UJI
SITOTOKSISITAS
ANTIKANKER PAYUDARA T47DFOTOSENSITIZER Meso- Tetraphenylporphine DAN Meso-Tetraphenylchlorin
SECARA FOTODINAMIK TERAPI
SKRIPSI
Untuk menuhi sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1
Diajukan Olah FUJI MARSELA ERLITA
1108010117
Fakultas Farmasi
v
INTISARI
Kanker payudara merupakan penyebab terbesar kematian setiap tahunnya. Kemoterapi adalah salah satu pengobatan pada terapi kanker yang sering digunakan, namun penggunaan kemoterapi banyak menimbulkan efek samping. PDT (Photodynamic therapy) merupakan pengobatan kanker yang menggunakan fotosensitizer, cahaya, dalam lingkungan oksigen sehingga menghasilkan oksigen singlet yang mampu menghancurkan sel kanker. Pada penelitian ini fotosensitizer yang digunakan adalah MTPP (meso-tetraphenylporphine) dan (meso -tetraphenylchlorin). MTPP dan MTPC merupakan senyawa golongan tetrapirol makrosiklik dimana perbedaan dari keduanya terletak pada 1 cincin pirol yang tereduksi. Penelitian ini bertujuan untuk melihat efektifitas kedua senyawa fotosensitizer terhadap sel line kanker payudara T47D dan pengaruh reduksi 1 cincin pirol pada senyawa tetrapirol makrosiklik. Uji sitotoksik dilakukan saat tanpa penyinaran terhadap sel vero dan sel T47D, uji aktivitas PDT dengan penyinaran dilakukan terhadap sel kanker payudara T47D dengan perbedaan waktu inkubasi 24 dan 48 jam. Uji tersebut menggunakan metode MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide). Pada uji sitotoksik terhadap sel normal tanpa penyinaran pada senyawa MTPP terjadi penurunan viabilitas sel dengan adanya pengaruh peningkatan konsentrasi, sedangkan senyawa MTPC pada konsentrasi 2 µM tidak memberikan efek toksik. Pada uji tanpa penyinaran terhadap sel kanker senyawa MTPC menunjukan penurunan viabilitas dibandingkan dengan senyawa MTPP. Pada uji aktivitas dengan penyinaran terhadap sel kanker waktu inkubasi 24 jam nilai IC50 senyawa MTPP 2,544 µM, sedangkan MTPC 2,036 µM. Pada inkubasi waktu 48 jam nilai IC50 senyawa MTPP 2,251 µM sedangkan senyawa MTPC 1,884 µM.
ABSTRACT
Breast cancer are the largest deaths cause annually. Chemotherapy are often used as cancer treatment therapy, but it give much side effects. PDT (Photodynamic therapy) is a cancer treatment using photosensitizer, lights, in oxygen environments to produce singlet oxygen which capable to destroy cancer cells. In this study, MTPP ( meso-tetraphenylporphine) and (meso-tetraphenylchlorin) were used as photosensitizer. MTPP and MTPC is macrocyclic tetrapyrol compound has difference in one reduced pyrole ring. The Aims of study to find the effectiveness both photosensitizer against T47D breast cancer line cells and the effect of one pyrole ring reduction on tetrapyrol macrocyclic compounds. Cytotoxic test were performed in the dark toxicity to vero cells and T47D cells. PDT activity test were performed in the light dependent toxicity T47D breast cancer cells with different time incubation, 24 and 48 hours. Using MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) test. Cytotoxic test against normal cells dark toxicity on MTPP, it can decreased cell viability influence concentration, while MTPC 2 μM concentration not giving any toxic effect. The dark toxicity to the cancer cells MTPC showed decrease in viability compared to MTPP. Test activity against cancer cells by irradiating 24 hours incubation time, IC50 value MTPP is 2,544 μM, while MTPC is 2,036 μM. 48 hours incubation IC50 value MTPP 2,251 μM while MTPC is 1,884 μM.
vii
Lembar Persembahan
Yang Utama Dari Segalanya...Puji syukur kepada Allah SWT. yang telah memberi kesempurnan
indera dan membekali dengan ilmu. Atas karunia serta kemudahan
yang Engkau berikan akhirnya skripsi ini dapat terselesaikan.
Sholawat dan salam selalu terlimpahkan ke haribaan Rasullah
Muhammad SAW.
Ayah dan Mamah tersayang, sebagai tanda bakti, hormat, dan rasa terima kasih,
yang telah memberikan kasih sayang, segala dukungan, doa dan bantuan.
Kupersembahkan karya sederhana ini untukmu...
Mel dan Dzaki, terimakasih telah menjadi semangat dan kebahagianku...
Pembimbing Skripsiku Bu Asmi & Bu Santi, terimakasih karena telah membuatku mengerti
dan memahami arti dalam sebuah proses belajar, bahwa sesungguhnya pejuang itu harus
bermental baja.
Rian Prianto... Terimakasih atas dukungan, semangat dan kesediaannya berbagi keluh kesah
selama ini.
Serta teman-teman farmasi 2011 atas kebersamaan, kerjasama dan semangat selama menempuh
pendidikan di Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Semoga Allah SWT membalas jasa budi kalian dikemudian hari dan memberikan kemudahan
MOTTO
BERJUANGLAH,
Seolah perjuangan adalah segalanya.
BERDOALAH,
ix PRAKATA
Bismillahirrahmanirrahim.
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat ALLAH SWT atas segala rahmat, hidayah serta inayahNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian (skripsi) yang berjudul “UJI SITOTOKSISITAS ANTIKANKER PAYUDARA (T47D) FOTOSENSITIZER meso-tetraphenylporphine (MTPP) DAN meso -tetraphenylchlorin (MTPC) SECARA FOTODINAMIK TERAPI”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi syarat dalam memperoleh gelar S1 di fakultas farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak, penulis tidak dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih kepada:
1. Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Dr. Agus Siswanto, M.Si, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, S.Si., M.Si., selaku dosen pembimbing I yang telah memberikan kepercayaan, bimbingan, arahan, dan petunjuk dalam menyusun skripsi ini dengan penuh kesabaran, ketekunan, sehingga dapat diselesaikan dengan baik.
4. Susanti, S.Farm., M.Phil. Apt. selaku dosen pembimbing II, yang telah memberikan petunjuk dan motivasi yang tinggi, sehingga penyusunan skripsi ini dapat terlaksana hingga selesai.
5. Prof. dr. H. Supargiyono, DTMH. S.U., Ph.D., Sp.ParK. yang telah memberikan perkuliahan mengenai kultur sel kepada penulis, sehingga penulis dapat memahami tentang penelitian ini.
7. Kedua orang tuaku tercinta yang telah memberikan dukungan moral, material, dan kekuatan doa.
8. Kedua adik tersayang (Mel dan Dzaki) terimakasih telah menjadi penyemangat untuk penulis.
9. Keluarga besar Bapak Kurdia dan Keluarga besar Bapak Kadmira (alm) telah banyak membantu dan mendukung melalui doa.
10. Keluarga Besar Omnia Farma (bu nurtanti, mba egri, mba refi, mba ratna, lia,
mba dini, ardi) terimakasih telah memberikan warna berbeda dalam hidup penulis.
11. Mas Rian Prianto, terimakasih telah mendampingi penulis dengan sabar
mendengar keluh kesah yang tiada hentinya.
12. Sahabatku (Dania, Windi, Dinar, mba Rini, Ghelsa, Menik, Devi) terimakasih
telah menjadi sahabat yang baik, ada kala suka dan duka.
13. Teman-teman seperjuangan Fakultas Farmasi angkatan 2011, semoga kita semua
menjadi manusia sebaik-baiknya manusia di bumi ini.
14. Nur Ardhiansyah dan Eko Prasetio yang telah berjuang bersama, terimakasih atas
kerjasama, kesabaran serta suka dukanya selama penelitian berlangsung.
15. Teman-teman di jogja, Khoerunnisa, Nisrina, Dewantara Wahyu Pratama,
terimakasih telah banyak membantu.
16. Semua pihak yang telah membantu yang tidak dapat penulis sebutkan satu
-persatu.
Penulis telah berusaha semaksimal mungkin agar penyusunan skripsi ini dapat tersusun dengan sempurna, namun penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak penyusunan skripsi ini tidak akan berjalan baik. Dengan segala kerendahan hati dan lapang dada, penulis menerima kritik dan saran yang membangun dari para pembaca untuk kesempurnaan di masa datang.
Purwokerto, Agustus 2016
xi
RIWAYAT HIDUP
Nama : Fuji Marsela Erlita Tempat, Tanggal Lahir : Cirebon, 30 Maret 1993 Jenis Kelamin : Perempuan
Agama : Islam
Alamat : Karyabakti Gg V Nomer 78 Kota Cirebon Nama Orang Tua :
a. Ayah : Sunadi
b. Ibu : Halimah
Riwayat Pendidikan :
1. SD Negeri Pelandakan II Kota Cirebon (2005) 2. SMP Negeri 4 Kota Cirebon (2008)
3. SMF Muhammadiyah Cirebon (2011)
Riwayat Organisasi :
1. Pimpinan Wilayah Ikatan Pelajar Muhammadiyah Jawa Barat. 2. Dewan Mahasiswa Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Direktur Badan Pemeriksa Keuangan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
HALAMAN PERSETUJUAN ... ii
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
SURAT PERNYATAAN ... iv
ABSTRAK ... v
ABSTRACT ... vi
LEMBAR PERSEMBAHAN ... vii
MOTTO ... viii A. Kanker dan Kanker Payudara ... 5
B. Sel T47D ... 7
C. Terapi Fotodinamik (PDT) ... 7
D. Fotosensitzer ... 10
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian ... 12
xiii
C. Definisi Variabel Operasional ... 12
D. Waktu dan Tempat Penelitian ... 13
E. Bahan dan Alat ... 13
1. Bahan ... 13
a. Bahan Utama ... 13
b. Sel Kanker ... 13
2. Alat... 14
F. Cara Penelitian ... 14
G. Analisis Hasil ... 15
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 16
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan ... 25
B. Saran ... 25
DAFTAR PUSTAKA ... 26
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Kanker payudara dalam jaringan ... 6
Gambar 2.Morfologi sel T47D 24 jam inkubasi dan 72 jam inkubasi ... 7
Gambar 3. Proses fotodinamik terapi dengan senyawa fotosensitizer pada pasien penderita kanker ... 8
Gambar 4. Mekanisme fotofisika dan fotokimia PDT ... 10
Gambar 5. Struktur senyawa meso-tetraphenyporphine dan meso-tetraphenyichlorin ... 11
Gambar 6. Reduksi garam tetrazolium pada pereaksi MTT menjadi kristal formazen ... 17
Gambar 7. Kristal formazen yang terbentuk dilihat dari mikroskop ... 18
Gambar 8. MTPP, MTPC, DOXO tanpa penyinaran terhadap sel NIH 3T3 ... 19
Gambar 9. MTPP, MTPC, DOXO tanpa penyinaran terhadap sel T47D ... 20
Gambar 10. MTPP dan MTPC tanpa penyinaran terhadap sel T47D inkubasi 24 jam ... 22
Gambar 11. MTPP dan MTPC tanpa penyinaran terhadap sel T47D inkubasi 48 jam ... 23
xv
DAFTAR TABEL
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Cara kerja sistematik ... 29
Lampiran 2. Mapping plate uji sitotoksik dan uji aktivitas ... 30
Lampiran 3. Perhitungan seri konsentrasi ... 31
Lampiran 4. Persen Viabilitas sel ... 33
