Lampiran 1
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
Nama : RAUDHAH SARI
Tempat / Tanggal Lahir : Takengon / 3 April 1994
Agama : Islam
Alamat : Jln. Setia No.40, Tanjung Rejo, Medan
Riwayat pendidikan :
Nama Institusi Tahun
TK Aisyiah Bustanul Athfal Takengon 1999-2000
SD Negeri 4 Takengon 2000-2006
SMP Negeri 1 Takengon 2006-2009
SMA Negeri 1 Takengon 2009-2012
Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara 2012 – Sekarang
Riwayat Organisasi :
Organisasi Tahun
Anggota Divisi Keuangan SCORE PEMA FK USU
Periode 2013-2014 2013-2014
Manager Keuangan SCORE PEMA FK USU Periode
2014-2015 2014-2015
Anggota Majelis Pertimbangan Agung SCORE PEMA
FK USU 2015-2016
Riwayat Pelatihan, Seminar, dan Simposium:
1. Get Together SCORE “Bukan Mahasiswa Biasa” (SCORE PEMA FK USU, 2012)
2. Pekan Ilmiah Mahasiswa “Doing a Research, Healing the World” (SCORE PEMA FK USU, 2012)
3. Seminar dan Workshop Basic Life Support & Traumatology (TBM FK USU, 2013)
4. Seminar, Symposium, dan Talkshow “Islamic Medicine 4” (PHBI FK USU, 2013)
5. Get Together SCORE “Get Together, Get Your Dreams” (SCORE PEMA FK USU, 2013)
6. Simposium Nasional Scripta Research Festival 2014 “Supporting The Survivors and Never Ever Giving Up on Leukemia” (SCORE PEMA FK USU, 2014)
7. Seminar Nasional Diabetes Melitus Type II (FK Udayana, 2014) 8. Get Together (SCORE PEMA FK USU, 2014)
9. Symposium and Workshop “Errors of Metabolism and Hormonal Disorders” (INAMSC FK UI, 2015)
10. Seminar dan Workshop Nasional “Good Clinical Practice (Cara Uji Klinik yang Baik)” (Komisi Etik Penelitian FK USU, 2014)
11. Simposium Nasional Scripta Research Festival 2015 “Clinical Updates and Current Management of Infectious Disease (Highlight on Dengue
Penghargaan Ilmiah yang Pernah Diraih :
Tahun Event Ilmiah Kategori
Lomba Prestasi Judul Karya
SIRT1-AMPK-Pathway: a Novel Treatment for Type 2 Diabetes Mellitus
Karya-Karya Ilmiah yang Pernah Dibuat :
Tahun Kategori Event Ilmiah Judul Karya
2013 KTI-GT
2014 Video Edukasi Scientific Fair
FK UNDIP Diary of My Heart 2014 Video Edukasi Temilnas 2014 Sigap Tangani Gunung Api
Lampiran 2
Lampiran 3
Lampiran 4
Lampiran 5
TAHAP PEMBUATAN SEDIAAN HISTOPATOLOGI
Pembuatan sediaan histopatologis dilakukan agar jaringan dapat diamati di bawah mikroskop. Adapun tahap pembuatan sediaan tersebut adalah sebagai berikut.
Tahapan Tujuan Cara
1. Fiksasi (Fixation)
Untuk membuat struktur unsur-unsur jaringan stabil dan menghindari kerusakan jaringan akibat enzim di dalam sel (autolisis) atau bakteri.
Mencelupkan jaringan kedalam formalin buffer 10% selama 2 jam.
Jaringan dibenamkan ke dalam parafin cair (58-60oC) selama 2 jam. 5. Pengecoran
(Blocking)
Membuat balok parafin disekitar jaringan agar mudah dipotong.
lembaran logam hingga rapat dan membentuk ruang seperti kubus. 6. Pemotongan
(Sectioning)
Memotong jaringan menjadi irisan-irisan tipis.
Menggunakan mikrotom dengan ketebalan 5-12µ. 7. Pewarnaan
(Staining)
Agar unsur jaringan menjadi kontras dan dapat dikenali di
Pengawet dan refraksi jaringan tersebut sehingga lebih jelas dilihat batas antar selnya.
Mounting media (gliserol atau balsam kanada).
9. Pelabelan (Labelling)
Memudahkan dalam pengenalan preparat.
Merekatkan kertas label pada preparat.
Seperti yang tertera pada tabel di atas, pewarnaan menggunakan Hematoxylin-Eosin (HE), sehingga inti sel dan reticulum endoplasma kasar yang mengandung banyak asam nukleat akan tampak berwarna ungu/biru (basofilik), sedangkan sitoplasma dan serat kolagen akan tampak berwarna merah muda (eosinofilik) (Pakurar dan Bigbee, 2004).
Adapun cara melakukan pewarnaan tersebut adalah sebagai berikut.
Proses Larutan Waktu
Deparafinisasi Xylol Cat Utama Haematoxylin Meyer
Air mengalir
Cat Pembanding Eosin 1.5 menit Dehidrasi Alkohol 80%
Alkohol 95% Alkohol 86%
5 celup 5 celup 2 menit
Dikeringkan 1 menit
Clearing Xylol
Xylol
10 menit 5 menit
Mounting Entelallan 5 menit
Lampiran 6
OUTPUT DATA HASIL PENELITIAN
a. Hasil Uji Normalitas Data Ketebalan Reepitelisasi Epidermis pada Kelompok Kontrol dan Perlakuan
Kelompok Statistic Std. Error
Tebal Epitel
5% Trimmed Mean 20.8672
Variance 19.085
5% Trimmed Mean 75.0789
Median 74.5700
5% Trimmed Mean 14.7556
5% Trimmed Mean 18.2561
5% Trimmed Mean 38.7467
Median 37.6600
Kelompok Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
b. Hasil Uji Homogenitas
Test of Homogeneity of Variances
Tebal Epitel
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.543 5 18 .226
c. Hasil Uji One-Way ANOVA
ANOVA
Tebal Epitel
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 12243.340 5 2448.668 100.172 .000
Within Groups 440.003 18 24.445
d. Hasil Uji Post Hoc LSD
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Tebal Epitel LSD
(I) Kelompok (J) Kelompok Mean
Difference
(I-J)
Std. Error Sig. 95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
P1
Lampiran 7
FORMAT PENGISIAN DATA
Sampel Ketebalan Reepitelisasi Epidermis (µm)
P1 P4 P21 K1 K4 K21
1 2 3 4
DAFTAR PUSTAKA
Ahliadi, S.S., 2014. Pengaruh Salep Ekstrak Daun Binahong (Anredera cordifolia) (Tonore) Steenis) Terhadap Reepitelisasi Epidermis pada Luka
Bakar Tikus Spague dawley. Jakarta: UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. Skripsi.
American Burn Association. 2013. Burn Incidence and Treatment in the United States: 2015. Chicago: ABA. Available from http://www.ameriburn.org/resources_factsheet.php. [Accessed 7 April 2015] Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kementerian Kesehatan RI.
2013. Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas 2013). Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Brunner & Suddarth, 2010. Textbook of Medical-Surgical Nursing. 12th ed. USA: Williams & Wilkins.
Campos, et al., 2008. Pollen Composition and Standarisation of Analytical Methods. Journal of Apicultural Research and Bee World 47(2): 156-163. Eroschenko, V.P., 2010. Atlas Histologi diFiore dengan Korelasi Fungsional. Ed.
11. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Farre, R., Frasquet, I., & Sanchez, A., 2004. Propolis and human health. Ars Pharmaceutica, 45(1): 21-43.)
Federer, W.T., 1963. Experimental Design: Theory and Application. New York: Mac. Millan. p.544.
Gowri, S., Vijaya, N., Powar, R., Honnungar, R., & Mallapur, M.D., 2012. Epidemiology and Outcome of Burn Injuries. J Indian Acad Forensic Med 34(4): 312-314.
Marcucci, MC, 1995. Propolis: Chemical Composition, Biological Properties and Therapeutic Activity. Apidologie 26: 83-89.
Martos, M.V., Navajas, Y.R., Lopez, J.F., Alvares, J.A.P., 2008. Functional Properties of Honey, Propolis, and Royal Jelly. Journal of Food Science 73(9): 117-124.
Maulana, R.A., 2014. Faktor Resiko yang Berperan Pada Mortalitas Penderita Luka Bakar Rawat Inap di RSUPH Adam Malik Medan. Medan: Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara. Thesis.
Mawarti, H., 2012. Pengaruh Flavonoid Propolis Terhadap Lama Penyembuhan Luka Bakar Grade II Pada Tikus Putih. Jombang: Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Pesantren Tinggi Darul Ulum Jombang.
Mercher, A.L., 2012. Histologi Dasar Junqueira: Teks & Atlas. Ed. 12. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Moenadjat, Y., 2009. Luka Bakar: Masalah dan Tatalaksana. Ed.4. Jakarta: Balai Penerbit FK UI.
Murtaza, G., et al., 2014. Caffeic Acid Phenethyl Ester and Therapeutic Potensials. BioMed Research International: 1-9.
Ningsih, D.R., 2009. Potensi Propolis Trigona spp. Pandeglang sebagai Pemacu Pertumbuhan Pada Sapi Peranakan Ongole. Bandung: IPB Scientific Repository. Master Thesis.
Nurmalisa, B.E., 2012. Efektivitas Pemberian Salep Propolis Terhadap Penyembuhan Luka Bakar Derajat II Pada Tikus Putih (Rattus norvegicus) Melalui Pengamatan Mikroskopis Yaitu Ketebalan Epitel dan Jumlah Fibroblas. Yogyakarta: PSIK 12 UMY.
Pakurar, A.S. & Bigbee, J.W., 2004. Digital Histology, an Interactive CD Atlas with Review Text. Canada: John Wiley & Sons, Inc.
Perdanakusuma, D.S., 2009. Surgical Management of Contracture in Head and Neck. Surabaya: Airlangga University School of Medicine.
Pradipta, I.G.N.D.O., 2010. Pengaruh Pemberian Propolis Secara Topikal Terhadap Migrasi Sel Polimorfonukleas Pada Luka Sayat Tikus. Jember: Fakultas Kedokteran Universitas Jember. Skripsi.
Rahayu, F., Wiwit Ade FW, Wiwik R., 2013. Pengaruh Pemberian Topikal Gel Lidah Buaya (Aloe chinensis Baker) Terhadap Reepitelisasi Epidermis pada Luka Sayat Kulit Mencit (Mus musculus). Riau: Fakultas Kedokteran Universitas Riau.
Rahayuningsih, T., 2012. Penatalaksanaan Luka Bakar (Combustio). Profesi 8: 1-13.
Rezende, G.P., Pimenta, F.C., Ribeiro. L., 2006. Antimicrobial Activity of Two Brazilian Commercial Propolis Extracts. Braz J Oral Sci 5(16): 967-970. Rismana, E., Rosidah, I., Prasetyawan, Y., Bunga, O., & Erna, Y., 2013.
Efektivitas Khasiat Pengobatan Luka Bakar Sediaan Gel Mengandung Fraksi Ekstrak Pegagan Berdasarkan Analisis Hidroksiprolin dan Histopatologi Pada Kulit Kelinci. Buletin Penelitian Kesehatan 41(1): 45-60.
Santoso, T., 2010. Perbedaan Kecepatan Kesembuhan Luka Bakar Antara Olesan Propolis 5% dan The Hijau Konsentrasi 6,4gr% Pada Tikus Putih (Rattus novergicus). Yogyakarta: PSIK 10 UMY. Skripsi.
Stein, C. & Kuchler, S., 2013. Targetting Inflammation and Wound Healing by Opioids. Elsevier 34(6): 300-312. Available from: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0165614713000473
Susilo, B., Mertaniasih, N.M., Koendhori, E.B., Agil, M., 2009. Komposisi Kimiawi dan Aktivitas Antimikroba Propolis dari Malang Jawa Timur. J.Penelit. Med. Eksakta 8(1): 23-30.
University of Virginia Health System, 2015. Burns. Available from: http://uvahealth.com/services/plastic-surgery/conditions-treatments/22574. [Accessed 28 April 2015]
Wahyuni, A. 2011. Statistika Kedokteran (disertai aplikasi dengan SPSS). Jakarta: Bamboedoea Communication.
Wasitaatmadja, S.M., 2011. Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin. Ed. 6. Jakarta: Badan Penerbit FK UI.
BAB 3
KERANGKA KONSEP DAN DEFINISI OPERASIONAL
3.1. Kerangka Konsep Penelitian
Berdasarkan tujuan penelitian dan tinjauan pustaka, maka dapat dirumuskan kerangka konsep pada penelitian ini adalah sebagai berikut.
Variabel Independen Variabel Dependen
3.2. Kerangka Teori Penelitian
Berdasarkan tinjauan pustaka yang telah dipaparkan, maka kerangka teori penelitian ini adalah sebagai berikut.
Proses Penyembuhan luka bakar
Fase inflamasi Fase proliferasi Fase maturasi
Angiogenesis Pembentukan jaringan
granulasi
Proliferasi fibroblas
Reepitelisasi epidermis
Migrasi keratinosit Proliferasi keratinosit Diferensiasi keratinosit Propolis
Proses reepitelisasi epidermis Pemberian propolis secara
topikal
3.3. Variabel Penelitian
3.3.1. Variabel Dependen
Adapun variabel dependen pada penelitian ini adalah proses reepitelisasi epidermis.
3.3.2. Variabel Independen
Adapun variabel independen pada penelitian ini adalah pemberian propolis secara topikal
3.3.3. Variabel Terkendali
Adapun variabel terkendali pada penelitian ini adalah: a. Kriteria sampel
b. Makanan dan minuman hewan coba c. Cara pemeliharaan hewan coba d. Prosedur penelitian
e. Dosis propolis
f. Cara pembuatan luka bakar g. Derajat luka bakar
h. Teknik pembuatan sediaan jaringan
3.4. Definisi Operasional
Adapun definisi operasional pada penelitian ini adalah sebagai berikut.
Tabel 3.1. Definisi Operasional
No. Variabel Definisi
Operasional Cara Ukur Alat Ukur Hasil Ukur
permukaan luka bakar derajat II.
3.5. Hipotesis
R
K
P
K1 K2 K3
P1 P2 P3
H1 H4 H21
BAB 4
METODE PENELITIAN
3.6. Jenis Penelitian
Penelitian ini merupakan true experimental study dengan post-test only control group design. Penelitian ini menggunakan hewan coba, yaitu mencit (Mus
musculus) galur Double Distsch Webster (DDW), yang dibagi secara random
menjadi 6 kelompok, yaitu 3 kelompok kontrol dan 3 kelompok perlakuan. Kemudian tiap mencit diberikan luka bakar derajat II. Pada kelompok perlakuan akan diberikan propolis secara topikal dan kelompok kontrol tidak diberikan propolis. Pengambilan jaringan histopatologi kulit dilakukan pada hari ke-1, 4 dan 21 untuk mengamati proses reepitelisasi epidermis. Penentuan waktu pembuatan jaringan histopatologi kulit didasarkan pada fase penyembuhan luka bakar. Secara skematis dapat digambarkan sebagai berikut:
Gambar 4.1. Skema pembagian hewan coba
Keterangan:
R : Randomisasi K : Kelompok kontrol P : Kelompok perlakuan
K3 : Observasi kelompok kontrol pada hari ke-21 P1 : Observasi kelompok perlakuan pada hari ke-1 P2 : Observasi kelompok perlakuan pada hari ke-4 P3 : Observasi kelompok perlakuan pada hari ke-21 H1 : Hari ke-1 setelah luka bakar
H4 : Hari ke-4 setelah luka bakar H21 : Hari ke-21 setelah luka bakar
: Pengelompokan hewan coba
: Pengambilan jaringan kulit yang dilakukan pada hari yang sama
3.7. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian direncanakan pada bulan Agustus - Oktober 2015. Perawatan dan pemberian intervensi pada hewan coba dilakukan di Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara (FK USU), pembuatan jaringan histopatologi kulit dilakukan di Laboratorium Patologi Anatomi FK USU, sedangkan pembacaan hasil (pengukuran proses reepitelisasi) dilakukan di Laboratorium Histologi FK USU. Penelitian dilakukan setelah mendapat Ethical Clearance dari Komisi Etik Penelitian Bidang Kesehatan FK USU.
3.8. Populasi dan Sampel Penelitian
4.3.1. Populasi Penelitian
Populasi penelitian ini adalah mencit (Mus musculus) galur Double Distsch Webster (DDW).
4.3.2. Sampel Penelitian
Sampel penelitian ini adalah 24 ekor mencit (Mus musculus) galur Double Distsch Webster (DDW) jantan yang diperoleh dari laboratorium Biologi FMIPA
3.9. Kriteria Inklusi dan Ekslusi
4.4.1. Kriteria Inklusi
1. Galur DDW
2. Jenis kelamin jantan 3. Berat badan 25-35 gram 4. Umur 8-12 minggu
4.4.2. Kriteria Ekslusi
1. Mencit terlihat sakit, tidak aktif bergerak
2. Memiliki kecacatan fisik atau kelainan anatomis
3.10. Besar Sampel
Besar sampel yang digunakan dalam penelitian ini ditentukan berdasarkan rumus Federer (Federer, 1963), yaitu:
t = Jumlah kelompok perlakuan (6)
n = Jumlah sampel tiap kelompok
Maka banyaknya sampel tiap kelompok yang digunakan pada penelitian ini adalah:
( t – 1 ) ( n – 1 ) ≥ 15 ( 6 – 1 ) ( n – 1 ) ≥ 15 5 ( n – 1 ) ≥ 15 n – 1 ≥ 3
n ≥ 4 ekor
Karena jumlah kelompok pada penelitian ini adalah 6 kelompok, maka jumlah sampel yang dibutuhkan pada penelitian ini adalah 24 ekor mencit.
3.11. Alat dan Bahan Penelitian
4.6.1. Alat
1. Kandang hewan coba 2. Tempat makan dan minum
3. Alat pembersih kandang 4. Handscoon
5. Masker 6. Pencukur bulu 7. Stopwatch
8. Plat besi ukuran 1x1 cm 9. Alat pemanas besi 10. Alat bedah minor 11. Tabung kecil tertutup
12. Kotak tempat sediaan jaringan histopatologi 13. Mikroskop cahaya
4.6.2. Bahan
1. Ekstrak propolis
2. Mencit jantan jenis DDW 3. Makanan mencit
4. Minuman mencit 5. Alkohol
6. Formalin 10%
3.12. Prosedur Penelitian
4.7.1. Pembuatan Sediaan Propolis Topikal
Ekstrak propolis dibuat dalam sediaan salep untuk digunakan secara topikal. Basis salep menggunakan adeps lanae dan vaselin album. Pertama-taman, masukkan adeps lanae terlebih dahulu ke dalam lumping kemudian aduk hingga lebur dengan menggunakan alu, kemudian tambahkan vaselin album dan diaduk secara konstan hingga homogen. Selanjutnya, tambahkan ekstrak propolis sesuai dengan konsentrasi yang dibutuhkan dan diaduk hingga homogen.
Formula standar dasar salep menurut Agoes Goeswin (2006) adalah: R/ Adeps Lanae 15 g
m.f salep 100 g
Sediaan salep yang digunakan pada penelitian ini menggunakan konsentrasi propolis 5% dibuat sebanyak 30 g dengan perhitungan sebagai berikut.
R/ Ekstrak propolis 1.5 g Basis salep 28.5 g m.f salep 30 g
4.7.2. Penyiapan Hewan Coba
Mencit jantan sebanyak 24 ekor dibagi menjadi 6 kelompok secara random, yaitu 3 kelompok kontrol dan 3 kelompok perlakuan. Masing-masing kelompok terdapat 4 ekor mencit dengan perlakuan sebagai berikut.
a. Kelompok kontrol
Mencit diberi luka bakar yang telah ditentukan dan diberikan placebo (basis salep). Punggung mencit dicukur kemudian diberi luka bakar menggunakan plat besi yang telah dipanaskan, lalu dilakukan pengambilan sampel jaringan dan penghitungan ketebalan reepitalisasi epidermis pada hari ke-1, 4 dan 21. b. Kelompok perlakuan
Mencit diberi luka bakar yang telah ditentukan dan diberi propolis topikal. Punggung mencit dicukur kemudian diberi luka bakar dengan menggunakan plat besi yang telah dipanaskan, lalu dilakukan pengambilan sampel jaringan dan penghitungan ketebalan reepitalisasi epidermis pada hari ke-1, 4 dan 21.
Kemudian mencit ditempatkan di dalam kandang yang sudah disekat sesuai dengan kelompok perlakuan. Setiap kandang berisi 4 ekor mencit. Kemudian mencit diadaptasikan selama 7 hari dan pada hari ke-8 dilakukan pembuatan luka bakar. Mencit diberi pakan standar dan minum secara ad libitum.
4.7.3. Pembuatan Luka Bakar
bakar pada punggung mencit dengan menggunakan plat besi yang telah dipanaskan menggunakan magnetic stir plate pada suhu 375oC selama 10 menit dan ditempelkan selama 10 detik pada punggung mencit sampai terbentuk luka bakar derajat II, yang ditandai dengan adanya warna kemerahan dan gelembung atau bula yang berisi cairan eksudat pada kulit mencit.
4.7.4. Perawatan Luka Bakar
Mencit yang telah dilukai pada bagian punggungnya masing-masing diberi perawatan berdasarkan kelompoknya. Pada kelompok perlakuan diberikan propolis secara topikal sedangkan pada kelompok kontrol diberikan placebo. Perlakuan tersebut dilakukan mulai dari hari pembuatan luka bakar sampai hari ke-21 sebanyak 2 kali sehari, yaitu pada jam 7 pagi dan jam 7 malam.
4.7.5. Pembuatan Sediaan Jaringan Histopatologi Kulit
Pengambilan sampel kulit dilakukan pada hari ke-1, 4 dan 21. Pengambilan dilakukan setelah mencit dieuthanasia dengan cara dislokasi servikal. Pada bagian yang diberi luka bakar dieksisi kira-kira 2 cm dengan kedalaman sampai subkutis. Selanjutnya jaringan kulit yang telah diambil diletakkan pada tabung kecil berisi formalin 10% yang tertutup. Kemudian tabung-tabung kecil yang telah terisi jaringan hewan coba dibawa ke Laboratorium Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran USU untuk dibuat sediaan histopatologi dengan pewarnaan hematoksilin eosin (HE).
4.7.6. Cara Penilaian Ketebalan Reepitelisasi Epidermis
3.13. Pengolahan dan Analisis Data
4.8.1. Pengolahan Data
Pengolahan data dilakukan dengan tahapan sebagai berikut (Wahyuni, 2011):
a. Editing
Editing dilakukan untuk memeriksa ketepatan dan kelengkapan data. Apabila data belum lengkap ataupun ada kesalahan, data dilengkapi kembali.
b. Coding
Data yang telah terkumpul dan dikoreksi ketepatan dan kelengkapannya kemudian diberi kode oleh peneliti secara manual sebelum diolah dengan komputer.
c. Entry
Data yang telah dibersihkan kemudian dimasukkan kedalam program komputer. Adapun program yang digunakan adalah SPSS.
d. Cleaning
Pemeriksaan semua data yang telah dimasukkan ke dalam program komputer. e. Saving
Penyimpanan data untuk siap dianalisis.
4.8.2. Analisis Data
Data hasil pengamatan proses reepitelisasi epidermis dianalisis menggunakan program statistika untuk melihat pengaruh yang bermakna pada pemberian propolis secara topikal pada luka bakar mencit. Hasil pengukuran diuji dengan menggunakan uji Shapiro-Wilk untuk mengetahui apakah data berdistribusi normal (p>0.05) dan uji homogenitas Levene Statistic untuk mengetahui apakah data homogen (p>0.05). Bila data yang diperoleh berdistribusi normal dan homogen maka dilakukan uji parametrik ANOVA (Analysis of Varian) dengan tingkat kepercayaan 95% (α<0.05) untuk mengetahui perbedaan
3.14. Alur Penelitian
Pengukuran reepitelisasi epidermis secara mikroskopik
BAB 5
HASIL DAN PEMBAHASAN
3.15. HASIL PENELITIAN
5.1.1 Deskripsi Lokasi Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara yang berlokasi di jalan dr. Mansyur No.5 Medan, Indonesia. Fakultas ini mulai melaksanakan pendidikan dokter sejak tanggal 20 Agustus 1952 dan mulai menggunakan Kurikulum Berbasis Kompetensi (KBK) sejak tahun 2006.
Fakultas Kedokteran USU memiliki fasilitas yang lengkap meliputi ruang belajar mengajar dan berbagai fasilitas pendukung, seperti ruang internet, ruang pertemuan, ruang skill lab, perpustakaan, poliklinik, dan masjid. Terdapat 14 laboratorium di Fakultas Kedokteran USU. Penelitian ini diadakan di tiga laoratorium, yaitu Laboratorium Farmakologi, Histologi, dan Patologi Anatomi.
5.1.2 Gambaran Mikroskopis Ketebalan Reepitelisasi Kulit
Gambar 5.1. Gambaran histopatologis kulit mencit dengan pewarnaa HE. (a)
Kontrol H1, (b) Perlakuan H1, (c) Kontrol H4, (d) Perlakuan H4, (e) Kontrol H21, dan (f) Perlakuan H21. (Perbesaran 200x, potongan melintang)
Pada Gambar 5.1. terlihat bahwa proses reepitelisasi mulai terjadi sejak hari 1 pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan. Lapisan epitel pada hari ke-1 tampak lebih tipis daripada hari ke-4 dan 2ke-1. Hal ini menunjukkan bahwa pertumbuhan epitel terus terjadi setiap harinya. Selain epitel, pada gambar diatas juga terlihat adanya sel fibroblas, jaringan kolagen, dan pada bekas luka juga terdapat serbukan sel radang neutrofil.
5.1.3 Hasil Pengukuran Ketebalan Reepitelisasi Kulit
Epitel pada luka bakar diukur ketebalannya setelah diberikan perlakuan agar dapat dihitung rata-ratanya dan dibandingkan secara statistik. Adapun hasil pengukuran ketebalan epitel dapat dilihat pada tabel berikut.
(a) (b) (c)
Tabel 5.1. Nilai rata-rata dan standar deviasi pengukuran ketebalan epitel
Perlakuan Jumlah Data Mean ± Standard Deviation (µm)
Berdasarkan hasil data pada Tabel 5.1. terjadi peningkatan ketebalan epitel jaringan kulit pasca luka bakar derajat II pada kontrol hari ke-1 dengan rerata±SD (14.66 ± 2.47 µm) bertambah tebal pada hari ke-4 (18.29 ± 1.11 µm), dan semakin tebal pada hari ke-21 (38.88 ± 5.41 µm).
Hal yang sama terjadi pada kelompok perlakuan yang diberi propolis topikal 5% hari ke-1 dijumpai ketebalan epitel jaringan kulit pasca luka bakar dengan rerata±SD (7.83 ± 1.29 µm) diikuti penambahan ketebalan epitel pada hari ke-4 (20.87 ± 4.37 µm) dan semakin bertambah tebal pada hari ke-21 (75.14 ± 9.45 µm).
Berdasarkan data dari Tabel 5.1. tersebut dapat divisualisasikan dalam diagram batang sebagaimana yang terdapat pada gambar dibawah ini.
0
Hari ke-1 Hari ke-4 Hari ke-21
5.1.4. Analisis Data
Analisis data penelitian didahului dengan uji normalitas data menggunakan uji Saphiro-Wilk. Hasil uji Saphiro-Wilk menunjukkan bahwa semua kelompok memiliki p>0.05 yang berarti data berdistribusi normal. Selanjutnya dilakukan uji homogenitas dengan menggunakan Levene Statistic dan diperoleh p=0.226 yang menunjukkan bahwa data yang didapatkan adalah homogen (p>0.05), maka dilakukan uji parametrik One-Way ANOVA.
Berdasarkan hasil analisis dengan One-Way ANOVA diperoleh hasil signifikan sebesar p=0.0001 (p<0.05), artinya terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata ketebalan epitel pada kelompok kontrol dan perlakuan. Kemudian dilakukan uji Post Hoc untuk mengetahui lebih lanjut perbedaan antara ketebalan epitel pada tiap kelompok perlakuan.
Uji Post Hoc yang digunakan adalah uii LSD (Least Significance Difference Test). Hasil dikatakan signifikan atau terdapat perbedaan bermakna
bila nilai p<0.05. Hasil uji Post Hoc LSD dapat dilihat pada Tabel 5.2.
Tabel 5.2. Perbandingan tingkat ketebalan reepitelisasi (Uji Post Hoc LSD)
Perlakuan Signifikasi Antar Kelompok Kontrol H1 vs Perlakuan H1
Kontrol H4 vs Perlakuan H4 Kontrol H21 vs Perlakuan H21
p = 0.066 p = 0.470 p = 0.0001* Dalam Kelompok Kontrol H1 vs Kontrol H4
Kontrol H1 vs Kontrol H21 Kontrol H4 vs Kontrol H21 Perlakuan H1 vs Perlakuan H4 Perlakuan H1 vs Perlakuan H21 Perlakuan H4 vs Perlakuan H21
Pada uji Post Hoc terdapat perbedaan bermakna tingkat ketebalan reepitelisasi pada kelompok kontrol dan perlakuan hari ke-21 (p=0.0001), tetapi pada hari ke-1 dan ke-4 tidak terdapat perbedaan bermakna dengan p=0.066 dan p=0.470. Sehingga dapat diartikan bahwa dengan memberikan propolis secara topikal pada hari ke-4 hingga hari ke-21 (fase proliferasi) dapat meningkatkan ketebalan reepitelisasi epidermis dibandingkan dengan pemberian placebo.
Perbandingan di dalam masing-masing kelompok menunjukkan bahwa terdapat peningkatan pertumbuhan lapisan epitel yang signifikan setiap harinya, kecuali pada kelompok kontrol H1 dan H4. Pada kelompok kontrol H4, terdapat peningkatan ketebalan epitel dibandingkan kelompok kontrol H1 (Tabel 5.1), tetapi tidak bermakna secara statistik (p=0.313). Hal ini menunjukkan bahwa proses reepitelisasi berlangsung lebih lambat pada kelompok kontrol yang tidak diberi propolis.
5.2. PEMBAHASAN
Luka dapat disebabkan oleh trauma yang mengakibatkan rusak atau terputusnya kontinuitas jaringan tubuh. Proses penyembuhan luka sangat diperlukan untuk mendapatkan kembali jaringan tubuh yang utuh. Proses ini sangat kompleks, terdiri dari tiga fase, yaitu fase inflamasi, proliferasi, dan maturasi. Pada fase proliferasi terjadi proses reepitelisasi, meliputi migrasi, proliferasi, dan diferensiasi keratinosit (Rahayu, 2013).
membantu proses reepitelisasi pada epidermis pasca luka bakar, khususnya pada fase proliferasi (hari ke-4 hingga hari ke-21).
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Olczyk et al., (2012) menunjukkan bahwa propolis dapat menstimulasi pembentukan glikoprotein laminin dan vitronektin, serta glikosaminoglikan (heparin sulfat/heparin). Fibroblas, keratinosit, dan sel epidermal tidak dapat melakukan perbaikan jaringan luka tanpa adanya ketiga komponen tersebut di jaringan luka. Vitronektin, dengan adanya transforming growth factor-β (TGF-β), menstimulasi migrasi dan proliferasi keratinosit, serta sintesis protein. Laminin berperan dalam migrasi dan proliferasi sel epidermal. Heparin sulfat/heparin menstimulasi pembentukan myofibroblas dan penutupan luka. Propolis dapat meningkatkan konsentrasi laminin, vitronektin, dan heparin sulfat/heparin pada jaringan luka bakar sejak hari ke-3 pemberiannya. Oleh karena itu, sejalan dengan penelitian ini tidak terdapat perbedaan bermakna antara pemberian propolis dan placebo pada hari ke-1 serta terjadi peningkatan ketebalan reepitelisasi yang tinggi pada kelompok perlakuan (Tabel 5.1).
Hasil penelitian ini didukung oleh Sushanta (2010) yang meneliti tentang pengaruh pemberian ekstrak propolis topikal pada proses penyembuhan luka sayat pada 30 ekor tikus jantan galur wistar. Hasil pemeriksaan jaringan kulit secara mikroskopik menunjukkan bahwa pemberian ekstrak propolis topikal dapat meningkatkan ketebalan epitel. Hal ini mengindikasikan bahwa proses penyembuhan berlangsung lebih cepat dan proses inflamasi berlangsung lebih singkat.
Peningkatan proses penyembuhan luka ini diduga karena efek resultan dari semua zat aktif yang terdapat dalam propolis, yaitu flavonoid, Caffeic acid phenethyl ester (CAPE), lilin, asam lemak, asam amino, vitamin, dan mineral
(Farre et al., 2004).
Kandungan flavonoid yang tinggi pada propolis mempunyai peranan utama dalam proses penyembuhan luka. Flavonoid dapat berfungsi sebagai antioksidan, antimikroba, dan antiinflamasi. Pada saat terjadi luka atau kerusakan jaringan, mediator-mediator inflamasi akan dikeluarkan oleh neutrofil, makrofag, sel endotel, dan sel-sel yang memiliki efek vasomotor penting. Mediator inflamasi akan mempengaruhi fungsi trombosit dan bahkan bertindak sebagai radikal bebas yang sitotoksik. Adanya flavonoid propolis yang kaya akan vitamin dan bertindak sebagai antioksidan dan disebutkan bahwa antioksidan propolis lebih baik daripada vitamin E (Velazquez, et al., 2007 dalam Mawarti, 2012).
Khasiat propolis sebagai antimikroba sudah banyak dilaporkan. Uji kepekaan antimikroba bahan ekstrak propolis pada bakteri Staphylococcus aureus, ternyata 100% (26 dari 26 isolat Staphylococcus aureus) sensitif terhadap ekstrak propolis (Susilo, et al., 2009). Aktivitas antimikroba propolis terhadap 26 spesies mikroorganisme menunjukkan bahwa ekstrak propolis dapat melawan pertumbuhan bakteri dan jamur, terutama bakteri gram positif dan Candida albicans (Rezende, et al., 2006).
Selain itu, adanya kandungan quercetin dan caffeic acid phenethyl ester (CAPE) pada propolis menyebabkan efek antiinflamasi dengan cara menghambat jalur siklooksigenase dan lipooksigenase sehingga asam arakhidonat yang dilepaskan oleh sel-sel yang rusak tidak berubah menjadi mediator-mediator inflamasi, seperti tromboksan, prostaglandin, dan leukotrien (Pradipta, 2010).
BAB 6
KESIMPULAN DAN SARAN
6.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan secara eksperimental dengan post test only control group design dan analisis data statistik tentang pengaruh pemberian propolis topikal 5% terhadap reepitelisasi epidermis pada luka bakar mencit, dapat disimpulkan bahwa:
a. Terdapat perbedaan yang signifikan (p<0.05) pada pemberian propolis dan placebo pada hari pengamatan ke-21.
b. Pemberian propolis topikal 5% dapat mempercepat proses reepitelisasi epidermis pada luka bakar mencit selama proses penyembuhan luka bakar.
6.2 Saran
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, saran yang dapat diberikan untuk penelitian selanjutnya adalah:
a. Dapat dilakukan penelitian sejenis dengan menggunakan propolis topikal dengan konsentrasi yang berbeda.
b. Dapat dilakukan perbandingan antara propolis topikal dengan kontrol positif (obat luka bakar).
c. Dapat dilakukan penelitian sejenis dengan jumlah sampel yang lebih banyak dan sampel hewan coba yang berbeda.
d. Diharapkan dapat menentukan zat aktif spesifik dan mekanisme kerjanya dalam meningkatkan proses reepitelisasi epidermis pada luka bakar.
e. Dilakukan pengamatan jaringan histopatologis kulit setiap harinya untuk mengetahui lama pengobatan luka bakar.
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Anatomi dan Histologi Kulit
Kulit adalah organ tubuh yang terletak paling luar dan membatasinya dari lingkungan hidup manusia. Luas kulit orang dewasa 1,5 m2 dengan berat kira-kira 15% berat badan. Kulit juga sangat kompleks, elastis, dan sensitif. Kulit bervariasi mengenai lembut, tipis, dan tebalnya. Kulit yang elastis dan longgar terdapat pada palpebra, bibir, dan preputium. Sedangkan kulit yang tebal dan tegang, terdapat di telapak kaki dan tangan dewasa. Kulit yang tipis terdapat pada muka, kulit lembut terdapat pada leher dan badan, sedangkan kulit dengan rambut kasar terdapat pada kepala (Wasitaatmadja, 2011).
Secara histologis, kulit terdiri atas dua lapisan (Eroschenko, 2012), yaitu: a. Epidermis
Epidermis adalah lapisan nonvaskular yang dilapisi epitel berlapis gepeng dengan lapisan tanduk dengan jenis dan lapisan sel yang berbeda-beda. Terdapat empat jenis sel di epidermis kulit, dengan keratinosit sebagai sel dominan. Keratinosit membelah, tumbuh bergerak ke atas, dan mengalami keratinisasi atau kornifikasi, dan membentuk lapisan epidermis protektif bagi kulit. Selain itu terdapat juga jenis sel lainnya yang jumlahnya lebih sedikit di epidermis, yaitu melanosit, sel langerhans, dan sel Merkel.
Terdapat lima lapisan sel pada epidermis, yaitu:
1) Stratum basal (germinativum), adalah lapisan paling dalam atau dasar di epidermis. Lapisan ini terdiri dari satu lapisan sel kolumnar hingga kuboid yang terletak pada membran basalis yang memisahkan epidermis dan dermis. Sel di stratum basal berfungsi sebagai sel induk bagi epidermis. Karena itu, di lapisan ini banyak ditemukan aktivitas mitosis. Sel membelah dan mengalami pematangan sewaktu bermigrasi ke atas menuju lapisan superfisial.
memperlihatkan banyak tonjolan sitoplasma, atau spina (duri), yang keluar dari permukaannya. Pembentukan filamen keratin berlanjut di lapisan ini yang kemudian tersusun membentuk berkas tonofilamen. Tonofilamen mempertahankan kohesi diantara sel dan menghasilkan resistensi terhadap abrasi epidermis.
3) Stratum granulosum, terdiri dari 3-5 lapis sel gepeng yang berisi granula keratohialin basofilik. Kombinasi granula keratohialin dan tonofilamen di sel ini menghasilkan keratin lunak kulit.
4) Stratum lucidum, yang translusen dan kurang jelas. Lapisan ini hanya ditemukan pada kulit tebal. Sel-selnya tersusun rapat dan tidak memiliki nukleus atau organel dan telah mati. Sel-sel gepeng ini mengandung filamen keratin yang padat.
5) Stratum korneum, adalah lapisan kulit kelima dan paling luar. Semua nukleus dan organel telah lenyap dari sel. Stratum korneum terutama terdiri dari sel mati yang gepeng berisi filamen keratin lunak. Sel superfisial berkeratin di lapisan ini secara terus-menerus dilepaskan atau mengalami deskuamasi serta diganti oleh sel baru yang muncul dari stratum basal di sebelah dalam. Selama proses keratinisasi, enzim-enzim hidrolitik merusak nukleus dan organel sitoplasma yang kemudian lenyap ketika sel terisi oleh keratin.
b. Dermis
Dermis adalah lapisan jaringan ikat yang mengikat epidermis. Dermis juga mengandung derivatif epidermal misalnya kelenjar keringat, kelenjar sebasea, dan folikel rambut. lapisan dermis dibentuk oleh dua lapisan, yaitu stratum papillare dan stratum reticulare.
Stratum reticulare adalah lapisan dermis yang lebih dalam. Lapisan ini lebih dalam dan ditandai oleh serat jaringan ikat padat tidak teratur (terutama kolagen tipe I), dan kurang seluler dibandingkan dengan stratum papillare. Tidak terdapat batas yang jelas antara kedua lapisan dermis karena stratum papillare menyatu dengan stratum reticulare.
Dibawah lapisan dermis terdapat hipodermis, atau jaringan subkutan, yaitu jaringan ikat longgar yang mengikat kulit secara longgar pada organ-organ dibawahnya, memungkinkan kulit bergeser diatasnya. Hipodermis sering mengandung sel-sel lemak dengan jumlah yang bervariasi (Mescher, 2012). Selain itu, pada lapisan hipodermis juga terdapat pembuluh darah, saraf, dan limfe (Wasitaatmadja, 2011).
Gambar 2.1. Histologi kulit
Sumber: Mescher A.L., 2012.
2.2. Luka Bakar
2.2.1. Definisi
Sedangkan luka bakar (combustion) merupakan respon kulit dan jaringan subkutan terhadap trauma suhu/termal (Grace dan Borley, 2006). Menurut Moenadjat (2009) luka bakar adalah suatu bentuk kerusakan dan atau kehilangan jaringan disebabkan kontak dengan sumber yang memiliki suhu yang sangat tinggi (misalnya api, air panas, bahan kimia, listrik, dan radiasi) atau suhu yang sangat rendah. Dalamnya luka bakar bergantung pada suhu agen penyebab luka bakar dan lamanya kontak dengan agen tersebut (Brunner dan Suddarth, 2010).
2.2.2. Klasifikasi
2.2.2.1. Bedasarkan Penyebabnya
Menurut Grace dan Borley (2006), klasifikasi luka bakar berdasarkan penyebabnya adalah:
a. Trauma suhu/termal, dapat disebabkan oleh paparan terhadap sumber panas yang kering (api, logam panas) atau lembab (cairan atau gas panas).
b. Trauma listrik, dapat menyebabkan kulit hangus dan kerusakan jaringan lebih dalam akibat arus listrik yang menjalar. Selain itu, juga dapat menyebabkan henti jantung.
c. Trauma kimiawi, dapat disebabkan karena kelalaian, kecelakaan kerja, baik di pabrik ataupun laboratorium, dan akibat penggunaan gas beracun dalam peperangan. Kandungan zat kimia yang bersifat asam atau basa dapat menyebabkan kerusakan jaringan kulit.
2.2.2.2. Bedasarkan Kedalaman Kerusakan Jaringan (Luka)
Klasifikasi luka bakar berdasarkan kerusakan jaringan luka (Moenadjat, 2009), antara lain:
a. Luka bakar derajat I
Kerusakan jaringan terbatas pada bagian permukaan (superfisial) yaitu epidermis, sehingga dermal-epidermal junction tetap utuh. Kulit kering, hiperemik memberikan efloresensi berupa eritema. Terdapat nyeri karena ujung-ujung saraf sensorik teriritasi. Tidak ada masalah klinis yang berarti dan penyembuhan luka bakar (regenerasi epitel) terjadi secara spontan dalam waktu 5-7 hari.
b. Luka bakar derajat II (partial thickness burn)
Kerusakan meliputi seluruh ketebalan epidermis dan sebagian superfisial dermis. Menimbulkan reaksi inflamasi akut disertai proses eksudasi. Luka bakar derajat II dibedakan menjadi dua, yaitu dangkal dan dalam.
Pada luka bakar derajat II dangkal (Superficial partial thickness burn), terdapat kerusakan mengenai epidermis dan sepertiga bagian superfisial dermis. Hal ini menyebabkan dermal-epidermal junction mengalami kerusakan, sehingga terjadi epidermolisis yang diikuti terbentuknya lepuh (bula, blister). Lepuh ini merupakan karakteristik luka bakar derajat dua dangkal. Bila epidermis terlepas (terkelupas), terlihat dasar luka kemerahankadang pucatedematus, dam eksudatif. Penyembuhan terjadi secara spontan, umumnya memerlukan waktu antara 10-14 hari.
c. Luka bakar derajat III (Full thickness burn)
Kerusakan meliputi seluruh bagian kulit dan lapisan yang lebih dalam. Kulit yang terbakar tampak lebih putih atau pucat karena terbentuk eskar (jaringan yang mengalami kerusakan akibat trauma termis). Terjadi kerusakan / kematian pada ujung-ujung saraf sensoris sehingga penderita hilang sensasi dan tidak merasakan nyeri. Proses penyembuhan memerlukan waktu yang lama.
(a) derajat I (b) derajat II (c) derajat III
Gambar 2.2. Klasifikasi luka bakar berdasarkan kedalaman kerusakan jaringan
Sumber: University of Virginia Health System, 2015.
2.2.3. Komplikasi
Komplikasi luka bakar berdasarkan waktu terjadinya, yaitu segera, awal, dan lanjut. Komplikasi segera luka bakar adalah sindrom kompartemen dari luka bakar sirkumferensial. Sebagai contoh, luka bakar pada ekstremitas mengakibatkan iskemia ekstremitas dan luka bakar toraks dapat menyebabkan hipoksia oleh karena gagal napas rekstriktif (Grace dan Borley, 2006).
Adapun komplikasi awal luka bakar meliputi hiperkalemia akibat adanya sitolisis pada luka bakar yang luas, gagal ginjal akut (kombinasi dari hipovolemia, sepsis, dan toksin jaringan), infeksi, dan ulkus akibat stres (ulkus Curling) (Grace dan Borley, 2006).
2.2.4. Proses Penyembuhan Luka Bakar
Penyembuhan luka bakar merupakan proses yang kompleks. Proses ini melibatkan banyak jenis sel dan mediator yang mengatur perbaikan jaringan. Berhasilnya penyembuhan luka dan regenerasi jaringan tergantung pada proses hemostasis, inflamasi, sistesis matriks, proliferasi, kontraksi luka, dan perbaikan jaringan dalam mengembalikan fungsi jaringan (Santoso, 2010).
Proses penyembuhan luka dibagi menjadi tiga fase, yaitu: a. Fase Inflamasi
Fase inflamasi merupakan reaksi tubuh terhadap luka yang timbul segera setelah terjadinya luka hingga 3-4 hari. Pada fase ini terjadi dua aktivitas fisiologis, yaitu hemostasis (pembekuan darah) dan fase inflamasi seluler. Selama proses hemostasis, pembuluh darah yang terputus pada luka yang menyebabkan perdarahan akan berusaha menghentikannya dengan vasokonstriksi, pengerutan ujung pembuluh darah yang terputus (retraksi), dan reaksi hemostasis (Nurmalisa, 2012).
Jaringan yang rusak dan sel mast akan mengeluarkan histamin dan mediator lain sehingga menyebabkan vasodilatasi pembuluh darah yang tidak rusak. Hal ini juga akan meningkatkan permeabilitas kapiler dan cairan yang kaya protein berpindah ke ruang interstisial. Terjadilah perbedaan tekanan onkotik yang akhirnya menyebabkan edema atau pembengkakan (Santoso, 2010).
b. Fase Proliferasi
Fase ini berlangsung sejak berakhirnya fase inflamasi hingga akhir minggu ketiga. Aktivitas utama selama fase ini adalah angiogenesis dan membentuk kembali permukaan luka melalui proses epitelisasi (Nurmalisa, 2012).
Angiogenesis berperan penting pada proses penyembuhan luka. Pembuluh kapiler baru akan membawa oksigen yang cukup ke daerah luka karena biasanya terdapat keadaan hipoksia dan turunnya tekanan oksigen (Pradipta, 2010).
Peran fibroblas juga sangat besar pada proses ini. Fibroblas akan aktif bergerak dari jaringan sekitar luka ke dalam daerah luka. Kemudian fibroblas akan berproliferasi dan mengeluarkan beberapa substansi, seperti kolagen, elastin, asam hialuronat, fibronektin, dan proteoglikans. Substansi ini berperan dalam membangun jaringan baru (Pradipta, 2010).
Pada proses epitelisasi, fibroblas mengeluarkan keratinocyte growth factor (KGF) yang berperan dalam stimulasi mitosis sel epidermal. Keratinisasi dimulai dari pinggir luka hingga membentuk barrier yang menutupi permukaan luka. Untuk membantu jaringan tersebut menutup luka, fibroblas akan mengubah strukturnya menjadi myofibloblas yang berperan dalam kontraksi jaringan. Fase proliferasi akan berakhir jika epitel kulit dan lapisan kolagen telah terbentuk (Pradipta, 2010).
c. Fase Maturasi
2.3.1. Komposisi Propolis
Komposisi propolis sangat bervariasi tergantung pada letak geografisnya. Propolis mengandung zat gizi yang lengkap dan kompleks, seperti terlihat pada tabel dibawah ini.
Tabel 2.1. Komposisi Propolis
Komposisi (%) Kandungan
Resin
Lilin lebah (wax) Minyak esensial Asam lemak Polen
Senyawa organik lain dan mineral
Flavonoid, asam fenol, dan ester Lilin lebah steroid, asam benzoik dan esternya. Vitamin B1, B2, B3, B6.
Sumber: Farre et al., 2004.
2.3.2. Manfaat Propolis Pada Proses Penyembuhan Luka Bakar
Beberapa tahun terakhir, propolis telah menjadi pusat perhatian para peneliti di dunia. Hal ini disebabkan karena manfaatnya baik sebagai obat ataupun industri kimia. Manfaat tersebut diantaranya sebagai antiinflamasi, antibakteri, dan mempercepat proses penyembuhan luka bakar. Penelitian oleh Olczyk, et al., menunjukkan bahwa propolis dapat menstimulasi peningkatan vitronectin, laminin, dan heparan sulfate / heparin yang berperan penting dalam proses
Senyawa kimia pada propolis yang bermanfaat dalam proses penyembuhan luka bakar, diantaranya adalah:
a. Flavonoid
Propolis mempunyai kandungan flavonoid yang paling banyak dibandingkan dengan produk lebah lain, seperti madu, royal jelly, dan pollen. Flavonoid yang terkandung didalam propolis bersifat antioksidan yang dapat mencegah infeksi dan mempercepat regenerasi epitel (Nurmalisa, 2012).
Aktivitas propolis dalam melawan beberapa jenis bakteri telah banyak dilaporkan. Propolis dapat membunuh bakteri gram positif (Staphylococcus aureus), bakteri gram negatif (Salmonella sp.), dan berbagai bakteri patogen
anaerob di mulut (Mawarti, 2012). Aktivitas antibakteri ini disebabkan karena kandungan flavonoid dan asam aromatik dan ester yang terkandung dalam resin propolis. Galangin, pinocembrin, dan pinostrobin adalah senyawa didalam flavonoid yang memiliki efek terbesar dalam melawan bakteri. Selain itu, ferulic dan caffeic acid juga berperan dalam aktivitas antibakteri ini (Marcucci, 1995).
Quercetin, kaemferol, epigenin, dan luteolin yang terkandung dalam
flavonoid berperan dalam meningkatkan tumbuhnya jaringan baru sebagai akibat dari sifat tissue strengthening dan regenerative effect berbagai senyawa tersebut (Nurmalisa, 2012).
Caffeic acid phenethyl ester (CAPE) adalah komponen bioaktif alami yang
c. Lilin dan asam lemak
Lilin yang terkandung didalam propolis mengandung ikatan ester, asam lemak, dan rantai alkohol hidrokarbon yang sebagian besar tidak aktif secara kimia. Lilin propolis mengandung mikroelemen yang berperan dalam mengobati luka bakar (Nurmalisa, 2012).
d. Polen dan Asam amino
Polen merupakan penyumbang kadar protein dalam propolis. Dari semua asam amino yang terdapat dalam propolis, arginin dan prolin tergolong yang terbanyak, yakni 45,8%. Arginin dapat menstimulasi regenerasi jaringan karena berperan dalam produksi asam nukleat (DNA) (Susanto, 2010).
e. Mineral dan vitamin
Komposisi mineral yang terkandung dalam propolis sangat lengkap. Mineral yang terbanyak pada propolis adalah kalium, magnesium, kalsium, fosfat, dan besi (Campos, et al., 2008). Mineral berperan penting dalam fungsi imunitas, antioksidan, penyembuhan luka, dll. (Moenadjat, 2009).
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Luka bakar merupakan masalah kesehatan masyarakat global. Hal ini disebabkan karena tingginya angka mortalitas dan morbiditas luka bakar, khususnya pada negara dengan pendapatan rendah-menengah, dimana lebih dari 95% angka kejadian luka bakar menyebabkan kematian (mortalitas). Bagaimanapun juga, kematian bukanlah satu-satunya akibat dari luka bakar. Banyak penderita luka bakar yang akhirnya mengalami kecacatan (morbiditas), hal ini tak jarang menimbulkan stigma dan penolakan masyarakat (Gowri, et al., 2012).
Pada tahun 2014, World Health Organization (WHO) memperkirakan bahwa terdapat 265.000 kematian yang terjadi setiap tahunnya di seluruh dunia akibat luka bakar. Di India, lebih dari satu juta orang menderita luka bakar sedang-berat per tahun. Di Bangladesh, Columbia, Mesir, dan Pakistan, 17% anak dengan luka bakar menderita kecacatan sementara dan 18% menderita kecacatan permanen. Sedangkan di Nepal, luka bakar merupakan penyebab kedua cedera tertinggi, dengan 5% kecacatan.
Menurut data American Burn Association (2015), di Amerika Serikat terdapat 486.000 kasus luka bakar yang menerima penanganan medis, 40.000 diantaranya harus dirawat di rumah sakit. Selain itu, sebanyak 3.240 kematian terjadi setiap tahunnya akibat luka bakar. Penyebab terbanyak terjadinya luka bakar adalah karena trauma akibat kecelakaan kebakaran, kecelakaan kendaraan, terhirup asap, kontak dengan listrik, zat kimia, dan benda panas.
penyebab terbanyak adalah flame burn injury (174 kasus, 50,4%) (Maulana, 2014).
Luka bakar merupakan respon kulit dan jaringan subkutan terhadap paparan yang berasal dari sumber panas, listrik, zat kimia, dan radiasi. Hal ini akan menimbulkan gejala berupa nyeri, pembengkakan, dan terbentuknya lepuhan (Grace dan Borley, 2006). Semua luka bakar (kecuali luka bakar ringan atau luka bakar derajat I) dapat menimbulkan komplikasi berupa shock, dehidrasi dan ketidakseimbangan elektrolit, infeksi sekunder, dan lain-lain (Rismana, et al., 2013).
Permasalahan yang dialami oleh penderita luka bakar, selain komplikasi, adalah proses penyembuhan luka bakar yang lama. Proses penyembuhan luka dapat dibagi menjadi tiga fase, yaitu fase inflamasi, proliferasi, dan maturasi. Pertama, fase inflamasi yang berlangsung sejak terjadinya luka hingga 3-4 hari.
Pada fase ini terjadi perubahan vaskuler dan proliferasi seluler. Daerah luka mengalami agregasi trombosit dan mengeluarkan serotonin, serta mulai timbul epitelisasi. Kedua, fase proliferasi yang berlangsung sejak berakhirnya fase inflamasi hingga hari ke-21. Pada fase inflamasi, terjadi proliferasi fibroblas, angiogenesis, dan proses epitelisasi. Ketiga, fase maturasi, terjadi sejak hari ke-21 hingga 1-2 tahun dimana terjadi proses pematangan kolagen, penurunan aktivitas seluler dan vaskuler. Bentuk akhir dari fase ini berupa jaringan parut yang berwarna pucat, tipis, lemas tanpa rasa nyeri atau gatal (Pradipta, 2010).
Epitelisasi merupakan proses yang penting pada saat penyembuhan luka bakar karena epitel melindungi tubuh dari paparan lingkungan. Selain itu, epitel juga berguna dalam melindungi tubuh dari invasi bakteri, trauma, dan kehilangan cairan. Semakin cepat proses reepitelisasi epidermis, maka semakin cepat proses penyembuhan luka. Oleh karena itu, diperlukan suatu terapi yang dapat digunakan untuk mempercepat proses reepitelisasi epidermis pada luka bakar (Ahliadi, 2014).
dicampur dengan saliva dan berbagai enzim dalam lebah sehingga menghasilkan resin baru yang berbeda dengan resin asalnya. Senyawa ini juga digunakan lebah untuk membangun sarangnya (Ningsih, 2009).
Propolis telah lama dikenal masyarakat Indonesia sebagai obat tradisional, karena propolis memiliki kandungan yang berfungsi dalam proses penyembuhan luka, yaitu flavonoid. Flavonoid memiliki banyak manfaat antara lain sebagai sebagai antiinflamasi, antimikroba, dan antioksidan (Martos, et al., 2008).
Efek antioksidan propolis ditunjukkan oleh kandungan yang terdapat dalam flavonoid, yaitu caffeic acid phenetyl ester (CAPE) yang merupakan antioksidan tingkat tinggi. CAPE menghambat reaksi oksidatif yang berlebihan akibat adanya proses inflamasi maupun metabolisme sel pada luka. CAPE menghambat pelepasan asam arakhidonat dari membran sel serta menghambat aktivitas COX-1 dan COX-2 sehingga tidak terbentuk mediator-mediator inflamasi (Murtaza, et al., 2014).
Efek antimikroba propolis penting untuk mencegah terjadinya infeksi sekunder yang rentan terjadi saat luka. Infeksi sekunder sering disebabkan oleh bakteri patogen, seperti Staphylococcus, Streptococcus, dan pneumococcus. Bakteri tersebut masuk ke dalam tubuh melalui jaringan yang rusak akibat luka bakar. Infeksi yang terjadi tidak hanya menyebabkan efek lokal, namun juga sistemik (Pradipta, 2010). Penelitian yang dilakukan oleh Meresta dan Meresta (1985) menunjukkan bahwa ekstrak propolis dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus sp. dan Streptococcus sp. Hal ini disebabkan karena adanya senyawa galangin, pinocembrin, dan pinostrobin yang terkandung dalam flavonoid propolis memiliki efek terkuat dalam melawan bakteri tersebut (Marcucci, 1995). Selain itu, terdapat kandungan caffeolylguinic acid dan cinnamon acid yang keduanya juga memiliki efek antimikroba (Marwanti, 2012).
Penelitian Olczyk, et al. (2012) menunjukkan bahwa propolis juga terbukti dalam menstimulasi pembentukan dan aktivitas glikoprotein seperti vitronectin, laminin, dan glikosaminoglikan, yaitu heparin sulfate/heparin. Vitronectin dan
dan proses penutupan luka. Oleh karena itu, propolis dapat mempercepat penyembuhan luka bakar dan proses reepitelisasi epidermis.
Berdasarkan latar belakang tersebut, maka penulis tertarik untuk meneliti tentang pengaruh pemberian propolis secara topikal terhadap proses reepitelisasi epidermis pada luka bakar mencit (Mus musculus).
1.2. Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang yang dipaparkan diatas, maka penulis merumuskan masalah penelitian sebagai berikut:
Bagaimana pengaruh pemberian propolis secara topikal terhadap proses reepitelisasi epidermis pada luka bakar mencit (Mus musculus).
1.3. Tujuan Penelitian
1.3.1. Tujuan Umum
Untuk mengetahui pengaruh pemberian propolis secara topikal terhadap proses reepitelisasi epidermis pada luka bakar mencit (Mus musculus).
1.3.2. Tujuan Khusus
1. Mengetahui ketebalan epitel (epidermis) yang terbentuk pada luka bakar mencit dengan pemberian propolis topikal pada hari ke-1, 4, dan 21.
2. Mengetahui ketebalan epitel (epidermis) yang terbentuk pada luka bakar mencit tanpa pemberian propolis pada hari ke-1, 4, dan 21.
1.4. Manfaat Penelitian
1. Menambah pengetahuan tentang propolis sebagai terapi alternatif luka bakar.
2. Dapat memberikan pengetahuan kepada masyarakat tentang manfaat propolis sebagai terapi alternatif luka bakar.
ABSTRAK
Luka bakar merupakan masalah kesehatan masyarakat dunia dengan angka mortalitas dan morbiditas yang tinggi. Penanganan yang efektif sangat diperlukan dalam mempercepat proses penyembuhan luka bakar. Propolis adalah salah satu produk lebah yang memiliki kandungan flavonoid tinggi. Propolis berperan sebagai antimikroba, antiinflamasi, antioksidan, dan mempercepat regenerasi jaringan. Propolis dapat menstimulasi pembentukan vitronektin, laminin, dan heparan sulfat/heparin yang berperan dalam proses reepitelisasi epidermis.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian propolis topikal 5% terhadap proses penyembuhan luka bakar, khususnya proses reepitelisasi epidermis.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan desain post-test only control group dengan menggunakan mencit (Mus musculus) galur Double Distsch Webster (DDW). Sampel yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 24 ekor mencit jantan dan dibagi secara acak menjadi 6 kelompok: 3 kelompok kontrol dan 3 kelompok perlakuan. Semua mencit diberikan luka bakar derajat II pada bagian punggung. Pada kelompok perlakuan diberikan propolis topikal 5% sebanyak 2 kali/hari, sedangkan pada kelompok kontrol diberikan dasar salep (vaselin album dan adeps lanae). Pengambilan jaringan kulit dilakukan pada hari ke-1, ke-4, dan ke-21 dan dilakukan pengukuran ketebalan reepitelisasi epidermis dengan menggunakan mikroskop.
Hasil uji statistik one way-ANOVA diikuti uji post-hoc LSD terhadap ketebalan epitel pada kelompok perlakuan dan kontrol menunjukkan perbedaan bermakna (p=0.0001) pada hari pengamatan ke-21 dengan rata-rata±SD (K21=38.88±5.41 µm, P21=75.14±9.45 µm). Hal ini membuktikan bahwa pemberian propolis dapat meningkatkan ketebalan epitel pada luka bakar sehingga mempercepat proses penyembuhan luka.
Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa propolis topikal 5% berkhasiat dalam proses penyembuhan luka bakar derajat II sehingga dapat digunakan sebagai terapi alternatif dalam penanganan luka bakar.
ABSTRACT
Burn injury is a public health problem with high morbidity and mortality rate in the world. Effective treatment is needed in accelerating wound healing process. Propolis is the bee product with high flavonoid content and act as an antimicrobial, anti-inflammatory, antioxidant, and improve tissues regeneration. Propolis can stimulate accumulation of vitronectin, laminin, and heparan sulfate/heparin, which play an important roles during reepithelization of epidermis.
The aim of this study was to determine the effect of topical propolis 5% on burn wound healing, especially reepithelization of epidermis.
An experimental study with post-test only control group design used Double Distsch Webster (DDW) strain of mice (Mus musculus). The samples were 24 male mice, divided randomly into 6 groups: 3 control groups and 3 treatment groups. All the mice were given second-degree burns on the back. In treatment groups were treated with topical propolis 5% twice daily, and control groups with a placebo (Vaseline album and adeps lanae). Reepithelization of epidermis was assessed by measuring epithelial thickness on day 1, 4, and 21 after injury.
Results of one way-ANOVA followed by LSD Post Hoc test on epithelial thickness between treatment and control groups showed a significant difference (p<0.0001) with mean±SD (K21=38.88±5.41 µm and P21=75.14±9.45 µm). It proved that administration of topical propolis can increase the epithelial thickness compared with placebo.
In conclusion, topical propolis 5% have beneficial effects in burn healing, hence it might be used as an alternative therapy of burns.
PENGARUH PEMBERIAN PROPOLIS SECARA TOPIKAL
TERHADAP PROSES REEPITELISASI EPIDERMIS
PADA LUKA BAKAR MENCIT (Mus musculus)
Oleh:
RAUDHAH SARI
120100143
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGARUH PEMBERIAN PROPOLIS SECARA TOPIKAL
TERHADAP PROSES REEPITELISASI EPIDERMIS
PADA LUKA BAKAR MENCIT (Mus musculus)
KARYA TULIS ILMIAH
Oleh:
RAUDHAH SARI
NIM : 120100143
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
ABSTRAK
Luka bakar merupakan masalah kesehatan masyarakat dunia dengan angka mortalitas dan morbiditas yang tinggi. Penanganan yang efektif sangat diperlukan dalam mempercepat proses penyembuhan luka bakar. Propolis adalah salah satu produk lebah yang memiliki kandungan flavonoid tinggi. Propolis berperan sebagai antimikroba, antiinflamasi, antioksidan, dan mempercepat regenerasi jaringan. Propolis dapat menstimulasi pembentukan vitronektin, laminin, dan heparan sulfat/heparin yang berperan dalam proses reepitelisasi epidermis.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian propolis topikal 5% terhadap proses penyembuhan luka bakar, khususnya proses reepitelisasi epidermis.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan desain post-test only control group dengan menggunakan mencit (Mus musculus) galur Double Distsch Webster (DDW). Sampel yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 24 ekor mencit jantan dan dibagi secara acak menjadi 6 kelompok: 3 kelompok kontrol dan 3 kelompok perlakuan. Semua mencit diberikan luka bakar derajat II pada bagian punggung. Pada kelompok perlakuan diberikan propolis topikal 5% sebanyak 2 kali/hari, sedangkan pada kelompok kontrol diberikan dasar salep (vaselin album dan adeps lanae). Pengambilan jaringan kulit dilakukan pada hari ke-1, ke-4, dan ke-21 dan dilakukan pengukuran ketebalan reepitelisasi epidermis dengan menggunakan mikroskop.
Hasil uji statistik one way-ANOVA diikuti uji post-hoc LSD terhadap ketebalan epitel pada kelompok perlakuan dan kontrol menunjukkan perbedaan bermakna (p=0.0001) pada hari pengamatan ke-21 dengan rata-rata±SD (K21=38.88±5.41 µm, P21=75.14±9.45 µm). Hal ini membuktikan bahwa pemberian propolis dapat meningkatkan ketebalan epitel pada luka bakar sehingga mempercepat proses penyembuhan luka.
Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa propolis topikal 5% berkhasiat dalam proses penyembuhan luka bakar derajat II sehingga dapat digunakan sebagai terapi alternatif dalam penanganan luka bakar.
ABSTRACT
Burn injury is a public health problem with high morbidity and mortality rate in the world. Effective treatment is needed in accelerating wound healing process. Propolis is the bee product with high flavonoid content and act as an antimicrobial, anti-inflammatory, antioxidant, and improve tissues regeneration. Propolis can stimulate accumulation of vitronectin, laminin, and heparan sulfate/heparin, which play an important roles during reepithelization of epidermis.
The aim of this study was to determine the effect of topical propolis 5% on burn wound healing, especially reepithelization of epidermis.
An experimental study with post-test only control group design used Double Distsch Webster (DDW) strain of mice (Mus musculus). The samples were 24 male mice, divided randomly into 6 groups: 3 control groups and 3 treatment groups. All the mice were given second-degree burns on the back. In treatment groups were treated with topical propolis 5% twice daily, and control groups with a placebo (Vaseline album and adeps lanae). Reepithelization of epidermis was assessed by measuring epithelial thickness on day 1, 4, and 21 after injury.
Results of one way-ANOVA followed by LSD Post Hoc test on epithelial thickness between treatment and control groups showed a significant difference (p<0.0001) with mean±SD (K21=38.88±5.41 µm and P21=75.14±9.45 µm). It proved that administration of topical propolis can increase the epithelial thickness compared with placebo.
In conclusion, topical propolis 5% have beneficial effects in burn healing, hence it might be used as an alternative therapy of burns.
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur ke hadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya yang begitu besar sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan karya Tulis Ilmiah (KTI) ini. Penulisan KTI ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana pada Program Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara. Judul yang penulis ajukan
adalah “Pengaruh Pemberian Propolis Secara Topikal Terhadap Proses
Reepitelisasi Epidermis Pada Luka Bakar Mencit (Mus musculus)”.
Proses penyelesaian KTI ini dapat berjalan dengan lancar karena adanya bimbingan, dukungan, dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis mengucapkan terima kasih dan penghargaan setinggi-tingginya kepada:
1. Prof. dr. Gontar Alamsyah Siregar, Sp.PD-KGEH, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara.
2. Dosen pembimbing dalam penulisan KTI ini, dr. Yunita Sari Pane, M.Si, yang dengan sepenuh hati telah meluangkan segenap waktu untuk mendukung, membimbing, dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan KTI ini.
3. dr. Esther Sitorus, Sp.PA, yang telah membimbing dan mengarahkan penulis dalam proses pengambilan data di laboratorium histologi FK USU.
4. Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt, selaku kepala laboratorium obat tradisional Fakultas Farmasi USU, yang telah meluangkan waktunya untuk dapat membimbing dalam pembuatan sediaan propolis topikal.
5. dr. Raka Jati P, M.Ked(An), Sp.An, dr. Rina Amelia, MARS, dan dr. Hiro Hidayah Danial Nst, M.ked(OG), Sp.OG selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dalam memperbaiki penelitian ini.
6. Keluarga tercinta, orang tua penulis, Drs. Kamal Syah dan Nurmaliah, S.Pd,
dan kakak penulis, Rika Yulia Fitri, S.Pd, yang selalu memberikan do’a,
dukungan, dan semangat untuk menyelesaikan penelitian ini.
8. Sahabat-sahabatku, Putri Nahrisa Nst, Riski Hakiki, Khairatul Ummah, Dyan Riza Indah Tami, Santri Mei, dan Syaida Masyarah Panjaitan, yang telah memberikan motivasi dan inspirasi sehingga penulis semangat dalam menyelesaikan penelitian ini.
9. Teman-teman sejawat stambuk 2012 FK USU, UKM SCORE PEMA FK USU, dan semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu-persatu.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa karya tulis ilmiah ini masih jauh dari kesempurnaan sehingga dengan segala kerendahan hati, penulis mengharapkan kritik dan saran dari pembaca sebagai sarana evaluasi kedepannya.
Medan, 15 Desember 2015 Penulis
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN PERSETUJUAN……… i
ABSTRAK……… ii
ABSTRACT ……… iii
KATA PENGANTAR ………. iv
DAFTAR ISI……… vi
DAFTAR TABEL……… ix
DAFTAR GAMBAR ………... x
DAFTAR LAMPIRAN……… xi
BAB 1 PENDAHULUAN ……….. 1
1.1. Latar Belakang……… 1
1.2. Rumusan Masalah ……… 4
1.3. Tujuan Penelitian ……… 4
1.4. Manfaat Penelitian ………. 5
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ……… 6
2.1. Anatomi dan Histologi Kulit ……….. 6
2.2. Luka Bakar ………. 8
2.2.1. Definisi ………. 8
2.2.2. Klasifikasi ……… 9
2.2.3. Komplikasi ………... 11
2.2.4. Proses Penyembuhan Luka Bakar ……… 12
2.3. Propolis ……….. 14
2.3.1. Komposisi Propolis ………. 15
