PENETAPAN KADAR FLAVONOID DAN FENOLIK EKSTRAK AIR JINTEN HITAM (Nigella sativa L.) DAN UJI SITOTOKSIK PADA SEL
KANKER PAYUDARA MCF-7 DARI TIGA DAERAH : HABASYAH, INDIA DAN INDONESIA
SKRIPSI
Oleh :
Apriliana Dwi Sejati K 100 080 070
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA
v
PENETAPAN KADAR FLAVONOID DAN FENOLIK EKSTRAK AIR JINTEN HITAM (Nigella sativa L.) DAN UJI SITOTOKSIK PADA SEL
KANKER PAYUDARA MCF-7 DARI TIGA DAERAH : HABASYAH, INDIA DAN INDONESIA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta
Oleh :
Apriliana Dwi Sejati K 100 080 070
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012
viii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb.
Segala puji bagi Allah yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah sehinga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang berjudul: “PENETAPAN KADAR FLAVONOID DAN FENOLIK EKSTRAK AIR JINTEN HITAM (Nigella sativa L.) DAN UJI SITOTOKSIK PADA SEL KANKER PAYUDARA MCF-7 DARI TIGA DAERAH : HABASYAH, INDIA DAN INDONESIA” sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Dalam penyusunan ini penulis banyak mendapatkan bantuan dari berbagai pihak. Untuk itu penulis mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Dr. Muhammad Da’i M.Si., Apt selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta dan sebagai dosen penguji skripsi. 2. Ibu Rosita Melannisa M.Si., Apt selaku dosen penguji skrpsi.
3. Ibu Ika Trisharyanti. D. K, M.Farm., Apt selaku pembimbing utama. 4. Bapak Andi Suhendi, S.farm., Apt selaku pembimbing pendamping. 5. Bapak Gunawan Setiayadi, S.Farm., Apt selaku dosen pembimbing
akademik.
6. Segenap laboran : Pak Rahmad, Pak Toni, Mbak Nur.
7. Ayah, ibu dan kakak ku yang selalu mendukung dan memberiku semangat. 8. Sahabat-sahabatku, mbak Nita, Vika, Netri, mbak Akhir, Mitha, Mahfur,
Hanif.
9. Berbagai pihak yang telah membantu dan penyusunan skripsi ini.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi siapa saja yang membacanya dan muncul kritik dan saran untuk perbaikan penulis selanjutnya.
Wa’alaikumsalam Wr. Wb.
Surakarta, Juli 2012 Penulis
ix
a. Sistematika Tanaman Nigella sativa ... 2
x
1. Penyiapan Bahan ... 8
2. Pembuatan Ekstrak Air Nigella sativa ... 8
3. Pemeriksaan Organoleptis Ekstrak Air Nigella sativa ... 8
4. Penetapan Kadar Flavonoid ... 8
a. Penetapan Operating Time (OT) ... 8
b. Penentuan Pajang Gelombang Maksimal ... 9
c. Kurva Baku Quercetin ... 9
d. Penetapan Kadar Flavonoid Dalam Sampel ... 9
5. Penetapan Kadar Fenolik ... 9
C.Penetapan Kadar Flavonoid Total ... 14
D. Penetapan Kadar Fenolik Total ... 16
E.Uji Sitotoksik Terhadap MCF-7 ... 18
F. Korelasi Flavonoid Fenolik dan Aktivitas Sitotoksik ... 20
xi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Ekstraksi Biji Jinten Hitam ... 13
Tabel 2. Pemerikasaan Organoleptis Ekstrak Air Jinten Hitam ... 13
Tabel 3. Kadar Flavonoid Ekstrak Air Jinten Hitam ... 15
Tabel 4. Kadar Fenolik Ekstrak Air Jinten Hitam ... 17
Tabel 5. Persentase Sel Hidup Ekstrak Air Jiten Hitam ... 20
Tabel 6. Kadar Flavonoid Fenolik Dan% Sel Hidup Konsentrasi 100 µg/mL ... 21
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Struktur Kimia Yang Terkandung Dalam Nigella sativa ... 4
Gambar 2. Struktur Umum Flavonoid ... 5
Gambar 3. Kuva Baku Kuersetin ... 14
Gambar 4. Kurva Baku Asam Galat ... 16
Gambar 5. Sel MCF-7 ... 18
Gambar 6. Grafik Hubungan Konsentrasi Dan % Sel Hidup ... 20
Gambar 7. Grafik Korelasi Kadar Flavonoid Fenolik Dan % Sel hidup konsentrasi 100 µg/mL ... 21
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi ... 30
Lampiran 2. Foto Biji Jinten Hitam ... 32
Lampiran 3. Foto Ekstrak Air Jinten Hitam ... 32
Lampiran 4. Gambar Alat Penetapan Kadar Flavonoid Dan Fenolik ... 32
Lampiran 5. Gambar Alat Uji Sitotoksik ... 32
Lampiran 6. Data Hasil Penetapan Kadar Flavonoid ... 33
Lampiran 7. Data Hasil Penetapan Kadar Fenolik ... 35
Lampiran 8. Data Hasil Uji Sitotoksik ... 37
xiv
DAFTAR SINGKATAN
ATCC American Type and Culture Collection
cm centimeter µg mikrogram DMSO Dimeilsulfoksida
ER Estrogen Reseptor
FBS Fetal Bovine Serum
GAE Gallic Acid Equivalen
HER-2 Hormone Estrogen Reseptor-2
IC50 Inhibitory Concentration 50
KLT Kromatigrafi Lapis Tipis
MTT (3-4,5dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromid) mL mililiter
PBS Phospate Buffer Saline
RPMI Roawall Park Memorial Institute
SDS Sodium Dodesil Sulfat
UV Ultra Violet
Vis Visibel
QE Quercetin Equivalen
xv
INTISARI
Jinten hitam (Nigella sativa L.), merupakan tanaman obat yang mengandung senyawa flavonoid dan fenolik yang mempunyai aktivitas antioksidan dan antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar flavonoid dan fenolik ekstrak air Nigella sativa Habasyah, India dan Indonesia dan aktivitas sitotoksik terhadap sel MCF-7.
Penetapan kadar flavonoid ekstrak air jinten hitam ditentukan dengan metode Chang. Penetapan kadar fenolik dilakukan dengan metode Folin-Ciocalteu. Uji sitotoksik pada sel MCF-7 dilakukan dengan metode MTT assay.
Hasil penelitian menunjukkan ekstrak air jinten hitam Habasyah, India,
dan Indonesia mempunyai kadar flavonoid berturut-turut 58,30±1,97 mg/100 gram; 12,90±0,50 mg/100 gram; 3,10±0,15 mg/100 gram. Kadar fenolik hitam 552,10±20,40 mg/100 gram (Habbsyah); 432,50±29,30 mg/100 gram (India); 49,50±2,50 mg/100 gram (Indonesia). Nilai IC50 ekstrak air jinten hitam Habasyah dan India >100 µg/mL. Nilai IC50 ekstrak air jinten hitam Indonesia < 100 µg/mL. Nilai korelasi (R2) kadar flavonoid dan fenolik dengan % sel hidup pada konsentrasi 100 µg/mL dari ekstrak air jinten hitam adalah 0,004; 0,432. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak air jinten hitam Habasyah dan India tidak poten digunakan sebagai agen sitotoksik dan kandungan flavonoid dan fenolik mempengaruhi aktivitas sitotoksik sebesar 0,4% dan 43%.
Kata kunci : Nigella sativa Linn., flavonoid total, fenolik total, aktivitas sitotoksik, sel MCF-7.
