LAMPIRAN
Lampiran 1.Kurva serapan larutan indometasin dalam medium dapar fosfat
pH7,4
(a) Kurva serapan indometasin dalam medium dapar fosfat pH 7,4 pada konsentrasi 50 ppm
Lampiran 2. Kurva kalibrasi larutan indometasin dalam medium dapar fosfat pH
7,4 pada panjang gelombang 266,0 nm
(a) pengukuran konsentrasi larutan indometasin dengan berbagai konsentrasi dalam medium dapar fosfat pH 7,4 pada panjang gelombang 265,0 nm
Lampiran 3. Perhitungan persen kumulatif indometasin yang berpenetrasimelalui kulit kelinci secara in vitro
Sebagai contoh diambil data penetrasi indometasin melalui kulit kelinci dari gel
formula 1.
Jumlah indometasin yang terpenetrasi melalui kulit kelinci dapat dihitung dengan
menggunakan persamaan regresi Y = 0,04318Ax + 0,00601, misal:
Pada menit ke-15 nilai A = 0,009, maka konsentrasinya adalah:
= 0,009−0,00601
0,04318 x 25= 1,73 µg/ml
Jumlah indometasin yang terpenetrasi kedalam 10,8 ml medium penerima adalah:
= 1,73 µg/ml x 10,8 ml = 18,69µg
Jumlah indometasin yang terpenetrasi kedalam medium adalah :
= 18,69 µg + faktor penambahan
= 18,69 µg + 0,55 µ g
= 19,24 µg
Persen kumulatif indometasin yang terpenetrasi adalah:
= ����� ℎ����� ������������������������������������������������������������� ���� −������������
x 100%
Lampiran 4. Data difusi indometasin dari gel formula 1
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 4. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 4. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 5. Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 1
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 5,94 5,13 4,05 5,04 0,95
15 19,18 13,98 11,45 14,87 3,94
30 21,72 20,90 17,60 20,07 2,18
60 27,84 23,48 24,50 25,27 2,28
90 31,39 29,11 32,17 30,89 1,59
120 38,30 38,06 39,56 38,64 0,80
150 45,91 47,91 47,12 46,98 1,01
180 54,51 54,89 54,30 54,57 0,30
210 63,88 61,66 60,75 62,10 1,61
240 71,62 69,79 67,99 69,80 1,81
270 79,95 76,94 78,50 78,46 1,51
300 88,63 84,07 86,89 86,53 2,30
330 94,96 94,12 96,41 95,16 1,16
360 104,90 106,27 107,41 106,19 1,26
390 116,07 117,16 117,02 116,75 0,59
420 130,72 127,41 129,11 129,08 1,65
450 139,93 140,99 141,46 140,79 0,79
480 158,52 156,27 155,39 156,72 1,61
510 169,79 169,84 169,38 169,67 0,25
Lampiran 7.Data difusi indometasin dari gel formula 2
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 7. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 7. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 8. Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 2
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 12,96 14,85 12,69 13,50 1,18
15 19,29 23,52 23,05 21,95 2,32
30 33,66 32,05 35,06 33,59 1,51
60 43,53 41,72 42,06 42,44 0,96
90 50,81 50,42 52,14 51,12 0,90
120 60,87 60,43 60,41 60,57 0,26
150 73,12 73,44 72,05 72,87 0,73
180 83,94 83,21 85,17 84,11 0,99
210 108,25 109,60 107,96 108,60 0,88
240 122,94 129,54 126,38 126,29 3,30
270 141,54 142,81 140,69 141,68 1,07
300 154,91 154,88 155,83 155,21 0,54
330 168,41 170,19 171,00 169,87 1,32
360 183,64 185,79 185,34 184,92 1,13
390 196,66 198,13 198,47 197,75 0,96
420 217,77 216,31 215,89 216,66 0,99
450 239,04 242,22 241,23 240,83 1,63
480 260,94 264,88 264,36 263,39 2,14
510 283,71 287,39 287,66 286,25 2,21
Lampiran 10. Data difusi indometasin dari gel formula 3
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 10. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 10. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 11.Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 3
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 15,93 19,71 22,68 19,44 3,38
15 25,24 32,61 36,66 31,5 5,79
30 46,61 43,02 47,42 45,68 2,34
60 53,55 56,83 55,1 55,16 1,64
90 67,79 69,43 69,07 68,76 0,86
120 76,48 79,81 79,08 78,45 1,75
150 92,24 103,62 93,48 96,45 6,24
180 104,36 115,61 105,95 108,64 6,09
210 118,62 139,10 125,88 127,87 10,38
240 140,85 151,34 144,86 145,68 5,29
270 154,98 172,50 164,02 163,83 8,76
300 177,96 188,26 190,86 185,69 6,82
330 195,70 222,58 226,27 214,85 16,69
360 225,17 249,60 248,22 240,99 13,72
390 256,85 283,29 287,66 275,93 16,67
420 294,84 307,15 320,76 307,58 12,97
450 329,05 335,76 355,63 340,15 13,82
480 369,44 377,87 391,22 379,51 10,98
510 402,68 415,45 429,87 416,00 13,60
Lampiran 13. Data difusi indometasin dari gel formula 4
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 13. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 13. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 14.Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 4
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 21,60 21,33 21,06 21,33 0,27
15 29,81 29,52 33,81 31,05 2,40
30 41,84 42,06 44,59 42,83 1,53
60 53,12 52,55 52,59 52,75 0,32
90 65,12 63,97 63,95 64,35 0,67
120 76,23 76,33 80,04 77,53 2,17
150 89,27 92,63 91,51 91,13 1,71
180 106,51 106,42 105,94 106,29 0,31
210 130,18 127,09 127,59 128,29 1,66
240 146,20 147,67 144,66 146,17 1,51
270 164,24 162,62 159,01 161,95 2,67
300 185,24 185,36 182,21 184,27 1,78
330 205,35 207,11 204,23 205,56 1,45
360 226,55 228,22 227,28 227,35 0,84
390 248,88 250,43 250,27 249,86 0,85
420 283,42 284,01 283,09 283,51 0,47
450 310,16 310,78 313,62 311,52 1,84
480 344,14 342,36 343,09 343,19 0,90
510 375,94 377,47 375,60 376,33 1,00
Lampiran 16. Data difusi indometasin dari gel formula 5
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 16. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 16. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 17.Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 5
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 2,97 5,94 3,24 4,05 1,64
15 10,54 11,08 9,48 10,37 0,81
30 13,65 14,22 14,11 13,99 0,30
60 19,66 18,90 20,71 19,76 0,91
90 28,28 27,15 26,19 27,21 1,05
120 36,20 34,95 35,80 35,65 0,64
150 44,10 47,86 45,84 45,93 1,88
180 57,34 56,05 58,99 57,46 1,47
210 69,35 68,71 68,44 68,83 0,47
240 80,73 81,10 80,26 80,70 0,42
270 91,09 91,48 89,22 90,60 1,21
300 100,28 101,24 104,99 102,17 2,49
330 114,36 116,20 115,74 115,43 0,96
360 131,05 131,16 132,26 131,49 0,67
390 144,33 146,57 143,45 144,78 1,61
420 161,88 162,41 160,34 161,54 1,08
450 175,43 175,14 176,14 175,57 0,51
480 192,34 191,44 192,03 191,94 0,46
510 206,69 207,29 207,41 207,13 0,39
Lampiran 19. Data difusi indometasin dari gel formula 6
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 19. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 19. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 20.Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 6
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 12,42 11,61 11,07 11,70 0,68
15 18,70 18,36 16,96 18,00 0,92
30 28,70 29,68 28,15 28,84 0,77
60 34,07 35,96 35,93 35,32 1,08
90 47,27 47,18 46,36 46,94 0,50
120 59,83 60,52 61,28 60,54 0,72
150 73,76 76,12 74,81 74,89 1,18
180 91,26 93,01 91,60 91,95 0,93
210 103,94 103,12 104,04 103,70 0,51
240 118,01 117,06 120,81 118,63 1,95
270 137,05 138,41 139,02 138,16 1,01
300 154,98 157,52 156,02 156,17 1,27
330 172,41 173,26 173,50 173,06 0,57
360 189,22 189,82 188,74 189,26 0,54
390 208,24 207,49 206,85 207,53 0,70
420 227,21 231,19 228,34 228,91 2,05
450 248,74 250,08 248,06 248,96 1,03
480 269,23 271,97 270,34 270,51 1,38
510 290,93 291,96 292,93 291,94 1,00
Lampiran 22. Data difusi indometasin dari gel formula 7
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 22. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 22. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 23.Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 7
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 22,95 22,68 23,22 22,95 0,27
15 42,09 39,36 37,25 39,57 2,42
30 52,27 51,99 50,22 51,49 1,11
60 67,91 67,36 65,44 66,90 1,29
90 83,52 82,14 81,42 82,36 1,07
120 100,35 103,19 101,63 101,72 1,42
150 121,12 122,10 117,48 120,23 2,44
180 136,67 144,77 133,02 138,15 6,01
210 157,99 161,71 157,06 158,92 2,46
240 182,87 181,20 174,68 179,58 4,33
270 201,81 199,89 193,78 198,49 4,20
300 223,59 216,55 212,55 217,56 5,59
330 240,57 239,58 236,02 238,72 2,39
360 273,29 261,16 258,89 264,44 7,74
390 300,76 287,53 288,85 292,38 7,29
420 324,50 322,86 317,02 321,46 3,93
450 347,84 348,97 339,59 345,47 5,12
480 372,56 377,53 365,39 371,82 6,10
510 407,38 408,68 390,88 402,31 9,92
Lampiran 25. Data difusi indometasin dari gel formula 8
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 25. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 25. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 26. Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 8
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 19,17 19,71 20,25 19,71 0,54
15 29,86 31,53 30,23 30,54 0,88
30 38,13 39,68 38,52 38,78 0,81
60 49,89 48,87 49,23 49,33 0,52
90 66,51 63,20 63,88 64,53 1,75
120 84,30 84,71 86,01 85,01 0,89
150 98,67 97,79 99,75 98,74 0,98
180 117,31 116,62 116,33 116,75 0,50
210 132,97 130,61 131,08 131,55 1,25
240 147,44 149,47 147,80 148,24 1,08
270 166,21 165,23 163,93 165,12 1,14
300 183,97 182,91 183,65 183,51 0,54
330 209,45 208,59 210,48 209,51 0,95
360 227,91 227,81 228,52 228,08 0,38
390 251,27 250,38 249,79 250,48 0,75
420 278,30 276,28 278,86 277,81 1,36
450 303,58 304,65 303,68 303,97 0,59
480 336,03 335,09 335,61 335,58 0,47
510 368,92 363,88 365,23 366,01 2,61
Lampiran 28. Data difusi indometasin dari gel formula 9
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 28. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 28. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 29. Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 9
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 37,26 38,61 34,02 36,63 2,36
15 48,27 49,75 50,40 49,47 1,09
30 59,98 62,12 62,88 61,66 1,50
60 74,28 74,98 73,94 74,40 0,53
90 87,57 86,13 84,75 86,15 1,41
120 104,79 103,72 103,86 104,12 0,58
150 124,37 119,12 123,90 122,46 2,90
180 145,61 142,29 144,84 144,24 1,74
210 170,45 160,65 168,29 166,46 5,15
240 191,30 177,67 191,12 186,69 7,81
270 218,71 201,53 213,70 211,31 8,83
300 247,01 223,62 242,38 237,67 12,39
330 270,48 257,17 274,41 267,35 9,04
360 303,92 282,08 301,85 295,95 12,06
390 336,59 309,54 327,10 324,41 13,72
420 363,93 343,21 359,85 355,66 10,98
450 394,50 373,02 394,24 387,25 12,33
480 425,55 402,81 423,29 417,21 12,53
510 458,66 429,49 453,11 447,09 15,49
Lampiran 31. Data difusi indometasin dari gel formula 10
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 31. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 31. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 32. Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 10
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 30,24 28,89 28,62 29,25 0,87
15 51,67 49,39 49,63 50,23 1,25
30 78,07 58,30 58,30 64,89 11,41
60 92,99 78,98 80,33 84,10 7,73
90 107,33 94,93 93,70 98,65 7,54
120 118,28 112,85 113,66 114,93 2,93
150 144,35 135,29 140,49 140,04 4,55
180 161,27 157,16 155,01 157,81 3,18
210 194,77 189,90 187,77 190,81 3,59
240 216,08 210,65 209,37 212,03 3,56
270 238,47 235,12 235,34 236,31 1,87
300 276,80 273,57 272,74 274,37 2,14
330 327,34 319,92 318,74 322,00 4,66
360 359,98 363,08 350,73 357,93 6,42
390 396,78 397,37 377,69 390,61 11,20
420 441,54 439,05 415,77 432,12 14,21
450 481,09 472,48 459,48 471,02 10,88
480 517,17 511,33 506,22 511,57 5,48
510 559,07 556,02 548,80 554,63 5,27
Lampiran 34. Data difusi indometasin dari gel formula 11
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 34. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 34. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 35. Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 11
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,27 0,27 0,18 0,16
5 20,25 17,31 17,31 18,29 1,70
15 31,31 31,87 31,87 31,68 0,32
30 46,18 38,18 38,18 40,84 4,62
60 62,45 57,50 57,50 59,15 2,86
90 75,28 71,58 71,58 72,81 2,14
120 87,49 87,34 91,39 88,74 2,30
150 105,96 103,78 104,15 104,63 1,17
180 129,61 123,84 126,92 126,79 2,89
210 158,81 152,10 153,00 154,64 3,64
240 185,30 185,16 182,84 184,43 1,38
270 215,12 215,18 210,16 213,49 2,88
300 239,28 237,92 236,18 237,79 1,56
330 268,17 269,83 267,40 268,47 1,24
360 301,60 299,27 297,98 299,62 1,84
390 327,99 326,93 330,43 328,45 1,79
420 364,63 364,16 363,99 364,26 0,33
450 402,68 403,12 401,32 402,37 0,94
480 429,95 433,27 431,59 431,60 1,66
510 468,26 467,41 466,69 467,45 0,79
Lampiran 37. Data difusi indometasin dari gel formula 12
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 37. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 37. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 38. Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
formula 12
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 23,76 24,03 22,68 23,49 0,71
15 30,82 36,25 36,39 34,49 3,17
30 51,29 49,39 49,83 50,17 1,00
60 63,69 64,53 65,02 64,41 0,67
90 76,84 78,54 78,54 77,97 0,98
120 100,19 100,40 99,05 99,88 0,73
150 131,38 132,37 130,89 131,54 0,75
180 155,85 160,40 161,23 159,16 2,90
210 185,21 185,01 184,59 184,93 0,32
240 212,22 215,16 210,39 212,59 2,40
270 241,64 244,50 244,44 243,53 1,64
300 274,10 273,90 277,94 275,31 2,28
330 311,10 308,08 313,08 310,75 2,52
360 340,78 340,62 340,43 340,61 0,18
390 370,10 370,95 372,06 371,03 0,98
420 405,70 405,49 405,60 405,60 0,11
450 436,47 437,26 437,07 436,93 0,42
480 479,10 480,46 473,20 477,59 3,86
510 513,30 515,28 507,86 512,14 3,84
Lampiran 40. Data difusi indometasin dari gel Jepang
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 40. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 40. (Lanjutan)
Jumlah IM mula-mula = 1000 µg
FP = Faktor pengenceran
FP = Volume medium untuk mencukupkan sampel (ml ) Volume cuplikan sampel (ml ) =
Lampiran 8. Jumlah rata-rata difusi indometasin yang berpenetrasi dari gel
Jepang
Waktu (Menit) Jumlah (µg) Rata-rata SD
Difusi I Difusi II Difusi III
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 18,63 18,09 18,36 18,36 0,27
15 29,54 29,22 31,13 29,96 1,03
30 46,69 48,24 45,20 46,71 1,52
60 65,20 64,73 63,82 64,58 0,70
90 85,05 82,38 84,36 83,93 1,39
120 104,64 106,57 104,71 105,30 1,10
150 124,88 124,32 125,52 124,90 0,60
180 148,71 145,93 146,72 147,12 1,43
210 174,72 173,04 172,28 173,35 1,25
240 201,64 198,49 199,27 199,80 1,64
270 236,17 236,55 237,14 236,62 0,49
300 264,57 265,86 265,69 265,37 0,70
330 294,74 296,21 295,20 295,38 0,75
360 331,59 328,10 329,15 329,61 1,79
390 371,83 374,25 370,27 372,11 2,00
420 409,94 408,32 411,26 409,84 1,47
450 454,47 452,99 463,79 457,08 5,86
480 501,26 502,38 503,92 502,52 1,34
510 533,61 537,85 537,82 536,43 2,44
Lampiran 43. Laju pelepasan indometasin dengan enhancer etanol
Waktu (Menit)
Etanol 3%
dC/dt (µg/menit)
Etanol 5%
dC/dt (µg/menit)
Etanol 7%
dC/dt (µg/menit)
0 0,18 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 32,60 6,48 19,44 3,89 21,33 4,27
15 41,10 0,85 31,50 1,21 31,05 0,97
30 47,96 0,46 45,68 0,95 42,83 0,79
60 60,79 0,43 55,16 0,32 52,75 0,33
90 77,43 0,55 68,76 0,45 64,35 0,39
120 89,86 0,41 78,45 0,32 77,53 0,44
150 104,99 0,50 96,45 0,60 91,13 0,45
180 122,45 0,58 108,64 0,41 106,29 0,51
210 141,58 0,64 127,87 0,64 128,29 0,73
240 156,68 0,50 145,68 0,59 146,17 0,60
270 181,97 0,84 163,83 0,61 165,37 0,64
300 200,87 0,63 185,69 0,73 184,58 0,64
330 223,63 0,76 214,85 0,97 205,88 0,71
360 245,07 0,71 240,99 0,87 227,67 0,73
390 267,38 0,74 275,93 1,16 250,17 0,75
420 295,27 0,93 307,58 1,06 283,82 1,12
450 319,35 0,80 340,15 1,09 311,84 0,93
480 350,42 1,04 379,51 1,31 343,51 1,06
510 383,39 1,10 416,00 1,22 376,65 1,10
Lampiran 44. Laju pelepasan indometasin dengan enhancer gliserin Waktu
(Menit)
Gliserin 45%
dC/dt (µg/menit)
Gliserin 50%
dC/dt (µg/menit)
Gliserin 55%
dC/dt (µg/menit)
Gliserin 60%
dC/dt (µg/menit)
0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
5 4,05 0,81 11,70 2,34 22,95 4,59 19,71 3,94
15 10,37 0,63 18,00 0,63 39,57 1,66 30,54 1,08
30 13,99 0,24 28,84 0,72 51,49 0,79 38,78 0,55
60 19,76 0,19 35,32 0,22 66,90 0,51 49,33 0,35
90 27,21 0,25 46,94 0,39 82,36 0,52 64,53 0,51
120 35,65 0,28 60,54 0,45 101,72 0,65 85,01 0,68
150 45,93 0,34 74,89 0,48 120,23 0,62 98,74 0,46
180 57,46 0,38 91,95 0,57 138,15 0,60 116,75 0,60
210 68,83 0,38 103,70 0,39 158,92 0,69 131,55 0,49
240 80,70 0,40 118,63 0,50 179,58 0,69 148,24 0,56
270 90,60 0,33 138,16 0,65 198,49 0,63 165,12 0,56
300 102,17 0,39 156,17 0,60 217,56 0,64 183,51 0,61
330 115,43 0,44 173,06 0,56 238,72 0,71 209,51 0,87
360 131,49 0,54 189,26 0,54 264,44 0,86 228,08 0,62
390 144,78 0,44 207,53 0,61 292,38 0,93 250,48 0,75
420 161,54 0,56 228,91 0,71 321,46 0,97 277,81 0,91
450 175,57 0,47 248,96 0,67 345,47 0,80 303,97 0,87
480 191,94 0,55 270,51 0,72 371,82 0,88 335,58 1,05
510 207,13 0,51 291,94 0,71 402,31 1,02 366,01 1,01
Lampiran 46. Laju pelepasan indometasin dari gel Jepang
Waktu (Menit) Gel Indometasin (Jepang) dC/dt (µg/menit)
0 0,00 0,00
5 18,36 3,67
15 29,96 1,16
30 46,71 1,12
60 64,58 0,60
90 83,93 0,65
120 105,30 0,71
150 124,90 0,65
180 147,12 0,74
210 173,35 0,87
240 199,80 0,88
270 236,62 1,23
300 265,37 0,96
330 295,38 1,00
360 329,61 1,14
390 372,11 1,42
420 409,84 1,26
450 457,08 1,57
480 502,52 1,51
510 536,43 1,13
Lampiran 47. Data uji statistik pengaruh etanol terhadap penetrasi indometasin
melalui kulit kelinci secara in vitro
H0: Tidak ada perbedaan yang signifikan konsentrasi indometasin yang berpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro antara formula yang mengandung etanol dan formula yang tidak mengandung etanol.
H1: Ada perbedaan yang signifikan konsentrasi indometasin yang berpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro antara formula yang mengandung etanol dan formula yang tidak mengandung etanol.
Descriptives
AUC total
N Mean Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence Interval
for Mean
Minimum Maximum Lower
Bound
Upper
Bound
BLANKO 3 2662.0600 13.84158 7.99144 2627.6756 2696.4444 2647.30 2674.75
Etanol 3 % 3 6086.2233 70.63092 40.77878 5910.7664 6261.6803 6040.96 6167.61
Etanol 5 % 3 6157.0567 225.94002 130.44653 5595.7906 6718.3228 5901.09 6328.74
Etanol 7 % 3 5763.1100 9.49711 5.48316 5739.5179 5786.7021 5755.12 5773.61
Total 12 5167.1125 1521.91281 439.33838 4200.1352 6134.0898 2647.30 6328.74
ANOVA
AUC total
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 2.537E7 3 8455255.225 600.522 .000
Within Groups 112638.805 8 14079.851
Lampiran 47. (Lanjutan)
Signifikansi = 0,000
0,000 < 0,05 = H0 ditolak, H1 diterima, Jadi ada perbedaan yang signifikan konsentrasi indometasin yang berpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro antara formula yang tidak mengandung etanol dan formula yang mengandung etanol.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
AUC total
Tukey HSD
(I) Etanol (J) Etanol
Statistics
Mean
Difference (I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower
Bound Upper Bound
BLANKO Etanol 3 % -3424.16333* 96.88430 .000 -3734.4210 -3113.9057
Etanol 5 % -3494.99667* 96.88430 .000 -3805.2543 -3184.7390
Etanol 7 % -3101.05000* 96.88430 .000 -3411.3076 -2790.7924
Etanol 3 % BLANKO 3424.16333* 96.88430 .000 3113.9057 3734.4210
Etanol 5 % -70.83333 96.88430 .002 381.0910 239.4243
Etanol 7 % 323.11333* 96.88430 .042 12.8557 633.3710
Etanol 5 % BLANKO 3494.99667* 96.88430 .000 3184.7390 3805.2543
Etanol 3 % 70.83333 96.88430 .002 239.4243 381.0910
Etanol 7 % 393.94667* 96.88430 .015 83.6890 704.2043
Etanol 7 % BLANKO 3101.05000* 96.88430 .000 2790.7924 3411.3076
Etanol 3 % -323.11333* 96.88430 .042 -633.3710 -12.8557
Etanol 5 % -393.94667* 96.88430 .015 -704.2043 -83.6890
Lampiran 48. Data uji statistik pengaruh gliserin terhadap penetrasi indometasin
melalui kulit kelinci secara in vitro
H0: Tidak ada perbedaan yang signifikan konsentrasi indometasin yang berpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro antara formula yang mengandung gliserin dan formula yang tidak mengandung gliserin.
H1: Ada perbedaan yang signifikan konsentrasi indometasin yang berpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro antara formula yang mengandung gliserin dan formula yang tidak mengandung gliserin.
Descriptives
AUC total
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence Interval
for Mean
Minimum Maximum Lower
Bound
Upper
Bound
BLANKO 3 2662.0600 13.84158 7.99144 2627.6756 2696.4444 2647.30 2674.75
Gliserin 45 % 3 3156.2867 5.70794 3.29548 3142.1073 3170.4660 3152.33 3162.83
Gliserin 50 % 3 4613.2200 15.22809 8.79194 4575.3913 4651.0487 4596.08 4625.19
Gliserin 55 % 3 6564.7900 92.86479 53.61551 6334.1011 6795.4789 6458.71 6631.40
Gliserin 60 % 3 5705.1033 14.66696 8.46797 5668.6686 5741.5381 5688.55 5716.48
Total 15 4540.2920 1529.01362 394.78962 3693.5525 5387.0315 2647.30 6631.40
ANOVA
AUC total
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 3.271E7 4 8177941.722 4399.082 .000
Within Groups 18590.108 10 1859.011
Lampiran 48. (Lanjutan)
Signifikansi = 0,000
0,000 < 0,05 = H0 ditolak, H1 diterima, Jadi ada perbedaan yang signifikan konsentrasi indometasin yang berpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro antara formula yang tidak mengandung gliserin dan formula yang mengandung gliserin.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
AUC total
Tukey HSD
(I) Gliserin (J) Gliserin
Mean
Difference (I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
BLANKO Gliserin 45 % -494.22667* 35.20427 .000 -610.0868 -378.3665
Gliserin 50 % -1951.16000* 35.20427 .000 -2067.0201 -1835.2999
Gliserin 55 % -3902.73000* 35.20427 .000 -4018.5901 -3786.8699
Gliserin 60 % -3043.04333* 35.20427 .000 -3158.9035 -2927.1832
Gliserin 45 % BLANKO 494.22667* 35.20427 .000 378.3665 610.0868
Gliserin 50 % -1456.93333* 35.20427 .000 -1572.7935 -1341.0732
Gliserin 55 % -3408.50333* 35.20427 .000 -3524.3635 -3292.6432
Gliserin 60 % -2548.81667* 35.20427 .000 -2664.6768 -2432.9565
Gliserin 50 % BLANKO 1951.16000* 35.20427 .000 1835.2999 2067.0201
Gliserin 45 % 1456.93333* 35.20427 .000 1341.0732 1572.7935
Gliserin 55 % -1951.57000* 35.20427 .000 -2067.4301 -1835.7099
Gliserin 60 % -1091.88333* 35.20427 .000 -1207.7435 -976.0232
Gliserin 55 % BLANKO 3902.73000* 35.20427 .000 3786.8699 4018.5901
Gliserin 45 % 3408.50333* 35.20427 .000 3292.6432 3524.3635
Gliserin 50 % 1951.57000* 35.20427 .000 1835.7099 2067.4301
Gliserin 60 % 859.68667* 35.20427 .000 743.8265 975.5468
Lampiran 49. Data uji statistik pengaruh kombinasi etanol dan gliserin terhadap
penetrasi indometasin melalui kulit kelinci secara in vitro
H0: Tidak ada perbedaan yang signifikan konsentrasi indometasin yang berpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro antara formula yang mengandung kombinasi etanol dan gliserin dan formula yang tidak mengandung kombinasi etanol dan gliserin.
H1: Ada perbedaan yang signifikan konsentrasi indometasin yang berpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro antara formula yang mengandung kombinasi etanol dan gliserin dan formula yang tidak mengandung kombinasi etanol dan gliserin.
Descriptives
AUC total
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence Interval
BLANKO 3 2662.0600 13.84158 7.99144 2627.6756 2696.4444 2647.30 2674.75
Etanol 3 % &
Gliserin 45 %
3 7195.8400 224.82256 129.80137 6637.3498 7754.3302 6939.08 7357.40
Etanol 5 % &
Gliserin 45 %
3 8113.1200 18.07869 10.43773 8068.2101 8158.0299 8100.92 8133.89
Etanol 7 % &
Gliserin 45 %
3 7207.3633 23.60604 13.62895 7148.7227 7266.0040 7187.29 7233.37
Etanol 5 % &
Gliserin 55 %
3 8624.6200 146.17831 84.39609 8261.4929 8987.7471 8477.55 8769.89
Total 15 6760.6007 2197.70668 567.44542 5543.5513 7977.6501 2647.30 8769.89
ANOVA
AUC total
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 6.747E7 4 1.687E7 1155.531 .000
Within Groups 145977.915 10 14597.792
Lampiran 49. (Lanjutan)
Signifikansi = 0,000
0,000 < 0,05 = H0 ditolak, H1 diterima, Jadi ada perbedaan yang signifikan konsentrasi indometasin yang berpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro antara formula yang tidak mengandung kombinasi etanol dan gliserin dan formula yang mengandung kombinasi etanol dan gliserin.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
AUC total
Tukey HSD
(I) Etanol & Gliserin
(J) Etanol
& Gliserin
Mean
Difference (I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower
Bound Upper Bound
BLANKO Etanol 3 %
& Gliserin
45 %
-4533.78000* 98.65020 .000 -4858.4459 -4209.1141
Etanol 5 %
& Gliserin
45 %
-5451.06000* 98.65020 .000 -5775.7259 -5126.3941
Etanol 7 %
& Gliserin
45 %
-4545.30333* 98.65020 .000 -4869.9692 -4220.6374
Etanol 5 %
& Gliserin
55 %
-5962.56000* 98.65020 .000 -6287.2259 -5637.8941
Etanol 3 % & Gliserin 45 % BLANKO 4533.78000* 98.65020 .000 4209.1141 4858.4459
Etanol 5 %
& Gliserin
45 %
-917.28000* 98.65020 .000 -1241.9459 -592.6141
Etanol 5 % & Gliserin 45 % BLANKO 5451.06000* 98.65020 .000 5126.3941 5775.7259
Etanol 3 %
& Gliserin
45 %
917.28000* 98.65020 .000 592.6141 1241.9459
Etanol 7 %
& Gliserin
45 %
905.75667* 98.65020 .000 581.0908 1230.4226
Etanol 5 %
& Gliserin
55 %
-511.50000* 98.65020 .003 -836.1659 -186.8341
Etanol 7 % & Gliserin 45 % BLANKO 4545.30333* 98.65020 .000 4220.6374 4869.9692
Etanol 3 %
& Gliserin
45 %
11.52333 98.65020 .000 -313.1426 336.1892
Etanol 5 %
& Gliserin
45 %
-905.75667* 98.65020 .000 -1230.4226 -581.0908
Etanol 5 %
& Gliserin
55 %
-1417.25667* 98.65020 .000 -1741.9226 -1092.5908
Etanol 5 % & Gliserin 55 % BLANKO 5962.56000* 98.65020 .000 5637.8941 6287.2259
Etanol 3 %
& Gliserin
45 %
1428.78000* 98.65020 .000 1104.1141 1753.4459
Etanol 5 %
& Gliserin
45 %
511.50000* 98.65020 .003 186.8341 836.1659
Etanol 7 %
& Gliserin
45 %
1417.25667* 98.65020 .000 1092.5908 1741.9226
Lampiran 50. Gambar alat
A. Alat-alat untuk uji difusi
Termometer pH meter
B. Alat pengukur konsentrasi indometasin yang terpenetrasi melalui kulit kelinci secara in vitro
DAFTAR PUSTAKA
Aiache, J.M., Devissaguet, J., and Guyot-herman, A.M. (1993). Farmasetika Biofarmasi . Penerjemah : Widji Soerartri, Dr. Surabaya: Airlangga University Press. Halaman 178-179 dan 247-248.
Akhtar, N., Rehman, M.U., Khan, H.M.S., Rasool, F., Saeed, T., dan Murtaza, G. (2011). Penetration Enhancing Effect of Polysorbate 20 and 80 on the In Vitro Percutaneous Absorption of L-Ascorbic Acid. Tropical Journal of Pharmaceutical Research. 10(3): 281-288.
Amelia, R. (2014). Studi Efek Tween 80, Minyak Inti Sawit dan Produk Konversinya terhadap Penetrasi Indometasin melalui Kulit Kelinci secara In Vitro dari Basis Salep Hidrokarbon. Skripsi. Medan: Universitas Sumatera Utara. Halaman 45-47.
Ammar, H.O., M.Ghorabb, S.A., El-Nahhasa., dan Kamela, R. (2007). Evaluation of Chemical Penetration Enhancer for Transdermal Delivery of aspirin. Asian Journal of Pharmaceutical sciences. 2(3): 96-105.
Anderson, T. (2012). Alginate as Biomaterials in Tissue Engencering. Charbohydr. Chem. 37(1): 227-228.
Anggraeni, Y. (2012). Pengaruh Etanol dan Asam Oleat Terhadap Penetrasi Transdermal Nanoemulsi Glukosamin Secara In Vitro Menggunakan Sel Difusi Franz. Skripsi. Depok: Universitas Indonesia. Halaman 53-54.
Aniroh, S. (2015). Studi Efek Minyak Wijen, Minyak Almond, dan Minyak Zaitun Terhadap Penetrasi Indometasin Melalui Kulit Kelinci Secara In Vitro dari Basis Gel Alginat. Skripsi. Medan: Universitas Sumatera Utara. Halaman 49-51.
Ansel, H.C. (1989). Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, diterjemahkan oleh Farida Ibrahim, Edisi Keempat. Jakarta: Universitas Indonesia Press. Halaman 313.
Bhowmik, D., Dasari, V., Duraivel, S., dan Kumar, K.P.S. (2013). Recent Trends In Penetration Enhancer Used In Transdermal Drug Delivery System. The Pharma Innovation – Journal. 2(2): 127-134.
Bjorklund, S., Johan, E., Krister, T. dan Emma, S. (2013). Glycerol and Urea Can Be Used to Increased Skin Permeability in Reduced Hydration Conditions. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 50(5): 638-645.
Chien, Y.W. (Ed). (1987). Transdermal Controlled Systemic Medications. New York and Basel: Marcel Dekker. Halaman 557-560.
Choi, M.Q., Man, F.S., Wang, X.J., Zhang, B.E., Brown, K.R. dan Feingold, P.M. (2005). Is endogenous glycerol a determinant of stratum corneum hydration in humans?. J. Invest. Dermatol. 125 (2005): 288–293.
Dermawan, A., Arianto, A., dan Bangun, H. (2013). Study Of The Effects of Tween 80 and Palm Kernel Oil on in vitro Ascorbic Acid Penetration Through Rabbit Skin. International Journal of Pharm Tech Research. 5(3): 965-972.
Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 310-311.
Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi Keempat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 1124-1210.
Faroza, R. (2008). Pengaruh Etanol Terhadap Karakteristik Fisikokimia Sediaan dan Peningkat Penetrasi Piroksikam dalam Basis Gel Carbomer ETD 2020. Skripsi. Surabaya: Universitas Airlangga. Halaman 43-47.
Foye, W.O. (1996). Principles of Medicinal Chemistry. Philadelphia: Lea and Febiger. Halaman 886.
Hadgraft, J. (2004). Skin Deep. Europen Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 58(2): 291-299.
Harding, C.R., Watkinson, A., Rawlings, A.V. dan Scott, I.R. (2000). Dry Skin, Moisturization and Corneodesmolysis. International Journal Cosmetology and Sciences. 22(2000): 21-52.
Insel, P.A. (1990). Dalam: The Pharmacological Basic of Therapeutics. Gilman, A.G., Rall, T.W., Nies, A.S., Taylor, P. Edisi VIII. New York: Pergamon Press. Halaman 639-681.
Kumar, K.P.S., Bhowmik, D., Chiranjib, B., dan Chandira, M. (2010). Transdermal Drug Delivery System-A Novel Drug Delivery System and Its Market Scope and Oppurtunities. International Journal of Pharma and Bio Sciences. 1(2): 1-21.
Kurniawan, A. (2014).Pengaruh Konsentrasi Gliserin Terhadap Laju Penetrasi Ibuprofen dalam Sediaan Gel Dispersi Padat Ibuprofen-PEG 6000 (1:1,5). Skripsi. Jember: Universitas Jember. Halaman 44-45.
Lademann, J., Otberg, N., Richter, H., Jacobi, U., Schaefer, H., Blume, P.U., dan Sterry, W. (2003). Follicular Penetration: An Important Pathway for Topically Applied Subtances. Hautarzt. 54: 321-323.
Langley, Leroy, L. (1980). Dynamic Anatomy and Physiology. United State of America: McGraw-Hill. Halaman 66-70.
Lombry, C., Dujardin, N., dan Preat, V. (2000). Transdermal Delivery of Macromolecules Using Electroporation. Journal of Pharmaceutical Research. 17(1): 32-37.
Luciano, Dorothy, S. (1978). Human Function and Structure. United State of America: McGraw-Hill. Halaman 84-87.
Marbun, S. (2015). Studi Penetrasi Indometasin secara In Vitro melalui Kulit Kelinci dengan menggunakan Minyak Esensial sebagai Enhancer. Skripsi. Medan: Universitas Sumatera Utara. Halaman 48-50.
Martin, A., Swarbrick, J., dan Cammarata, A. (1993). Farmasi Fisik. Edisi Ketiga. Jakarta : UI-Press. Halaman 827-832.
Mishra, A.N. (1998). Transdermal Drug Delivery. In: Jain NK. Editor: Controlled and Novel Drug Delivery. New Delhi: Varghese Publication: Halaman 100-129.
Moffat, A.C. , Osselton, M.D., dan Widdop, B. (2005). Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons. London: Pharmaceutical Press. Halaman 366-369.
Moser, K., Kriwet, K., Naik, A., Kalia, Y.N., dan Guy, R.H. (2001). Passive Skin Penetration Enhancement and Its Quantification In Vitro. Eur. J. Pharm. Biopharm. 52(2): 103-112.
Pathan, I.B., dan Setty, C.M. (2009). Chemical Penetration Enhancers for Transdermal Drug Delivery Systems. Tropical journal of Pharmaceutical Research. 8(2): 173-179.
Prakash, U.R.T., dan Thiagarajan, P. (2012). Transdermal Drug Delivery System Influencing Factors, Study Methods and Therapeutic Application. International journal of Pharmacy. 2(2): 366-374.
Ramarao, P., dan Diwan, P.V. (1998). Formulation and in Vitro Evaluation of Polymeric Films of Diltiazem Hydrochloride and Indomethacin for Transdermal Administration. Drug Development and Industrial Pharmacy. 24(4): 327-336.
Ramteke, K.H., Dhole, S.N., dan Patil, S.V. (2012). Transdermal Drug Delivery System: A Review. Journal of Advanced Scientific Research. 3(1): 22-35.
Rowe, R.C., Sheskey, P., dan Owen, S.C. (Ed). (2006). Handbook of Pharmaceutical Excipients. 5th Edition. London: Pharmaceutical Press. Halaman 283-285.
Saurabh, V.N., Lalita, L., Nemade, Maya, T., Desai, Shailejkumar, D., Bonde, dan Shweta, U.D. (2014). Chemical Penetration Enhancer: For Transdermal Drug Delivery System. International Journal of Pharmacy Review dan Research. 4(1):33-40.
SDA. (1990). Glycerine: An Overview. New York: The Soap and Detergent Association. Halaman 6.
Setiadi, N., Arifin, M.F., Ade, R. (2011). Pengaruh Etanol 96% Terhadap Difusi Salbutamol Sulfat dalam Sediaan Transdermal Sistem Matriks Kombinasi Povidon-Etilselulosa Melalui Membran Millipore-Isoprofil Miristat. Farmasains, vol 1, no. 4. Halaman 157, 163.
Sharma, G,N., Sanadya, J., Kaushik, A., Dwivedhi, A. (2012). Penetration Enhancement of Medicinal Agent. International Research Journal of Pharmacy. 3(5): 82-85.
Smolinske, S.C. (1992). Handbook of Food, Drug and Cosmetic Excipients. USA: CRC Press. Halaman 199-203.
Sun, J., dan Huaping, T. (2013). Alginate-Based Biomaterial for Regenerative Medicine Application. China: Journal Materials. 6: 1285-1309.
Taketoshi, I., Toshihiro, S., Miyuki, M., Yutaka, O., dan Toshio, T. (2001). Skin Penetration by Indomethacin /Smectite Complex. Journal of Supramolecular Chemistry. I: 217-219.
Tjay, T.H., dan Rahardja, K. (2008). Obat-Obat Penting. Edisi Keenam. Jakarta: PT. Elex Media Komputindo. Halaman 330-334.
Tortora, G., dan Grabowski, S. (2006). The Integumentary System. In: Principles of Anatomy and Physiology. 9th Edition. John Wiley and Sons Inc. Halaman 150-151.
Trenggono, Retno, I., Latifah dan Fatma. (2007). Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama. Halaman 12-13.
Trommer, H., dan Neubert, R.H.H. (2006). Overcoming The Stratum Corneum: The Modulation of Skin Penetration. Skin Pharmacology and Physiology. 19: 106-121.
Walters, Kenneth, A., dan Keith, R. (2002). The Structure and Function of Skin. In Kenneth A. Walters (Ed). Dermatological and Transdermal Formulations. New York: Marcel Dekker, Inc. Halaman 453-461.
Walter, K.A., dan Hadgraf, J. (1993). Pharmaceutical Skin Penetration Enhancement. New York: Marcel Dekker, Inc. Halaman 365-369.
Wasitaatmadja, S.M. (1997). Penuntun Ilmu Kosmetik Medik. Penerbit Jakarta: Universitas Indonesia. Halaman 3-5.
Wilkosz, M.F., dan Bogner, R.H. (2003). Transdermal Drug Delivery. US. Pharmacist. 28(4): 603.
BAB III
METODE PENELITIAN
Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimen, meliputi
pembuatan sediaan gel indometasin dengan basis gel alginat yang dibuat dalam 12
formula gel menggunakan peningkat penetrasi (enhancer) etanol, gliserin dan
campuran etanol dengan gliserin, kemudian dibandingkan dengan gel indometasin
dari Jepang, dan diukur laju difusi dari masing-masing enhancer menggunakan sel
difusi. Jumlah indometasin terpenetrasi kedalam larutan dapar fosfat pH 7,4
ditentukan menggunakan spektrofotometer UV pada panjang gelombang 265,0
nm. Semua pengujian diulangi sebanyak 3 kali selama 9 jam.
3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat-alat
Sel difusi yang terdiri dari sel donor dan sel reseptor dengan volume
masing-masing 10,8 ml dan luas permukaan sel difusi 1,28 cm2,spektrofotometer
(UV-1800 Shimadzu Spectrophotometer), magnetic stirrer (Boeco), magnetic bar,
pH meter (Hanna), penunjuk waktu (stopwatch), neraca analitik (Ohaus),
mikrometer skrup (Delta Corporation), lumpang dan stamfer,gelas ukur (Pyrex),
beaker gelas (Pyrex), labu tentukur (Pyrex), maat pipet (Pyrex), termostat (MGW
Lauda), lemari pendingin Glacier (Nuaire), gelas arloji, dan seperangkat alat
difusi.
3.1.2Bahan-bahan
Indometasin (Wako pure chemical industries, Ltd Japan), etanol (Merck),
fosfat (Merck), natrium hidroksida (Merck), natrium klorida (Merck), silicone
grease, natrium alginat (Wako pure chemical industries, Ltd Japan), kalsium
klorida (Merck), metil paraben (Merck),dan akuades.
3.2 Prosedur Penelitian 3.2.1 Pembuatan pereaksi
3.2.1.1 Pembuatan akuades bebas karbon dioksida
Akuades dididihkan selama 5 menit atau lebih dan didiamkan sampai
dingin dan tidak boleh menyerap karbon dioksida dari udara (Ditjen, POM, 1995).
3.2.1.2 Pembuatan larutan natrium hidroksida 0,2 N
Natrium hidroksida sebanyak 8 gram dilarutkan dalam air bebas
karbondioksida hingga 1000 ml (Ditjen, POM, 1995).
3.2.1.3 Pembuatan medium dapar fosfat (pH 7,4)
Kalium dihidrogen fosfat sebanyak 6,8 gram dilarutkan dalam 250 air
suling bebas CO2, lalu ditambahkan natrium hidroksida 0,2 N sebanyak 195,5 ml,
lalu ditambahkan air bebas karbondioksida hingga volumenya 1000 ml (Ditjen,
POM, 1995).
3.2.1.4 Pembuatan larutan natrium klorida 0,9%
Natrium klorida sebanyak 9 gram dilarutkan dalam air bebas
karbondioksida hingga 1000 ml (Ditjen, POM, 1995).
3.2.2 Pembuatan kurva serapan dan kurva kalibrasi larutan indometasin dalam medium dapar fosfat (pH 7,4)
kemudian dicukupkan dengan medium pH 7,4 sampai garis tanda. Konsentrasi
Indometasin adalah 50 ppm (mcg/ml).
3.2.2.2 Pembuatan blanko dan penentuan baseline
Pelarut dimasukkan kedalam kedua kuvet sebagai blanko, kemudian
diukur absorbansinya sehingga didapat baseline untuk pengukuran sampel.
3.2.2.3 Pembuatan kurva serapan indometasin
Larutan induk baku dipipet 5 ml, dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml
kemudian dicukupkan dengan medium pH 7,4 sampai garis tanda, dikocok sampai
homogen. Konsentrasi indometasin adalah 10 ppm (mcg/ml). Diukur serapannya
dengan spektrofotometer uv pada panjang gelombang 200-360nm.
3.2.2.4 Pembuatan kurva kalibrasi indometasin
Dari larutan induk baku indometasin dibuat larutan dengan berbagai
konsentrasi yaitu: 0,3; 1; 4; 8; 10; 12; 14; 16 dan 18 ppm dengan memipet larutan
induk baku masing-masing 0,15; 0,5; 2; 4; 5; 6; 7; 8 dan 9 ml dimasukkan ke
dalam labu ukur 25 ml kemudian dicukupkan dengan medium pH 7,4 sampai
garis tanda, dikocok sampai homogen. Diukur serapannya dengan
Spektrofotometer UV pada panjang gelombang 265,0nm.
3.2.3 Penyiapan membran biologis
Pada penelitian ini digunakan kulit dari kelinci jantan dengan berat
berkisar antara 1,5-2 kg. Rambut pada daerah abdomen dicukur dengan hati-hati
menggunakan pisau cukur (Gillette Goal). Pencukuran dilakukan sehari sebelum
pengambilan kulit untuk mengkondisikan kulit sesuai lingkungan. Kelinci
dimatikan dengan cara dibius dengan dietil eter dan kulit bagian abdomen
dengan akuades, dibungkus dengan aluminium foil, dan disimpan segera pada
suhu -50°C (lemari pembeku bersuhu sangat rendah, Sanyo, Japan) sampai
eksperimen dilakukan(Akhtar, et al, 2011). Pada waktu kulit mau dipakai, kulit
direndam dengan larutan NaCl 0,9% selama 24 jam.
3.2.4 Pembuatan basis gel dengan alginat
Pembuatan basis gel dengan alginat sesuai dengan pembuatan basis gel
pada penelitian sebelumnya. Komposisi dasar gel alginat:
R/ Kalsium klorida 0,025 g
Natrium alginat 1,5 g
Metil paraben 0,01 g
Akuades ad 50 g
Ditimbang natrium alginat sebanyak 1,5 g, dikembangkan diatas akuades
secukupnya, dibiarkan selama 1 malam hingga mengembang. Ditambahkan
kalsium klorida yang telah dilarutkan dalam akuades, dan ditambahkan dengan
metil paraben yang telah dilarutkan dalam air panas, gerus hingga homogen.
Kemudian masukkan ke dalam pot plastik (Bangun, 2001).
3.2.5 Pembuatan gel indometasin
Komposisi formula gel indometasin tanpa dan dengan berbagai peningkat
penetrasi dapat dilihat pada Tabel 3.1.
Cara pembuatan gel indometasin :
Tabel 3.1 Komposisi formula gel indometasin tanpa dan dengan berbagai bahan
peningkat penetrasi
FORMULA NAMA BAHAN
Indometasin (g) Etanol (g) Gliserin (g) Gel Alginat (g) ad
1 0,02 - - 2
2 0,02 0,06 - 2
3 0,02 0,1 - 2
4 0,02 0,14 - 2
5 0,02 - 0,9 2
6 0,02 - 1 2
7 0,02 - 1,1 2
8 0,02 - 1,2 2
9 0,02 0,06 0,9 2
10 0,02 0,1 0,9 2
11 0,02 0,14 0,9 2
12 0,02 0,1 1,1 2
3.2.6Uji penetrasi indometasin dalam sediaan gel secara In Vitro
Untuk pengujian gel indometasin, membran biologisdengan luas 1 inchi
kuadrat (panjang = 1 inchi; lebar = 1 inchi) dan tebal 0,32 mm direndam terlebih
dahulu sebelumnya dengan NaCl 0,9% selama 24 jam, dikeringkan dengan tisu
kemudian diolesi 0,10 g gel indometasin F1 sampai F12 dan gel pembanding, yaitu
gel indometasin dari Jepang sebanyak 0,10 g juga, menggunakan sarung tangan
karet.Kemudian dipasangkan pada sel difusi yang telah diolesi silicone grease dan
dihubungkan bagian donor dan reseptor dengan karet. Selanjutnya dimasukkan
magnetic bar ke dalam bagian reseptor dan dimasukkan juga larutan dapar fosfat
sampai batas tanda. Sel difusi dijaga pada suhu 37ºC menggunakan termostat
selama percobaan dan pada interval waktu tertentu dipipet 1 ml aliquot,
diencerkan 25 kali, dan diukur absorbansinya dengan spektrofotometer UV pada
panjang gelombang 265,0 nm.Setiap pengujian dilakukan selama 9 jam dan
Skema uji penetrasi indometasin melalui kulit kelinci secara in vitro dapat
dilihat pada Gambar 3.1 dibawah ini (Martin, et al., 1993).
Donor Reseptor
Membran biologis
Batanganmagnet
Gambar 3.1 Skema uji penetrasi gel indometasin melalui kulit kelinci
secara In Vitro
3.2.7 Analisa statistik
Semua data yang diperoleh dianalisa dengan one way ANOVA kemudian
dilanjutkan dengan Uji Post Hoc yang dianalisa dengan Tukey HSD menggunakan
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Pengaruh Konsentrasi Etanol Terhadap Penetrasi Indometasin Melalui Kulit Kelinci Secara In Vitro
Pengaruh konsentrasi etanol dalam formula gel terhadap penetrasi
indometasin melalui kulit kelinci dapat dilihat pada Gambar 4.1 dan nilai AUC
indometasin yang terpenetrasi dari masing-masing formula ke dalam medium
dapar fosfat pH 7,4 pada suhu 370Cdapat dilihat pada Tabel 4.1.
Gambar 4.1 Pengaruh etanol terhadap penetrasi indometasin melalui kulit
kelinci dari gel alginat dalam medium dapar fosfat pH 7,4 pada suhu 370C secara in vitro
Tabel 4.1 Nilai AUC dari gel yang mengandung enhancer etanol dan tanpa
enhancer
F2 = Gel alginat yang mengandung Etanol 3% F3 = Gel alginat yang mengandung Etanol 5% F4 = Gel alginat yang mengandung Etanol 7%
Dalam Gambar 4.1 dan Tabel 4.1 menunjukkan bahwa jumlah
indometasin yang terpenetrasi ke medium penerima lebih besar pada formula yang
mengandung enhancer etanol daripada formula yang tidak mengandung enhancer,
dan perbedaan ini adalah signifikan berdasarkan uji statistik (One Way ANOVA, P
< 0,05, uji Post Hoc dianalisis dengan Tukey). Semakin besar konsentrasi etanol
yang digunakan, semakin besar pula jumlah indometasin yang
terpenetrasi.Berdasarkan uji statistik (One Way ANOVA, P < 0,05, uji Post Hoc
dianalisis dengan Tukey) terdapat perbedaan yang signifikan pada berbagai
konsentrasi etanol yang digunakan, yaitu F2 berbeda secara signifikan dengan F3
dan F4, dan antara F3 dan F4 juga terdapat perbedaan yang signifikan.
Pada penelitian terdahulu telah diteliti etanol sebagai peningkat penetrasi
dengan rentang konsentrasi 5% - 10% dengan zat aktif piroksikam dalam basis gel
carbomer ETD 2020 (Faroza, 2008). Selain itu, peningkatan penetrasi yang terjadi
juga diduga karena etanol dapat meningkatkan kelarutan indometasin dalam
pembawanya. Menurut William dan Barry (2004), mekanisme aksi potensial
lainnya yang mungkin dan perlu dipertimbangkan dari enhancer adalah
kemampuannya dalam meningkatkan kelarutan obat dalam pembawanya. Hasil
ini sesuai dengan penelitian Setiadi, dkk., (2011), bahwa etanol dapat
meningkatkan penetrasi salbutamol, dimana konsentrasi 3% etanol memberikan
penetrasi tertinggi. Etanol dapat meningkatkan penetrasi obat melalui kulit jika
Gambar 4.2Pengaruh konsentrasi etanol terhadap penetrasi indometasin melalui
kulit kelinci dari gel alginat dalam medium dapar fosfat pH 7,4 pada suhu 370C secara in vitropada menit ke-270
Dalam Gambar 4.2 menunjukkan bahwajumlah indometasin yang
terpenetrasi cenderung meningkat dengan meningkatnya konsentrasi etanol
sampai 5%, tetapi pada konsentrasi 7% penetrasi menurun. Hal ini disebabkan
karena mekanisme etanol yang bekerja dengan cara melarutkan lipid yang
terdapat pada stratum korneum yang akan mengubah permeabilitas kulit, (Walters
dan Hadgraft, 1993), sehingga semakin tinggi konsentrasietanolmaka semakin
banyak lapisan lipid yang larut dan menyebabkanair pada kulit akan menguap,
dengan hilangnya air yang berlebihan pada kulit akan menyebabkan dehidrasi
pada kulit. Apabila kulit sudah dehidrasi maka kulit akan mengeras dan
mengkerut sehingga obat akan susah menembus kulit.Dengan demikian, jumlah
indometasin terpenetrasi kedalam medium penerima juga semakin kecil.Hal ini
menunjukkan bahwa dengan meningkatnya penetrasi indometasin tidak linier
dengan bertambahnya konsentrasi etanol.
4.2 Pengaruh Konsentrasi Gliserin Terhadap Penetrasi Indometasin Melalui Kulit Kelinci Secara In Vitro
Pengaruh konsentrasi gliserindalam formula gel terhadap penetrasi
indometasin melalui kulit kelinci dapat dilihat pada Gambar 4.3 dan nilai AUC
indometasin yang terpenetrasi dari masing-masing formula ke dalam medium
dapar fosfat pH 7,4 pada suhu 370C dapat dilihat pada Tabel 4.2.
Gambar 4.3Pengaruh gliserin terhadap penetrasi indometasin melalui kulit
kelinci dari gel alginat dalam medium dafar fosfat pH 7,4 pada suhu 370Csecara in vitro
Tabel 4.2Nilai AUC dari gel yang mengandung enhancer gliserin dan tanpa
Dalam Gambar 4.3 dan Tabel 4.2 menunjukkan bahwa jumlah
indometasin yang terpenetrasi ke medium penerima lebih besar pada formula yang
mengandung enhancer gliserin daripada formula yang tidak mengandung
enhancer, dan perbedaan ini adalah signifikan berdasarkan uji statistik (One Way
ANOVA, P < 0,05, uji Post Hoc dianalisis dengan Tukey). Semakin besar
konsentrasi gliserin yang digunakan, semakin besar pula jumlah indometasin yang
terpenetrasi, kecuali pada F8 dengan konsentrasi 60%, jumlah indometasin yang
terpenetrasi menurun. Berdasarkan uji statistik (One Way ANOVA, P < 0,05, uji
Post Hoc dianalisis dengan Tukey) terdapat perbedaan yang signifikan pada
berbagai konsentrasi gliserin yang digunakan, yaitu F5 berbeda secara signifikan
dengan F6, F7 dan F8, F6 berbeda secara signifikan dengan F7 dan F8, dan antara
F7 dan F8 juga terdapat perbedaan yang signifikan.
Pada penelitian yang dilakukan oleh Kristanto, 2011, dibuat variasi
konsentrasi gliserin 0, 10, 20, 30, 40% dan diperoleh hasil bahwa kelarutan
indometasin meningkat seiring dengan peningkatan konsentrasi gliserin yang
digunakan, sehingga daya penetrasi obat menembus kulit juga meningkat. Salah
satu cara yang dapat ditempuh untuk meningkatkan kelarutan obat adalah dengan
penggunaan sistem kosolven. Kosolven yang dapat dipakai dalam sediaan
parenteral diantaranya adalah gliserin. Gliserin merupakan pelarut organik yang
mempunyai gugus poliol yang mampu meningkatkan kelarutan bahan obat dalam
air (Kristanto, 2009). Kosolven dapat meningkatkan kelarutan bahan obat
sehingga dapat meningkatkan penetrasinya melalui membran kulit untuk
mencapai tempat aksinya.
Gliserin adalah contohdarikomponenNMF (Natural Moisturizing
sekelompokmolekulhigroskopisyangsecara alami terdapat dalamkulit
danmelindungi kulit daripengeringanparah (Bjorklund, et al, 2013). Namun,jelas
bahwafungsipenghalangsertasifat mekanikSCtidakhanya tergantung padakadar
air, tetapi yang lebih penting dalam menghidrasi kulit (Bjorklund, et al,
2013).Pelembabadalah zatyang biasa digunakanuntuk pengobatanatau
pencegahankondisikulit keringyang rusakuntuk membuatstratum
korneumlebihlembut dan lentur. Faktor pelembabalami(NMF), yang merupakan
campurandariasamaminobebas danturunannya, garam anorganik, asam laktat,
urea, dangliserol. Dengan adanya penambahan gliserin dapat meningkatkan
penetrasi obat melalui kulit karena gliserin dapat meningkatkan hidrasi kulit (Choi
etal., 2005 danHardingetal., 2000).
Jumlah indometasin yang terpenetrasi ke dalam medium penerima paling tinggi
adalah konsentrasi gliserin 55%.
Gambar 4.4 Pengaruh konsentrasi gliserin terhadap penetrasi indometasin
