat u bot ol bibit biakan 600ml unt uk 10 bot ol. Lakukan dengan cepat dan asept is unt uk menghindari kont aminasi. Jangan ada cairan yang t ercecer at au t umpah.
? Tut up bot ol dengan pot ongan koran ukuran 7x7 cm dan ikat dengan karet . Bot ol yang t el ah diinokul asi dengan biakan murni disimpan (i nkubasi) sel ama 6 har i (di ruang yang t idak t erkena l angsung sinar mat ahari dengan suhu ruang 28O -32OC). Ingat ! pot ongan koran j uga harus dipanaskan. Masukkan dalam oven suhu 1 0 0OC selama 10 menit .
? Set el ah diinkubasi sel ama 6 hari, bibit t ersebut dapat digunakan unt uk inokul asi media pembuat an nat a l empeng. Lakukan sort asi sebel um digunakan unt uk bibit nat a l empeng. Sat u bot ol (600 ml ) di gunakan unt uk l i ma l oyang (5 l it er). Rat a-rat a t iap l oyang diberikan bibit sebanyak 120 ml .
? Kr it er ia bibit yang baik yait u t er bent uknya l apisan nat a pada per mukaan cair an, t idak t erdapat j amur dan t idak t erdapat ruang kosong ant ara l apisan nat a dengan cairan. Bibit t ersebut dapat dikembangkan kembal i sampai 8 kal i. Berdasarkan pengal aman, bibit dapat bert ahan sampai 5 bul an. Gunakan biakan baru apabil a hasil nat a l empeng t ipis.
Ingat !! Jangan menggunakan bibit yang t ercemar j amur, wal aupun masih dal am bent uk kol oni dan l api san nat a di per mukaan t i dak ser agam dengan yang l ai n ( l ebi h t i pi s ), penampakan cairan bibit j ernih dan t erdapat ruang kosong ant ara l apisan nat a dan cairan.
