ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA
STEROID/TRITERPENOID DARI LANDAK LAUT
Diadema setosum
SKRIPSI
OLEH:
SILVIA RAHMI
NIM 121524174
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA
STEROID/TRITERPENOID DARI LANDAK LAUT
Diadema setosum
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
SILVIA RAHMI
NIM 121524174
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA
STEROID/TRITERPENOID DARI LANDAK LAUT
Diadema setosum
OLEH : SILVIA RAHMI
NIM 121524174
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Fakultas Farmasi Unversitas Sumatra Utara
Pada Tanggal: 25 Januari 2016
Medan, 23 Maret 2016 Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Pejabat Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001 Disetujui Oleh:
Pembimbing I, Panitia Penguji,
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt NIP 195107231982032001 NIP 195310301980031002
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt
Pembimbing II, NIP 195107231982032001
Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt NIP 195807101986012001 NIP 195109081985031002
Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt NIP 195112231980032002
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala limpahan berkat, rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dengan judul “Isolasi dan Identifikasi Senyawa Steroid/Triterpenoid Dari Landak Laut Diadema setosum ”.
Pada kesempatan ini dengan segala penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Pejabat Dekan. Fakultas Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Almarhumah Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., yang selama hidup beliau menjadi dosen pembimbing I. Ucapan terima kasih kepada Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt., selaku pembimbing I dan II yang telah membimbing dan memberikan petunjuk serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Bapak Dr. Panal Sitorus,M.Si., Apt., selaku ketua penguji, Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., dan Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt selaku anggota penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada terhingga kepada Ayahanda Badruzzaman, SKM., M.Kes., dan Ibunda
v
Darmawati, S.Pd, Abang-abang Darmansyah, ST., Ramadhansyah, S.Kep., Reza, SE., kakak-kakak Badri Mayawati, S.Kep., Sri Muharramah, S.H., dan Cut Intan, SE., beserta Cekpus dan keponakan-keponakan tersayang yang telah memberikan semangat, nasehat dan doa selama perkuliahan hingga selesainya skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi kita semua.
Medan, Maret 2016 Penulis
Silvia Rahmi NIM 121524174
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertandatangan dibawah ini :
Nama : Silvia Rahmi
Nomor Induk Mahasiswa : 121524174 Program Studi : Ekstensi Farmasi
Judul Skripsi :iIsolasi dan Identifikasi Senyawa Steroid/ Triterpenoid dari Landak Laut (Diadema setosum).
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, 18 Maret 2016 Yang membuat pernyataan,
Silvia Rahmi NIM 121524174
vii
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA STEROID/TRITERPENOID DARI LANDAK LAUT Diadema setosum
yarat untuk memperolehgelar Sarjana bABSTRAK
Landak laut Diadema setosum adalah hewan laut kelompok Echinodermata yang hidupnya di zona terumbu karang dan di dasar laut. Hewan ini memiliki tubuh yang ditutupi cangkang dan 95% bagian cangkang tersebut diselimuti oleh duri-duri yang beracun. Toksin yang dihasilkan oleh racun landak laut memiliki senyawa bioaktif. Senyawa kimia yang terkandung dalam duri dan cangkang landak laut adalah alkaloid, glikosida, saponin dan steroid/triterpenoid. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik simplisia, golongan senyawa kimia, ekstraksi dan isolasi senyawa steroid/triterpenoid dari simplisia cangkang dan duri landak laut Diadema setosum.
Ekstraksi dilakukan secara perkolasi menggunakan pelarut n-heksana. Ekstrak dianalisis secara kromatografi lapis tipis (KLT) dengan berbagai perbandingan pengembang, dilanjutkan isolasi menggunakan kromatografi lapis tipis preparatif. Isolat yang diperoleh dari hasil isolasi dilakukan uji kemurnian secara kromatografi lapis tipis dua arah, selanjutnya diidentifikasi secara spektrofotometri ultraviolet (UV) dan spektrofotometer inframerah (IR).
Hasil karakterisasi simplisia cangkang dan duri landak laut Diadema setosum diperoleh kadar air 7,987%, kadar sari yang larut dalam air 4,95 %, kadar sari yang larut dalam etanol 6,69 %, kadar abu total 21,364 %, dan kadar abu tidak larut asam 11, 66 %. Hasil pemeriksaan golongan senyawa kimia menunjukkan adanya senyawa alkaloid, glikosida, saponin dan steroid/triterpenoid. Hasil isolasi diperoleh dua isolat (biru dan ungu), hasil uji kemurnian kedua isolat tersebut secara kromatografi lapis tipis dua arah diperoleh harga Rf 0,225 untuk isolat bewarna biru dan harga Rf 0,625 untuk isolat bewarna ungu. Identifikasi dilakukan terhadap isolat yang bewarna ungu secara spektrofotometri ultraviolet (UV) memberikan absorbansi maksimum pada panjang gelombang 205 nm dan secara spektrofotometri IR menunjukkan adanya gugus fungsi –OH, CH-alifatis, C=C, CH3, C-O, CH2. Isolat yang diperoleh termasuk golongan senyawa steroid/triterpenoid.
Kata kunci : Landak laut, Diadema setosum, isolasi, steroid/triterpenoid
ISOLATION AND IDENTIFICATION OF STEROID/TRITERPENOID OF SEA URCHIN Diadema setosum
yarat untuk memperolehgelar Sarjana bABSTRACT
Sea urchin Diadema setosum is a sea animal that in Echinodermata group that lives on coral reef zone and seabed. This animal has a body covered with shells and 95% parts of shell are covered by the poisonous spines. Toxins produced by poison of sea urchins have bioactive compounds. Chemical compounds contained in sea urchin spines and shells are alkaloids, glycosides, saponins and steroid / triterpenoid. The purpose of this study was to determine the characteristics of simplicia, chemical compounds and isolating compounds steroid /triterpenoid of simplicia of sea urchin shells and spines Diadema setosum.
The sea urchin shells and spines was extraction by percolation methode using n-hexane as solvent, the extract was analyzed by thin layer chromatography (TLC) with various ratio of developers, followed by isolation using preparative thin layer chromatography. The isolated was purified using two-dimention of thin layer chromatography, and identification of pure isolat using further spectrophotometry ultraviolet (UV) and infrared spectrophotometry (IR).
The characterization results simplicia of sea urchin shells and spines Diadema setosum obtained 7.987% of moisture content, content of water-soluble extract of 4.95%, the levels of soluble extract in ethanol 6.69%, total ash content of 21.364%, and acid insoluble ash content of 11, 66%. Test results indicate the presence of the chemical compound are alkaloids, glycosides, saponins and steroid/triterpenoid. Isolation results obtained two isolates (blue and purple), the results of testing the purity of the isolate both thin layer chromatography in two-dimention obtained Rf 0.225 for blue colored isolates and isolates Rf 0.625 for purple colored. Identification of the purples isolate by spectrophotometry ultraviolet (UV) gives a maximum absorbance at a wavelength of 205 nm and spectrophotometry infrared (IR) results indicate the presence of functional groups OH, CH-aliphatic, C=C, CH3, CO, CH2. Isolates belonged steroid compounds / triterpenoid.
ix DAFTAR ISI Halaman JUDUL ... i PENGESAHAN ... iii KATA PENGANTAR ... iv
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT ... vi
ABSTRAK ... vii
ABSTRACT ... viii
DAFTAR ISI ... ix
DAFTAR TABEL ... xiii
DAFTAR GAMBAR ... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ... xv BAB I PENDAHULUAN ... 1 1.1 Latar Belakang ... 1 1.2 Perumusan Masalah ... 2 1.3 Hipotesis ... 3 1.4 Tujuan Penelitian ... 3 1.5 Manfaat Penelitian ... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 4
2.1 Uraian Landak Laut ... 4
2.1.1 Habitat ... 4
2.1.2 Morfologi dan anatomi ... 5
2.1.3 Klasifikasi kandak laut ... 6
2.2 Kandungan Golongan Senyawa Kimia ... 6 2.2.1 Alkaloida ... 6 2.2.2 Glikosida ... 7 2.2.3 Saponin ... 8 2.2.4 Steroid/triterpenoid ... 9 2.3 Ekstraksi ... 9 2.4 Kromatografi ... 11
2.4.1 Kromatografi lapis tipis ... 12
2.4.2 Kromatografi preparatif ... 12
2.5 Spektrofotometri ... 13
2.5.1 Spektrofotometri sinar ultraviolet (UV) ... 13
2.5.2 Spektrofotometri sinar Inframerah (IR) ... 13
BAB III METODE PENELITIAN ... 16
3.1 Alat-alat ... 16
3.2 Bahan-bahan ... 16
3.3 Pengumpulan dan Pengolahan Landak Laut ... 17
3.3.1 Pengumpulan landak laut ... 17
3.3.2 Identifikasi landak laut ... 17
3.3.3 Pengolahan landak laut ... 17
3.4 Lokasi Penelitian ... 18
3.5 Pembuatan Larutan Pereaksi ... 18
3.5.1 Larutan pereaksiasam klorida 2 N ... 18
3.5.2 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2 N ... 18
xi
3.5.4 Larutan pereaksi Mayer ... 18
3.5.5 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1% ... 18
3.5.6 Larutan pereaksi Liebermann-Burchard ... 18
3.5.7 Larutan pereaksi Dragendorff ... 19
3.5.8 Larutan pereaksi Molisch ... 19
3.5.9 Larutan air kloroform ... 19
3.5.10 Larutan kloralhidrat ... 19
3.5.11 Larutan pereaksi timbal (II) asetat 0,4N ... 19
3.5.12 Larutan pereaksi asam sulfat 50% dalam metanol ... 19
3.5.13 Larutan asam nitrat 0,5N ... 19
3.6 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ... 19
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik ... 20
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 20
3.6.3 Penetapan kadar air ... 20
3.6.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air ... 21
3.6.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol ... 21
3.6.6 Penetapan kadar abu total ... 21
3.6.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam .. 22
3.7 Skrining golongan senyawa kimia ... 22
3.7.1 Pemeriksaan alkaloida ... 22
3.7.2 Pemeriksaan flavonoid ... 23
3.7.3 Pemeriksaan saponin ... 23
3.7.4 Pemeriksaan tanin ... 23
3.7.5 Pemeriksaan glikosida ... 23
3.7.6 Pemeriksaan antrakinon ... 24
3.7.7 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ... 24
3.8 Pembuatan Ekstrak ... 24
3.9 Analisis Ekstrak n-heksana secara KLT ... 25
3.10 Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid Secara KLT Preparatif ... 25
3.11 Uji Kemurnian terhadap isolat ... 26
3.11.1 Uji KLT dua arah ... 26
3.12 Identifikasi isolat ... 27
3.12.1 Identifikasi isolat dengan spektrofotometri UV ... 27
3.12.2 Identifikasi isolat dengan spektrofotometri IR ... 27
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 28
4.1 Hasil Identifikasi Landak Laut ... 28
4.2 Hasil Pemeriksaan Karakteristik ... 28
4.3 Hasil Skrinning Golongan Senyawa Kimia ... 30
4.4 Hasil Ekstraksi ... 31
4.5 Hasil Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid secara KLT Preparatif ... 31
4.6 Hasil Identifikasi Isolat dengan Spektrofotometri UV ... 32
4.7 Hasil Identifikasi Isolat dengan Spektrofotometri IR ... 32
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 34
5.1 Kesimpulan ... 34
5.2 Saran ... 34
DAFTAR PUSTAKA ... 35
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1. Hasil karakterisasi simplisia cangkang dan duri landak laut
Diadema setosum ... 29 4.2. Hasil skrining golongan senyawa kimia simplisia cangkang dan
duri landak laut Diadema setosum ... 30 4.3. Hasil identifikasi isolat secara spektrofotometri inframerah ... 33
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1. Struktur anatomi landak laut .... ... 6 2.2. Struktur dasar steroid ... 9
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Hasil identifikasi landak laut Diadema setosum ... 37
2 Gambar bagan kerja penelitian ... 38
3 Gambar landak laut Diadema setosum segar ... 39
4 Gambar simplisia landak laut Diadema setosum ... 40
5 Gambar serbuk simplisia landak laut Diadema setosum 41
6 Gambar mikroskopik serbuk simplisia cangkang dan duri landak laut Diadema setosum ... 42
7 Gambar bagan pengolahan, skrinning golongan senyawa kimia dan karakterisasi serbuk simplisia ... 43
8 Gambar bagan pembuatan ekstrak n-heksana simplisia landak laut Diadema setosum secara KLT ... 44
9 Gambar hasil analisis ekstrak n-heksana simplisia cangkang dan duri landak laut Diadema setosum ... 45
10 Gambar kromatogram hasil KLT preparatif ... 46
11 Gambar kromatogram hasil KLT dua arah isolat a ... 47
12 Gambar kromatogram hasil KLT dua arah isolat b ... 48
13 Gambar spektrum ultraviolet (UV) dari senyawa isolat a ekstrak n-heksana cangkang dan duri landak laut ... 49
14 Gambar spektrum inframerah (IR) dari senyawa isolat a ekstrak n-heksana cangkang dan duri landak laut ... 50
15 Perhitungan hasil penetapan kadar ... 51
