i
SKRIPSI
ATIKAH NADHIFAH FAHMI
UJI EFEKTIVITAS BENZALKONIUM KLORIDA
KONSENTRASI 0,025% b/v DENGAN pH5
(
Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonasaeruginosa
)
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2016
iv
KATA PENGANTAR
Bismillahirrohmanirrohiim.
Segala puji hanya bagi Allah SWT yang telah memberikan anugerah dan hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “UJI
EFEKTIVITAS BENZALKONIUM KLORIDA KONSENTRASI 0,025% b/v DENGAN pH 5 (Terhadap Bakteri Pseudomonasaeruginosa)” untuk
memenuhi salah satu persyaratan akademik dalam menyelesaikan Program Sarjana Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah MalangDengan selesainya skripsi ini, penulis berterima kasih kepada :
1. Drs. Sugiyartono, MS, selaku dosen pembimbing I yang telah mengupayakan ilmu, waktu, dan tenaganya untuk membimbing saya dengan segala ketulusannya sehingga dapat menyelesaikan penyusunan tugas akhir ini
2. Arina Swastika M., S.Farm., Apt, selaku dosen pembimbing II yang telah begitu sabar dan tulus memberikan bimbingan hingga naskah skipsi ini bisa terselesaikan dengan baik.
3. Drs. H. Achmad Inoni, Apt dan Dian Ermawati, M.Farm., Apt, selaku Tim Penguji yang memberikan saran, masukan dan kritik yang telah membangun terhadap skripsi yang telah saya kerjakan.
4. YoyokBekti P, M.Kep, Sp.Kom, selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang
5. NailisSyifa’ S.Farm., Apt., MSc. selaku Ketua Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang
6. Dian Ermawati, M.Farm., Apt selaku dosen wali yang sudah memberikan bantuan moril, arahan, dan bimbingan kepada saya selama menjalani studi. 7. Laboran Laboratorium Teknologi Sediaan Steril dan Laboratorium Biomedik: Mbak Susi, Mas Ferdi, dan Pak Joko yang selalu membantu saya.
8. Abi saya Ir. Achmad Fahmi Thanthawi dan mama saya Umi Salamah Fahmi yang sudah menjadi orang tua terbaik. Terimakasih untuk selalu mendukung, memberikan nasehat, memberikan dorongan, mendoakan
v
setiap saat dan setiap waktu. Terimakasih untuk segalanya, seribu kata tidak pernah cukup untuk mengucapkan terimakasih kepada kalian.
9. Mas saya Ali Fahmi Bachtiar dan Adik saya ‘Iffa Nabila Fahmi yang selalu mendukung saya dan menghibur setiap saat. Terimakasih telah menjadi saudara terhebat yang saling membantu satu sama lain. Saya sayang kalian.
10. Kayk, neneng, mbah umi, (alm) mbah abi, serta keluarga besar dari mama dan abi tanpa terkecuali. Terimakasih sudah memberikan kebersamaan keluarga yang begitu hangat. Kalian adalah sebaik-baiknya tempat kembali saat lelah.
11. Sahabat-sahabat terbaik Nabila, Anita Silvia Arief, dan Muthmainnah yang selalu ada, selalu memahami, selalu menerima, dan selalu mendengarkan segala keluh kesah saya, serta mendukung segala hal yang saya lakukan. Terimakasih sudah menjadi sahabat-sahabat yang tulus dan gila.
12. Sahabat-sahabat skripsi steril, teman seperjuangan Nabila, Nadia, Nada, Athirah, Niken, Agung, dan Yudha yang selalu membantu sampai skripsi ini selesai. Terimakasih atas kerjasamanya yang begitu kompak, kegilaannya sehingga membuat saya selalu nyaman, dan segala hal bersama kalian selalu menyenangkan.
13. Sahabat-sahabat saya sejak di MAN 3 MALANG Nabila, Yala, Ciripa, Usa, dan Aisy yang selalu memahami saya karena waktu untuk bertemu semakin sempit. Terimakasih pengertiannya.
14. Teman-teman gila di kampus, Nabila, Mumut, Arisa, Ratna, Rike, Nehar, Bima, Tri, Ahya, Agung Tri, Brawi, Puyuk, dan lain-lain. Terimakasih sudah menjadi teman-teman yang gila dan baik hati, senang bisa bersama kalian.
15. Muhammad Riduan, Iwang, dan Mas Aris terimakasih telah meluangkan waktunya dengan mengantarkan ke Surabaya hingga selamat untuk membantu tim skripsi steril.
16. Kakak-kakak skripsi steril 2011, terima kasih karena tidak bosan menjawab segala pertanyaan terkait skripsi ini.
vii
RINGKASAN
Pengawet adalah agen kimia atau formulasi yang mampu mengurangi jumlah mikroorganisme yang berkembang (viable) dalam suatu objek atau bidang sehingga mencapai tingkat yang aman untuk (tujuan) penggunaan dan dapat menjaga jumlah mikroorganisme viabel pada atau di bawah kadar yang aman pada penggunaan/usia guna produk. Hal ini sangat penting pada sediaan farmasi multiguna atau sediaan yang rentan menjadi media perkembangbiakan mikroorganisme. Pengawet ditambahkan pada produksi obat-obatan sediaan nonsteril, seperti sediaan oral, krim, gel, suppositoria, dan kapsul yang mengandung cairan, dan juga untuk sedian steril, seperti tetes mata dan sediaan injeksi dosis ganda (multipledose).
Salah satu pengawet yang sering digunakan adalah benzalkonium klorida karena toxicitasnya rendah, tidak korosif dan memiliki rentang pH yang luas. Selain itu, benzalkonium klorida sering digunakan untuk modifikasi formulasi karena memiliki stabilitas kimia dan karakteristik antimikroba yang sangat baik.Benzalkonium klorida tidak efektif terhadap beberapa bakteri, salah satunya adalah Pseudomonasaeruginosa. Sehingga untuk meningkatkan efektivitas benzalkonium klorida terhadap Pseudomonasaeruginosaperlu peningkatan konsentrasi dan modifikasi pH karena aktivitas menghambat benzalkonium klorida akan meningkat jika konsentrasi ditingkatkan dan dengan adanya modifikasi pH. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efektivitas benzalkonium klorida konsentrasi 0,025% b/v dengan pH 5 terhadap aktivitas bakteri Pseudomonasaeruginosa.
Prosedur pertama yang dilakukan pada penelitian ini adalah identifikasi bahan dan bakteri, sterilisasi alat dan bahan yang akan digunakan, sterilisasi ruang, kontrol ruangan LAFC (Laminar Air FlowCabinet), pembuatan sediaan, pembuatan media uji kontrol positif dan kontrol negatif, uji inaktivasi pengawet, uji sterilitas, dan yang terakhir adalah uji efektivitas pengawet benzalkonium klorida 0,025% b/v dengan pH 5. Pada uji efektivitas, terlebih dahulu dilakukan yaitu membuat suspensi bakteri dengan cara swabbiakan koloni bakteri menggunakan ose lalu encerkan dengan larutan NaCl 0,9% steril. Encerkan suspensi tersebut hingga kekeruhan sesuai dengan standar McFarland yang artinya dalam suspensi tersebut jumlah mikroba adalah 108cfu/ml. Kemudian inokulasi sediaan yang dibuat dengan menggunakan suspensi mikroba sejumlah 50 µl pada masing-masing batch. Sediaan yang telah diinokulasikan disimpan di suhu ruang. Setelah itu diambil 1 µL dengan menggunakan osespreaderdan diratakan ke media agarpada hari ke 0, 7, 14, 21, dan 28, kemudian diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam, dan dihitung jumlah bakterinya, dimana perhitungan jumlah koloni mempunyai syarat yaitu 30-300 koloni dengan tujuan agar mudah dihitung dan tentukan penurunan jumlah mikroba tersebut selama 28 hari pengujian. Sediaan yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 3 vial dengan perlakuan yang sama. Jika media pada hari ke-0 dan hari ke-7 tidak mengalami penurunan jumlah mikroba maka benzalkonium klorida dinyatakan
viii
tidak efektif, sedangkan jika pada hari ke-0 sampai hari ke-7 mengalami penurunan jumlah mikroba maka benzalkonium klorida memenuhi syarat uji efektivitas.
Dari penelitian uji efektivitas benzalkonium klorida konsentrasi 0,025% dengan pH 5 terhadap aktivitas bakteri Pseudomonasaeruginosayang dilakukan menunjukkan adanya penurunan jumlah bakteri Pseudomonasaeruginosamulai hari ke-0 sampai hari ke-28. Sehingga, dapat disimpulkan bahwa benzalkonium klorida konsentrasi 0,025% dengan pH 5 efektif digunakan sebagai pengawet untuk menghambat aktivitas bakteri Pseudomonasaeruginosa.
xii
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL SKRIPSI... i
LEMBAR PENGESAHAN... ii
LEMBAR PENGUJIAN... iii
KATA PENGANTAR... iv
RINGKASAN... vii
ABSTRAK... ix
ABSTRACT... x
DAFTAR SINGKATAN... xi
DAFTAR ISI... xii
DAFTAR TABEL... xvii
DAFTAR GAMBAR... xviii DAFTAR LAMPIRAN... xix
BAB I PENDAHULUAN... 1
1.1.Latar Belakang...1
1.2.Rumusan Masalah... 3
1.3.Tujuan Penelitian... 4
1.4.Manfaat Penelitian... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 5
2.1. Tinjauan Tentang Pengawet... 5
2.1.1. Definisi Pengawet ... 5
2.1.2. Pemilihan Pengawet... 5
2.1.3. Kategori Pengawet... 6
2.2. Benzalkonium Klorida... 8
2.2.1. Sifat Fisika Kimia... 8
2.2.2. Aktivitas Antimikroba... 9
2.2.3. Toksisitas Pengawet ... 10
2.3. Tinjauan Tentang pH ... 11
2.3.1. Pengertian pH... 11
2.3.2. Tinjauan Tentang Hubungan pH dengan Bakteri... 11
xiii
2.4. Tinjauan Tentang Mikrobiologi... 12
2.4.1. Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Pertumbuhan... 12
2.4.2. Sumber Kontaminasi Mikroorganisme... 14
2.5. Tinjauan Tentang Bakteri... 16
2.5.1. Klasifikasi Pseudomonas aeruginosa ... 16
2.5.2. Morfologi dan Identifikasi... 16
2.5.3. Patogenesis... 17
2.6. Tijauan Tentang Sterilisasi... 18
2.6.1. Definisi Sterilisasi... 18
2.6.2. Tujuan Sterilisasi... 18
2.6.3. Macam-macam Sterilisasi... 18
2.7. Tijauan Tentang Teknik Aseptik... 20
2.8. Tinjauan Uji Sterilitas... 23
2.8.1. Media untuk Uji Sterilisasi... 23
2.8.2. Pengambilan Sampel Untuk Uji Sterilitas Media untuk Sterilisas 26
2.8.3. Metode Uji sterilisasi... 26
2.8.4. Prosedur Umum Pelaksanaan Uji Sterilisasi... 27
2.8.5. Kontrol dalam Uji Sterilisasi... 29
2.8.6. Penafsiran Hasil Uji Sterilitas... 30
2.9. Tinjauan Uji Efektivitas Pengawet... 31
2.9.1. Kategori Produk... 31
2.9.2. Uji Organisme... 31
2.9.3. Media... 32
2.9.4. Persiapan Inokulum... 32
2.9.5. Prosedur... 32
2.9.6. Kriteria Untuk Efektivitas Antimikroba... 34
2.10.Tinjauan Tentang Dapar... 35
2.10.1. Pengertian Dapar... 35
2.10.3. Tinjauan Tentang Dapar Asetat... 36
2.11.Metode Perhitungan Mikroba... 37
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL... 39
3.1. Uraian Kerangka Konseptual... 39
3.2. Skema Kerangka Konseptual... 41
xiv
4.1. Desain Penelitian... 42
4.2. Lokasi Penelitian... 42
4.3. Waktu Penelitian... 42
4.4. Sterilisasi Ruang... 42
4.5. Preparasi Alat dan Bahan... 42
4.5.1. Alat... 42
4.5.2. Bahan... 43
4.5.3. Prosedur Sterilisasi Alat... 44
4.6. Preparasi Sediaan... 44
4.6.1. Formulasi... 44
4.6.2. Prosedur Pembuatan Sediaan (Tanpa Bahan Aktif)... 44
4.6.3. Prosedur Sterilisasi Sediaan (Ansel, 2005)... 45
4.7. Uji Inaktivasi Pengawet... 45
4.7.1. Penyiapan Unit Laminar air flow dan Memasukkan Semua Bahan dan Alat... 45
4.7.2. Kontrol Lingkungan di luar dan di dalam Laminar Air Flow Cabinet (LAFC)... 46
4.7.3. Kontrol Lingkungan Suhu dan Kelembaban di luar Laminar Air Flow Cabinet (Lingkungan Penyimpanan Sampel)... 47
4.7.4. Penyiapan Media... 47
4.7.5. Uji Sterilitas dan Fertilitas Media... 48
4.8. Inaktivasi Pengawet... 48 4.8.1. Pengenceran Sampel... 48 4.8.2. Inokulasi Sampel... 49 4.9. Uji Sterilitas... 49 4.10. Uji Efektivitas... 50 4.10.1. Penyiapan Media... 50
4.10.2. Pembuatan Suspensi Mikroba Uji... 50
4.10.3. Tahapan Kerja... 51
4.10.4. Penanaman Sampel... 51
4.10.6. Pengamatan dan Penafsiran Sampel Uji... 52
4.11. Skema Kerangka Operasional Metode Penelitian... 53
BAB V HASIL PENELITIAN... 54 5.1. Hasil Uji Kontrol Lingkungan Pada Laminar Air Flow Cabinet
xv
(LAFC)... 55
5.1.1.Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air FlowCabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pembuatan Sediaan Tetes Mata... 55
5.1.2.Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air FlowCabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Uji Inaktivasi Pengawet... 56
5.1.3.Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air FlowCabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Uji Inaktivasi Pengawet... 57
5.2. Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Positif) ... 59
5.3. Hasil Uji Sterilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Negatif) ... 59
5.4. Hasil Uji Inaktivasi Pengawet dengan Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino... 60
5.5. Hasil Uji Sterilitas Sediaan Tetes Mata dengan Menggunakan MediaTioglikolat Cair dan Kasamino... 61
5.6. Hasil Uji Efektivitas Benzalkonium Klorida Konsentrasi 0,025% dengan pH 5 Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas aeruginosa. 62
5.6.1.Hasil Kontrol Lingkungan Uji Efektivitas Pengawet... 62
5.6.2.Jumlah Awal Rata-rata Mikroba Uji dalam cfu (Colony FormingUnits) per ml untuk Uji Efektivitas Pengawet... 63
5.6.3.Jumlah Mikroba dalam cfu (Colony Forming Units) per ml Pada UjiEfektivitas Pengawet... 63
BAB VI PEMBAHASAN... 66
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN... 71
7.1. Kesimpulan... 71
7.2. Saran... 71
DAFTAR PUSTAKA... 72
xvi
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
II.1 Klasifikasi atau Grade Ruangan Steril (Lukas, 2006) ... 22
II.2 Perlengkapan dan Kandungan Kuman dari Manusia... 22
II.3 Jumlah Minimum yang Digunakan untuk Tiap Media...26
II.4 Jumlah Minimum Bahan yang Diuji Sesuai dengan... 26
II.5. Jumlah Volume dan Media untuk Bahan Cair... 28
II.6. Kategori Produk Berdasarkan Kompendia... 31
II.7. Kondisi Inokulum dalam Kultur... 33
II.8. Kriteria Untuk Tes Mikroorganisme (Anonim, 2007) ... 34
V.1 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pembuatan Sediaan... 55
V.2 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pembuatan Sediaan... 57
V.3 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pengujian Sterilitas... 58
V.4 Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Positif) ... 59
V.5 Hasil Uji Sterilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Negatif) ... 60
V.6 Hasil Uji Inaktivasi Pengawet Benzalkonium Klorida Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino... 60
V.7 Hasil Uji Sterilitas Sediaan Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino... 61
V.8 Hasil Kontrol Lingkungan Uji Efektivitas Pengawet dalam LAFC. 63
V.9 Jumlah Awal Rata-rata Mikroba Uji dalam cfu (Colony Forming Units) per ml untuk Uji Efektivitas Pengawet... 63
V.10 Jumlah Mikroba dalam cfu (Colony Forming Units) per ml Pada Uji Efektivitas Pengawet... 64
V.11 Persentase Rata-Rata dan Logaritma Penurunan Jumlah Mikroba Pada Uji Efektivitas... 64
xvii
V.12 Rata-Rata Persentase dan Logaritma Penurunan Jumlah Mikroba
xviii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1. Struktur Kimia Benzalkonium Klorida... 8
2.2. Pseudomonas aeruginosa pada nutrien agar... 17
2.3 Asam Asetat... 36
2.4 Natrium Asetat... 37
3.1 Skema kerangka konseptual... 41
4.1 Letak Media Agar dalam Unit Laminar Air Flow Cabinet Sebelum Pengujian Sterilitas... 46
4.2 Letak Media Agar dalam Unit Laminar Air Flow Cabinet Saat Pengujian Sterilitas Berlangsung... 46
xix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Daftar Riwayat Hidup... 75
2. Surat Anti-Plagiasi... 76
3. Sertifikat Bahan... 77
4. Sertifikat Bahan... 79
5. Sertifikat Bahan Benzalkonium Klorida... 80
6. Sertifikat Bakteri Pseudomonas aeruginosa... 81
7. Sertifikat Bakteri Bacillus subtilis... 82
8. Sertifikat Bakteri Candida albicans... 83
9. Perhitungan Bahan Sedian Benzalkonium Klorida Konsentrasi 0,025% dengan pH 5... 84
10. Foto Alat dan Bahan... 86
11. Skema Tahapan Pembuatan Sediaan... 88
12. Skema Kerja Uji Inaktivasi Pengawet... 89
13. Skema Kerja Uji Sterilitas Sediaan... 90
14. Skema Kerja Pembuatan Media Nutrient Agar... 91
15. Skema Uji Efektivitas Pengawet... 92
16. Gambar Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar AirFlow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pembuatan Sediaan...94
17. Gambar Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Uji Inaktivasi Pengawet... 96
18. Gambar Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pengujian Sterilitas. 98
19. Gambar Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Selama Pengujian Efektivitas Pengawet Sediaan... 100
20. Gambar Kontrol Jumlah Mikroba Standar 0,5 McFarland (Pseudomonas aeruginosa)... 101
21. Gambar Hasil Uji Fertilitas dan Sterilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino... 102
22. Gambar Hasil Uji Inaktivasi Pengawet dengan Menggunakan Media Kasamino... 103
xx
23. Gambar Hasil Uji Inaktivasi Pengawet dengan Menggunakan Media Tioglikolat Cair... 104 24. Gambar Hasil Uji Sterilitas Sediaan dengan Menggunakan Media
Tioglikolat Cair dan Kasamino... 105 25. Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025%
b/v Dengan pH 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas
aeruginosa)... 106 26. Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025%
b/v Dengan pH 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas
aeruginosa)... 107 27. Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025%
b/v Dengan pH 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas
aeruginosa)... 108 28. Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025%
b/v Dengan pH 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas
aeruginosa)... 109 29. Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025%
b/v Dengan pH 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas
aeruginosa)... 110 30. Perhitungan Persentase dan Logaritma Penurunan Jumlah Bakteri.. 111
72
DAFTAR PUSTAKA
Agoes, Goeswin. 2009. Pengembangan Sediaan Farmasi. Edisi Revisi dan Perluasan. Bandung : Penerbit ITB
Agoes, Goeswin. 2009. Sediaan Farmasi Steril.Bandung : Penerbit ITB
Ansel, Howard C., 2008. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi Edisi Keempat. Jakarta : Penerbit Universitas Indonesia (UI-Press).
Anonim. 2007. United State Pharmacopoeia, Edisi 30. Rockville : USPConvention, Inc.
Anonim. 2015. Pseudomonasaeruginosa. https://id.wikipedia.org/wiki/. Diakses pada tanggal 23 September 2015
AyselUgur, OzgurCeylan, andBelmaAslim. 2012. Characterization of
Pseudomonasspp. Krom Seawater of The Southwest Coast of Turkey. Turkey : J. Biol. Environ. SCI
Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2006. Pedoman Cara Pembuatan Obat
Yang Baik. Jakarta : Badan POM.
Bore, Erland., etal. 2007.
AdaptedTolerancetoBenzalkoniumChlorideinEscheriachia coli K-12 StudiedbyTranscriptomeandProteomeAnalyses. France : Microbiology.
Cooper, J. W., 1975, Dispensing for Pharmaceutical Students, twelfth Ed.10, pitmanmedicalPublishingco. ltd, London
CVUA Stuttgart, Schaflandstr. 2012. QuaternaryAmmoniumCompounds
(QAC). Germany : Europa Union ReferenceLaboratory for Residues of
Pesticides.
Denyer, SP. And Baird, R.M., 2007. GuideMicrobiological Control In
Pharmaceuticalsand Medical Devices, 2th ed., BocaRaton CRC Press, Taylor & Francis Group.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995. Farmakope Indonesia. Edisi
keempat. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2009. Farmakope Indonesia. Edisi
kelima. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Dosunmu, etal. 2015. Silver-coatedCarbonNanotubesDownregulate The
Expression of PseudomonasaeruginosaVirulenceGenes: a PotentialMechanism for TheirAntimicrobialEffect. USA : International
Journal of Nanomedicine.
Elder, David., Crowley, Patrick., 2012. AntimicrobialPreservativePart Two:
Choosing a Preservative. UK : American Pharmaceutical Review.
Fischetti, A.V., R.P. Novick, J.J. Ferreti, D.A. Portnoy, andJ.I. Rood. 2000. Gram
73
Gillespie, Stephen dan Kathleen Bamford. 2008. At A Glance Mikrobiologi
Medis dan Infeksi. Edisi ketiga. Jakarta : Penerbit Erlangga.
Hunter, P.R. 1993. The microbiology of bottled natural mineral waters. United Kingdom : Journal of AppliedBacteriology
Jawetz, Melnick, &Adelberg’s. 2001. Mikrobiologi Kedokteran. Edisi dua
puluh dua. Jakarta : Penerbit Salemba Medika.
Jawetz, Melnick, &Adelberg’s. 2007. Medical MicrobiologyTwentyFourth Ed. USA : The McGraw-HillCompanies, Inc.
Kimata,etal. 2004.
Pseudomonasaeruginosaisolatedfrommarineenvironmentsin Tokyo Bay.Japan : Ocean Research Institute.
Kumar, Surinder. 2012. Textbook of Microbiology. New Delhi : Jaypee Brothers Medical Publishers.
Martin, A.N., Swarbrick, J., dan Cammarata, A. 1983. Farmasi Fisik. Edisi III. Jakarta : UI-Press.
McDonnell, Gerald. And Russell, Denver., 1999. Antiseptics dan Disinfectants:
Activity, Action, andResistance.United Kingdom : ClinicalMicrobiologyReview.
Mesaros, etal. 2007. Pseudomonasaeruginosa:
resistanceandtherapeuticoptionsattheturn of thenewmillennium.
Belgium : European Society of
ClinicalMicrobiologyandInfectiousDiseases
Patrick J. Crowley& David P. Elder, 2012.AntimicrobialPreservativesPart One
: Choosing a Preservative System. American
Pelczar, Michael dan E.C.S.Chan. (1986). Dasar-Dasar Mikrobiologi. Cetakan I. Jakarta:UI-Press. Hal. 101.
PratiwiSyivia T., 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta : Erlangga.
Prescott, L.M., J.P. Harley, andD.A. Klein. 2003. Microbiology. 5 ed. New York : McGraw Hill.
Rangkuti.D. 1994. Penuntun Penelitian Mikrobiologi. Padang : Sekolah Menengah Analis Kimia
Remington, J. P. 2005. Remington’s Pharmaceutical The Science
andPracticeinPharmacy 21stEdition. Pennsylvania : Lippincott Williams
& Wilkins.
Rowe, C Raymond, dkk. 2009. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Edisi keenam. London : Pharmacetical Press.
Ryan, K.J., J.J. Champoux, S. Falkow, J.J. Plonde, W.L. Drew, F.C. Neidhardt,
74
MicrobiologyAnIntroductiontoInfectiousDiseases. 3rd ed. Connecticut:
Appleton&Lange
Siswandono dan Soekarjo, Bambang. 2011. Kimia Medisinal. Surabaya : Airlangga University.
Solveig, Langsurd. 2007. AdaptedTolerenceToBenzalkoniumChloride In
Eschericia Coli K-12 StudiedByTranscriptomeandProteomeAnalysis.
Great BritainPrinted.
Stefanus Lukas. 2006. Formulasi Steril. Yogyakarta : Penerbit ANDI
Suriani, Sanita., Soemarno, Suharjono. 2013. Pengaruh Suhu dan pH terhadap
Laju Pertumbuhan Lima Isolat Bakteri Anggota Genus Pseudomonas yang diisolasi dari Ekosistem Sungai Tercemar Deterjen di sekitar Kampus UniveristasBrawijaya. Indonesia : Universitas Brawijaya.
Syukri., 1999. Kimia Dasar 2. Bandung : Penerbit ITB.
Vogel. 1985. Buku Analisis Anorganik Kualitatif Makro dan Semimikro.
Edisi Kelima. Bagian I. PT Kalman Pustaka : Jakarta.
Voigt, R. 1995. Buku Ajar Teknologi Farmasi. Edisi kelima. Yogyakarta : Gadjah Mada University Press.
Volk, W. A. dan M. F. Wheeler. 1993. Mikrobiologi Dasar, Erlangga, Jakarta Waluyo. L. 2007. Mikrobiologi Umum. UMM Press. Malang
Zabrzewska, Beata., etal. 2014. Development Studies On Determination of
PreservativesDecomposition Products.Poland : Polish Pharmaceutical
