PEMBERIAN KRIM EKSTRAK LIDAH BUAYA (Aloe vera Linn.) TOPIKAL MENCEGAH PENURUNAN PROKOLAGEN PADA TIKUS WISTAR (Rattusnorvegicus) YANG DIPAPAR SINAR UVB.

i

TESIS

PEMBERIAN KRIM EKSTRAK LIDAH BUAYA

(

Aloe vera Linn.

) TOPIKAL MENCEGAH PENURUNAN

PROKOLAGEN PADA TIKUS WISTAR

(

Rattusnorvegicus

) YANG DIPAPAR

SINAR UVB

ANDRE KURNIAWAN NIM 1290761035

PROGRAM MAGISTER

PROGRAM STUDI ANTI-AGING MEDICINE

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

i

TESIS

PEMBERIAN KRIM EKSTRAK LIDAH BUAYA

(

Aloe vera Linn.

) TOPIKAL MENCEGAH PENURUNAN

PROKOLAGEN PADA TIKUS WISTAR

(

Rattusnorvegicus

) YANG DIPAPAR

SINAR UVB

ANDRE KURNIAWAN NIM 1290761035

PROGRAM MAGISTER

PROGRAM STUDI ANTI-AGING MEDICINE

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

Lembar Persetujuan Pembimbing/promotor

TESIS INI TELAH DISETUJUI

PADA TANGGAL : ………..

Pembimbing I Pembimbing II

Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And, FAACS Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp.FK NIP 194612131971001 NIP :194606191976021001

Mengetahui,

Ketua Program Studi Magister Direktur Program Pascasarjana

Program Pascasarjana Universitas Udayana

Universitas Udayana

Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And, FAACS Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp.S(K)

Lembar Penetapan Panitia Penguji Tesis

Tesis ini Telah Diuji dan Dinilai oleh Panitia Penguji pada

Program Pascasarjana Universitas Udayana pada Tanggal : ………

Berdasarkan SK Rektor Universitas Udayana, No :...

Tanggal : ...

Panitia penguji Tesis adalah:

Ketua : Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And, FAACS Anggota : 1. Prof.dr.I Gusti Made Aman, Sp. FK

2. Prof.Dr.dr.J Alex Pangkahila, M.SC,Sp.And

i

PEMBERIAN KRIM EKSTRAK LIDAH BUAYA

(

Aloe vera Linn.

) TOPIKAL MENCEGAH PENURUNAN

PROKOLAGEN PADA TIKUS WISTAR

(

Rattusnorvegicus

) YANG DIPAPAR

SINAR UVB

Tesis Untuk Memperoleh Gelar Magister

Pada Program Magister, Program Studi Ilmu Biomedik, Program Pascasarjana Universitas Udayana

ANDRE KURNIAWAN NIM : 1290761035

PROGRAM MAGISTER

PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK

PROGRAM PASCA SARJANA

UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

ii

Lembar Persetujuan Pembimbing/promotor

TESIS INI TELAH DISETUJUI

PADA TANGGAL : ………..

Pembimbing I Pembimbing II

Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And, FAACS Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp.FK NIP 194612131971001 NIP :194606191976021001

Mengetahui,

Ketua Program Studi Magister Direktur Program Pascasarjana

Program Pascasarjana Universitas Udayana

Universitas Udayana

Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And, FAACS Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp.S(K)

iii

Lembar Penetapan Panitia Penguji Tesis

Tesis ini Telah Diuji dan Dinilai oleh Panitia Penguji pada

Program Pascasarjana Universitas Udayana pada Tanggal : ………

Berdasarkan SK Rektor Universitas Udayana, No :...

Tanggal : ...

Panitia penguji Tesis adalah:

Ketua : Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And, FAACS Anggota : 1. Prof.dr.I Gusti Made Aman, Sp. FK

2. Prof.Dr.dr.J Alex Pangkahila, M.SC,Sp.And

iv

SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT

Saya yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama : Andre Kurniawan

NIM :

1290761035

Program Studi : Magister Ilmu Biomedik Kekhususan Anti Aging Medicine

Judul Tesis :

PEMBERIAN KRIM EKSTRAK LIDAH BUAYA (Aloe vera Linn.) TOPIKAL MENCEGAH PENURUNAN PROKOLAGEN PADA TIKUS WISTAR

(Rattusnorvegicus) YANG DIPAPAR SINAR UVB

Dengan ini menyatakan bahwa karya ilmiah Tesis/Disertasi* ini bebas plagiat.

Apabila di kemudian hari terbukti plagiat dalam karya ilmiah ini, maka saya bersedia menerima sanksi sesuai peraturan Mendiknas RI No. 17 Tahun 2010 dan Peraturan Perundang-undangan yang berlaku.

Denpasar, 15 Juli 2016

Yang membuat Pernyataan

( Andre Kurniawan )

v

UCAPAN TERIMAKASIH

Pertama-tama perkenankanlah penulis memanjatkan puji syukur kehadiran Tuhan Yang Maha Esa, karena rahmat dan karunia-Nya penelitian dan penyusunan tesis yang berjudul “Pemberian Krim Ekstrak Lidah Buaya (Aloe vera Linn.) Topikal Mencegah Penurunan Prokolagen Pada Tikus Wistar (Rattus norvegicus) Yang Dipapar Sinar UVB” dapat berjalan lancar.

Tesis ini disusun dalam rangka memenuhi persyaratan tugas akhir belajar untuk meraih gelar Magister pada Program Magister Program Studi Ilmu Kedokteran Biomedik, kekhususan Anti-Aging Medicine Program Pascasarjana Universitas Udayana. Dengan selesainya laporan ini, penulis ingin menyampaikan rasa hormat serta penghargaan dan ucapan terimakasih yang sebesar besarnya kepada:

1. Prof. Dr. dr. I Ketut Suastika, SpPD-KEMD selaku Rektor Universitas Udayana yang telah meberikan fasilitas pendidikan dan kesempatan kepada ProgramPascasarjana Universitas Udayana

2. Prof. Dr. dr. A. A Raka Sudewi, SpS(K) sebagai Direktur Program Pascasarjana Universitas Udayana, Prof. Dr. Made Budhiarsa, MA selaku Asdir I dan Prof. Dr. Made Sudiana Mahendra, Ph. selaku Asdir II atas kesempatan yang diberikan untuk menjadi mahasiswa di Program Pasca Sarjana Universitas Udayana.

3. Prof.Dr.dr. Wimpie I. Pangkahila Sp.And, FAACS, Koordinator Program Studi Ilmu Kedokteran Biomedik Kekhususan Anti Aging

Medicine Fakultas Kedokteran Universitas Udayana, serta penguji dan

pembimbing I yang banyak memberikan bimbingan, koreksi, masukan, saran ilmiah serta memberikan semangat untuk dapat menyelesaikan karya ilmiah.

4. Dr.dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih M.Sc., SpGK, Ketua Program Studi Ilmu Kedokteran Biomedik Kekhususan Anti Aging Medicine

Fakultas Kedokteran Universitas Udayana.

5. Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp.FK, Kepala Laboratory Animal Unit Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Udayana, serta penguji dan pembimbing II, yang telah meberikan masukan dan saran ilmiah dan semangat untuk terus maju untuk menyelesaikan karya ilmiah ini.

6. Prof.Dr.dr.J Alex Pangkahila, M.SC,Sp.And selaku penguji yang secara teliti mengkoreksi tesis ini dan memberikan masukan yang positif baik saat akan mulai penelitian sampai penulisan, untuk lebih menyempurnakan laporan ini.

7. Dr. A.A.G.P .Wiraguna,SpKK (K) selaku penguji yang secara teliti mengkoreksi tesis ini dan memberikan masukan yang positif baik saat akan mulai penelitian sampai penulisan, untuk lebih menyempurnakan laporan ini.

vi

9. Bapak Wibi Wirawan yang memberi bantuan tanpa kenal lelah dari saat pemeliharaan tikus, melakukan biopsi sampai pengiriman hasil biopsi sehingga penelitian berjalan lancar.

10.Dr. Husin R.M. Drs. Apt. M.Kes., selaku Kepala UPT Materia Medica beserta staff yang membantu dan membimbing pada saat pembuatan ekstrak Aloe vera.

11.Bapak Yoga yang sudah banyak membantu dalam pembuatan analisa kimia ekstrak Aloe vera.

12.Para dosen dan pengajar Ilmu Biomedik FK UNUD, seluruh karyawan bagian Ilmu Biomedik serta semua pihak yang telah membantu selama pendidikan, penelitian dan penulisan tesis ini, dengan rendah hati saya ucapkan beribu terimakasih.

13.Istri tercinta, Merryta Yessy dan anak-anak tersayang, Aurelia Kasih dan Jonathan Oliver, yang ikut merasakan suka duka penulis selama menjalankan pendidikan Master di Program Biomedik kekhususan

Anti Aging Medicine di FK UNUD. Tidak lupa kepada orang tua dan

saudara yang juga memberi dukungannya selama penulis menempuh pendidikan.

14.Teman-teman di Program Magister Program Studi Ilmu Kedokteran Biomedik, kekhususan Anti-Aging Medicine Program Pascasarjana Universitas Udayana, khususnya angkatan 2012, atas motivasi, semangat dan kebersamaannya.

Kekurangan adalah milik manusia, tesis ini memang masih jauh dari sempurna. Saran dari berbagai pihak akan penulis terima dengan hati terbuka untuk kelengkapan dan lebih baiknya laporan tesis ini. Semoga semua yang baik dari segala penjuru bersatu di dalam hati kita semua.

Akhir kata, semoga Allah Yang Maha Kuasa, senantiasa melimpahkan berkat dan anugerah-Nya kepada kita semua, amin.

Denpasar, 15 Juli 2016

vii

ABSTRAK

PEMBERIAN KRIM EKSTRAK LIDAH BUAYA (Aloe vera Linn.) TOPIKAL MENCEGAH PENURUNAN PROKOLAGEN PADA TIKUS WISTAR (Rattus norvegicus) YANG DIPAPAR SINAR UVB

Paparan sinar UV B terus menerus pada kulit menyebabkan perubahan struktur dan fungsi kulit. Sinar UV B dapat merangsang pembentukan radikal bebas yaitu molekul yang sangat reaktif dengan elektron tidak berpasangan yang dapat langsung merusak berbagai membran sel struktural, lipid, protein dan DNA. Antioksidan adalah zat yang dapat memberikan perlindungan dari tekanan oksidatif endogen dan eksogen oleh radikal bebas. Ekstrak lidah buaya mengandung flavonoid 1,18 mg/100mL, total fenol 8,08 mg/100mL, tanin 10,93 mg/100mL dan kapasitas antioksidan 43,79 mg/L. Tujuan penelitian ini untuk membuktikan bahwa pemberian krim ekstrak lidah buaya mencegah penurunan prokolagen pada tikus Wistar (Rattus norvegicus) yang dipapar sinar UVB.

Penelitian ini adalah penelitian animal experimental dengan post test only

control group design. Sebanyak 36 ekor tikus Wistar jantan dibagi menjadi 2

kelompok yang masing-masing terdiri dari 18 ekor, yaitu kelompok 1 diolesi krim dasar dan kelompok 2 diolesi krim ekstrak lidah buaya kemudian keduanya dipapar sinar UVB dengan dosis total 840 mJ/cm² selama 4 minggu. Akhir penelitian kulit tikus kedua kelompok dieksisi untuk pemeriksaan prokolagen dengan imunohistokimia.

Hasil Uji Shapiro-Wilk dan Levene’test menunjukkan bahwa distribusi data kedua kelompok normal dan varian data kedua kelompok homogen dengan p ≥ 0,05. Hasil analisis komparatif kedua kelompok dengan menggunakan t

independent test menunjukkan bahwa terdapat perbedaan secara bermakna

jumlah prokolagen antara kedua kelompok dengan p < 0,05. Rerata prokolagen kelompok 2 adalah 17,50% sedangkan kelompok 1 rerata prokolagen adalah 6,94%.

Simpulan penelitian ini adalah pemberian krim ekstrak lidah buaya mencegah penurunan prokolagen pada tikus Wistar jantan yang dipapar UVB.

viii

ABSTRACT

ADMINISTRATION OF TOPICAL ALOE VERA EXTRACT CREAM AVOID PROCOLLAGEN DECLINE IN WISTAR

RAT (Rattus norvegicus) EXPOSED TO UV B LIGHT

UV B light constant exposure to the skin cause the change in skin structure and function. UV B light induces formation of free radicals, a very reactive molecules to non-paired electron which can destruct structural cell membrane, lipid, protein and DNA. Antioxidant may give protection from endogene and exogene pressure caused by free radicals. Aloe vera extract contain flavonoid 1,18 mg/100mL, total phenol 8,08 mg/100mL, tanin 10,93 mg/100mL and antioxidant capacity of 43,79 mg/L. The aim of this research was to prove that topical Aloe vera can avoid procollagen decline in Wistar rat (Rattus

norvegicus) exposed to UV B light.

This research was an animal experimental with post test only control group design. Thirty six male wistar rats divided into 2 groups (18 rats in each group). Group 1 was treated by basic cream and Group 2 was treated with Aloe vera cream. Both groups were exposed to UV B Light with total dosage 840 mJ/cm² in 4 weeks and excision of the skin were done to check the amount of dermal collagen by immunohistochemistry.

Shapiro-Wilk and Levene’ Test results showed that the distribution of these two

groups were normal and the variant was homogene with p ≥ 0,05. The result of comparative analysis of both groups using t independent test showed that there was a significant difference of prokolagen amount between two groups (p < 0,05). The mean of procollagen amount in Group 2 was 17,50% and in Group 1 was only 6,94%.

It was concluded that topical administration of 20% topical aloe vera extract cream avoided procollagendecline in male Wistar rats exposed to UV B light.

ix

DAFTAR ISI

SAMPUL DALAM………i

PRASYARAT GELAR……….ii

LEMBAR PERSETUJUAN………..iii

PENETAPAN PANITIA PENGUJI……….iv

SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT………..v

UCAPAN TERIMAKASIH………..vi

ABSTRAK ……….……….viii

ABSTRACT ……….ix

DAFTAR ISI………..x

DAFTAR GAMBAR………xiii

DAFTAR TABEL………xiv

DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG..………..xv

BAB I PENDAHULUAN ... 1

1.1. Latar Belakang ... 1

1.2. Rumusan Masalah ... 4

1.3. Tujuan Penelitian ... 4

1.4. Manfaat Penelitian ... 4

1.4.1. Manfaat Ilmiah ... 5

1.4.2. Manfaat Aplikasi ... 5

BAB II KAJIAN PUSTAKA ... ..6

2.1. Penuaan (Aging) ... ..6

2.1.1 Teori Penuaan dan Faktor yang Mempengaruhi Penuaan ... ..7

2.2. Sinar Ultra Violet ... 12

2.2.1. Efek Radiasi Sinar UV ... 13

2.3.Anatomidan Fungsi Kulit Manusia ... 15

2.3.1. LapisanEpidermis ... 15

2.3.2. LapisanDermis ... 17

2.3.3. Lapisan Subkutis ... 17

2.3.4. Fibroblas ... 18

2.3.4. Kolagen ... 19

x

2.4.1. Perubahan Klinis Kulit pada Photoaging ... 25

2.4.2. Perubahan Histopatologi pada Kulit Photoaging ... 26

2.4.3. Pencegahan dan Pengobatan Photoaging ... 27

2.5. Radikal Bebas ... 28

2.6. Antioksidan ... 30

2.7. Lidah Buaya ... 31

2.7.1. Morfologi Lidah Buaya ... 33

2.7.2. KandunganLidah Buaya ... 35

2.7.3. Lidah BuayaSebagai Antioksidan ... 36

BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN 3.1. Kerangka Berpikir ... 38

3.2. Konsep Penelitian ... 39

3.3. Hipotesis Penelitian ... 39

BAB IV METODE PENELITIAN ... 40

4.1 Rancangan Penelitian ... 40

4.2. Lokasi dan Waktu Penelitian ... 40

4.3. Ruang Lingkup Penelitian ... 41

4.4. Penentuan Sumber Data ... 41

4.4.1. Populasi ... 41

4.4.2. Sampel ... 41

4.4.3. Teknik Pengambilan Sampel ... 41

4.4.4. Besar Sampel ... 42

4.4.5. Kriteria Eligibilitas ... 42

4.4.5.1 .Kriteria Inklusi ... 42

4.4.5.2. Kriteria Drop Out ... 43

4.5. Variabel Penelitian ... 43

4.5.1. Jenis variabel ... 43

4.5.2. Definisi Operasional Variabel ... 43

4.6. BahanPenelitian ... 44

4.7. Prosedur Penelitian ... 45

4.8. Alur Penelitian ... 48

4.9. Analisis Data ... 48

BAB V HASIL PENELITIAN ... 50

5.1. Analisis Deskriptif ... 50

5.2. Uji Normalitas Data ... 50

5.3. Uji Homogenitas Data ... 51

5.4. Prokolagen ... 51

BAB VI PEMBAHASAN HASIL PENELITIAN ... 55

xi

6.2. Distribusi dan Homogenitas Data Hasil Penelitian ... 55

6.3. Pengaruh Pemberian Ekstrak Lidah Buayaterhadap Prokolagen ... 56

BAB VII SIMPULAN DAN SARAN ... 60

7.1. Simpulan ... 60

7.2. Saran ... 60

DAFTARPUSTAKA ... 60 Lampiran 1: Prosedur Penanganan Hewan Coba

Lampiran 2 : Ethical Clearance

Lampiran 3 : Hasil Analisis Ektrak Aloe vera

Lampiran 4 : Keterangan Pembuatan Ekstrak Lampiran 5 : Analisa Statistika

Lampiran 6 : Nilai Rata-Rata Prokolagen per Lapang Pandang

xii Daftar Gambar

Gambar 2. 1 Mekanisme Photoaging akibat sinar UV …………... ₂₄

Gambar 2. 2 Lidah buaya (Aloe vera Linn.)……….……….…... 35

Gambar 3. 1 Bagan konsep Penelitian ………. 39

Gambar 4. 1 Skema Rancangan Penelitian………... 40

xiii Daftar Tabel

Tabel 2. 1 Kandungan kimia lidah buaya………... 35

Tabel 2. 2 Hasil Uji identifikasi fitokimia ekstrak lidah buaya ... 37

Tabel 5. 1 Hasil Analisis Deskriptif Prokolagen….………... 50

Tabel 5. 2. Hasil Uji Normalitas Data Prokolagen…...…….………... 51

Tabel 5. 3. Hasil Uji Homogenitas Data Prokolagen..…….………... 51

xiv

DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG

AAM : Anti Aging Medicine

AP-1 : Activator Protein

Ca : Kalsium

cDNA : Complementary Deoxyribonucleic Acid

Cu : Kuprum

CoQ10 : koenzim Q10

DHEA : Dehydroepiandrosterone

DHR : Dihydrorhodamine

DNA : Deoxyribonucleic acid

deg. : Degeneratif

et al : dan kawan-kawan

ECM : Extra Cellular Matrix

eV : Electron Volts IL-1 : Interleukin-1

KC : Keratinosit

Kc : Kilo Joule

xv

MED : Minimal Erythema Dose

mJ/cm² : mili Joule per sentimeter persegi

MMP : Matrix Metalloproteinase

MMPs : Matrix Metalloproteinases

MMP-1 : Interstitial Collagenase

mRNA : Messenger Ribonucleic Acid

Nm : Nano Meter

NO : Nitric Oxide

O2 : Oksigen

P : Fosfor

pH : Pangkat Hidrogen

ROS : Reactive Oxygen Species

SOD : Superoxide Dismutase

TGF-β : Transforming Growth Factor-beta

TIMP-1 : Tissue Inhibitor of Metalloproteinase

TL : Tubular Lamp

TMB : Tetramethylbenzidine

TNF-α : Tumor Necrosing Factor-alfa

UV : Ultraviolet