MAKROSKOPIK GINJAL DAN HISTOPATOLOGI TUBULUS
PROKSIMAL GINJAL MENCIT (
Mus musculus
L
.
) JANTAN
YANG DIBERI RHODAMIN B
TESIS
Oleh:
RISMA DUMIRI MANURUNG
097008006/BM
PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU BIOMEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2011
MAKROSKOPIK GINJAL DAN HISTOPATOLOGI TUBULUS
PROKSIMAL GINJAL MENCIT (
Mus musculus
L
.
) JANTAN
YANG DIBERI RHODAMIN B
TESIS
Oleh:
RISMA DUMIRI MANURUNG
097008006/BM
PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU BIOMEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2011
MAKROSKOPIK GINJAL DAN HISTOPATOLOGI TUBULUS
PROKSIMAL GINJAL MENCIT (
Mus musculus
L
.
) JANTAN
YANG DIBERI RHODAMIN B
TESIS
Oleh:
RISMA DUMIRI MANURUNG
097008006/BM
PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU BIOMEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
DAN HISTOPATOLOGI TUBULUS PROKSIMAL GINJAL MENCIT
(Mus musculus
L
.)
JANTAN YANG DIBERI RHODAMIN B
TESIS
Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar
Magister Biomedik dalam Program Studi Magister Ilmu Biomedik
Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara
Oleh:
RISMA DUMIRI MANURUNG
097008006/BM
PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU BIOMEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PANITIA PENGUJI TESIS
Ketua
: Dr. Ir. Herla Rusmarilin, MS
Anggota
: 1. dr. Betty, Sp.PA
2. dr. Delyuzar, Sp.PA(K)
i
Rhodamin B merupakan pewarna tekstil yang tidak dapat digunakan sebagai pewarna
makanan, akumulasi didalam tubuh akan menimbulkan gangguan kesehatan. Madu
mengandung komponen bioaktif flovanoid, asam amino, enzim dan vitamin yang
bermanfaat bagi tubuh. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui manfaat
pemberian madu terhadap perubahan kadar ureum dan kreatinin serta makroskopik
ginjal dan histopatologi tubulus proksimal ginjal mencit (
Mus musculus
L.) jantan
yang diberi rhodamin B.
Penelitian ini diuji dengan eksperimen laboratorium menggunakan rancangan
the post
test only control group
. Subyek penelitian adalah mencit jantan (
Mus musculus
L.)
Strain DD Webster, berumur 6-8 minggu dengan berat 25-40 gram, di peroleh dari
FMIPA USU. Subyek dibagi 4 kelompok terdiri dari: P0 (kontrol), P1 (rhodamin B
0,2%), P2 (madu 0,08ml/20gram mencit/hari), P3 (rhodamin B 0,2% dan madu
0,08ml/20gram mencit/hari). Selanjutnya dilakukan uji normalitas dan homogenitas
data, bila data berdistribusi normal dan homogen dilakukan uji ANOVA, bila
(p<0,05) dilanjutkan dengan uji Post hock analisa Benferroni taraf 5% dan bila data
berdistribusi tidak normal dan tidak homogen diuji dengan Mann Whitney.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar ureum pada kelompok P1(R) meningkat
secara bermakna (p<0,05) dibanding P3, P0(R) dan P2(R) dan berbeda secara tidak
bermakna (p>0,05) terhadap kelompok P0, P1, P2 dan P3(R). Kadar kreatinin pada
kelompok P1 dan P3 terjadi penurunan secara bermakna (p<0,05) dibandingkan
kelompok P0 dan P2. Setelah penghentian pemberian rhodamin terjadi peningkatan
kadar kreatinin secara bermakna (p<0,05) terhadap kelompok P1(R) dan P3(R).
Derajat nekrosis tubulus proksimal ginjal berbeda secara bermakna (p<0,05) antara
kelompok rhodamin (P1) dan P1(R) dengan kelompok P0, P2, P0(R), dan P2(R) dan
berbeda tidak bermakna (p>0,05) terhadap P3 dan P3(R). Pertambahan berat badan
tertinggi terdapat pada kelompok P2 (madu) dan terendah terdapat pada kelompok P3
(Rhodamin dan madu).
Pada penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian madu tidak dapat memperbaiki
kadar ureum dan kreatinin serta perubahan makroskopik ginjal dan histopatologi
tubulus proksimal ginjal mencit jantan yang diberi rhodamin B.
ii
Rhodamin B is a textile dyes that should not be used as food coloring, accumulation
in the body which caused several health problems. Honey contains the bioactive
components e.g: flovanoid, amino acids, enzymes and vitamins, which is very useful
to make the body health. The purpose of this research was to determine the usefulness
of honey in changes between the urea and creatinine levels as well as macroscopic
and histopathological renal proximal tubules of male mice (Mus musculus L.) which
had been given Rhodamin B.
This experimental research laboratory with the design of the post test only control
group. The male mice research s subject (Mus musculus L.) Strain DD Webster, aged
6-8 weeks with 25-40 grams, obtained from the Natural Science USU. Subjects were
divided into four groups: P0 (control), P1 (Rhodamin B 0.2%), P2 (honey 0.08
ml/20g mice/day) and P3 (Rhodamin B 0.2% and honey 0.08 ml/20g mice/day). Then,
there were normality and homogeneity tests of data, if the result of research are
normally distributed and homogeneous there will be an ANOVA test (p <0.05)
continued by a Post Hock test with Benferroni analysis of 5%, when the data were not
normally distributed and homogeneous, followed by the Mann Whitney test.
The research s result has shown that urea level in group P1(R) increased
significantly (p<0.05) compared to P3, P0 (R) and P2 (R) and did not significantly
(p>0.05) different between group P0, P1, P2 and P3(R). The Creatinine levels
between group P1 and P3 decreased significantly (p<0.05) compared to group P0
and P2. After the recovery period, the creatinine levels increased significantly (p
<0.05) towards groups P1(R) and P3(R). The renal proximal tubular necrosis degree
was significantly different (p<0.05) between the groups Rhodamin (P1) and P1(R)
with the group P0, P2, P0(R) and P2(R) and did not significantly different (p>0.05)
towards the P3 and P3(R). The highest weight gain was in the group P2 (honey) and
the lowest weight gain was in the group P3 (Rhodamin and honey).
This research has shown that honey could not fix the urea and creatinine levels as
well as macroscopic changes, and renal proximal tubules histopathology of male
mice which had been given Rhodamin B.
iii
Segala Puji dan Syukur Kehadirat Tuhan Yang Maha Kuasa atas berkat dan
kasih-Nya, penulis dapat menyusun tesis ini sebagai salah satu untuk memenuhi
persyaratan dalam memperoleh gelar Magister Ilmu Biomedik, pada Program studi
Ilmu Biomedik di Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara.
Adapun judul penelitian ini Manfaat Pemberian Madu Terhadap Perubahan Kadar
Ureum dan Kreatinin serta Makroskopik Ginjal dan Histopatologi Tubulus Proksimal
Ginjal Mencit
(Mus Musculus
L.
)
Jantan yang Diberi Rhodamin B
iv
Utara yang telah memberi izin penelitian kepada penulis, Ibu dr. Yahwardiah Siregar,
Ph.D selaku Ketua Program Studi Magister Ilmu Biomedik Fakultas Kedokteran
Universitas Sumatera Utara Medan dan seluruh staf yang memberi kesempatan
penulis untuk belajar menambah wawasan pengetahuan. Kepada Pimpinan dan staf
laboratorium Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (MIPA)
Universitas Sumatera Utara, serta Pimpinan dan staf laboratorium Patologi Anatomi
Fakultas Kedokteran USU Medan, yang telah menyediakan tempat dan alat-alat
laboratorium untuk membantu pemeriksaan hasil penelitian tesis ini.
Terimakasih penulis juga kepada Direktur Politehnik Kesehatan Kementrian
Kesehatan Medan, ibu Ir. Zuraidah Nasution, M.Kes yang telah memberi kesempatan
pada penulis untuk menjadi salah satu peserta tugas belajar di Program Magister Ilmu
Biomedik FK USU tahun 2009 serta Ketua Jurusan dan staf jurusan Keperawatan
Politehnik Kesehatan Kementrian Kesehatan Medan.
v
khusus Jurusan Fisiologi (Adri, Melda, Novi, Etty, Sisca, Asfur) yang selalu bersedia
berdiskusi dan saling tukar pikiran, memberikan saran serta masukan sehingga
penulis dapat menyelesaikan penulisan tesis ini dengan baik.
Penulis menyadari bahwa tesis ini masih perlu mendapat koreksi dan masukan
untuk kesempurnaan. Oleh karena itu Penulis berharap adanya kritik serta saran untuk
penyempurnaan tulisan ini. Akhir kata penulis berharap kiranya tesis ini dapat
bermanfaat bagi kita semua dan menambah wawasan bagi yang membaca. Amin
Medan, Agustus 2011
Penulis
vi
Nama
: Risma Dumiri Manurung
Tempat/Tanggal Lahir
: Tebing Tinggi, 11 Agustus 1969
Agama
: Kristen Protestan
Status
: Menikah
Alamat
: Jln. Seroja Permai. Kelurahan Kemenangan Tani
Kecamatan Medan Tuntungan, Medan
Telp/Hp : 08126547643
Pendidikan :
SD RK Bersubsidi Mutiara Gunung Sitoli
: 1976-1982
SMP Negeri 7 Medan
: 1982-1985
SMA Negeri 5 Medan
: 1985-1988
Akademi Keperawatan Depkes RI Medan
: 1988-1991
Akta Megajar IV FKIP Universitas Pattimura Ambon
: 1996-1998
Fakultas Keguruan dan Imu Pendidikan (FKIP) Unpatti : 1996-1998
Fakultas Keperawatan Universitas Sumatera Utara
: 2002-2003
Program Ners Fakultas Keperawatan USU
: 2004-2005
Program Magister Studi Ilmu Biomedik FK-USU Medan : 2009-2011
Riwayat Pekerjaan :
vii
ABSTRAK...
Halaman
i
ABSTRACT...
ii
KATA PENGANTAR...
iii
DAFTAR RIWAYAT HIDUP...
vi
DAFTAR ISI...
vii
DAFTAR TABEL...
x
DAFTAR GAMBAR...
xi
DAFTAR LAMPIRAN...
xii
BAB 1. PENDAHULUAN...
1
1.1. Latar Belakang...
1
1.2. Perumusan Masalah...
7
1.3. Kerangka Konsep...
7
1.4. Tujuan Penelitian...
8
1.5. Hipotesis...
9
1.6. Manfaat Penelitian...
9
BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA
10
2.1. Rhodamin B...
10
2.1.1. Karakteristik Kimia Rhodamin B...
10
2.1.2. Dampak Rhodamin B...
12
2.2. Ginjal...
16
viii
2.3. Madu ...
34
2.3.1. Gambaran Umum Madu...
34
2.3.2. Kualitas Madu
...
36
2.3.3. Kandungan Madu
...
...
37
2.3.4. Mekanisme Proteksi Madu dalam Melindungi Sel Tubulus
Proksimal Ginjal Mencit akibat pemberian Rhodamin B...
39
BAB 3. METODE PENELITIAN...
43
3.1. Tempat dan Waktu Penelitian...
43
3.2. Populasi dan Sampel Penelitian...
43
3.3. Variabel Penelitian...
44
3.4. Defenisi Operasional...
45
3.5. Etika Penelitian...
47
3.6. Bahan dan Alat Penelitian...
47
3.7. Desain Penelitian...
48
3.8. Pelaksanaan Penelitian...
51
3.8.1. Persiapan dan Pemeliharaan Hewan Coba ...
51
3.8.2. Prosedur Pembedahan Hewan Coba...
51
3.8.3. Prosedur Pemeriksaan Kadar Ureum dan Kadar Kreatinin
Darah Mencit...
52
3.8.4. Prosedur Pembuatan Preparat Histopatologi Ginjal
Mencit.. ... ...
54
ix
3.9.4. Histopatologi Tubulus Proksimal Ginjal Mencit...
56
3.10. Analisis Data...
57
BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN...
59
4.1. Hasil Penelitian...
59
4.1.1. Kadar Ureum Darah Mencit (
Mus musculus
L.)...
59
4.1.2. Kadar Kreatinin Darah Mencit (
Mus musculus
L.)...
61
4.1.3. Makroskopik Mencit (
Mus musculus
L.)...
63
4.1.4. Histopatologi Tubulus Proksimal Ginjal Mencit (
Mus musculus
L.)...
65
4.2. Pembahasan ...
67
4.2.1. Kadar Ureum Darah Mencit (
Mus musculus
L.)...
67
4.2.2. Kadar Kreatinin Darah Mencit (
Mus musculus
L.)...
70
4.2.3. Makroskopik : Berat Badan dan Perubahan Warna
Ginjal mencit...
71
4.2.4. Histopatologi Tubulus Proksimal Ginjal Mencit(
Mus musculus
L.)...
74
BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN...
78
5.1. Kesimpulan...
78
5.2. Saran...
79
x
Tabel
Judul
Halaman
2.1.
Syarat Mutu Madu...
37
2.2.
Kandungan Mineral dalam Madu...
38
2.3.
Kandungan vitamin dan mineral dalam madu...
39
4.1.
Hasil rata-rata kadar ureum darah mencit (
Mus musculus
L.)
setelah perlakuan dan masa pemulihan...
60
4.2.
Hasil rata-rata kadar kreatinin darah mencit (
Mus musculus
L.) setelah perlakuan dan masa pemulihan...
62
4.3.
Rata-rata pertambahan berat badan mencit (
Mus musculus
L.)
per minggu (%) setelah perlakuan dan masa pemulihan...
64
4.4.
Hasil rata-rata derajat nekrosis tubulus proksimal ginjal
mencit (
Mus musculus
L.) setelah perlakuan dan masa
xi
Gambar
Judul
Halaman
1.1.
Kerangka Konsep Manfaat Pemberian Madu terhadap
Ginjal...
7
2.1.
Struktur Kimia Rhodamin B...
10
2.2.
Struktur Umum Histologis Ginjal...
17
2.3.
Kortek Ginjal : Aparatus Jukstaglomerular
...
18
18
2.4.
Potongan Korteks Renal...
19
2.5.
Pewarnaan H-E pada bagian Kortek Renal...
21
2.6.
Sel Tubulus ginjal normal dan nekrosis...
22
2.7.
Jejas sel akibat radikal bebas...
29
2.8.
Jejas sel reversibel dan ireversibel...
30
2.9.
Gambaran sel nekrosis...
30
3.1.
Alur perlakuan penelitian...
50
4.1.
Grafik rata-rata kadar ureum darah mencit (
Mus musculus
L.) setelah perlakuan dan masa pemulihan...
61
4.2.
Grafik hasil rata-rata kadar kreatinin darah mencit (
Mus
musculus
L.) setelah perlakuan dan masa pemulihan...
63
4.3.
Grafik rata-rata pertambahan berat badan mencit (
Mus
musculus
L.) per minggu (%) setelah perlakuan dan masa
pemulihan...
64
4.4.
Grafik rata-rata derajat nekrosis tubulus proksimal ginjal
mencit (
Mus musculus
L.) setelah perlakuan dan masa
pemulihan...
67
4.5.
Histologi ginjal mencit kelompok P1 (rhodamin B) dan
P1(R) (pembesaran 400x, nekrosis > 50%)...
75
4.6.
Histologi ginjal mencit kelompok P3 dan P3(R)
(pembesaran 400x, sel tubulus proksimal ginjal normal)...
76
xii
Lampiran
Judul
1
Rekomendasi Persetujuan Etik
(Ethical Clearance)
2
Gambar Histopatologi Tubulus Proksimal Ginjal Mencit
3a
Gambar Pemeliharaan dan pembedahan hewan mencit
3b
Gambar pemeriksaan kadar ureum dan kreatinin darah mencit
3c
Gambar pemeriksaan Patologi Anatomi sel tubulus Ginjal
4
Keterangan melakukan penelitian di Laboratorium Biologi MIPA USU
5
Keterangan melakukan penelitian di Laboratorium Patologi Anatomi
FK USU
6a
Pengolahan hasil uji statistik test Normality kadar ureum, kreatinin,
berat badan dan histologi tubulus ginjal
6b
Pengolahan hasil uji statistik test of Homogeneity of variance kadar
ureum, kreatinin, berat badan dan histologi ginjal
6c
Pengolahan hasil uji statistik test ANOVA Ureum dan kreatinin dan
Post Hoc Test kadar ureum
6d
Pengolahan hasil uji statistik Post Hoc Test kadar kreatinin
i
Rhodamin B merupakan pewarna tekstil yang tidak dapat digunakan sebagai pewarna
makanan, akumulasi didalam tubuh akan menimbulkan gangguan kesehatan. Madu
mengandung komponen bioaktif flovanoid, asam amino, enzim dan vitamin yang
bermanfaat bagi tubuh. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui manfaat
pemberian madu terhadap perubahan kadar ureum dan kreatinin serta makroskopik
ginjal dan histopatologi tubulus proksimal ginjal mencit (
Mus musculus
L.) jantan
yang diberi rhodamin B.
Penelitian ini diuji dengan eksperimen laboratorium menggunakan rancangan
the post
test only control group
. Subyek penelitian adalah mencit jantan (
Mus musculus
L.)
Strain DD Webster, berumur 6-8 minggu dengan berat 25-40 gram, di peroleh dari
FMIPA USU. Subyek dibagi 4 kelompok terdiri dari: P0 (kontrol), P1 (rhodamin B
0,2%), P2 (madu 0,08ml/20gram mencit/hari), P3 (rhodamin B 0,2% dan madu
0,08ml/20gram mencit/hari). Selanjutnya dilakukan uji normalitas dan homogenitas
data, bila data berdistribusi normal dan homogen dilakukan uji ANOVA, bila
(p<0,05) dilanjutkan dengan uji Post hock analisa Benferroni taraf 5% dan bila data
berdistribusi tidak normal dan tidak homogen diuji dengan Mann Whitney.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar ureum pada kelompok P1(R) meningkat
secara bermakna (p<0,05) dibanding P3, P0(R) dan P2(R) dan berbeda secara tidak
bermakna (p>0,05) terhadap kelompok P0, P1, P2 dan P3(R). Kadar kreatinin pada
kelompok P1 dan P3 terjadi penurunan secara bermakna (p<0,05) dibandingkan
kelompok P0 dan P2. Setelah penghentian pemberian rhodamin terjadi peningkatan
kadar kreatinin secara bermakna (p<0,05) terhadap kelompok P1(R) dan P3(R).
Derajat nekrosis tubulus proksimal ginjal berbeda secara bermakna (p<0,05) antara
kelompok rhodamin (P1) dan P1(R) dengan kelompok P0, P2, P0(R), dan P2(R) dan
berbeda tidak bermakna (p>0,05) terhadap P3 dan P3(R). Pertambahan berat badan
tertinggi terdapat pada kelompok P2 (madu) dan terendah terdapat pada kelompok P3
(Rhodamin dan madu).
Pada penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian madu tidak dapat memperbaiki
kadar ureum dan kreatinin serta perubahan makroskopik ginjal dan histopatologi
tubulus proksimal ginjal mencit jantan yang diberi rhodamin B.
ii
Rhodamin B is a textile dyes that should not be used as food coloring, accumulation
in the body which caused several health problems. Honey contains the bioactive
components e.g: flovanoid, amino acids, enzymes and vitamins, which is very useful
to make the body health. The purpose of this research was to determine the usefulness
of honey in changes between the urea and creatinine levels as well as macroscopic
and histopathological renal proximal tubules of male mice (Mus musculus L.) which
had been given Rhodamin B.
This experimental research laboratory with the design of the post test only control
group. The male mice research s subject (Mus musculus L.) Strain DD Webster, aged
6-8 weeks with 25-40 grams, obtained from the Natural Science USU. Subjects were
divided into four groups: P0 (control), P1 (Rhodamin B 0.2%), P2 (honey 0.08
ml/20g mice/day) and P3 (Rhodamin B 0.2% and honey 0.08 ml/20g mice/day). Then,
there were normality and homogeneity tests of data, if the result of research are
normally distributed and homogeneous there will be an ANOVA test (p <0.05)
continued by a Post Hock test with Benferroni analysis of 5%, when the data were not
normally distributed and homogeneous, followed by the Mann Whitney test.
The research s result has shown that urea level in group P1(R) increased
significantly (p<0.05) compared to P3, P0 (R) and P2 (R) and did not significantly
(p>0.05) different between group P0, P1, P2 and P3(R). The Creatinine levels
between group P1 and P3 decreased significantly (p<0.05) compared to group P0
and P2. After the recovery period, the creatinine levels increased significantly (p
<0.05) towards groups P1(R) and P3(R). The renal proximal tubular necrosis degree
was significantly different (p<0.05) between the groups Rhodamin (P1) and P1(R)
with the group P0, P2, P0(R) and P2(R) and did not significantly different (p>0.05)
towards the P3 and P3(R). The highest weight gain was in the group P2 (honey) and
the lowest weight gain was in the group P3 (Rhodamin and honey).
This research has shown that honey could not fix the urea and creatinine levels as
well as macroscopic changes, and renal proximal tubules histopathology of male
mice which had been given Rhodamin B.
! " #$ #
% % $
atar
elakang
& '( ')') *'* ')')
y
')+ ,-.')-(' / '.) ' 0-.12 '(') 3'y
't
' .4(y
')+ 2 '5 4)+ut
'0' 34 ( '5')+ ') ')'( 6') '( 7 8-0 45 49 ')s
1 'tu
0'( ') ')s
-.4 )+( '5 4t
- .5 49 '
t
9 ')y
' 2 '3 ' ,- ): 1( /'.)' 0 '(')') ')2't
0-5 49 't
3'.4s
- +4 .'s
' )'7y
;.<0 'y
')+ 9 '.10 = .'s
'y
')+ 5-z
't
3')t
-(>t
1 .y
' )+ 9 '5us
,1(')5 '9s
1 'tu
*'04)')1 ):1(0- )- ):1(')2 4549 ')-.9 '3 '2
t
0 '(' )')t
-.t
- ):u
*4( '34549 't
3 '.4 ,- ):1( / '.) ')y
' (1 .')+ 0-)'.4( 7 ?- ):1(s
1 'tu
2 .<31( 0 '(')') 3-)+') 0- )'02 45 ( ') /'.)'y
')+ @-.'9 3') ,-.A '.4's
4s
')+'t
,-.2- )+' .19 3'5 '0 0- )40 ,15( ')s
-5 - .'s
-s
- <.')+ 1 ):1( 0 -0 ,-54 3') 0- )+(<)> 10s
4 0 '( ' )')t
- .
s
-,1 :B C <5 5-t
=DEEFG;H 4z
'9 / 't
4= 3((7=DEEIJ78- )'0, '9 ')
z
't
2- /'.)'t
- .9 '3'21 's
tu
2 .<31(0'(')')'t
'u
04)10') ,- .t
1 *1 ') '+'.t
-.5 49 't
5 -,49 0- )'.4( BK'9=y
DE EL J= )'0 1 ) 2- )++1 ) '')z
't
2- /'.) ' 9 ' .us
5'9y
')+ '0 ') 34( <)> 10s
4 3')s
-s
1 '4 3- )+ ') , 't
's y
')+344
z
4)( ') <5 -9 5 -0 , '+'y
')+ ,-.w
- )')+7 K-( ' .')+ 4)4 ,-,- .'2 ' 2 .<3us
-) 0 '( ')')3 ') 0 4 )10') , ')'(y
0- )++1 ) '( ')z
't
2- /' .)'y
' )+ 345' .')+ 't
'u
y
M NOP
t
QO PR SR St
NOTPRt
QU VS WNXQYus
PR Z NR YNOS [ Ns
N\ Pt
PR ] ^ _ `abccd Z NRWNds
M NOd^
X/1988 dan Dirjen Pengawasan Obat dan Makanan (POM) No.00366/
C/II/1990 tentang zat warna berbahaya (Menkes RI, 1985; Ditjend POM
Depkes RI, 1990).
Banyaknya penggunaan zat pewarna rhodamin B dalam masyarakat
terhadap berbagai produk makanan dan minuman adalah disebabkan zat
pewarna rhodamin B memberikan warna yang lebih cerah, lebih praktis, harga
relatif murah dan tersedia dalam bentuk kemasan kecil sehingga
memungkinkan masyarakat yang berpenghasilan menengah ke bawah dapat
membelinya, dapat dimanfaatkan untuk menutupi kualitas produk makanan
yang bermutu rendah yang sebenarnya sudah tidak layak dikonsumsi (Djalil
dkk, 2005; Syah, 2005) serta rendahnya pemahaman pedagang atau konsumen
tentang bahaya yang ditimbulkan zat pewarna tersebut (Utami dan Suhendra,
2009). Winarno (2004) menyatakan, pangan yang mengandung pewarna
rhodamin B memberikan warna merah menyala (mencolok), jika digunakan
dalam bentuk larutan (minuman) cenderung berpendar atau
efg hijf gfk f lkmnwarna tidak pudar terhadap pemanasan (digoreng/rebus) serta banyak
memberikan titik-titik warna karena tidak homogen.
opq prstpq u
s
op vp t wpopry
p q x yz wz{t
uqxxus
|} |s
pr ~ { {t p tu opq z |q orp t |q|tzw pq opr u p t{|vs
out
|t {pt
pp qpqt
rp ou
s
usqp v sp tp opy
zrpwprt
p t |q xpq ozq xz
pt
p rqp rsop tuq p v utzq | t |q | tz wpq {p op ppqpq pqpw |wsvp ps
prs
|{|rt
u |s
osx|rw|rz{z wo pqs
psoup}z {pt
|qp}zpq pt
zopqpr us
tpw
pt
u t|q |tz wpq {pop yp} | t|r p xuv uqx ou {ps
pr p wprt
p z opp q s ~ zxp t|q |tz wpq {p op {rsoz w tp wpq pq u q oz t
ru rz tp t
pqxxps
| {|rt
ut
|rp
s
utp wpq pqr uq xpqw |t}pq xxz vp urz {y |q o sv sus
opqtpq us
pq ¡ sop tuq t |rz {p wpq
z
pt
{|prqps
uq |t
us y
p qx }pqy
pw ouxzqp wpqs
|}p xp u {| prq p
t
|wt
uv w|rt
ps
wp{ps
s
|rpt
wz v ut
wpy
z q u vsq opqs
p }zq |r yw q o |x
s
|rt
p }ppq r |p x|q up opq z u {|q y|tprpq pur ¢ £ ¤¥ ¦ pop wsq |q rps
ut
uqxxu }|r p rqp t|rp w|zqxu
pq opq t|r pt
|r pqx {p op wsq |q r ps
u r|q op £r |st
upt
u t
|rtps
z w xsv sq xpq §¨ ©¨ } ps
ps
|r
t
pt
|r}zpt
opru ª «¬ ª ¨ ®¯¨ ® opq ¯ ° ¨ ©¬± ¬ }p pqy
pq xt
uop w } us
poutpwpq²p uq xxsvp qopq u st} uqx ¶· ¸
t
¹º» ¸s
¸t
¼s
½¾¹¿¼À ¸Á Ât
ý¾¼¿ ¼Ä ¾Ãż Á ÀÃÁƸt
¿¼Át
¸ºÇ»s
ÃƼ ½¼s
Ç ÈºÇɼ Á Àà Á¸À ÈÇ Êº¼Á
s
¼½º¹ À¼ ËÌ Ã½ ƺ ÍÁ¿Ãx
Î ÏÐÐÑÒÎs
à Ƽ ½¼ ¸ÁÉ ½¼Óà Á¼ ļ¿¼ ¿¹» ¸s
ÔÕÎÖÀ×غ×ÀÃÁÃȼ Ⱥ¼Áy
ÄÃ ÀÈÃs
¼½¼ Á ¹ ½×¼ Á ¾¼t
¸Î ׸Á·¼ Ê ¿¼ Á Ê ¸ÀÙ¼y
¼Á× ¿ ¸¸ºÇɸ Äà ½Ç ȼ ¾¼ Á ¼Á¼t
¹ À ¸ Èà ½Ç ļ Äà ÀÈÃs
¼ ½¼ Á ¹ ½×¼Á ËÌ Ã ½Æº ÍÁ¿ Ãx
Î ÏÐÐÑÒ Ú Û ¾¹¿¼ À¸Á  Èà ½s
¸Ù¼t
º¼½s
¸ Á¹×à Á¸º ¿¼ Á ×à Á¹t
¹º»¸ºs
à ½t
¼ Àà ÁÇ Á·Çº º¼ Á ¼ºÉ ¸Ó ¸t
¼s
Àut
¼×à Á¸º ¼ Á ×y
¿ ¼Ä¼t
ÀÃÁÃȼ Ⱥ¼Áy
ºÃ½us
¼º¼Á Ü ÝÞ Ë ½¼ ÁÉ ¹ ÀÎ ÏÐÐ ÖÒs
à ½t
¼ ļ¿ ¼ ¾ÃÅ ¼Á ƹȼt
¸ºÇ» ¿¼Á Àà ÁƸt
ÀÃÁÇ Á·u
ºº¼ Á ÄÃ½Ç È¼ ¾¼Á ׸z
¸y
¼Á× ÈǽǺ ¿¼ Á
t
à ½·¼¿ ¸ ÄÃ½Ç È¼¾¼ Á ļ¿¼ ׸Á· ¼Ê ¿¸ ȼ׸¼ Á ĸà ÊÇ À ¿¼Á º¹½t
ú»y
¼Á× ÀÃÁ¸ ĸ
s
Ë Ý¼ ¸Á××¹ ʼ Á ¿¼Á ß ¸ ¾¹ À ȸÁ× Î àÕÔáÒ Ú â à ÀÈà ½¸¼Á ½¾¹¿ ¼À ¸Á Âs
à Ƽ½¼Äý¹ ½¼Ê¿ ¼Ê¼Àº¹ Á
s
à ÁÉ ½¼s
¸ÏÎÐãÀà Á×¼º ¸ ȼt
º¼ Á» ÃÀǼt
¸ºÇ» À¼t
¸¿¼ Ê ¼À ÑÀ¸ Á××u
¼º ¸È¼t
ºÃ½us
¼º ¼ Á ÀÇ Êt
¸¹ ½×¼ÁËÍÞÛä Î àÕåÔÒ ÚÛ ¾¹¿¼ À¸ Á Â
s
à ȼ ×¼¸ ȼ¾¼ Át
¹º»¸º ¼ Á×y
À¼s
Ǻ ºÃ ¿¼ ʼ Àt
Ç ÈÇ ¾ ¼º¼ Á Àà Á׸ºÇÉ ¸s
¸½ºÇʼs
¸ ¿¼½¼ ¾ ¿¼ Á Àà Á×¼ ʼÀ ¸ Ľ¹» Ãs
¼È» ¹ ½È»¸Î ¿ ¸st
½¸ Èus
¸Î ÀÃt
¼ ȹ ʸs
Àà ¿¼ Á ú»º ½Ãs
¸Ú æ ¸Á· ¼Ê ÀÃ½Ç Ä¼º¼ Á ¹ ½×¼ Á ú» º ½Ãs
¸u t
¼ À¼y
¼Á× Äà ÁɸÁ× Ç ÁÉǺ Àà Á×à Êu
¼ ½º¼Áz
¼t
ç¼z
t t
¹º» ¸ºy
¼ Á× À¼s
Ǻ º ÿ¼ ʼ Àt
ÇÈÇ ¾ ËæÇyt
¹ Á ¿¼ Á è¼ ÊÊÎ ÏÐÐå ÒÚ Þʸ ½¼ Á ¿ ¼ ½¼¾ ºÃ ׸Á·¼ Êy
¼Á×t
¸ Á×׸ ¿¼ Á Äà Á¸Á׺ ¼t
¼ Á º¹ Á»Ã ÁÉ ½¼s
¸ Ľ¹¿Çº ¼Á×y
¿¸Ãº» º ½Ã¸s
¿ ¸ ¸ºÇÉ ¸ ½Ã¼È» ¹ ½È»¸ ¼ ¸½ ¿¼ ½¸ Ƽ ¸½¼ Át
Ç ÈÇ Êus
Àà ½Ç ļº¼ Á Ù¼ºÉ ¹ ½ut
¼ À¼y
¼ Á×t
à ½Ê ¸È¼t
¿¼ ʼ À ÀÃÀÄà Á×¼½Ç ¾¸ ºÃ Äú¼¼Á ׸Á·¼ Êt
íîïðñò óï ô õö õ÷ øð ùï õò úíôù û üîðõýøï øþ ýî þîö øö
y
t
î ðÿ ø ó þy
ø ø ø÷óþÿ ø÷ øï õò ú ùû îþøþ î ÿø÷ ø ï÷óþó
s
ó þ ÿø÷t
øüý øï üî üöî þ ïøïøïõñ÷ó
s
øs
ós
ót
ñý÷ øs
üøs
î÷ îý ót
î÷t
õöõ÷us
ñ÷ó õðóy
øþ ö î ð÷øþÿut
óu
ðîs
ós
î ðus
øïøþs
î ðó þt
îðÿø ó ý ø øs
î÷ îý ót
î÷t
õöõ÷us
ý ðñï ó üø÷ ï øðî þøüîðõýøïø þt
î üý ø
t
øöñðöó øþ üîþï ñþ îþòðøs
óï øþ ð ø õþ ú õöó þ ûs
îðt
øs
øþ øt
ýîïø
t
îð ø øý øþñïóø øþ ðî þò øþt
î ðø øýz
øt t
ñïóï ú ñò ðøþ ûî ð
us
øïøþt
õöõ÷us
üî þî öøöï øþy
ðît
îþó øóðøþ î óþøs
t
îðÿø ó õðî ü ó øóýî ðïø÷ îü óø ýî þóþï ø
t
øþ õðîõü ú í ûs
îï ót
øð ! "ü# ÷# øðó øþï ðîø
t
ó þóþ îï ós
t
øð ! ü # ÷ # øðóú $ ðóî øþ%ó÷s
ñþ ! ûñ øüó þ üîðõý øï øþ
z
øt t
ñïóï øþy
üîþ óþ õïóst
ðîs
ðît
óï õ÷ õü î þ ñý÷ øs
üø ý ø ø ÷ ñüî ðõ÷us
óþÿø÷ øþy
üî þy
îö øöï øþst
ðîs
ñïó øt
ó& øþ óþ&÷ øüøs
ó ý ø øs
î÷ "s
î÷ ý ñ ñót s
îðt
ø üîs
øþ óø÷ ÷ñüîðõ÷us
ú 'þø ó û(î þ
y
ø) ø ðø óï ø÷y
øþ ó øs
ó÷ ï øþ ð ñ øüóþ ú * ( +,- ./0 123 3ûy
ø þ üî ðõýøï øþ ø
s
ó÷ üît
øö ñ÷ ós
üîz
øt t
ñïóï ÿõø øýøt
üîþî ö øö ï øþy
ïî ðus
øï øþ ÷ ñüîðõ÷us
ú ( ó þ ú 4û î ðs
t
ø üî þõðõþï øþ ïît
î ðs
î ó øøþø øþ øþøþò ó ñï ó øþòõö õú5 ð ø÷6û
ùþò ó ñïó øþ üî ðõý øï øþ
s
î þø)øy
y
ø þ ü øüý õ üî þõöø ý ðññïó øþüî þÿø ó ü ñ÷ îïõ÷
y
øþt
ó øï öî ðö ø øy
ø î þ øþ øðø üî üöî ðóïøþ î÷ îïòðñþ þy
øú ø ó ø ø 6! û üîþ îø ýî üö î þò õï øþ ðø óïø÷ öîö ø
s s
î ðt
ø üî üýî ðöøó ïóïî ð
us
øï øþy
ø þ ót
ó üö õ÷ï øþs
îýîðt
óü øs
ø÷øýî þ îðþøøþ ýî þy
øï ót
ï øþïîð øþ:;<< =>
st
?>@ A@B< >C DEFFFGH IJKJL C >@JM N >C >C OJ C P@ =L >s
N< B>@s
P@y
>Q > >@R N;B M N?>@St
>O Nt
N?>B TJBJO BJ >t
J@R JB KPUB;COPt
Ns
N ?P@ =>@ U>?NB>< KPK >Ss
s
PL N@ ==> ?NOP U<JB>@ >@R N ;BM N ?>@ ?>UN <
u
>Uy
>@= ? >O >t
CP< N@ ?J@=Nt
JKJL ?>UN KP UK > =>Ns
P U>@=>@U>?NB><KPK >s s
POPUt
NC >?J HV >?J C PUJO >B >@
s
>< >Ls
>tu y
>@= B>y
> >@R N;BM N ?>@ WA< XV >C >Uy
YZ [\]SEFF E
; Estevinho
YZ [\], 2008) dan telah digunakan sebagai sumber makanan
alami sejak zaman dahulu karena mengandung karbohidrat, vitamin, enzim,
protein, mineral dan asam amino (Suranto, 2007; Bogdanov
YZ [\], 2007).
Mengandung flavonoid, betakaroten, albumin dan bilirubin (Gheldof
YZ [\],
2002), dan terdapat senyawa biologis aktif asam kafeat, asam ester phenethyl
kafeat dan glukon flavonoid yang dapat menghambat proliferasi sel tumor
(Chinthalapally
YZ[\], 1993). Madu mampu menginduksi apoptosis sel kanker
kandung kemih dan menghambat pertumbuhan tumor (Swellam
YZ [\], 2003)
serta proliferasi sel adenokarsinoma ginjal (Samarghandian
YZ [\], 2011).
Madu memiliki efek proteksi yang dapat mengurangi kerusakan sel ginjal dan
hati mencit pada dosis 0,08ml/20g BB (Ratnasari, 2009 ; Dewi, 2010).
^_`_ a
erum
usan
basalah
cdef g
s
geh gi jegkgi fk gt
gs
lghg mdi dnkt
k l dejlhgius
l gs
gngo mdi dn kt
kgi pdek hjq k ik r sfghg o lgi tggt
mdl p dekgi l gfjt
deogfg m mdej pg ogi hg f ge je djl fgi he dgt
kik is
det
g l gheuvhu mkh wki xg n fgi okst
u mgt
u nu wkt
j pj nus
meuhv kl g nwki xgnldiykt
z{ |}~ |} | |}xgi qgiy
g iwfk p dek eoufglkic?
[image:25.612.121.574.300.681.2]^__
erangka
onsep
Gambar 1.1. Kerangka Konsep Manfaat Pemberian Madu terhadap Ginjal
Rhodamin B
Bioaktivasi sitokrom P450
Radikal bebas
(Radical Oxygen Species (ROS)
Stress oksidasi
Peroksidasi Lipid
Kerusakan Sel epitel tubulus
Proksimal ginjal
-Makroskopik (BB,Warna)
-Histopatologi Ginjal :
*Degenerasi Hidrofik
*Nekrosis (karyopiknosis,
karyolisis, karyoreksis)
-Test Fungsi Ginjal :
*Ureum
*Kreatinin
ORAL
Aktivasi NO
(Nitrit Oxide)
Aktivasi SOD
(Superoksida Dismutase)
Meningkatkan
Total Antioxidant
Status (TAS)
Aktivasi Gluthation
Peroxidase (GSH)
VIT E, VIT C, VIT D
Enzim:Diastase, lipase
invertase , peroksidase
Beta karoten, Flavanoid,
Asam fenolik, asam urat
Asam nikotinat
Mineral : Fe, S ,Mg,
Ca,Kalium, Na, Khlor,
Fosfor, selenium
Keterangan :
: MENGHAMBAT
: MEMACU
:
Kandungan Madu
VIT D
Tujuan
enelitian
Tujuan um
um
t
t
t
u
t
s
t
st
t
t
us
t
¡ ¢£¤ ¢£¥¢¦ ¢£§¨© y
ª «¬
Tujuan khusus
¨
t
t
s
t
st
t
t
us
t
®¡ ¢£
¤¢£¥ ¢¦ ¢£§¨©
y
ªs
¯¨¯¨
t
t
s
t
st
t
t
us
t
®¡ ¢£¤¢£¥ ¢¦ ¢£§¨© s
t
ªs
° ®s
© ¨ ±¨
t
t
s
t
st
t
t
us
t
®¡ ¢ £ ¤ ¢£¥ ¢¦¢£§¨ © y
¯ ¨²¨
t
t
s
t
st
t
t
us
t
®¡ ¢ £ ¤ ¢£¥ ¢¦¢£ §¨© s
t
t
u s
°
³´ µ ¶·¸¹ º»¶¼»
t
½¾¸¿ À» Á¸ ½¾ ½¶ ¹½Ã½Á ¸Á»¸ º à ½¶ ¹Á»½t
¿¶¿¶s
»Át
½ º½¹ÁÄÅ ¹ÄÀ¿ ¹¼¿¶Æ ½Çà ½¶¾¿st
ÄÀ ½t
ÄÇ Ä¼¿t
¸ ¸Çus
ÀÁ Ĺſº½Ç ¼¿¶Æ½Çº»¶È¿t
ÉÊ Ë Ì Í ËÌÎ ËÏ ËÌдÑƽ¶·½¶½¶ ¼y
ÿ»Á¿ Á¾ Äà ½º¿ ¶Ò ý¶º½Ã¸Å»Ç½º ½ÓÔ¾ ½Á¿´ Õ´ µ ¶·¸¹º» ¶ ¼»t
½¾¸¿À»Á¸  ½¾½¶¹ ½Ã ½Á¸Á»¸ºÃ ½¶¹Á »½t
¿¶¿ ¶s
»Át
½ º½¹ÁÄÅ ¹ÄÀ¿¹¼¿ ¶Æ½Çý¶¾¿
st
ÄÀ ½t
ÄÇ Ä¼¿ ¸ ¸Çt
us
ÀÁĹſ º ½Ç ¼¿ ¶Æ ½Çº»¶È¿t
ÉÊ ËÌÍËÌÎ ËÏËÌÐ´Ñ Æ½¶·½¶s
»t
»Ç½¾t
¿ ý¹ ÿ »Á¿ Á¾ Äà ½º¿ ¶ Ò Ã½¶ º ½Ã¸s
»Ç½º½ Ö ¾ ½Á¿ ɺ½s
½ À»º¸Ç¿ ¾½¶Ñ´×ØÙØ Ú
ipotesis
Ûà ½ º½¶Ü½½
t
º ½Ã¸t
»Á ¾ ½Ã ½À À»Á¸ ½¾½¶ ¹½Ã ½Á ¸Á»¸ º à ½¶ ¹Á» ½t
¿ ¶¿¶s
»Át
½ º½¹Á ÄŹÄÀ¿ ¹ ¼¿¶Æ½Ç ý¶ ¾¿st
ÄÀ ½t
ÄÇ Ä¼¿t
¸ ¸Çus
ÀÁ Ĺſ º½Ç ¼¿¶Æ½Ç º» ¶È¿t
ÝÊ ËÌ Í ËÌÎ ËÏËÌдÑÆ ½¶· ½¶s
»t
»Ç½¾Ã¿ »Á¿Á¾ Äà ½º¿¶Ò ´×ØÞØ ß
anfaat
àenelitian
á» ¶»Ç ¿
t
¿½¶¿ ¶¿Ã¿ ¾½Á ½À ¹½¶Ã½À ½t
º» ºÂ» Á¿¹½¶¿ ¶ÜÄÁ º ½s
¿¿Ç º¿ ½¾t
»¶· ½¶¼ º½¶Ü½½t
º½Ã¸Ã½¶Ã¿Æ½Ã¿ ¹½¶Â½¾ ½ ¶À»Á¿ º ½¶¼½¶t
½ ¼¿º ½sy
½Á½¹½t
¸¶·¸ ¹º» ¶ ¼¼¸¶½ ¹½¶ º½Ã¸s
» ½¼½¿ ½¶·¿ Ĺſ à ½¶ ½Ç½º¿ ½¾ à ½Ç ½º º» ¶È» ¼½¾ ¹» Áus
½¹½¶ ¼¿¶Æ½Ç ½¹¿ ½t
Á ½Ã¿¹½Ç » ½s
à ½Á¿ À»w
½Á ¶½ Á¾Äýº¿¶ Ò Ã ½¶ Ƹ ¼½ à ½À½t
»Á ¼¸ ¶ ½ ¸ ¶·¸ ¹ À» ¶»Ç ¿t
¿½¶s
»Ç½¶Æut
¶y
½ à ½Ç½º À» ¶¼»º ½¶ ¼½¶ Ľt
âĽt t
Á ½Ã¿s
¿ Ķ½Çã ¹¾¸ Åus
¶y
½ À» ¶¼» ºÂ½¶ ¼½¶s
» ¶y
½ä½ ¿Ľ¹·¿Ü ½¾½¶ ¶ ½Â½t
¿y
½ ¶ ¼ Ç ½¿ ¶ ½ ¶ ¼y
»ÁÀ Ä·»¶Å¿s
T
UST
Rhodam
in
arakteristik im
ia
Rhodam
in
s y
y
y
t
t s
t
t t
tu
[9-(2-
)-6-(
)-3 -
-3-
.
Sinonimnya
adalah
&
No.19,
, .l.
åæçæè é êë ì í
ut
ìîïs
ìî ð ìt
ëìíut
ñìë ìò ìó í ñìî ìë ôõ öõë ÷s
êñóôót
ëìíut
ñ ìë ìò ìs
ìò ö óñíõôë õíóñìñìîî ìt
íóøòö ó ñíõôùóñì úû êí üôýî ñêx
÷þ ååÿ èó ýîñõî ê
s
óì÷ ê íñìs
ì íô ìî êíìt
ø íìî ûêîô ês
ý õèþþ ûêîô ês
êí ýX/1988 dan Dirjen Pengawasan Obat dan Makanan (POM) No.00366/C/
II/1990 menyatakan bahwa rhodamin B termasuk dalam 30 zat pewarna bahan
berbahaya yang tidak boleh terdapat di dalam obat, makanan dan kosmetik
(Menkes RI, 1985; Ditjend POM Depkes RI, 1990).
Rhodamin B merupakan zat pewarna sintetis berbentuk serbuk kristal
berwarna kehijauan, dalam bentuk larutan pada konsentrasi tinggi berwarna
merah keunguan dan konsentrasi rendah berwarna merah terang (Trestiati,
2003; Merck Index, 2006). Termasuk golongan pewarna
basa, dan
terbuat dari
dan
suatu bahan yang tidak
bisa dimakan (Nainggolan dan Sihombing, 1984) serta sangat berfluoresensi
(Merck Index, 2006).
m
pak
Rh odam
in
!"#$ %& ' $ ()*+ #,#&
z
#t
- #)& #y
#& . /() /# #y
#y
#& .s
#$+ #%s
( ,#)#& . $#
s
% /#&#,y
"%s
#0 # .*&#,#& " #0#$ $(- #)& #% /( )/ #.#% $#, #& #& "#&$ %&*$ #&1 2� %s
%s y
#&.$(& ..*&#,#&$(t
! "("(st
)* ,3 %y
#& . "%0 #&4ut
,#& "(&. #&$(t
! "(s
+( ,5 )! 6 !$(t
)%7t
( 0# "% ,(t
# * % / # -#s
%6#t
) #8*&) !"#$%& 't
% "#, #&
y
# "%(/ #/,#&s
s
(&#-#y
! ). #&% ,7t
(t
#+ % ! 0( ,#)(&# ,!&5 #$ %& #s
%s
(&
y
#- # #&! ). #& %,t
( )ut
#$ #t
%$ /#0 "#& #)s
(& 9:* /#& "%7 ;<<<=1 >(& .#&t
( ),!&5#$%& #
s
%&y
# ) ! " #$%& ' "(& .#& ,( "* #u
& 3* )t
( )s
( /*5 7 $(&y
(/#/ ,#& ) !"#$ %& ' /( )/# #y
# 4% ,# "%.*& #,#&s
(/ #.#% +(-#)&# + #"# $ #,#&#&7 ! /#t
$ #*+*& ,! 3$(t
%,1 ? #0 %& % "%"* ,*&. ! 0( @ %& #)&! 9ABBC=y
#&. $ (&#y
t
# ,#& /# -#t
%$/#0 $($#& . /#&# ,y
"% .*& #, #&s
( / #. #% + %.$ (& #t
#u z
#t
+(w
#)& #"#0#$ %& "* 3
t
)%,! 3$(t
% , "#& ,!&5 #$ %& #s
%"#0#$ $ #,#& #& "#+#t t
( )4#"%#, % /#t
+(&..*&##&D #t
+(w
#)& #t
( ,3t
%0t
()s
( /*51>% "#0#$
st
)* ,5 * ) ) ! " #$ %& 't
( )" #+ #t
% ,#t
#& "(&. #&s
(&#-#y
,0! )%& 9E 0="%$ #& ##t
!$,0! )%&t
( ).! 0!& .s
( /#. #%s
(&y
#- # #0!.(& "#&s
%6#t
#0 !.( &y
#& . /()#" # "% "#0#$
s
(&#-#y
! ).#&% ,s
#& . #t
/( )/# ##y
" #& $($%0% ,% )(#,5 %F %t
#s y
#& .t
%&..%u
&5 * , $ (&8#+ #% ,(st
#/% 0#& "#0#$t
* /* "(&.#& 8 #)# /( )% ,#t
#&t
( ) #"#+s
(&y
# -# G(&s
y
#- # "%"#0#$tu
/*y
#& .$(& %$ /* 0 ,#& (6(,t
! ,3 %, "#& $ ($%8
u
,#& ,( ) + #"# $ #&*3 % # 9H* 3 $#y
# "% "#& :* ,#& "#) A BB <=1 I *.#s
(&#-#y
20 ,% 0#t
%&. 9E ?J GE ?
J
KLMN K
t
O P QO RL MPKLSMT UVWX Y RO N KTK S ZT [\Ps
ZTKy
w
Kt
ZLs
Z S\ [ SZ Ls
O ]Kt s
KT ^Kt
L KROPK_` NZT aKRO SZT [\ P NZt
KSM_Ot y
KT^ LZKP[O ]s
Zt
Z _ KQ NZT^K_ KNO KP[O bKs
O RZT^KT ZT cO Ns
Ot
MPL MN V defgh iZT [\ P L KROP K_ OTO KPKT S ZLO PKt
KT R ZT^KT jL M[ZOT`_Z NKPR KTklWUmZbO `nopqrsKPKLOK tuv w xynoozYhi ZSZ L Kj K R KLO QK
s
O _ jZT Z _Ot
OKT \ aOt
MP{Os
Ot
Ks
NZT\T a\PPKT L QMRKNOT i NZ NO _OPOmk| }
_Z SOQR KLO~gggN^ P ^`R KTR Kj K
t
NZTO N S\ _ PKTO LOt
Ks
OP\ Kt
j KR K NZ N SL KT N\ PM{ K U [t
ZLst
ätter, 1999 dalam Wirasto, 2008) sedangkan
pada
hewan percobaan tikus ditemukan bahwa dosis lethal LD
50
per-oral sebesar
887mg/kg, dan dosis terendah sebesar 500mg/kg (RTECS, 2005). Menurut
Parodi
t u vw., (1982), LD
50
per-oral pada tikus 90mg/kgBB. Sedangkan
menurut Singh
t u vw., (1987) LD
50
per-oral pada tikus yaitu lebih besar dari
10,56mg/kgBB dan secara intra vena pada tikus LD
50
sebesar 89,5 mg/kgBB
(Merck Index, 2006). Rhodamin B bersifat karsinogenik dan genotoksik
(Brantom, 2005).
t
y
t
s
x
¡¢ y
t
£ ¤ t
¥¦§§ ¨© ª t s
u
z
y
s
s
t
s
t
t
«y
s
ut
International Agency for Research on Cancer
¬ ® t
¯¡ ¤ª « s
° ° ±
s
t
¡ u t
t
t
t
y
t
t
«s
«
s
± t
s
£ t
« t
¢ u
ª t
us
t
²
t
y
t z
t
£ ¤ ªy
us
y
z
t
£ y
us
t
£ ³ s
t
s
£y
t
´µ¶·¸¹¸º» º ¼½µ¶ ¼ º µ´
u
¶¾º¿ ¶¼¶w
¼½ ¶¼t
µ½s
µÀÁ Àµ½ ¼s
¼¹ à ¼½¿ À¼Ä ¼¶ ÅµÆ ¼½ ¶¼ ÀÁº ¼¶´ ¼º ¼¶¼¶Ç¶¸ ¶È¸¸Ã¾½¼ÃµÉs
µÅµ½t
¿Å µÆ¼½ ¶ ¼t
µºÊt
¿¹ Ë̵½ ÀµÃ¼¼¶ Æ ¼½ ¶¼ ´¼º¼¶ ¼¶
y
¼¶ ¾ ´ µ¶ ¾¾Á¶ ¼º ¼¶z
¼t
Å µ½w
¼½ ¶¼ ´ ¼º ¼¶¼¶ ü¶ ÀÁº¼¶ Å µÆ ¼½ ¶ ¼ ´¼º ¼¶¼¶ ǽĸ ü´¿¶ ÍÉ ¼º¼¶t
µ½¹ ¿Ä ¼t
ü½¿ º ¼½¼º µ½ ¿st
¿º Æ ¼½ ¶¼¶y
¼ ¼¶Â ¼½ ¼ ¹¼¿¶ Î ÇÏÉ Ð ¼½¶¼ ´¼º ¼¶¼¶ ºµ¹¿ Ä ¼t
¼¶ ·µ½ ¼Ä Àµ½ ¼¶µº¼w
¼½ ¶¼s
µÄ¿ ¶¾¾¼
t
¼´Å ¼º ´ µ¶¼½¿º» ü¹ ¼´ Àµ¶ÂÁº ¹ ¼½ut
¼¶Ñ ´¿¶Á´¼¶ Æ ¼½¶¼ ´µ½ ¼ÄÀµ½Å µ¶Ã¼½ ¼
t
¼u
» ÇÒÉ Í¼¶y
¼º ´ µ´ À µ½¿º ¼¶ ¿t
t
¿º Ót
¿t
¿º Ƽ½¶¼ º ¼½ µ¶¼t
¿Ã¼º ĸ ´¸ ¾µ¶ Çs
µÅ µ½t
¿ Å ¼Ã ¼ º µ½ ÁÅ Áº ü¶ µs
Å Á¼½É » ÇÔÉ Õ Ã¼s
µÃ¿º¿t
½ ¼s
¼ Å ¼Ä¿t
Çt
µ½ut
¼´ ¼ Å ¼Ã¼s
¿½ ÁÅ» ¹ ¿ ´ Á¶É » ÇÖÉ ×µ¶ ¾¾¸½¸º ¼¶t
µ½¼s
¼ ¾¼t
¼¹s
µt
µ¹¼Ä ´µ¶¾º¸ ¶ÊÁ´s
¿´¼º ¼¶ ¼¶t
µ½s
µÀÁ » ÇØÉÍ µ½À¼u t
¿Ã¼º ¼¹ ¼´¿s
µs
Á¼¿´¼º ¼¶ ¼¶¶y
¼ » ÇÙÉ Ú¼¼t
ÿ ¸¹¼Ä»t
¼Ä¼¶t
µ½Ä ¼Ã¼Å ŵ´ ¼¶¼s
¼¶ Ç Ã¿ ½µÀÁÊ Ñ ¾¸ ½ µ¶ ¾w
¼½¶¼t
¿ üº Å Áü½É» ÇÛ ÉÜ ¼½¾¼¶y
¼´ Á½ ¼Ä» ·¸ ¶Â¸ Ä ¶y
¼Î ļ½¾¼s
¼us y
¼¶ ¾Ä¼¶y
¼Ã¿ Ý Á¼¹ à µ¶ ¾¼¶ Ä ¼½ ¾¼Þßß½ ÁÅ¿¼ÄÅ µ½À¸ ¸¹Çп¶¼½ ¶¸»Òßß ÖàڼĻy
Òßß ØÉ ËÕ ¹ ¼
s
¼¶ Å µ¶ ¼´ À¼Ä ¼¶z
¼t
Å µÆ¼½¶ ¼ Å ¼Ã¼ ´¼º ¼¶¼¶ À¿ ¼s
¼¶y
¼ ¼Ã¼¹¼Ä Á¶Â Áº ´µ´ Àµ½¿ º µs
¼¶ ´µ¶¼½¿º À¼¾¿ º¸ ¶ÊÁ´µ¶à ´µ¶ÁÂu
Å¿ º Á¼¹ ¿t
¼s y
¼¶ ¾ ½µ¶Ã¼Ä ü½¿s
âãäå ãæç
s
èç äés
ãêëçìãt
ã äíçt
çç îs
y
çîïç èçæ ç èçz
çt
æ ãðç äîççåç êé ñèçäés
ãïé ìã
s
ãòçt
ç î ó ãå çs
æ ãðç äî çs
é îô ãt
éì äòõ èçêé î öt
é èçì èéæ ãäì ãîç îìçî èéìõ î÷ ë ês
é ìçäãîç íëì çî æãð çäîç êçì ç îç î èç îs
ç îïçt
í ã äíç òççy
íçïé ì ãs
ãòçt
ç îõå ãòì çä ãîçétu
æ ãðç äî ççåç êéêãäëæçì ç îæéå é òç îy
çîït
ãäíçé ìøùú ùú û
injal
ùú ùúüú ý
nat om
þi dan
istologi
ûinjal
ÿé îóçå
t
ãäå ãt
çì æçèç èéî èé îï æõ÷t
ãäé õä çí èõ êãî èé èç ãäç ò åë êíçå ñ èés
ãí ãå ç ò ì ç îçî èç î ìéäé
t
ëåç îï í ãå çì ç îï èéíë îïìus
åçæés
ç î åãêçìñ èé í ãå ç ìçîï æ ãäét
õ îéë ê äéãèçîé ås
õ îñ ø ÿéîóçå ê ãäëæçìç îs
ãæ çs
ç îïõäïç îy
ç îï í ãs
çäñ íãäíãîôëìs
ãæãät
é ìççîï èãîïç îw
ç äîç ì ãê ã äç òç îø õ÷ éés
òçt
é êãîy
ãíçíìç î ïé îóçå ìç îçît
ãäå ãt
çì
ê åãíéò äãîèç ò èé íçîèéîïìçî ïéîóçå
ìé äé ø çéîï
s
êçs
é îï ïé îóçå êãêé åé ìé í ãäçt
ï äç ê èãîïç î ëìëäç îæç îóç îï êñ åãíçä êñ èçî
t
ãíçå ê ÿç ät
îã ä èç î éçtt
ñ øãäêëìçç î ïéîóçå åééî èç î
t
ãäèçæ çt
èé èçåç ês
ëçtu
ìçæ÷ ëåy
çîï èéì ãåéå é îïéå ãêçìæ ãäé îãäéìèçîç
s
éçÿãäõ ôç òçîèäçs
õ êçèç îå éãñøö éåçêçss
çïé îóçå ê ãêí ã
s
çäñ éîé èét
çîèçé æ ãäï ããäç îs
å ãêçì èés
ãìéç ät
ïé îóçå ãîèé èç î çäìë êñ ø éés
êãèéçå ïé îóçå í ã äí ãîôëì ãìë îï èçîs
és
é å çt
ãäç å îçy
ãêíë îïø éés
ãìë îï ê ãèé çå òé åë ê ïé îóçå ê ãäëæçìç ît
ãêæçt
êçs
ëì îy
çs
ç äçñ ì ãåëç ä êç
s
ëì îy
ç æãêíëå ëò èç äç ò èç î æãêíëåë ò å é êçñs
ãät
çì ãåëç äîçy
y t
t s
y
t
s
t
y
t
t
s
y t
t
us
tus
t
us
tus
st s t
t
t
t s s
s
us y
st
t
t
tus
t
us
t
s
y
s
t s
t
s
y
t
us s
s
t tut
y
s s
t
t
us
s
s
t
t t
s s
s s
t s t u
t
et al.
us
us
t
s
t
s
t s
s
t
us
tus
us
tus
t
us
tus st
y t
y
t
us
t
us
s
s
s
y
s
y t
s
s
y
m,
[image:37.612.149.519.455.677.2]membentuk suatu
brushborder
yang menambah luas permukaan penyerapan
(Guyton dan Hall, 2007; Junqueira dan Carneiro, 2007). Karena selnya besar,
setiap potongan melintang tubulus proksimal hanya mengandung 3-5 inti
bulat, biasanya terletak pada pusat sel. Pada hewan hidup, tubulus proksimalis
memiliki lumen lebar dan dikelilingi oleh kapiler peritubular. Tubulus
kontortus proksimal berfungsi dalam mengabsorbsi kembali zat-zat yang
tersaring misalnya albumin, protein kecil dan non protein seperti karbohidrat
(Leeson
et al.
, 1996)
.
Pada sajian histologi
brushborder
tampak tidak teratur
dan lumen kapiler peritubular sangat mengecil atau kolaps (Junqueira dan
Carneiro, 2007; Leeson
et al.
, 1996).
t
t
us
! " #s
#$ %#t
#t
&#'# #$ !# '#$ $( #$t
&#' #
t
! ) * #$y
# +# (y
#$ % "" '#& #$t
us
" $ %# #"t
s
,s
t
" # #$ " #t
#$st
y
#$ % #s
$( #! !t
us
,s
st
"t
#$!t
# ( + $(u
$ ' #$ #s
#" %#$ , " #" #$ " # #$ " #t
#$s
- ## + (+,s
#$tu
#' #s
t
" . /01 #$ %y
t
$%% $t
" $'
t
! + #s
#t
#u
"$%# ( + #$( ! #$23 ( #$et al.,
41156)7
us
$(tus
!"#s
#$8ut s
#% # #$! #&$ ) 9$!# &$#' # #&
st
( $(U terdiri atas ruas tebal desenden, dengan str uktur
yang sangat mirip tubulus kontortus proksimalis, sedangkan ruas tipis
desenden, ruas tipis asenden, dan ruas tebal asenden, yang strukturnya sangat
mirip tubulus kontortus distal. Di medula bagian luar, ruas tebal desenden
dengan garis tengah luar sekitar 60 m, secara mendadak menipis sampai
sekitar 12 m dan berlanjut sebagai ruas tipis desenden. Lumen ruas nefron ini
lebar karena dindingnya terdiri atas sel epitel gepeng yang intinya hanya
sedikit menonjol ke dalam (Junqueira dan Carneiro, 2007).
t
t t u s s
y
t
s
s
s
et al.
s
st
t
us
t
us st y
y s
s t
t
t
s
t t
s t
us
brushborder
s
t
us st t
t
t
brushborder,
s
t
us st
s
s t
us st
t
us
t
y s
t
us st
t
us
s
y
t
us
t
t
t
s
s t
us st
t
us
st
y
s
s
t
y
s t
y
st
t
us
t
us
st
s
yt
t s y
s
s t
us
t t
yusuty
s t u
t
s
t
us
s t
us y t
t
t
t
t
s tu
us y
t
us
s
et al
t
s t t
us
;
B=kerusakan awal iskemik
(reversibel); C=Nekrotik sel epitel (irreversibel)
:; <=>; ?@ A <
t
B<; =<Cu
=t
= >B>:B<C=D =E FG= Es
BHu
> I=J =<t
B<;; EK B <ILDM I= <;s y
=E FDB<H=I=EGB=
t
=s
? =I=>GL <t
BGN @A<t
B<; LI= OB< BEFIL>B <M Ius
> B<M := G= EC=D=EF P C=D= E F= <t
B<; ;EK B<I LDMI=<;s
@ QB?=E FG= E : B>DM IM J?=<= J D=I; GE=y
= ?= I=JRB E= <BE= I;s y
= E FDB <>M= <=GBRBE=C= R=;EOB <; L<@S B<
s
= <= O= E F;EH= I DB<=s
=I ?= <; :IBGNus s
;>:=;GMt
s
<BE= I;s
?=Et
B<s
BD=<s
B:=EH=E F C=D= E F PC=D= E F =<
t
B <; RBE= <BE= I;s
@ Q B<= DMK =OB<BE =E Fy
DB<H =I=E > BI=IM; :IBxus
<BE=I;s
>=s
M G GB >B?M I=s
:;E=I;s
> BI= IM; EB<vus t
L<= G=I;s
X,
XI, dan XII. Sifat inervasinya adalah vasomotor untuk pembuluh-pembuluh
darah (Junqueira dan Carneiro, 2007).
TU TU TU V
isiologi
Winjal
XY Z[\
t
]^Y_t
[\ X`a` Z Zb`s
c` a`\` Xd e[^f`^ g`\` Y ^Yh ]\ f`^Ys
c[ c [^f`t
i\ `Y\h g`Y \`^Y^ j [\s
[b ib `\a`^_ [s
[Yck`^ f`^]l c] jY_mni^queira dan Carneiro, 2007).
Ginjal merupakan alat tubuh yang strukturnya amat rumit, berperan penting
dalam pengelolaan berbagai faal utama tubuh. Beberapa fungsi ginjal :
1. Regulasi volume dan osmolalitas cairan tubuh
Bila tubuh kelebihan cairan maka terdapat rangsangan melalui arteri karotis
interna ke osmoreseptor di hipotalamus anterior. Rangsangan tersebut
diteruskan ke kelenjar hipotalamus posterior sehingga produksi hormon
anti diuretik (ADH) dikurangi dan akibatnya diuresis banyak.
2. Regulasi keseimbangan elektrolit
Untuk mempertahankan homeostasis, ekskresi air dan elektrolit seharusnya
sesuai dengan asupan. Jika asupan melebihi ekskresi, jumlah zat dalam
tubuh meningkat. Jika asupan kurang dari ekskresi, jumlah zat dalam tubuh
berkurang.
3. Regulasi keseimbangan asam basa
Ginjal turut mengatur asam-basa, bersama dengan sistem dapar paru dan
cairan tubuh, dengan mengekskresi asam dan mengatur penyimpanan dapar
cairan tubuh.
4. Ekskresi produk metabolit dan substansi asing
opq rstu vwxo
t
q rq ryzowq v wxot
q rs{ s{tu oops
|wot
yz owqos
op r|v } xot
tu ~wsz |v ovq w ~ xp xoo r xps}sq r ys
x~xwt
q q}q w|qrtu zor p xt
o s}qt
zowq xwo oq swp sr q r o } pxp |or o ry
o vt
sv q r zo rz
ot
oqrs
}oqrroy
y
o r zq ~wsz |v q s}x
t
|| ot
ou
~ xrxw roorus
x~ xwt
q ~ xst
qs
qzou sot
sot
or zorp ovo rort
opo or |r
s
qxrzsvwq ro ow
t
qs
q~os
q zo }op xwqt
w s~sqxs
qs
; Ginjal mengsekresi eritropoietin, yang
merangsang pembentukan sel darah merah. Salah satu rangsangan yang
penting untuk sekresi eritropoietin oleh ginjal ialah hipoksia.
b. Pengatur tekanan arteri; Ginjal berperan dalam mengatur tekanan arteri
jangka panjang dengan mengekskresi sejumlah natrium dan air. Ginjal
juga mengatur tekanan arteri jangka pendek dengan mengsekresi faktor
atau zat vasoaktif, seperti renin yang menyebabkan pembentukan
produk vasoaktif (misalnya angiotensin II).
6. Pengaturan produksi 1,25-dihidroksi vitamin D3
Ginjal menghasilkan bentuk aktif dari vitamin D, yaitu 1,25-dihidroksi
vitamin D3.
7. Sintesa glukosa
s
s
t
st
s
s
s
t
us
s
t
t
t
u
s
¡ ¢ s
£ s
t
t
s
¢ t
u
y
t
s
¤
t
s
t
s
us
us
¥ y
s
t
¦§y
s
¨
s
t
t
¢ s
t
s
y
u
©ª « ¬ ¥Blood Urea Nitrogen
t
©¨yt
® ¥¯°°±«
t
u
t
©Blood Urea Nitrogen/
ª«¬ s
t
s
u
²t
s
t
y
s
tu
¢ s
tu
z
t
y
tu s
t
¤
t
¥
y
£ t
« us
s
t
£t
©¨yt
® ¥¯°°± ³ u
y
t
t
s
t
t
s
t
y
t
s
©´ x
y
¥¦µ¶·º» ¼½¾ ½¿¼
s
»½ ÀÁs
¼Â ÿÃÄÁy
À º À ÀŠÿ» Á ż ÀÂû Æ»Ât
¿Às
» ÇÂ È Å¼¿ÃÂus
ºÀÁ żÁ»Áǽ Àt
Áy
À ½ÀºÀ¿ ½¿¼Àt
»Á» Á ºÀÂÀÅ ºÀ¿ÀÄ Å ¼¿ÃÉÀ½ ÀÁ » Á º»½ Às
» ¿us
À½ ÁÀy
Æ ÃÁÇs
»Ç» ÁÊ ÀÂË Ì Àº ÀÄ ¼w
ÀÁżÁÍ»t
½ÀºÀ ¿ÁÈ ¿Å ÀÂÎ Ï ÐÀÁÑ À ¿ÀÒÓÔÕ28,3 mg/dl
dan kreatinin antara 0,30
1,0 mg/dl (Malole dan Pramono, 1989).
Ö× Ö×Ø× ÙÚ
krosis Tubular
ÛÜut
ÝÙÞ Ûßà
roses
á Úgenerasi dan
ÙÚkrosis S
el
Sel adalah unit terkecil yang menunjukkan semua sifat dari kehidupan.
Aktifitasnya memerlukan energi dari luar untuk proses pertumbuhan,
perbaikan dan reproduksi. Ketika mengalami stres fisiologis atau rangsang
patologis, sel bisa beradaptasi mencapai kondisi baru dan mempertahankan
kelangsungan hidupnya. Namun bila kemampuan adaptif berlebihan sel
mengalami jejas. Dalam batas tertentu bersifat reversibel dan sel kembali ke
kondisi semula. Stres yang berat atau menetap menyebabkan cedera
ireversibel dan sel yang terkena mati (Cotran
et al.
, 2003).
Penyebab cedera sel : deprivasi oksigen, infeksi, reaksi imun, defek
genetik, ketidakseimbangan nutrisi, obat-obatan dan bahan kimia (Robbins
et
âãäåæä çãäåèéæê ëãìçã æé íî í
t
æs
çãçé ìæä ï êðç ãð ñt
æs
ís
ð ñçð ò íó ï óãut
è êæä ãäô íçæt
æu
óðõæó òð ìâæäâæëæt
éãì æó êí ìâãäåæäóã çæt
íæäñãîè ìè êð ìåæäö÷æ
t
óíç í æ çãäåíä âèó ñ í øã âã ìæs
ãî ç ãî æîè í ø æì æ îæäås
èäå éã ì åæéèäå âãäåæäóðç ëðäãä ç ðîãóèîã ìæt
æu
ð ì åæä ãî ãîèî ãìös
ù æâæóðäâís
í íä íóã ìus
æó æät
ã ìéã
s
æìt
ã ìt
æêæä ðîã ês
ã îy
æäå ç ãäååèäæó æä ï ç ãä åæé ñð ìëñ í ï çãäåãó ñó ìãs
í ï æt
æu
çãä åðä ñãä òìæs
íó æäs
ãäæ ú æöy
ûæäy
æóz
æt
ó íçíæ î æíäy
æäåt
íâæó æó òíõs
ãø æì æ íä ò ìíä ñíó é íðîð åí
s
ït
ãt
æëí ëã ìt
æçæ óæîí êæìus
âíóðäüã ìs
í ç ãäý æâí çãt
æéðîít t
ðóñ íó ìã æó òíõy
æäå ó ãç èâí æä éãóãìý æ ëæâæs
ãît
æìåãt
ö ûæêæä óíç íæ ç ís
æîäy
æ ìêð â æç íä û ç ãäã ìíç æ æt
æu
çãä âðäð ì ãî ãó ò ìðä éãé æs s
ãîæçæ ìãæó ñ í íä ò ìæs
ãîs
ã êíä ååæçãäåóæt
æîís
ís
ëãç éãä òèóæä ìæâ íó æîéãé æs
ö þãìâæë æt
ÿìãæóñ í ýã ý æs s
ãîy
æäå âíëãìæä ò æ ìæí ìæâíó æî éãéæs y
æítu
ëã ìðó ñ íâæs
ã çãçé ì æä î í ëíâ ïõ ìæ åçãä òæ
s
í âæä í ó æt
æäs
íî æä å ëìð òãíä ö ä òãìæó ñ í ìæâíó æî î ã ç æóçãä åê æ
s
íî óæä ëã ìðó ñ íâ æy
æäåt
íâæóst
æé íî â æä ìã æó òíõ âæät
ãìýæâí ìãæó ñí æut
ðó æt
æîít
íóö ãæó ñ í ìæâíó æî éãé æs
âãäåæät
íç íä ëæâæ çít
ðóðä âìíæ âæä äèóîã æìçãä íç éèîó æäìus
æóäy
æèäò æít
èäååæî öã ì
us
æóæä çãç é ãìíó æä íç ëîíó æs
í ëæâ æ ëãç éèäè êæäs
ãî âæäs ss
t
s
tus
t
t t s s
t
s
u t s
u
sst t u
y
s
t
t s
s
s
s
t s s t
us
s
s
s
ss t
s
t
st s
et al.,
s s
t
s
et al
s s
st
s
t
s
s t
v s
s
s
v s
s
t
t s
t
s
t s
t
y y tu
y
s
s
s
s
s
s
y
t s
s s
v s
s
et al
s
s
st
t
s y t
s
sts y
s
t
t
s
t s
t
st s
s
tu
s
y
s t
t s
s
ss
s
t
s
t y
t
t
atogenesis
t
y
t
t
z
t
z
t
t
z
t
y
t
u
y
t
us
s
s
t
s
st
s
t
u
ut
s
s
s
t
s
t
!
s
t
t
s
"s
# $
y
y
tu
% "s
# "s
s
#s
t t
y
us
s
us
y
us
t
tus