دزی یقودص دیهش یکشزپ مولع هاگشناد یشهوژپ یملع هلجم

(1)

دسي يقٍدص ديْش يكشسپ مَلع ُاگشًاد يشٍّصپ يولع ِلجه

Journal of Shahid Sadoughi University of Medical Sciences

ُرٍد 24 ُراوش ، 3

، دادرخ Vol. 24, No.3, Jun 2016 9315

:ِحفص 276 - Pages: 269-276 261

نیب طابترا یسررب لپ

ی مسیفروم rs401502 C/G

نژ رد هدنریگ

نیکولرتنیا 12

تیتاپه تنوفع و B1 نمزم B

يحلاص يبتجه داشًاٍر دادرْه ،9

يبحه اضر ديس ،2 3*

يلاز اضردوحه ،

4

ُديكچ

ِهدقه

زیسبذّ زًَفػ:

زهلاػ ُصَح رلاىـه صا یىیB

یذخ یىیٌلو مساَػ ِث شدٌه زػا يىوه ٍ زػا خ صا

ِلو ،يهضه زیسبذّ

یذجو صٍشیػ

ٍ سلاَلػَسبذّ ىبًشػ دَؿ

زیسبذّ زًَفػ شیػ سد ُذٌٌو يییؼس سَشوبف هی یٌویا نشؼیػ سد ىبثضیه یىیشًط ِمثبػ .

B

ىذث صا عٍشیٍ یصبؼوبد بی ىذؿ يهضه یَػ ِث زػا

يیوَلششٌیا . 12

زًَفػ یصبؼوبد سد یوْه ؾمً ىآ ُذًشیگ ٍ ،یػٍشیٍ یبّ

ًبكَلخ زیسبذّ

یه یصبث B

فذّ .ذٌٌو صا

يیث ىبجسسا یػسشث ِؼلبٌه يیا لد

ی نؼیفسَه

rs401502 C/G

يیوَلششٌیا ُذًشیگ ىط

12 زیسبذّ ٍB1

.دَث يهضهB

:يسررب شٍر

دسَه ِؼلبٌه يیا سد -

،یذّبؿ هیهًَطDNA

105 زیسبذّ ِث لاشجه سبویث ٍ يهضهB

105 .ذیدشگ جاشخشػا نلبػ دشف

ِث ىَثشه خیبسًَط لد

ی نؼیفسَه یذیسَئلوًَ هس

rs401502 C/G

ؽٍس يػَس ،

PCR-RFLP

.ذؿ یثبی یلاَس

جياتً

خیبسًَط یًاٍاشف:

یبّ

،GG

،GC

یبّ للآ ٍ CC

ٍG

تیسشس ِث ىاسبویث سدC

3 / 53 ،%

41 ،%

7 / 5

ٍ ،%

3 / 73

% ، 7 / 26

% ٍ ٍُشگ سد

تیسشس ِث نلبػ 4

/ 51 ،%

41 ،%

6 / 7 % ٍ 9 / 71

% ، 1 / 28 % .ذیدشگ ِجػبحه عبػاشث

بًآ

ٌؼه فلاشخا ،یسبهآ یبّضیل ی

ٍ سبویث ٍُشگ يیث یساد

ُذّبـه نلبػ ذـً

.

ِجيتً

:یريگ

ٌؼه ىبجسسا ِؼلبٌه يیا سد ی

يیث یساد لد

ی نؼیفسَه یذیسَئلوًَ هس

rs401502 C/G

يیوَلششٌیا ُذًشیگ ىط 12

ٍB1

زیسبذّ ِث لاشثا داذؼشػا ذـً ُذّبـه يهضهB

شظً ِث.

نؼیفسَه یلد يیا ِو ذػس یه زًَفػ ِث لاشثا داذؼشػا سد یوْه ؾمً ذًاَس یوً

.ذؿبث ِشؿاد يهضه ة زیسبذّ

شاٍ

ُ یاّ

:یديلک

زیسبذّ عٍشیٍ

،B

لد ی نؼیفسَه ُذًشیگ ،یذیسَئلوًَ هس

يیوَلششٌیاB1

12 يهضه زیسبذّ ،

1 -

ٌيزگ ،یکشزپ یسبىش سيزیي ذشرا یسبىشربک سيزیي

،یکشزپ مًلع ٌذکشواد ،یسبىش

ٌبگشواد تیبزت

،سرذم نازُت

2 -

ٌيزگ ،یکشزپ یسبىش سيزیي یصصخت یازتکد ،ربیشواد سيزیي

،یکشزپ مًلع ٌذکشواد ،یسبىش

ٌبگشواد تیبزت ذم

،سر نازُت

3 - گ یبَ یربمیب ٌذکشَيژپ ،شراًگ ٌبگتسد یبَ یربمیب یژًلًیمذیپا ي ٍیبپ مًلع تبقیقحت زکزم ،یکشزپ یسبىش سيزیي یصصخت یازتکد ،ربیدبتسا ،ذبک ي شراً

ًلع ٌبگشواد نازُت ،یتشُب ذیُش یکشزپ م

4 - کشَيژپ ،ذبک ي شراًگ یبَ یربمیب تبقیقحت زکزم ،شراًگ صصخت قًف ،دبتسا نازُت ،یتشُب ذیُش یکشزپ مًلع ٌبگشواد ،ذبک ي شراًگ یبَ یربمیب ٌذ

* هفلت ؛)لًئسم ٌذىسیًو(

: 42122432514

، :یکیويزتکلا تسپ [email protected]

:تفبیرد خیربت 2

/ 6 / 1334 :شزیذپ خیربت

26 / 3 / 1334

(2)

270 ييب طابترا يسررب لپ

ي نسيفرَه ( rs401502 C/G ىش رد)

…

ِهدقه زیسبذّ عٍشیٍ زًَفػ زهلاػ نْه رلاىـه صا یىی B

.زػا یهَوػ عبػا شث

ذْث ىبهصبػ سبهآ یًبْخ زؿا

، دٍذح ٍد

شفً دسبیلیه ىبْخ مدشه صا

زیسبذّ زًَفػ بث دسَخشث ِمثبػ اسB

ِشؿاد ذًا ( 1 صا دَخ ِث دَخ عٍشیٍ ُدَلآ داشفا شثوا سد ِچشگا .)

یه فزح ىذث فزح ِث سدبل ىذث ،ىاسبویث صا یٍّشگ سد یلٍ ،دَؿ

زیسبذّ عٍشیٍ زًَفػ ٍ زؼیً عٍشیٍ

صبف ِث دبح صبف صا B

دساٍ يهضه یه

زیسبذّ .ددشگ یسبویث یلكا زلػ يهضه B

یبّ

صا ؾیث .زػا ىبْخ شػاشػ سد يهضه یذجو 360

سد شفً ىَیلیه

ىبْخ شػاشػ صا

زیسبذّ یسبویث يهضهB

ىآ صا یؿبً مساَػ ٍ

یه حًس ذًشث ( 2 .)

یه ُدص يیوخس صا ؾیث ِو دَؿ

35 مشؼه سد ىبیًاشیا ذكسد

سبذّ

زی

ُدَثB

(ذًا 3 بذّ زًَفػ عَیؿ .) زیس

ىاشیا سد يهضهB

يیث 7 / 2

% بس 2 / 7

% یله ِهبًشث صا ذؼث یلٍ دَث شیغشه

شیص ِث ،ىَیػبٌیؼواٍ

2

% (زػا ِشفبی ؾّبو 4

زیسبذّ عٍشیٍ .)

عٍشیٍ ِشػد صاB

یاساد یبّ

ِشؿس ٍدDNA

ا ی بًدبذّ ُداًَبخ صا

عٍشیٍ بًدبذّ َسسٍا غٌخ صا ٍ ُذیشیٍ

ٍ ُدَث زًَفػ يیا بث

عٍشیٍ

یه ِث ذًاَس زلبح دبح زیسبذّ لهبؿ یفلشخه یٌیلبث یبّ

قشث زیسبذّ سدبً رسَك ِث ٍ یذجو يهضه یسبویث ٍ یّبگ ٍ بػآ

(دَؿ نشخ یفخه زیسبذّ

5 ضخ ٍ لیلاد صٌَّ ) ئ

يیا صٍشث ربی

زلبح نؼیًبىه ٍ رٍبفشه یٌیلبث یبّ

ِث زًَفػ ىذؿ يهضه یبّ

یه شظً ِث بها زػا ُذـً ِشخبٌؿ غهبخ رسَك خػبد ذػس

شثؤه

ؾمً داشفا یٌویا نشؼیػ یوْه

سد نبد صبػ ی ىذث صا عٍشیٍ

غىػشث ٍ دساد تخَه یٌویا نشؼیػ تػبٌهبً دشىلوػ

زفشـید

ىذؿ يهضه یَػ ِث یسبویث یه

دَؿ یوؼث ِىٌیا زلػ ٍُلاػ ِث

عبؼح شگید یوؼث ٍ مٍبمه عٍشیٍ ِث داشفا یه شس

ِث اس ذٌؿبث

یه يجسشه داشفا یٌویا نشؼیػ یىیشًط سبشخبػ د

(ذًٌا 6 يیٌچوّ .)

زًَفػ سد ِو دساد دَخٍ یَل هیطَلَیهذیدا ذّاَؿ لهاَػHBV

یصبث زًَفػ ِدیشً يییؼس سد اس یوْه ؾمً ىبثضیه یىیشًط یه (ذٌٌو 7 .) زیوّا یثبؼشوا ٍ یسار یٌویا خػبد ٍد شّ ،زًَفػ غفس سد ٍ ؾّبو ِث شدٌه ِو یٌویا خػبد ٍد شّ سد نششـه قخبؿ .دساد

فزح یشح سدHBV

یه دبح ِلحشه یثبْشلا خػبد سد ضیً ٍ دَؿ

يیبوَشیبػ ،دساد ؾمً عٍشیٍ ذه یه بّ

(ذٌؿبث 8 .) یىیشًط عٌَس

صا ِو زػا ىبؼًا مًَط سد یدبیص ىآ

بّ

یه ِث ىاَس لد ی نؼیفسَه هس

یذیسَئلوًَ

SNP(Single Nucleotide Polymorphism)

بی فزح ،

صبث ذٌچ ؾیاضفا

DIP(Deletion - Insertion Polymorphism)

،

یلاَس یساشىس ُبسَو یبّ

STR(Short Tandem Repeat)

دشو ُسبؿا

یلد ِو نؼیفسَه هس یبّ

حیاس یذیسَئلوًَ

نْه ٍ يیشس يیشس

یلد زػا ىبؼًا مًَط نؼیفسَه (

9،10 ىط .) يیوَشیبػ یبّ

بّ

یلد يیوَشیبػ ذیلَس ثػبث ٍ ذٌشؼّ هیفسَه بث فلشخه یبّ

یگظیٍ

یه یكبخ یبّ

ذًَؿ ( 11 ).

ا يیوَلششٌی 12

ٍد صا ِو زػا شویادٍششّ يیوَشیبػ هی

ذحاٍشیص ٍ P35

ث ِو P40

ِ یذیفلَػ ید ذًَید رسَك نّ ِث

ُذؿ للشه يیوَلششٌیا .زػا ُذؿ لیىـس ،ذًا

12 سدبل ُذؿ لبؼف

لَلػ يیث لدبؼس بس زػا یبّ

ٍ Th1

(ذٌو نیظٌس اس Th2

12 .)

يیوَشیبػ يیا ث

ِ لبؼف یبّطبفٍشوبه صا ُذوػ سًَ

بی ٍ ُذؿ

لَلػ هیسسذًد یبّ

ىذث سد یه حؿشس

ُذًشیگ ِث ٍ دَؿ

دَخ (

IL12 Receptor

) یه للشه ث ٍ دَؿ

ِ ُذٌٌوبملا هی ىاٌَػ

ِث زجؼً یَل یه لوػTh1

(ذٌو 13 يیوَلششٌیا ُذًشیگ .) 12

صا

لَلػ یبّ

،T

،NK

لَلػ بّ

ی یه ىبیث هیسسذًد لىـشه ٍ ذًَؿ

ُذًشیگ ذحاٍ شیص ٍد صا ٍ β1

زػا β2

یسبشخبػ ٍبحل ِث ِو

عًَ يیوَشیبػ یبّسَشذػس ُداًَبخ بث يجسشه (ذٌشؼّ I

13 شیص .)

ذحاٍ

،β2

ىاٌَػ ِث )ُذًشیگ(سَشذػس گٌیلبٌگیػ لبمشًا ُشیدًص

یه ساشل ُدبفشػا دسَه دشیگ

شیص ٍ ذحاٍ

ذًبگیل لبلسا یاشث β1

(زػا نْه سبیؼث 14

ذحاٍ شیص .) يیوَلششٌیا ُذًشیگβ1

12 حٌػ ،

ا ییلابث یه ىبـً اس یذیسَئلوًَ راشییغس ص بث ىبجسسا سد ِو ذّد

یسبویث صا یدبیص سبوؿ ِث لاشثا داذؼشػا (زػا بّ

15 .)

يیا سد شثا ِؼلبٌه لد

ی نؼیفسَه (

rs401502 C/G

ىط سد ) شیص

ذحاٍ

گ B1

ُذًشی يیوَلششٌیا 12

ِث داشفا لاشثا داذؼشػا یٍس شث

زیسبذّ يهضه زًَفػ

ٌو ِؼخاشه ىاسبویث سدB

ىبشػسبویث ِث ُذٌ

لششٌو ٍُشگ بث ِؼیبمه سد ىاشْس یًبملبً

.زفشگ ساشل یػسشث دسَه

يسررب شٍر دسَه عًَ صا ِؼلبٌه يیا -

ًَِوً بث ٍ ُدَث یذّبؿ صا یشیگ

105

ٍ سبویث 105 یًباملبً ىبشاػسبویث ِاث ُذاٌٌو ِاؼخاشه نلباػ دشف

(3)

حلاص يبتجه ي

ىاراكوّ ٍ

271

ىاشْس لبػ یً

یبّ

93 ٍ 94 زفشگ مبدًا .

یًبؼو ىاسبویث ذاًدَث

زیسبذّ ِث لاشجه ِو زاؼس ياػَس ىباـیا یسبویث ٍ ذًدَث يهضهB

( اضیلاا

Diapro Diagnostics, Italy

ىط یاشًآ سَاوح یاشث ) ٍHBs

ذه یدبث یشًآ ىبـًَخ سدHBc

ئبس ذی ِاث نلباػ داشافا ٍ دَاث ُذاؿ

ىط یشًآ شظً صا ِو ذًدَث یداشفا ،لششٌو ىاٌَػ یدباث یاشًآ ٍHBs

ذه ذلبف ٍ ُدَث یفٌهHBc

صا .ذاًدَث یذجو یسبویث یىؿضد ِمثبػ

ربامیمحس ضاوشه یاللاخا ِهبً زیبهس حشً ِث ُذؿ دساٍ داشفا مبوس یسبویث ؽساَگ یبّ

ذجو ٍ .ذؿ ِشفشگ یشـْث ذیْؿ ُبگـًاد

4 یلیه ِشفشگ لششٌو ٍُشگ ٍ ىاسبویث صا یٌیحه لهبو ىَخ ششیل

دبامؼًا ذاه باث ىذؿ ِشخل صا یشیگَلخ یاشث ٍ ذؿ ،سٍبادهEDTA

غذاػ ؽٍس صا ُدبفشاػا باث هایهًَطDNA

Salting out

قیالخس

(ذؿ 16 .) شفبث سد هیهًَطDNA Tris - EDTA

ٍ 20 - یشًباػ داشاگ

خایسًَط يیایؼس زْخ .ذؿ ُشیخر گٌیذیبسًَط ذٌیآشف مبدًا ىبهص بس

ُشیدًص ؾٌواٍ ؽٍس ،داشفا دٍذاحه رباؼٌل یلىؿ ذٌچ صاشویلد یا

(یلَاً ُذًَؿ

PCR - RFLP

بفشاػا دسَاه ) یاشاث .زافشگ ساشال ُد

یباّساضفا مشً صا شویاشد یحاشً

Gene Runner

ٍ

Primer3

ُدبفشاػا

ؽٍس صا ٍ ذااؿ

BLAST

زااؼیص ربااػلاًا یااله ضااوشه زیبااػ

(یسٍبااٌف

http://www.ncbi.nlm.nih.gov

زااْخ ) ئبس

ذاای شااویاشد

یلاَاس .ذاؿ ُدبفشػا ُذؿ یحاشً

لٍذاخ سد باّشویاشد یباّ

1 جسد

زػا ُذؿ .

لٍذخ 1 : ربلخـه دٍذحه شثا بث نیضًآ ٍ بّشویاشد

لپ ي نسيفرَه رويارپ يلاَت

ُدٌٌک دٍدحه نيسًآ يللآ پيتٌَف

-401502 C/G F: 5- CACCAGGACCTAAAAGGGAG -3

R: 5- ATATCAGCGTCGGAACCAAC -3 Eco 471 (Ava II)

G:184 bp C:114 bp+70 bp

100 مشگًَبً

صا ِاو ؾٌاواٍ ىَالخه ِث اس هیهًَط DNA

یٍبح 5 / 2 ه

ٍشىی ل ششی شفبث

Taq DNA polymerase

، 1 ه

ٍشىی

ل شاشی نیضایٌه ذایشلو

MgCl₂)

،) 2 ذاحاٍ

نیضاًآ

(Super Taq

England) Taq DNA polymerase

یاساد زیاكبخ حیحالس

(باٌخ

Proof Reading

) ، 5 / 0 ه ٍشاىی ل شااشی یٍبااح ىَالخه صا

2 / 0 یااالیه سلاَاااه شاااّ صا ٍdNTP

10 لَاااهَىید شاااّ صا

شویاشد یًَیث(

)یثٌَخ ُشو ،ش زػا

داَاه ییباًْ نادح ٍ ِفباها ،

ِاااث شاااٌمه ةآ باااث اس حَااایسٍشىیه ىٍسد ُذاااؿ ىَااالخه 25 ه

ٍشىی ل ششی ِاخشچ مبادًا زاْخ ٍ نیذًبػس ؾٌاواٍ یباّ

)ىبااولآ فسٍذااٌدا(هیسبهَسا شلىیبااػَهشس ُبگشااػد ىٍسد PCR

ِهبًشث .نیداد ساشل اذاشثا :ذؿ ُداد ُبگشػد ِث حشؿ يیذث PCR

ٍا ىَیااػاسَسبًد رذااه ِااث ِاایل

5 یبااهد سد ِاامیلد 94

ِااخسد

یشًبػ ِشؿس ٍد ىذؿ اذخ یاشث داشگ ،زفشگ مبدًا نّ صا DNA

ًَِوً مٍد ِلحشه سد یبهد سد بّ

94 یشًباػ ِخسد یاشاث داشاگ

رذه 45 ِاث باّشویاشد لبلسا یاشث غذػ ٍ ذٌشفشگ ساشل ِیًبث

رذه 35 ِث بهد ،ِیًبث 63

یشًبػ ِخسد سد .زافبی ؾّباو داشگ

ِلحشه

ِشخبػ یاشث مسبْچ ىذاؿ لایًَ ٍ لاوىه ِشؿس ىذؿ

ِشؿس رذه یاشث ُبگشػد یبهدDNA

45 ِاث ِیًبث 72 ِاخسد یشًبػ

لحاشه .ذؿ ُذًبػس داشگ 2

بس 4 یاشث 37 ساشاىس ِاخشچ

یباهد سد ییباًْ ىذاؿ لیًَ ِلحشه ىآ مبوسا صا ذؼث .ذؿ 72

یشًبػ ِخسد رذه یاشث ٍ داشگ

10 لَالحه .ذاؿ مبادًا ِمیلد

ِثPCR

(صسبگآ لط یٍس شث صسَفٍششىلا ؽٍس

PeQ Lab

)ىبولآ ،

1

% شفبااث بااث ُذااؿ ِاایْس

TBE 1X

يیشااگ بااث یضاایهآ گااًس ٍ

(سٍَیٍ

Green Viewer

سبىاؿآ ؾفٌثاشاف سَاً لثبمه سد ) یصباػ

لَااالحه ىآ صا غاااد .ذاااؿ شثلاادٍذاااحه نیضاااًآ باااث PCR

(

Eco 471 (Ava II

ُباگیبخ ِاو صباشٌهشف زوشاؿ ِاث ىَاثشه

اس شظً دسَه SNP

یه ؽشث ؾٌاواٍ دساٍ شایص حشاؿ ِاث ،ذاّد

:ذؿ 10 لَالحه شاشیلٍشىیه یٍباح یًَالخه ِاث اسPCR

2

(شفباث شاشیلٍشىیه

Buffer Red

ٍ ) 4 ذاحاٍ

شثلاادٍذااحه نیضاًآ

Eco 471 (Ava II)

ییباًْ نادح ِاث شاٌمه ةآ باث ٍ ِفبها ،

20 رذااه ِااث ٍ نیذًبااػس شااشیلٍشىیه 16

یبااهد سد زػبااػ

37 یشًبااػ ِااخسد

َىًا داشااگ شااظً دسَااه نیضااًآ ٍ ذااؿ ِااث

ِهبًشث يػَس

NEBcutter(New England Biolabs)

ث ِ زاػد

.ذهآ صسباگآ لط یٍس شاث صسَافٍششىلا باث ضیً یویضًآ نوّ لَلحه

3 شفبث بث ُذؿ ِیْس %

TBE 1X

رباجثا زاْخ .ذاؿ یصبػسبىؿآ

(4)

…

ؽٍس صا لكبح حیبشً زحك

PCR - RFLP

، 10

ًَِوً ذكسد باّ

ٍ ةبخشًا یفدبلس سًَ ِث نیمشاؼه یلاَاس يیایؼس ؽٍس ياػَس

یلاَس .ذًذؿ یثبی

ُداد یسبهآ لیلحس مشً يػَس بّ

ساضفا ِخاؼًSPSS

ٍ مبادًا19

صا ششوو ساذمه 05

/ 0 یٌؼه زاؼس .ذاؿ ِاشفشگ شظً سد ساد یسباهآ

Chi-square

ًَِوً یػسشث زْخ .زفشگ ساشل ُدبفشػا دسَه بّ

جياتً

صا لكبح ِؼٌل لًَ

بث شثاشثPCR

186 باث زفخ (ص

Base Pair

)

ُدَث رسٍبده صا ذؼث ٍ لَلحه

داشافا سد شاظً دسَه نیضًآ بثPCR

(رَااگیصَوّ

) GG

ُصاذااًا بااث ؽشااث ىٍذااث 186bp

داشاافا سد ،

یصٍششّ

گ رَ

( )GC

ؽشث ٍ ُدسَخ ِؼٌل ِػ 184

، 114،70 زافخ

یصبث

ٍ (رَگیصَوّ داشفا سد )CC

ؽشاث ٍ ُدسَاخ 2

ِاؼٌل 114 ،

70 ُذّبـه یصبث زفخ ه

ی دَؿ اؿ سد ِاو لى

یباّ

1 ٍ 2 ىباـً

ُداد

ُذؿ .ذًا

لىؿ 1 : لَلحه صسَفٍششىلا ِدیشً

ُصاذًا بثPCR 186bp هّبچ(

1 بس 4 هّبچ .) 5 هّبچ ٍ یفٌه لششٌو ًَِوً

6 ( ِث ىَثشه Ladder 50bp (Fermentas یه

.ذٌؿبث

لىؿ 2 : صسبگآ لط یٍس شث یویضًآ نوّ لَلحه صسَفٍششىلا ِدیشً

3

% ؼٌل . یویضًآ ؽشث صا لكبح رب یه ُذید لىؿ سد ِو سًَ ىبوّ .RFLP

ُسبواؿ هاّبچ دَؿ

1 (رَگیصَوّ

هّبچ ٍ )CC ُسبوؿ یبّ

2 ٍ 3 (رَگیصٍششّ

ُسبوؿ هّبچ ٍ )GC 4

(رَگیصَوّ

)GG زػا ُسبواؿ هّبچ ٍ 5

لَالحه یٍباح هاّبچ ٍPCR

ُسبوؿ 6 ِث ىَثشه ُسبوؿ هّبچ ٍ لششٌوRFLP

7 ِث ىَثشه Ladder 50bp ا

زػ .

ُذؿ ُداد كیجٌس لششٌو داشفا بث غٌخ ٍ يػ شظً صا سبویث داشفا مبوس صا ٍ ذًدَث 210

ِؼلبٌه دسَه دشف 86

(دشه 43 سبویث - 43 )نلبػ

ٍ 124 ( ىص 62 سبویث - 62 ِو ذًدَث )نلبػ سد ضیً یٌػ غیصَس

ِثبـه ٍُشگ ٍد دَث

( 3 / 0 )p=

فاشحًا ٍ یٌػ يیگًبیه ٍ سبیؼه

98 /

±11 9 / 36 ذكسد ٍ دَث تیسشس ِث ضیً دشه ٍ ىص یًاٍاشف

59

%

ٍ 41

% .ذؿ ِجػبحه خیبسًَط یًاٍاشف غیصَس

بّ

للآ ٍ بّ

زػد ِث ی

سد ُذهآ لٍذخ 2

ِؼلبٌه صا لكبح حیبشً عبػا شث .زػا ُذهآ

، یًاٍاشف خیبسًَط للآ ٍ سد

ٍد

ٍُشگ یساذمه فلاشخا دساد بها ىَهصآ

یسبهآ ث ِ لیلد ندح يییبد ًَِوً

فلاشخا يیث

ٍد گ

ٍُش اس

یٌؼه ساد ىبـً

یوً

ٍ ذّد زیسبذّ ِث لاشجه داشفا يیث ٍ يهضهB

خیبسًَط شظً صا نلبػ داشفا للآ ٍ

IL12RB1

ٌؼه فلاشخا ی

یساد

خیبسًَط یًاٍاشف .دساذً دَخٍ

(یبّ

CC,GC,GG

سد تیسشس ِث )

ىاسبویث 3 / 53

% ، 41

% ، 7 / 5

% تیسشس ِث نلبػ ٍُشگ سد ٍ

4 / 51

% ، 41

% ، 6 / 7

% .دَث ( 851 / 0

;

P-value

للآ یًاٍاشف ٍ ) یبّ

(5)

273

ٍG

تیسشس ِث ضیً نلبػ ٍ سبویث ٍُشگ ٍد سدC

3 / 73

% ، 7 / 26

% ٍ 9 / 71

% ، 1 / 28

% ث .ذهآ زػد ِ

لٍذخ 2 : خیبسًَط یًاٍاشف غیصَس بّ

للآ ٍ بّ

ُذهآ زػد ِث ی

تًَش ا پي )دصرد(راويب دادعت

دّاش دادعت )دصرد(

OR(CI = 0/95) P-Value

56 GG ( 3 / 53 ) 54

( 4 / 51 ) گ

غخشه ٍُش

43 GC ( 41 ) 43

( 41 ) (

8 / 1 - 59 / 0 ) 03 / 1 89

/ 0

6 CC ( 7 / 5 ) 8

( 6 / 7 ) (

2 / –4 45 / 0 ) 38 / 1 57

/ 0

للآ )ذكسد(سبویث داذؼس

ذّبؿ داذؼس (

ذكسد ) OR(CI = 0/95)

P-Value

77 G ( 5 / 73 ) 76

( 9 / 71 ) غخشه ٍُشگ

28 C ( 7 / 26 ) 29

( 1 / 28 ) (

1 / 3 - 85 / 0 ) 6 / 1 14

/ 0

ثحب سَلس ىآ شث یا خػبد ِو زػا زًَفػ ِث ،ىبثضیه یٌو

HBV

لَئؼه نبد صبػ ی يایا لَاً سد یسباویث ضًطَسباد ٍ یاػٍشیٍ

(ذؿبث زًَفػ 17

لَلػ خػبد .) یبّ

ِث ُدَلآ دبح ىاسبویث سد T

اس عٍشیٍ زیمفَه بث ِوHBV

نبد صبػ ی ،ذیذاؿ ،ذًدَث ُدشو

ًبشجؼً يهضه مشف سد ٍ یللخس ٍ لبًَلو یلد يیا ٍ دَث فیؼه

یه ىبـً

ٌو ِو ذّد لَلػ يػَس ِیلٍا زًَفػ لشش

یبّ

ششْثT

ٍ شسشثؤه (زػا 18

ُداد ىبـً فلشخه ربؼلبٌه .) زًَفػ ِو ذًا

ُدَااجً هیااؼوَسَشیبػ دَااخ HBV

تیااػآ ٍ سد یذااجو یبااّ

زیسبذّ يهضه زًَفػ سبچد ىاسبویث ؾٌواٍ ِدیشً سد ،B

یباّ

ىبثضیه یٌویا نشؼیػ لػ

ِی زػاHBV

يیوَشیباػ . ؾامً باّ

ِیلػ عبفد سد یوْه زًَفػ

شایی سَاً ِث ٍ ذًساد یػٍشیٍ یبّ

سَاً ِاث ٍ یًبثضیه خػبد تلبی یَگلا يییؼس كیشً صا نیمشؼه ىبااـً اس دَااخ شااثا عٍشاایٍ شاایثىس سبااْه كاایشً صا نیمشااؼه یه .ذٌّد لد ی نؼیفسَه یه ىط هیدضً بی لخاد سد

ىاضایه ذًاَس

ذّد شییغس اس ىط ىبیث (

20

، 19 يیوَلششٌیا .) 12

یسَاحه ؾمً

هیشحس سد

ٍ خػبد ؽششؼگ یٌویا یبّ

ٌِػاٍ بث یٌویا ٍ Th1

( یلَلااػ يیوَاالششٌیا .دساد )CMI

12 یبااّدشىلوػ صا یاالیخ

یه لبؼف اس یىیطَلَیث یىیطَالَیث راشاثا يیوَشیبػ يیا ٍ ذٌو

یاه ىبـً دَخ فبخ ُذًشیگ ِث لبلسا نحه ِث اس دَخ .ذاّد

يیوَلششٌیا ُذًشیگ 12

لهبؿ للاذح 2

یاضده ذحاٍ شیص ٍ β1

اس لاباث یاجیوشس لیه بث یؼىلذوو نّبث ىبجسسا سد ِو زػا β2

دَخٍ ِث یه دسٍآ ذاحاٍ شایص ِو زػا ُذؿ ُذید . خاػبد سدβ1

يیوَلششٌیا 12

یلَلػ ذیلَس ٍ راشاییغس .زاػا یسٍشاه Th1

لد ی نؼیفسَه ىط سد

يیوَلششٌیا ُذًشیگB1

12 اس ىآ ییباًاَس ، زحس زیػَفٌل ضیبوس ٍ شیثىس سد

ثأس شی یه ساشل (ذاّد 21

، 15 .)

نؼیفسَه یلد ىط سد دَخَه یبّ

12 بث

زػا ُدَث ىبجسسا سد بّ یسبویث صا یداذؼس .

ِو یسبؼلبٌه سد شث

یٍس ثأس شی لد ی نؼیفسَه ىط

12

SNPs;

641A→G, 684C→T, 1094T→C, and 1132G→C)

) شاث

ششوبثَىیبه(لػ ىاسبویث یٍس ُشاو سَاـو سد )غیصَلوشثَس مَی

ِو زػا ُذؿ ُذید ،زفشگ مبدًا لد

ی ناؼیفسَه سد ىط يایا سد

یسباویث يایا ِث داشفا یلاشثا داذؼشػا شثؤاه

(زاػا ُدَاث 21

.)

لَگیه ُشیضخ زیؼوخ سد ىاسبىوّ ٍ بؼیل يػَس ِو یسبؼلبٌه لاشااثا سد داشاافا یااىیشًط یبّداذؼشااػا سد لبااغسشد سَااـو سد باادًا غیصٍشیذااػَشذل ِااو ذااؿ ُذااید ،ذااؿ م

االد ی نااؼیفسَه

(

rs401502

يیوَلششٌیا ُذًشیگ ىط ) 12

سد زیاػبؼح باث B1

ِشفبی .دساد ىبجسسا یسبویث ِث لاشثا خایبسًَط ِاو داد ىباـً باّ

رَگیصَوّ

( 1196GG

شاثاشث سد زهٍبمه لهبػ هی داشفا سد )+

یااه ةَااؼحه یسبااویث (ذااؿ

22

ِااؼلبٌه سد .) يااػَس ِااو یا

Numkung

شااث ىاسبااىوّ ٍ ىبااجسسا سد ُشااو زاایؼوخ یٍس

لد ی نؼیفسَه يیوَالششٌیا ُذاًشیگ ىط

12 یطشالآ باثB1

یباّ

يایا ِو ذؿ ُذید ،زفشگ مبدًا یشػَد الد

ی ناؼیفسَه ىباجسسا

یطشلآ ِث لاشثا شٌخ بث یلخـه (زاػا ِشؿاد یشػَد یبّ

23 .)

ِااؼلبٌه

Takahashi

یٍس شااث يااداط زاایؼوخ سد ىاسبااىوّ ٍ

ىبجسسا لد ی نؼیفسَه شسَهٍشد

12 بثB1

یطشلآ ؾیاضفا شٌخ ِاو داد ىبـً یشػَد یبّ

الد ی ناؼیفسَه

شسَهٍشد 111A/T

- ٍ

C/T

2 - لاشاثا شاٌخ بث یلخـه ىبجسسا

یطشلآ ِث زاػا ِشؿاد یشػَد یبّ

( 24 ).

ٍ بىیسسَاػ رباؼلبٌه

(6)

…

يیاث ىباجسسا ،لیصشث سَـو سد ىاسبىوّ

الد ی ناؼیفسَه ىط سد

يیوَلششٌیا ُذًشیگ 12

B₁

بیسلابه ِث لاشثا سد داشفا زیػبؼح ٍ

(داد ىبـً اس 25

).

یٍس شث ِؼلبٌه لد

ی نؼیفسَه ىط

ِث ،بیًد فلشخه ىبمً سد بّ

شلحٌه یىیشًط شیبخر شًبخ دشف ِث

ِؼهبخ شّ

یسٍبافشه حیبشً ،

ِؼهبخ شّ سد زػا ششْث ٍ ِشؿاد یػسشث یا

سًَ ِث یىیشًط یبّ

یلو سًَ ِث حیبشً غذػ ٍ مبدًا اضده حیباشً صا ٍ دَؿ یػسشث

ُشْث یسبویث شثاشث سد زهٍبمه بی یسبویث زلػ ِث ىذیػس سد ىآ ِاؼلبٌه ىٌَوباس ىاشایا سد .زاؼخ ٍ ُذاًشیگ يایا یٍس شاث یا

یسباویث بث ىآ ىبجسسا .زاػا ِاشفشگً رسَاكHBV

دبٌْاـید

یه غهبخ حیبشً ِث ىذیػس زْخ دَؿ داذاؼس یٍس شث ِؼلبٌه شس

شگید سد ٍ ًَِوً یششـیث نؼیفسَه یلد

شیاؼه سد لایخد یبّ

يیوَلششٌیا 12

.دشیگ مبدًا ،ىآ ُذًشیگ ٍ

ِجيتً

یريگ ِااث عَااخس بااث یبااّ ُداد

ىبااجسسا ،ِااؼلبٌه حیبااشً صا لااكبح

ٌؼه ی نلباػ ٍ سباویث ٍُشگ يیث یساد زاػد ِاث

غایصَس ٍ ذاهبیً

نلباػ ٍ سباویث داشافا يیاث سد یذیبسًَط شمس

ًباجی لاحه ٍ ىباؼىی

لد ی نؼیفسَه بٌه دسَه

یسبهآ شظً صا ِؼل

ٌؼه ی ساد .دَجً

یراسگساپس صا جشخشؼه ِلبمه بد

ىبی

ِهبً

عسذه زیثشس ُبگـًاد زیبوح بث ،

ُذىـٍّظد ٍ ث

یسبوی یبّ

یىاؿضد مَالػ ُبگـًاد ذجو ٍ ؽساَگ

ىبگذٌؼیًَ .زفشیزد مبدًا یشـْث ذیْؿ دَخشث

مصلا ه ی ذًٌاد صا

ضیً ٍ عسذه زیثشس ُبگـًاد یـٍّظد زًٍبؼه ىباٌوسبو

مشاشحه

یًباملبً ىبشاػسبویث ذاجو ٍ ؽساَاگ ربمیمحس ضوشه ُبگـیبهصآ .ذٌیبوً یًادسذل ٍ شىـس ًِبویوك

References:

1- Puri P. Acute Exacerbation of Chronic Hepatitis B: The Dilemma of Differentiation from Acute Viral Hepatitis B. J Clinic Experimental Hepato 2013; 3(4): 301-12.

2- Rossi C, Shrier I, Marshall L, Cnossen S, Schwartzman K, Klein MB, et al. Seroprevalence of Chronic Hepatitis B Virus Infection and Prior Immunity in Immigrants and Refugees: A Systematic Review and Meta-Analysis. PLoS ONE 2012; 7(9): e44611.

3- Vahid T, Alavian SM, Kabir A, Kafaee J, Yektaparast B. Hepatitis B Prevalence and Risk Factors in Blood Donors in Ghazvin, IR. Iran. Hepat Mon 2005; 5(4): 117-22.

4- Alavian SM, Fallahian F, Lankarani KB. The changing epidemiology of viral hepatitis B in Iran. J Gastrointestinal and Liver Dis 2007; 16(4): 403.

5-Tiollais P, Pourcel C, Dejean A. The hepatitis B virus. Nature 1985; 317(6037): 489-95.

6- Dustin LB, Rice CM. Flying under the radar: the immunobiology of hepatitis C. Annu Rev immuno 2007;

25: 71-99.

7- Thursz MR. Host genetic factors influencing the outcome of hepatitis. J viral hepatitis 1997; 4(4): 215-20.

8- Timmer R, Bukh J, Spangenberg HC, Wieland S, Pemberton J, Steiger C, et al. Viral and immunological determinants of hepatitis C virus clearance, persistence, and disease. Proceedings of the National Academy Sci 2002; 99(24): 15661-68.

9- Thursz M, Yallop R, Goldin R, Trepo C, Thomas HC. Influence of MHC class II genotype on outcome of infection with hepatitis C virus. The ENCORE group. Hepatitis C European Network for Cooperative Res Lancet 1999; 354(9196): 2119-24.

(7)

275

10- Thio CL, Thomas DL, Goedert JJ, Vlahov D, Nelson KE, Hilgartner MW, et al. Racial differences in HLA class II associations with hepatitis C virus outcomes. J infectious dis 2001; 184(1): 16-21.

11- Guidotti LG, Isogawa M, Chisari FV. Host–virus interactions in hepatitis B virus infection. Curr Opin Immunol 2015; 36: 61-6.

12- Croxford AL, Kulig P, Becher B. IL-12-and IL-23 in health and disease. Cytokine growth factor Rev 2014;

25(4): 415-21.

13-Gately MK, Renzetti LM, Magram J, Stern AS, Adorini L, Gubler U, et al. The interleukin-12 / interleukin- 12-receptor system: role in normal and pathologic immune responses. Annu Rev immuno 1998; 16(1): 495-521. 14- Watford WT, Moriguchi M, Morinobu A, O'Shea JJ. The biology of IL-12: coordinating innate and adaptive

immune responses. Cytokine & growth factor Revi 2003; 14(5): 361-68.

15-Robinson RT. IL12Rbeta1: the cytokine receptor that we used to know. Cytokine 2015; 71(2): 348-59.

16- Miller SA, Dykes DD, Polesky H. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells. Nucleic acids Res 1988; 16(3): 1215.

17- van Tong H, Bock CT, Velavan TP. Genetic insights on host and hepatitis B virus in liver diseases. Mutation Res / Revi in Mutation Res 2014; 762(0): 65-75.

18- Chisari FV. Cytotoxic T cells and viral hepatitis. J Clinic Investigation 1997; 99(7): 1472-77. 19- Chakravarty R. Host genetic factors in hepatitis B virus infection. Int J Hum Genet 2005; 5(1): 33-6.

20- Cao GW. Clinical relevance and public health significance of hepatitis B virus genomic variations. World J gastroenterology: WJG 2009; 15(46): 5761-69.

21- Akahoshi M, Nakashima H, Miyake K, Inoue Y, Shimizu S, Tanaka Y, et al. Influence of interleukin-12 receptor beta1 polymorphisms on tuberculosis. Human genetics 2003; 112(3): 237-43.

22- Esteves LM, Bulhões SM, Branco CC, Mota FM, Paiva C, Cabral R, et al. Human Leptospirosis:

Seroreactivity and Genetic Susceptibility in the Population of São Miguel Island (Azores, Portugal). PloS one 2014;

9(9): e108534.

23-Namkung JH, Lee JE, Kim E, Kim S, Kim S, Shin ES, et al. Association of single nucleotide polymorphisms in the IL-12 (IL-12A and B) and IL-12 receptor (IL-12Rβ1 and β2) genes and gene-gene interactions with atopic dermatitis in Koreans. J Dermatological Sci 2010; 57(3): 199-206.

24- Takahashi N, Akahoshi M, Matsuda A, Ebe K, Inomata N, Obara K, et al. Association of the IL12RB1 promoter polymorphisms with increased risk of atopic dermatitis and other allergic phenotypes. Hum Mol Genet 2005; 14(21): 3149-45.

25- Sortica VA, Cunha MG, Ohnishi MDO, Souza JM, Ribeiro-dos-Santos ÂK, Santos NP, et al. IL1B, IL4R, IL12RB1 and TNF gene polymorphisms are associated with Plasmodium vivax 54[4alaria in Brazil. Malar J 2012;

11(1): 1.

(8)

ي نسيفرَه (

rs401502 C/G ىش رد)

…

Association between Interleukin-12 Receptor B1 Gene Polymorphism (rs401502 C/G) and Chronic Hepatitis B Virus Infection

Mojtaba Salehi (MSc)¹, Mehrdad Ravanshad (PhD)², Seyed Reza Mohebbi (PhD)^*3, Mohammad Reza Zali (MD)⁴

1,2 Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran.

3 Basic and Molecular Epidemiology of Gastrointestinal Disorders Research Center, Research Institute for Gastroenterology and Liver Diseases, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran.

4 Gastroenterologist, Gastroenterology and Liver Diseases Research Center, Research Institute for Gastroenterology and Liver Diseases, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran.

Received: 24 Aug 2015 Accepted: 17 Dec 2015 Abstract

Introduction: Hepatitis B virus (HBV) infection is a major health problem worldwide and may lead to serious clinical complications, including chronic hepatitis, liver cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. The host’s genetic background in immune system genes is a crucial etiologic factor in progression of HBV infection to chronic disease or clearance of the virus from the body. Interleukin 12 and its receptor (IL12 Receptor) play an important role in the clearance of viral infections, especially HBV. The aim of this study is to investigate the association between interleukin 12 receptor B1 gene single nucleotide polymorphism (rs401502 C/G) and chronic HBV infection.

Methods: In this case control study, genomic DNA of 105 chronically HBV infected patients and 105 healthy controls was extracted. Genotype of (rs401502 C/G) single nucleotide polymorphism was determined using polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method.

Results: The frequency of (rs401502 C/G) SNP for GG, GC, CC genotypes and G, C alleles was %53.3,

%41, %5.7 and %73.3, %26.7 in the chronic patients and %51.4, %41, %7.6 %71.9 , and %28.1 in the control group, respectively. Statistical analysis of the results showed that there was not any significant difference between the case and control groups (p=0.851).

Conclusion: In this study, no association was found between (rs401502 C/G) single nucleotide polymorphism within IL12RB1 gene and chronic hepatitis B virus infection. It seems that this SNP does not play a crucial role in susceptibility to HBV chronic infection.

Keywords: Hepatitis B virus; Single Nucleotide Polymorphisms; IL-12 Receptor B1; Chronic Hepatitis

This paper should be cited as:

Mojtaba Salehi, Mehrdad Ravanshad, Seyed Reza Mohebbi, Mohammad Reza Zali. Association between interleukin- 12 receptor B1 gene polymorphism (rs401502 C/G) and chronic hepatitis B virus infection. J Shahid Sadoughi Univ Med Sci 2016; 24(3): 269-76.

*Corresponding author: Tel: +98 2122432514, email: [email protected]