BAHAN SEMINAR
SKRIPSI
OLEH:
FIORRIETA VEGLYANI MASHITHA
NIM 121501014
PENGESAHAN SKRIPSI
ISOLASI SENYAWA FUKOIDAN DARI TALUS RUMPUT
LAUT COKLAT (
Sargassum ilicifolium
(Turner) C. Agard)
SERTA UJI SITOTOKSIK DENGAN METODE
BRINE
SHRIMP LETHALITY TEST
SKRIPSI
OLEH:
FIORRIETA VEGLYANI MASHITHA
NIM 121501014
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
BAHAN SEMINAR
SKRIPSI
OLEH:
FIORRIETA VEGLYANI MASHITHA
NIM 121501014
PENGESAHAN SKRIPSI
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017
ISOLASI SENYAWA FUKOIDAN DARI TALUS RUMPUT
LAUT COKLAT (
Sargassum ilicifolium
(Turner) C. Agard)
SERTA UJI SITOTOKSIK DENGAN METODE
BRINE
SHRIMP LETHALITY TEST
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
PENGESAHAN SKRIPSI
ISOLASI SENYAWA FUKOIDAN DARI TALUS RUMPUT LAUT COKLAT (Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard) SERTA UJI SITOTOKSIK DENGAN METODE BRINE SHRIMP LETHALITY
TEST
OLEH:
FIORRIETA VEGLYANI MASHITHA NIM 121501014
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 29 Maret 2017
Disetujui Oleh:
Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb., M.Si., Apt. NIP 197506102005012003
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. NIP 195201041980031002
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. NIP 195107231982032001
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. NIP 195201041980031002
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP 195310301980031002
Medan, April 2017 Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Dekan,
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001 Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt.
NIP 195107231982032001
KATA PENGANTAR
Bismillaahirrahmaanirrahiim,
Puji dan syukur penulis ucapkan kepada Allah SWT yang telah memberikan
karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul “Isolasi Senyawa Fukoidan dari Talus Rumput Laut Coklat (Sargassum
ilicifolium (Turner) C. Agard) serta Uji Sitotoksik dengan Metode Brine Shrimp
Lethality Test”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan terima
kasih kepada Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, yang telah memberikan fasilitas dan masukan selama
masa pendidikan dan penelitian. Penulis juga berterima kasih yang
sebesar-besarnya kepada Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Drs. Fathur Rahman Harun,
M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan
bimbingan, arahan dan bantuan selama masa penelitian dan penulisan skripsi ini
berlangsung. Penulis juga menyampaikan ucapan terima kasih kepada Dr. Drs.
Panal Sitorus, M.Si., Apt., dan Dr. Poppy Anjelisa Zaitun Hasibuan, M.Si., Apt.,
selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan dalam penyusunan skripsi
ini. Penulis juga menyampaikan terima kasih kepada Prof. Dr., Urip Harahap.,
Apt., selaku dosen penasihat akademik yang telah banyak memberikan nasihat
dan bimbingan selama masa perkuliahan, Ibu Dr., Dra Marline Nainggolan, MS.,
Apt selaku ketua departemen biologi farmasi, Bapak dan Ibu staf pengajar
kepada Bapak dan Ibu koordinator laboratorium yang telah memberikan izin dan
fasilitas untuk penulis sehingga dapat mengerjakan dan menyelesaikan penelitian.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada pemerintah yang telah
memberikan beasiswa kepada penulis selama masa perkuliahan. Penulis juga
ingin menyampaikan rasa terima kasih serta penghargaan yang tulus dan tak
terhingga kepada orangtua tercinta H. Ir. Muhammad Ruslan, Ibunda Hj. Hoilisah,
S.Kep., Ners., dan kepada adik-adik tercinta Razy Naubach Haritsa Albatriq dan
Abbsumarmanali Firyabi Sakhtiani atas doa dan dukungan baik moril maupun
materiil kepada penulis. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada
teman-teman semua khususnya DEFISA (Della Rispita, Elvi Tri Yunita, Nurhotimah
Siregar, Novita Sari), Fadlina Aulia dan Arief Hidayat Zulkifli, serta seluruh
teman-teman kelas B 2012, STF 2012, dan ISMAFARSI yang selalu memberikan
dorongan dan motivasi selama penulis melakukan penelitian.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan yang terdapat dalam
skripsi ini. Untuk itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun
dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang
farmasi.
Medan, April 2017 Penulis,
SURAT PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini,
Nama : Fiorrieta Veglyani Mashitha
Nomor Induk Mahasiswa : 121501014
Program Studi : S-1 Reguler Farmasi
Judul Skripsi : Isolasi Senyawa Fukoidan dari Talus Rumput Laut Coklat (Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard) serta Uji Sitotoksik dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri dan belum pernah diajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di Perguruan Tinggi dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Utara dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, April 2017 Yang membuat pernyataan,
ISOLASI SENYAWA FUKOIDAN DARI TALUS RUMPUT LAUT COKLAT (Sargassum ilicifolium (Turner) C.Agard) SERTA UJI SITOTOKSIK DENGAN METODE BRINE SHRIMP LETHALITY TEST
ABSTRAK
Rumput laut coklat Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard tumbuh hampir diseluruh wilayah laut Indonesia, tetapi belum banyak dimanfaatkan. Salah satu komponen utama yang terdapat di dalam rumput laut coklat adalah fukoidan. Beberapa sumber menyatakan bahwa fukoidan memiliki aktivitas biologis seperti antikoagulan, antitrombosis, antitumor, antivirus, immunomodulator, antiinflamasi, antioksidan, dan antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi senyawa fukoidan dan memantau senyawa aktif yang bersifat toksik.
Penelitian ini meliputi penyiapan bahan tumbuhan, pemeriksaan karakteristik simplisia, proses isolasi fukoidan menggunakan HCl 0,1 N, identifikasi senyawa fukoidan secara spektrofotometri UV dan FTIR, serta uji sitotoksik terhadap larva Artemia salina Leach yang ditunjukkan oleh nilai LC50
Hasil isolasi diperoleh fukoidan sebesar 19,86 g. Hasil karakteristik senyawa fukoidan diperoleh susut pengeringan 19,32%, identifikasi senyawa fukoidan hasil isolasi secara spektrofotometri UV diperoleh panjang gelombang yang sama dengan baku pembanding yaitu pada 203,81 nm, sedangkan secara sprektrofotometri FTIR menunjukkan adanya gugus O-H, C-H alifatik, gugus S=O dan C-O. Pengujian sitotoksik diperoleh LC
dengan menggunakan metode Brine Shrimp Lethality Test. Pengujian ini menggunakan 3 konsentrasi isolat yaitu 10 µg/ml, 100 µg/ml, dan 1000 µg/ml serta kontrol negatif dengan menggunakan air laut buatan. Tiap konsentrasi berisi 10 ekor larva dengan 3 kali pengulangan. Kematian larva diamati setelah 24 jam pemberian isolat. Data hasil pengujian dianalisis dengan model analisis Probit.
50 sebesar 13658,4 µg/ml,
menunjukkan bahwa isolat fukoidan tidak bersifat sitotoksik.
ISOLATION OF FUCOIDAN FROM BROWN SEAWEED THALLUS (Sargassum ilicifolium (Turner) C.Agard) AND CITOTOXICITY TEST
USING BRINE SHRIMP LETHALITY TEST METHOD
ABSTRACT
Brown seaweed Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard grows in most of Indonesia’s coast, unfortunately it is not widely used yet. One of major components in brown seaweed is fucoidan. According to some source, fucoidan has many biological activities such as anticoagulant, antitrombotic, antitumor, antivirus, immunomodulator, antiinflammatory, antioxidants, and anticancer. This study aims to isolate fucoidan compound and to monitor the toxic effect of bioactive compound.
This study included the preparation of plant materials, determination the characteristics of simplex, isolation of fucoidan compound with 0.1 N HCl, identification of fucoidan compound, and cititoxicity test on Artemia salina Leach shown by LC50
The result of fucoidan isolation is 19.85 g, drying shrinkage is 19.32 %, identification isolates of fucoidan with UV spectrophotometric obtained similar wavelength to standart at 203.81 nm. FTIR spectrophotometric showed O-H, CH-aliphatic, group of S=O and C-O. Citotoxicity test obtained LC
using Brine Shrimp Lethality Test method. This test used 3 concentrations of isolate, 10 µg/ml, 100 µg/ml, and 1000 µg/ml, and negative control using sea water. Each concentration contain ten larvas and performed 3 replications. Death of larvas observed 24 hours after giving the isolate. Data were analyzed by Analytic Probit Model.
50 is on 13658.4
µg/ml, showed that isolates of fucoidan compound did not have citotoxic effect.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
SURAT PENGESAHAN ... vi
ABSTRAK ... vii
ABSTRACT ... viii
DAFTAR ISI ... ix
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Perumusan Masalah ... 3
1.3 Hipotesis ... 3
1.4 Tujuan Penelitian... 4
1.5 Manfaat Penelitian ... 4
1.6 Kerangka Pikir Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Uraian Tumbuhan ... 5
2.1.1 Habitat tumbuhan rumput laut ... 5
2.1.2 Morfologi tumbuhan ... 6
2.1.4 Nama lain tumbuhan ... 7
2.1.5 Kandungan rumput laut coklat ... 7
2.2 Ekstraksi ... 7
2.3 Senyawa Fukoidan ... 9
2.3.1 Ekstraksi senyawa fukoidan ... 10
2.3.2 Pemurnian senyawa fukoidan ... 12
2.4 Artemia salina Leach ... 14
2.4.1 Klasifikasi Artemia salina ... 14
2.4.2 Morfologi ... 15
2.4.3 Siklus hidup ... 15
2.5 Uji Sitotoksisitas ... 17
2.5.1 Brine shrimp lethality test ... 17
2.5.2 Metode potato disk (menghambat tumor crown gall) 18 2.5.3 Uji terhadap Lemna minor L. ... 18
2.6 Spektrofotometri Ultraviolet ... 18
2.7 Spektrofotometri Inframerah ... 19
BAB III METODE PENELITIAN ... 21
3.1 Alat dan Bahan ... 21
3.1.1 Alat ... 21
3.1.2 Bahan ... 21
3.2 Pengumpulan dan Pengolahan Bahan Tumbuhan ... 22
3.2.1 Pengumpulan bahan tumbuhan ... 22
3.2.2 Identifikasi tumbuhan ... 22
3.3 Waktu dan Tempat Penelitian ... 23
3.4 Pemeriksaan Makroskopik ... 23
3.5 Pembuatan Larutan Pereaksi ... 23
3.5.1 Pereaksi asam klorida 1 N ... 23
3.5.2 Pereaksi asam klorida 0,1 N ... 23
3.6 Isolasi Senyawa Fukoidan ... 23
3.7 Penetapan Susut Pengeringan ... 24
3.8 Identifikasi Senyawa Fukoidan ... 24
3.8.1 Analisis secara spektrofotometri UV ... 26
3.8.2 Analisis secara spektrofotometri FTIR ... 26
3.9 Sitotoksik ... 25
3.9.1 Pembuatan air laut buatan ... 25
3.9.2 Penetasan telur Artemia salina Leach ... 26
3.9.3 Pengujian Brine Shrimp Lethality Test ... 26
3.10 Perhitungan LC50 3.11 Analisis Data Sitotoksik ... 28
... 27
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 29
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan... 29
4.2 Hasil Pemeriksaan Makroskopik ... 29
4.3 Hasil Isolasi Senyawa Fukoidan ... 29
4.4 Hasil Penetapan Susut Pengeringan ... 30
4.5 Hasil Identifikasi Senyawa Fukoidan ... 30
4.5.1 Identifikasi secara spektrofotometri UV ... 30
4.6 Hasil Uji Sitotoksik ... 33
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 36
5.1 Kesimpulan ... 36
5.2 Saran ... 36
DAFTAR PUSTAKA ... 37
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Hasil spektrofotometri FTIR senyawa isolat dan baku fukoidan Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard ... 33
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Struktur senyawa fukoidan ... 10
2.2 Morfologi Artemia salina Leach ... 15
4.1 Spektrum ultraviolet isolat fuko idan ... 30
4.2 Spektrum ultraviolet baku fukoidan ... 31
4.3 Spektrum inframerah isolat fukoidan ... 31
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Surat hasil identifikasi tumbuhan ... 41
2 Bagan kerja penelitian ... 42
3 Bagan kerja isolasi senyawa fukoidan ... 43
4 Bagan kerja uji sitotoksik ... 44
5 Gambar makroskopik tumbuhan segar rumput laut coklat ... 45
6 Gambar makroskopik simplisia rumput laut coklat ... 46
7 Gambar makroskopik serbuk simplisia rumput laut coklat ... 45
8 Gambar isolat fukoidan rumput laut coklat ... 48
9 Gambar alat spektrofotometer UV-Visibel ... 49
10 Gambar alat spektrofotometer FTIR ... 50
11 Perhitungan karakteristik isolat fukoidan rumput laut coklat ... 51
12 Tabel probit Finney ... 53
13 Perhitungan persentase kematian larva ... 54
