LAPORAN PRAKTIKUM
MATA KULIAH PENGENDALIAN VEKTOR EPIDEMIOLOGI
UJI BIOASSAY
Disusun Oleh: Kelas B
Siska Fiany G1B011006
Ratna Juwita G1B011015
Irfan Febiary G1B011026
Shella Kartika Andira G1B011036
Nurendah A. P. G1B011040
Michika Adhisa Putri G1B011048 Indri Nur Oktaviani G1B011062
Doni Juliana G1B011068
KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAAN UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMU KESEHATAN JURUSAN KESEHATAN MASYARAKAT
PURWOKERTO
A. PENDAHULUAN 1. Latar Belakang
Penyakit zoonosis adalah penyakit yang ditularkan dari hewan ke
manusia atau sebaliknya. Salah satu cara penularan penyakit ini dapat
terjadi melalui vektor. Saat ini banyak penyakit zoonosis pada manusia
yang merupakan Kejadian Luar Biasa (KLB) muncul karenan peranan
vektor yang tak terkendali. Penyakit ini sebenarnya sudah lama diketahui
keberadaannya dan dianggap umum, tetapi karena kegagalan
pengendalian vektor maka penyakit ini selalu terjadi berulang kali
(Berijaya, 2006).
Nyamuk merupakan salah satu serangga yang memiliki peran
sebagai vektor dari agen penyakit. Penyakit yang ditularkan oleh nyamuk
masih merupakan masalah kesehatan bagi masyarakat, baik di perkotaan
maupun di pedesaan, seperti: Demam Berdarah Dengue (DBD), Malaria,
Filariasis (kaki gajah), Chikungunya dan Encephalitis. Biasa (KLB) yang
pada beberapa tahun terakhir ini cenderung mengalami peningkatan
jumlah kasus maupun kematiannya. Nyamuk yang menyebabkan
penyakit-penyakit tersebut diantaranya adalah nyamuk anopheles, aedes,
culex, dan lainnya (Suharyo, 2006).
Pengendalian vektor nyamuk terdiri dari beberapa langkah.
langkah awal dengan menurunkan populasi nyamuk, dengan
memberantas tempat perindukan nyamuk dan juga aktivitas untuk
membunuh nyamuk dewasa ataupun larva nyamuk dengan insektisida
(Komariah, 2010). Penyemprotan rumah dan pemakaian kelambu
berinsektisida pada prinsipnya memperpendek umur nyamuk sehingga
penyebaran dan penularan penyakit dapat terputus (Sucipto, 2011).
lnsektisida umumnya hanya diuji pada skala laboratorium,
sementara berbagai faktor di lapangan sangat berpengaruh. Faktor-faktor
yang mempengaruhi residu insektisida diantaranya adalah dosis, suhu
dan kelembaban, jenis permukaan benda, alat semprot dan · ukuran
Metode yang digunakan untuk mengetahui kekuatan/ daya bunuh
insektisida yang digunakan serta efek residual insektisida yang
digunakan untuk pengendalian vektor secara kimiawi disebut dengan
metode bioassay, baik untuk pemberantasan nyamuk dewasa maupun jentik. Dengan kata lain bioassay dilakukan untuk mengetahui efektif atau tidaknya insektisida yang digunakan terhadap vektor dalam program
pemberantasan vektor. Uji yang banyak dilakukan antara lain uji
terhadap kelambu yang diberi insektisida (Yahya, 2013), uji terhadap
fogging (Djati, 2005), dan uji terhadap IRS (Hariastuti, 2007). Untuk itu, praktikum yang kami lakukan pada acara ini adalah mengetahui metode
pengukuran efektivitas insektisida dalam menanggulangi persebaran
nyamuk yaitu dengan uji bioassay.
2. Tujuan Praktikum
a. Untuk menilai dan mengetahui daya tahan dan efektivitas racun
serangga di lapangan pada bermacam-macam lingkungan
b. Untuk menilai mutu dan operasi/ tindakan pemberantasan vektor
c. Untuk menilai ada/tidaknya racun serangga
B. METODE
1. Alat dan Bahan
a. Bioassay Kontak
1) Nyamuk uji 8) Handuk
2) Kerucut Plastik 9) Kardus berpelepah pisang
3) Gelas plastic 10) Sling hygrometer
4) Kapas 11) Thermometer
2) Kerucut Plastik 9) Kardus berpelepah pisang
4) Kapas 11) Thermometer
5) Kasa plastik yang sudah didesain sesuai bentuk jarring-jaring
kubus sebanyak 12 buah
6) Kotak kardus untuk penempatan nyamuk saat holding yang diberi
pelepah batang isang dan selimut basah untuk menjaga
1) Nyamuk uji disiapkan, diharapkan nyamuk vector dan berasal dari
hasil peliharaan/ penangkapan sekitar lokasi dapat blood feed semua (standar program) atau unfeed semua (standar WHO)
2) Menuju ke lokasi, perkenalkan diri, sampaikan maksud dan tujuan
kepada petugas baik di DKK, Puskesmas (yang sebelumnya telah
dihubungi) maupun perangkat desa/ tokoh masyarakat
3) Rumah yang telah disemprot didatangi (menggunakan penduduk/
tenaga yang menangani penyemprotan sebagai petunjuk jalan).
Biasanya rumah yang telah disemprot ditempelkan stiker yang
telah menunjukkan rumah tersebut telah disemprot pada tanggal
tertentu, dengan insektisida tertentu dan terdapat nama kepala tim
yang di bioassay, tanggal penyemprotan, jenis insektisida yang digunakan. Ukur pula suhu dan kelembapan pada lokasi yang
dilaksanakan bioassay
4) Kerucut ditempelkan pada dinding yang telah disemprot, terdapat
minimal 3 rumah yang diuji dengan dinding yangberbeda-beda
yang terdapat dilokasi tersebut (misalnya tembok, kayu, bambu
atau tembok bercat, tembok berplamir) pada tiap rumah terdapat 3
kerucut yang ditempelkan dengan menggunakan selotip
5) 15 ekor nyamuk uji dimasukan ke dalam masing-masing kerucut
6) Nyamuk diamati kematiannya dalam 30 menit dan 1 jam setelah
dimasukkan ke dalam kerucut
a. Kerucut untuk sampel control ditempelkan pada dinding yang tidak
berinsektisida untuk sampel kontrol
7) Nyamuk diambil dan dipindahkan ke gelas plastik setelah 1 jam
untuk disimpan pada kotak nyamuk, diberi air gula dan diholding
selama 24 jam
8) Dijaga kelembapannya selama penyimpanan dengan diberi handuk
basah, dicatat suhu dan kelembapannya
9) Setelah 24 jam dicatat jumlah kematian dan isikan pada form
10)Insektisida dikatakan efektif apabila jumlah kematian setelah
holding 24 jam > 70%
11)Apabila jumlah kematian pada control antara 5 % - 20 % dikoreksi
dengan formula Abbott’s :
b. Bioassay kelambu
1) Nyamuk uji disiapkan, diharapkan nyamuk vector dan berasal
darihasil penangkapan/ pemeliharaan sekitar lokasi
2) Kerucut ditempelkan pada kelambu, terdapat minimal 3 kelambu
yang diuji, pada tia kelambu terdapat sisi yang ditempel kerucut.
Kerucut ditempelkan bolak balik dengan posisi kelambu
3) 15 ekor nyamuk uji dimasukkan kedalam masing-masing kerucut
4) Diamati kematiannya dalam 30 menit dan 1 jam setelah nyamuk
dimasukkan
5) Untuk control ditempelkan kerucut pada potongan kelambu yang
tidak berinsektisida
6) Setelah 1 jam nyamuk diambil dan dipindahkan ke gelas plastik
untuk disimpan di kolatak nyamuk, diberi air gula dan diholding
selama 24 jam
7) Selama penyimpanan dijaga kelembapannya dengan diberi handuk
basah, dicatat suhu dan kelembapannya
8) Setelah 24 jam dicatat jumlah kematian dan isikan pada form
bioassay kelambu, insektisida pada kelambu dikatakan efektif apabila jumlah kematian setelah holding 24 jam > 70%
9) Apabila jumlah kematian pada control antara 5%-20% kematian
masing-masing kerangka diisi 20 ekor nyamuk, dengan pembagian
sebagai berikut : ada 3 lokasi pengujian diletakkan 3 kerangka
dimana 2 buah diletakkan di dalam rumah dan satu buah di luar
rumah, tiga buah kerangka untuk control. Kerangka control
diletakkan di lokasi yang tidak dilakukan fogging
3) Ujung kasa diikat dengan karet gelang, lalu menggantungkannya
dengan benang kasur
4) Kerangka-kerangka yang telah diisi nyamuk tersebut digantungkan
di tiga lokasi yang telah ditentukan alam wilayah fogging sebelum
5) Dihitung jumlah nyamuk uji yang hidup/ mati kemudian dicatat
satu jam setelah foging dilakukan dan 24 jam sesudahnya
6) Foging dikatakan efektif apabila jumlah kematian seelah holding
24 jam > 70%
7) Apabila jumlah kematian pada control antara 5%-20% kematian
koreksi dengan formula Abbot’s :
C. HASIL
Praktikum bioassay dimulai dengan diberikannya pengarahan tentang
alat dan bahan, serta cara kerja dari uji bioassay yang disampaikan oleh petugas Balai Penelitian dan Pengembangan vector dan reservoir penyakit
(BP2VRP) yaitu Bapak Sunaryo, S.KM., M.Sc. Alat dan bahan yang
dijelaskan diantaranya adalah nyamuk uji yang terdiri dari nyamuk dari genus
Aedes, Anopheles dan Culex, kerangka kubus, kelambu berinsekisida, gelas
plastik yang berisi nyamuk, kerucut plastik (cone), tempat holding nyamuk
dan aspirator bengkok. Setelah itu di demonstrasikan cara mengambil dan
memindahkan nyamuk degan menggunakan aspirator bengkok.
Gambar 1. Holding nyamuk (a) dan gelas plastik (b)
a
Gambar 2. Kerucut plastik (cone)
Gambar 3. Aspirator bengkok
1. Bioassay Kontak
Setelah demonstrasi praktikan dipersilahkan melakukan simulasi
memasang kerucut sesuai dengan pedoman bioassay Indoor Residual Spray (IRS) yaitu pada dinding yang telah disemprot insektisida. Kelompok kami memasang kerucut pada tiga kelompok berbeda yaitu
pada dinding, meja praktikum dan pintu laboratorium, namun
tempat-tempat yang ditempeli kerucut tersebut tanpa disemprot insektisida
sebelumnya. Praktikan hanya mempraktekkan cara memasang kerucut
dengan benar yaitu sebelum ditempelkan dasar kerucut ditempeli dengan
solasi agar dapat menempel pada dinding dengan kuat. Setelah dasar
pada dinding dengan menekan dasarnya hingga dipastika dasarya melekat
kuat pada dinding.
Gambar 4. Penempelan solasi pada dasar cone
Gambar 5. cone yang dipasang pada dinding, meja dan pintu
Praktikum dilanjutkan dengan pengambilan dan pemindahan
nyamuk uji sebanyak 10-15 nyamuk dengan menggunakan aspirator
bengkok dari tempat holding ke dalam gelas plastik oleh praktikan.
Caranya yaitu dengan membuka tali holding kemudian menghisap nyamuk
dengan aspirator bengkok yang telah disterilkan dengan alcohol 70%
sebelumnya, jika nyamuk yang terperangkap dalam aspirator telah
mencukupi jumlahnya tutup ujung lubangnya dengan jari, lalu keluarkan
aspirator dari tempat holding kemudian ikat lagi holding agar nyamuk
Gambar 6. Pengambilan nyamuk dari holding.
Selanjutnya buka kapas
penutup gelas plastik
hembuskan semua nyamuk
ke dalam gelas plastik
kemudian gelas ditutup
kembali dengan kapas.
Gambar 7. Memasukkan nyamuk ke dalam gelas plastik
Selanjutnya nyamuk dari gelas plastik diambil dan dipindahkan dari gelas plastik cone yang menempel di dinding.
Kelompok kami hanya memasukkan nyamuk sebanyak 4 nyamuk
ke dalam cone. Prosedur yang dilakukan sama dengan pemindahan nyamuk dari holding ke gelas plastik yaitu dengan aspirator. Namun pada
saat pemindahan nyamuk pertama, nyamuk tersebut langsung mati karena
terjepit ujung aspirator. Beberapa menit kemudian terdapat juga nyamuk
yang terperangkap pada dasar cone yang tidak menempel sempurna pada dinding. Hal ini perlu dihindari apabila dilakukan pada uji bioassay yang sebenarnya karena akan menimbulkan bias pada jumlah nyamuk yang mati
tetapi bukan disebabkan karena insektisida. Nyamuk seharusnya dibiarkan
30-60 menit pada dinding namun kami hanya megamati selama ±10 menit,
kemudian nyamuk dipindahkan lagi ke dalam gelas plastik yang
selanjutnya akan pindahkan lagi ke dalam holding untuk diamati selama
24 jam. Semua tahap praktik tersebut dilakukan oleh setiap praktikan
secara bergantian.
2. Bioassay Kelambu
Praktikum bioassay kelambu, praktikan hanya mengamati cone yang di tempelkan pada bagian luar dan dalam kelambu berinsektisida.
Namun praktikum ini tidak menilai apakah insektisida yang digunakan
efektif atau tidak dikarenakan membutuhkan waktu yang lama untuk
menguji sebuah insektisida yang digunakan serta terbatasnya peralatan
yang disediakan dan petugas yang mendampingi.
3. Bioassay Fogging
Praktikum bioassay fogging, praktikan hanya melihat kubus yang terbuat dari besi berlapis kasa yang diikat di bagian atasnya dengan ukuran
12x12x12 m3. Kubus besi tersebut akan dipasang di luar dan di dalam
rumah sebelum dilakukan fogging ketika uji bioassay fogging yang sebenarnya dilakukan. Kasa kubus diikat dibagian atasnya dengan karet
gelang kemudian digantung menggunakan benang kasur.
Gambar 10. Kubus besi berlapis kasa
D. PEMBAHASAN
Bioassay merupakan metode untuk mendeteksi dan mengetahui karakter resistensi insektisida pada populasi vektor tertentu. Uji bioassay ini memiliki prinsip yang sam denga kertas uji kerentanan WHO yaitu dengan
memaparkan insektisida dengan konsentrasi tertentu dalam beberapa waktu.
Selain itu, uji ini juga dapat dilakukan untuk mengukur efikasi formula
insektisida (Brogdon, 2014).
Berdasarkan metode, jenis uji bioassay terbagi menjadi dua yaitu uji bioassay dengan metode WHO dan uji bioassay dengan metode botol bioassay. namun yang paling banyak digunakan di berbagai negara adalah uji bioassay dengan metode WHO (Aizoun et al, 2013). Namun berdasarkan penerapan uji dalam program pada pemberantasan vektor khususnya nyamuk
terdiri dari uji terhadap kelambu yang diberi insektisida (Yahya, 2013), uji
Uji bioassay terdiri dari beberapa jenis antara lain:
1. Uji biossay nyamuk terhadap kelambu yang diberi insektisida (Yahya, 2013)
Nyamuk yang dipakai untuk pengujian adalah nyamuk An. vagus dewasa
yang merupakan hasil pembiakan dari nyamuk yang ditangkap dari
sekitar kandang sapi dan kerbau di lokasi penelitian. Sejumlah nyamuk
hasil pembiakan dalam kondisi yang sehat dan kenyang darah
dimasukkan ke dalam satu bio-assay cone (Depkes, 1986 dalam Yahya,
2013). Untuk satu bio-assay cone hanya dimasukkan lima ekor nyamuk dengan periode paparan dengan kelambu selama tiga menit, untuk
mengurangi gangguan antar nyamuk pada saat paparan yang singkat di
atas kelambu (Depkes, 2006).
2.Uji bioassay thermal fogging
Memiliki tujuan untuk mengetahui efetivitas insektisida yang
digunakan dalam thermal fogging tersebut. pada laporan kegiatan yang dilakukan oleh Djati (2005), nyamuk uji yang digunakan merupakan
nyamuk Aedes aegypti yang diambil dari hasil biakan laboratorium
dalam kondisi kenyang
3.Uji bioassay terhadap IRS
nyamuk vektor malaria umumnya aktif mencari mangsa pada malah hari,
setelah menghisp darah nyamuk biasanya beristirahat sementara di
sekitar rumah. seingga diharapkan insektisda yang efektif adalah ketika
nyamuk yang telah terpapar insektisda di dinding akan mati paling lama
24 jam. untuk itu, cara pengujian bioassay pada IRS ini adalah dengan menempelkan kerucut yang berisi nyamuk-nyamuk kenyang pada 3
rumah berbeda yang memiliki jenis dinding berbeda (Hariastuti, 2007).
Dari ketiga jenis bioassay tersebut, tidak dapat ditentukan mana yang paling efektif karena efektivitas uji bioassay dapat diketahui berdasarkan pada lamanya waktu paparan dan dosis diagnosis penggunaan
insektisida (CDC, 2013), lokasi yang menjadi sasaran (Hariastuti, 2007),
konsentrasi insektisida yang digunakan, formulasi, permukaan,
kelembaban, suhu dan metode evaluasi.
Metode bioassay memiliki beberapa kelebihan dan kekurangan, diantaranya kelebihan bioassay versi CDC (botol bioassay) dibandingkan dengan uji kerentanan WHO menurut, Aizon et al (2013), adalah sebagai
berikut:
1. Dapat untuk mengetahui efektivitas insektisida yang digunakan
khususnya pada program-program pengendalian vektor oleh
pemerintah sehingga dapat menjadi bahan evaluasi dalam
menentukan jenis insektisida.
2. Alat yang digunakan dalam uji bioassay cukup mudah digunakan dan tidak memerlukan pelatihan intensif untuk dapat
menggunakannya dengan baik dan benar.
3. Menggunakan nyamuk yang lebih sedikit dari uji kerentanan WHO
4. Tidak perlu transfer nyamuk dari satu botol ke botol yang lain
5. Memungkinkan deteksi mekanisme resistensi sederhana atau pun
ganda pada nyamuk uji terhadap insektisida
6. Bioassay jenis botol assay lebih sederhana dan cepat.
7. Setiap konsentrasi insektisida (murni atau dirumuskan) dapat
dievaluasi.
Kekurangan uji bioassay menurut CDC adalah :
1. Pelaksanaannya membutuhkan waktu yang lama yaitu 24 jam untuk
memantau dan mencatat jumlah kematian nyamuk akibat insektisida.
2. Pelaksanaan uji bioassay harus mengikuti jadwal yang ditetapkan oleh pejabat daerah sehingga tidak dapat dilakukan sesuai dengan
kehendak peneliti.
3. Setiap tempat yang diuji harus dilapisi insektisida terlebih dahulu
4. Catatan kematian dalam alat uji masih harus memerlukan perlakuan
Vatandoost et al (2009), juga menyatakan kelemahan uji bioassay dibandingkan dengan efek residu model laboratorium adalah sebagai
berikut:
1. Memakan waktu lama
2. Relatif mahal
E. DAFTAR PUSTAKA
Aïzoun, N., Razaki O., Roseric A., Roland A., Olivier O., Virgile G., Rock A., Gil G. P. dan Martin A. 2013. Comparison of the standard WHO susceptibility tests and the CDC bottle bioassay for the determination of insecticide susceptibility in malaria vectors and their correlation with biochemical and molecular biology assays in Benin, West Africa. Parasites & Vectors. Vol. 6 (147): 1-10.
Beriajaya. 2006. Peranan Vektor Sebagai Penular Penyakit Zoonosis. Lokakarya Nasional Penyakit Zoonosis. Balai Penelitian Veteriner. Bogor.
Brogdon W. G. dan Adeline Chan. 2014. Guideline for Evaluating Insecticide Resistance in Vectors Using the CDC Bottle Bioassay.
http://www.cdc.gov/malaria/resources/
pdf/fsp/ir_manual/ir_cdc_bioassay_en.pdf. Diakses pada Rabu, 25 Juni 2014.
Djati, R. A. P. 2005. Bioassay Fogging di Desa Kalimendong Kecamatan Purwonegoro Kabupaten Banjarnegara. Laporan Kegiatan Litbang P2B2 Banjarnegara.
Hadi, dkk. 2010. Efektifitas Pemanasan Kelambu Berinsektisida, Olyset Terhadap Nyamuk Aedes Aegypti (Diptera: Culicidae). Jurnal Ekologi Kesehatan. Vol. 9 (4): 1333-1339.
Hariastuti, N. Ika. 2007. Tinjauan Hasil Penyemprotan IRS Melalui Bioassay yang Dilaksanakan Loka Litbang P2B2. Laporan Kegiatan. Balaba. Ed. 005 (2): 11 – 12.
Komariah, dkk. 2010. Pengendalian Vektor. Jurnal Kesehatan Bina Husada. Vol 6 (1): 34 – 43.
Suharyo., dkk. 2006. Dinamika A. Aegypti sebagai vektor penyakit. Jurnal Kesehatan Masyarakat. Vol 2 (1).
Vatandoost H., M.R. Abai, M. Abbasi, M. Shaeghi, M. Abtahi & F. Rafie. 2009. Designing of a laboratory model for evaluation of the residual effects of deltamethrin (K-othrine WP 5%) on different surfaces against malaria vector, Anopheles stephensi (Diptera: Culicidae). Journal Vector Borne Disease. Vol. 46: 261–267.
