DETERMINASI STRAIN RENTAN
HOMOZIGOT
PADA
Aedes aegypti
(Linn) DENGAN METODE
SELEKSI INDUKAN TUNGGAL
ISFANDA
SEKOLAH PASCASARJANA
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN
SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA*
Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis berjudul Determinasi Strain RentanHomozigot pada Aedes aegypti dengan Metode Seleksi Indukan Tunggal adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini.
Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut Pertanian Bogor.
Bogor, September 2014
Isfanda
RINGKASAN
ISFANDA. Determinasi Strain Rentan Homozigot pada Aedes aegypti dengan Metode Seleksi Indukan Tunggal. Dibimbing oleh UPIK KESUMAWATI HADI dan SUSI SOVIANA
Pengendalian umumnya dilakukan dengan tiga cara yaitu fisik, biologik, dan kimia. Aplikasi insektisida merupakan cara yang paling umum digunakan. Di samping keunggulan dalam penurunan populasi vektor yang cepat, aplikasi satu jenis insektisida yang berulang dalam jangka panjang dapat menimbulkan bebeberapa masalah, yakni munculnya populasi serangga target yang resisten, resurjensi, ledakan hama sekunder, penumpukan residu insektisida di alam yang menimbulkan masalah terhadap manusia, hewan dan lingkungan.
Koloni nyamuk Aedes aegypti di laboratorim Entomologi Kesehatan FKH IPB merupakan sumber spesimen nyamuk standar yang secara rutin digunakan dalam berbagai penelitian dan pengujian. Akan tetapi akhir-akhir ini diduga bahwa secara genetik, koloni nyamuk ini telah bersifat resisten heterozigot. Hal ini terlihat dari hasil pengujian efikasi insektisida yang menunjukkan rata-rata kematian nyamuk yang tidak seragam pada setiap ulangan dari generasi dan umur nyamuk yang sama. Oleh karena itu dibutuhkan upaya untuk memperoleh koloni yang rentan secara homozigot. Upaya ini dapat dilakukan dengan metode seleksi indukan tunggal yaitu suatu metode yang dilakukan dengan mengisolasi setiap satu pasang indukan dan mengembangbiakkan keturunannya sampai diperoleh koloni yang rentan.
Tujuan penelitian ini untuk mempelajari dan menentukan strain rentan homozigot pada Ae. aegypti dengan metode seleksi indukan tunggal. Penelitian ini bermanfaat sebagai informasi dasar tentang status kerentanan Ae. aegypti koloni Laboratorium terhadap beberapa jenis insektisida. Penelitian ini dilakukan dari bulan Desember 2013 sampai bulan April 2014.
Percobaan ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap.Analisis kerentanan setiap sampel ditentukan berdasarkan persentase kematian larva dan dewasa dengan menggunakan uji statistik regresi probit. Penentuan kerentanan larva dan nyamuk dewasa dinyatakan sebagai Rasio Resistensi.
Uji kerentanan larva terhadap setiap jenis konsentrasi insektisida menggunakan 25 larva instar III yang dimasukkan ke dalam wadah berisi 240 ml air yang telah ditambahkan 1 ml insektisida. Sementara itu pengujian nyamuk dewasa menggunakan WHO test kit dengan masing-masing menggunakan 25 nyamuk dewasa untuk setiap perlakuan.
Hasil menunjukkan dengan metode seleksi indukan tunggal, kemudian dipaparkan dengan insektisida malation, propoksur 1 ppm, dan sipermetrin 0.001 ppm, larva Ae. aegypti memperlihatkan tren rentan homozigot pada generasi keempat (F4). Adapun pada stadium dewasa, Ae. aegypti pada generasi keempat (F4) belum menunjukkan perubahan menjadi strain yang homozigot rentan terhadap tiga jenis insektisida. Pembentukan strain homozigot rentan memerlukan waktu di atas lima generasi.
SUMMARY
ISFANDA. Determination of Homozygous Strain In Aedes aegypti (Linn) Using Single Sib-selection Method. Supervised by UPIK KESUMAWATI HADI and SUSI SOVIANA.
In general, mosquito control performed in three ways, i.e physical, biological and chemical control wich insecticides applicationis the most commonly used. Usage one type of insecticide repeatedly in long period can lead to some problems, such as the emergence of the resistant of target insect populations, resurgence and increasing number of secondary pest. Also, accumulation of insecticide residue in nature can cause problems for humans, animals and crops.
Ae. aegypti colony in the Medical Entomology laboratory, Faculty of Veterinary Medicine - Bogor Agricultural University (IPB) is suspected heterozygous resistant genetically. It was seen from the result of insecticides efficacy test that demonstrate the average mosquito mortality was not uniform even in same both generation and mosquitoes ages. Therefore it takes an effort to gained homozygous susceptible colony. This can be done using single parent selection method that was performed by isolating one pair of mosquitoes parent and maintan its off spring to obtain susceptible colonies.
The purpose of this study was to study and determine homozygous susceptible Ae. aegypti laboratory colony. This research is useful as basic information about vulnerability status of Ae. aegypti laboratory colony against several types of insecticide. This research was conducted at December 2013 until April 2014.
These experiments use a completely randomized design. Susceptibility analysis of each sample was determined by the percentage mortality of larvae and adults using probit regression statistical test. Determination of larval and adult mosquito susceptibility was expressed in the form of RR (ratio resistance).
Adults Ae. aegypti from Medical Entomology laboratory colony taken randomly. Each pairs of the mosquito parent were separated into different cages and fed guinea pig’s blood to produce eggs (F0). The Ae. aegypti egg that originated from one parent mosquitoes hatched in plastic trays containing one liter of tap water.The eggs that hatched into larvae were fed with mix chicken liver powder and cat food (w/w 1:1).The average room temperature between 20 - 28 °C and 88% -90% humidity. Insecticides that used for larvae testing were 97% malathion and, 93.86% propoxur with its concentration of 1 ppm, 0.001 ppm and 0.0005 ppm, also 98.84% cypermethrin with of 0.001 ppm, 0.0005 ppm and 0.00025 ppm concentration. Adult mosquitoes testing, were using impregnated paper i.e 0.8% malathion, 0.1% bendiocarb, and 0.025% deltamethrin.
The result showed that in single sib-selection method, that exposed with 0.001 ppm sipermetrin, malathion, and 1 ppm propoxur, Ae. aegypti larvae showed homozygote susceptibility in fourth generation (F4). Meanwhile on adult stadium, F4 generation of Ae. aegypti did not showed of change to homozigote susceptible strain through that 3 of insecticide. Homozygote suscebtible strain forming after fifth generation.
© Hak Cipta Milik IPB, Tahun 2014
Hak Cipta Dilindungi Undang-Undang
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan atau menyebutkan sumbernya. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan, penelitian, penulisan karya ilmiah, penyusunan laporan, penulisan kritik, atau tinjauan suatu masalah; dan pengutipan tersebut tidak merugikan kepentingan IPB
Tesis
sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains
pada
Program Studi Parasitologi dan Entomologi Kesehatan
DETERMINASI STRAIN RENTAN
HOMOZIGOT
PADA
Aedes aegypti
(Linn) DENGAN METODE
SELEKSI INDUKAN TUNGGAL
SEKOLAH PASCASARJANA
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
Judul Tesis : Determinasi Strain RentanHomozigot pada Aedes aegypti dengan Metode Seleksi Indukan Tunggal
Nama : Isfanda NIM : B252114011
Disetujui oleh Komisi Pembimbing
Prof Dr Drh Upik Kesumawati Hadi, MS Ketua
Dr Drh Susi Soviana, MSi Anggota
Diketahui oleh
Ketua Program Studi Parasitologi dan Entomologi Kesehatan
Prof Dr Drh Upik Kesumawati Hadi, MS
Dekan Sekolah Pascasarjana
Dr Ir Dahrul Syah, MScAgr
Tanggal Ujian: 21 Juli 2014
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah subhanahu wa ta’ala atas segala karunia-Nya sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan. Tema yang dipilih dalam penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Desember 2013 ini ialah Determinasi Strain RentanHomozigot pada Aedes aegypti dengan Metode Seleksi Indukan Tunggal.
Terima kasih penulis ucapkan kepada Ibu Prof Dr Drh Upik Kesumawati Hadi MS dan Ibu Dr Drh Susi Soviana MSi selaku pembimbing. Ungkapan terima kasih juga disampaikan Bapak Prof Dr Drh Singgih Harsojo Sigit, MSc, Bapak Dr Drh FX. Koesharto, MSc, Ibu Dr Drh Dwi Jayanti Gunandini, MSi, Bapak Dr Drh Ahmad Arif Amin, MSc yang selama ini telah memberikan ilmunya. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada para staf di Bagian Parasitologi dan Entomologi Kesehatan (PEK) Ibu Juju, Bapak Heri, Bapak Taofik, Bapak Nanang, Bapak Guspriyadi, Ibu Een serta teman-teman mahasiswa PEK yeng telah banyak membantu selama penelitian. Ungkapan terima kasih juga disampaikan kepada Ayahanda (alm) Abdullah Abbas, Ibunda Rusmanidar Ilyas, Kakanda Yulizar, Lely Hayati, Zahrul Hadi, Noer Linas, Herlina, serta seluruh keluarga atas segala doa dan dukungannya.
Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.
Bogor, September 2014
DAFTAR ISI
DAFTAR TABEL vi
DAFTAR GAMBAR vi
DAFTAR LAMPIRAN vi
1 PENDAHULUAN 7
Latar Belakang 7
Tujuan Penelitian 2
Manfaat Penelitian 3
2 TINJAUAN PUSTAKA 3
Arti Penting Nyamuk Ae. aegypti 3
Pengendalian Kimiawi Terhadap Nyamuk 4
3 METODE 6
Tempat dan Waktu Penelitian 6
Rancangan Penelitian 6
Penyediaan Larva dan Nyamuk Uji 6
Pengujian Status Kerentanan Terhadap Insektisida 7
Analisis Data 8
4 HASIL DAN PEMBAHASAN 8
Kerentanan Larva Ae. aegypti terhadap 3 Jenis Insektisida 8 Kerentanan Nyamuk Ae. aegypti Terhadap 3 Jenis Insektisida 12
5 SIMPULAN DAN SARAN 15
Simpulan 15
Saran 15
DAFTAR PUSTAKA 16
LAMPIRAN 19
DAFTAR TABEL
1 Rata-rata persentase kematian larva Ae. aegypti terhadap insektisida
malation 9
2 Nilai LT dan RR larva Ae. aegypti terhadap malation 9 3 Rata-rata persentase kematian larva Ae. aegypti terhadap insektisida
propoksur 10
4 Nilai LTdan RR Larva Ae. aegypti terhadap propoksur 10 5 Rata-rata persentase kematian larva Ae. aegypti terhadap insektisida
sipermetrin 11
6 Nilai LT dan RR Larva Ae. aegypti terhadap sipermetrin 11 7 Rata-rata persentase kematian larva Ae. aegypti terhadap 3 isektisida
pada konsentrasi tinggi. 12
8 Nilai LT dan RR nyamuk Ae. aegypti terhadap malation 0.8% 12 9 Nilai LTdan RR nyamuk Ae. aegypti terhadap bendiokarb 0,1% 13 10 Nilai LT dan RR nyamuk Ae. aegypti terhadap deltametrin 0,025% 13 11 Rata-rata persentase kematian nyamuk Ae. aegypti terhadap 3 jenis
insektisida 14
DAFTAR LAMPIRAN
1 Kertas berinsektisida (impregnatedpaper) 19
2 WHO testkit 19 terhadap tiga konsentrasi sipermetrin (a. 0.001 ppm ; b. 0.0005 ppm ;
c. 0.00025 ppm) 23
8 Rata-rata persentase kematian nyamuk Ae. aegypti terhadap malation
0.8% 24
9 Rata-rata persentase kematian nyamuk Ae. aegypti terhadap
bendiokarb 0.1% 24
10 Rata-rata persentase kematian nyamuk Ae. aegypti terhadap
deltametrin 0.025% 24
1
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Nyamuk termasuk ke dalam subfamili Culicinae, famili Culicidae dari ordo Diptera, Ae. aegypti berperan sebagai vektor penyakit demam berdarah dengue (DBD), sedangkan nyamuk jenis lainnya berperan sebagai vektor malaria, chikungunya, demam kuning (yellow fever), japanese encephalitis (JE), serta filariasis. Nyamuk merupakan serangga berukuran kecil yang mengalami metamorfosis sempurna (holometabola) yang di awali dengan stadium telur, menetas menjadi larva, pupa dan akhirnya dewasa. Total siklus hidup nyamuk diselesaikan dalam waktu 9-12 hari pada suhu 27-30oC. Nyamuk dewasa yang baru muncul dari pupa akan mencari pasangan kemudian melakukan perkawinan dan siap mencari darah (Hadi dan Soviana 2010).
Di daerah urban, dikenal dua jenis nyamuk utama yang berperan sebagai vektor. Nyamuk itu adalah Ae. aegypti yang berkembang biak dalam tempat penampungan air yang tidak beralaskan tanah dengan aktifitas menggigit diurnal. Jenis lainnya adalah Cx. quinquefasciatus, vektor filariasis dan japanese encephalitis (JE) yang merupakan nyamuk rumah dengan aktifitas mengganggu dan mengisap darah pada malam hari dan berkembang biak di selokan (Hadi dan Koesharto 2006).
Secara umum pengendalian nyamuk vektor dilakukan dengan tiga cara yakni pengendalian fisik yaitu upaya untuk membuat lingkungan menjadi tidak sesuai dengan perkembangan vektor. Cara kedua adalah pengendalian biologis yang dititik beratkan pada penggunaan musuh alami atau predator sebagai pemangsa nyamuk. Adapun cara ketiga adalah pengendalian kimiawi dengan aplikasi insektisida merupakan cara yang paling umum digunakan (Hadi dan Soviana 2010, Sukowati 2010, dan Supartha 2008).
Hingga saat ini penggunaan insektisida semakin meningkat di negara-negara berkembang. Penggunaan satu jenis insektisida yang berulang-ulang dalam jangka waktu yang lama dapat menimbulkan beberapa masalah yaitu, munculnya populasi serangga target yang resisten, munculnya resurjensi, ledakan hama sekunder, penumpukan residu insektisida di alam yang menimbulkan masalah terhadap manusia, hewan dan hasil pertanian (Hadi dan Soviana 2010).
Resistensi adalah perubahan genetik pada suatu organisme dalam menyeleksi racun (toxin). Perkembangan resistensi suatu organisme tidak terjadi secara langsung dalam pengendalian menggunakan insektisida. Pengendalian hama tidak akan berhasil dilakukan jika gejala resistensi tidak dideteksi sejak awal (FAO 2012). Penggunaan insektisida kimia golongan organoklorin, organofosfat, karbamat, dan piretroid dapat mempercepat terbentuknya resistensi dan munculnya resistansi silang (Cui et al. 2006).
2
Mekanisme resistensi perilaku adalah yang berkaitan dengan proses secara alami untuk menghindari kontak dengan insektisida (Kranthi 2005).
Organisme multiseluler mempunyai dua set kromosom (diploid) yang memiliki satu alel pada setiap kromosom. Jika alelnya sama berarti homozigot. Jika kedua alel berbeda maka organisme tersebut heterozigot. Sifat genetik yang mempengaruhi resistensi terhadap insektisida dapat ditemukan pada satu atau kedua alel. Ketika sifat tersebut dimiliki oleh kedua alel (RR) maka serangga menjadi resisten homozigot. Serangga yang resisten homozigot akan menurunkan satu alel resisten (R) kepada generasi berikutnya. Jika generasi berikutnya menerima satu alel resisten (R) dari induk lainnya, maka keturunan tersebut akan menjadi resisten homozigot (RR). Jika sifat resisten ditemukan hanya dalam satu alel gen (RS), maka serangga resisten heterozigot akan kurang resisten terhadap insektisida. Individu yang rentan homozigot (SS) akan rentan terhadap insektisida. Populasi yang belum pernah terpapar insektisida umumnya sangat rentan, gen resisten di dalam populasi tersebut sangat jarang terbentuk (FAO 2012).
Secara fenotip nyamuk yang resisten homozigot selain lebih resisten terhadap paparan insektisida juga mengalami penurunan kemampuan lainnya. Sebagai contoh Rowland (1991) menyatakan bahwa nyamuk betina Anopheles stephensi Liston dan An. gambiae Giles yang resisten homozigot (RR) terhadap
insektisida Dieldrin (γHCH) menurun kemampuannya dibandingkan terhadap
nyamuk yang resisten heterozigot (RS) dan yang masih rentan (SS). Kemampuan nyamuk yang diukur dan dibandingkan antara lain dalam mencari tempat peletakan telur, mencari inang, jumlah telur yang dihasilkan sampai kemampuan nyamuk yang berkurang dalam menghindari predator. Nyamuk An. gambiae
jantan yang resisten homozigot terhadap insektisida yang sama memiliki penurunan kemampuan bersaing dalam memperebutkan nyamuk betina.
Penelitian untuk mendeteksi resistensi terkini di lapangan dan mekanismenya sangat penting dalam menentukan strategi yang efektif untuk mencegah proses kejadian resistensi (Gonzales et al.1999). Hamdan et al. (2005) menyatakan nyamuk Culex quinquefasciatus lebih cepat menjadi resisten terhadap malation dan permetrin dibandingkan dengn Ae. aegypti dan Ae. albopictus. Sementara itu, Ahmad et al. (2000) melaporkan bahwa larva Cx. quinquefasciatus
lebih resisten dibandingkan spesies Aedes terhadap malation dan temephos. Koloni nyamuk Ae. aegypti di Laboratorim Entomologi Kesehatan FKH IPB diduga secara genetik bersifat resisten heterozigot. Hal ini terlihat dari hasil pengujian efikasi insektisida yang menunjukkan rata-rata kematian nyamuk yang tidak seragam pada setiap ulangan dari generasi dan umur nyamuk yang sama. Oleh karena itu dibutuhkan upaya untuk memperoleh koloni nyamuk yang rentan secara homozigot. Upaya ini dapat dilakukan dengan metode seleksi indukan tunggal yaitu suatu metode yang dilakukan dengan mengisolasi setiap satu pasang indukan dan mengembangbiakkan keturunannya sampai diperoleh koloni yang rentan terhadap insektisida (Hamdan et al. 2008).
Tujuan Penelitian
3
Manfaat Penelitian
Hasil penelitian ini bermanfaat sebagai informasi dasar tentang status kerentanan Ae. aegypti koloni Laboratorium terhadap beberapa jenis insektisida.
2
TINJAUAN PUSTAKA
Arti Penting Nyamuk Ae. aegypti
Nyamuk merupakan serangga berukuran kecil yang memiliki bagian mulut untuk menusuk dan mengisap. Nyamuk yang berada di sekeliling rumah seperti
Culex quinquefasciatus, Ae. aegypti dan Ae. albopictus, tumbuh dan berkembang dalam genangan air di sekitar permukiman. Nyamuk dewasa biasanya berukuran dengan panjang 3-6 mm, tertarik pada cahaya, pakaian berwarna gelap, manusia dan hewan. Hal ini disebabkan oleh bau zat-zat yang dikeluarkan hewan, terutama CO2 dan asam amino. Nyamuk betina siap mencari darah setelah kawin untuk perkembangan telur dan setelah bertelur nyamuk akan mencari darah kembali untuk siklus bertelur berikutnya (siklus gonotrofik) (Hadi dan Koesharto 2006).
Perkembangan Ae. aegypti dari telur menjadi dewasa dengan suhu ruangan antara 10oC hingga 28oC memerlukan waktu tercepat 5.5 hari dan paling lambat 121 hari. Waktu tercepat didapatkan pada ruangan dengan suhu rata-rata 28.7oC dan waktu terlama didapatkan di ruang dengan suhu rata-rata 10oC. Waktu yang dibutuhkan telur nyamuk untuk menjadi nyamuk dewasa berkurang dengan bertambahnya suhu udara (Hidayati et al. 2007).
Nyamuk Ae. aegypti betina mencari dan mengisap darah pada pagi dan sore hari, menghisap darah berbagai jenis hewan atau manusia, sedangkan nyamuk Ae. menimbulkan kegatalan juga merupakan vektor utama demam berdarah, dan
chikungunya, terutama di Indonesia. Demam berdarah (DBD) atau dengue hemorrhagic fever (DHF) adalah penyakit virus yang ditularkan oleh nyamuk yang saat ini menjadi perhatian utama masyarakat internasional. DBD ditemukan di daerah tropik dan subtropik, terutama wilayah urban dan periurban. DBD pertama kali diketahui di Asia Tenggara tahun 1950an tetapi mulai tahun 1975 hingga sekarang merupakan penyebab kematian utama pada anak-anak di negara-negara Asia. Prevalensi penyakit ini secara global meningkat drastis dekade saat ini (WHO 2004).
4
sebagai penyakit asal viral terpenting yang berbahaya dan berakibat fatal bagi manusia (Gubler et al. 2002).
Di Indonesia penyakit ini dilaporkan pertama kali pada tahun 1968, di kota Jakarta dan Surabaya. Epidemi penyakit DBD di luar Jawa pertama kali dilaporkan di Sumatera Barat dan Lampung tahun 1972. Sejak itu, penyakit ini semakin menyebar luas ke berbagai wilayah di Indonesia. Penularan DBD hanya dapat terjadi melalui gigitan nyamuk yang di dalam tubuhnya mengandung virus Dengue (Hadi 2011).
Hidayati et al. (2007) melaporkan bahwa jumlah penduduk, letak geografis, dan suhu dapat mempengaruhi umur stadium pradewasa nyamuk dan periode inkubasi ekstrinsik (EIP) atau masa inkubasi virus Dengue. Di sebagian besar daerah endemik Dengue di Indonesia, panjang stadium pradewasa nyamuk Ae. aegypti antara 13 hingga 24 hari atau 2 hingga 4 minggu. Periode inkubasi ekstrinsik (EIP) virus di dalam tubuh nyamuk memerlukan waktu 11 hingga 14 hari atau 1 hingga 2 minggu. Pada daerah dengan suhu udara 21oC, nyamuk Aedes
memerlukan waktu hingga 7 minggu untuk stadium pradewasa dan 4 hingga 5 minggu untuk periode inkubasi ekstrinsik virus. Potensi penularan virus Dengue dan perkembangbiakan nyamuk Aedes hampir tidak ada pada ketinggian tempat masing-masing lebih dari 1350 dan 1600 mdpl.
Chikungunya disease atau demam chikungunya adalah satu di antara penyakit tular vektor yang saat ini banyak terjadi di Indonesia. Penyebab penyakit ini adalah Alphavirus (famili Togaviridae) dan ditularkan melalui gigitan nyamuk
Ae. aegypti dan Ae. albopictus. Di Indonesia, penyakit ini dilaporkan pertama kali di Samarinda pada tahun 1973, kemudian berjangkit di Kuala Tungkal, Jambi tahun 1980. Tahun 1983 merebak di Martapura, Ternate, Yogyakarta. Setelah menghilang hampir 20 tahun, kejadian luar biasa (KLB) demam chikungunya
terjadi pada awal tahun 2001 di Muara Enim, Sumatera Selatan dan Aceh, kemudian muncul di Bogor bulan Oktober. Demam Chikungunya berjangkit lagi di Bekasi (Jawa Barat), Purworejo dan Klaten (Jawa Tengah) pada tahun 2002. Selanjutnya berkembang hingga sekarang ke berbagai wilayah lain di Indonesia (Hadi 2011b).
Kedua penyakit tersebut hingga sejauh ini karena merupakan penyakit virus, maka tidak ada pengobatan untuk menghentikan atau memperlambat perkembangan virus ini. Pengobatan hanya dapat dilakukan dengan cara simptomatis yaitu menghilangkan gejala-gejala yang terlihat setiap penderita. Cairan bisa diberikan untuk mengurangi dehidrasi dan obat-obatan diberikan untuk mengurangi demam, serta mengatasi perdarahan (Hadi 2011).
Pengendalian Kimiawi Terhadap Nyamuk
5 diaplikasikan, menurunkan populasi nyamuk dengan cepat, dan mudah didapat (Hadi dan Soviana 2010).
Beberapa golongan insektisida yang sering digunakan dalam pengendalian nyamuk adalah dari organofosfat, karbamat, dan piretroid. Piretroid merupakan racun axonik pada serabut saraf, mengikat protein dalam syaraf yang dikenal sebagai voltage-gate sodiumchannel. Pada keadaan normal protein ini membuka untuk memberikan rangsangan pada saraf dan menutup untuk menghentikan sinyal syaraf. Piretroid terikat pada gerbang ini dan mencegah penutupan secara normal yang menghasilkan rangsangan saraf berkelanjutan. Hal ini yang mengakibatkan tremor dan inkoordinasi pada serangga yang keracunan insektisida. Sementara itu insektisida golongan organofosfat dan karbamat merupakan racun saraf dan secara spesifik mengikat enzim asetilkolinesterase (AChE). Enzim ini dibentuk untuk menghambat suatu impuls saraf melewati sinaps untuk tidak bekerja. Sehingga sinaps yang keracunan tidak mampu menghentikan impuls saraf yang berkelanjutan yang pada akhirnya mengakibatkan kejang-kejang dan inkoordinasi (Wirawan 2006).
Insektisida organofosfat, karbamat, dan piretroid mempunyai organ target yang sama yaitu asetilkolinesterase (AChE) pada saraf. AChE menghidrolisis eksitatori neurotransmiter asetilkolin pos-sinaptik pada membran saraf. Perubahan AChE pada serangga yang resisten terhadap organofosfat dan karbamat menyebabkan berkurangnya sensitivitas dalam menghambat enzim oleh insektisida (Hemingway dan Ranson 2000).
Penggunaan insektisida piretroid semakin meningkat setelah munculnya nyamuk yang resisten terhadap insektisida golongan organofosfat dan organoklorin dalam beberapa tahun terakhir. Pengendalian vektor banyak gagal karena program pengendalian yang tidak efisien dan tidak berkelanjutan. Upaya pengendalian dan menghilangkan tempat perindukan nyamuk Ae. aegypti sebagai vektor dilakukan dengan penggunaan larvasida. Larvasida yang sering digunakan yaitu temephos, permetrin, bti, dan pyriproxyfen yang diaplikasikan kedalam tempat penampungan air (McCall dan Kittayapong 2006).
Kejadian resistensi nyamuk Ae. aegypti terhadap insektisida telah banyak dilaporkan diberbagai negara. Ae. aegypti dilaporkan telah resisten terhadap DDT dan malation di Port Sudan City (Husham et al. 2010). Sementara itu, di Selangor Malaysia Rong et al. (2012) melaporkan Ae. aegypti telah resisten terhadap DDT, propoksur, bendiokarb, dan permetrin (angka mortalitas di bawah 80%). Di Brazil, Ae. aegypti dilaporkan telah resisten terhadap temephos karena pemakaian yang terus menerus. Upaya untuk mengatasi masalah resistensi ini sulit dan perlu waktu lama, paling tidak tujuh tahun (Lima et al. 2011). Di Indonesia, Mulyatno
et al. (2012) melaporkan larva Ae.aegypti dari 9 lokasi di Surabaya menunjukkan masih efektif terhadap temephos 1mg/l, sedangkan di tiga lokasi lainnya (Tambaksari, Gubeng, dan Sawahan) telah menunjukkan adanya resistensi (kematian di bawah 80%). Nurjanah (2013) menyatakan bahwa nyamuk Ae. aegypti di beberapa daerah di Kota Bogor telah resisten terhadap malation, bendiokarb, dan deltametrin. Paradani et al. (2011) juga menyatakan bahwa nyamuk Ae. aegypti di Kota Cimahi telah resisten terhadap sipermetrin.
6
terhadap resistensi insektisida ada di dalam bagian kecil populasi. Gen akan diaktifkan ketika terjadi pemaparan insektisida. Kecepatan dan derajat perkembangan resistensi tergantung pada frekwensi resistensi gen dalam populasi, jenis gen yang bertanggung jawab terhadap resistensi, dosis insektisida yang digunakan dan frekwensi aplikasi (Ahmad et al. 1998).
3
METODE
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Parasitologi dan Entomologi Kesehatan Departemen Ilmu Penyakit Hewan dan Kesehatan Masyarakat Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor mulai dari bulan Desember 2013 sampai dengan bulan April 2014.
Rancangan Penelitian
Penelitian ini dilakukan selama 4 bulan. Pada dua bulan pertama dilakukan seleksi indukan dan perkembangbiakan nyamuk F0 – F1 untuk memperoleh koloni nyamuk dengan populasi yang besar sehingga diharapkan pada generasi berikutnya jumlah larva dan dewasa mencukupi untuk dilakukan pengujian.
Percobaan ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap pada larva dengan 3 perlakuan dan 4 ulangan sedangkan pada dewasa dengan 3 perlakuan dan 3 ulangan untuk setiap jenis insektisida. Persamaan regresi antara waktu kontak dengan mortalitas dibuat untuk mengetahui status kerentanan populasi nyamuk yang diuji terhadap insektisida. Analisis kerentanan setiap sampel kandang ditentukan berdasarkan pada persentase kematian larva dan dewasa dengan menggunakan uji statistik regresi dan analisis probit dengan menggunakan software SPSS versi 19.
Penyediaan Larva dan Nyamuk Uji Seleksi Indukan
Sebanyak 10 pasang nyamuk Ae. aegypti F97 dewasa strain insektarium diambil secara acak. Setiap satu pasang indukan nyamuk dewasa (jantan dan betina) kemudian dipisahkan ke dalam kandang yang berbeda. Nyamuk tersebut diberi makan darah marmut untuk menghasilkan telur dan hasil dari penetasan telur tersebut dinyatakan sebagai F0.
7 tersebut diganti dengan air baru setiap dua hari sekali sampai menjadi larva instar IV. Pupa dikumpulkan di dalam wadah gelas plastik, kemudian dimasukkan ke dalam kandang hingga eklosi menjadi dewasa. Seterusnya nyamuk jantan dan betina yang telah melakukan perkawinan, diberi makan darah marmut dan dibiarkan bertelur. Pemeliharaan ini dilakukan hingga 5 generasi (F5). Suhu rata-rata ruangan berkisar antara 20oC-28oC dengan kelembaban 88% - 90%.
Pengujian Status Kerentanan Terhadap Insektisida Insektisida
Insektisida yang digunakan untuk pengujian larva nyamuk terdiri atas tiga golongan, yaitu malation 97% (organophosfat), propoksur 93.86% (karbamat), dan sipermetrin 98.84% (piretroid). Setiap insektisida dilakukan pengujian terhadap tiga tingkatan konsentrasi yang diencerkan dengan aseton dalam satuan ppm. Konsentrasi insektisida malation dan propoksur untuk larva Aedes aegypti
sebesar 1 ppm, 0.001 ppm, 0.0005 ppm dan sipermetrin 0.001 ppm, 0.0005 ppm, 0.00025 ppm. Pengujian nyamuk dewasa digunakan kertas berinsektisida (impregnated paper) malation 0.8%, bendiokarb 0.1%, dan deltametrin 0.025% (WHO 2013).
Uji Kerentanan Larva
Uji ini menggunakan larva instar III. Sebanyak 25 larva dimasukkan ke dalam wadah plastik berukuran 350 ml. Selanjutnya, ditambahkan air sebanyak 225 ml yang telah dicampur insektisida dengan tingkatan konsentrasi sebagaimana tersebut diatas masing-masing sebanyak 1 ml. Pengamatan kematian larva dimulai dari menit ke 10, 20, 30, 40, 50, 60 dan 24 jam setelah kontak. Pengujian ini diulang 4 kali. Untuk kontrol positif dilakukan dengan menggunakan Aseton (98%), sedangkan kontrol negatif menggunakan air yang telah disaring. Apabila angka kematian kontrol pada larva lebih besar dari 20% maka harus dilakukan pengujian ulang, dan bila kematian terjadi antara 5%-20% maka data dikoreksi dengan rumus Abbot.
Uji Kerentanan Nyamuk Dewasa
Pengujian dilakukan dengan menggunakan impregnated paper yang dimasukkan ke dalam masing-masing tabung WHO test kit, sedangkan untuk kontrol hanya menggunakan kertas saring. Pengujian ini di ulang 3 kali dengan satu kontrol negatif. Nyamuk betina umur 2-3 hari yang kenyang air gula diambil dari kandang pemeliharaan. Setiap tabung holding tube (tidak dilapisi
8
tegak selama satu jam dan diamati kematiannya mulai dari 10, 20, 30, 40, 50, dan 60 menit.
Setelah kontak selama 60 menit, nyamuk dipindahkan kembali ke dalam kandang dan beri air gula 10 %. Setelah 24 jam, jumlah nyamuk yang mati dihitung dan dicatat. Apabila terjadi kematian pada kelompok kontrol nyamuk lebih dari 20%, akan dilakukan seperti halnya pada pengujian larva yaitu koreksi dengan rumus Abbot (WHO 1998).
Analisis Data Analisis Status Kerentanan Larva dan Dewasa
Status kerentanan ditentukan berdasarkan presentase kematian larva dan dewasa. Apabila kematiannya dibawah 80% maka populasi tersebut dinyatakan resisten, antara 80% - 97% dinyatakan toleran, dan antara 98% - 100% dinyatakan rentan (WHO 1975).
Analisis Status Resistensi Larva dan Dewasa
Status resistensi nyamuk Ae. aegypti dan terhadap malation, bendiokarb, propoksur, dan sipermetrin diukur dengan perhitungan analisis regresi probit yang dinyatakan dalam LT50, LT95, dan rasio resistensi (RR). Setelah diperoleh nilai LT50, LT95, maka nilai RR dapat dihitung menggunakan persamaan berikut:
4
HASIL DAN PEMBAHASAN
Kerentanan Larva Ae. aegypti terhadap 3 Jenis Insektisida Kerentanan Larva Ae. aegypti terhadap Malation
9
Tabel menunjukkan nilai LT50 dan LT95 mengalami peningkatan dari generasi F2 sampai generasi F5. Nilai LT50 dan LT95 tertinggi pada generasi F5 yaitu 92.73 menit dan 177.54 menit. Hal ini menunjukkan bahwa semakin bertambah generasi maka nilai LT50 dan LT95 semakin tinggi. Nilai RR50 dan RR95 mengalami peningkatan seiring dengan penambahan generasi. RR50 dan RR95 mencapai nilai 1.0 terdapat pada generasi ke F4. Hal ini menunjukkan bahwa nilai kerentanan yang sama atau homozigot telah tercapai pada generasi F4. Generasi ke F5 merupakan pembanding dalam penghitungan nilai RR.
Kerentanan Larva Ae. aegypti terhadap Propoksur
Berdasarkan hasil uji kerentanan larva Ae. aegypti yang dipaparkan dengan insektisida propoksur disajikan pada Tabel 3. Rata-rata kematian larva Ae. aegypti mencapai 100% pada generasi F3, F4, dan F5 pada 24 jam setelah pemaparan. Kematian larva Ae. aegypti pada konsentrasi 0.001 dan 0.0005 Tabel 2 Nilai LT dan RR larva Ae. aegypti terhadap malation
Malation 1 ppm
Tabel 1 Rata-rata persentase kematian larva Ae. aegypti terhadap insektisida malation
Kematian Larva Ae. aegypti setelah 24 jam
Insektisida Generasi
F2(%) F3(%) F4(%) F5(%)
Malation 1 ppm 98.40c 99.50c 100c 100c
10
berbeda nyata (P < 0.05). Persentase kematian larva mengalami peningkatan pada konsentrasi 1 ppm setelah 24 jam pemaparan pada setiap generasi.
Nilai LT50 dan LT95 pada konsentrasi 1 ppm tertinggi pada F5 yaitu 94.02 menit dan 160.47 menit (Tabel 4). Nilai RR50 dan RR95 mengalami peningkatan seiring dengan penambahan generasi. RR50 dan RR95 mencapai nilai 1.0 terdapat pada generasi ke F4. Hal ini menunjukkan bahwa nilai kerentanan yang sama atau homozigot telah tercapai pada generasi F4 di setiap konsentrasi.
Kerentanan Larva Ae. aegypti terhadap Sipermetrin
Berdasarkan hasil uji kerentanan larva Ae. aegypti yang dipaparkan dengan insektisida sipermetrin disajikan pada Tabel 5. Rata-rata kematian larva Ae.
aegypti mencapai 100% di generasi F5 pada 24 jam setelah pemaparan. Kematian larva Ae. aegypti pada konsentrasi 0.005 dan 0.00025 berbeda nyata (P < 0.05). Persentase kematian larva mengalami peningkatan konsentrasi 0.001 ppm setelah
Tabel 4 Nilai LTdan RR Larva Ae. aegypti terhadap propoksur Propoksur 1 ppm
Tabel 3 Rata-rata persentase kematian larva Ae. aegypti terhadap insektisida propoksur
Kematian Larva Ae. aegypti setelah 24 jam
Insektisida Generasi
F2(%) F3(%) F4(%) F5(%)
Propoksur 1 ppm 96.90c 100b 100c 100b
11 24 jam pemaparan pada setiap generasi. Nilai LT50 dan LT95 mengalami peningkatan dari generasi F2 sampai generasi F5. Nilai LT50 dan LT95 tertinggi pada generasi F5 dengan nilai yaitu 99.56 menit dan 125.17 menit (Tabel 6). Hal ini menunjukkan bahwa semakin bertambah generasi nilai LT50 dan LT95 semakin tinggi. Nilai RR50 dan RR95 mengalami peningkatan seiring dengan penambahan generasi. RR50 dan RR95 mencapai nilai 1.0 pada generasi ke F4. Hal ini menunjukkan bahwa nilai kerentanan yang sama atau homozigot telah tercapai pada generasi F4.
Hasil uji kerentanan larva Ae. aegypti mulai dari F2 sampai F5 terhadap pemaparan tiga konsentrasi Sipermetrin tersaji dalam Tabel 1 dan 3. Konsentrasi sipermetrin 0.001 ppm tampak adanya peningkatan persentase kematian larva setiap generasi dengan nilai rasio resistensi LT50 0.9–1.0. Nilai kematian tertinggi (100%) pada konsentrasi 0.001 ppm terjadi pada generasi F4 dan F5. Adapun pada konsentrasi 0.0005 ppm, kematian larva tertinggi tampak pada generasi F4 (67.90%) dengan nilai RR50 0.9–1.0. Konsentrasi 0.00025 ppm, nilai kematian tertinggi hanya terjadi pada generasi F5 (52.10%) dengan nilai RR50 0.8–0.1.
Tabel 6 Nilai LT dan RR Larva Ae. aegypti terhadap sipermetrin Sipermetrin 0.001 ppm
Tabel 5 Rata-rata persentase kematian larva Ae. aegypti terhadap insektisida sipermetrin
Kematian Larva Ae. aegypti setelah 24 jam
Insektisida Generasi
12
Kerentanan Nyamuk Ae. aegypti Terhadap 3 Jenis Insektisida Kerentanan Ae.aegypti terhadap Malation
Hasil penelitian menunjukkan bahwa persentase kematian nyamuk Ae. aegypti terhadap malation tertinggi pada generasi F4 (31.07%) dan terendah pada generasi F3 (25.87%) (Tabel 11). Persentase kematian pada generasi F2 berbeda nyata dengan generasi F3, F4 dan F5 (P < 0.05).
Nilai RR50 dari generasi F2 sampai generasi F4 mulai 0.2-0.9. Artinya perbandingan antara nilai LT50 pada setiap generasi dibandingkan nilai LT50 pada generasi terakhir semakin mendekati nilai 1.0 dan mencapai sifat yang homozigot pada generasi F4. Adapun nilai RR95 pada generasi F2 memiliki nilai 1.2. Hal ini berarti waktu kematian 95% pada generasi tersebut lebih lama dibandingkan waktu kematian 95% pada generasi pembanding (F5). Sifat resisten kemungkinan masi dimiliki oleh generasi F2 yang merupakan bawaan dari induk sebelumnya. Nilai RR95 pada generasi selanjutnya semakin menurun dan mendekati 1.0 pada generasi F4.
Nilai RR yang belum mendekati 1.0 berarti bahwa nyamuk pada generasi tersebut belum mempunyai genetik yang homozigot dan belum memiliki kerentanan yang sama terhadap insektisida malation. Nyamuk yang homozigot merupakan nyamuk yang mempunyai pasangan gen yang sama dalam satu populasi.
Kerentanan Nyamuk Ae. aegypti terhadap Bendiokarb
Hasil persentase kematian nyamuk terhadap bendiokarb ditunjukkan pada Tabel 11. Persentase kematian pada masing-masing generasi F2, F3, dan F4 adalah 6.93%, 25.20%, 25.87% sedangkan pada generasi F5 sebesar 28%. Hasil ini memperlihatkan ada perbedaan angka kematian setelah 24 jam. Secara statistik kenaikan angka kematian ini tidak berbeda nyata (P > 0.05) antara generasi F2, F3, Tabel 7 Rata-rata persentase kematian larva Ae. aegypti terhadap 3 isektisida
pada konsentrasi tinggi.
Insektisida
Kematian Larva Ae. aegypti pada konsentrasi tinggi setelah 24 jam
F2 (%) F3 (%) F4 (%) F5 (%)
Malation 1 ppm 98.40 99.50 100 100
Propoksur 1 ppm 96.40 100 100 100
Sipermetrin 0.001 ppm 86.40 86.90 99.90 100
Tabel 8 Nilai LT dan RR nyamuk Ae. aegypti terhadap malation 0.8%
13 F4, dan F5. Nilai LT50 nyamuk Ae. aegypti terhadap bendiokarb ditunjukkan pada Tabel 9.
Nilai RR50 dari generasi F2 sampai generasi F4 mulai 0.1-0.9, yang berarti perbandingan antara nilai dan RR95 pada generasi F2 0.1, F3 0.9 dan 1.0 yang berarti nilai LT50 pada setiap generasi dibandingkan nilai LT50 pada generasi terakhir semakin mendekati nilai 1.0.Nilai RR95 pada generasi F2 0.1, sedangkan pada generasi F3 dan F4 sudah mencapai 1.0, yakni sama dengan nilai RR pembanding. Nyamuk Ae. aegypti generasi F3 dan F4 sudah mempunyai sifat homozigot yang sama dengan generasi F5 yang dinyatakan sebagai generasi pembanding. Nilai RR yang belum mendekati 1.0 berarti bahwa nyamuk pada generasi tersebut belum mempunyai gen yang homozigot dan belum memiliki kerentanan yang sama terhadap insektisida bendiokarb.
Kerentanan Nyamuk Ae. aegypti terhadap Deltametrin
Berdasarkan hasil penelitian menunjukkan bahwa persentase kematian nyamuk Ae. aegypti terhadap deltametrin tertinggi pada generasi F2 31.07%, pada generasi F3 87.33%, dan F4 93.30%, sedangkan F5 93.13% yang ditampilkan pada Tabel 11. Hasil menunjukkan bahwa ada perbedaan kenaikan angka kematian setelah 24 jam yang berarti ada pengaruh yang nyata antara generasi F2 dengan generasi F3,F4, dan F5 (P < 0.05).
Nilai RR50 dari generasi F2 sampai generasi F4 mulai 0.3-1.0, artinya perbandingan antara LT50 pada setiap generasi dibandingkan nilai LT50 pada generasi terakhir mencapai nilai 1.0. Nilai RR95 pada generasi F2 sampai F4 mulai 0.4-1.0. Perbandingan antara LT95 setiap generasi dibandingkan LT95 pada generasi terakhir mencapai 1.0. Nyamuk Ae. aegypti generasi F4 dan generasi F5 menunjukkan bahwa sudah mempunyai sifat yang homozigot. Nilai RR yang Tabel 10 Nilai LT dan RR nyamuk Ae. aegypti terhadap deltametrin 0,025%
Generasi Deltametrin 0.025%
Tabel 9 Nilai LTdan RR nyamuk Ae. aegypti terhadap bendiokarb 0,1%
14
mencapai 1.0 berarti bahwa nyamuk pada generasi tersebut telah mempunyai genetik yang homozigot dan memiliki kerentanan yang sama terhadap insektisida deltametrin.
Ketiga jenis insektisida yang digunakan dalam penelitian ini menggunakan golongan insektisida yang berbeda dan paling sering digunakan di lapangan. Malation adalah golongan organofosfat, propoksur dan bendiokarb dari golongan karbamat, sedangkan sipermetrin dan deltametrin adalah piretroid sintetik. Ketiganya memiliki target kerja yang berbeda.
Organofosfat dan karbamat bekerja pada sinaps syaraf yang menghambat enzim kolinesterase. Enzim ini menjadi terfosforilasi ketika terikat dengan organofosfat dan bersifat tetap (irreversible). Tetapi pada karbamat menghambat enzim kolinesterase bersifat tidak tetap (reversible) (Wirawan 2006; Hadi dan Soviana 2010). Piretroid sintetik merupakan racun akson (serabut syaraf) yang terikat pada voltage-gate sodium channel, yang mencegah penutupan secara normal dan berakibat terjadinya rangsangan syaraf berkelanjutan (Wirawan 2006; WHO 2006).
Hasil penelitian menunjukkan bahwa status kerentanan larva Ae. aegypti
terhadap 3 jenis insektisida (malation, propoksur, dan sipermetrin), secara umum menunjukkan adanya peningkatan status kerentanan khususnya pada konsentrasi 1 ppm pada malation dan propoksur, sedangkan 0.001 ppm pada sipermetrin. Peningkatan status kerentanan terjadi mulai pada generasi keempat (F4) khususnya pada malation dan sipermetrin, sedangkan pada propoksur sudah tercapai pada generasi ketiga (F3) (Tabel 7).
Sementara itu, status kerentanan nyamuk dewasa Ae. aegypti terhadap 3 jenis insektisida (malation, bediokarb, dan deltametrin) hasilnya menunjukkan cenderung mengalami peningkatan status kerentanan, tetapi sampai generasi keempat (F4) belum menunjukkan adanya angka kematian di atas 97% (Tabel 11).
Larva dan dewasa Ae. aegypti yang digunakan pada penelitian ini dipaparkan dengan ketiga golongan insektisida selama lima generasi. Data angka kematian larva dengan metode seleksi tunggal disajikan pada Tabel 1-7, sedangkan untuk nyamuk (dewasa) disajikan pada Tabel 8-11.
Dari data tersebut baik larva maupun dewasa belum menunjukkan adanya generasi strain rentan homozigot murni yang ditandai oleh adanya kematian 100%. Meskipun pada generasi ke F4 sudah ada yang menunjukkan kematian 100% (malation dan sipermetrin) tetapi akan dapat dipastikan apabila seleksi terhadap insektisida tersebut dilakukan hingga minimal 10 generasi (F10). Hal serupa juga terjadi pada stadium dewasa yang terpapar oleh malation, bendiokarb, Tabel 11 Rata-rata persentase kematian nyamuk Ae. aegypti terhadap 3 jenis
insektisida
Kematian Nyamuk Ae. aegypti setelah 24 jam
Insektisida Generasi
15 dan deltametrin. Hamdan et al. (2008) melaporkan bahwa larva Cx. quinquefasciatus menunjukkan berhasil menjadi strain rentan homozigot pada generasi kelima (F5). Hal ini ditunjukkan oleh adanya kematian 100% pada generasi kelima (F5). Adapun nilai LT50 nyamuk Cx. quinquefasciatus dewasa dengan cara yang sama menunjukkan juga penurunan resistensi pada setiap generasi, dan resistensi pada generasi kesepuluh (F10) menurun 1.8 kali bila dibandingkan dengan F0. Hal ini menunjukkan bahwa stadium larva pada Cx.
quinquefasciatus lebih cepat mengalami penurunan resistensi dibandingkan dengan stadium dewasa.
Resistensi secara genetik diturunkan dan tingkat perkembangan resistensi bergantung pada frekwensi gen resisten, kekerapan penggunaan insektisida dan lamanya aplikasi (Brown 1986). Sementara itu Finney dan Dunley (2009) menyatakan bahwa resistensi meningkat lebih cepat pada tempat-tempat seperti rumah kaca, tempat serangga atau tungau bereproduksi dengan cepat, tempat yang kecil atau tidak ada imigrasi serangga-serangga rentan.
Mekanisme fisiologis yang tepat untuk resistensi organophosphate (malation) terhadap nyamuk masih harus dieksplorasi untuk mengembangkan cara mengukur resistensi. Studi perlu dilakukan untuk mendapatkan pola resistensi silang dan menentukan managemen pengendalian yang tepat. Sebagai contoh, penggunaan insektisida secara bergantian untuk menghindari terbentuknya mekanisme gen yang resisten. Program pengendalian harus memperhatikan resiko terjadinya resistensi silang insektisida terhadap populasi nyamuk dan hama pertanian. Oleh karena itu, studi mekanisme resistensi silang perlu dilakukan untuk dapat mengatasi masalah resistensi dan merencanakan strategi baru dalam mengurangi terjadinya evolusi resistensi. Studi resistensi silang juga akan memberikan informasi penting untuk mengenali mekanisme resistensi (Scott 1989).
5
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Dengan metode seleksi indukan tunggal, kemudian dipaparkan dengan insektisida malation, propoksur 1 ppm, dan sipermetrin 0.001 ppm, larva Ae.
aegypti menunjukkan tren rentan homozigot pada generasi keempat (F4). Adapun pada stadium dewasa, Ae. aegypti pada generasi keempat (F4) belum menunjukkan perubahan menjadi strain yang homozigot rentan terhadap tiga jenis insektisida. Pembentukan strain homozigot rentan memerlukan waktu di atas lima generasi.
Saran
16
DAFTAR PUSTAKA
Ahmad N W, Lee HL, Sa’diyah I. 1998. Rate of Resistance Development in Wild
Culex quinquefasciatus (Say) Selected by Malathion and Permethrin. Southeast Asian J. of Trop. Med. & Pub. Hlth. 29(4): 849–855.
Ahmad NW, Kamaludin MY, Lee HL, Rogayah TAR, Sa’diyah I. 2000. Oxidase Activity in Relation to Insecticide Resistance in Vectors of Public Health Importance. Trop. Biomed. 17(2):69-79.
Brown AWA (1986). Insecticide Resistant in Mosquitoes: a Pragmatic Review. J. of American Mosq. Cont. Asso. 2:123-140.
Cui F, Raymond M, Qiao CL. 2006. Review Insecticide Resistance in Vector Mosquitoes in China. Pest Manag Sci. 62:1013-1022.
[FAO] Food and Agriculture Organization of The United Nations. 2012.
International Code of Conduct on the Distribution and Use of Pesticide. Guidelines on Prevention and Management of Pesticide Resistance. Rome (Italy): FAO press.
Finney DJ, Dunley J. (2009). Orchard Pest Management, http://www.wsu.edu/ Gonzales T, Bisset JA, Diaz C, Rodriguez MM, Brandolini MB. 1999. Insecticide
Resistance in a Culex quinquefasciatus Strain from Rio janeiro, Brazil. Mem. Inst. Oswaldo Cruz 94(1):121-122.
Gubler, DJ. 2002. The Global Emergence/Resurgence Of Arboviral Diseases As Public Health Problems. Arch.Med. Res. 33:330-342.
Hadi UK (2011). Penyakit Tular Vektor: Demam Berdarah Dengue. Bagian Parasitologi dan Entomologi Kesehatan. Institut Pertanian Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. http://www.academia.edu/3265641/Penyakit_Tular_-Vektor_Demam_Berdarah_Dengue
Hadi UK (2011b). Penyakit Tular Vektor: Penyakit Chikungunya. Bagian Parasitologi dan Entomologi Kesehatan. Institut Pertanian Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. http://upikke.staff.ipb.ac.id/files/2011/06/Penyakit-TularVek-tor- Chikungunya.pdf.
Hadi UK, Koesharto FX. 2006. Nyamuk. Di dalam Sigit SH, Hadi UK. Hama Permukiman Indonesia: Pengenalan , Biologi, dan Pengendalian. Bogor (ID): Unit Kajian Pengendalian Hama Permukiman (UKPHP) FKH IPB.
Hadi UK, Soviana S. 2010. Ektoparasit: Pengenalan, Identifikasi dan Pengendaliannya. Bogor (ID): IPB Press.
Hamdan H, Ahmad NW, Azirun MS. 2008. Determination of Homozygotes Susceptible Strain in Cx. quinquefasciatus (Say), Using Single Raft Sib-selection Method. Trop Biomed. 25(1):75-79.
Hamdan H, Azirun MS, Ahmad NW, and Lim LH. 2005. Insecticide Resistance in
Culex quinquefasciatus (Say), Aedes aegypti (L.) and Aedes albopictus (Skuse) Larvae Against Malathion, Permetrin and Temephos. Trop. Biom. 22(1):45-52. Hemingway J dan Ranson H. 2000. Insecticide in Insect Vectors of Human
17 Hidayati R, Kesumawati U, Manuwoto S, Koesmaryono Y, Boer R. 2007.
Kebutuhan Satuan Panas Untuk fase Perkembangan Pada Nyamuk Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) dan Periode Inkubasi Ektrinsik Virus Dengue. J. Ekol. Kes. 6(3):648-658.
Husham AO, Abdalmagid MA, Brair M. 2010. Status Susceptibility of Dengue Vector; Aedes aegypti to Different Groups of Insecticides in Port Sudan City - Red Sea State. Sudanese J. Public Health. 5(4):199-202.
Kranthi KR. 2005. Insecticide Resistance. Washington (AS):Central Institute for Cotton Research.
Lima EP, Paiva MHS, Araujo AP, Silva EVG, Silva EVG, Silva UM, Oliveira LN, Santana AEG, Barbosa CN, Neto CCP, Goulart MO et al. 2011. Insecticide Resistance in Aedes aegypti Populations from Ceara, Brazil. Par & Vect. 4(5):1-12.
McCall PJ, Kittayapong P. 2006. Control of Dengue Vectors: Tools and Strategies. Prog. for Research and Training in Trop. Diseases 1-13.
Mulyatno KC, Yamanaka A, Ngadino, Konishi E. 2012. Resistance of Aedes aegypti (L.) larvae to Temephos in Surabaya, Indonesia. Southeaast Asian J. Trop Med Public Health 43(1):29-33.
Nurjanah S. 2013. Status kerentanan vektor Aedes aegypti Terhadap Insektisida dan Kaitannya Dengan Kejadian Kasus Demam Berdarah Di Kota Bogor [tesis]. Institut Pertanian Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.
Pradani FY, Ipa M, Marina R, Yuliasih Y. 2011. Penentuan Status Resistensi
Rowland M. 1991. Behaviour and Fitness γHCH/dieldrin Resistant and Susceptible Female Anopheles gambiae and Anopheles stephensi Mosquitoes in The Absence of Insecticide. Med. Vet. Entomol. 5:193-206.
Scott JG. 1989. Cross Resistance to The Biological Insecticide Abamectin in Pyrethroid Resistant House Flies. Pest. Bioc. And Phys. 34:27-31.
Sukowati S. 2010. Masalah Vektor Demam Berdarah Dengue (DBD) dan Pengendaliannya di Indonesia. Bul. Jendela Epid. 2:26.
Supartha IW. 2008. Pengendalian Terpadu Vektor Virus Demam Berdarah Dengue, Aedes aegypti (Linn.) dan Aedes albopictus (Skuse) (Diptera: Culicidae). Pertemuan Ilmiah, 3-6 Sepetember 2007, Udayana-Bali, Indonesia. [WHO] World Health Organization. 1975. Instruction for Determining The
Susceptibility or Resistance of Adult Mosquitos to Organophosphorus and Carbamat Insecticides. Geneva (CH): WHO.
[WHO] World Health Organization. 1998. Report of The WHO Informal Consultation. Test Procedures for Insecticide Resistance Monitoring in Malaria Vectors, Bio-Efficacy and Persiistance of Insecticides on Treated Surfaces. Geneva (CH): WHO press.
18
[WHO] World Health Organization. 2006. Pesticides and Their Application. For The Control of Vector and Pests of Public health Importance. The Sixth Edition. Department of Control of Negleted Tropical Disease. WHO Pesticides Evaluation Scheme (WHOPES). Geneva (CH): WHO press.
[WHO] World Health Organization. 2013. Test Prosedures for Insecticide Resistance Monitoring in Malaria Vector Mosquitoes. Geneva (CH): WHO Press.
19
LAMPIRAN
Lampiran 1 Kertas berinsektisida (impregnatedpaper)
20
Lampiran 3 Kandang pemeliharaan Ae. aegypti
21 Lampiran 5 Perbandingan mortalitas Larva Ae. aegypti pada perbedaan generasi
terhadap tiga konsentrasi malation (a. 1 ppm ; b. 0.001 ppm ; c. 0.0005 ppm)
a
b
22
Lampiran 6 Perbandingan mortalitas Larva Ae. aegypti pada perbedaan generasi terhadap tiga konsentrasi propoksur (a. 1 ppm ; b. 0.001 ppm ; c. 0.0005 ppm)
a
b
23 Lampiran 7 Perbandingan mortalitas Larva Ae. aegypti pada perbedaan generasi
terhadap tiga konsentrasi sipermetrin (a. 0.001 ppm ; b. 0.0005 ppm ; c. 0.00025 ppm)
a
b
24
Lampiran 8 Rata-rata persentase kematian nyamuk Ae. aegypti terhadap malation 0.8%
Lampiran 9 Rata-rata persentase kematian nyamuk Ae. aegypti terhadap bendiokarb 0.1%
25 Lampiran 11 Rata-rata persentase kematian Ae. aegypti dewasa setelah 24 jam
26
RIWAYAT HIDUP
Isfanda lahir di Rheuem Timu (Kab. Bireuen, Aceh) pada tanggal 30 Mei 1987, putra ke enam dari enam bersaudara dari Bapak Abdullah Abbas dan Ibu Rusmanidar Ilyas. Riwayat pendidikan dari SMA Negeri 1 Samalanga lulus pada tahun 2005 dan Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Syiah Kuala lulus pada tahun 2010.
