INTISARI
Tomat merupakan jenis buah yang banyak mengandung likopen yang bermanfaat sebagai antioksidan. Texapon® N70 merupakan surfaktan anionik. Surfaktan merupakan bahan yang penting dalam pembuatan sediaan krim. PEG 6000 merupakan basis larut air yang mudah dicuci dan meningkatkan kenyamanan dalam penggunaan. Penelitian ini bertujuan untuk untuk mengetahui faktor yang dominan di antara Texapon® N70 sebagai surfaktan dan PEG 6000 sebagai basis dalam menentukan respon sifat fisis (viskositas dan ukuran droplet) dan stabilitas krim. Selain itu juga bertujuan untuk mendapatkan komposisi optimum Texapon® N70 dan PEG 6000 dalam sediaan krim ekstrak etil asetat tomat.
Penelitian ini menggunakan rancangan eksperimental murni dengan desain faktorial dua faktor yaitu Texapon® N70 dan PEG 6000 pada dua level yaitu level tinggi dan level rendah. Analisis statistik menggunakan uji ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%. Pengolahan data dilakukan menggunakan software R-2.14.1.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa Texapon® N70 dan PEG 6000 memberikan efek yang signifikan terhadap viskositas, sementara interaksi dari Texapon® N70 dan PEG 6000 tidak memberikan efek yang signifikan. Nilai efek yang paling besar ditunjukkan oleh Texapon® N70. Texapon® N70, PEG 6000, dan interaksinya memberikan efek yang signifikan terhadap ukuran droplet. Nilai efek yang paling besar ditunjukkan oleh PEG 6000. Jadi, Texapon® N70 merupakan faktor dominan dalam mempengaruhi sifat fisis (viskositas) krim ekstrak etil asetat tomat. Pada penelitian ini ditemukan area komposisi optimum Texapon® N70 dan PEG 6000 yang diprediksi sebagai formula optimum krim ekstrak etil asetat tomat namun hasil yang didapatkan tidak valid.
ABSTRACT
Tomatoes are fruits which contain lots of lycopene works as the antioxidant. Texapon® N70 is an anionic surfactant. Surfactant is one of the most important ingredient in the manufacture of cream preparation. PEG 6000 is a water-soluble base is easily washable and improve the convenience. The purpose of this study was to determine the dominant factor among Texapon® N70 as surfactants and PEG 6000 as a base in determining the response of the physical properties (viscosity and droplet size) and stability of cream. It was also purposed to obtain the optimum composition of Texapon® N70 and PEG 6000 in the preparation of ethyl acetate extract tomato cream.
This study used a pure experimental design using a factorial design with two factors is Texapon® N70 and PEG 6000 on two levels: high level and low level. Statistical analysis using ANOVA test with a 95 % confidence interval. The analysis was performed using R-2.14.1 software.
The results showed that Texapon® N70 and PEG 6000 gave the significant effect toward the cream viscosity, where as the interaction of Texapon® N70 and PEG 6000 gave no effect toward the cream viscosity. The greatest effect of the value indicated by Texapon® N70. Texapon® N70, PEG 6000, and their interaction gave the significant effect toward the cream droplet size. The greatest effect of the value indicated by PEG 6000. In conclusion, Texapon® N70 was a dominant factor in influencing the physical properties (viscosity) of ethyl acetate extract tomato cream. The optimum area of composition of Texapon® N70 and PEG 6000 could be obtained but it was not valid.
PENGARUH TEXAPON® N70 SEBAGAI SURFAKTAN DAN PEG 6000 SEBAGAI BASIS TERHADAP SIFAT FISIS DAN STABILITAS KRIM
EKSTRAK ETIL ASETAT TOMAT DENGAN DESAIN FAKTORIAL
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Fanny Adriyani Halim NIM : 108114122
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA
i
PENGARUH TEXAPON® N70 SEBAGAI SURFAKTAN DAN PEG 6000 SEBAGAI BASIS TERHADAP SIFAT FISIS DAN STABILITAS KRIM
EKSTRAK ETIL ASETAT TOMAT DENGAN DESAIN FAKTORIAL
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Fanny Adriyani Halim NIM : 108114122
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA
ii
Persetujuan Pembimbng
PENGARUH TEXAPON® N70 SEBAGAI SURFAKTAN DAN PEG 6000 SEBAGAI BASIS TERHADAP SIFAT FISIS DAN STABILITAS KRIM EKSTRAK ETIL ASETAT TOMAT DENGAN DESAIN FAKTORIAL
Skripsi yang diajukan oleh: Fanny Adriyani Halim
NIM : 108114122
telah disetujui oleh:
Pembimbing
iii
Pengesahan Skripsi Berjudul
PENGARUH TEXAPON® N70 SEBAGAI SURFAKTAN DAN PEG 6000 SEBAGAI BASIS TERHADAP SIFAT FISIS DAN STABILITAS KRIM EKSTRAK ETIL ASETAT TOMAT DENGAN DESAIN FAKTORIAL
Oleh:
Fanny Adriyani Halim NIM : 108114122
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Pada tanggal:
Mengetahui, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Dekan,
Ipang Djunarko, M.Sc., Apt.
Panitia Penguji Tanda tangan
1. Septimawanto Dwi P., S.Farm., M.Si., Apt. ………...
2. C.M. Ratna Rini Nastiti, M.Pharm., Apt. ………
iv
HA LA MA N PERSEMBA HA N
Pendidikan adalah tiket masa depan, hari esok dimiliki oleh
orang-orang yang mempersiapkan dirinya sejak hari ini
(M alcolm X)
H iduplah seakan kamu akan mati esok, belajarlah seakan kamu
akan hidup selamanya (M ahatma Gandhi)
Bekerjalah, bukan untuk makanan yang akan dapat binasa,
melainkan untuk makanan yang bertahan sampai kepada hidup
yang kekal, yang akan diberikan Anak M anusia kepadamu;
sebab D ialah yang disahkan oleh Bapa, Allah, dengan
meterai-N ya (Yoh 6:27)
Aku bukanlah orang hebat, tapi aku mau belajar dari
orang-orang hebat.. Aku bukanlah orang-orang yang istimewa, tapi aku akan
memeberikan sesuatu yang istimewa untuk orang-orang yang
aku kasihi..
Aku persembahkan karyaku kepada:
Tuhan Yesus Kristus Yang M aha Baik
M amah, Papah, Oh Chris, E ma, U u, dan alm. E ngkong tercinta
Teman-teman angkatan 2010
v
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS
Yang bertanda tangan di bawah ini, saya mahasiswa Universitas Sanata Dharma: Nama : Fanny Adriyani Halim
Nomor Mahasiswa : 108114122
Demi perkembangan ilmu pengetahuan, saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma karya Ilmiah saya yang berjudul:
PENGARUH TEXAPON® N70 SEBAGAI SURFAKTAN DAN PEG 6000 SEBAGAI BASIS TERHADAP SIFAT FISIS DAN STABILITAS KRIM
EKSTRAK ETIL ASETAT TOMAT DENGAN DESAIN FAKTORIAL
beserta perangkat yang diperlukan (bila ada). Dengan demikian saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma hak untuk menyimpan, mengalihkan dalam bentuk media lain, mengolahnya dalam bentuk pangkalan data, mendistribusikan secara terbatas, dan mempublikasikannya di internet atau media lain untuk kepentingan akademis tanpa perlu meminta izin dari saya ataupun memberi royalti kepada saya selama tetap mencantumkan nama saya sebagai penulis.
Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya. Dibuat di Yogyakarta
Pada tanggal : 09 Desember 2013 Yang menyatakan
vi
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA
Saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya tulis ini tidak memuat karya atau bagian karya orang lain, kecuali yang telah disebutkan dalam kutipan dan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah.
Apabila di kemudian hari ditemukan indikasi plagiarisme dalam naskah ini, maka saya bersedia menanggung segala anksi sesuai peraturan perundang-undangan yang berlaku.
Yogyakarta, 22 Oktober 2013 Penulis,
vii PRAKATA
Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan penyertaan yang diberikan kepada penulis, sehingga penulis bisa menyelesaikan laporan akhir yang berjudul “Pengaruh Texapon® N70 sebagai Surfaktan dan PEG 6000 sebagai Basis terhadap Sifat Fisis dan Stabilitas Krim Ekstrak Etil Asetat Tomat dengan Desain Faktorial” dengan baikdan tepat waktu.
Dalam menyelesaikan laporan akhir ini, penulis mengalami banyaknya kesulitan dan hambatan. Namun, dengan adanya bantuan, dukungan, dan motivasi dari banyak pihak, maka penulis dapat menyelesaikan laporan akhir ini. Oleh karena itu, dengan keredahan hati penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada: 1. Kedua orang tua, kakak, dan keluarga yang telah memberikan kasih sayang, doa, perhatian, semangat, dukungan, dan perjuangan untuk membiayai selama penulis menempuh pendidikan.
2. Ipang Djunarko, M.Sc., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
3. Septimawanto Dwi P., S.Farm., M.Si., Apt., selaku Dosen Pembimbing Skripsi, atas bimbingan, arahan, dukungan, dan perhatian yang diberikan selama penyusunan proposal, penelitian di laboratorium, pengolahan data, dan penyusunan laporan akhir.
viii
5. Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku dosen penguji yang telah meluangkan waktunya untuk menguji, sekaligus saran dan kritik yang diberikan kepada penulis.
6. Christofori Maria Ratna Rini Nastiti, M.Pharm., Apt., selaku dosen pembimbing akademik atas segala perhatian yang diberikan kepada penulis. 7. Segenap Dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
yang telah memberikan banyak ilmu serta pengalaman yang sangat berharga bagi penulis selama perkuliahan.
8. Pak Musrifin, Pak Parlan, Mas Kunto, Pak Iswandi, Pak Heru, Pak Wagiran, Mas Otok, dan laboran-laboran lain atas bantuan yang diberikan yang diberikan kepada penulis.
9. Teman kerja skripsi, Ega, Henny, dan Agnes atas kerjasama, dukungan, bantuan, semangat, dan suka duka yang dilewati bersama dalam proses awal penyusunan proposal hingga penyelesaian laporan akhir ini.
10. Sahabat sekaligus saudara, Henny, Verica, Agnes, Vivi, dan Go Yoanita atas kebersamaan yang dilewati bersama dalam proses perkuliahan, serta untuk doa, semangat, bantuan, dan dukungan yang selalu diberikan kepada penulis 11. Johan Andi Sudibyo yang selalu menemani, membantu, dan memberikan
semangat dalam menyelesaikan laporan akhir ini.
ix
13. Teman-teman angkatan 2010, khususnya kelas FST B atas kebersamaan, semangat, dukungan, keceriaan selama ini dalam melewati setiap proses perkuliahan dan praktikum.
14. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu.
Seperti pepatah “tak ada gading yang tak retak”, penulis menyadari adanya kekurangan selama penyusunan laporan akhir ini. Oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun dari semua pihak untuk kebaikan kedepannya. Penulis berharap semoga laporan akhir ini dapat bermanfaat bagi pembaca.
Yogyakarta, 24 Oktober 2013
x DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL... ...i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING... ...ii
HALAMAN PENGESAHAN...iii
HALAMAN PERSEMBAHAN...iv
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS...v
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA...vi
PRAKATA...vii
DAFTAR ISI...x
DAFTAR TABEL...xiii
DAFTAR GAMBAR...xv
DAFTAR LAMPIRAN...xvii
INTISARI...xviii
ABSTRACT...xix
BAB I . PENGANTAR...1
A. Latar Belakang...1
1. Permasalahan...4
2. Keaslian Karya...4
3. Manfaat...5
B. Tujuan Penelitian...5
1. Tujuan umum...5
xi
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA...6
A. Kulit...6
B. Antioksidan dan Radikal Bebas...8
C. Tomat...10
A. Jenis dan Rancangan Penelitian...34
xii
1. Variabel Penelitian...34
2. Definisi Operasional...35
C. Bahan Penelitian...37
D. Alat Penelitian...37
E. Tata Cara Penelitian...38
F. Analisis Hasil...45
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN...47
A. Pembuatan Ekstrak Etil Asetat Tomat...47
B. Uji Kualitatif Antioksidan EkstrakEtil Asetat Tomat...50
C. Pembuatan Krim Ekstrak Etil Asetat Tomat...52
D. Uji Sifat Fisis dan Stabilitas Krim Ekstrak Etil Asetat Tomat...59
E. Efek Penambahan Texapon® N70 dan PEG 6000 serta Interaksinya dalam Menentukan Sifat Fisis Krim………...69
F. Prediksi Komposisi Optimum Texapon® N70 dan PEG 6000...74
G. Validasi Formula...77
H. Uji Iritasi Primer dengan Metode HET-CAM...81
I. Keterbatasan dalam Penelitian...83
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN...84
A. Kesimpulan...84
B. Saran...84
DAFTAR PUSTAKA...85
LAMPIRAN...91
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel I. Kandungan likopen dalam buah segar dan olahan tomat………...14
Tabel II. Rancangan percobaan desain faktorial dua faktor dan dua level………..………..30
Tabel III. Formula acuan………39
Tabel IV. Formula modifikasi………....40
Table V. Rancangan formula desain fakorial………41
Tabel VI. Hasil rendemen ekstrak kental tomat………...49
Tabel VII. Hasil orientasi Texapon® N70 dan PEG 6000………...56
Tabel VIII. Level rendah dan level tinggi Texapon® N70 dan PEG 6000…....59
Tabel IX. Data uji organoleptis dan pH krim………...60
Tabel X. Daya sebar krim ( ̅ ± ) setelah 48 jam pembuatan………...62
Tabel XI. Viskositas krim ( ̅ ± ) setelah 48 jam pembuatan….………..63
Tabel XII. Viskositas krim ( ̅ ± ) pada 48 jam, 7 hari, 14 hari, 21 hari, dan 28 hari setelah pembuatan...63
Tabel XIII. % Pergeseran viskositas krim ( ̅ ± )………....65
Tabel XIV. Ukuran droplet krim ( ̅ ± ) setelah 48 jam pembuatan……...66
Tabel XV. Ukuran droplet krim ( ̅ ± ) pada 48 jam, 7 hari, 14 hari, 21 hari, dan 28 hari setelah pembuatan...67
Tabel XVI. % Pergeseran ukuran droplet krim ( ̅ ± )………....68
xiv
Tabel XVIII. Uji kesamaan varians viskositas dan ukuran droplet…………...70 Tebel XIX. Efek Texapon® N70, PEG 6000, dan interaksi keduanya terhadap
viskositas krim………...71 Tebel XX. Efek Texapon® N70, PEG 6000, dan interaksi keduanya terhadap
xv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Penampang kulit………..……….…6
Gambar 2. Sodium lauril eter sulfat…...………...18
Gambar 3. Polietilen glikol…………..………19
Gambar 4. Asam stearat………..……….20
Gambar 5. Trietanolamin……….….………...21
Gambar 6. Propilen glikol………..………..22
Gambar 7. Metil paraben………..………...23
Gambar 8. Kurva hubungan diameter droplet dan viskositas…..………25
Gambar 9. Chorioallantoic membrane…. ………..…………29
Gambar 10. Reaksi pada uji DPPH………...…….…50
Gambar 11. Hasil uji kualitatif antioksidan………..…….51
Gambar 12. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi Texapon® N70 terhadap viskositas krim……..……….……57
Gambar 13. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi Texapon® N70 terhadap ukuran droplet krim………...….57
Gambar 14. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi PEG 6000 terhadap viskositas krim………...58
Gambar 15. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi PEG 6000 terhadap ukuran droplet krim………..………..58
xvi
Gambar 17. Grafik viskositas krim selama penyimpanan…………...………..64 Gambar 18. Grafik ukuran droplet krim selama penyimpanan…………..……67 Gambar 19. Contour Plot respon viskositas krim ekstrak etil asetat tomat…..74 Gambar 20. Contour Plot respon ukuruan droplet krim ekstrak etil asetat
tomat………75 Gambar 21. Superimposed Contour Plot pada krim ekstrak etil asetat
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Lembar Determinasi Tanaman Tomat...91
Lampiran 2. Data Hasil Orientasi Texapon® N70 dan PEG 6000...92
Lampiran 3. Hasil Uji Sifat Fisis dan Stabilitas Krim Ekstrak Etil Asetat Tomat...95
Lampiran 4. Analisis Statistika Sifat Fisis dan Stabilitas Krim menggunakan Software R.2.14.1...98
Lampiran 5. Data Validasi Formula...106
Lampiran 6. Perhitungan Irritation Score (IS)...109
xviii INTISARI
Tomat merupakan jenis buah yang banyak mengandung likopen yang bermanfaat sebagai antioksidan. Texapon® N70 merupakan surfaktan anionik. Surfaktan merupakan bahan yang penting dalam pembuatan sediaan krim. PEG 6000 merupakan basis larut air yang mudah dicuci dan meningkatkan kenyamanan dalam penggunaan. Penelitian ini bertujuan untuk untuk mengetahui faktor yang dominan di antara Texapon® N70 sebagai surfaktan dan PEG 6000 sebagai basis dalam menentukan respon sifat fisis (viskositas dan ukuran droplet) dan stabilitas krim. Selain itu juga bertujuan untuk mendapatkan komposisi optimum Texapon® N70 dan PEG 6000 dalam sediaan krim ekstrak etil asetat tomat.
Penelitian ini menggunakan rancangan eksperimental murni dengan desain faktorial dua faktor yaitu Texapon® N70 dan PEG 6000 pada dua level yaitu level tinggi dan level rendah. Analisis statistik menggunakan uji ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%. Pengolahan data dilakukan menggunakan software R-2.14.1.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa Texapon® N70 dan PEG 6000 memberikan efek yang signifikan terhadap viskositas, sementara interaksi dari Texapon® N70 dan PEG 6000 tidak memberikan efek yang signifikan. Nilai efek yang paling besar ditunjukkan oleh Texapon® N70. Texapon® N70, PEG 6000, dan interaksinya memberikan efek yang signifikan terhadap ukuran droplet. Nilai efek yang paling besar ditunjukkan oleh PEG 6000. Jadi, Texapon® N70 merupakan faktor dominan dalam mempengaruhi sifat fisis (viskositas) krim ekstrak etil asetat tomat. Pada penelitian ini ditemukan area komposisi optimum Texapon® N70 dan PEG 6000 yang diprediksi sebagai formula optimum krim ekstrak etil asetat tomat namun hasil yang didapatkan tidak valid.
xix
ABSTRACT
Tomatoes are fruits which contain lots of lycopene works as the antioxidant. Texapon® N70 is an anionic surfactant. Surfactant is one of the most important ingredient in the manufacture of cream preparation. PEG 6000 is a water-soluble base is easily washable and improve the convenience. The purpose of this study was to determine the dominant factor among Texapon® N70 as surfactants and PEG 6000 as a base in determining the response of the physical properties (viscosity and droplet size) and stability of cream. It was also purposed to obtain the optimum composition of Texapon® N70 and PEG 6000 in the preparation of ethyl acetate extract tomato cream.
This study used a pure experimental design using a factorial design with two factors is Texapon® N70 and PEG 6000 on two levels: high level and low level. Statistical analysis using ANOVA test with a 95 % confidence interval. The analysis was performed using R-2.14.1 software.
The results showed that Texapon® N70 and PEG 6000 gave the significant effect toward the cream viscosity, where as the interaction of Texapon® N70 and PEG 6000 gave no effect toward the cream viscosity. The greatest effect of the value indicated by Texapon® N70. Texapon® N70, PEG 6000, and their interaction gave the significant effect toward the cream droplet size. The greatest effect of the value indicated by PEG 6000. In conclusion, Texapon® N70 was a dominant factor in influencing the physical properties (viscosity) of ethyl acetate extract tomato cream. The optimum area of composition of Texapon® N70 and PEG 6000 could be obtained but it was not valid.
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Di era modern ini dunia kosmetika semakin berkembang ditandai dengan penggunaan bahan-bahan sintetik baik sebagai zat aktif maupun eksipien. Namun penggunaannya telah banyak menimbulkan efek yang merugikan. Oeh karena itu dibutuhkan produk farmasetika yang berkhasiat dan aman digunakan. Konsep
back to nature kini mulai dikembangkan dalam berbagai bidang, termasuk dalam bidang pengobatan dan kosmetika. Penggunaan bahan alam lebih disukai karena diyakini mempunyai efek samping yang lebih kecil dibandingkan pengobatan modern yang menggunakan bahan sintetik (Anonim, 2003).
Banyak penyakit yang dnjisebabkan oleh adanya radikal bebas, biasa disebut Reactive Oxygen Species (ROS) yang dapat menginduksi penyakit kanker, ateroklerosis, dan penuaan yang disebabkan oleh oksidasi yang menyebabkan kerusakan jaringan. Radikal bebas adalah oksigen yang susunan atomnya tidak sempurna sehingga zat ini merupakan zat berbahaya yang sangat reaktif dan bersifat merusak jaringan serta organ tubuh sehingga dapat menimbulkan banyak penyakit (Sibuea, 2003).
superoksida dismutase, glutation peroksidase, dan konsumsi nutrisi yang bersifat antioksidan seperti vitamin E dan C, selenium, dan jenis karotenoid dapat membantu tubuh melawan kerusakan yang ditimbulkan oleh radikal bebas tersebut (Pangkahila, 2007).
Antioksidan merupakan zat yang dalam kadar rendah mampu menghambat laju oksidasi molekul target, yaitu menghambat radikal bebas. Antioksidan secara normal terdapat di dalam tubuh dan dapat mengatasi efek radikal bebas, tetapi jika jumlah antioksidan tidak mencukupi maka akan menyebabkan pembentukan radikal bebas yang berakibat kerusakan sel (Sibuea, 2003).
Tomat merupakan salah satu jenis buah yang sering dikonsumsi oleh masyarakat dalam berbagai bentuk sajian. Tomat diketahui sebagai sumber utama
melawan radikal bebas yang diakibatkan adanya ROS. Zat aktif dalam krim yaitu eksrtrak etil asetat tomat yang mengandung likopen, merupakan senyawa larut minyak dan berukuran kecil sehingga dapat diaplikasikan untuk sediaan topikal (Narendran dkk., 2013).
Surfaktan merupakan suatu molekul yang sekaligus memiliki gugus hidrofilik dan gugus lipofilik sehingga dapat mempersatukan campuran yang terdiri dari air dan minyak (Jatmika, 1998). Penggunaan surfaktan terbagi atas tiga golongan, yaitu sebagai bahan pembasah (wetting agent), bahan pengemulsi (emulsifying agent), dan bahan pelarut (solubilizing agent) (Genaro, 1990). Surfaktan yang digunakan adalah Texapon® N70 karena merupakan suatu surfaktan yang memiliki karakteristik sebagai agen emulsifikasi yang baik dan memiliki stabilitas yang baik dalam penyimpanan (Anonim, 2000).
Basis yang digunakan adalah Polietilen Glikol (PEG) 6000. PEG 6000 memiliki karakteristik berupa lilin putih, padat dan kekerasannya bertambah dengan bertambahnya berat molekul. Digunakan PEG 6000 karena polimer ini mudah larut dalam berbagai pelarut (Rowe dkk., 2009). Penambahan PEG 6000 pada krim dapat meningkatkan viskositas tanpa memberikan efek berminyak seperti pada penambahan asam stearat, serta dapat berperan sebagai emulsion stabilizer yang dapat meningkatkan kestabilan sediaan krim (Różańska dkk, 2012).
1. Permasalahan
Berdasarkan latar belakang di atas, maka permasalahan yang diteliti yaitu: a. Adakah faktor dominan yang mempengaruhi sifat fisis dan stabilitas krim
ekstrak etil asetat tomat di antara Texapon® N70 dan PEG 6000?
b. Apakah dapat ditemukan area komposisi optimum Texapon® N70 dengan PEG 6000 pada superimposed contour plot yang diprediksikan sebagai formula optimum krim ekstrak etil asetat tomat?
2. Keaslian Penelitian
Pernah dilakukan penelitian serupa oleh Muhammad Haqqi Budiman, mahasiswa FMIPA Universitas Indonesia pada tahun 2008. Skripsi tersebut berisikan mengenai formulasi sediaan krim ekstrak tomat namun dengan penggunaan basis dan surfaktan yang berbeda.
3. Manfaat
a. Manfaat teoretis
Secara teoritis, penelitian ini menambah informasi bagi dunia ilmu pengetahuan, khususnya dalam bidang kefarmasian mengenai formulasi sediaan krim ekstrak etil asetat tomat.
b. Manfaat praktis
Penelitian ini akan menghasilkan sebuah sediaan krim ekstrak etil asetat tomat yang memiliki sifat fisis dan stabilitas yang baik dengan komposisi Texapon® N70 dan PEG 6000 yang optimal.
B. Tujuan 1. Tujuan Umum
Membuat sediaan krim ekstrak etil asetat tomat yang memiliki sifat fisis dan stabilitas yang baik.
2. Tujuan Khusus
a. Mengetahui adanya faktor yang dominan dalam menentukan sifat fisis dan stabilitas krim ekstrak etil asetat tomat diantara Texapon® N70 dan PEG 6000.
6
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Kulit
Kulit adalah organ yang berfungsi menutupi seluruh permukaan tubuh. Kulit memiliki kekakuan dan ketebalan yang bervariasi disetiap bagian. Pada kulit wajah terdiri dari sel-sel yang sangat tipis, sehingga hal ini memungkinkan terjadinya penetrasi sediaan kosmetika ke dalam kulit. Dalam menjaga kulit agar tetap berada dalam kondisi yang baik diperlukan sediaan kosmetika seperti
cleansing, freasing, atau toning, dan moisturizing (Young, 1972).
Kulit terdiri dari tiga lapisan, yaitu epidermis (kulit ari), dermis (kulit jangat atau korium), dan jaringan subkutan (Brannon, 2007).
1. Lapisan Epidermis
Epidermis merupakan lapisan kulit terluar dan mempunyai 5 lapisan, yaitu: lapisan tanduk (stratum corneum), stratum lucidum, stratum spinosum,
stratum spinosum, stratum germinativum atau stratum basale (Brannon, 2007). Lapisan epidermis terutama terdiri dari keratinosit yang merupakan fungsi dasar untuk menghsilkan filamen protein, keratin, yang berguna sebagai barier pelindung yang dikombinasikan dengan beberapa komponen lemak (Junquera dan Kelley, 1997).
2. Lapisan Dermis
Dermis mempunyai ketebalan yang bervariasi tergantung lokasi kulit. Dermis mempunyai 2 lapisan, yaitu: papilary layer yang berisi susunan tipis dari serat kolagen dan reticular layer yang tersusun dari serat kolagen tebal dan tersusun sejajar dengan permukaan kulit (Brannon, 2007).
Dermis mengandung banyak pembuluh darah yang meiliki peran penting dalam pengaturan suhu tubuh dan tekanan darah. Jaringan kapiler yang luas dalam stratum papilar berfungsi untuk mengatur suhu tubuh dan memberi makan epidermis di atasnya yang tidak memiliki pembuluh darah sendiri (Junquera dan Kelley, 1997).
3. Jaringan subkutan
B. Antioksidan dan Radikal Bebas
Antioksidan merupakan senyawa yang dapat menetralkan radikal bebas, seperti: enzim Superoksida Dismutase (SOD), glutation, dan katalase. Antioksidan dapat diperoleh dari asupan makanan yang banyak mengandung vitamin C, vitamin E, betakaroten, dan senyawa fenolik. Bahan pangan yang dapat menjadi sumber antioksidan alami, seperti rempah-rempah, coklat, biji-bijian, buah-buahan, sayur-sayuran seperti buah tomat, pepaya, jeruk dan sebagainya (Prakash, 2001).
Radikal bebas adalah atom atau molekul yang tidak stabil dan sangat reaktif karena mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada orbital terluarnya. Untuk mencapai kestabilan atom atau molekul, radikal bebas akan bereaksi dengan molekul disekitarnya untuk memperoleh pasangan elektron. Reaksi ini akan berlangsung terus menerus dalam tubuh dan bila tidak dihentikan akan menimbulkan berbagai penyakit seperti kanker, jantung, katarak, penuaan dini, serta penyakit degeneratif lainnya (Prakash, 2001).
Berkaitan dengan fungsinya, senyawa antioksidan di klasifikasikan dalam lima tipe antioksidan, yaitu:
2. Oxygen scavengers , yaitu senyawa-senyawa yang berperan sebagai pengikat oksigen sehingga tidak mendukung reaksi oksidasi. Dalam hal ini, senyawa tersebut akan mengadakan reaksi dengan oksigen yang berada dalam sistem sehingga jumlah oksigen akan berkurang. Contoh dari senyawa-senyawa kelompok ini adalah vitamin C (asam askorbat), askorbilpalminat, asam eritorbat, dan sulfit.
3. Secondary antioxidants, yaitu senyawa-senyawa yang mempunyai kemampuan untuk berdekomposisi hidroperoksida menjadi prodak akhir yang stabil. Tipe antioksidan ini pada umumnya digunakan untuk menstabilkan poliolefin resin. Contohnya, asam tiodipropionat dan dilauriltiopropionat. 4. Antioxidative enzime, yaitu enzim yang berperan mencegah terbantuknya
radikal bebas. Contohnya glukose oksidase, superoksidase dismutase(SOD), glutation peroksidase, dan kalalase.
C. Tomat
1. Klasifikasi umum
Dunia : Plantae
Divisi : Spermatophyta Anak divisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledonae Ordo : Solanales Famili : Solanaceae Genus : Lycopersicon
Spesies : Lycopersicon lycopersicum (L.) Karsten
(Cheppy, 2001). 2. Nama Umum dan Daerah
Nama umum atau nama dagang Lycopersicon lycopersicum (L.) Karsten adalah tomat yang dapat digolongkan sebagai buah-buahan atau sayur-sayuran. Tomat memiliki nama yang beragam, yaitu Sumatera: terong kaluwat, reteng, cung asam; Jawa: kemir, leunca komir (Sunda), ranti bali, ranti gendel, ranti kenong, rante raja, terong sabrang, dan tomat; Sulawesi: kamantes, samatet, samante temantes, komantes, antes, tomato, tamati, dan tomate. Selain di Indonesia, tomat juga memiliki nama lain di luar negeri, yaitu China: fan gie, xi hon shi; Belanda: tomaat; Jerman: tomate; Perancis:
simplisianya adalah Lycopersici esculenti fructus (buah tomat) (Anonim, 1995).
3. Morfologi
Tomat mempunyai akar tunggang yang tumbuh menembus kedua tanah dan akar serabut yang tumbuh menyebar kearah samping. Batang berbentuk persegi empat hingga bulat, berbatang lunak tetapi cukup kuat, berbulu, berwama hijau. Daun berbentuk oval, bagian tepi bergerigi, berwama hijau, dan merupakan daun majemuk ganjil yang berjumlah sekitar 3-6 cm. Bunga tomat berukuran kecil, diameternya sekitar 2 cm, dan berwama kuning cerah. Bentuk buah tomat bervariasi tergantung varietasnya, ada yang berbentuk bulat, agak bulat, agak lonjong dan bulat telur (oval). Ukuran buahnya juga bervariasi antara 8 – 180 gram (Cahyono, 1998).
4. Ekologi dan Penyebarannya
merupakan kota di Indonesia yang dikenal sebagai pusat penghasil tomat (Anonim, 1995).
5. Kandungan Kimia
Kandungan senyawa dalam buah tomat di antaranya solanin (0,007 %), saponin, asam folat, asam malat, asam sitrat, bioflavonoid (termasuk likopen, α dan ß-karoten), protein, lemak, vitamin, mineral dan histamin
(Canene-Adam dkk., 2004). Likopen merupakan salah satu kandungan kimia paling banyak dalam tomat, dalam 100 gram tomat rata-rata mengandung likopen sebanyak 3-5 mg (Giovannucci, 1999).
Lycopene atau yang sering disebut sebagai α-carotene adalah suatu karotenoid pigmen merah terang, suatu fitokimia yang banyak ditemukan dalam buah tomat dan buah-buahan lain yang berwarna merah. Karotenoid ini telah dipelajari secara ekstensif dan ternyata merupakan sebuah antioksidan yang sangat kuat dan memiliki kemampuan anti-kanker (Mascio dkk.,1989).
Likopen merupakan pigmen alami yang disintesis oleh tanaman dan mikroorganisme, merupakan senyawa karotenoid, bentuk isomer asiklik dari β-karoten dan tidak memiliki aktivitas sebagai vitamin A (Agarwal dan Rao,
Sifat kimia likopen lainnya adalah bentuk kristalnya yang seperti jarum, panjang, dalam bentuk tepung berwarna kecoklatan. Likopen bersifat hidrofobik kuat dan lebih mudah larut dalam kloroform, benzena, heksana, dan pelarut organik lainnya. Degradasi likopen dapat melalui proses isomerisasi dan oksidasi karena cahaya, oksigen, suhu tinggi, teknik pengeringan, proses pengelupasan, penyimpanan dan asam (Agarwal dan Rao, 2000).
Secara struktural, likopen terbentuk dari delapan unit isoprena. Banyaknya ikatan ganda pada likopen menyebabkan elektron untuk menuju ke transisi yang lebih tinggi membutuhkan banyak energi sehingga likopen dapat menyerap sinar yang memiliki panjang gelombang tinggi (sinar tampak) dan mengakibatkan warnanya menjadi merah terang. Jika likopen dioksidasi, ikatan ganda antarkarbon akan patah membentuk molekul yang lebih kecil yang ujungnya berupa –C=O. Meskipun ikatan –C=O merupakan ikatan yang bersifat kromophorik (menyerap cahaya), tetapi molekul ini tidak mampu menyerap cahaya dengan panjang gelombang yang tinggi sehingga likopen yang teroksidasi akan menghasilkan zat yang berwarna pucat atau tidak berwarna. Elektron dalam ikatan rangkap akan menyerap energi dalam jumlah besar untuk menjadi ikatan jenuh, sehingga energi dari radikal bebas yang merupakan sumber penyakit dan penuaan dini dapat dinetralisir oleh likopen (Mascio dkk.,1989).
karoten dan sepuluh kali lebih baik daripada alfa-tokoferol (Sunarmani dan Tanti, 2008). Serta 100 kali lebih efisien daripada vitamin E atau 12500 kali dari pada glutation. Singlet oxygen merupakan prooksidan yang terbentuk akibat radiasi sinar ultra violet dan dapat menyebabkan penuaan dan kerusakan kulit. Selain sebagai anti skin aging, likopen juga memiliki manfaat untuk mencegah penyakit kardiovaskular, kencing manis, osteoporosis,
infertility, dan kanker (kanker kolon, payudara, endometrial, paru-paru, pankreas, dan terutama kanker prostat). Ini semua diakibatkan banyaknya ikatan rangkap dalam molekulnya (Mascio dkk.,1989).
Tomat yang diproses menjadi jus, saus, dan pasta memiliki kandungan likopen yang tinggi dibandingkan bentuk segar. Sebagai contoh, jumlah likopen dalam jus tomat bisa mencapai lima kali lebih banyak daripada tomat segar. Tomat yang dimasak atau dihancurkan dapat mengeluarkan likopen lebih banyak, sehingga mudah diserap tubuh (Sunarmani dan Tanti, 2008).
Likopen secara alami dalam tumbuhan berada dalam bentuk konfigurasi trans yang secara termodinamik adalah bentuk yang stabil (Zechmeister dkk., 1949; Nguyen dan Schwartz, 1999). Dengan pengaruh cahaya dan pemanasan bentuk all-trans dapat berubah menjadi isomer mono atau poli cis (Sudardjat dan Gunawan, 2003). Secara umum isomer cis bersifat lebih polar, mempunyai kecenderungan yang lebih rendah untuk menjadi kristal, lebih larut dalam minyak dan pelarut hidrokarbon, lebih mudah bergabung dengan lipoprotein maupun struktur lipid subseluler, sehingga lebih mudah masuk ke dalam sel dan bersifat kurang stabil dibanding isomer trans (Clinton dkk., 1996). Sehingga dapat disimpulkan bahwa tomat yang mengalami pengolahan dan pemanasan terlebih dahulu sebelum dikonsumsi akan meningkatkan bioavailabilitas likopen dalam tubuh (Sunarmani dan Tanti, 2008).
6. Manfaat dan Kegunaan
Tomat dapat bermanfaat sebagai obat diare, serangan empedu, gangguan pencernaan, dan memulihkan fungsi liver (Fuhramn dkk.,1997). Beberapa studi menemukan bahwa likopen memiliki aktivitas antioksidan yang poten. Levy, et al. (1995) menyebutkan bahwa likopen mampu menghambat pertumbuhan kanker endometrial, kanker payudara dan kanker paru-paru pada kultur sel dengan aktivitas yang lebih tinggi dibandingkan dengan α dan β-karoten. Dengan penghambatan senyawa radikal bebas
D. Ekstraksi
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan zat yang dapat larut dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair. Proses penyarian dipisahkan menjadi: pembuatan serbuk, pembasahan, penyarian, dan pemekatan. Secara umum, penyarian dilakukan secara infundasi, maserasi, perkolasi, dan destilasi uap (Depkes RI, 1986).
Maserasi merupakan cara ekstraksi zat aktif menggunakan cairan pengekstraksi dengan penggojogan atau pengadukan pada suhu ruangan dan mengalami pengadukan secara konstan. Maserasi merupakn metode yang paling banyak digunakan dalam metode ekstraksi. Metode ini mempunyai keuntungan yaitu sampel yang dibutuhkan tidak terlalu banyak dan dapat dilakukan dengan cara yang sama seperti teknik dan produksi batch (List dan Schmidt, 1989).
E. Krim
Formula tradisional untuk vanishing cream didasarkan pada jumlah asam stearat yang besar sebagai fase minyak yang dapat melunak pada suhu tubuh dan mengkristal pada bentuk yang sesuai sehingga tidak terlihat dalam penggunaan dan membentuk film yang tidak berminyak. Emulgator yang berperan dalam proses tersebut adalah sabun yang terbentuk dengan adanya penambahan basa yang cukup untuk bereaksi dengan asam stearat (Wilkinson dan Moore, 1982).
F. Bahan Formulasi
1. Surfaktan
Surfaktan merupakan suatu molekul yang sekaligus memiliki gugus hidrofilik dan gugus lipofilik sehingga dapat mempersatukan campuran yang terdiri dari air dan minyak. Molekul surfaktan memiliki bagian polar yang suka akan air (hidrofilik) dan bagian non polar yang suka akan minyak/lemak (lipofilik). Sifat rangkap ini yang menyebabkan surfaktan dapat diadsorbsi pada antar muka udara-air, minyak-air dan zat padat-air, membentuk lapisan tunggal dimana gugus hidrofilik berada pada fase air dan rantai hidrokarbon ke udara, dalam kontak dengan zat padat ataupun terendam dalam fase minyak. Umumnya bagian non polar (lipofilik) adalah merupakan rantai alkil yang panjang, sementara bagian yang polar (hidrofilik) mengandung gugus hidroksil (Jatmika, 1998).
pelarut (solubilizing agent). Penggunaan surfaktan ini bertujuan untuk meningkatkan kestabilan emulsi dengan cara menurunkan tegangan antarmuka, antara fasa minyak dan fasa air. Surfaktan dipergunakan baik berbentuk emulsi minyak dalam air maupun berbentuk emulsi air dalam minyak (Genaro, 1990).
Gambar 2. Sodium lauril eter sulfat (Anonim, 2000)
Texapon® N70 atau Sodium Lauryl Ether Sulphate (SLES) merupakan suatu surfaktan yang memiliki sifat seperti detergen. Karakteristik Texapon® N70 antara lain: agen emulsifikasi, dispersi, pembasah, dan pembusa yang baik; merupakan solvensi dan bahan pengental yang baik; kompatibilitas baik; serta tingkat iritasi pada mata dan kulit yang rendah (Anonim, 2000). Sodium lauril sulfat atau sodium lauril eter sulfat merupakan surfaktan anionik pada penggunaan konsentrasi 0,5-2,5% (Rowe dkk., 2006).
2. Basis
Basis salep yang digunakan dalam sediaan krim dibagi dalam 4 kelompok: 1. Basis hidrokarbon
2. Basis serap
Basis ini dapat berupa bahan anhidrat atau basis hidrat yang memiliki sifat hidrofil kemampuan menyerap kelebihan air (Allen, 2002).
3. Basis yang dapat dicuci dengan air
Basis ini merupakan emulsi minyak dalam air yang dapat dicuci menggunakan air. Yang termasuk basis jenis ini adalah salep hidrofobik (Allen, 2002).
4. Basis larut dalam air
Basis jenis ini hanya mengandung komponen yang larut dalam air dan tidak mengandung bahan berlemak, serta dapat dicuci dengan air. Basis jenis ini lebih baik digunakan untuk dicampurkan dengan bahan padat atau tidak berair, karena sangat mudah melunak dengan penambahan air (Allen, 2002).
Gambar 3. Polietilen glikol (Rowe dkk., 2006)
macam berat molekul mulai dari 200 sampai 8000. Pemberian nomor menunjukkan berat molekul rata-rata dari masing-masing polimernya. PEG yang memiliki berat molekul rata-rata kurang dari 1000 berupa cairan bening tidak berwarna, sedangkan yang mempunyai berat molekul rata-rata lebih dari 1000 berupa lilin putih, padat dan kekerasannya bertambah dengan bertambahnya berat molekul. Dalam industri farmasi PEG digunakan untuk melarutkan obat-obat yang tidak larut air. Penggunaan PEG sebagai basis sekaligus pelarut bahan yang tidak larut air juga dapat meningkatkan penyebaran obat di dalam tubuh manusia (Mitchell, 1972).
PEG 6000 atau Makrogol 6000 merupakan campuran produk polikondensasi dari etilenoksida dan air. PEG 6000 berupa serbuk putih licin atau potongan putih kuning gading, praktis tidak berbau, dan tidak berasa. Mudah larut dalam air, etanol 95% P, dan kloroform P, praktis tidak larut dalam eter P (Dirjen POM, 1979).
3. Asam Stearat
Gambar 4. Asam stearat (Rowe dkk., 2009)
starat praktis tidak larut dalam air. Asam stearat dalam bentuk serbuk mungkin mengiritasi, namun mudah dihilangkan dengan cara netralisasi menggnakan suatu basa. Asam stearat dapat mengentalkan lotion (Boylan dkk., 1986). Titik leleh asam stearat 69-70°C dan konsentrasi yang umumnya digunakan dalam sediaan krim sebesar 1-20% (Rowe dkk., 2009).
4. Trietanolamin (TEA)
Gambar 5. Trietanolamin (Rowe dkk.,2009)
Trietanolamin (TEA) merupakan turunan dari ammonia yag berupa cairan kental, tidak berwarna, atau kuning pucat. Trietanolamin bersifat larut air, alkohol, dan kloroform (Boylan dkk., 1986). Trietanolamin memiliki titik leleh 20-21°C dan pH 10,5 (Rowe dkk., 2009).
besar minyak, lemak, dan lilin sebagai fase eksternal. Trietanolamin tidak bersifat toksik saat terabsorpsi di kulit (Boylan dkk., 1986).
5. Propilen Glikol
Gambar 6. Propilen glikol (Rowe dkk., 2009)
6. Metil Paraben
Gambar 7. Metil Paraben (Rowe dkk., 2009)
Metil paraben secara luas digunakan sebagai antimikroba pada kosmetik, produk makanan, dan sediaan farmasi. Paraben efektif pada range pH yang luas dan memiliki aktivitas antimikroba spektrum luas, meskipun paraben paling efektif menghambat yeast dan fungi. Aktivitas antimikroba meningkat seiring dengan peningkatan rantai gugus alkil, tetapi kelarutannya dalam air menjadi menurun. Oleh karena itu, penggunaan campuran paraben sering digunakan untuk menghasilkan efek antimikroba yang lebih efektif. Konsentrasi penggunaan metil paraben sebagai antimikroba pada sediaan topikal adalah 0,02-0,3%. Metil paraben bersifat nonmutagenik, nonteratogenik, dan nonkarsinogenik (Rowe dkk.,2009).
7. Aquadest
harus bebas dari kotoran atau mikroba. Air murni dapat digunakan untuk sediaan-sediaan yang membutuhkan air sebagai pelarut, kecuali pada sediaan parenteral (Lachman, 1994).
G. Pencampuran
Pencampuran merupakan suatu proses yang bertujuan untuk menangani dua atau lebih komponen yang belum bercampur atau sebagian bercampur sehingga setiap unit (partikel, molekul, dan lain-lain) dari komponen dapat saling berinteraksi (Aulton, 2007). Faktor-faktor yang mempengaruhi pencampuran yaitu suhu, kecepatan geser, tegangan geser, tekanan, dan waktu pencampuran (Nielloud dan Mestres, 2000).
Ketika proses pengadukan berlangsung, kedua fase cairan akan membentuk droplet. Droplet-droplet ini bisa terbentuk dan terjadinya fase kontinyu diakibatkan karena droplet-droplet tersebut tidak stabil (Lieberman dkk., 1996). Energi bebas permukaan dari sistem emulsi yang tergantung pada total luas permukaan dan tegangan permukaan meningkat seiring
Secara elektrostatis dan hambatan sterik, viskositas emulsi akan lebih tinggi ketika droplet semakin kecil. Viskositas juga akan lebih tinggi bila ukuran droplet relatif homogen, yaitu ketika distribusi ukuran droplet sempit. Sifat alami
emulsifying agent dapat mempengaruhi tidak hanya stabilitas emulsi, tetapi juga distribusi ukuran droplet, rata-rata ukuran droplet, dan selanjutnya viskositas (Schramm, 2005).
Gambar 8. Kurva hubungan diameter droplet dan viskositas (Schramm, 2005)
H. Sifat Fisis Krim
1. Ukuran Partikel
ukuran partikel dengan viskositas yang akan meningkatkan stabilitas. Semakin tinggi viskositas maka semakin kecil ukuran partikel (Harmita, 2006).
2. Viskositas
Viskositas adalah suatu pernyataan pertahanan dari suatu cairan untuk mengalir, semakin tinggi viskositas akan semakin besar tahanannya (Martin dkk., 1993). Peningkatan viskositas akan meningkatkan waktu retensi pada tempat aplikasi, tetapi menurunkan daya sebar (Gupta dkk., 2002).
Penggolongan bahan menurut tipe aliran dan deformasinya dibagi menjadi dua yaitu, sistem Newton dan sistem non-Newton. Tipe alir plastis, pseudoplastis, dan dilatan termasuk dalam sistem non-Newton (Martin dkk., 1993).
mengurangi tahanan internal dari bahan tersebut dan mengakibatkan laju geser yang lebih besar pada setiap tegangan geser berikutnya. Selain itu, sebagian dari pelarut yang berikatan dengan molekul kemungkinan dilepaskan, sehingga menyebabkan penurunan efektif baik konsentrasi maupun ukuran molekul yang terdispersi. Hal ini juga akan mengakibatkan penurunan viskositas yang nyata (Sinko, 2006).
I. Stabilitas
Dalam formulasi sediaan farmasi harus memenuhi kriteria umum yaitu stabil, baik secara kimia maupun fisika, serta efektif dan aman dipakai. Stabilitas obat merupakan suatu keadaan di mana obat dalam kemasan tertentu yang disimpan dengan cara dan suhu yang sesuai mempunyai kadar yang konstan, yaitu jika pada penentuan kadar dengan metode analisis yang spesifik menghasilkan kadar minimal 90% dari kadar yang ditetapkan dalam label/etiket. Selain itu sediaan harus berbentuk seperti semula, yaitu tidak ada perubahan bentuk, rasa, dan perubahan lain yang dapat ditentukan secara fisika atau kimia (Tjiang, 1978).
Uji stabilitas penting untuk mengetahui apakah sebuah emulsi tetap stabil selama periode waktu tertentu, uji yang biasa dilakukan antara lain :
a. Uji mikroskopik. Stabilitas fisik emulsi dapat dikrthui dengan uji derajat
b. Analisis ukuran droplet. Jika rata-rata ukuran droplet meningkat seiring bertambahnya waktu (bersamaan dengan penurunan jumlah droplet), dapat disumsikan bahwa penyebabnya adalah koalesen.
c. Perubahan viskositas. Ditunjukkan bahwa banyak faktor yang mempengaruhi viskositas emulsi. Adanya variasi pada ukuran atau jumlah droplet dapat dideteksi dengan perubahan viskositas secara nyata (Aulton, 2002).
J. Metode HET-CAM
Hen’s Egg Test-Chorioallantoic Menbrane (HET-CAM) bertujuan untuk mendapatkan informasi efek yang terjadi pada konjungtiva oleh karena pemaparan zat uji. Embrio ayam telah lama digunakan sebagai model toksisitas embrio bagi para virologist. Metode ini menggunakan telur fertile yang diinkubasikan pada inkubator pada suhu 36-37°C. Pengaturan lembab pada inkubator dilakukan dengan pemberian air pada rak inkubator. Periode inkubasi untuk telur fertile yang akan digunakan untuk HET-CAM adalah 8-12 hari (D’Arcy dan Howard, 1996).
Chorioallantonic membrane dari embrio telur secara luas digunakan dalam penelitian angiogenesis secara in vivo yang disebut sebagai CAM assay. Metode ini lebih mudah dan murah jika dibandingkan dengan metode in vivo lainnya. Juga dapat diamati adanya hemorage, lisis, dan koagulasi yang diakibatkan adanya pengaruh dari bahan yang disuntikkan (Klarwasser dkk., 2001).
Gambar 9. Chorioallantoic membrane (Klarwasser dkk., 2001)
Irritation Score (IS) pada HET-CAM:
1. 0 – 0,9 (Kategori iritasi: tidak mengiritasi atau praktis tidak mengiritasi) 2. 1 – 4,9 (Kategori iritasi: iritasi lemah)
3. 5 – 8,9 atau 5 – 8,9 (Kategori iritasi: iritasi sedang) 4. 9 – 21 atau 10 – 21 (Kategori iritasi: iritasi kuat)
K. Desain Faktorial
Desain faktorial merupakan aplikasi persamaan regresi yaitu teknik untuk memberikan model hubungan antara variabel-respon dengan satu atau lebih variabel bebas. Model yang diperoleh dari analisa tersebut berupa persamaan matematika (Bolton, 1997). Desain faktorial digunakan untuk mengevaluasi efek dari faktor yang dipelajari secara simultan dan efek yang relatif penting dapat dinilai (Armstrong dan James, 1996). Dengan desain faktorial, dapat didesain suatu percobaan untuk mengetahui faktor yang dominan berpengaruh secara signifikan terhadap respon. Juga memungkinkan kita mengetahui interaksi antara faktor-faktor tersebut (Bolton, 1997; Voigt, 1994).
Pada desain faktorial dua faktor dan dua level diperlukan empat formulasi (2n = 4, dengan 2 menunjukkan level dan n menunjukkan jumlah faktor). Rancangan penelitian desain faktorial dengan dua faktor dan dua level seperti tabel II.
Tabel II. Rancangan percobaan desain faktorial dua faktor dan dua level Formula Faktor A Faktor B Interaksi
1 - - +
a + - -
b - + -
ab + + +
Formula 1 = faktor A pada level rendah, faktor B pada level rendah Formula a = faktor A pada level tinggi, faktor B pada level rendah Formula b = faktor A pada level rendah, faktor B pada level rendah Formula ab = faktor A pada level tinggi, faktor B pada level rendah Rumus yang berlaku:
Y = b0 + b1 (XA) + b2 (XB) + b12 (XA) (X B) Dengan:
Y = respon hasil atau sifat yang diamati (XA) (X B) = level faktor A dan faktor B
b0, b1, b2, b12 = koefisien, dapat dihitung dari hasil percobaan
Besarnya efek dapat dicari dengan menghitung selisih antara rata-rata respon pada level tinggi dan rata-rata respon pada level rendah (Bolton, 1997).
Keuntungan desain faktorial adalah bahwa metode ini memungkinkan untuk mengidentifikasi efek masing-masing faktor dan efek interaksi antar faktor. Metode ini ekonomis, dapat mengurangi jumlah penelitian jika dibandingkan dengan meneliti dua efek faktor secara terpisah (Muth, 1999).
L. Landasan Teori
Kulit adalah organ yang berfungsi menutupi seluruh permukaan tubuh. Dalam menjaga kulit agar tetap berada dalam kondisi yang baik diperlukan sediaan kosmetika seperti cleansing, freasing, atau toning, dan moisturizing
digunakan zat antioksidan. Salah satu zat antioksidan yang alami yaitu likopen yang terdapat dalam tomat. Beberapa studi in vitro menemukan bahwa likopen memiliki aktivitas antioksidan yang poten (Fuhramn dkk., 1997).
Krim adalah bentuk sediaan setengah padat yang mengandung satu atau lebih bahan obat terlarut atau terdispersi dalam bahan dasar yang sesuai (Dirjen POM, 1995). Sifat fisis yang diperiksa dalam sediaan krim misalnya viskositas dan ukuran droplet. Viskositas adalah suatu pernyataan pertahanan dari suatu cairan untuk mengalir, semakin tinggi viskositas akan semakin besar tahanannya (Martin dkk., 1993). Ukuran droplet rata-rata atau distribusi ukuran globul merupakan tolok ukur penting untuk mengevaluasi sediaan emulsi. Diameter globul berkisar antara 0,5-50 μm. Terdapat hubungan antara ukuran partikel
dengan viskositas yang akan meningkatkan stabilitas. Semakin tinggi viskositas maka semakin kecil ukuran partikel (Harmita, 2006).
Untuk mengetahui faktor yang dominan berpengaruh secara signifikan terhadap respon, juga untuk mengetahui interaksi antara faktor-faktor tersebut dapat digunakan desain faktorial (Bolton, 1997; Voigt, 1994).
Hen’s Egg Test-Chorioallantoic Menbrane (HET-CAM) bertujuan untuk mendapatkan informasi efek yang terjadi pada konjungtiva oleh karena pemaparan zat uji. Embrio ayam telah lama digunakan sebagai model toksisitas embrio bagi para virologist. Periode inkubasi untuk telur fertile yang akan digunakan untuk HET-CAM adalah 8-12 hari (D’Arcy dan Howard, 1966). Metode ini dapat digunakan untuk mengamati adanya hemorage, lisis, dan koagulasi yang diakibatkan adanya pengaruh dari bahan yang disuntikkan (Klarwasser dkk., 2001).
M.Hipotesis
Terdapat faktor yang dominan di antara Texapon® N70 dan PEG 6000 dalam menentukan sifat fisis dan stabilitas krim ekstrak etil asetat tomat, serta dapat ditentukan area komposisi optimum Texapon® N70 dengan PEG 6000 pada
34
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk dalam penelitian eksperimental menggunakan metode desain faktorial.
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional
1. Variabel Penelitian a. Variabel bebas
Komposisi Texapon® N70 sebagai surfaktan dengan level rendah sebesar 1 gram dan level tinggi 2,5 gram, serta komposisi PEG 6000 sebagai basis krim dengan level rendah sebesar 2 gram dan level tinggi 6 gram.
b. Variabel tergantung
Sifat fisis krim ekstrak etil asetat tomat meliputi organoleptis, tipe krim, daya sebar, viskositas krim, ukruan droplet, serta stabilitas krim meliputi pergeseran viskositas dan pergeseran ukuran droplet.
c. Variabel pengacau terkendali
d. Variabel pengacau tak terkendali
Perubahan suhu dan kelembaban ruangan tempat pembuatan dan penyimpanan krim.
2. Definisi Operasional
a. Ekstrak etil asetat tomat adalah konsentrat berupa cairan yang berasal dari buah tomat dan mengandung likopen dan ß-karotendalam buah tomat yang larut pada pelarut etil asetat dengan prosedur sesuai dengan yang tertulis pada penelitian ini.
b. Krim adalah krim yang mengandung ekstrak etil asetat tomat dengan komposisi seperti pada penelitian ini.
c. Surfaktan adalah Texapon® N70, yaitu surfaktan anionik yang bekerja dengan cara menurunkan tegangan antarmuka.
d. Basis adalah PEG 6000, merupakan jenis basis larut air.
e. Sifat fisis krim adalah parameter yang digunakan untk mengetahui kualitas fisik sediaan krim yang meliputi ukuran droplet dan viskositas. f. Stabilitas krim adalah parameter yang digunakan untuk mengetahui ada
tidaknya perubahan krim dalam penyimpanan yang meliputi pergeseran viskositas dan pergeseran ukuran droplet ukuran droplet.
h. Pergeseran viskositas adalah persentase dari selisih viskositas krim 48 jam setelah dibuat dengan viskositas krim setelah penyimpanan selama 28 hari.
i. Ukuran droplet adalah besarnya ukuran droplet dalam sediaan krim yang dilihat dengan menggunakan mikrokop. Ukuran droplet yang diharapkan yaitu kurang dari 40 μm.
j. Pergeseran ukuran droplet adalah persentase penambahan atau perubahan ukuran droplet dalam sediaan krim selama penyimpanan 28 hari.
k. Faktor adalah besaran yang mempengaruhi respon, dalam penelitian ini yaitu emulsifying agent (Texapon® N70) dan basis(PEG 6000).
l. Level adalah tingkatan jumlah atau besarnya faktor dalam suatu penelitian, dalam penelitian ini terdapat dua level, yaitu level rendah dan level tinggi. m. Respon adalah hasil percobaan yang akan diamati perubahannya secara
kuantitatif. Respon dalan penelitian ini yaitu viskositas dan ukuran droplet. n. Efek adalah perubahan respon yang disebabkan variasi level dan faktor. o. Desain faktorial adalah metode rasional untuk menyimpulkan efek dari
besaran yang berpengaruh terhadap kualitas produk secara obyektif.
p. Contour plot adalah garis-garis respon dari sifat fisis (viskositas pada
100-125 d.Pa.s dan ukuran droplet kurang dari 40 μm) yang dibuat melalui persamaan desain faktorial.
q. Superimposed contour plot adalah penggabungan garis-garis pada daerah
r. Metode HET-CAM dapat digunakan untuk melihat adanya hemorage, lisis, dan koagulasi yang diakibatkan adanya pengaruh dari bahan yang disuntikkan.
C. Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak etil asetat tomat, asam stearat (kualitas farmasetis), PEG 6000 (kualitas farmasetis), metil paraben (kualitas farmasetis), trietanolamin (kualitas farmasetis), propilenglikol (kualitas farmasetis), Texapon® N70 (kualitas farmasetis), aquadest, dan metylen blue.
D. Alat Penelitian
E. Tata Cara Penelitian
1. Ekstraksi
Satu kilogram buah tomat segar dicuci dengan air mengalir kemudian diblender hingga halus. Buah tomat yang telah diblender kemudian dimasukkan ke dalam 4 buah Erlenmeyer 500 mL masing-masing 250 gram. Dilakukan penambahan 250 mL pelarut etil asetat ke dalam masing-masing
Erlenmeyer. Kemudian tabung Erlenmeyer dilapisi dengan alumunium foil
untuk mencegah terjadinya reaksi oksidasi likopen karena pengaruh cahaya. Setelah itu, dilakukan maserasi dengan cara pendiaman selama 7 hari dan dilakukan penggojogan berkala setiap harinya.
Maserat dikeluarkan dari tabung Erlenmeyer, lalu ekstrak cair dipisahkan dari ampas dengan menggunakan saringan. Ekstrak cair yang diperoleh kemudian dimasukkan ke dalam corong pisah untuk memisahkan antara fase etil asetat dan fase air. Fase etil asetat diambil, kemudian etil asetat yang terkandung dalam ekstrak diuapkan dengan menggunakan vaccum rotary evaporator pada tekanan rendah dan suhu 40-60oC hingga tidak ada pelarut yang menetes lagi dan hingga terbentuk ekstrak kental (Narendran dkk., 2013).
2. Uji Kualitatif Antioksidan
Ekstrak kental tomat diteteskan pada bagian tengah kertas Whattmann. Kemudian diteteskan pula larutan DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) 0,2% pada seluruh bagian dari kertas Whattmann. Ditunggu beberapa saat dan diamati perubahan yang terjadi. Warna ungu pada bagian tengah kertas
Whattmann akan memudar menunjukkan bahwa ekstrak kental tomat memiliki aktivitas antioksidan (Elya dkk., 2013).
3. Formula Sediaan Krim
Formula yang digunakan dalam pembuatan krim ekstrak etil asetat tomat mengacu pada formula dalam Formularium Medicamentorium Selectum
(Ikatan Sarjana Farmasi Indonesia, 1971). Komposisi dari formula dapat dilihat pada tabel III.
Tabel III. Formula acuan (Ikatan Sarjana Farmasi Indonesia, 1971)
Formula Komposisi
Asam stearat 14,2 g Trietanolamin 1 g
Gliserol 10 g
Boraks 0,25 g
Nipagin 0,1 g
Nipasol 0,05 g
Formula modifikasi berdasarkan hasil orientasi untuk formula krim 100 gram dapat dilihat pada tabel IV.
Tabel IV. Formula modifikasi
Formula Komposisi
Asam Stearat 20 gram Trietanolamin 1,35 gram PEG 6000 2 - 6 gram Texapon® N70 1 – 2,5 gram Metil Paraben 0,2 gram Propilen Glikol 5 gram Aquadest 60 mL Ekstrak kering tomat 6 gram
Tabel V. Rancangan formula desain faktorial
4. Pembuatan Krim Ekstrak Etil Asetat Tomat
Asam stearat dilelehkan diatas waterbath pada suhu 70°C. PEG 6000 juga dilelehkan diatas waterbath pada suhu 70°C. Setelah PEG 6000 meleleh lalu dimasukkan Texapon® N70, trietanolamin, propilen glikol, dan metil paraben. Kemudian fase minyak (asam stearat) dan fase air (campuran PEG 6000, Texapon® N70, trietanolamin, propilen glikol, dan metil paraben) dituang ke dalam mortar hangat lalu diaduk dengan menggunakan mixer
5. Orientasi Formula Krim Ekstrak Etil Asetat Tomat
Beberapa macam krim dibuat dengan membuat variasi pada jumlah Texapon® N70 berturut-turut 0,5 gram, 1 gram, 1,5 gram, 2 gram, dan 2,5 gram. Masing-masing krim kemudian dilihat respon viskositas dan ukuran droplet setelah 48 jam. Irisan dari jumlah terkecil dan terbesar Texapon® N70 dari kedua respon yang masih memberikan perubahan yang linear akan menjadi level rendah dan level tinggi pada penelitian ini.
Beberapa macam krim dibuat dengan membuat variasi pada jumlah PEG 6000 berturut-turut 2 gram, 4 gram, 6 gram, 8 gram, dan 10 gram. Masing-masing krim kemudian dilihat respon viskositas dan ukuran droplet setalah 48 jam. Irisan dari jumlah terkecil dan terbesar PEG 6000 dari kedua respon yang masih memberikan perubahan yang linear akan menjadi level rendah dan level tinggi pada penelitian ini.
6. Evaluasi Formula Krim Etil Asetat Tomat a. Pengujian organoleptis
Uji organoleptis dilakukan dengan mengamati bau, warna, dan homogenitas sediaan krim pada 48 jam setelah pembuatan.
b. Pengujian tipe emulsi dengan metode pewarnaan
bertipe M/A atau A/M. Jika menunjukkan warna seragam berarti tipe emulsi M/A, karena air adalah fase luar.
c. Pengujian pH
Sejumlah krim dioleskan pada kertas pH universal dan kemudian ditentukan pH dari sediaan krim tersebut.
d. Pengujian daya sebar
Uji daya sebar dilakukan setelah 48 jam pembuatan sediaan krim. Uji dilakukan dengan cara menimbang krim seberat 1 gram, diletakkan di tengah horizontal plate. Diatas krim diletakkan horizontal plate dan pemberat sehingga total berat horizontal plate dan pemberat menjadi 125,0 gram, didiamkan selama 1 menit, kemudian diukur dan dicatat diameter penyebaran krim.
e. Pengujian viskositas
Uji viskositas dilakukan 5 kali yaitu setelah 48 jam pembuatan krim, pada penyimpanan krim 1 minggu, 2 minggu, 3 minggu, dan 1 bulan. Pengukuran viskositas dilakukan dengan menggunakan alat
Viscotester seri VT 04 (RION-JAPAN) dengan cara memasukkan krim ke dalam wadah dan pasang pada portabel viscotester. Viskositas krim diketahui dengan mengamati gerakan jarum penunjuk viskositas.
f. Pengujian mikromeritik (ukuran droplet)
lensa mikroskop. Cara pengujian mikromeritik yaitu sejumlah krim dioleskan pada gelas objek kemudian diletakkan di meja benda pada mikroskop. Diamati ukuran droplet yang terdispersi pada krim. Untuk menentukan objek digunakan pembesar lemah kemudian diganti pembesar kuat. Diameter droplet diukur sebanyak 500 droplet (Martin dkk., 1993). Pengukuran ini dilakukan dengan metode mean.
g. Uji Iritasi Primer dengan Metode HET CAM
Telur ayam kampung yang digunakan adalah telur yang telah tumbuh menjadi embrio (setelah dierami selama 8-12 hari). Kemudian buka cangkang telur pada bagian yang memiliki rongga udara. Kontrol positif (NaOH 0,1 N) dan kontrol negatif (NaCl 0,9%) diambil menggunakan spuit sebanyak 0,3 mL kemudian disuntikkan pada daerah pada membran yang dekat dengan pembuluh darah, kemudian amati perubahan yang terjdi pada pembuluh darah. Sedangkan untuk formula krim yang akan diuji diambil sebanyak 0,3 gram kemudian diletakkan pada pada daerah pada membrane yang dekat dengan pembuluh darah, kemudian amati perubahan pada pembuluh darah.
Pengamatan reaksi CAM (chorioallantoic membrane) dilakukan selama 300 detik. Waktu timbulnya gejala diamati dan dicatat. Gejala-gejala yang diamati adalah hemoragi (pendarahan), vascular lysis
I S= 301− pembuluh darah hingga pembuluh darah hilang pada CAM. Coagulation time yaitu dimulai dalam detik pembentukan koagulan pada CAM (Rudianto, 2010).
7. Validasi Formula Krim Ekstrak Etil Asetat Tomat
Validasi formula dilakukan dengan cara menentuakan daerah optimum hasil optimasi, kemudian berdasarkan superimposed contour plot maka diambil 1 titik untuk membuat formula validasi yaitu pada Texapon® N70 1,5 gram dan PEG 6000 5,5 gram. Setelah itu dibuat formula dengan komposisi surfaktan dan basis yang telah ditentukan untuk dijadikan sebagai formula validasi. Kemudian formula yang dibuat dilakukan replikasi 3 kali. Krim yang telah terbentuk kemudian dilakukan pengujian viskositas dan ukuran droplet pada 48 jam setelah pembuatan.
F. Analisis Hasil
Persamaan desain faktorial yang didapat digunakan untuk membuat
contour plot viskositas dan ukuran droplet krim ekstrak etil asetat tomat. Dari masing-masing contour plot digabungkan menjadi superimposed contour plot
untuk mengetahui daerah optimum komposisi Texapon® N70 dan PEG 6000, terbatas pada level yang diteliti. Analisis data dilakukan dengan bantuan software
R-2.14.1 dengan berbagai uji statistik yang dilakukan, antara lain: Shapiro-Wilk
untuk mengetahui normalitas distribusi data dan Levene’s Test untuk mengetahui kesamaan varians. Apabila data yang diuji memenuhi persyaratan uji statistik parametrik, maka dilanjutkan dengan uji ANOVA untuk melihat signifikansi dari setiap faktor Texapon® N70, PEG 6000, serta interaksinya dalam mempengaruhi respon. Signifikasi data dapat dilihat dari nilai p-value. Namun, apabila tidak memenuhi persyaratan uji parametrik, maka dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis dengan post hoc Wilcoxon
47
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Pembuatan Ekstrak Etil Asetat Tomat
1. Pengumpulan Bahan dan Determinasi Tanaman
Buah tomat yang digunakan dalam penelitian perlu dipastikan kebenaran spesiesnya dengan melakukan determinasi. Determinasi buah dilakukan dengan membandingkan ciri-ciri morfologi buah dengan kunci determinasi yang mengacu pada pustaka Flora of Java Volume II. Hasil determinasi menunjukkan bahwa buah tersebut merupakan buah dari tanaman
Lycopersicon lycopersicum (L.) Karsten.
