Uji Fitokimia Fix

(1)

I.

I. No. No. Percobaan Percobaan :: 66 II.

II. Judul Judul Percobaan Percobaan :: Uji Fitokimia Pada Ekstrak RiUji Fitokimia Pada Ekstrak Rimpang Temulawak mpang Temulawak III.

III. Tanggal Tanggal Percobaan Percobaan :: 07 September 201607 September 2016 IV.

IV. Tujuan Tujuan Percobaan Percobaan :: 1.

1. Memilih peralatan yang dibutuhkan sesuai dengan percobaan yang dikerjakanMemilih peralatan yang dibutuhkan sesuai dengan percobaan yang dikerjakan 2.

2. Memilih bahan-bahan yang dibutuhkan sesuai dengan percobaan yangMemilih bahan-bahan yang dibutuhkan sesuai dengan percobaan yang dikerjakan

dikerjakan 3.

3. Mengidentifikasi komponen kimia tumbuhan dari kelompok terpenoid, steroid,Mengidentifikasi komponen kimia tumbuhan dari kelompok terpenoid, steroid, fenolik (antrakuinon, tanin, dan fenol), flavonoid, dan alkohol yang terkandung fenolik (antrakuinon, tanin, dan fenol), flavonoid, dan alkohol yang terkandung dalam ekstrak rimpang temulawak

dalam ekstrak rimpang temulawak V.

V. Dasar TeoriDasar Teori

Uji fitokimia merupakan salah satu langkah penting dalam upaya Uji fitokimia merupakan salah satu langkah penting dalam upaya mengungkapkan potensi sumber daya tumbuhan. Hasil sintesis fitokimia dapat mengungkapkan potensi sumber daya tumbuhan. Hasil sintesis fitokimia dapat memberikan petumjuk tentang keberadaan komponen kimia (senyawa) jenis memberikan petumjuk tentang keberadaan komponen kimia (senyawa) jenis golongan alkaloid, flavonoid, fenolik, steroid dan tri terpenoid pada tumbuhan (Tim golongan alkaloid, flavonoid, fenolik, steroid dan tri terpenoid pada tumbuhan (Tim dosen kimia organik, 2016). Fitokimia biasanya digunakan untuk menunjuk pada dosen kimia organik, 2016). Fitokimia biasanya digunakan untuk menunjuk pada senyawa yang ditemukan padatumbuhan yang tidak dibutuhkan untuk fungsi normal senyawa yang ditemukan padatumbuhan yang tidak dibutuhkan untuk fungsi normal tubuh,tapi memiliki efek yang menguntungkan bagi kesehatan atau memiliki peran tubuh,tapi memiliki efek yang menguntungkan bagi kesehatan atau memiliki peran aktif bagi pencegahan penyakit.

aktif bagi pencegahan penyakit.

Fitokimia yaitu ilmu yang mempelajari berbagai senyawa organik yang Fitokimia yaitu ilmu yang mempelajari berbagai senyawa organik yang dibentuk dan disimpan oleh tumbuhan, yaitu tentang struktur kimia, biosintesis, dibentuk dan disimpan oleh tumbuhan, yaitu tentang struktur kimia, biosintesis, perubahan

perubahan dan dan metabolisme metabolisme serta serta penyebaran penyebaran secara secara alami alami dan dan fungsi fungsi biologis biologis daridari senyawa organik. Fitokimia biasanya digunakan untuk merujuk pada senyawa yang senyawa organik. Fitokimia biasanya digunakan untuk merujuk pada senyawa yang ditemukan pada tumbuhan yang tidak dibutuhkan untuk fungsi normal tubuh, tapi ditemukan pada tumbuhan yang tidak dibutuhkan untuk fungsi normal tubuh, tapi memiliki efek yang menguntungkan bagi kesehatan. Uji fitokimia dilakukan pada memiliki efek yang menguntungkan bagi kesehatan. Uji fitokimia dilakukan pada setiap ekstrak. Hasil analisis fitokimia dapat memberikan petunjuk tentang setiap ekstrak. Hasil analisis fitokimia dapat memberikan petunjuk tentang keberadaan komponen kimia (senyawa) jenis golongan alkaloid, flavonoid, steroid, keberadaan komponen kimia (senyawa) jenis golongan alkaloid, flavonoid, steroid, triterpenoid.

triterpenoid.

Temulawak (cucumu zanthorrhiza) merupakan salah satu jenis ramu-ramuan Temulawak (cucumu zanthorrhiza) merupakan salah satu jenis ramu-ramuan yang digunakan sebagai bahan baku obat. Tumbuhan temulawak mempunyai ukuran yang digunakan sebagai bahan baku obat. Tumbuhan temulawak mempunyai ukuran rimpang yang besar dan bercabang-cabang. Kandungan kimia di rimpang temulawak rimpang yang besar dan bercabang-cabang. Kandungan kimia di rimpang temulawak

(2)

mengandung zat kuning (kurkumin), dermotoksi kurkumin, glukosa, kalium oksalat, mengandung zat kuning (kurkumin), dermotoksi kurkumin, glukosa, kalium oksalat, protein, serat, pati, minyak atsiri.

protein, serat, pati, minyak atsiri.

Alkaloid merupakan senyawa organik bahan alam yang terbesar jumlahnya Alkaloid merupakan senyawa organik bahan alam yang terbesar jumlahnya baik

baik dari dari segi segi jumlah jumlah maupun maupun sebarannya. sebarannya. Secara Secara umum umum alkaloid alkaloid merupakanmerupakan senyawa metabolit sekunder yang bersifat basa mengandung satu atau lebih atom senyawa metabolit sekunder yang bersifat basa mengandung satu atau lebih atom nitrogen dengan sepasang elektron bebasnya. Alkaloid adalah senyawa organik yang nitrogen dengan sepasang elektron bebasnya. Alkaloid adalah senyawa organik yang terdapat dari alam yang bersifat basa disebabkan karena adanya atom N (nitrogen) terdapat dari alam yang bersifat basa disebabkan karena adanya atom N (nitrogen) dalam molekul senyawa tersebut.

dalam molekul senyawa tersebut.

Flavonoid merupakan satu kelompok senyawa fenol yang terbesar di alam. Flavonoid merupakan satu kelompok senyawa fenol yang terbesar di alam. Senyawa-senyawa ini merupakan zat warna merah, ungu dan biru serta kuning yang Senyawa-senyawa ini merupakan zat warna merah, ungu dan biru serta kuning yang ditemukan banyak dalam tumbuh-tumbuhan. Sebagian besar flavonoid yang terdapat ditemukan banyak dalam tumbuh-tumbuhan. Sebagian besar flavonoid yang terdapat pada

pada tumbuhan tumbuhan terikat terikat pada pada molekul molekul gula gula sebagai sebagai glikosida glikosida dan dan dalam dalam bentukbentuk campuran, serta jarang sekali dijumpai dalam bentuk senyawa tunggal. Flavonoid campuran, serta jarang sekali dijumpai dalam bentuk senyawa tunggal. Flavonoid dapat digunakan sebagai obat karena mempunyai macam-macam bioaktivitas, seperti dapat digunakan sebagai obat karena mempunyai macam-macam bioaktivitas, seperti antiinflamasi, anti kanker, anti biotik, dan sebagainya. Flavonoid secara kimia antiinflamasi, anti kanker, anti biotik, dan sebagainya. Flavonoid secara kimia tersusun dari 15 atom karbon dengan inti dasar tersusun dalam konjugasi.

tersusun dari 15 atom karbon dengan inti dasar tersusun dalam konjugasi.

Steroid atau triterpenoid merupakan suatu kelompok senyawa yang memiliki Steroid atau triterpenoid merupakan suatu kelompok senyawa yang memiliki kerangka dasar siklo pentano perhidrofenantren dalam bentuk empat cincin terpadu. kerangka dasar siklo pentano perhidrofenantren dalam bentuk empat cincin terpadu. Senyawa ini memiliki beberapa kegunaan bagi tumbuhan yaitu sebagai pengatur Senyawa ini memiliki beberapa kegunaan bagi tumbuhan yaitu sebagai pengatur pertumbuhan.

pertumbuhan. Karetenoid Karetenoid sebagai sebagai pewarna pewarna dan dan memiliki memiliki peran peran dalam dalam prosesproses fotosintesis. Kegunaannya dalam bidang farmasi seringkali digunakan sebagai bahan fotosintesis. Kegunaannya dalam bidang farmasi seringkali digunakan sebagai bahan baku pembuatan obat.

baku pembuatan obat. Fenol meliputi Fenol meliputi berbagai senyawa berbagai senyawa yang berasal yang berasal dari dari tumbuhantumbuhan yang memiliki ciri dan karakter yang sama, yaitu memiliki cincin aromatik yang yang memiliki ciri dan karakter yang sama, yaitu memiliki cincin aromatik yang mengandung salah satu jenis atau 2 gugus hidroksil. Kuonin adalah senyawa mengandung salah satu jenis atau 2 gugus hidroksil. Kuonin adalah senyawa berwarna dan mempunyai kromofor kasar. Identifikasi hasil positif sen

berwarna dan mempunyai kromofor kasar. Identifikasi hasil positif sen yawa ini yaituyawa ini yaitu adanya perubahan warna larutan menjadi merah, violet atau merah keunguan.

adanya perubahan warna larutan menjadi merah, violet atau merah keunguan.

Saponin adalah jenis glikosida yang banyak ditemukan dalam tumbuhan. Saponin adalah jenis glikosida yang banyak ditemukan dalam tumbuhan. Saponin memiliki karakteristik berupa buih. Sehingga ketika direaksikan dengan air Saponin memiliki karakteristik berupa buih. Sehingga ketika direaksikan dengan air dan dikocok akan terbentuk buih yang dapat bertahan lama. Saponin mudah larut dan dikocok akan terbentuk buih yang dapat bertahan lama. Saponin mudah larut dalam air dan tidak larut dalam eter.

dalam air dan tidak larut dalam eter.

Sebagian senyawa organik bahan alam adalah senyawa aromatik. Senyawa Sebagian senyawa organik bahan alam adalah senyawa aromatik. Senyawa aromatik mengandung senyawa karbonatik yang cincin aromatik hanya terdiri dari aromatik mengandung senyawa karbonatik yang cincin aromatik hanya terdiri dari

(3)

karbon seperti benzena. Oleh karena itu senyawa bahan organik alam sering disebut fenol walaupun sebagian diantaranya bersifat netral.

VI. Alat dan Bahan

 Alat-alat:

1. Blender 1 buah

2. Pisau 1 buah

3. Neraca Analitik 1 buah

4. Neraca Ohauss 1 buah

5. Gelas Kimia 2 buah

6. Tabung Reaksi 2 buah

7. Pembakar Spirtus 1 buah

8. Rak tabung reaksi 1 buah

9. Tabung reaksi 5 buah

10. Pipet tetes 10 buah

11. Spatula 1 buah

12. Corong 1 buah

13. Erlenmeyer berparuh 1 buah

14. Kaki tiga 1 buah

15. Kasa 1 buah  Bahan-bahan: 1. Rimpang temulawak 2. HCl pekat 3. H2SO4 pekat 4. H2SO4 2N 5. FeCl3 1% 6. Kloroform 7. Amoniak 8. Logam Mg 9. Metanol 60%-80% 10. Etanol 70% 11. Aquades

(4)

12. Reagen Lieberman – Burchard

13. Reagen Meyer

14. Reagen Dragendorf

15. Reagen Wagner

VII. Alur

1. Penyiapan ekstrak methanol rimpang temulawak

Rimpang Temulawak

- Dibersihkan dan dikeringkan

- Digiling atau diblender

Rimpang Temulawak

- Diuapkan dalam penangas air

Rimpang Temulawak

- Dimasukkan kedalam gelas kimia

- Diekstraksi dengan 15 mL methanol

- Dipanaskan

- Disaring dengan kertas saring

filtrat _Residu

(5)

2. Identifikasi alkanoid

3. Identifikasi flavonoid

- (+) 0,1 Mg dan 2 tetes HCl pekat

- (+) 3 mL entanol - Dikocok - Dipanaskan - Dikocok lagi - disarin 1 mL sampel Filtrat Residu 1 mL sampel - (+) 3 tetes H2SO4 - Dikocok - Didiamkan

- Bagian ata diuji dengan dragendorf

- (+) 3 tetes H2SO4

- Dikocok

- Didiamkan

- Bagian ata diuji dengan wagner

- Dicampur dengan 1 mL kloroform

- (+) 1 mL amoniak

- Dipanaskan daam penangas air

- Ddikocok

- disaring

1 mL sampel

- Dibagi menjadi bagian yang sama

Filtrat

- (+) 3 tetes H2SO4

- Dikocok

- Didiamkan

- Bagian ata diuji dengan meyer

Tabung I Tabung II Tabung III

(6)

4. Identifikasi saponin

5. Identifikasi steroid

6. Identifikasi triterpenoid

- Dikocok

- Didiamkan selama 15 menit

- Dididihkan dalam 10 mL air dalam penangas air

- disaring

1 mL sampel

Filtrate Residu

Basa yang stabil

- (+) 3 Ml etanol 70%

- (+) 2mL H2SO4 pekat

- (+) 2 mL asam asetat anhidrat 1 mL sampel Biru/hijau - (+) 2 mL kloroform - (+) 2 mL H2SO4 pekat 1 mL sampel Merah kecoklatan

(7)

7. Identifikasi Tanin

- (+) 2 tetes FeCl 3

- Dididihkan dengan 20 mL air diatas penangas air

- disaring 1 mL sampel

filtrat

(8)

VIII. Hasil Pengamatan

No. Prosedur Percobaan Hasil Pengamatan Dugaan/Reaksi Kesimpulan

1. Penyimpanan Ekstrak methanol pada rimpang temulawak

Sebelum :

Rimpang temulawak : kuning Sesudah :

Dikeringkan dan diblender : serbuk kuning

Sebelum :

Methanol 60-80% : larutan tak berwarna

Serbuk kering temulawak : berwarna kuning kering

Sesudah :

Serbuk temulawak + methanol 60-80% : terbentuk 2 lapisan jingga kemerahan

Filtrat : larutan berwarna merah kehitaman

Residu : coklat

Ekstrak methanol rimpang temulawak mengandung alkaloid, flavonoid steroid, triterpenoid dan tannin sehingga baik untuk ekstraksi temulawak. - Dibersihkan dan dikeringkan

- Digiling atau diblender Rimpang Temulawak

Rimpang Temulawak

- Diuapkan dalam penangas

- Dimasukkan kedalam gelas kimia

- Diekstraksi dengan 15 mL methanol - Dipanaskan

- Disaring dengan kertas saring

Rimpang Temulawak

filtrat Residu

Sampel

KIMIA ORGANIK III

Uji Fitokimia pada Ekstrak Rimpang Temulawak

2. Identifikasi alkanoid _{Sebelum :}

Sampel : larutan coklat

Kloroform : larutan tak berwarna Amonia : larutan tak berwarna H2SO4 2 N : larutan tak berwarna

Reagen Meyer : larutan tak berwarna

Reagen Wegner : larutan merah kecoklatan

Reagen Dragendorf : larutan kuning

Sesudah :

Sampel + kloroform : larutan berwarna jingga

Sampel + kloroform + amonia : larutan berwarna merah bata Sampel + kloroform + amonia + dipanaskan : terdapat dua lapisan, lapisan atas berwarna merah (-) dan lapisan bawah merah (++)

Sampel temulawak positif mengandung alkaloid ditandai dengan terbentuknya endapan coklat saat diuji dengan reagen Wagner, terbentuk endapan jingga jika diuji dengan reagen Mayer, dan terbentuk endapan putih saat diuji dengan reagen Dagendrorf.

Filtrat I tidak mengandung alkanoid, sedangkan sampel II dan III mengandung alkaloid. - Dicampur dengan 1 mL kloroform

- (+) 1 mL amoniak

- Dipanaskan daam penangas air - Ddikocok

- Dibagi menjadi 3 bagian yang sama Filtrat

- (+) 3 tetes H2SO4

- Dikocok - Didiamkan - Bagian ata diuji

dengan meyer Tabung I

(9)

2. Identifikasi alkanoid _{Sebelum :}

Kloroform : larutan tak berwarna Amonia : larutan tak berwarna H2SO4 2 N : larutan tak berwarna

Reagen Meyer : larutan tak berwarna

Reagen Wegner : larutan merah kecoklatan

Reagen Dragendorf : larutan kuning

Sesudah :

Sampel + kloroform : larutan berwarna jingga

Sampel + kloroform + amonia : larutan berwarna merah bata Sampel + kloroform + amonia + dipanaskan : terdapat dua lapisan, lapisan atas berwarna merah (-) dan lapisan bawah merah (++)

Sampel temulawak positif mengandung alkaloid ditandai dengan terbentuknya endapan coklat saat diuji dengan reagen Wagner, terbentuk endapan jingga jika diuji dengan reagen Mayer, dan terbentuk endapan putih saat diuji dengan reagen Dagendrorf.

Filtrat I tidak mengandung alkanoid, sedangkan sampel II dan III mengandung alkaloid. - Dicampur dengan 1 mL kloroform

- (+) 1 mL amoniak

- Dipanaskan daam penangas air - Ddikocok

- Dibagi menjadi 3 bagian yang sama Filtrat

- (+) 3 tetes H2SO4

dengan meyer Tabung I

Jingga

KIMIA ORGANIK III

Tabung I

Filtrat I + H2SO4 2 N : larutan berwarna merah bata

Filtrat I + H2SO4 2 N + reagen Mayer : larutan jingga

Tabung II

Filtrat II + H2SO4 2 N : larutan merah bata

Filtrat II + H2SO4 2 N + reagen Wagner : larutan coklat

Tabung III

Filtrat III + H2SO4 2 N : larutan merah bata

Filtrat III + H2SO4 2 N + reagen Dragendorf : endapan putih - (+) 3 tetes H2SO4

dengan wagner Tabung II Coklat - (+) 3 tetes H2SO4 - Dikocok - Didiamkan - Bagian atas diuji

dengan dragendorf Tabung III

(10)

Tabung I

Filtrat I + H2SO4 2 N : larutan berwarna merah bata

Filtrat I + H2SO4 2 N + reagen Mayer : larutan jingga

Tabung II

Filtrat II + H2SO4 2 N : larutan merah bata

Filtrat II + H2SO4 2 N + reagen Wagner : larutan coklat

Tabung III

Filtrat III + H2SO4 2 N : larutan merah bata

Filtrat III + H2SO4 2 N + reagen Dragendorf : endapan putih - (+) 3 tetes H2SO4

dengan wagner Tabung II Coklat - (+) 3 tetes H2SO4 - Dikocok - Didiamkan - Bagian atas diuji

dengan dragendorf Tabung III

Jingga

KIMIA ORGANIK III

3. Identifikasi flavanoid _{Sebelum :}

Etanol 70 % : larutan tak berwarna

Mg : serbuk putih keabu-abuan HCl : larutan tak berwarna Sesudah :

Sampel + etanol 70 % : larutan jingga (+)

Filtrat + logam Mg : larutan berwarna jingga terdapat endapan logam Mg tidak larut dalam larutan

Filtrat + logam Mg + HCl pekat : terdapat gelembung gas, larutan berwarna merah

Sampel yang mengandung flavonoid akan

membentuk warna merah pada etanol dan terdapat

gelembung gas.

Sampel rimpang

temulawak mengandung flavonoid.

- (+) 0,1 Mg dan 2 tetes HCl pekat - (+) 3 mL entanol - Dikocok - Dipanaskan - Dikocok lagi - disaring 1 mL sampel Filtrat Residu 1 mL sampel

(11)

3. Identifikasi flavanoid _{Sebelum :}

Mg : serbuk putih keabu-abuan HCl : larutan tak berwarna Sesudah :

Sampel + etanol 70 % : larutan jingga (+)

Filtrat + logam Mg : larutan berwarna jingga terdapat endapan logam Mg tidak larut dalam larutan

Filtrat + logam Mg + HCl pekat : terdapat gelembung gas, larutan berwarna merah

Sampel yang mengandung flavonoid akan

membentuk warna merah pada etanol dan terdapat

gelembung gas.

Sampel rimpang

temulawak mengandung flavonoid.

- (+) 0,1 Mg dan 2 tetes HCl pekat - (+) 3 mL entanol - Dikocok - Dipanaskan - Dikocok lagi - disaring 1 mL sampel Filtrat Residu 1 mL sampel

KIMIA ORGANIK III

4.

5.

Identifikasi saponin

Identifikasi steroid

Sebelum :

Sampel : larutan coklat Air : larutan tak berwarna Sesudah :

Sampel + air : larutan berwarna kuning (++)

Setelah dipanaskan dan dikocok : larutan berwarna kuning dan terdapat tidak terbentuk busa

Sebelum :

H2SO4 pekat : larutan tak berwarna

CH3COOH : larutan tak berwarna

Sesudah :

Sampel + etanol : larutan kuning (-) + H2SO4 pekat : larutan

Sampel temulawak positif mengandung saponin jika terbentuk busa yang stabil.

Sampel mengandung steroid positif jika membentuk perubahan warna dari ungu menjadi biru/hijau

Sampel rimpang

temulawak tidak mengandung saponin

Sampel rimpang temulwak tidak mengandung steroid - Dikocok

- Dididihkan dalam 10 mL air dalam penangas air - disaring

1 mL sampel

Filtrate Residu

Basa yang stabil

- (+) 3 mLmethanol 70% - (+) 2 mL H2SO4 pekat

- (+) 2 mL asam asetat anhidrat 1 mL sampel

(12)

4.

5.

Identifikasi saponin

Identifikasi steroid

Sebelum :

Sampel : larutan coklat Air : larutan tak berwarna Sesudah :

Sampel + air : larutan berwarna kuning (++)

Setelah dipanaskan dan dikocok : larutan berwarna kuning dan terdapat tidak terbentuk busa

Sebelum :

H2SO4 pekat : larutan tak berwarna

CH3COOH : larutan tak berwarna

Sesudah :

Sampel + etanol : larutan kuning (-) + H2SO4 pekat : larutan

Sampel temulawak positif mengandung saponin jika terbentuk busa yang stabil.

Sampel mengandung steroid positif jika membentuk perubahan warna dari ungu menjadi biru/hijau

Sampel rimpang

temulawak tidak mengandung saponin

Sampel rimpang temulwak tidak mengandung steroid - Dikocok

- Dididihkan dalam 10 mL air dalam penangas air - disaring

1 mL sampel

Filtrate Residu

Basa yang stabil

- (+) 3 mLmethanol 70% - (+) 2 mL H2SO4 pekat

- (+) 2 mL asam asetat anhidrat 1 mL sampel

Biru/hijau

KIMIA ORGANIK III

6.

7.

Identifikasi Tnterpenoid

Identifikasi Tanin

berwarna ungu + CH3COOH anhidrat : larutan berwarna ungu Sebelum :

Kloroform : larutan tak berwarna H2SO4 pekat : larutan tak berwarna.

Sesudah :

Sampel + kloroform : larutan coklat kemerahan + H2SO4 pekat : terdapat 2 lapisan (coklat kemerahan, dan coklat jernih) Sebelum :

Sampel : larutan coklat FeCl3 1 % : larutan kuning Sesudah :

Sampel + air : larutan berwarna kuning + dipanaskan + disaring : larutan berwarna kuning (+) + FeCl3 1 % : larutan berwarna coklat (-)

sampel yang positif mengandung trterpenoid akan membentuk warna merah kecoklatan

Sampel yang positif mangandung tanin akan membentuk larutan berwarna coklat kehijauan/biru kehitaman Sampel rimpang temulawak mengandung teriterpenoid Sampel rimpang temulawak mengandung tanin - (+) 2 mL kloroform - (+) 2 mL H2SO4 pekat 1 mL sampel Merah kecoklatan - (+) 2 tetes FeCl3

filtrat

(13)

7. Identifikasi Tanin

anhidrat : larutan berwarna ungu Sebelum :

Kloroform : larutan tak berwarna H2SO4 pekat : larutan tak berwarna.

Sesudah :

Sampel + kloroform : larutan coklat kemerahan + H2SO4 pekat : terdapat 2 lapisan (coklat kemerahan, dan coklat jernih) Sebelum :

Sampel : larutan coklat FeCl3 1 % : larutan kuning Sesudah :

Sampel + air : larutan berwarna kuning + dipanaskan + disaring : larutan berwarna kuning (+) + FeCl3 1 % : larutan berwarna coklat (-)

sampel yang positif mengandung trterpenoid akan membentuk warna merah kecoklatan

Sampel yang positif mangandung tanin akan membentuk larutan berwarna coklat kehijauan/biru kehitaman Sampel rimpang temulawak mengandung teriterpenoid Sampel rimpang temulawak mengandung tanin - (+) 2 mL kloroform - (+) 2 mL H2SO4 pekat 1 mL sampel Merah kecoklatan - (+) 2 tetes FeCl3

filtrat

Hasil Pengamatan

KIMIA ORGANIK III

IX. Analisis dan Pembahasan

Pada percobaan uji fitokimia pada ekstraksi rimpang temulawak (Curcuma zanthorrhiza) dilakukan beberapa cara:

1. Pada percobaan pertama yaitu penyiapan ekstrak methanol rimpang temulawak segar dengan prosedur rimpang temulawak dicuci dan dikuliti. Kemudian dikeringkan dengan cara diangin-anginkan lalu digiling atau diblender untuk mendapatkan serbuk kering. Selanjutnya 5 gram serbuk kering temulawak ditimbang dengan neraca analitik dan dimasukkan ke dalam gelas kimia 100mL serta direndam dengan 15 mL methanol 60-80%. Methanol 60-80% merupakan larutan tidak berwarna. Proses ini disebut maserasi yaitu proses perendaman sampel menggunakan pelarut organik pada suhu ruang. Adanya penambahan 15 mL methanol 60-80% ini menguntungkan dalam senyawa bahan alam karena dengan perendaman sampel tumbuhan akan terjadi perpecahan dinding dan membran sel akibat perbedaan tekanan diluar dan didalam sel sehingga metabolit sekunder yang ada dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut organik. Lalu dipanaskan dalam

(14)

IX. Analisis dan Pembahasan

Pada percobaan uji fitokimia pada ekstraksi rimpang temulawak (Curcuma zanthorrhiza) dilakukan beberapa cara:

1. Pada percobaan pertama yaitu penyiapan ekstrak methanol rimpang temulawak segar dengan prosedur rimpang temulawak dicuci dan dikuliti. Kemudian dikeringkan dengan cara diangin-anginkan lalu digiling atau diblender untuk mendapatkan serbuk kering. Selanjutnya 5 gram serbuk kering temulawak ditimbang dengan neraca analitik dan dimasukkan ke dalam gelas kimia 100mL serta direndam dengan 15 mL methanol 60-80%. Methanol 60-80% merupakan larutan tidak berwarna. Proses ini disebut maserasi yaitu proses perendaman sampel menggunakan pelarut organik pada suhu ruang. Adanya penambahan 15 mL methanol 60-80% ini menguntungkan dalam senyawa bahan alam karena dengan perendaman sampel tumbuhan akan terjadi perpecahan dinding dan membran sel akibat perbedaan tekanan diluar dan didalam sel sehingga metabolit sekunder yang ada dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut organik. Lalu dipanaskan dalam penangas air menggunakan kaki tiga dan bunsen untuk mempercepat proses

ekstraksi

Ekstrak + CH3OH → sampel membentuk dua lapisan. Lapisan bawah membentuk endapan berwarna kuning dan lapisan atas membentuk larutan berwarna jingga. Setelah dipanaskan kemudian disaring menggunakan corong kaca yang berbentuk residu dan filtrat. Dimana residu berbentuk gumpalan kuning dari serbuk-serbuk rimpang temulawak yang tidak digunakan lagi. Sedangkan filtrat menjadi berwarna coklat yang kemudian segera diuapkan dengan cara dimasukkan ke dalam penangas air untuk menghasilkan ekstrak kental. Ekstrak methanol rimpang temulawak yang berwarna coklat ini merupakan sampel untuk uji fitokimia pada rimpang

temulawak.

2. Pada percobaan kedua yaitu mengidentifikasi alkaloid dengan metode Culvenor-Fitzgerald. Pada tahap pertama, ekstrak atau sampel pada percobaan pertama diambil 1 ml dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi menggunakan pipet tetes. Kemudian ditambahkan 1 mL kloroform yang merupakan larutan tidak berwarna. Saat 1 mL sampel ditambahkan dengan 1 mL klorofom akan terbentuk larutan berwarna jingga. Penambahan 1 mL kloroform ini berfungsi untuk memutuskan

(15)

ikatan yang terjadi antara asam tanin dan alkaloid yang terikat secara ionik. Dimana atom N dari alkaloid berikatan stabil dengan gugus hidroksil genolik dari asam tanin. Dengan terputusnya ikatan ini alkaloid akan bebas, sedangkan asam tanin akan terikat oleh kloroform. Kemudian ditambahkan 1 mL amoniak, dimana amoniak merupakan larutan tidak berwarna dan memiliki bau yang sangat menyengat. Setelah ditambahkan amoniak 1 mL larutan berwarna merah bata. Selanjutnya larutan tersebut dipanaskan diatas bunsen menggunakan kaki tiga. Saat dipanaskan larutan akan membentuk 2 (dua) lapisan. Lapisan bawah berwarna merah (-) dan lapisan atas berwarna merah (++). Kemudian larutan tersebut dikocok dengan baik dan disaring dengan menggunakan kertas saring sehingga didapatkan filtrat yang berwarna merah pekat. Filtrat yang dihasilkan dibagi ke dalam tiga tabung reaksi, yaitu tabung 1, 2 dan 3. Setelah filtrat dimasukkan ke dalam masing-masing tabung reaksi kemudian ditambahkan 3 tetes H2SO4 2N encer. Larutan H2SO4 2N encer tidak berwarna. Dengan ditambahkan H2SO4 kedalam masing-masing tabung reaksi larutan akan berwarna merah bata. Adanya penambahan larutan H2SO42N encer berfungsi untuk mengikat kembali alkaloid menjadi garam alkaloid agar dapat bereaksi dengan pereaksi-pereaksi logam berat. Untuk alkaloid yang menghasilkan kompleks garam anorganik yang tidak larut sehingga terpisah dengan metabolik sekundernya. Kemudian larutan dikocok dengan kuat untuk melarutkan senyawa-senyawa pada tiap-tiap lapisan secara tepat dan sempurna sehingga bercampur merata. Kemudian didiamkan beberapa menit hingga larutan terpisah menjadi 2 (dua) lapisan. Setelah larutan terpisah, pada setiap tabung diambil bagian atas pada lapisan tersebut dan dimasukkan kedalam tabung reaksi lain dengan menggunakan pipet tetes sehingga diperoleh larutan bagian atas di dalam 3 (tiga) tabung reaksi yang berbeda. Ketiga tabung reaksi yang berbeda tersebut diberi perlakuan yang berbeda pula.

Tabung reaksi 1 ditambahkan pereaksi Meyer, dimana pereaksi Meyer merupakan larutan tidak berwarna. Pada tabung reaksi 1 ini terbentuk larutan berwarna jingga. Fungsi dari penambahan pereaksi Meyer pada tabung 1 untuk mendeteksi adanya alkaloid, dimana pereaksi Meyer berikatan dengan alkaloid melalui ikatan koordinasi antara atom N alkaloid dan Hg pereaksi Meyer sehingga menghasilkan senyawa kompleks merkuri yang nonpolar. Pada tabung reaksi 2 ditambahkan

(16)

larutan yang berbeda yaitu pereaksi Wayner yang tidak berwarna, sehingga didapatkan larutan berwarna coklat. Tabung reaksi 3 ditambahkan pereaksi Dragendorff. Pereaksi Dragendorf merupakan larutan tidak berwarna. Sehingga dengan penambahan pereaksi Dragendorff maka terbentuk endapan putih. Dari hasil yang didapatkan pada ketiga tabung reaksi, yaitu pada tabung reaksi 1 terbentuk larutan berwarna jingga, pada tabung reaksi 2 terbentuk larutan berwarna coklat dan pada tabung reaksi 3 terbentuk endapan putih. Maka ketiga tabung reaksi tersebut membuktikan bahwa sampel temulawak positif mengandung alkaloid yang ditandai dengan adanya larutan yang berwarna jingga pada pereaksi Meyer, larutan coklat pada pereaksi Wayner dan endapan putih pada pereaksi Dragendorff.

Persamaan Reaksi dari tabung I :

Kalium alkaloid (endapan jingga)

Persamaan reaksi Tabung II :

Kalium alkaloid (endapan coklat) Persamaan reaksi tabung III :

(17)

3. Pada percobaan ketiga, yaitu identifikasi flavonoid yang bertujuan untuk mengidentifikasi adanya flavonoid atau tidak pada sampel temulawak. Langkah pertama yang dilakukan yaitu mengambil 1 mL sampel menggunakan pipet tetes kedalam tabung reaksi. Kemudian dicampur dengan 3 mL etanol 70% dimana larutan etanol 70% tidak berwarna sehingga campuran larutan menjadi berwarna kuning (+) atau jingga. Campuran larutan berwarna jingga tersebut pada tabung reaksi kemudian dikocok dan dipanaskan dalam penangas air menggunakan kaki tiga dan bunsen sehingga larutan menjadi larut. Setelah larutan menjadi larut kemudian dikocok kembali dan disaring dengan menggunakan kertas saring. Filtrat yang dihasilkan setelah disaring itu berwarna jingga yang kemudian ditambah 0,1 gram Mg sehingga terbentuk endapan di bagian dasar tabung. Setelah itu campuran tersebut ditambahkan 2 tetes HCl pekat. HCl pekat merupakan larutan asam yang tidak berwarna. Sehingga dengan penambahan HCl pekat akan menjadi larutan berwarna merah. Fungsi dari penambahan Mg dan HCl pekat adalah untuk

mendeteksi adanya senyawa flavanoid dimana flavanoid akan bereaksi dengan Mg setelah penambahan asam klorida pekat dengan terjadinya perubahan warna merah sebab flavanoid mengalami perubahan serapan cahaya ke arah panjang gelombang yang lebih besar akibat adanya reaksi reduksi oleh HCl. Dari percobaan ketiga yang telah dilakukan, terbukti bahwa sampel temulawak positif mngandung flavonoid dibuktikan dengan adanya perubahan warna merah setelah ditambahkan Mg dan HCl pekat.

(18)

4. Pada percobaan keempat, yaitu identifikasi saponin yang bertujuan untuk mengidentifikasi adanya saponin pada sampel temulawak. Pertama 1 mL sampel dimasukkan kedalam gelas kimia dan dicampurkan dengan 10 mL dan dipanaskan hingga mendidih menggunakan bunsen dan kaki tiga. Saat penambahan air panas ke dalam sampel terlihat ada busa pada tabung reaksi dan setelah didiamkan busa tersebut hilang. Hal ini membuktikan bahwa sampel temulawak tidak mengandung saponin dilihat dari tidak terbentuknya busa secara konstan/stabil. Busa yang terjadi pada saponin merupakan komponen lipida polar yang bersifat ampifilik (memiliki gugus hidrofilik dan gugus hidrofobik). Di dalam sistem cair, lipida cair secara spontan terdispersi membentuk misel dengan ekor filik yang bersinggungan dengan medium cair. Misel tersebut dapat mengandung ribuan molekul lipida. Lipida cair membentuk suatu lapisan dengan ketebalan satu molekul yaitu lapisan tunggal. Pada sistem tersebut, ekor hidrokarbon terbuka sehingga terhindar dari air dan lapisan hidrofilik memanjang ke air yang bersifat polar. Namun pada percobaan kelompok kami tidak terbentuk busa secara stabil yang artinya pada sampel temulawak tidak memiliki saponin.

(19)

5. Pada percobaan kelima, yaitu identifikasi steroid yang bertujuan untuk mengidentifikasi adanya steroid pada sampel temulawak. Pertama 1 mL sampel berwarna coklat dimasukkan kedalam tabung reaksi menggunakan pipet tetes. Kemudian dicampur dengan 3 mL etanol 70%. Larutan etanol 70% ini merupakan larutan tidak berwarna. Penambahan etanol 70% ini menjadikan sampel berwarna kuning (-) atau jingga. Setelah larutan tercampur, kemudian ditambahkan 2 mL H2SO4 2N pekat sehingga terbentuk endapan berwarna ungu. Adanya penambahan H2SO42N pekat yang merupakan larutan tidak berwarna ini adalah berfungsi untuk mengikat steroid. Setelah itu campuran larutan ditambahkan 2 mL asam asetat anhidrat tidak berwarna yang merupakan reagen Lieberman-Burchard, sehingga terbentuk adanya endapan jingga dan larutan berwarna merah kecoklatan. Fungsi adanya penambahan asam asetat anhidrat adalah untuk mengikat air sehingga tidak mengandung air. Dengan adanya endapan jingga dan larutan berwarna merah kecoklatan ini menandakan bahwa sampel temulawak negatif tidak mengandung steroid. Jika sampel yang dihasilkan berwarna ungu kebiruan atau kehijauan, maka sampel positif. Namun, pada percobaan yang kami lakukan sampel negatif dengan reagen Lieberman-Burchard.

6. Pada percobaan keenam, yaitu identifikasi triterpenoid yang bertujuan untuk mengidentifikasi adanya triterpenoid pada sampel temulawak. Langkah pertama 1

(20)

mL sampel temulawak yang berwarna coklat diambil dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi menggunakan pipet tetes. Kemudian ditambahkan 2 mL kloroform yang merupakan larutan tidak berwarna. Penambahan 2 mL kloroform ini menjadikan larutan berwarna coklat kemerahan. Fungsi dari penambahan kloroform ini untuk melarutkan triterpenoid yang mudah larut dalam pelarut organik. Setelah itu ditambahkan 2 mL H2SO4 2N pekat yang merupakan larutan tidak berwarna. Dengan adanya penamabahan H2SO42N pekat ini terbentuk 2 lapisan. Yaitu lapisan atas larutan coklat kemerahan dan lapisan bawah larutan coklat jernih. Penambahan H2SO4 2N pekat ini berfungsi untuk mereduksi triterpenoid. Pada percobaan keenam yang telah dilakukan diperoleh larutan coklat kemerahan antar permukaan. Hal ini membuktikan bahwa sampel temulawak tersebut positif mengandung triterpenoid.

7. Pada percobaan ketujuh, yaitu identifikasi tanin yang bertujuan untuk mengidentifikasi adanya tanin pada sampel temulawak. Pertama sampel temulawak diambil 1 mL dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi menggunakan pipet tetes. Kemudian dididihkan dengan 20 mL air di dalam penangas menggunakan bunsen dan kaki tiga. Setelah itu disaring, dan filtrat yang dihasilkan diuji dengan 2-3 tetes pereaksi FeCl3 1%. Dimana FeCl3 1% merupakan larutan berwarna kuning. Dengan penambahan 2-3 tetes pereaksi FeCl3 1% ini terbentuk larutan berwarna coklat (-). Timbulnya warna larutan coklat (-) ataupun biru kehitaman menunujukkan bahwa percobaan sampel temulawak positif mengandung tanin.

(21)

X. Kesimpulan

Dari percobaan yang telah dilakukan, diperoleh kesimpulan diantaranya: 1. Sampel temulawak teridentifikasi positif mengandung alkaloid yang ditandai dengan adanya larutan berwarna jingga pada pereaksi Meyer, larutan coklat pada pereaksi Wayner dan endapan putih pada pereaksi Dragendorff. 2. Sampel temulawak teridentifikasi positif mengandung flavonoid dibuktikan dengan adanya perubahan warna merah setelah ditambahkan Mg dan HCl pekat. 3. Sampel temulawak tidak teridentifikasi mengandung saponin. Hal ini dikarenakan tidak terbentuk busa. 4. Sampel temulawak teridentifikasi adaya steroid. Atau tidak mengandung steroid ditandai dengan adanya endapan jingga dan larutan berwarna merah kecoklatan. 5. Sampel temulawak teridentifikasi positif mengandung triterpenoid ditandai dengan larutan merah

(22)

kecoklatan antar permukaan. 6. Sampel temulawak teridentifikasi positif mengandung tanin. Terbukti timbulnya warna larutan coklat (-) saat melakukan percobaan.

XI. Jawaban Pertanyaan

1. Tuliskan secara lengkap reaksi setiap uji fitokimia diatas! Jawab:

Identifikasi Alkaloid dengan Metode Culvenor-Filzgerald Reaksi Mayer : N + K 2[HgI4] NK+ + K[HgI 4] -Reaksi Wagner : N + KI + I 2 NK + + I3 -Reaksi Dragendorf : N + K[BiI 4] NK + + K[BiI4] -Identifikasi Flavonoid

C2H5OH + Mg(s)Mg(OH)2(aq) + C2H5Mg(OH)2 +CH3-CH2 + HCl

O O O OH HO O OH C O Identifikasi Steroid KBiI4 K + + BiI4

-+ C

2

H

5

(aq)



+ C

2

H

5

(aq) +

HCl (aq)

(23)

H₃C o O + BiI₄ -N N N o CH₃ H₃C O BiI₄ N N N CH₃ O CH₃ CH₃ O Identifikasi Tanin

FeCl

₃

Fe

3+

+3Cl

-HO OH OH HO OH +Fe3+ OH OH HO OH +Fe(OH)3 hitam

2. Tulis struktur dasar dari masing-masing kelompok senyawa steroid, triterpenoid, tannin, saponin, flavonoid, dan alkaloid!

Jawab:

Struktur Dasar Saponin Struktur Dasar Alkaloid

(24)

3. Sebutkan senyawa-senyawa flavonoid apa saja yang terdapat pada rimpang temulawak berdasarkan literatur yang ada!

Jawab:

Flavonoid adalah senyawa yang terdiri dari 15 atom karbon yang umumnya tersebar di dunia tumbuhan. Lebih dari 2000 flavonoid yang berasal dari tumbuhan telah diidentifikasi, namun ada tiga kelompok yang umum dipelajari, yaitu antosianin, flavonol, dan flavon. Antosianin (dari bahasa Yunani anthos , bunga dan kyanos, biru-tua) adalah pigmen berwarna yang umumnya terdapat di bunga berwarna merah, ungu, dan biru. Pigmen ini juga terdapat di berbagai bagian tumbuhan lain misalnya, buah tertentu, batang, daun dan bahkan akar. Flavnoid sering terdapat di sel epidermis. Sebagian besar flavonoid terhimpn di vakuola sel tumbuhan walaupun tempat sintesisnya ada di luar vakuola.

4. Sebutkan fungsi dan manfaat rimpang temulawak bagi kehidupan manusia! Jawab:

Rimpang temulawak dalma kehidupan sehari-hari biasanya digunakan untuk mengatasi gangguan liver, rematik dan lelah, sebagai penghilang rasa sakit,anti bakteri/jamur, anti diabetic, anti diare,anti oksidan, anti tumor, diuretic, depresi.

Beberapa khasiat temulawak antara lain: mengobati bau badan yang tidak sedap, penurunan kolesterol, liver, sakit kuning, hepatitis, perut kembung, tidak nafsu makan akibat kekurangan cairan empedu, demam, pegal linu, rematik, memulihkan kesehatan setelah melahirkan, sembelit, darah tinggi, batu empedu, haid tidak lancar, wasir, produksi ASI sedikit, dan menjaga stamina.

(25)

XII. Daftar Pustaka

Agustin, Rizqi Lia. 2013. Isolasi Minyak Jahe dari Rimpang Jahe. http://dokumen-tips/documents/isolasi-minyak-jahe-dari-rimpang-jahe.html. Diakses pada tanggal 12 September 2016.

Arum, Y. P. 2012. Isolasi dan Uji daya Antimikroba Ekstrak Daun Kersen. Jurnal MIPA 35 (2):165-174 (2012). Semarang: Kimia FMIPA Unnes.

Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia. Penentuan Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Terjemahan K. Padmawinata & I. Soediro. Penerbit: ITB Bandung. Hart, H. 2003. Kimia Organik. Jakarta: Erlangga.

Lenny, Sofia. 2006. Senyawa flavanoid, pemi propanoida & alkaloida (online). http://repository.usu.ac.id.

Nadjeb. 2010. Alkanoid. Online

(http://nadjeb.files.wordpress.com/2009/03/alkanoid.pdf )

Soewolo. 1996. Pengaruh anabolik steroid terhadap pembentukan otot dan kesehatan (online). http://isjd.lipi.go.id.

Tim Dosen Kimia Organik. 2016. Petunjuk Praktikum Kimia Organik II. Surabaya: Jurusan Kimia FMIPA Unesa.