HASIL DAN PEMBAHASAN Sitotoksisitas Fraksi Ekstrak Lengkeng

Ekstrak metanol daun lengkeng dilakukan pemisahan dengan fraksinasi menjadi fraksi heksan (FH), etil asetat (FEA), dan butanol (FB). Pengujian sitotoksisitas fraksi ekstrak lengkeng diuji dengan MTT assay terhadap sel line

Huh7it-1. Sitotoksisitas tidak terlihat pada FB hingga konsentrasi 160 µg/ml, sedangkan pada FH dan FEA adanya toksisitas pada konsentrasi 80 µg/ml terlihat menurunnya suatu viabiltas sel masing-masing sebesar 46,2 dan 54,8% (Gambar 1). Pengujian FH, FEA, dan FB dengan konsentrasi bertingkat didapat 50% konsentarasi sitotoksisitas (CC50) masing-masing sebesar 73,6; 169,1; dan 522,7 µg/ml.

Aktivitas Antiviral HCV Fraksi Daun Lengkeng

Aktivitas antiviral FH, FEA, dan FB pada konsentrasi 40 µg/ml terhadap HCV strain JFH1-a tidak terlihat adanya infeksi virus yang timbul (Gambar 2). Namun pada konsentrasi 20 µg/ml, FH terlihat infeksi virus lebih rendah dibandingkan dengan FEA dan FB masing-masing sebesar 1,4; 12,3; dan 34,4%. Pengujian FH, FEA, dan FB dengan konsentrasi bertingkat didapat 50% konsentrasi hambatan terhadap virus (IC50) masing-masing sebesar 12,3; 13,1; dan 16,4 µg/mL.

Gambar 2 Uji anti-HCV frakasi ekstrak lengkeng.

Nilai selectivity index (SI) didapat dari hasil CC50 dibagi dengan IC50 masing- masing fraksi dapat dilihat pada tabel 1.

Tabel 1 Nilai selectivity index (SI) frakasi daun lengkeng

Fraksi Nilai CC50(µg/ml) Nilai IC50(µg/ml) Nilai SI

FH 73,6 12,3 6

FEA 169,1 13,1 12,9

FB 522,7 16,4 31,9

Fraksinasi ekstrak metanol daun DL menggunakan pelarut n-heksan, etil asetat, dan n-butanol untuk memprediksi senyawa dari yang bersifat non polar dan semi polar. Pelarut n-heksan merupakan pelarut non-polar yang dapat melarutkan senyawa non-polar, sedangkan pelarut etil asetat dan n-butanol merupakan pelarut semi polar yang dapat melarutkan senyawa semi polar. Senyawa aktif dimungkin- kan besifat senyawa non-polar hingga semi polar yang dilihat adanya aktivitas hambatan terhadap HCV galur JFH1a.

Ekstrak metanol daun DL dilaporkan mengandung saponin, flavonoid, tripernenoid dan steroid, tanin, serta glikosida. Daun DL dilaporkan mengandung berbagai senyawa, yaitu asam elagat, 3,4-O- dimetil asam elagat, (+)- katekin, (-)- epikatekin, etil galat, asam galat, kaempferol, kuersetin, dan kaempferol -3-O-a-L- rhamnoside (Apriyanto 2014). Asam galat, asam elagat, (+)- katekin, dan (-)- epikatekin yang terdapat pada tanin dilaporakan mempunyai aktivitas antiviral Hepatitis C (Wu et al. 2013; Reddy et al. 2014). Hsu et al. 2015; Khachatoorian et al. 2012; Lin et al. 2013 menyatakan selain itu, kuersetin, dan kaemferol yang merupakan dari senyawa flavonoid juga dilaporkan mempunyai aktivitas antiviral Hepatitis C (Gonzalez et al. 2009; Khachatoorian et al. 2012; Bachmetov et al. 2012; Aoki et al. 2014; Belkacem et al. 2014).

KESIMPULAN

Senyawa antivirus Hepatitis C yang terkandung pada daun DL diprediksi lebih dari satu senyawa aktif dengan adanya efek penghambatan pada semua fraksi terhadap HCV.

UCAPAN TERIMA KASIH

Kami ucapkan terima kasih kepada Dr. Takaji Wakita (National Institute of Infectious Diseases, Tokyo, Japan) for providing pJFH-1 and pSGR-JFH1. Peneitian ini didikung oleh Science and Technology Research Partnerships for Sustainable Development (SATREPS) from Japan Science and Technology Agency (JST) and Japan International Cooperation Agency (JICA).

DAFTAR PUSTAKA

Aoki C, Hartati S, Santi MR, Lydwina, Firdaus R, Hanafi M, Kardono LBS, Shimizu Y, Sudarmono P, Hotta H. 2014. Isolation and identification ofsubsubstances with anti-hepatitis C virus activities from Kalanchoe pinnata.

International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 6(2): 211215.

Apriyanto DR, Aoki C, Hartati S, Hanafi M, Kardono LBS, Arsianti A, Louisa M, Sudiro TM, Dewi BE, Sudarmono P, Soebandrio A, Hotta H. 2016. Anti-

hepatitis C virus activity of a crude extract from longan (Dimocarpus longan Lour.) Leaves. Japanese Journal of Infectious Diseases.69(3): 213220. Bachmetov L, Gal-Tanamy M, Shapira A, Vorobeychik M, Giterman-Galam T,

Sathiyamoorthy P, Golan-Goldhirsh A, Benhar I, Tur-Kaspa R, Zemel R. 2012. Suppression of hepatitis C virus by the flavonoid quercetin is mediated by inhibitionof NS3 protease activity. Journal of Viral Hepatitis. 19(2): e81e88.

Balunas MJ, Kinghorn AD. 2005. Drug discovery from medicinal plants. Life Sciences. 78(5): 43141.

Ahmed-Belkacem A, Guichou J-F, Brillet R, Ahnou N, Hernandez E, Pallier C, Pawlotsky J-M. 2014. Inhibition of RNA binding to hepatitis C virus RNA- dependent RNA polymerase: a new mechanism for antiviral intervention.

Nucleic Acids Research. 42(14): 9399–9409.

Calland N, Dubuisson J, Rouillé Y, Séron K. 2012. Hepatitis C Virus and Natural Compounds: A New Antiviral. Viruses. 4(10): 21972217.

Freeman AJ, Dore GJ, Law MG, Thorpe M, Von Overbeck J, Lloyd AR, Marinos G, Kaldor JM. 2001. Estimating progression to cirrhosis in chronic hepatitis C virus infection. Hepatology. 34(4): 809816.

Gonzalez O, Fontanes V, Raychaudhuri S, French SW. 2009. The heat shock protein inhibitor Quercetin attenuates hepatitis C virus production.

Hepatology. 50(6): 17561764.

Gottwein JM, Scheel TKH, Jensen TB, Lademann JB, Prentoe JC, Knudsen ML, Hoegh AM, Bukh J. 2009. Development and characterization of hepatitis C virus genotype 1–7 cell culture systems: role of CD81 and scavenger receptor class B type I and effect of antiviral drugs. Hepatology. 49(2): 364377. Hsu WC, Chang SP, Lin LC, Li CL, Richardson CD, Lin CC, Lin LT. 2015.

Limonium sinense and gallic acid suppress hepatitis C virus infection by blocking early viral entry. Antiviral Research. 118: 139147.

Khachatoorian R, Arumugaswami V, Raychaudhuri S, Yeh GK, Maloney EM, Wang J, Dasgupta A, French SW. 2012. Divergent antiviral effects of bioflavonoids on the hepatitis C virus life cycle. Virology. 433: 346355. Lin YT, Wu YH, Tseng CK, Lin CK, Chen WC, Hsu YC, Lee JC. 2013. Green tea

phenolic epicatechins inhibit hepatitis C virus replication via cycloxygenase- 2 and attenuatevirus-induced inflammation. PLoS One. 8:e54466.

Newman DJ, Cragg GM, Snader KM. 2000. The influence of natural products upon drug discovery. Natural Product Reports. 17(3): 215234.

Pybus OG, Cochrane A, Holmes EC, Simmonds P. 2005. The hepatitis C virus epidemic among injecting drug users. Infection, Genetics and Evolution. 5(2): 131139.

Reddy BU, Mullick R, Kumar A, Sudha G, Srinivasan N, Das S. 2014. Small molecule inhibitors of HCV replication from pomegranate. Scientific Reports. 4:5411.

Shepard CW, Finelli L, Alter MJ. 2005. Global epidemiology of hepatitis C virus infection. The Lancet Infectious Diseases. 5(9): 558567.

Wu Q, Wang L, Yu X, Sun Y, Jinag Y. 2013. Polyphenols from longan leaf and their radical-scavenging activity. International Proceedings of Chemical, Biological & Environmenta. 50: 180185.

EFEK PUPUK ORGANIK TERHADAP SIFAT KIMIA TANAH DAN