Pengertian mikroskop - Spada UNS

(1)

1

(2)

Asal kata mikroskop:

 Micro = kecil

 Scopium = penglihatan

Pengertian mikroskop

 Suatu alat yg tdr dr bbrp lensa & tersusun dlm sebuah tabung (mikroskop majemuk)

 Fungsinya utk melihat obyek (objectum=sesuatu yg

diketengahkan) & gerakan halus yg tak teramati olh mata biasa  memperbesar obyek

Penemu: Zacharias Jansen & Antonie van Leewenhoek

(3)

3

(4)

CARA KERJA



Cara kerja:

 Menggunakan cahaya yg ditembuskan ke obyek yg diamati



Hasilnya:

 Bayangan obyek diperbesar

 Daya pisah dipertinggi



Btk proyeksi bayangan

 Terbalik (mikroskop sederhana)

 Tegak (mikroskop majemuk)

(5)

5

(6)

Daya pisah = daya resolusi

 Daya pisah: jarak minimum antara 2 titik yg dpt dibedakan scr jelas sbg 2 titik oleh mata

 Mata manusia yang sehat mempunyai daya resolusi 0,2 mm

 Dgn mikroskop cahaya perbesaran 1000x

memungkinkan mata mns membedakan dua buah obyek yang berjarak satu sama lain sekitar 0,0002 mm (daya resolusi 0,0002 mm)

 Berbagai nilai daya pisah:

 Mata = 0,1-0,2 mm

 Mikroskop cahaya = 0,2 μm

Mikroskop elektron = 0,1 – 6 nm

(7)

7

 Rumus daya pisah:

D : daya pisah

k : konstanta (0,61)

λ : panjang gelombang  λ cahaya putih: 550 nm = 0,550 μm n : indeks bias media pengamatan

α^o : ½ sudut jatuhnya cahaya pd lensa obyektif dr specimen

 Cara memperbesar daya pisah/resolusi:

 Konstanta kecil  dgn pengaturan jarak

 λ kecil  dgn filter/penggunaan sumber cahaya yg λ-nya pendek (misal uv)

 n diperbesar/dinaikkan  dgn pemilihan media mounting preparat

 Memperbesar α^o  dgn memperpendek jarak preparat dgn lensa obyektif

 Mengubah diafragma

λ

D = k --- n sin α^o

(8)

 n sin α^o = Numerical Apertura (NA)

 n (indeks bias) berbagai media:

 Udara : 1,000

 Air : 1,333

 Air laut : 1,343

 Etanol 100% : 1,367

 Formalin: 1,372

 Gliserin 100% : 1,475

 Kanada balsam : 1,547

 Minyak emersi : 1,560

 Daya pisah & NA berbagai lensa obyektif:

 Lensa obyektif 10  NA: 0,25, D: 1,3 μm

(9)

9

PERBESARAN OBYEK/PREPARAT



Lensa obyektif: 4, 10, 40, 100 x



Lensa okuler: 4 – 30 x



Perbesaran lemah

 Obyektif 4 x okuler 10 = 40 x



Perbesaran kuat

(10)



Misal pd lensa obyektif ada tulisan

 40 / 0,55

 160 / 0-2,5



Artinya:

 40 : perbesaran lensa obyektif

 0,55 : NA (Numerical Apertura)

 160 : panjang tabung lensa okuler sampai lensa obyektif (mm)

 0-2,5 : ketebalan gelas penutup (mm)

(11)

11

JENIS-JENIS MIKROSKOP

1.

Mikroskop monokuler & binokuler

2.

Mikroskop stereo

3.

Inverted microscope

4.

Mikroskop fase kontras

5.

Mikroskop fluoresens

6.

Mikroskop elektron

(12)



Mikroskop monokuler & binokuler

 Mrp mikroskop cahaya utk mengamati irisan tipis 2 dimensi (panjang & lebar)



Mikroskop stereo

 Mrp mikroskop cahaya dgn arah sinar dr atas utk mengamati 3 dimensi pd sediaan/preparat semi mikroskopis



Inverted microscope

 Mrp mikroskop cahaya dgn arah sinar dr atas, lensa obyektif di bawah obyek, utk mengamati 3 dimensi pd preparat mikroskopis & preparat yg dpt dibolak-balik

(13)

13

(14)

(15)

15

Mikroskop inverted Mikroskop fase kontras

(16)



Mikroskop fase kontras

 Mrp mikroskop cahaya dgn variasi pengaturan cahaya shg pd preparat dpt memberi variasi gelap & terang sangat kontras  colorless



Mikroskop fluoresens

 Mrp mikroskop cahaya, dgn sumber cahaya yg intensitasnya tinggi

(lampu xenon/mercuri), obyek diberi pewarnaan khusus (pewarna

fluoresens) shg dpt memantulkan warna khas yg diserap olh bag

tertentu sel

(17)

17

Mikroskop flouresens

(18)

(19)

19



Mikroskop elektron

 Sumber energinya elektron

 Gerakan elektron yang dipercepat dalam suatu kolom elektromagnet,

 Dalam suasana hampa udara (vakum), elektron akan berkarakter seperti cahaya, dengan ^λ

100.000x lebih kecil dari cahaya.

 Medan listrik dan medan magnet dapat berperan sebagai lensa dan cermin thd elektron spt pd

lensa optik dalam mikroskop cahaya

(20)

 Ada 2 jenis:

 TEM (Transmission Electron Microscope):

 elektron ditembuskan ke dalam obyek pengamatan

 obyek yang diamati hrs setipis mungkin sehingga dapat ditembus oleh elektron, atau elektron dipercepat secepat mungkin sehingga mampu menembus obyek sampai pada batas tertentu

 resolusi hingga 0,1 nm (= 1 angstrom) atau dgn pembesaran sampai 1.000.000x

 SEM (Scanning Electron Microscope)

 sinar elektron (electron beam) difokuskan di permukaan obyek dan mengambil gambarnya dengan mendeteksi elektron yang muncul dari permukaan obyek

 Obyek tidak perlu diiris ultra tipis

 resolusi hingga 1 nm atau pembesaran 400.000 x

(21)

21

TEM

(22)

SEM

(23)

23

 Berdasarkan sumber energi utk membentuk bayangan:

 Mikroskop cahaya/optik

 Mikroskop elektron

 Berdasarkan jumlah lensa okulernya:

 Mikroskop monokuler: hy 1 lensa okuler

 Mikroskop binokuler: mpy 2 lensa okuler

 Berdasarkan kualitas & kesempurnaan komponennya:

 Student microscope

 Clinical microscope

 Research microscope  utk pengamatan biasa sampai dgn menggunakan mikrochip yg komponennya dpt diganti utk berbagai keperluan sistem pengamatan. Disertai jg dgn adanya layar monitor

(24)



Berdasarkan konstruksi & kegunaannya

 Mikroskop biologi (biological/medical microscope)

 utk mengamati benda tipis & transparan, penyinaran dr bwh

 Mikroskop stereo  utk mengamati benda scr 3 dimensi, mpy 2 lensa okuler & 2 lensa obyektif yg diluruskan. Benda yg diamati dpt tipis, tebal atau transparan

 Mikroskop metalurgi/material  khusus utk

pengamatan permukaan logam/kristal atau benda transparan lain

 Mikroskop berkamera → mikroskop yg dilengkapi dgn kamera utk keperluan dokumentasi

(25)

25

(26)

BAGIAN-BAGIAN MIKROSKOP

1.

Bagian mekanik: semua bag yg tdk

mempunyai fungsi optik  tubus, revolver, sekrup pengarah kasar (makrometer),

sekrup pengarah halus (mikrometer), meja sediaan, pemegang, sendi inklinasi, kaki

2.

Bag optik  lensa okuler, lensa obyektif,

kondensor, diafragma, cermin

(27)

27

(28)

Bagian optik

 Lensa okuler

 Mrp lensa kompleks

 Fungsi: menerima bayangan semu yg terbentuk

 Perbesaran umumnya: 4, 6, 10 x

 Lensa obyektif

 Fungsi: menerima cahaya yg telah menembus obyek shg terbentuk bayangan dr obyek tsb

 Perbesaran umumnya: 10, 40, 100 x  dilekatkan pd revolver

 Obyektif kuat berukuran lbh pjg dr obyektif lemah

(29)

Comparing Powers of Magnification

We can see better details with higher the powers of magnification, but we cannot see as much of the image.

Which of these images would be viewed at a higher power

of magnification?

(30)

What’s my power?

To calculate the power of magnification, multiply the power of the ocular lens by the power of the objective.

What are the powers of magnification for each of the objectives we have on

our microscopes?

Fill in the table on your worksheet.

(31)

31

PERBESARAN OBYEK/PREPARAT



Lensa obyektif: 4, 10, 40, 100 x



Lensa okuler: 4 – 30 x



Perbesaran lemah



Perbesaran kuat

(32)

 Kondensor

 Fungsi: mengumpulkan cahaya yg msk

(dipantulkan olh cermin) & difokuskan ke obyek

 Bag ini dilengkapi dgn diafragma

 Dpt dinaikturunkan dgn sekrup pengendali kondensor

 Diafragma

 Tdp di sebelah bawah kondensor

 Fungsi: mengatur byk sedikitnya cahaya yg msk ke obyek

 Cermin

 Mpy 2 permukaan: cekung & datar

 Fungsi: mengarahkan (menerima &

memantulkan) cahaya ke obyek

(33)

33

Bagian mekanik



Tubus

 Menghubungkan lensa okuler & obyektif

 Ada 2 tipe: yg dpt dinaikturunkan (dgn mikrometer

& makrometer) & yg tdk dpt dinaikturunkan



Revolver

 Mrp penukar obyektif yg dpt diputar

 Fungsi: utk mengganti lensa obyektif dgn cara memutar revolver sedemikian rupa shg sampai terasa berdetik

(34)



Sekrup pengarah kasar (makrometer)

 Fungsi: utk menggerakkna tubus scr kasar shg obyek yg terfokuskan dpt terlihat



Sekrup pengarah halus (mikrometer)

 Fungsi: menggerakkan tubus scr halus & teliti, digunakan jk obyek telah fokus



Meja sediaan

 Ada 2 penjepit utk memegang gelas benda

 Bag tengah berlubang utk lewat cahaya

 Ada sekrup penggerak gelas benda ke depan &

belakang serta ka kanan & kiri

(35)

35



Pemegang

 Mrp tempat utk memegang mikroskop ketika mikroskop diangkat



Sendi inklinasi

 Mrp sendi pd pemegang shg pemegang dpt dimiringkan ke belakang

 Sendi ini menghubungkan alat pemegang & bag kaki



Kaki

 Fungsi: agar mikroskop dpt berdiri kokoh

(36)

LANGKAH2 MENGGUNAKAN MIKROSKOP

1.

Menyiapkan mikroskop

 Mengangkat sebaikna dgn 2 tangan, 1 tangan di pemegang, 1nya di kaki

 Saat digunakan, lengan menghadap tempat

duduk & meja obyek berlawanan arah dgn posisi kita

 Utk perawatan, almari penyimpan diberi silika gel

& lampu  agar tdk berjamur

 Bag optik dibersihkan dgn kain/kertas khusus yg seratnya halus

(37)

Always carry a microscope with one hand holding the arm and one hand under the base.

Base

(38)

2. Tubus dinaikkan dgn makrometer shg obyektif tdk membentur meja bila revolver diputar

3. Revolver diputar pd obyektif terlemah lebih dahulu, tepat di bawah okuler. Ciri telah tepat, akan terasa berdetik

4. Diafragma dibuka sebesar-besarnya dgn cara menggeser bag yg manonjol

5. Cermin diatur shg cahaya terpantul lewat lubang pd meja obyek & terlihat merata terangnya pd lingkaran okuler

 Hindari cahaya matahari langsung

 Pilih lensa cekung jk cahaya kurang kuat

 Jk byk penghalang, jgn menggunakan lensa datar Jk terlalu silau kecilkan apertura diafragma

(39)

39

6. Sediaan diletakkan pd meja dgn dijepit &

diposisikan tepat di bwh lensa obyektif

7. Dgn memperhatikan obyek di samping mikroskop, makrometer diputar shg tubus turun. Jgn sampai lensa menyentuh sediaan (pd bbrp mikroskop biasanya sdh ada alat otomatis utk menghindari hal tsb)

8. Dgn melihat obyek pd lensa okuler, mikrometer diputar utk mencari fokus yg plg baik

9. Mengganti dengan perbesaran lebih kuat

 Revolver diputar sesuai dgn perbesaran yg dikehendaki

 Usahakan pertama kali mencari dgn perbesaran paling lemah jangan langsung perbesaran kuat

(40)

10. Stl itu putar mikrometer utk mencari fokus

perbesaran kuatnya. Walaupun dgn perbesaran lemah fokusnya sdh tepat, bila diganti dgn

perbesaran kuat fokusnya berubah, shg hrs diatur lagi sampai fokus

11. Utk perbesaran 1000x  menggunakan minyak emersi

12. Biasakan mengamati dgn 2 mata, utk menghindari keletihan mata

13. Stl pemakaian, mikroskop disimpan dlm posisi istirahat:

 Posisi cermin tegak lurus

 Meja benda diturunkan sampai maksimal

 Tubus dinaikkan sampai maksimal

 Revolver yg berhadapan dgn meja benda pd perbesaran terlemah

 Sekrup penggeser sediaan hrs rata dgn meja benda