Lampiran 2. Gambartumbuhan dan daun titanus (Leea aequata L.)
Tumbuhan titanus
P1 = 27,3 P2 = 26,2 P3 = 23,1 P4 = 21,2 L = 8,2 L = 8,0 L = 7,9 L = 6,9
Lampiran 3.Gambar simplisia dan serbuk simplisia daun titanus
P1 = 21,9P2 = 21,2 P3 = 16,3 P4 = 16,0
L = 4,3 L = 5,0 L = 4,0 L = 3,0
Simplisia daun titanus
Lampiran 4.Gambarmikroskopik serbuk daun titanus (Leea aequata L.)
1
2
3
4
Keterangan :
1. Rambut kelenjar 2. Rambut penutup
Lampiran 5. Perhitungan kadar air dan hasil statistik standar deviasi simplisia daun titanus
5.1 Kadar air simplisia = Volume akhir − Volume awal
Beratsampel x 100%
No Berat sampel (g) Volume awal (ml)
Volume akhir (ml)
1. 5,0063 0,95 1,2
2. 5,0100 1,2 1,45
3. 5,150 1,45 1,7
a. Kadar air = 0,25 mL
5,006 3 gx 100 mL
=
4,99%b. Kadar air = 0,25 mL
5,0105 g x 100 mL
=
4,98%c. Kadar air = 0,25 mL
5,0150 g x 100 mL
=
4,98%d. % Rata-rata kadar air = 4,99% + 4,98% + 4,98%
Lampiran 6.Perhitungan % rendemen ekstrak dan fraksi
% Rendemen ekstrak etanol = ekstrak etanol
simplisia awalx 100 ml
= 69 g
500 gx 100 ml
=
13,8% % Rendemen fraksi n-heksana = fraksi −heksana
simplisia awal x 100 ml
= 2,1 g
500 gx 100 ml
=
0,42% % Rendemen fraksi etilasetat = fraksi etilasetat
simplisia awal x 100 ml
= 2,5 g
500 gx 100 ml
=
0,5% % Rendemen fraksi air = fraksi air
simplisia awalx 100 ml
= 2,7 g
500 gx 100 ml
44 Karakterisasi simplisia:
1. Pemeriksaan Makroskopik 2. Pemeriksaan Mikroskopik 3. Penetapan Kadar Air
Skrining Fitokimia: 1. Alkaloid
2. Flavonoid 3. Glikosida
4. Glikosida antrakinon 5. Tanin
6. Saponin Lampiran 7. Bagan kerja penelitian
7.1 Bagan pengolahan daun titanus (Leea aequata L.) dan ekstraksi serbuk simplisisa secara maserasi dan ekstraksi cair-cair (ECC).
Dicuci dari pengotor hingga bersih, ditiriskan
Ditimbang berat basah
Dirajang dan dikeringkan dalam lemari pengering
Sortasi kering
Ditimbang berat kering
Dihaluskan Daun titanus segar
Simplisia
Serbuk simplisia
Ekstraksi
Lampiran 7 (lanjutan)
7.2 Bagan pembuatan ekstrak etanol
Dimasukkan kedalam wadah kaca Ditambahkan 75 bagian etanol 96% Ditutup
Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk
Diperas
Dicuci dengan etanol 96%, disaring hingga diperoleh 100 bagian
Dipindahkan kedalam bejana tertutup
Dibiarkan ditempat sejuk dan terlindung cahaya selama 2 hari
Dienap tuangkan atau disaring
Dipekatkan dengan evaporator berputar pada suhu tidak lebih dari 400 C
Di keringkan 500 g serbuk simplisia
Maserat Ampas
Maserat
Lampiran 7 (lanjutan)
Dilarutkan dengan 10ml etanol Dimasukkan dalam corong pisah
Ditambahkan 50 ml air dan 50 ml n-heksana Digojok
Didiamkan hingga memisah sempurna Ditampung bagian atasnya
Dilakukan sampai tidak berwarna
Dimasukkan dalam corong pisah
Ditambahkan 50 ml etilasetat Diuapkan Digojok
Didiamkan
Ditampung bagian atasnya Dilakukan sampai tidak berwarna
Diuapkan Diuapkan
Pemeriksaan senyawa Ekstraksi cair-cair
10 g ekstrak kental etanol
Lapisan etanol-air
Lapisan n-heksana
Fraksi n-heksana
Lapisan air Lapisan etilasetat
Lampiran 7 (lanjutan)
7.4 Bagan penyiapan air laut buatan
Dilarutkan terlebih dahulu dalam beaker glass
Dimasukkan dalam labu tentukur 1000 ml Ditambahkan air suling sampai 1000 ml 38 g gram non-yodium
Lampiran 7 (lanjutan)
7.5 Bagan pengujian toksisitas
Dilarutkan dengan Na-CMC 0,5% 0,1 ml
Ditambah dengan air laut buatan 5 mL
Dipipet 0,5 ml
Dicukupkan sampai 5 ml (diulang 5 kali)
Dipipet 0,5 ml
Dicukupkan sampai 5 ml
Dipipet 0,5ml
Dicukupkan sampai 5 ml
Dimasukkan 10 ekor Artemia salina Leach
Ditambahkan air laut buatan sampai 5 ml
50 mg ekstrak/fraksi
Larutan konsentrasi 10.000 µg/ml
Larutan konsentrasi 1000 µg/ml
Larutan konsentrasi 100 µg/ml
Larutan konsentrasi 10 µg/ml Larutan konsentrasi
1000 µg/ml
Larutan konsentrasi 1000 µg/ml
Larutan konsentrasi 100 µg/ml
Larutan konsentrasi 100 µg/ml
Larutan konsentrasi 10 µg/ml
Larutan konsentrasi 10
Dibiarkan dibawah sinar lampu pijar 5 watt selama 24 jam
Dihitung jumlah Artemia salina Leach yang mati
Lampiran 8. Hasil dan perhitungan persamaan regresi linier daun titanus
Tabel hasil pengujian BSLT ekstrak etanol No Konsentr
asi (µg/ml)
Jumlahnauplii
yang mati % Kematian
P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5
1. 10 3 4 3 3 4 30 40 30 30 40
2. 100 10 8 9 8 7 100 80 90 80 70
3.
1000 10 10 10 10 9 100 10
0 100 100 90 Rata-rata 7,6
7 7,3 3 7,3 3 7,0 0 6,6 7 76,6 7 73, 33 73,3 3 70,0 0 66,6 7
Kontrol 0 0
Rumus % kematian:
% kematian = � −
� x 100 %
Tes = Jumlah kematian nauplii larutan uji Kontrol = Jumlah kematian nauplii larutan kontrol Total = Jumlah nauplii yang digunakan
% kematian (10 µ g/ml) P1 =3−0
10 x 100 % = 30 %
P2 =4−0
10 x 100% = 40 %
P3 =3−0
10 x 100 % = 30 %
P4 =3−0
10 x 100 % = 30 %
P5 =4−0
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
30+ 40+30+30+40
5 = 34%
% kematian (100 µ g/ml) P1 =10−0
10 x 100 % = 100 %
Lampiran 8 (lanjutan)
P2 =8−0
10 x 100% = 80 %
P3 =9−0
10 x 100 % = 90 %
P4 =8−0
10 x 100 % = 80 %
P5 =7−0
10 x 100 % = 70 %
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
100+ 80+90+80+70
5 = 84%
% kematian (1000µ g/ml) P1 =10−0
10 x 100 % = 100 %
P2 =10−0
10 x 100% = 100 %
P3 =10−0
10 x 100 % = 100 %
P4 =10−0
10 x 100 % = 100 %
P5 =9−0
10 x 100 % = 90 %
100+ 100+100+100+90
5 = 98%
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan pertama X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 30 30 1
2 100 200 4
3 100 300 9
∑X = 6 ∑Y = 230 ∑XY =
530 ∑ X2= 14 X = 2 Y = 76,66
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 530−6.230 /3 14− 6 ²/3
= 530−460
14−12 = 35 b = y – ax
= 76,66 – 35 (2) = 6,66
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 35x + 6,66
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
LC50 = 17,3061µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan kedua X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 40 40 1
2 80 160 4
3 100 300 9
∑X = 6 ∑Y = 220 ∑XY = 500 ∑
X2= 14 X = 2 Y = 73,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 500−6.220 /3 14− 6 ²/3
= 500−440
14−12 = 30 b = y – ax
= 73,33– 30 (2) = 13,33
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 30x + 13,33
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
LC50 = anti log 1,2223 LC50 = 16,6839µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan ketiga X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 30 30 1
2 90 180 4
3 100 300 9
∑X = 6 ∑Y = 220 ∑XY = 510 ∑ X2
= 14 X = 2 Y = 73,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 510−6.220 /3 14− 6 ²/3
= 510−440
14−12 = 30 b = y – ax
= 73,33– 35 (2) = 3,33
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 35x + 3,33
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
LC50 = anti log 1,3334 LC50 = 21,5476µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan keempat X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 30 30 1
2 80 160 4
3 100 300 9
∑X = 6 ∑Y = 210 ∑XY = 490 ∑ X2
= 14
X = 2 Y = 70
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 490−6.210 /3 14− 6 ²/3
= 490−420
14−12 = 35 b = y – ax
= 70– 35 (2) = 0
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 35x + 0
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
LC50 = anti log 1,4285 LC50 = 26,8225µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan kelima X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 40 40 1
2 70 140 4
3 90 270 9
∑X = 6 ∑Y = 200
∑XY = 450 ∑ X2= 14
X = 2 Y = 66,66
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 450−6.210 /3 14− 6 ²/3
= 450−400
14−12 = 25 b = y – ax
= 66,66 – 25 (2) = 16,66
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 25x + 16,66
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
LC50 = anti log 1,3336 LC50 = 21,5575µg/ml
Rata-rata LC50 : P1+ P2+P3+P4+P5 5
: 17,3061 + 16,6839 + 21,5476 + 46,4087 + 21,5575
5 = 24,7007 µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel hasil pengujian BSLT fraksi n-heksana
No
Konsentr asi (µg/ml)
Jumlahnauplii
yang mati % Kematian nauplii P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5
1. 10 4 3 3 3 2 40 30 30 30 20
2. 100 8 8 7 7 8 80 80 70 70 80
3. 1000 10 10 9 10 9 100 100 90 100 90 Rata-rata 7,3
3 7,0 0 6,3 3 6,6 6 6,3 3 73,3 3 70,0 0 63,3 3 66,6 6 63, 33
Kontrol 0 0
Rumus % kematian:
% kematian : � −
� x 100 %
Tes = Jumlah kematian nauplii larutan uji Kontrol = Jumlah kematian nauplii larutan kontrol Total = Jumlah nauplii yang digunakan
% kematian (10 µ g/ml) P1 =4−0
10 x 100 % = 40 %
P2 =3−0
10 x 100% = 30 %
P3 =3−0
10 x 100 % = 30 %
P4 =3−0
10 x 100 % = 30 %
P5 =2−0
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
40+30+30+30+20
5 = 30%
% kematian (100 µ g/ml) P1 =8−0
10 x 100 % = 80 %
P2 =8−0
10 x 100% = 80 %
Lampiran 8 (lanjutan)
P3 =7−0
10 x 100 % = 70 %
P4 =7−0
10 x 100 % = 70 %
P5 =2−0
10 x 100 % = 20 %
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
80+ 80+70+70+20
5 = 76%
% kematian (1000µ g/ml) P1 =10−0
10 x 100 % = 100 %
P2 =10−0
10 x 100% = 100 %
P3 =9−0
10 x 100 % = 90 %
P4 =10−0
10 x 100 % = 100 %
P5 =9−0
10 x 100 % = 90 %
100+ 100+90+100+90
5 = 96%
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan pertama X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 40 40 1
2 80 160 4
3 100 300 9
∑X = 6 ∑Y = 220 ∑XY = 500 ∑ X2
= 14 X = 2 Y = 73,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 500−6.220 /3 14− 6 ²/3
= 500−440
14−12 = 30 b = y – ax
= 73,33– 30 (2) = 13,33
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 30x + 13,33
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,2223 LC50 = 16,6839µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan kedua X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 30 30 1
2 80 160 4
3 100 300 9
∑X = 6 ∑Y = 210 ∑XY = 490 ∑ X2
= 14
X = 2 Y = 70
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 490−6.210 /3 14− 6 ²/3
= 490−420
14−12 = 35 b = y – ax
= 70– 35 (2) = 0
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 35x + 0
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
LC50 = anti log 1,4285 LC50 = 26,8225µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan ketiga X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 30 30 1
2 70 140 4
3 90 270 9
∑X = 6 ∑Y = 190 ∑XY = 440 ∑
X2= 14 X = 2 Y = 63,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 440−6.210 /3 14− 6 ²/3
= 440−380
14−12 = 30 b = y – ax
= 63,33 – 30 (2) = 3,33
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 30x + 3,33
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,5556 LC50 = 35,9418µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan keempat X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 30 30 1
2 70 140 4
3 100 300 9
∑X = 6 ∑Y = 200 ∑XY = 470 ∑
X2= 14 X = 2 Y = 66,66
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 470−6.200 /3 14− 6 ²/3
= 470−400
14−12 = 35 b = y – ax
= 66,66 – 35 (2) = - 3,34
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 35x – 3,34
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
x = 1,524 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,524 LC50 = 33,4195µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan kelima X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 20 20 1
2 80 160 4
3 90 270 9
∑X = 6 ∑Y = 190
∑XY = 450 ∑ X2= 14 X = 2 Y = 63,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 450−6.190 /3 14− 6 ²/3
= 450−380
14−12 = 35 b = y – ax
= 63,33 – 35 (2) = - 6,67
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 35x – 6,67
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
x = 1,6191 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,6191 LC50 = 41,6006µg/ml
Rata-rata LC50 : P1+ P2+P3+P4+P5 5
: 16,6839 +26,8225 + 35,9418 + 33,4195 + 41,6006
5 = 30,8936 µg/ml
Lampiran 8 (lanjutan)
Tabel hasil pengujian BSLT fraksi etilasetat
No
Konsentr asi (µg/ml)
Jumlahnauplii
yang mati % Kematian nauplii P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5
1. 10 2 3 3 2 2 20 30 30 20 20
2. 100 8 7 7 8 7 80 70 70 80 70
3. 1000 9 9 8 7 8 90 90 80 70 80
Rata-Rata 6,3
3 6,33 6,0 0 5,6 6 5,6 6 63,3 3 63,3 3 60, 00 56, 66 56, 66
Kontrol 0 0
Rumus % kematian:
% kematian : � −
� x 100 %
Tes = Jumlah kematian nauplii larutan uji Kontrol = Jumlah kematian nauplii larutan kontrol Total = Jumlah nauplii yang digunakan
% kematian (10 µ g/ml) P1 =2−0
10 x 100 % = 20 %
P2 =3−0
10 x 100% = 30 %
P3 =3−0
10 x 100 % = 30 %
P4 =2−0
P5 =2−0
10 x 100 % = 20 %
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
20+30+30+20+20
5 = 24%
% kematian (100 µ g/ml) P1 =8−0
10 x 100 % = 80 %
P2 =7−0
10 x 100% = 70 %
Lampiran 8 (lanjutan)
P3 =7−0
10 x 100 % = 70 %
P4 =8−0
10 x 100 % = 80 %
P5 =7−0
10 x 100 % = 70 %
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
80+ 70+70+80+70
5 = 74%
% kematian (1000µ g/ml) P1 =9−0
10 x 100 % = 90 %
P2 =9−0
10 x 100% = 90 %
P3 =8−0
10 x 100 % = 80 %
P4 =7−0
10 x 100 % = 70 %
P5 =8−0
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
90+ 90+80+70+80
5 = 82%
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan pertama X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 20 20 1
2 80 160 4
3 90 270 9
∑X = 6 ∑Y = 190 ∑XY = 450 ∑
X2= 14 X = 2 Y = 63,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 450−6.190 /3 14− 6 ²/3
= 450−380
14−12 = 35 b = y – ax
= 63,33 – 35 (2) = - 6,67
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 35x – 6,67
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
35x = 50 – 6,67 x = 1,6191 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,6191 LC50 = 41,6006µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan kedua X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 30 30 1
2 70 140 4
3 90 270 9
∑X = 6 ∑Y = 190
∑XY = 450 ∑ X2= 14 X = 2 Y = 63,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 450−6.190 /3 14− 6 ²/3
= 450−380
14−12 = 35 b = y – ax
= 63,33 – 35 (2) = - 6,67
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 35x – 6,67
50 = 35x – 6,67 35x = 50 – 6,67 x = 1,6191 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,6191 LC50 = 41,6006µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan ketiga X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 30 30 1
2 70 140 4
3 80 240 9
∑X = 6 ∑Y = 180 ∑XY = 410 ∑ X2
= 14
X = 2 Y = 60
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 410−6.180 /3 14− 6 ²/3
= 410−360
14−12 = 25 b = y – ax
= 60 – 25 (2) = 10
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 25x + 10
y = ax + b 50 = 25x + 10 25x = 50 – 10 x = 1,6 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,6 LC50 = 39,8107µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan keempat X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 20 20 1
2 80 160 4
3 70 210 9
∑X = 6 ∑Y = 170 ∑XY = 390 ∑ X2
= 14 X = 2 Y = 56,66
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 390−6.170 /3 14− 6 ²/3
= 390−340
14−12 = 25 b = y – ax
= 56,66 – 25 (2) = 6,66
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
50 = 25x + 6,66 25x = 50 – 6,66 x = 1,7336 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,7336 LC50 = 54,1501µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan kelima X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 20 20 1
2 70 120 4
3 80 240 9
∑X = 6 ∑Y = 170 ∑XY = 400 ∑
X2= 14 X = 2 Y = 56,66
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 400−6.170 /3 14− 6 ²/3
= 400−340
14−12 = 30 b = y – ax
= 56,66 – 30 (2) = - 3,34
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
50 = 30x – 3,34 30x = 50 + 3,34 x = 1,7786 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,7786 LC50 = 59,9979 µg/ml
Rata-rata LC50 : P1+ P2+P3+P4+P5 5
: 41,6006 + 41,6006 + 39,8107 + 54,1501 + 59,9979
5 = 47,4319 µg/ml
[image:33.595.112.516.458.572.2]Lampiran 8 (lanjutan)
Tabel hasil pengujian BSLT fraksi air
No
Konsentrasi (µg/ml)
Jumlahnauplii
yang mati % Kematian nauplii P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5
1. 10 2 2 2 1 3 20 20 20 10 30
2. 100 5 6 6 7 7 50 60 60 70 70
3. 1000 9 8 7 7 8 90 80 70 70 80
Rata-Rata 5,33 5,33 5 5 6 53,33 53,33 50 50 60
Kontrol 0 0
Rumus % kematian:
% kematian : � −
� x 100 %
Tes = Jumlah kematian nauplii larutan uji Kontrol = Jumlah kematian nauplii larutan kontrol Total = Jumlah nauplii yang digunakan
% kematian (10 µ g/ml) P1 =2−0
10 x 100 % = 20 %
P2 =2−0
P3 =2−0
10 x 100 % = 20 %
P4 =1−0
10 x 100 % = 10 %
P5 =3−0
10 x 100 % = 30 %
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
20+20+20+10+30
5 = 20%
% kematian (100 µ g/ml) P1 =5−0
10 x 100 % = 50 %
P2 =6−0
10 x 100% = 60 %
Lampiran 8 (lanjutan)
P3 =6−0
10 x 100 % = 60 %
P4 =7−0
10 x 100 % = 70 %
P5 =7−0
10 x 100 % = 70 %
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
50+60+60+70+70
5 = 62%
% kematian (1000µ g/ml) P1 =9−0
10 x 100 % = 90 %
P2 =8−0
10 x 100% = 80 %
P3 =7−0
P4 =7−0
10 x 100 % = 70 %
P5 =8−0
10 x 100 % = 80 %
% kematian rata-rata: P1+ P2+P3+P4+P5 5
90+80+70+70+80
5 = 78%
Lampiran 8 (Lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan pertama X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 20 20 1
2 50 100 4
3 90 270 9
∑X = 6 ∑Y = 160 ∑XY = 390 ∑ X2
= 14 X = 2 Y = 53,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 390−6.160 /3 14− 6 ²/3
= 450−380
14−12 = 35 b = y – ax
= - 16,67
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 35x – 16,67
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
50 = 35x – 16,67 35x = 50 + 16,67 x = 1,9048 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,9048 LC50 = 80,3156µg/ml
[image:36.595.111.513.507.613.2]Lampiran 8 (lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan kedua X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 20 20 1
2 60 120 4
3 80 240 9
∑X = 6 ∑Y = 160 ∑XY = 380 ∑ X2
= 14 X = 2 Y = 53,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 380−6.160 /3 14− 6 ²/3
= 380−320
= 53,33 – 30 (2) = - 6,67
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 30x + 6,67
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
50 = 30x + 6,67 30x = 50 + 6,67 x = 1,889 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,889 LC50 = 77,4461µg/ml
Lampiran 8 (lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan kedua X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 20 20 1
2 60 120 4
3 80 240 9
∑X = 6 ∑Y = 160
∑XY = 380 ∑ X2= 14 X = 2 Y = 53,33
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 380−6.160 /3 14− 6 ²/3
= 380−320
= 53,33 – 30 (2) = - 6,67
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 30x + 6,67
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
50 = 30x + 6,67 30x = 50 + 6,67 x = 1,889 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,889 LC50 = 77,4461µg/ml
[image:38.595.111.512.534.639.2]Lampiran 8 (lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan ketiga X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 20 20 1
2 60 120 4
3 70 210 9
∑X = 6 ∑Y = 150 ∑XY = 350 ∑
X2= 14
X = 2 Y = 50
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 350−6.150 /3 14− 6 ²/3
= 350−300
b = y – ax = 50 – 25 (2) = 0
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 25x + 0
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
50 = 25x + 0 25x = 50 x = 2
LC50 = anti log x LC50 = anti log 2 LC50 = 100 µg/ml
Lampiran 8 (lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan keempat X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 10 10 1
2 70 140 4
3 70 210 9
∑X = 6 ∑Y = 150 ∑XY = 360 ∑ X2
= 14
X = 2 Y = 50
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 360−6.150 /3 14− 6 ²/3
= 360−300
b = y – ax = 50 –30 (2) = - 10
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 30x –10
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
50 = 30x –10 30x = 50 + 10 x = 2
LC50 = anti log x LC50 = anti log 2 LC50 = 100 µg/ml
Lampiran 8(lanjutan)
Tabel perhitungan persamaan garis pengulangan kelima X
(Log konsentrasi)
Y
( % kematian) XY X
2
1 30 30 1
2 70 140 4
3 80 240 9
∑X = 6 ∑Y = 180 ∑XY = 410 ∑
X2= 14
X = 2 Y = 60
a =
∑XY−∑X .∑Y/n ∑X²− ∑X 2/n= 410−6.180 /3 14− 6 ²/3
= 410−360
b = y – ax = 60 – 25 (2) = 10
Jadi, persamaan garis yang diperoleh adalah: y = ax + b
y = 25x + 10
Perhitungan LC50 dengan nilai y adalah 50: y = ax + b
50 = 25x + 10 25x = 50 – 10 x = 1,6 LC50 = anti log x LC50 = anti log 1,6 LC50 = 39,8107µg/ml
Rata-rata LC50 : P1+ P2+P3+P4+P5 5
: 80,3156 + 77,4461 + 100 + 100 + 39,8107
5 = 79,5144 µg/ml
[image:41.595.113.488.561.780.2]Lampiran 9. Data rerata dan SD jumlah kematian nauplii
Tabel hasil perhitungan rerata dan SD dari kematian nauplii
Ekstrak/Fraksi Rerata kematian nauplii
Etanol P1 P2 P3 P4 P5
7,66 7,33 7,33 7,00 6,66 SD (±) 4.041 3.055 3.786 3.606 2.517
n-Heksana 7,33 7,00 6,33 6,66 6,33 SD (±) 3.055 3.606 3.055 3.512 3.786 Etilasetat 6,33 6,33 6,00 5,66 5,66
SD (±) 3.786 3.055 2.646 3.215 3.215
Air 5,33 5,33 5,00 5,00 6,00
Lampiran 10. Hasil perhitungan statistik standar deviasi
Tabel perhitungan statistik ekstrak etanol pengulangan pertama
Descriptives
N Mean
Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m
Maxim um Lower
Bound
Upper Bound
10 µg/ml 1 3.00 . . . . 3 3
1000 µg/ml 1 10.00 . . . . 10 10
[image:43.595.116.505.83.146.2] [image:43.595.114.506.221.454.2]Total 3 7.67 4.041 2.333 -2.37 17.71 3 10
Tabel perhitungan statistik ekstrak etanol pengulangan kedua
Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m Maxim um Lower Bound Upper Bound
10µg/ml 1 4.00 . . . . 4 4
100µg/ml 1 8.00 . . . . 8 8
1000µg/ml 1 10.00 . . . . 10 10
Total 3 7.33 3.055 1.764 -.26 14.92 4 10
Tabel perhitungan statistik ekstrak etanol pengulangan ketiga
Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m Maxim um Lower Bound Upper Bound
10µg/ml 1 3.00 . . . . 3 3
100µg/ml 1 9.00 . . . . 9 9
Total 3 7.33 3.786 2.186 -2.07 16.74 3 10
Tabel perhitungan statistik ekstrak etanol pengulangan keempat
Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m
Maxim um Lower
Bound
Upper Bound
10µg/ml 1 3.00 . . . . 3 3
100µg/ml 1 8.00 . . . . 8 8
1000µg/ml 1 10.00 . . . . 10 10
Total 3 7.00 3.606 2.082 -1.96 15.96 3 10
Lampirn 10 (lanjutan)
Tabel perhitungan statistik ekstrak etanol pengulangan kelima
Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m
Maxim um
Lower Bound
Upper Bound
Tabel hasil perhitungan statistik fraksi n-heksana pengulangan pertama
Lampirn 10 (lanjutan)
Tabel hasil perhitungan statistik fraksi n-heksana pengulangan kedua
Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m Maxim um Lower Bound Upper Bound
100µg/ml 1 7.00 . . . . 7 7
1000µg/ml 1 9.00 . . . . 9 9
Total 3 6.67 2.517 1.453 .42 12.92 4 9
Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m Maxim um Lower Bound Upper Bound
10 µg/ml 1 4.00 . . . . 4 4
100 µg/ml 1 8.00 . . . . 8 8
1000 µg/ml 1 10.00 . . . . 10 10
10µg/ml 1 3.00 . . . . 3 3
100µg/ml 1 8.00 . . . . 8 8
1000µg/ml 1 10.00 . . . . 10 10
[image:46.595.113.504.83.205.2] [image:46.595.112.506.246.474.2]Total 3 7.00 3.606 2.082 -1.96 15.96 3 10
Tabel hasil perhitungan statistik fraksi n-heksana pengulangan ketiga Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m
Maxim um Lower
Bound
Upper Bound
10 µg/ml 1 3.00 . . . . 3 3
100 µg/ml 1 7.00 . . . . 7 7
1000 µg/ml 1 9.00 . . . . 9 9
Total 3 6.33 3.055 1.764 -1.26 13.92 3 9
Lampirn 10 (lanjutan)
Tabel hasil perhitungan statistik fraksi n-heksana pengulangan kelima
Lampiran 10 (lanjutan)
Tabel hasil perhitungan statistik fraksi etilasetat pengulangan pertama Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m Maxim um Lower Bound Upper Bound
10µg/ml 1 3.00 . . . . 3 3
100µg/ml 1 7.00 . . . . 7 7
1000µg/ml 1 10.00 . . . . 10 10
Total 3 6.67 3.512 2.028 -2.06 15.39 3 10
Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m Maxim um Lower Bound Upper Bound
10 1 2.00 . . . . 2 2
100 1 8.00 . . . . 8 8
1000 1 9.00 . . . . 9 9
Tabel hasil perhitungan statistik fraksi etilasetat pengulangan kedua
Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m
Maxi mum Lower
Bound
Upper Bound
10 µg/ml 1 3.00 . . . . 3 3
100 µg/ml 1 7.00 . . . . 7 7
1000 µg/ml 1 9.00 . . . . 9 9
Total 3 6.33 3.055 1.764 -1.26 13.92 3 9 Descriptives
N Mean Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimu m
Maxim um Lower
Bound
Upper Bound
10 1 2.00 . . . . 2 2
100 1 8.00 . . . . 8 8
1000 1 9.00 . . . . 9 9
DAFTAR PUSTAKA
Amelia, S. (2015). KarakterisasiSimplisia DanUjiToksisitasEkstrak Etanol Serta Fraksin-Heksana dan Etilasetat TeripangPearsonothuria graeffei (Semper) TerhadapArtemia salina Leach. Skripsi. Program Studi Sarjana Farmasi. Medan: Universitas Sumatera Utara. Halaman 26.
Anderson. J.E. (1991). A Blind Comparison of Simple Bench-Top Bioassays and Human Tumour Cell Cytotoxities as Antitumor Prescreens. Phytochem J
Anal. Vol. 2. Halaman 59.
Arbiastuti, Y., dan Muflihati. (2008). Isolasi dan Uji Aktivitas Kandungan Kimia Bioaktif dari Biji Duku (Lasium domesticum Corr). Jurnal Penelitian
Universitas Tanjung Pura. 10(2): 74.
Cahyadi, R. (2009). Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Buah Pare (Momordica
charantia L.) Terhadap Larva Artemia salina Leach Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Skripsi. Semarang: Fakultas
Kedokteran Universitas Diponegoro.Halaman 54-58.
Depkes, RI. (1978). Materia Medika Indonesia. Jilid II. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 150-156, 165-167.
Depkes, RI. (1979). Materia Medika Indonesia. Jilid III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 33-34, 696.
Depkes, RI. (1980). Materia Medika Indonesia. Jilid IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 152.
Depkes, RI. (1989). Materia Medika Indonesia. Jilid V. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 151-154.
Depkes, RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 7, 896-898. 1112.
Depkes, RI. (2001).Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid II. Jakarta: Departemen Kesehatan dan Kesejahteraan SosialRI Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. Halaman 195.
Depkes, RI. (2007). Kebijakan Obat Tradisional. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 321-325.
Dey, P.M. (2012). Methods in Plant Biochemistry. Volume I. USA: Academic Press. Halaman 81-82.
Ditjen, POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 9, 12, 33.
Ditjen POM. (1985). Cara Pembuatan Simplisia. Jakarta: Depkes RI. Halaman 11-13.
Fanani, R. (2009). Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Daun Dewandaru (Eugenia
uniflora L,) Per Oral Pada Tikus Sprague Dawley. Skripsi. Surakarta:
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Halaman 56. Farnsworth, N.R. (1966). Biologycal And Phytochemical Screening of Plants.
Chicago: Reheis Chemical Company. Journal of Pharmaceutical Science 55(3): 263-264.
Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 76, 147-149.
Heyne, K. (1950). De Nuttige Planten Van Nederlandsch Indie. Penerjemah: Badan Litbang Departemen Kehutanan. (1987). Tumbuhan Berguna Indonesia. Jilid III. Jakarta: Halaman 1279.
Inayah, Ningsih, dan Kustono. (2012). Uji Toksisitas dan Identifikasi Awal Golongan Senyawa Aktif Ekstrak Etanol dan n-Heksana Teripang Pasir (Holothuria scabra) Kering Pantai Kenjeran Surabaya. Alchemy. Vol. 2 No. 1. Halaman 93.
Indiastuti, D.N., Purwaningsih, S., Setiawati, Y., dan Cholies, N. (2008). Skrining Pendahuluan Toksisitas Beberapa Tumbuhan Benalu Terhadap Larva
Artemia salina Leach. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia. Universitas
Airlangga. Halaman 81-85.
Kemala, S. (2012). Efek Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Dan Fraksi Daun Bangun-Bangun (Plectranthus amboinicus (Lour.) Terhadap Larva
Artemia salina Leach Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test. Skripsi. Program Studi Sarjana Farmasi. Medan: Universitas Sumatera
Utara. Halaman 18-19.
Kurniawan, H. (2012). Uji Toksisitas Akut Ekstrak Metanol Daun Kesum (Polygonum minus Huds)Terhadap Larva Artemia salina Leach Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Skripsi. Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan. Pontianak: Universitas Tanjungpura.Halaman 19-23.
Khare, C.P. (2007). Indian Medicinal Plants. New Delhi: Springe Science + Business Media, LCC. Halaman 211-249.
Kristianti, A.N., Aminah,N.S., Tanjung, M., dan Kurniadi, B. (2008). Buku Ajar
Fitokimia.Jurusan Kimia Laboratorium Kimia Organik FMIPA.
Surabaya: Universitas Airlangga. Halaman 14.
Malinda, I. (2015). Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Obat Antitetanus Pengobatan Tradisional Karo. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Halaman 1-3, 35. Marliana, S.D., Suryanti, V. dan Suyono. (2005). Skrining Fitokimia dan Analisis
Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam (Sechium
edule Jacq. Swartz.) Dalam Ekstrak Etanol Biofarmasi. Volume 3.
Nomor 1. Halaman 26-31.
Meyer, U.N., N.R. Ferigni, J.E., Putnam, L.B., Ja Cobsen, D.E. Nichols, dan J.L. McLaughlin. (1982). Brine Shrimp: A Convenient General Bioassay For Active Plant Constituents. Planta Medica.Halaman45: 31-34.
Muaja, A.D., Kolengan, H.S.J., dan Runtuwene, M.R.J. (2013). Uji Toksisitas Dengan Metode BSLT dan Analisis Kandungan Fitokimia Ekstrak Daun Soyogik (Saurauia bracteosa DC) dengan Metode Soxhletasi. Jurnal
MIPAUNSRAT. Hal. 117.
Mudjiman, A. (1989). Udang Renik Air Asin (Artemia salina). Jakarta: Penerbit Bhratara. Halaman 17-21.
Mutia, D. (2010). Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Buah Anggur (Vitis vinifera) Terhadap Larva Artemia salina Leach Dengan Metode Brine Shrimp
Lethality Test (BSLT). Skripsi. Semarang: Fakultas Kedokteran
Universitas Diponegoro.Halaman 20-23.
Panjaitan, R. B. (2011). Uji Toksisitas Akut Ekstrak Kulit Batang Pulasari (Alyxiae Cortex) Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT).
Skripsi.Yogyakarta: Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.Halaman 20-23.
Rahman, M., Habib, R., Hasan, R., Islam, A.M.T., dan Khan, I.N. (2012). Comparative Antioxidant Potential Of Different Extracts Of Flacourtia Jangomas Lour Fruits.Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical
Research. Halaman 5(1):73-75.
Reddy, B.S., Reddy, R.K.K., Reddy, B.P., Ramakrishna, S., dan Diwan, P.V. (2008). Potential in vitro antioxidant and protective effects of Soymida
febrifuga on ethanol induced oxidative damage in HepG2 cells. Food Chem. Toxicol. Halaman 46:3429–3442.
Runia, Y.A. (2008). Faktor-Faktor Yang Berhubungan Dengan Keracunan Pestisida Organofosfat, Karbanat, dan Kejadian Anemia Pada Petani Holikultura di Desa Terojasari Kecamatan Ngablak Kabupaten Magelang. Tesis. Semarang: Universitas Diponegoro. Halaman 77. Robinson, Trevor. (1995). Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Bandung:
Penerbit ITB. Hal. 157.
Sangi, M., Runtuwene, M.R.J., Simbala, H.E.I., dan Makang, V.M.A. (2008).Analisis Fitokimia Tumbuhan Obat di Kabupaten Minahasa Utara.Skripsi. Manado: Fakultas MIPA UNSRAT. Halaman 57.
Saifuzzaman, Md., Awlad Hossaina, Md., Hossain, Anwar., Ali Eunus Sheemul and Amirul Islama, Md. (2008). Evaluation Of Analgesic Activity Of Ethanolic Extract Of Leea Indica Leaves. Bangladesh: Khulna University. Halaman. 51-59.
Srinivasan. (2009). Chemicalcomposition and antimicrobial activity of the essential oil of Leea indica(Burm. F.) Merr. flowers. Nat Prod Rad. Halaman 8:488–493.
Venn, R.F. (2008. Principles and Practices of Bioanalysis. Edisi kedua. Prancis: Taylor and Francis Group Ltd. Halaman 23-25.
Wagner. (1984). Plant Drug Analysis a Thin Layer Chromatography
Atlas.Springer-Verlag. Halaman 164.
Widyastuti, S. (2008). Uji Toksisitas Ekstrak Daun Iprih (Ficus glabella Blume) Terhadap Artemia salina Leachdan Profil Kromatografi Lapis Tipis.
Skripsi. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta. Halaman 15.
WHO. (1998). WHO. (1998). Quality Control Methods For Medicinal Plant Materials. Switzerland. Hal. 31-33.
BAB III
METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menguji efek toksisitas dari ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air daun titanus (Leea aequata L.) terhadap Artemia salina Leachmenggunakan metode
Brine Shrimp Lethality Test
yang
dilakukan di LaboratoriumFarmakognosiFakultas Farmasi, Universitas Sumatera Utara.
3.1Alat
Alat–alat yang digunakandalampenelitianiniadalah alat-alat gelas laboratorium, aluminium foil,bejanamaserasi, bejana penetasan telur Artemia
salina Leach, blender (Panasonic, Jerman), bola karet, cawan porselin, desikator,
inkubator, krus porselin, kaca objek, kaca penutup, kertassaring, kertas label, batang pengaduk, lampu pijar 5 watt (Hannochs, China),lemari pengering, mikroskop (Boeco, Jerman),mortirdanstamfer, neraca analitik (Vibra AJ, Jepang),penangas air (Stuart, Inggris), evaporator berputar(Stuart, Inggris), seperangkatalatdestilasi, spatula, statif,seperangkat alat penetapan kadar air (Stuart, Inggris)danvial 10 ml.
3.2 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah daun titanus, telur
Artemia salina Leach, air laut buatan (ALB), ragi, garam non-yodium, Na-CMC
2 N, asam klorida pekat, asam nitrat pekat, asam sulfat pekat, asam nitrat 0,5 N, benzena, besi (III) klorida, bismuth (III) nitrat, etanol (destilasi), etilasetat (destilasi),n-heksana (destilasi), eter,isopropanol, kalium iodida, kloroform, metanol, natrium hidroksida, amil alkohol, natrium sulfat anhidrat, petrolum eter, raksa (II) klorida, serbuk magnesium, serbuk zinkum, timbal (II) asetat dan toluena.
3.1Pembuatan Pereaksi
3.3.1 Pereaksi Kloralhidrat
Sebanyak 50 g kloralhidrat dilarutkan dalam 20 mLl air suling (Depkes, RI., 1979).
3.3.2 Pereaksi Dragendroff
Sebanyak 8 g bismut (III) nitrat dilarutkan dalam 20 ml asam nitrat pekat. Pada wadah lain dilarutkan 27,2 g kalium iodida dalam 50 ml air suling, kemudian kedua larutan dicampurkan dan didiamkan sampai memisah sempurna. Diambil lapisan jernih dan diencerkan dengan air suling hingga 100 ml (Depkes, RI., 1980).
3.3.3 Pereaksi Bouchardat
Sebanyak 4 g kalium iodida dilarutkan dalam air suling secukupnya, ditambahkan 2 g iodium dicukupkan dengan air suling hingga 100 mL (Depkes, RI., 1978).
3.3.4Pereaksi natrium hidroksida 2 N
Sebanyak 8,002 g kristal natrium hidroksida ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air suling hingga 100 ml (Depkes RI, 1978).
Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat dilarutkan dalam air suling bebas CO2 hingga 100 ml(Depkes, RI., 1978).
3.3.6 Pereaksi besi (III) klorida 1% b/v
Sebanyak 1 g FeCl3 dilarutkan dalam air 100 ml (Depkes, RI., 1978). 3.3.7 Pereaksi asam nitrat 0,5 N
Sebanyak 3,4 ml asam nitrat pekat diencerkan dengan air suling 100 mL (Depkes, RI., 1979).
3.3.8 Pereaksi asam klorida 2 N
Sebanyak 17 ml HCl pekat diencerkan dalam air suling 100 ml (Depkes RI, 1978).
3.3.9 Pereaksi asam sulfat 2 N
Sebanyak 9,8 ml H2SO4 pekat ditambahkan air suling 100 ml (Depkes, RI., 1978).
3.3.10 Pereaksi Lieberman-Burchard
Sebanyak 5 ml asam asetat anhidrat dicampurkan perlahan dengan 5 ml H2SO4 pekat, ditambahkan 50 ml etanol ke dalam campuran tersebut (wagner, 1984).
3.3.11 Pereaksi Mayer
Sebanyak 1,3596 g raksa (II) klorida ditimbang, dilarutkan dalam air suling 60 ml. Wadah lain ditimbang 5 g kalium iodida, dilarutkan dalam 10 ml air suling, dicampurkan dan ditambahkan air suling 100 ml (Depkes RI, 1980).
3.3.12 Pereaksi Molisch
Sebanyak 3 g α-naftol ditimbang, kemudian dilarutkan dalam asam nitrat
Penyiapan sampel meliputi pengambilan sampel, identifikasi sampel serta pengolahan sampel (Malinda, 2015).
3.4.1Pengambilan sampel
Pengambilan sampel dilakukan secara purfosif tanpa membandingkan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Sampel yang digunakan adalah daun titanus segar yang berwarna hijau (tidak terlalu tua dan tidak terlalu muda) yang diambil dari Desa Suka Nalu, Kecamatan Barus Jahe, Kabupaten Karo, Provinsi Sumatera Utara.
3.4.2Identifikasi sampel
Identifikasisampeldilakukandi HerbariumBogoriense, Bidang BotaniPusatPenelitianBiologiLembagaIlmuPengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor. 3.4.3 Pengolahan sampel
Sebanyak 4 kg daun titanus dibersihkan dari pengotor dengan cara mencuci dibawah kran air yang mengalir hingga bersih, ditiriskan, ditimbang, dikeringkan dengan rak pengering selama 5 hari, disortasi kering, ditimbang berat kering. Sampel dianggap kering apabila sudah rapuh bila diremas, kemudian diserbukkan, disimpan dalam wadah plastik dan ditimbang (Malinda, 2015).Bagan pengolahan sampel dapatdilihatpada Lampiran 7, halaman 49.
3.5 Hewan Percobaan
Hewan percobaan yang digunakan pada penelitian ini adalah telur udang
Artemia salina Leach kering yang diproduksi oleh Amerika Serikat yang
diperoleh dari salah satu toko penjual ikan hias di dekat Plaza Thamrin. Jalan Mohammad Husni Thamrin No. 73B Medan.
Pemeriksaan karakteristik simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik, mikroskopik dan penetapan kadar air.
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik
Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan mengamati bentuk luar, ukuran, bau, rasa serta warna dari simplisia(Depkes, RI., 2007).
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia daun titanus. Sejumlah serbuk simplisia ditaburkan diatas objek glass yang telah ditetesi dengan larutan kloralhidrat, ditutupi dengan kaca penutup kemudian diamati dibawah mikroskop (Depkes, RI., 2007).
3.6.3 Penetapan kadar air
Skrining fitokimia fraksi n-heksana, etilasetat dan air dilakukan dengan cara yang sama dengan skrining fitokimia serbuk simplisia/ekstrak etanol sebanyak 0,1 g tiap-tiap fraksi meliputi pemeriksaan golongan alkaloid, flavonoid, glikosida, glikosida antrakinon, saponin, tanin dan steroid/triterpenoid.
3.7.1 Pemeriksaan alkaloid
Sebanyak 0,1 g fraksi n-heksana ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat yang diperoleh dipakai untuk uji alkaloid sebagai berikut:
a. Filtrat 3 tetes ditambah 2 tetes pereaksi Mayer, maka akan terbentuk endapan menggumpal berwarna putih atau putih kekuningan.
b. Filtrat 3 tetes ditambah 2 tetes peraksi Bouchardat, maka terbentuk endapan berwarna coklat sampai hitam.
c. Filtrat 3 tetes ditambah 2 tetes peraksi Dragendorff, maka akan terbentuk endapan warna merah atau jingga.
Alkaloida positif jika ada endapan atau keruhan paling sedikit dua dari 3 percobaan diatas (Depkes, RI., 1995).
3.7.2 Pemeriksaan glikosida
50oC. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sari air digunakan untuk percobaan berikut: 0,1 ml larutan percobaan dimasukkan dalam tabung reaksi, diuapkan di atas penangas air. Pada larutan ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molisch, lalu ditambahkan dengan hati-hati 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuk cincin ungu pada batas kedua cairan, menunjukkan adanya ikatan gula (glikon) (Depkes, RI., 1995).
3.7.3 Pemeriksaan glikosida antrakinon
Sebanyak 0,1 g fraksi n-heksana ditambahkan 5 ml asam sulfat 2 N, dipanaskan sebentar, setelah dingin ditambahkan 10 ml benzena, dikocok dan didiamkan. Lapisan benzen dipisahkan dan disaring. Filtrat berwarna kuning menunjukkan adanya antrakinon. Kocok lapisan benzena dengan 2 ml NaOH 2 N, lalu didiamkan. Lapisan air berwarna merah dan lapisan benzena tidak berwarna menunjukkan adanya senyawa antrakinon (Depkes RI, 1995).
3.7.4 Pemeriksaan saponin
Sebanyak 0,1 g fraksi n-heksana dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik. Terbentuk busa setinggi 1-10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan asam klorida 2 N menunjukkan adanya saponin (Depkes, RI., 1995).
3.7.5 Pemeriksaan tanin
Sebanyak 0,1 g fraksi n-heksana dimaserasi dengan 20 ml n-heksana selama 2 jam lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Sisa ditambahkan 2 tetes pereaksi Liebermann-Burchard, diteteskan pada saat akan mereaksikan sampel uji melalui dinding cawan. Timbulnya warna biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroid, sedangkaan warna merah, merah muda atau ungu menunnjukkan adanya triterpenoid (Harbone, 1987).
3.7.7 Pemeriksaan flavonoida
Sebanyak 0,1 g fraksi n-heksana ditambahkan 10 ml air panas, didihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas. Filtrat yang diperoleh diambil 5 ml, ditambahkan 0,1 g sebuk magnesium, 1 ml asam klorida pekat, 2 ml amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah atau kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966).
3.8 Pembuatan Ekstrak dan Fraksinasi
3.8.1 Pembuatan ekstrak etanol
Fraksinasi dilakukan dengan metode ekstraksi cair-cair (ECC). 10 g ekstrak kental daun titanus dilarutkan dalam 10 ml etanol, ditambahkan 50 ml air suling, kemudian ditambahkan dengan n-heksana sebanyak 50 ml menggunakan corong pisah, digojok dan biarkan sampai memisah, kemudian dipisahkan, selanjutnya di fraksinasi kembali dengan menggunakan pelarut n-heksana hingga diperoleh fraksi yang jernih (tidak memberikan hasil positif dengan penambahan pereaksi Liebermann-Buchard), kemudian fraksi air ditambahkan 50 ml etilasetat, di gojok dan dibiarkan memisah. Lapisan etilasetat dipisahkan dan fraksinasi dilanjutkan sampai diperoleh fraksi etilasetat yang jernih (tidak memberikan hasil positif dengan penambahan pereaksi FeCl3 1%). Kumpulan hasil fraksi n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air masing-masing diuapkan dengan evaporator berputar pada temperatur 400C sampai diperoleh ekstrak kental, kemudian dikeringkan dan disimpan pada tempat yang sesuai (Amelia, 2015). Bagan pembuatan fraksi dapat dilihat pada Lampiran 7, halaman 50.
3.9 Perhitungan Rendemen
Perhitungan rendemen dilakukan dengan menghitung jumlah ekstrak yang diperolehdengan simplisia awal kemudian dikalikan 100 % (Ditjen, POM., 2000).
3.10 Uji Toksisitas
lubang pada sekatnya. Dimasukkan air laut buatan ke dalam bejana, ditaburkan telur Artemia salina Leach ke dalam bagian yang kecil kemudian bagian atasnya ditutup dengan aluminium foil sedangkan bagian yang besar dibiarkan terbuka menghadap lampu pijar 5 watt selama 48 jam, telur akan menetas menjadi larva dan siap digunakan untuk hewan uji (Meyer, et al., 1982).
Sebanyak 0,5 g Na-CMC ditaburkan dalam lumpang yang berisi 20 ml air suling panas, didiamkan selama 15 menit lalu digerus hingga diperoleh massa yang transparan, diencerkan dengan air suling, dihomogenkan, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 mL dan dicukupkan volumenya dengan air suling hingga 100 ml.
sampai 5ml, lalu semua vial diletakkan dibawah cahaya lampu pijar 5 watt selama 24 jam, dihitung jumlah larvayang mati tiap dosis dan kontrol.
Data dihitung menggunakan rumus Abbott: Kematian = tes − kontrol
kontrol x 100
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Identifikasi Tumbuhan
Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakuakan di Pusat Penelitian dan Pengembangan LIPI Bogor, menunjukkan bahwa tumbuhan yang diteliti adalah
Leea aequata L., suku Leeaceae. Hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1,
halaman 38.
4.2 Pemeriksaan Makroskopik
Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia daun titanus yaitu daun berwarna hijau, berbentuk lonjong, tepi daun bergerigi, ujung daun meruncing, berasa pahit dan bau aromatik. Hasil pemeriksaan dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 39-40.
4.3 Pemeriksaan Mikroskopik
Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk daun titanus memperlihatkan adanya stomata tipe parasitik, kristal kalsium oxalat bentuk jarum, rambut kelenjar dan rambut penutup. Hasil pemeriksaan dapat dilihat pada Lampiran 4, halaman 41.
4.4 Karakteristik
7,58% dan kadar abu tidak larut asam 0,65%. Disebabkan telah adanya pemerikasaan karakteristik serbuk simplisia dari daun titanus sehingga peneliti tidak melakukan pemeriksaan karakteristik yang tertera diatas kecuali pemeriksaan kadar air.
Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia daun titanus diperoleh kadar air 4,98%. Kadar air ini memenuhi persyaratan yaitu tidak lebih dari 10% (Depkes, RI., 1995). Penetapan kadar air dilakukan untuk memberi batasan atau rentang besarnya kandungan air didalam simplisia karena tingginya kandungan air dapat mempercepat pertumbuhan jamur (Ditjen, POM., 2000). Perhitungan kadar air simplisia daun titanus dilihat pada Lampiran 5, halaman 42.
4.5 Ekstraksi dan Fraksinasi
Hasil ekstraksi yang diperoleh dari simplisia daun titanus sebanyak 500 g yang dimaserasi dengan pelarut etanol 96% diperoleh ekstrak etanol daun titanus sebanyak 69 g dengan rendemen 13,8%. Hasil fraksinasi ekstrak etanol sebanyak 10 g menggunakan pelarut heksana, etilasetat dan air, diperoleh fraksi n-heksana 2,1 g dengan rendemen 0,42%, fraksi etilasetat 2,5 g dengan rendemen 0,5% dan fraksi air 2,7 g dengan rendemen 0,54%. Perhitungan % rendemen ekstrak dan fraksi dapat dilihat pada Lampiran 6, halaman 43.
4.6 Skrining Fitokimia
tersebut sehingga peneliti hanya melakukan skrining fitokima terhadap fraksi-fraksi saja. Skrining fitokimia dilakukan terhadap fraksi-fraksi n-heksana, fraksi-fraksi etilasetat dan fraksi air. Hasil skrining fitokimia dapat dilihat pada Tabel berikut: Tabel 4.1 Hasil skrining fitokimia fraksi-fraksi
No
Skrining
Hasil
Fraksi
n-heksana
Fraksi etilasetat
Fraksi Air
1. Alkaloid - + +
2. Flavonoid - + +
3. Glikosida - - +
4. Glikosida antrakinon - - -
5. Saponin - + +
6. Tanin - + +
7. Steroid/Triterpenoid + - -
Keterangan : (+) = mengandung golongan senyawa (-) = tidak mengandung golongan senyawa
Pengujian alkaloid tidak terbentuk endapan putih pada uji Mayer, tetapi terbentuk endapan pada uji Dragendorff dan Bourchardat berarti dalam fraksi terdapat alkaloid yaitu fraksi etilasetat dan fraksi air. Tujuan penambahan HCl sebelumditambahkan pereaksi adalah karena alkaloidbersifat basa sehingga diekstrak denganpelarut yang mengandung asam (Harborne, 1987). Hasil positif alkaloid pada uji Dragendorff ditandai dengan terbentuknya endapan berwarna merah. Hasil positif alkaloid pada uji Bourchardatditandai dengan terbentuknya endapan berwarna coklat. Uji Mayer menunjukkan hasil alkaloid negatifkarenatidak terbentuknya endapan putih.
adanya flavonoid akibat dari reduksi oleh asam klorida pekat dan magnesium.Skrining glikosida ditunjukkan dengan penambahan pereaksi Molisch dan asam sulfat pekat dimana terbentuk cincin ungu. Pereaksi Molisch merupakan pereaksi umum yang digunakan untuk identifikasi karbohidrat, dalam hal ini adalah gula (Kemala, 2012).
Saponin merupakan bentuk glikosida dari sapogenin sehingga akan bersifat polar. Saponin adalah senyawa yang bersifat aktif permukaan dan dapat menimbulkan busa jika dikocok dalam air (Kristanti dkk., 2008). Timbulnya busa pada uji saponin menunjukkan adanya glikosida yang mempunyai kemampuan untuk membentuk buih dalam air yang terhidrolisis menjadi glukosa dan senyawa lainnya. Senyawa saponin tersebut akan cenderung tertarik oleh pelarut yang bersifat semi polar (Marliana, et al., 2005). Hasil skrining fitokimia positif saponin pada fraksi etilasetat dan fraksi air.
Identifikasi taninmenggunakan pereaksi besi(III)klorida. Hasilyang diperoleh pada fraksi etilasetat dan fraksi airadalah positif mengandung tanin denganmemberikan warna hijaukehitaman.Penambahan ekstrak dengan FeCl31%dalam air menimbulkan warna hijua, merah, ungu atau hitam yang kuat. Terbentuknyawarna hijau kehitaman pada ekstrak setelahditambahkan FeCl31%karena tanin akanbereaksi dengan ion Fe3+membentuksenyawa kompleks (Harborne, 1987).
ungu sehingga negatif mengandung triterpenoid. Menurut Harbone (1987) triterpenoid menunjukkan warna merah, merah muda atau ungu sedangkan steroid akan menghasilkan warna biru kehijauan.
4.7 Uji Toksisitas
Uji toksisitas dimaksudkan untuk memaparkan adanya efek toksik dalam kaitannya dengan penggunaan senyawa yang terdapat dalam tumbuhan tersebut (Widyastuti, 2008). Brine Shrimp Lethality Test merupakan salah satu metode untuk menguji bahan-bahan yang bersifat toksik dan digunakan sebagai uji hayati yang pertama untuk penelitian bahan alam karena cepat, murah, sederhana (tidak memerlukan teknik aseptik), untuk melakukannya tidak memerlukan peralatankhusus dan membutuhkan sampel yang relatif sedikit dalam pengujian BSLT ini.
Nilai LC50 nilai LC50. LC50 (LethalConcentration 50%) adalah tingkat konsentrasi ekstrak yang dibutuhkan untuk mematikan50% dari hewan yang diuji. Sehingga, apabila jumlah mortalitas lebih dari 50% dapatdipastikan nilai LC50 ˂
1000 μg/ml atau 1000 ppm. Metode ini menggunakan larva Artemia salina Leach
sebagai hewan uji. Uji toksisitas dengan metode ini merupakan uji toksisitas akut dimana efek toksik dari suatu senyawa ditentukan dalam waktu singkat, yaitu rentang waktu selama 24 jam setelah pemberian dosisi uji. Prosedurnya dengan menentukan nilai LC50 dari aktivitas komponen aktif tanaman terhadap larva
Artemia salina Leach (Kemala, 2012). Suatu ekstrak dikatakan toksik berdasarkan
metode BSLT jika harga LC50< 1000 µg/ml (Meyer, et al., 1982). Kematian larva
yang terkandung di dalam larutan uji yang telah kita teliti tersebut (Cahyadi, 2009; Mutia, 2010).
[image:69.595.118.507.217.291.2]Berdasarkan hasil perhitungan regresi linier pengujian toksisitas larutan uji terhadap larva Artemia salina Leach dapat dilihat pada Tabelberikut:
Tabel 4.2 Hasil pengukuran LC50 dengan metode BSLT
Menurut Meyer, et al., (1982), jika ekstrak mempunyai nilai LC50< 1000 µg/ml maka ekstrak tersebut bersifat toksik pada larva Artemia salina Leach. Berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa ekstrak dan fraksi memiliki aktivitas toksik terhadap larva Artemia salina Leach karena nilai LC50nya masih dibawah 1000 µg/ml.
Tabel 4.3 Tingkat nilai toksisitas LC50 (Anderson, 1991)
No Nilai LC50(µg/ml) Tingkat Toksisitas 1
2 3 4
0 – 250 250 – 500 500 – 750 750 – 1000
Sangat toksik Toksik Sedang Tidak toksik
Berdasarkan pembagian tingkat toksisitas LC50 menurut Anderson (1991) diatas, maka nilai LC50 yang diperoleh dari ekstrak dan fraksi termasuk kedalam tingkat sangat toksik dengan rentang nilai antara 0 – 250 µ g/ml. Perbedaan toksisitas antara ekstrak dan fraksi ini dapat disebabkan oleh senyawa yang terkandung pada masing-masing ekstrak dan fraksi. Pada ekstrak etanol nilai LC50 yang diperoleh lebih rendah dibandingkan dengan fraksi n-heksana yaitu 24,7007 µg/ml, diduga karena senyawa yang terkandung di dalamnya yaitu flavonoid, steroid/triterpenoid, saponin, glikosida dan tanin yang apabila masuk kedalam
No Ektrak/Fraksi LC50µg/ml
1. Etanol 24,7007
2. n-Heksana 30,8936
3. Etilasetat 47,4319
[image:69.595.111.512.469.542.2]saluran pencernaan larva dapat mengganggu proses fisiologis sel (Cahyadi, 2009). Pada fraksi n-heksana memiliki nilai LC5030,8936 µg/ml. Hal ini disebabkan karena pelarut n-heksana merupakan pelarut non polar sehingga dapat menarik enyawa-senyawa yang bersifat non polar seperti steroid/triterpenoid. Steroid/triterpenoid dalam kadar tertentu dapat menyebabkan kematian terhadap larva dengan cara menghambat daya makan (Cahyadi, 2009). Fraksi etilasetat memiliki nilai LC5047,4319 µg/ml. Aktivitas toksiknya diduga disebabkan oleh flavonoid, saponin, tanin dan alkaloid yang memiliki aktivitas toksik pada larva
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian diatas, maka dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun titanus memiliki efek toksik terhadap larva Artemia salina Leach yang ditunjukkan dengan nilai LC5024,7007 µg/ml,sedangkanpadafraksin-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air memiliki efek toksik yang ditunjukkan dengan nilai LC50 30,8936 µg/ml, 47,4319 µg/ml dan 79,5144 µg/ml.
5.2 Saran
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan
2.1.1 Sistematika tumbuhan
Klasifikasi tumbuhan titanus sebagai berikut (Depkes, RI., 2001; LIPI, 2015):
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta Kelas : Dicotyledonae Bangsa : Rhamnales Suku : Leeacea Marga : Leea
Jenis : Leea aequata L. 2.1.2 Nama asing
Leea aequata L. memiliki nama lain seperti: ginggiyang (Sunda), girang
(Jawa Tengah), jirang (Madura), kayu ajer perempuan (Melayu), mali-mali (Makassar), uka (Maluku) (Depkes, RI., 2001).
2.1.3 Morfologi tumbuhan
masih muda hijau dan setelah tua ungu kehitaman dengan biji kecil berbentuk segitiga dan berwana putih kekuningan. Tumbuhan ini termasuk tumbuhan berakar tunggal dengan warna coklat muda (Depkes, RI., 2001).
2.1.4 Habitat
Tumbuhan ini tumbuh tersebar di seluruh pulau Jawa pada ketinggian kurang dari 1000 m di atas permukan laut, sebagai semak yang tidak berduri yang tumbuh di tepi sungai-sungai dan dibawah semak belukar lain di lembah-lembah (Heyne, 1950).
2.1.5 Kandungan kimia
Biji Leea aequata L. mengandung saponin, flavonoid dan polifenol (Depkes, RI., 2001). Suharmiati (2005) menyatakan bahwa daun, buah dan akar
Leea indica yang memiliki famili yang sama dengan Leea aequata L.
mengandung flavonoid. Daunnya mengandung flavonoid, alkaloid, glikosida, steroid/terpenoid, tanin dan polifenol. Buahnya mengandung tanin dan flavonoid. Kulit batangnya mengandung alkaloid, flavonoid dan steroid. Akarnya mengandung saponin, flavonoid, steroid dan tanin. Bijinya mengandung saponin, flavonoid dan polifenol (Rahman,et al., 2012).
2.1.6 Manfaat tumbuhan
kepala. Kulit batangnya berguna sebagai antiracun ular, antidiare, analgetik dan antimalaria.
2.3 Ekstraksi
Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair dibuat dengan menyari simplisisa nabati atau hewani menurut cara yang cocok, di luar pengaruh cahaya matahari langsung. Ekstrak kering harus mudah digerus menjadi serbuk (Ditjen POM, 1985). Ekstraksi adalah penyarian komponen aktif dari suatu tumbuhan atau hewan dengan menggunakan pelarut yang cocok (Handa, 2008). Metode yang dapat digunakan dalam proses ekstraksi antara lain maserasi, perkolasi, refluks, sokletasi, digesti dan infus. Pemilihan metode tersebut disesuaikan dengan kepentingan dalam memperoleh sari yang baik (Harborne, 1987). Pelarut yang digunakan dalam proses ekstraksi tersebut harus dipilih berdasarkan kemampuannya dalam melarutkan kandungan zat aktif yang semaksimal mungkin dari unsur-unsur yang tidak diinginkan (Ansel, 1989).
Beberapa metode ekstraksi yang sering digunakan dalam berbagai penelitian adalah:
A.Cara panas 1.Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada temperatur yang lebih tinggi daripada temperatur ruangan, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-500C (Ditjen, POM., 2000).
2. Refluks
3.Sokletasi
Proses pemisahan suatu komponen yang terdapat dalam zat padat
dengan cara penyaringan berulang ulang dengan menggunakan pelarut tertentu
dan alat tertentu (soxlet) sehingga semua komponen yang diinginkan akan
terisolasi (Voigt, 1994).
4.Infus
Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air terukur 96-980C selama 15-20 menit (Ditjen, POM., 2000).
5. Dekok
Dekok adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur > 900C selama 30 menit(Harborne, 1987).
A.C