UJI EFEK PENURUNAN KADAR ASAM URAT DARI
EKSTRAK ETANOL DAUN COCOR BEBEK
(Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken)
PADA MENCIT JANTAN
SKRIPSI
OLEH:
MUHARRIR MAISALDI
NIM 121524173
PROGRAM STUDI EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
UJI EFEK PENURUNAN KADAR ASAM URAT DARI
EKSTRAK ETANOL DAUN COCOR BEBEK
(Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken)
PADA MENCIT JANTAN
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
MUHARRIR MAISALDI
NIM 121524173
PROGRAM STUDI EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI EFEK PENURUNAN KADAR ASAM URAT DARI
EKSTRAK ETANOL DAUN COCOR BEBEK
(Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken)
PADA MENCIT JANTAN
OLEH:
MUHARRIR MAISALDI NIM 121524173
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 5 Agustus 2015
Disetujui Oleh:
Pembimbing I, Panitia Penguji,
Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt. Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt. NIP 195008221974121002 NIP 195103261978022001
Pembimbing II, Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt. NIP 195008221974121002
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. Drs. Saiful Bahri, M.S., Apt. NIP 195311281983031002 NIP 195208241983031001
Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb, M.Si., Apt. NIP 197506102005012003
Medan, 5 Agustus 2015 Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Wakil Dekan I,
iv
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala limpahan berkat, rahmat dan karuniaNya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini. Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, yang berjudul “Uji Efek Penurunan Kadar Asam Urat dari Ekstrak Etanol Daun Cocor Bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) pada Mencit Jantan”.
Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt., selaku Wakil Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan bantuan dan fasilitas selama masa pendidikan.
v
Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., selaku kepala Laboratorium Fitokimia Farmasi USU yang telah memberikan izin dan fasilitas untuk penulis sehingga dapat mengerjakan dan menyelesaikan penelitian ini.
Penulis mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tulus kepada Ayahanda Drs. M. Thalib Ali dan Ibunda Mawardaton, serta adik-adikku Almh. Nanda Astuti, Munazhirah, Muzaimah, dan Muzammir atas doa, nasihat, motivasi, semangat, dan pengorbanan baik moril maupun materil dalam menyelesaikan skripsi ini. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Mia Ridhayani, S.Farm., Siti Amalia Wahyu Pratiwi, S.Farm., serta teman-teman seperjuangan Farmasi Ekstensi 2012 gelombang 2 atas semangat, bantuan serta doa kepada penulis selama masa perkuliahan hingga selesainya penyusunan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih banyak kekurangan. Oleh karena itu sangat diharapkan kritikan dan saran yang dapat menyempurnakan skripsi ini. Akhirnya penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, 5 Agustus 2015
Penulis,
vi
UJI EFEK PENURUNAN KADAR ASAM URAT DARI EKSTRAK ETANOL DAUN COCOR BEBEK
(Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) PADA MENCIT JANTAN
ABSTRAK
Asam urat adalah produk akhir metabolisme purin pada manusia. Pola makan yang tidak sehat seperti mengkonsumsi makanan yang mengandung purin tinggi dan proses pengeluaran asam urat dari dalam tubuh mengalami gangguan, menyebabkan kadar asam urat semakin meningkat. Umumnya untuk mengatasi asam urat digunakan obat-obat sintesis yang dapat menimbulkan efek samping. Oleh karena itu dikembangkan pengobatan alternatif menggunakan tanaman obat seperti cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken). Cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) digunakan secara tradisional untuk pengobatan penyakit infeksi, luka, demam, peradangan, wasir, pusing, penurun panas, batuk, rematik, dan peluruh air seni. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek ekstrak etanol daun cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) terhadap penurunan kadar asam urat pada mencit jantan yang diinduksi dengan kalium oksonat secara intraperitoneal.
Tahapan penelitian yaitu identifikasi bahan tanaman, pengumpulan dan pengolahan bahan, pembuatan simplisia, karakterisasi simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik, dan mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut air, penetapan kadar sari larut etanol, penetapan kadar abu total, dan penetapan kadar abu tidak larut asam, pembuatan ekstrak dengan menggunakan metode maserasi dan pengujian efek penurunan kadar asam urat dari ekstrak etanol daun cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) dilakukan secara eksperimental dengan menggunakan kalium oksonat sebagai penginduksi asam urat dan kadar asam urat diukur dengan alat Easy Touch®. Mencit dinyatakan hiperurisemia bila kadar asam uratnya 1,7-3,0 mg/dl. Ekstrak etanol daun cocor bebek dengan dosis yaitu 50, 100 dan 200 mg/kg BB diberikan secara oral, dan pengamatan selang waktu 1 jam selama 3 jam. Sebagai kontrol positif digunakan Allopurinol dosis 10 mg/kg BB dan CMC Na 1% sebagai kontrol negatif. Data hasil pengujian kemudian dianalisis dengan metode analisis variansi (ANAVA), kemudian dilanjutkan dengan Post Hoc Tukey HSD.
Hasil karakteristik simplisia daun cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) diperoleh kadar air 4,00%, kadar sari larut air 38,07%, kadar sari larut etanol 15,67%, kadar abu total 6,9%, dan kadar abu tidak larut asam 0,62%. Hasil uji efek penurunan kadar asam urat pada mencit jantan menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) memberikan efek penurunan kadar asam urat pada mencit jantan dengan dosis efektif 100 mg/kg BB, dan tidak berbeda signifikan dengan kontrol positif Allopurinol (p > 0.05).
vii
EFFECTS OF ETHANOL EXTRACT OF LIFE PLANT LEAVES (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken)
TO DECREASE URIC ACID LEVELS IN MALE MICE
ABSTRACT
Uric acid is the end product of purine metabolism in humans. Unhealthy diet such as eating foods that have high levels of purine, and disorders of uric acid expenditure processes of the body can cause increased levels of uric acid. Generally, the synthetis of drugs used to treat gout but can cause side effects. Therefore developed an alternative treatment using medicinal plants like life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken). Life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) traditionally used for the treatment of infectious diseases, sores, fever, inflammation, hemorrhoids, dizziness, fever, cough, rheumatism, and urine laxative. The purpose of this research was to find out the effect of the ethanol extract of life plant leaves (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) to decrease uric acid levels in male mice induced by potassium oxonate intraperitoneally.
Stage of this research is the identification of plant material, collection and processing of materials, manufacture of the simplex, the simplex characterization includes macroscopic, and microscopic examination, determination of water content, the assay of the water soluble extract, the ethanol soluble extract, the determination of total ash and determination of acid insoluble ash content, manufacture of extracts using maceration method, and testing the effect of a decrease in the levels of uric acid from the ethanol extract of life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) leaves carried out experimentally by using potassium oxonate as inducer and measurement of uric acid levels with Easy Touch®. Mice were declared hiperuricemia when uric acid levels from 1.7 to 3.0 mg/dl. Ethanol extract of life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) leaves in doses 50, 100, and 200 mg/kg administered orally and observation interval of 1 hour for 3 hours. Allopurinol is used as a positive control dose of 10 mg/kg and CMC Na 1% as a negative control. The results of test were analyzed by the method of analysis of variance (ANAVA) was followed by Post Hoc Tukey HSD.
The results of the simplex characteritic gave water content of 4.00%, water soluble extract content of 38.07%, the ethanol soluble extract 15.67%, total ash content of 6.9%, and acid insoluble ash content of 0.62%. The result of the effect of a decrease uric acid levels in male mice showed that the ethanol extract of life plant leaves give the effect of a decrease uric acid levels in male mice with an effective dose of 100 mg/kg BW and did not give a significant differences with positive control allopurinol (p > 0.05).
Key words: Life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) leaves, Uric acid,
viii
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
HALAMAN JUDUL ... ii
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Kerangka Pikir ... 3
1.3 Perumusan Masalah ... 4
1.4 Hipotesis ... 4
1.5 Tujuan Penelitian ... 4
1.6 Manfaat Penelitian ... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 6
2.1 Tanaman Cocor Bebek ... 6
2.1.1 Klasifikasi Tanaman ... 6
ix
2.1.3 Nama Asing ... 6
2.1.4 Deskripsi Tanaman ... 7
2.1.5 Khasiat Secara Tradisional ... 7
2.1.6 Kandungan Kimia ... 7
2.1.7 Aktivitas Farmakologi Hasil Penelitian ... 8
2.2 Metode Ekstraksi ... 8
2.3 Asam Urat ... 10
2.3.1 Metabolisme Asam Urat ... 10
2.3.2 Hiperurisemia ... 11
2.3.3 Gout ... 11
2.4 Obat Antihiperurisemia ... 13
2.5 Kalium Oksonat ... 15
BAB III METODE PENELITIAN ... 16
3.1 Alat - Alat yang digunakan ... 16
3.2 Bahan - Bahan yang digunakan ... 16
3.3 Penyiapan Bahan ... 17
3.1.1 Pengumpulan Bahan ... 17
3.1.2 Identifikasi Tumbuhan ... 17
3.1.3 Pengolahan Bahan ... 17
3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi ... 17
3.4.1 Pereaksi Bouchardat ... 17
3.4.2 Pereaksi Dragendroff ... 18
3.4.3 Pereaksi Mayer ... 18
x
3.4.5 Pereaksi Molisch ... 18
3.4.6 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M ... 18
3.4.7 Pereaksi Asam Klorida 2 N ... 18
3.4.8 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N ... 18
3.4.9 Pereaksi Asam Sulfat 2 N ... 19
3.4.10 Pereaksi Liebermann-Burchard ... 19
3.4.11 Larutan Kloralhidrat ... 19
3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ... 19
3.5.1 Pemeriksaan Makroskopik ... 19
3.5.2 Pemeriksaan Mikroskopik ... 19
3.5.3 Penetapan Kadar Air ... 20
3.5.4 Penetapan Kadar Sari Larut Air ... 20
3.5.5 Penetapan Kadar Sari Larut Etanol ... 21
3.5.6 Penetapan Kadar Abu Total ... 21
3.5.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam ... 21
3.6 Skrining Fitokimia ... 22
3.6.1 Pemeriksaan Steroid/Triterpenoid ... 22
3.6.2 Pemeriksaan Alkaloid ... 22
3.6.3 Pemeriksaan Flavonoid ... 23
3.6.4 Pemeriksaan Glikosida ... 23
3.6.5 Pemeriksaan Tanin ... 24
3.6.6 Pemeriksaan Saponin ... 24
3.6.7 Pemeriksaan Antrakinon ... 24
xi
3.8 Uji Efek Penurunan Kadar Asam Urat ... 25
3.8.1 Pembuatan suspensi CMC Na 1% sebagai kontrol negatif ... 25
3.8.2 Pembuatan suspensi allopurinol sebagai kontrol positif ... 25
3.8.3 Pembuatan Larutan Kalium Oksonat 0,5% ... 25
3.8.4 Pembuatan suspensi ekstrak etanol daun cocor bebek (EEDCB) 1% ... 26
3.9 Penyiapan Hewan Percobaan ... 26
3.10 Pengujian Efek Penurunan Kadar Asam Urat ... 26
3.11 Penggunaan Alat ... 28
3.12 Analisis Data ... 28
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 29
4.1 Hasil Identifikasi Tanaman ... 29
4.2 Hasil Karakteristik ... 29
4.3 Pengujian Efek Penurunan Kadar Asam Urat ... 31
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 40
5.1 Kesimpulan ... 40
5.2 Saran ... 40
DAFTAR PUSTAKA ... 41
xii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Hasil Karakteristik ... 30
4.2 Hasil Skrining Fitokimia ... 30
4.3 Hasil Pengukuran Kadar Asam Urat ... 32
4.4 Persen Penurunan Kadar Asam Urat ... 34
4.5 Post Hoc Tukey Jam ke 1 ... 35
4.6 Post Hoc Tukey Jam ke 2 ... 35
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 45
2. Surat Persetujuan Etik (ethical clearance) ... 46
3. Gambar Tumbuhan Cocor Bebek ... 47
4. Gambar Daun Segar dan Simplisia Cocor Bebek ... 48
5. Gambar Serbuk Simplisia Cocor Bebek ... 49
6. Hasil Mikroskopik Daun dan Serbuk Cocor Bebek ... 50
7. Bagan Alur Penelitian ... 52
8. Perhitungan Penetapan Kadar Air ... 54
9. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Air ... 55
10. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Etanol ... 56
11. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total ... 57
12. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam ... 58
13. Volume Maksimum Sesuai Jalur Pemberian Dan Konversi Dosis .. 59
14. Contoh Perhitungan Dosis ... 60
15. Gambar Alat Pengukuran Kadar Asam Urat Easy Touch ... 63
16. Gambar Hewan Percobaan ... 64
17. Tabel Hasil Pengukuran Kadar Asam Urat ... 65
18. Tabel Hasil Persen Penurunan Kadar Asam Urat ... 66
19. Hasil Perhitungan Persen Kadar Asam Urat ANAVA ... 67
vi
UJI EFEK PENURUNAN KADAR ASAM URAT DARI EKSTRAK ETANOL DAUN COCOR BEBEK
(Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) PADA MENCIT JANTAN
ABSTRAK
Asam urat adalah produk akhir metabolisme purin pada manusia. Pola makan yang tidak sehat seperti mengkonsumsi makanan yang mengandung purin tinggi dan proses pengeluaran asam urat dari dalam tubuh mengalami gangguan, menyebabkan kadar asam urat semakin meningkat. Umumnya untuk mengatasi asam urat digunakan obat-obat sintesis yang dapat menimbulkan efek samping. Oleh karena itu dikembangkan pengobatan alternatif menggunakan tanaman obat seperti cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken). Cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) digunakan secara tradisional untuk pengobatan penyakit infeksi, luka, demam, peradangan, wasir, pusing, penurun panas, batuk, rematik, dan peluruh air seni. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek ekstrak etanol daun cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) terhadap penurunan kadar asam urat pada mencit jantan yang diinduksi dengan kalium oksonat secara intraperitoneal.
Tahapan penelitian yaitu identifikasi bahan tanaman, pengumpulan dan pengolahan bahan, pembuatan simplisia, karakterisasi simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik, dan mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut air, penetapan kadar sari larut etanol, penetapan kadar abu total, dan penetapan kadar abu tidak larut asam, pembuatan ekstrak dengan menggunakan metode maserasi dan pengujian efek penurunan kadar asam urat dari ekstrak etanol daun cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) dilakukan secara eksperimental dengan menggunakan kalium oksonat sebagai penginduksi asam urat dan kadar asam urat diukur dengan alat Easy Touch®. Mencit dinyatakan hiperurisemia bila kadar asam uratnya 1,7-3,0 mg/dl. Ekstrak etanol daun cocor bebek dengan dosis yaitu 50, 100 dan 200 mg/kg BB diberikan secara oral, dan pengamatan selang waktu 1 jam selama 3 jam. Sebagai kontrol positif digunakan Allopurinol dosis 10 mg/kg BB dan CMC Na 1% sebagai kontrol negatif. Data hasil pengujian kemudian dianalisis dengan metode analisis variansi (ANAVA), kemudian dilanjutkan dengan Post Hoc Tukey HSD.
Hasil karakteristik simplisia daun cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) diperoleh kadar air 4,00%, kadar sari larut air 38,07%, kadar sari larut etanol 15,67%, kadar abu total 6,9%, dan kadar abu tidak larut asam 0,62%. Hasil uji efek penurunan kadar asam urat pada mencit jantan menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) memberikan efek penurunan kadar asam urat pada mencit jantan dengan dosis efektif 100 mg/kg BB, dan tidak berbeda signifikan dengan kontrol positif Allopurinol (p > 0.05).
vii
EFFECTS OF ETHANOL EXTRACT OF LIFE PLANT LEAVES (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken)
TO DECREASE URIC ACID LEVELS IN MALE MICE
ABSTRACT
Uric acid is the end product of purine metabolism in humans. Unhealthy diet such as eating foods that have high levels of purine, and disorders of uric acid expenditure processes of the body can cause increased levels of uric acid. Generally, the synthetis of drugs used to treat gout but can cause side effects. Therefore developed an alternative treatment using medicinal plants like life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken). Life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) traditionally used for the treatment of infectious diseases, sores, fever, inflammation, hemorrhoids, dizziness, fever, cough, rheumatism, and urine laxative. The purpose of this research was to find out the effect of the ethanol extract of life plant leaves (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) to decrease uric acid levels in male mice induced by potassium oxonate intraperitoneally.
Stage of this research is the identification of plant material, collection and processing of materials, manufacture of the simplex, the simplex characterization includes macroscopic, and microscopic examination, determination of water content, the assay of the water soluble extract, the ethanol soluble extract, the determination of total ash and determination of acid insoluble ash content, manufacture of extracts using maceration method, and testing the effect of a decrease in the levels of uric acid from the ethanol extract of life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) leaves carried out experimentally by using potassium oxonate as inducer and measurement of uric acid levels with Easy Touch®. Mice were declared hiperuricemia when uric acid levels from 1.7 to 3.0 mg/dl. Ethanol extract of life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) leaves in doses 50, 100, and 200 mg/kg administered orally and observation interval of 1 hour for 3 hours. Allopurinol is used as a positive control dose of 10 mg/kg and CMC Na 1% as a negative control. The results of test were analyzed by the method of analysis of variance (ANAVA) was followed by Post Hoc Tukey HSD.
The results of the simplex characteritic gave water content of 4.00%, water soluble extract content of 38.07%, the ethanol soluble extract 15.67%, total ash content of 6.9%, and acid insoluble ash content of 0.62%. The result of the effect of a decrease uric acid levels in male mice showed that the ethanol extract of life plant leaves give the effect of a decrease uric acid levels in male mice with an effective dose of 100 mg/kg BW and did not give a significant differences with positive control allopurinol (p > 0.05).
Key words: Life plant (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken) leaves, Uric acid,
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Asam urat merupakan hasil metabolisme akhir dari purin yaitu salah satu komponen asam nukleat yang terdapat dalam inti sel tubuh. Peningkatan kadar asam urat dapat mengakibatkan gangguan pada tubuh manusia seperti perasaan linu-linu di daerah persendian dan sering disertai timbulnya rasa nyeri yang teramat sangat bagi penderitanya. Hal ini disebabkan oleh penumpukan kristal di daerah tersebut akibat tingginya kadar asam urat dalam darah. Penyakit ini sering disebut hiperurisemia atau lebih dikenal masyarakat sebagai penyakit asam urat. Hiperurisemia disebabkan oleh sintesa purin berlebihan dalam tubuh karena pola makan yang tidak sehat dan proses pengeluaran asam urat dari dalam tubuh mengalami gangguan. Faktor-faktor yang diduga mempengaruhi penyakit ini adalah diet, berat badan dan gaya hidup (Price dan Wilson, 2005).
2
Salah satu tanaman yang berkhasiat sebagai obat adalah cocor bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken). Cocor bebek digunakan secara tradisional untuk pengobatan wasir, pusing, penurun panas, batuk, dan peluruh air seni (Fajriah, 2011). Beberapa hasil penelitian yang telah dilakukan menunjukkan bahwa tanaman cocor bebek memiliki potensi sebagai analgetik (Safitri, dkk., 2013), memiliki efek antiinflamasi (Wirda, 2001), antidiabetes (Dewiyanti, dkk., 2012), obat luka bakar (Hasyim, dkk., 2012), dan hepatoprotektor (Trubus, 2013). Cocor bebek mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, dan tannin (Safitri, dkk., 2013), asam askorbat, quercetin, kaempferol dan bryophyllin (Utami, 2003). Quercetin dan kaempferol merupakan senyawa kimia yang dapat menghambat kerja enzim xantin oxidase yang merupakan salah satu enzim yang berfungsi dalam proses pembentukan asam urat (Haidari, dkk., 2011).
3
1.2 Kerangka Pikir Penelitian
Kerangka pikir dari penelitian ini adalah sebagai berikut :
Variabel Bebas Variabel Terikat Parameter
Gambar 1. Kerangka Pikir Penelitian
Keterangan :
EEDCB : Ekstrak Etanol Daun Cocor Bebek
1. Makroskopik 2. Mikroskopik 3. Kadar air 4. Kadar sari larut
dalam air 5. Kadar sari larut
dalam etanol 6. Kadar abu total 7. Kadar abu tidak
larut dalam asam
Skrining golongan
Allopurinol Kadar Asam Urat (mg/dL) Simplisia daun
4
1.3 Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas dapat diambil perumusan masalah yaitu sebagai berikut :
a. apakah karakteristik simplisia daun cocor bebek sesuai dengan persyaratan pada Materia Medika Indonesia?
b. apakah ekstrak etanol daun cocor bebek dapat menurunkan kadar asam urat pada mencit yang diinduksi dengan kalium oksonat?
1.4 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah diatas maka dibuat hipotesis sebagai berikut :
a. karakteristik simplisia daun cocor bebek yang diteliti sesuai dengan persyaratan pada Materia Medika Indonesia;
b. ekstrak etanol daun cocor bebek dapat menurunkan kadar asam urat yang diinduksi larutan kalium oksonat.
1.5 Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah sebagai berikut :
a. untuk mengetahui karakteristik daun cocor bebek yang diteliti;
5
1.6 Manfaat Penelitian
Manfaat penelitian ini adalah sebagai berikut :
a. memberikan informasi tentang karakteristik simplisia dan efek penurunan kadar asam urat dari ekstrak etanol daun cocor bebek;
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tanaman Cocor Bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken)
2.1.1 Klasifikasi Tanaman
Tanaman Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken dapat diklasifikasi sebagai berikut:
Divisi : Spermatophyta Sub divisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledoneae Bangsa : Rosales
Suku : Crassulaceae Marga : Bryophyllum
Jenis : Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken Sinonim : Kalanchoe pinnata Lam. Pers
(Depkes RIa, 2000)
2.1.2 Nama Daerah
Didingin (aceh), ceker bebek, cocor bebek (Sumatera Utara, Riau, Jambi), daun sejuk (Palembang), buntiris (Sunda), ceker itik, sosor bebek, suru bebek (Jawa), daun sejuk (melayu), daun ancar bebek (Madura), mamala (Halmahera), rau kufiri (Ternate) dan kabi-kabi (Tidore) (Depkes RIa, 2000).
2.1.3 Nama Asing
7
(Cina); pountay poun po (Laos); yoekiyapinba (Myanmar); bencha chat, ton tai bai pen, khuwum taai ngaai pen (Thailand) (Trubus, 2013).
2.1.4 Deskripsi Tanaman
Cocor bebek merupakan tumbuhan semak atau tumbuhan semusim dengan tinggi 30-100 cm. Batang bersegi empat, lunak, beruas, tegak, hijau. Daun tebal, tunggal, berbentuk lonjong, bertangkai pendek, ujung tumpul, tepi bergerigi, pangkal membundar, panjang 5-20 cm, lebar 2,5 – 15 cm. Bunga berbentuk malai, majemuk, menggantung, kelopak silindris, berlekatan, berwarna merah keunguan, benang sari delapan, putik panjang ± 4 cm, mahkota berbentuk corong dan panjangnya 3,5-5,5 cm. Buah berbentuk kotak dan berwarna ungu bernoda putih. Biji kecil dan putih dan berakar tunggang berwarna kuning keputihan (Depkes RIa, 2000).
2.1.5 Khasiat Secara Tradisional
Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken digunakan secara tradisional untuk
pengobatan wasir, pusing, penurun panas, obat batuk, dan peluruh air seni (Depkes RIa, 2000). Masyarakat di Bundelkhand, India menggunakan jus daun segar cocor bebek untuk mengatasi penyakit kuning. Daun segar dihaluskan lalu dijadikan kompres pada luka bakar. Ilmu pengobatan Cina menggunakan seluruh bagian tanaman yang dipercaya memberi efek dingin untuk menghentikan pendarahan, menghilangkan panas, dan detoksifikasi (Trubus, 2013).
2.1.6 Kandungan Kimia
8
syringat, asam kofeat, asam p-hydroxybenzoat, dan beberapa asam organik, β -sisterol, kuersetin-3-0-α-rhamnopyranosil-α-L-arabinopyranosida (Trubus, 2013).
2.1.7 Aktivitas Farmakologi Hasil Penelitian
Tanaman cocor bebek memiliki efek sebagai analgetik (Safitri, dkk., 2013), memiliki efek antiinflamasi (Wirda, 2001), antidiabetes (Dewiyanti, dkk., 2012), obat luka bakar (Hasyim, dkk., 2012), dan hepatoprotektor (Trubus, 2013).
2.2 Metode Ekstraksi
Ekstraksi adalah suatu proses penyarian senyawa kimia yang terdapat di dalam bahan alam atau berasal dari dalam sel dengan menggunakan pelarut dan metode yang tepat. Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair dibuat dengan menyari simplisia nabati atau hewani menurut cara yang cocok, di luar pengaruh cahaya matahari langsung (Ditjen POM, 1979). Metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut, dibedakan menjadi:
a. Cara dingin
Metode ekstraksi cara dingin dibedakan menjadi: i. Maserasi
Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar).
ii. Perkolasi
9 b. Cara Panas
Metode dengan cara panas dibedakan menjadi: i. Refluks
Refluks adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik.
ii. Soxhletasi
Soxhletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik.
iii. Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50oC.
iv. Infundasi
Infundasi adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 90oC selama 15 menit di penangas air, dapat berupa bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih.
v. Dekoktasi
10
2.3 Asam Urat
Asam urat merupakan produk akhir katabolisme purin dalam tubuh yang tidak memiliki tujuan fisiologis sehingga dapat dianggap sebagai produk buangan (Katzung, dkk., 2002). Secara alamiah, purin terdapat dalam tubuh kita dan dijumpai pada semua makanan dari sel, yakni makanan dari tanaman (sayur, buah, kacang-kacangan) atau pun hewan (daging, jeroan, ikan sarden). Asam urat sebagian besar dieksresi melalui ginjal dan sebagian kecil melalui saluran cerna (Nucleus, 2011).
Asam urat pada serum normal pada laki-laki adalah 5,1 ± 1.0 mg/dl dan pada perempuan adalah 4,0 ± 1.0 mg/dl. Nilai ini akan meningkat sampai 9-10 mg/dl pada seseorang dengan gout (Price dan Wilson, 2005). Sedangkan pada mencit normal kadar asam uratnya adalah 0,5-1,4 mg/dl dan mencit dikatakan hiperurisemia jika kadar asam uratnya berkisar antara 1,7-3,0 mg/dl (Muhtadi, dkk., 2012). Manusia memiliki kadar asam urat yang lebih tinggi dari hewan mamalia lain karena manusia tidak memiliki enzim urikase, yaitu enzim yang menguraikan asam urat menjadi allantoin yang mudah larut (Katzung, 2002).
2.3.1 Metabolisme Asam Urat
11
xantin yang masing-masing dikatalis oleh enzim xantin oxidase dan guanase. Xantin yang terbentuk akan kembali dikatalisis oleh xantin oxidase menjadi asam urat (Murray, dkk., 2003).
2.3.2 Hiperurisemia
Hiperurisemia adalah keadaan dimana terjadi peningkatan kadar asam urat darah di atas normal. Beberapa hal yang dapat mempengaruhi kadar asam urat dalam darah serta merupakan faktor penyebab terjadinya hiperurisemia adalah sebagai berikut:
a. Peningkatan produksi asam urat (overproduction)
i. Penyebab primer yaitu terjadi peningkatan aktivitas phosporibosyl
pyrophosphate synthetase (PRPP synthetase) akan meningkat
menyebabkan peningkatan PRPP yang merupakan kunci sintesa purin dan terjadi defisiensi hypoxantine guanine phosporibosyl transferase (HGPRT) akan meningkatkan metabolisme guanin dan hipoxantin menjadi xantin. ii. Penyebab sekunder adalah terjadi peningkatan asupan purin, konversi asam
nukleat meningkat, penguraian ATP meningkat. b. Penurunan eksresi asam urat (underproduction)
Hal ini dapat terjadi karena penyebab primer dan penyebab sekunder yaitu berupa insufiensi ginjal, terjadi inhibisi pengeluaran asam urat, dan peningkatan reabsorbsi tubular (Gaw, dkk., 2011).
2.3.3 Gout
12
hiperurisemia. Gout adalah diagnosis klinis sedangkan hiperurisemia adalah kondisi biokimia (Mariani, dkk., 2012). Gout dapat bersifat primer dan sekunder. Gout primer merupakan akibat langsung pembentukan asam urat tubuh yang berlebihan atau akibat penurunan ekskresi asam urat. Gout sekunder disebabkan karena pembentukan asam urat yang berlebihan atau ekskresi asam urat yang berkurang akibat proses penyakit lain atau pemakaian obat-obat tertentu (Price dan Wilson, 2005).
Terdapat empat tahap perjalanan klinis gout yang tidak terobati, yaitu: a. Tahap hiperurisemia asimtomatik
Pada tahap ini pasien tidak menunjukkan gejala-gejala selain dari peningkatan kadar asam urat serum. Hanya 20% dari pasien hiperurisemia asimtomatik yang berlanjut menjadi serangan gout akut.
b. Tahap arthritis gout akut
Serangan gout akut terjadi ketika kristal urat mulai terbentuk pada cairan sinovial. Pada tahap ini gejala yang muncul sangat khas, yaitu radang sendi yang akut dan timbul sangat cepat dalam waktu singkat. Keluhan berupa nyeri, bengkak, merah dan hangat, disertai keluhan sistem berupa demam, menggigil dan merasa lelah.
c. Tahap interkritis
13
tahun tanpa serangan akut dan tanpa tata laksana yang adekuat akan berlanjut ke stadium gout kronik.
d. Tahap gout kronik
Pada tahap ini terjadi kerusakan persendian dan bahkan persendian mengalami kehancuran total oleh adanya deposit kristal asam urat, terjadi kerusakan yang ekstensif dan permanen (Price dan Wilson, 2005).
2.4 Obat Antihiperurisemia
Berikut ini adalah golongan obat-obat yang digunakan untuk mengatasi kondisi hiperusemia:
a. Golongan urikosurik
Golongan urikosurik yaitu golongan obat yang dapat meningkatkan eksresi asam urat. Obat-obat ini bekerja dengan cara menghambat reabsorbsi asam urat di tubulus ginjal sehingga peningkatan eksresi asam urat melalui urin. Oleh karena itu, fungsi ginjal yang baik, sangat mendukung mekanisme kerja obat golongan ini. Probenesid dan sulfinpirazon adalah contoh obat golongan urikosurik (Katzung, dkk., 2002).
b. Golongan urikostatik
14
tersebut, produksi asam urat akan berkurang dan produksi xantin dan hipoxantin meningkat dan dibuang melalui ginjal (Dipiro, 1997).
Allopurinol adalah satu-satunya obat golongan urikostatik yang digunakan sampai saat ini. Allopurinol dan metabolitnya oksipurinol (alloxantine) merupakan inhibitor xantin oksidase dan mempengaruhi perubahan hipoxantin menjadi xantin dan xantin menjadi asam urat. Allopurinol juga menurunkan konsentrasi intraseluler PRPP. Oleh karena waktu paruh metabolitnya panjang, allopurinol cukup diberikan satu kali sehari. Dosis awal untuk allopurinol adalah 100 mg sehari, dosis allopurinol dapat ditingkatkan sampai 300 mg/hari tergantung pada respon kadar asam urat. Efek samping pada pemakaian allopurinol yaitu terjadi gangguan gastrointestinal termasuk mual, muntah dan diare, terjadi reaksi alergi, toksisitas hati, neuritis perifer dan lain-lain (Katzung, dkk., 2002). Mekanisme inhibisi sintesis asam urat oleh allopurinol dapat dilihat pada Gambar 2.1
Gambar 2.1 Mekanisme inhibisi sintesis asam urat oleh allopurinol
(Katzung, dkk., 2002)
15
2.5 Kalium Oksonat
Kalium oksonat merupakan salah satu penginduksi hiperurisemia pada hewan pengerat, dan biasanya diberikan dengan cara injeksi intraperitonial. Kalium oksonat bekerja dengan cara menghambat enzim urikase. Enzim tersebut dapat mengurai asam urat menjadi allantoin yang dapat larut dalam air. Jika enzim tersebut dihambat maka akan terjadi penumpukan asam urat pada hewan uji (Wanatabe, dkk., 2006). Metabolisme asam urat menjadi allantoin dan mekanisme kerja kalium oksonat dalam menghambat enzim urikase dapat dilihat pada Gambar 2.2.
Keterangan : Menghambat
Menguraikan Terurai
Gambar 2.2 Mekanisme kerja kalium oksonat dalam menghambat enzim
urikase (Mazzali, dkk., 2001)
Enzim Urikase
Allantoin Asam Urat
16
BAB III
METODE PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan tahapan penelitian yaitu identifikasi bahan, pengumpulan dan pengolahan bahan, pembuatan simplisia, pemeriksaan karakterisasi simplisia, pembuatan ekstrak, penyiapan hewan percobaan, pengujian efek penurunan kadar asam urat secara oral terhadap mencit jantan. Data hasil penelitian dianalisis dengan menggunakan program SPSS (Statistical Product and Service Solution) versi 18.
3.1 Alat-alat yang digunakan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi alat-alat gelas laboratorium, aluminium foil, blender (National), lemari pengering, oven listrik (Memmert®), tanur (Naberttherm®), timbangan digital (Mettler Tolledo®), neraca kasar (OHAUS), alat destilasi penetapan kadar air, desikator, stopwatch, mortir dan stamfer, kaca objek, kaca penutup, rotary evaporator (Heidolph VV-300),
freeze dryer (Edwards), neraca hewan (Presica), spuit 1 ml (Terumo), oral sonde,
mikroskop (Boeco) dan alat pengukur kadar asam urat (Easy Touch®).
3.2 Bahan-bahan yang digunakan
17
3.3 Penyiapan Bahan
Penyiapan bahan meliputi pengumpulan bahan, identifikasi tumbuhan, dan pengolahan bahan.
3.3.1 Pengumpulan bahan
Pengumpulan bahan dilakukan secara purposif, yaitu tanpa membandingkan dengan daerah lain. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun cocor bebek, yang diambil dari Desa Gampong Lada, Kecamatan Mutiara Timur, Kabupaten Pidie, Propinsi Aceh.
3.3.2 Identifikasi tumbuhan
Identifikasi tumbuhan dilakukan di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia Pusat Penelitian Biologi, Bogor.
3.3.3 Pengolahan bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah daun cocor bebek yang masih segar. Daun dipisahkan dari pengotoran. Lalu dicuci hingga bersih kemudian ditiriskan dan ditimbang, diperoleh berat basah sebesar 5 kg. selanjutnya daun tersebut dikeringkan dalam lemari pengering pada temperatur ± 40oC sampai daun kering. Simplisia yang telah kering diblender menjadi serbuk, ditimbang dan diperoleh berat simplisia sebesar 600 g. Lalu dimasukkan ke dalam wadah tertutup rapat dan disimpan pada suhu kamar.
3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi
3.4.1 Pereaksi Bouchardat
18
3.4.2 Pereaksi Dragendorff
Larutan bismut (III) nitrat P 40% b/v dalam asam nitrat P sebanyak 20 ml kemudian dicampurkan dengan 50 ml larutan kalium iodida, didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan jernih diambil dan diencerkan dengan air suling secukupnya hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.3 Pereaksi Mayer
Larutan raksa (II) klorida P 2,266% b/v sebanyak 60 ml dicampur dengan 10 ml larutan kalium iodida P 50% b/v. Kedua larutan dicampurkan dan ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.4 Pereaksi besi (III) klorida 1%
Sebanyak 1 g besi (III) klorida dilarutkan dalam air suling sampai 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.5 Perekasi Molisch
Sebanyak 3 g α-naftol dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.6 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M
Timbal (II) asetat sebanyak 15,17 g dilarutkan dalam air suling bebas CO2
hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.7 Pereaksi asam klorida 2 N
Sebanyak 7,3 ml asam klorida pekat diencerkan dengan air suling sampai 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.8 Pereaksi natrium hidroksida 2 N
19
3.4.9 Pereaksi asam sulfat 2 N
Larutan asam sulfat pekat sebanyak 9,8 ml ditambahkan air suling sampai 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.10 Pereaksi Liebermann-Burchard
Campur secara perlahan 5 ml asam asetat anhidrida dengan 5 ml asam sulfat pekat tambahkan etanol 95% hingga 50 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.11 Larutan kloralhidrat
Sebanyak 50 g kloralhidrat ditimbang, lalu dilarutkan dalam 20 ml air suling (Depkes RI, 1995).
3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
Pemeriksaan karakteristik simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik, mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut dalam air, penetapan kadar sari larut dalam etanol, penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam.
3.5.1 Pemeriksaan makroskopik
Pemerikasaan makroskopik dilakukan dengan mengamati warna, bentuk, ukuran, dan rasa pada daun segar dan simplisia daun cocor bebek.
3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik
20
difiksasi dengan api spiritus, kemudian ditutup dengan kaca penutup dan diamati di bawah mikroskop dengan berbagai pembesaran.
3.5.3 Penetapan kadar air
Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluen). Alat terdiri dari labu alas bulat 500 ml, alat penampung, pendingin, tabung penyambung dan tabung penerima.
Cara penetapan:
Pada labu bulat dimasukkan 200 ml toluena dan 2 ml air suling, didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume air di dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Kemudian kedalam labu yang berisi toluen jenuh tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama, lalu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluen mulai mendidih, kecepatan tetesan diatur lebih kurang 2 tetes per detik hingga sebagian air tersuling. Kemudian kecepatan dinaikkan hingga 4 tetes per detik. Kemudian setelah semua air tersuling, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin sampai suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (Depkes RI, 1995).
3.5.4 Penetapan kadar sari larut dalam air
21
kemudian disaring. Diuapkan 20 ml filtrat sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).
3.5.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol
Sebanyak 5 g serbuk simplisia, dimaserasi selama 24 jam dalam etanol 96% dalam labu bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, dibiarkan selama 18 jam, kemudian disaring. Diuapkan 20 ml filtrat sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar sari larut dalam etanol dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).
3.5.6 Penetapan kadar abu total
Sebanyak 2 g serbuk simplisia yang telah digerus dan ditimbang seksama dimasukkan dalam krus porcelin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pemijaran dilakukan pada suhu 600oC selama 3 jam. Kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (WHO, 1998).
3.5.7 Penetapan abu tidak larut dalam asam
22
3.6 Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui golongan senyawa steroid/triterpenoid, alkaloid, flavonoid, glikosida, saponin, tanin dan antrakinon. Skrining dilakukan terhadap serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun cocor bebek.
3.6.1 Pemeriksaan steroid/triterpenoid
Sebanyak 1 g serbuk simplisia daun cocor bebek dimaserasi dengan 20 ml
n-heksan selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada
sisa dalam cawan penguap ditambahkan beberapa tetes pereaaksi Liebermann-Burchard. Timbul warna biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroida, sedangkan warna merah, merah muda atau ungu menunjukan adanya triterpenoida. Perlakuan yang sama juga dilakukan pada ekstrak etanol daun cocor bebek (Harborne, 1987).
3.6.2 Pemeriksaan alkaloid
Serbuk simplisia daun cocor bebek ditimbang sebanyak 0,5 g, kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit, didinginkan lalu disaring (Depkes RI, 1995). Filtrat dipakai untuk percobaan berikut:
1. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan Mayer akan terbentuk endapan berwarna putih atau kuning;
2. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan Bouchardat akan terbentuk endapan berwarna coklat hitam;
23
Alkaloida dinyatakan positif jika terjadi endapan atau paling sedikit dua dari tiga percobaan diatas. Perlakuan yang sama juga dilakukan pada ekstrak etanol daun cocor bebek (Depkes RI, 1995)
3.6.3 Pemeriksaan flavonoid
Serbuk simplisia daun cocor bebek ditimbang sebanyak 10 g, dimasukkan kedalam tabung reaksi lalu ditambahkan 10 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, di kocok dan dibiarkan memisah. Flavonoida positif jika terjadi warna merah atau kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol. Perlakuan yang sama juga dilakukan pada ekstrak etanol daun cocor bebek (Farnsworth, 1966).
3.6.4 Pemeriksaan glikosida
24
cairan menunjukkan adanya ikatan gula. Perlakuan yang sama juga dilakukan pada ekstrak etanol daun cocor bebek (Depkes RI, 1995).
3.6.5 Pemeriksaan tanin
Serbuk simplisia daun cocor bebek ditimbang sebanyak 0,5 g, disari dengan 10 ml air suling, disaring lalu filtrat diencerkan dengan air suling sampai hampir tidak berwarna. Diambil 2 ml larutan tersebut lalu ditambahkan 1 sampai 2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin. Perlakuan yang sama juga dilakukan pada ekstrak etanol daun cocor bebek (Fansworth, 1966).
3.6.6 Pemeriksaan saponin
Serbuk simplisia daun cocor bebek sebanyak 0,5 g dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik, timbul busa yang mantap tidak kurang dari 10 menit setinggi 1 - 10 cm. Ditambahkan 1 tetes larutan asam klorida 2 N, bila buih tidak hilang menunjukkan adanya saponin. Perlakuan yang sama juga dilakukan pada ekstrak etanol daun cocor bebek (Depkes RI, 1995).
3.6.7 Pemeriksaan antrakinon
25
3.7 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Cocor Bebek
Sebanyak 400 g serbuk simplisia dimaserasi dengan 75 bagian etanol 70% dalam wadah tertutup rapat dan dibiarkan pada suhu kamar selama 5 hari terlindung dari cahaya matahari sambil diaduk, kemudian disaring dan ampas diremaserasi dengan etanol 70% secukupnya hingga diperoleh 100 bagian. Dipindahkan ke bejana tertutup, dibiarkan di tempat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari. Enap tuangkan atau disaring. Maserat yang diperoleh dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator pada temperatur ± 40oC sampai diperoleh ekstrak kental (Ditjen POM, 1979).
3.8 Uji Efek Penurunan Kadar Asam Urat
3.8.1 Pembuatan suspensi CMC Na 1% sebagai kontrol negatif
Pembuatan suspensi CMC Na 1% dilakukan dengan cara sebagai berikut: Sebanyak 1 g CMC Na ditaburkan ke dalam lumpang yang berisi air suling panas sebanyak 20 ml. Didiamkan selama 15 menit hingga diperoleh masa yang transparan, digerus hingga berbentuk gel dan diencerkan dengan sedikit air suling, kemudian dituang ke dalam labu tentukur 100 ml, ditambah air suling sampai batas tanda.
3.8.2 Pembuatan suspensi allopurinol 0,1% sebagai kontrol positif
26
3.8.3 Pembuatan larutan kalium oksonat 0,5% (B/V)
Pembuatan larutan kalium oksonat dilakukan dengan cara sebagai berikut: ditimbang sebanyak 50 mg kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml, ditambahkan aqua pro injeksi sampai batas tanda.
3.8.4 Pembuatan suspensi ekstrak etanol daun cocor bebek (EEDCB)
Pembuatannya dilakukan dengan cara sebagai berikut: ekstrak ditimbang masing-masing sebanyak 50 mg, 100 mg dan 200 mg, dimasukkan masing-masing ke dalam lumpang, ditambahkan sedikit suspensi CMC Na 1% dan digerus hingga homogen, selanjutnya dimasukkan masing-masing ke dalam labu tentukur, kemudian masing-masing konsentrasi dicukupkan dengan suspensi CMC Na 1% sampai 10 ml.
3.9 Penyiapan Hewan Percobaan
Hewan yang digunakan adalah mencit jantan dengan berat 20-30 g dibagi 5 kelompok, yaitu kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif dan kelompok uji yang terdiri dari 3 dosis dan setiap kelompok terdiri dari 5 ekor mencit.
Sebelum digunakan sebagai hewan percobaan, semua mencit terlebih dahulu dipelihara selama kurang lebih dua minggu untuk penyesuaian lingkungan, mengontrol kesehatan dan berat badan, kemudian mencit dipuasakan (tidak diberi makan tapi tetap diberi minum) selama 18 jam.
3.10 Pengujian Efek Penurunan Kadar Asam Urat EEDCB
27
yang masing-masing terdiri dari 5 ekor hewan uji. Kemudian masing-masing hewan uji dalam kelompok ditimbang dan diberi tanda pada bagian ekor.
Tiap kelompok diukur kadar asam urat puasa dengan diambil darah yang berasal dari vena ekor mencit. Kadar asam urat diukur dengan menggunakan strip
test Easy Touch®.
Semua kelompok mencit kemudian diinjeksi dengan kalium oksonat dosis 200 mg/kg BB secara intra peritoneal (ip). Satu jam kemudian diukur kadar asam urat darah mencit. Mencit dinyatakan hiperurisemia jika kadar asam uratnya 1,7-3,0 mg/dl. Setelah mencit hipeurisemia diberi perlakuan sebanyak sekali secara oral. Kelompok perlakuan tersebut adalah sebagai berikut:
a. Kelompok I : diberikan suspensi Allopurinol dosis 10 mg/kg BB b. Kelompok II : diberikan suspensi CMC Na 1%
c. Kelompok III : diberikan suspensi EEDCB dosis 50 mg/kg BB d. Kelompok IV : diberikan suspensi EEDCB dosis 100 mg/kg BB e. Kelompok V : diberikan suspensi EEDCB dosis 200 mg/kg BB
Satu jam kemudian diukur kadar asam urat darah mencit, lalu diukur kembali setelah 2 jam dan 3 jam dengan cara yang sama. Dicatat hasil pengukuran masing-masing kelompok perlakuan (Kristiani, dkk., 2013; Mariani, dkk., 2012; Muhtadi, dkk., 2012; Simamarta, dkk., 2012; Wanatabe, dkk., 2006). Selanjutnya dihitung persen penurunan kadar asam urat dengan rumus sebagai berikut;
Keterangan : a = kadar asam urat setelah induksi
b = kadar asam urat pada waktu pengamatan jam ke-t
% penurunan kadar asam urat = �−�
28
3.11 Penggunaan Alat
Kadar asam urat diukur dengan menggunakan strip test Easy Touch® yang bekerja secara enzimatis. Prosedur penggunaannya yaitu:
a. sesuaikan kode yang terdapat pada vial strip test dengan memori;
b. setelah sesuai masukkan memori ke dalam alat pengukur kadar asam urat; c. masukkan strip test untuk menghidupkan layar;
d. darah disentuhkan pada strip test, kemudian darah akan mengalir sampai ke zona reaksi dengan otomatis;
e. setelah 20 detik hasil pengukuran kadar asam urat akan ditampilkan pada layar.
3.12 Analisis Data
29
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Identifikasi Tanaman
Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan di Pusat Penelitian dan Pengembangan LIPI Bogor, menunjukkan bahwa tumbuhan yang diteliti adalah
Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken, suku Crassulaceae.
4.2 Hasil Karakteristik
Hasil pemeriksaan makroskopik daun segar cocor bebek berbentuk lonjong atau bundar panjang, panjang 5-20 cm dan lebar 2,5-15 cm, berwarna hijau, ujung daun tumpul, pangkal daun membundar, pinggiran daun beringgit atau beringgit ganda, permukaan daun gundul dan rasanya sedikit asam. Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia daun cocor bebek berkeriput berbentuk lonjong atau bundar panjang, berwarna hijau kecoklatan, ujung daun tumpul, pangkal daun membundar, pinggiran daun beringgit atau beringgit ganda dan rasanya sedikit asam.
Hasil pemeriksaan mikroskopik daun segar dan serbuk simplisia daun cocor bebek terlihat adanya epidermis dengan stomata tipe anomositik, mesofil meliputi sel parenkim besar, berbentuk bundar, dinding tipis didalamnya ada hablur kalsium oksalat bentuk prisma.
30
Tabel 4.1 Hasil karakterisasi serbuk simplisia daun cocor bebek
No Karakteristik serbuk simplisia Simplisia
Kadar (%) Persy. MMI (%)
Hasil karakterisasi serbuk simplisia memenuhi syarat berdasarkan persyaratan pada Materia Medika Indonesia Edisi V (1989). Kadar air simplisia adalah 4,00 %. Jika kadar air lebih dari 10% dapat terjadi proses pembusukan dan merusak bahan, sehingga tidak dapat disimpan dalam jangka waktu yang lama. Penetapan kadar sari larut air untuk mengetahui banyaknya senyawa yang dapat larut dalam air. Penetapan kadar sari etanol dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa kimia yang larut dalam etanol (Ditjen POM, 1979). Penetapan kadar abu total bertujuan untuk mengetahui kadar senyawa-senyawa anorganik seperti logam Mg, Ca, Pb, dan Si. Pada penetapan kadar abu tidak larut asam, senyawa anorganik yang tidak larut adalah silikat yang menunjukkan pengotor dari pasir.
Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun cocor bebek menunjukan hasil yang sama, dapat dilihat pada tabel berikut ini.
Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak daun cocor bebek
31
Berdasarkan hasil skrining fitokimia diatas, menunjukkan bahwa tanaman cocor bebek mengandung hampir semua metabolit sekunder, kecuali antrakinon. Adanya metabolit sekunder seperti tersebut di atas sangat berhubungan dengan khasiat tanaman ini secara farmakologi. Adanya steroid/triterpenoid maupun flavonoid yang terdapat di dalam tanaman ini sangat mendukung tanaman ini sebagai obat antihiperurisemia. Menurut Wirda (2001), steroid/triterpenoid berperan dalam menghilangkan nyeri. Nyeri biasanya dialami oleh penderita hiperurisemia, sedangkan flavonoid berperan sebagai inhibitor xantin oksidase (Umameswari, 2013).
4.3 Pengujian efek penurunan kadar asam urat
Hiperusemia pada mencit dilakukan dengan cara diinduksi dengan menggunakan larutan kalium oksonat. Pengukuran kadar asam urat dilakukan dengan menggunakan alat pengukur kadar asam urat Easy Touch®. Kalium oksonat dapat digunakan sebagai penginduksi asam urat, karena kalium oksonat dapat bekerja menghambat enzim urikase yang mengubah asam urat menjadi allantoin sehingga kadar asam urat darah meningkat.
32
Tabel 4.3 Hasil Pengukuran Kadar Asam Urat
33
Gambar 4.1 Grafik Kadar Asam Urat Rata-rata Vs Waktu
Berdasarkan grafik diatas dapat dilihat bahwa setelah terinduksi, kelompok perlakuan yang diberikan CMC Na 1 %, suspensi allopurinol 10 mg/kg BB, suspensi EEDCB 50 mg/kg BB, suspensi EEDCB 100 mg/kg BB dan suspensi EEDCB 200 mg/kg BB, kadar asam uratnya mengalami kenaikan. Hal ini disebabkan kalium oksonat telah bekerja menghambat enzim urikase sehingga kadar asam urat di dalam darah mencit meningkat.
Pada jam ke-1, ke-2, dan ke-3, kelompok yang diberikan suspensi allopurinol 10 mg/kg BB, suspensi EEDCB 50, 100 dan 200 mg/kg BB memberikan efek penurunan kadar asam urat. Kelompok yang diberikan suspensi CMC Na 1 % tidak memberikan efek penurunan kadar asam urat.
Untuk melihat kekuatan ektrak etanol daun daun cocor bebek dan allopurinol dalam menurunkan kadar asam urat, maka dihitung persen penurunan kadar asam urat. Data persen penurunan kadar asam urat dianalisa secara statistik dengan metode ANAVA lalu dilanjutkan dengan uji Post Hoc Tukey HSD untuk semua kelompok perlakuan dari jam ke-1 sampai dengan jam ke-3 dan dilakukan
0
Jam ke-1 Jam ke-2 Jam ke-3
suspensi Allopurinol 10 mg/kg BB (kontrol positif) suspensi EEDCB 50 mg/kg BB
suspensi EEDCB 100 mg/kg BB
suspensi EEDCB 200 mg/kg BB
34
perhitungan persen penurunan kadar asam urat rata-rata setiap kelompok perlakuan setelah pemberian suspensi allopurinol dan suspensi ekstrak etanol daun daun cocor bebek. Hasil perhitungan persen penurunan kadar asam urat rata-rata setiap kelompok perlakuan dapat dilihat pada tabel di bawah ini:
Tabel 4.4 Persen Penurunan Kadar Asam Urat
Kelompok
35
Suspensi Allopurinol dosis 10 mg/kg BB 5 16.6800
Sig. .351
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.
Uji Tukey HSD pada jam ke-1 dengan perlakuan masing-masing diulang sebanyak 5 kali menunjukkan hasil bahwa kelompok perlakuan yang diberikan suspensi EEDCB 50 mg/kg BB, suspensi EEDCB 200 mg/kg BB, suspensi EEDCB 100 mg/kg BB dan suspensi allopurinol 10 mg/kg BB menunjukkan persen penurunan kadar asam urat yang tidak berbeda signifikan, dengan nilai signifikansi 0,351 (p>0,05). Persen penurunan kadar asam urat yang paling kuat adalah suspensi allopurinol 10 mg/kg BB, selanjutnya diikuti oleh suspensi suspensi EEDCB 100 mg/kg BB, suspensi EEDCB 200 mg/kg BB dan yang paling lemah adalah suspensi EEDCB 50 mg/kg BB.
Tabel 4.6 Post Hoc Tukey Jam ke 2
Suspensi Allopurinol dosis 10 mg/kg BB 5 35.9020
Sig. 1.000 .782
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
36
Uji Tukey HSD pada jam ke-2 dengan perlakuan masing-masing diulang sebanyak 5 kali menunjukkan bahwa kelompok perlakuan yang diberikan suspensi EEDCB 50 mg/kg BB memiliki persen penurunan kadar asam urat yang berbeda signifikan dengan EEDCB 100 mg/kg BB, suspensi EEDCB 200 mg/kg BB dan suspensi allopurinol 10 mg/kg BB. Pada tabel juga terlihat bahwa suspensi EEDCB 100 mg/kg BB memiliki persen penurunan kadar asam urat yang tidak berbeda signifikan dengan suspensi EEDCB 200 mg/kg BB dan suspensi allopurinol 10 mg/kg BB, nilai signifikannya adalah 0,782(p>0,05). Persen penurunan kadar asam urat yang paling kuat adalah suspensi allopurinol 10 mg/kg BB, selanjutnya diikuti oleh suspensi EEDCB 100 mg/kg BB dan suspensi EEDCB 200 mg/kg BB.
Tabel 4.7 Post Hoc Tukey Jam ke 3
Tukey HSDa
Perlakuan
N
Subset for alpha = 0.05
1 2
Suspensi EEDCB dosis 50 mg/ kg BB 5 27.5280
Suspensi EEDCB dosis 100 mg/ kg BB 5 42.3780
Suspensi EEDCB dosis 200 mg/ kg BB 5 43.2920
Suspensi Allopurinol dosis 10 mg/kg BB 5 44.1680
Sig. 1.000 .511
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.
37
berbeda signifikan dengan suspensi EEDCB 200 mg/kg BB dan suspensi allopurinol 10 mg/kg BB, nilai signifikannya adalah 0,511(p>0,05). Persen penurunan kadar asam urat yang paling kuat adalah suspensi allopurinol 10 mg/kg BB, selanjutnya diikuti oleh suspensi EEDCB 200 mg/kg BB dan suspensi EEDCB 100 mg/kg BB.
Berikut ditampilkan secara grafik batang persentase penurunan kadar asam urat setiap jam.
Gambar 4.2 Grafik Persentase Penurunan Kadar Asam Urat Vs Waktu
Berdasarkan grafik diatas menunjukan persentase penurunan kadar asam urat yang ditunjukan oleh Allopurinol dosis 10 mg/kg BB, EEDCB dosis 100 mg/kg BB dan EEDCB dosis 200 mg/kg BB pada setiap jam tidak jauh berbeda.
0
Jam ke-1 Jam ke-2 Jam ke-3
suspensi Allopurinol 10 mg/kg BB
suspensi EEDCB 50 mg/kg BB
suspensi EEDCB 100 mg/kg BB
suspensi EEDCB 200 mg/kg BB
P
38
Peningkatan dosis EEDCB dua kali lipat yaitu dosis 200 mg/kg BB hanya meningkatkan efek penurunan kadar asam urat sedikit lebih tinggi dari dosis 100 mg/kg BB. Jadi dapat disimpulkan bahwa dosis yang paling efektif pada penurunan kadar asam urat mencit adalah dosis 100 mg/kg BB.
Menurut Zastrow dan Bourne (2001), peningkatan dosis obat seharusnya akan meningkatkan respon yang sebanding dengan dosis yang ditingkatkan, namun dengan meningkatnya dosis peningkatan respon akhirnya akan menurun, karena sudah tercapai dosis yang sudah tidak dapat meningkatkan respon lagi.
39
40
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 KESIMPULAN
Kesimpulan di dalam penelitian ini adalah :
a. Hasil pemeriksaan karakteristik daun cocor bebek memenuhi syarat Materia Medika Indonesia yaitu kadar air 4,00%, kadar sari larut dalam air 38,07%, kadar sari larut dalam etanol 15,67%, kadar abu total 6,9% dan kadar abu tidak larut dalam asam 0,62%.
b. Ekstrak etanol daun cocor bebek dapat menurunkan kadar asam urat dalam darah mencit jantan dengan dosis efektif 100 mg/kg BB.
5.2 SARAN
a. Disarankan untuk penelitian selanjutnya dilakukan uji efek penurunan kadar asam urat dari daun cocor bebek dengan menggunakan penginduksi lain seperti makanan yang mengandung purin tinggi.
41
DAFTAR PUSTAKA
Depkes RI. (1989). Materia Medika Indonesia. Jilid V. Cetakan Pertama. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI. Halaman 290-294. Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Cetakan Keenam. Jakarta:
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI. Halaman 247-251, 297-304, 321-325.
Depkes RIa. (2000). Investaris Tanaman Obat Indonesia (I). Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 147-148.
Depkes RIb. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 1-17.
Dewiyanti, I.D., Filailla, E., Megawati, dan Yuliani, T. (2012). The Antidiabetic Activity of Cocor Bebek Leaves (Kalanchoe pinnata Lam. Pers.) Ethanolic Extract from Various Areas. The Journal Of Tropical Life
Science. 2(2): 37-39.
Dipiro, J.T. (1997). Pharmacotherapy A Pathophysiologic Approach 3th edition.
New York: The McGraw-Hill Companies, Inc. Halaman: 1755-1760. Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 9, 902.
Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen Keseharan Republik Indonesia. Halaman 855, 896, 898, 1035.
Fajriah, S. (2011). Isolasi, Identifikasi dan Uji Aktivitas Biologi dari Fraksi Etil Asetat Daun Cocor Bebek (Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken). Tesis. Depok: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Indonesia
Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screening Of Plants. J. Pharm. Sci. 55(3): 264.
42
Haidari, F., Seid, K. A., Majid, M. S., Soltan, A. M., dan Mohammad, R. R. (2011). Effect of Parsley (Petroselinum crispum) and Its Flavonol Constituents, Kaempferol and Quercetion, on Serum Uric Acid Level, Biomarkers of Oxidative Stress, and Liver Xantine Oxidoreductase Activity in Oxonate-Inducated Hyperuricemic Rats. Iranian journal of
pharmaceutical research. 10(4): 811-819.
Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Terjemahan Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 4, 70-72, 127, 155. Harmita. dan Radji, M. (2008). Buku Ajar Analisis Hayati. Edisi III. Jakarta:
Penerbit EGC. Halaman: 24.
Hasyim, N., Pare, K.L., Junaid, I., dan Kurniati, A. (2012). Formulasi dan Uji Efektivitas Gel Luka Bakar Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalachoe pinnata L.) pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus). Majalah Farmasi dan
Farmakologi. 16(2): 89-94.
Katzung, B.G. (2002). Farmakologi: Dasar dan Klinik. Jilid 3. Diterjemahkan oleh: Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran UNAIR. Jakarta: Salemba Medika. Halaman: 246.
Kristiani, R.D., Rahayu, D., dan Subarnas, A. (2013). Aktivitas Antihiperurisemia Ekstrak Etanol Akar Pakis Tangkur (Polypodium feei) pada Mencit Jantan.
Bionatura-Jurnal Ilmu-Ilmu Hayati dan Fisik. ISSN 1411-0903: 174-177.
Mariani, I., Bahri, S., dan Awaluddin, S. (2012). Aktivitas Antihiperurisemia Ekstrak Etanol Herba Suruhan (Peperomia pellucida (L.) Kunth) pada Mencit Jantan. Journal of Pharmaceutics and Pharmacology. 1(1): 37-43. Mazzali, M., Hugnes, J., Kim, Y.G., Jefferson, J., Kang, D. H., Gordon, K. L.,
Lan, H. Y., Krvlighn, S., dan Johnson, R. J. (2001). Elevated uric acid increases blood pressure in the rats by a novel independent mechanism.
Hypertension. 32(2001):1101-1106.
Muhtadi, Suhendi, A., Nurcahyanti, W., dan Sutrisna, E.M. (2012). Potensi Daun Salam (Syzigium polyanthum Walp.) dan Biji Jinten Hitam (Nigella sativa Linn) Sebagai Kandidat Obat Herbal Terstandar Asam Urat. Pharmacon 13(1): 30-36
43
Nucleus, T. (2011). Asam Urat atau Gout. Jakarta: PT. Nucleus Precise Newsletter. Halaman 1-5.
Price, S. A., dan Wilson, L. M. (2005). Patofisiologi, konsep klinis proses-proses
penyakit. Diterjemahkan oleh : Dharma Adji. Edisi VI. Jakarta: Penerbit
EGC. Halaman 437-446.
Safitri, A.R., Andre, M., dan Irsan, A. (2013). Uji Efek Analgetik Infusa Daun Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers.) terhadap Mencit Jantan Galur Swiss yang Diinduksi dengan Asam Asetat. Skripsi. Pontianak: Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjungpura.
Simarmata, Y.B.C., Awaluddin, S., dan Bahri, S. (2012). Efek Hipourikemia Ekstrak Daun Sidaguri (Sida rhombifolia L) pada Mencit Jantan. Journal
of Pharmaceutics and Pharmacology. 1(1): 21-28.
Tayeb, R., Amelia, V., dan Usmar. (2012). Pengaruh Pemberian Infus Sarang Semut (Myrmecodia pendens) terhadap Kadar Asam Urat Darah pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus). Majalah Farmasi dan Farmakologi.
16(1): 31-36.
Trubus, T. (2013). 100 Plus Herbal Indonesia Buku Ilmiah dan Racikan. Depok: PT. Trubus Swadaya. Halaman: 574-575.
Umameswari, M. (2013). Virtual Screening Analysis and In-Vitro Xantine
Oxidase Inhibitory Activity os some Commercially Available Flavonoids.
Iran J Pharm Res.12(3): 317-323.
Utami, P. (2003). Tanaman Obat untuk Mengatasi Asam Urat dan Rematik. Jakarta: Agromedia Pustaka. Halaman 28-30.
Watanabe, S., Kimura, Y., Shindo, K., dan Fukui, T. (2006). Effect of Human Placenta Extract on Potassium Oxonate-induced Elevation of Blood Uric Acid Concentration. Journal of Health Science. 52(6): 738-742.
WHO. (1998). Quality Control Methods for Medicinal Plant Material. Geneva: WHO. Halaman: 34, 36-39.
44
46
47 Lampiran 3. Tumbuhan Cocor Bebek
48
Lampiran 4. Daun Segar dan Simplisia Daun Cocor Bebek
a. Daun cocor bebek segar
49 Lampiran 5. Serbuk Simplisia Cocor Bebek
50
Lampiran 6. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Daun Cocor Bebek
a. Mikroskopik penampang melintang daun cocor bebek
Keterangan : 1. Epidermis
2. Jaringan Palisade 3. Xilem 4. Floem 5. Stoma
5. Jaringan Kolenkim
1 2
3
4
5
51 Lampiran 6. (Lanjutan)
b. Mikroskopik serbuk simplisia daun cocor bebek
Keterangan : 1. Stomata tipe anomositik
2. Parenkim dengan kristal kalsium oksalat 3. Xilem
4. Hablur kalsium oksalat
1
2
3
52 Lampiran 7. Bagan alur penelitian
Dicuci dari pengotor hingga bersih
Ditiriskan
Dikeringkan di lemari pengering
Pemeriksaan makroskopis Dihaluskan
Daun cocor bebek
Serbuk Simplisia
Karakterisasi simplisia Skrining fitokimia
Penetapan: - Kadar air
- Kadar sari larut dalam air - Kadar sari larut dalam etanol - Kadar abu total
- Kadar abu tidak larut dalam asam
Pemeriksaan:
- Steroid/triterpenoid - Alkaloid
53 Lampiran 7. (Lanjutan)
Dimaserasi dengan 75 bagian etanol 70%
Dimaserasi dengan 25 bagian etanol 70%
Dipekatkan menggunakan rotary evaporator
antihiperurisemia
Serbuk simplisia (400 g)
Ekstrak etanol kental 138,26 g Maserat I + II
Pengukuran kadar asam urat Pemeriksaan:
- Steroid/triterpenoid - Alkaloid
- Flavonoid - Glikosida - Saponin - Tanin - Antrakinon
Skrining fitokimia
Ampas
Pengujian aktivitas antihiperurisemia
54
Lampiran 8. Perhitungan penetapan kadar air serbuk simplisia daun cocor bebek No. Berat sampel
(g)
Volume air (ml)
Kadar (%)
1. 5,002 0,2 4
2. 5,001 0,2 4
3. 5,003 0,2 4
1. % Kadar air I = 0,2 ml
5,002 g
x 100% = 4 %
2. % Kadar air II = 0,2 ml
5,001 g
x 100% = 4 %
3. % Kadar air III = 0,2 ml
5,003 g
x 100% = 4 %
% Kadar rata-rata = 4 %+4 %+4 %
55
Lampiran 9. Perhitungan penetapan kadar sari larut dalam air dari serbuk simplisia daun cocor bebek
No. Berat sampel (g) Berat sari (g) Kadar (%) 1. 5,002 0,381 38,06 2. 5,003 0,383 38,27 3. 5,001 0,379 37,89
% Kadar sari larut etanol = Berat sari (g)
Berat sampel (g)×
100
20 × 100%
1. % Kadar sari larut dalam air I = 0,381 g
5,002 g
x
100
20 x 100% = 38,06 %
2. % Kadar sari larut dalam air II = 0,383 g
5,003 g
x
100
20
x 100% = 38,27 %
3. % Kadar sari larut dalam air III = 0,379 g
5,001 g
x
100
20
x 100% = 37,89 %
% Kadar rata-rata = 38,06 %+38,27 %+37,89 %
