Lampiran 1. Kromatogram Hasil Optimasi Perbandingan Fase Gerak Metanol 60% - Dapar Fosfat pH 6,8 dan Laju Alir 1 ml/menit pada Sampel Sirup
1.1. Kromatogram Optimasi pada Sampel Sirup dengan Fase Gerak Metanol 60% - Dapar Fosfat pH 6,8 (30:70) dan Laju Alir 1 ml/menit
a. Sirup ABC
c. Sirup Kapten
e. Sirup Pohon Pinang
Gambar11.
a, b, c, d, e
danf
merupakankromatogrampenyuntikandari larutan1.2. Kromatogram Optimasi pada Sampel Sirup dengan Fase Gerak Metanol 60% - Dapar Fosfat pH 6,8 (40:60) dan Laju Alir 1 ml/menit
a. Sirup ABC
c. Sirup Kapten
e. Sirup Pohon Pinang
Gambar12.
a, b, c, d, e
danf
merupakankromatogrampenyuntikandari larutan1.3. Kromatogram Optimasi pada Sampel Sirup dengan Fase Gerak Metanol 60% - Dapar Fosfat pH 6,8 (50:50) dan Laju Alir 1 ml/menit
a. Sirup ABC
c. Sirup Kapten
e. Sirup Pohon Pinang
Gambar13.
a, b, c, d, e
danf
merupakankromatogrampenyuntikandari larutansirup ABC, James, Kapten, Piramid Unta dan Pohon Pinang denganfasegerak metanol 60% - dapar fosfat pH 6,8 (50:50), volumepenyuntikan20µ l, laju alir1 ml/menit padapanjang gelombang225nm
a
c
e
f
Gambar14.
a, b, c, d, e
danf
merupakankromatogrampenyuntikan6kalidarilarutansirup ABC,fasegerak metanol 60% - dapar fosfat pH 6,8 (40:60), volumepenyuntikan20µ l, laju alir1 ml/menit padapanjang gelombang225nm
a
c
e
f
Gambar15.
a, b, c, d, e
danf
merupakankromatogrampenyuntikan6kalidari larutansirupJAMES,fasegerak metanol 60% : dapar fosfat pH 6,8Lampiran 4. KromatogramHasilPenyuntikanLarutanSirupKAPTEN
a
c
e
f
Gambar16.
a, b, c, d, e
danf
merupakankromatogrampenyuntikan6kalidari larutansirup KAPTEN,fasegerak metanol 60% : dapar fosfat pHLampiran 5. KromatogramHasilPenyuntikanLarutanSirupPIRAMID UNTA
a
c
e
f
Gambar17.
a, b, c, d, e
danf
merupakankromatogrampenyuntikan6kalidariLampiran 6. KromatogramHasilPenyuntikanLarutanSirupPOHON PINANG
a
c
e
f
Gambar18.
a, b, c, d, e
danf
merupakankromatogrampenyuntikan6kalidariLampiran 7. Perhitungan Persamaan Regresi dari Kurva Kalibrasi Natrium SakarinBPFI
DataHasilPenyuntikanLarutanNatrium SakarinBPFI BerdasarkanLuas Puncak
No Konsentrasi(ppm) LuasArea
1 25 2255624,3
2 50 4231920,4
3 100 7895845,7
4 150 11626808,1
5 200 15283908,9
TabelKonsentrasi(X)Vs Luas Area(Y)untukNatrium Sakarin No
Konsentrasi
(ppm) LuasArea XY X2 Y2
X Y
1 0 0 0 0 0
2 25 2255624,3 56390607,5 625 5,08784x1012
3 50 4231920,4 211596020 2500 17,90915x1012 4 100 7895845,7 789584570 10000 62,34438x1012 5 150 11626808,1 1744021215 22500 135,18267x1012 6 200 15283908,9 3056781780 40000 233,59787x1012 ∑ 525 41294107,4 5858374193 75625 454,12191x1012 Rata2 87,5 6882351,233 976395698,8 12604,166 75,686985x1012
a =
(
X)
nX n Y X XY / / 2 2
∑
∑
∑
∑ ∑
− − =( )(
)
( )
525 /6 75625 6 / 4 , 41294107 525 5858374193 2 − − = 75625,76152 Y = a X + bb = Y− aX
= 6882351,233 – (75625,76252)(87,5) = 265097,1
Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = 75625,76152X + 34676853,2
=
( )(
)
( )
{
75625 525 /6}
{
454,12191 10(
41294107,4)
/6}
6 / 4 , 41294107 5 , 52 5858374193 2 102 × −
−
−
= 10
Lampiran 8. ContohPerhitunganuntukMencariKadarNatriumSakarin dalam Sirup Konsentrat (Sirup James)
Berat sampel yang ditimbang = 1,2495 Luas Area (Y) = 3233499
Persamaan Regresi : Y = 75625,76152X + 265097,1
X = 76152 , 75625 1 , 265097 3233499−
= 39,2512 µg/ml
Konsentrasi Na. Sakarin = 39,2512 µg/ml
(g) Sampel Berat (ml) Larutan Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Sakarin Na.
Kadar =
= g ml ml g 2495 , 1 10 / µ 39,2512 ×
Lampiran 9. HasilPerhitunganKadarNatriumSakarin padasirupABC, JAMES, KAPTEN, PIRAMID UNTA dan POHON PINANG
No Sirup LuasArea Kadar(mg/kg) Kadar rata-rata (mg/kg)
1 ABC
5707052 718,0677
722,3643 5693358 716,2605
5766873 725,9610 5747163 723,3605 5769341 726,2873 5753895 722,3643
2 JAMES
3233499 314,1353
302,3955 3214145 312,0976
3170977 307,5190 3258579 316,7891
2918559 280
2947152 283,8319
3 KAPTEN
7528679 767,0212
773,1373 7438420 757,4900
7614343 776,0669 7645895 779,3987 7648524 779,6766 7643729 779,1703
4 PIRAMID UNTA
6172301 622,1010
610,9154 6154296 620,2047
6134898 618,1618 5963086 600,0677 5907742 594,2394 6064210 610,7176
5 POHON PINANG
9284732 938,3690
1.034,2962 10201864 1.033,7836
Lampiran 10. ContohPerhitunganuntukMencariKadarNatriumSakarin dalam Sirup Sesuai Aturan Penggunaannya (Sirup James)
D
m = ×
C B A g/kg) ( nya penggunaan aturan sesuai sirup dalam Sakarin Na. Kadar Keterangan:
A = Volume total sirup B = Saran penyajian (gelas) C = Volume 1 gelas (200 ml)
D = Kadar Na. Sakarin dalam sediaan sirup
D
m = ×
C B A g/kg) ( nya penggunaan aturan sesuai James sirup dalam Sakarin Na. Kadar
= 302,3955mg/kg
ml/gelas 200 gelas 21 ml 600 ×
Lampiran 11. KomatogramHasilUjiPerolehanKembali(%recovery)dariSirup ABCsebelumDitambah Natrium Sakarin BPFI 201,4597µg/gsampel
a
c
e
f
Gambar19.
a, b, c, d, e
danf
merupakankromatogramdarilarutanSirupABC sebelum ditambahNatriumSakarinBakumasing-masing 201,4597 µg/gsampel, fase gerak metanol 60%-daparfosfat pH 6,8 (40:60),77
Lampiran 12. KomatogramHasilUjiPerolehanKembali(%recovery)dari Sirup ABC setelah Ditambah Natrium Sakarin201,4597µg/gsampel
a
78 c
79 e
f
80
metanol 60% : dapar fosfat pH 6,8 (40:60),volumepenyuntikan20µ l, laju alir1ml/menitpadapanjanggelombang225nm
Lampiran 13. UjiValidasidariSirupABC
13.1.PerhitunganPerolehanKembali(%recovery)dariSirupABC
% Recovery =
A A F C C C * −
x 100 %
Keterangan :
CF = Kadar Na. Sakarin dalam sampel setelah penambahan baku
CA = Kadar Na.Sakarin dalam sampel sebelum penambahan baku
C*A = Kadar larutan baku yang ditambahkan Jumlah Baku Natrium Sakarinyang ditambahkan kedalam sampeladalah1mg/5gramsirup.
Pengenceran : Ditimbang sirup sebanyak 200.04 gram, kedalamnya ditambahkan 40,3 mg baku Natrium Sakarin, digerus
didalamlumpanghinggahomogen.Setelahhomogenditimbangsebanyak 5,0513 gram.
KadarNatriumSakarinyangditambahkan=
40,3mg
200,04g
KadarNatrium Sakarin sirup ABCsebelum dan sesudah ditambah bakuNatrium Sakarin =201,4597mg/kg
No
Luas Area Kadar ( mg/kg )
Recovery ( % ) Sebelum
Penambahan
Sesudah
Penambahan Penambahan Sebelum Penambahan Setelah
82
13.1.1. Contoh Perhitungan % Recovery dengan Metode Adisi Standar
% Recovery =
A A F
C C C
*
−
x 100 %
% Recovery = 100%
4597 , 201
0677 , 718 8074 ,
932 − ×
83 13.2. Perhitungan RSD dari Sirup ABC
No.
Kadar (mg/kg) (X)
Luas Area
(Y) (X-X ) (X-X )2
1. 932,8074 7391905 -6,70055 15,8603
2. 940,6034 7451464 1,09545 33,5206
3. 941,6832 7459707 2,17525 15,2944
4. 940,2124 7448480 0,70445 1,7169
5. 942,5692 7466484 3,06125 17,9530
6. 939,1721 7440529 -0,33585 0,0987
∑ = 5637,0477 X = 939,50795
∑ = 60,8094
SD =
(
)
1 -n X -Xi 2
∑
= 1 6 60,8094 − = 3,4874 RSD = ×100%X SD
= 100%
50795 , 939 4874 , 3 ×
84 No Kadar (mg/kg) (X) LuasArea
(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)
2
1
25 2255624,3 2155741,138 99883,162 0,9976646051x1010 2
50 4231920,4 4046385,176 185535,224 3,442331934x1010 3
100 7895845,7 7827673,252 68172,448 0,4647482666x1010 4
150 11626808,1 11608961,33 17846,77 0,03185071994x1010 5
200 15283908,9 15390249,4 -106340,5 1,130830194x1010
∑ 6,06742572 x1010
13.3. Perhitungan Batas Deteksi(LOD)dan Batas Kuantitasi(LOQ)Natrium Sakarin 2 ) ( ) / ( Deviasi Standar 2 − − =
∑
n Yi Y x Sy 2 5 10 06742572 , 6 / 10 − × = x SySy/x = 142213,756
Slope x Sy x LOD) 3 / ( Deteksi Batas = 76152 , 75625 756 , 142213 3x LOD=
LOD = 5,6415 mg/kg
Slope x Sy x LOQ) 10 / (
Kuantitasi
Batas =
85
Lampiran 14. Analisis data statistik untuk mencari kadar Natrium Sakarin sebenarnya dari penyuntikanSirupABC
No Kadar) X
(
X−X)
(
X−X)
21 718, 0677 -3,9825 15,8603
2 716,2605 -5,7897 33,5206
3 725,9610 3,9108 15,2944
4 723,3605 1,3103 1,7169
5 726,2873 4,2371 17,9530
6 722,3643 0,3141 0,0987
∑X=4.332,3013
X = 722,0502
∑=84,4439
SD =
(
)
1 -n X -Xi 2
∑
= 1 6 84,4439 − = 4,1096Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 5, diperoleh nilai t tabel = 4,03.
Data diterima jika t hitung< t tabel. t hitung =
n SD X Xi / −
t hitung 1 =
6 / 4,1096 3,9825 = 2,3748
t hitung 2 =
6 / 4,1096 5,7897 = 3,4524
t hitung 3 =
6 / 4,1096
3,9108
86 t hitung 4 =
6 / 4,1096
1,3103
= 0,7810
t hitung 5 =
6 / 4,1096
4,2371
= 2,5255
t hitung 6 =
6 / 4,1096
0,3141
= 0,1872
Dari hasil perhitungan di atas didapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.
Kadar Natrium Sakarin dalam sirup ABC: µ = X ± (t (α/2, dk) x SD /√n )
87
Lampiran 15. Analisisdata statistik untuk mencari kadar Natrium Sakarin sebenarnya dari penyuntikanSirup JAMES
No Kadar) X
(
X−X)
(
X−X)
21 314,1353 -11,7398 137,8229
2 312,0976 9,7021 94,1307
3 307,5190 5,1235 26,2503
4 316,7891 14,3936 207,1757
5 280 -22,3955 501,5584
6 283,8319 -18,5636 344,6072
∑X=1814,3729
X = 302,3955
∑=1311,5452
SD =
(
)
1 -n X -Xi 2
∑
= 1 6 1.311,5452 − = 16,1960Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 5, diperoleh nilai t tabel = 4,03.
Data diterima jika t hitung< t tabel. t hitung =
n SD X Xi / −
t hitung 1 =
6 / 16,1960 11,7398 = 1,7755
t hitung 2 =
6 / 1960 , 16 9,7021 = 1,4673
t hitung 3 =
6 / 16,1960
5,1235
= 0,7749
t hitung 4 =
6 / 16,1960
14,3936
88 t hitung 5 =
6 / 16,1960
22,3955
= 3,3871
t hitung 6 =
6 / 16,1960
18,5636
= 2,8076
Dari hasil perhitungan di atas didapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.
Kadar Natrium Sakarin dalam sirup JAMES: µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )
Lampiran 16. Analisisdatastatistikuntukmencarikadar Natrium Sakarin sebenarnya dari penyuntikanSirup KAPTEN
No Kadar
(X)
(
X−X)
(
X−X)
2
1 767,0212 -6,1161 37,4067
2 757,4900 -15,6473 244,8379
3 776,0669 2,9296 8,5825
4 779,3987 6,2614 39,2051
5 779,6766 6,5393 42,7624
6 779,1703 6,0330 36,3971
∑X= 4638,8237
X = 773,1373
∑= 409,1917
SD =
(
)
1 -n X -Xi 2
∑
= 1 6 409,1917 − = 9,0464Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 5, diperoleh nilai
t tabel = 4,03.
Data diterima jika t hitung< t tabel. t hitung =
n SD X Xi / −
t hitung 1 =
6 / 9,0464 6,1161 = 1,6560
t hitung 2 =
6 / 0464 , 9 15,6473 = 4,2368
t hitung 3 =
6 / 9,0464
2,9296
= 0,7932
t hitung 4 =
6 / 9,0464
6,2614
t hitung 5 = 6 / 9,0464 6,5393 = 1,6954
t hitung 6 =
6 / 9,0464
6,0330
= 1,6335
Dari hasil perhitungan di atas didapat data 2 t.hitung > t.tabel, maka tidak semua data tersebut diterima.
No Kadar
(X)
(
X−X)
(
X−X)
2
1 767,0212 -9,2455 85,4793
2 776,0669 -0,1998 0,0399
3 779,3987 3,1320 9,8094
4 779,6766 3,4132 11,6499
5 779,1703 2,9036 8,4309
∑X= 3.881,3337
X = 776,2667
∑= 105,4094
SD =
(
)
1 -n X -Xi 2
∑
= 1 5 105,4094 − = 5,1334Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 4, diperoleh nilai
t tabel = 4.60.
Data diterima jika t hitung< t tabel. t hitung =
n SD X Xi / −
t hitung 1 =
5 / 5,1334 9,2455 = 4,0273
t hitung 2 =
5 / 1334 , 5 0,1998 = 0,0870
t hitung 3 =
5 / 5,1334
3,1320
t hitung 4 =
5 / 5,1334
3,4132
= 1,4868
t hitung 5 =
5 / 5,1334
2,9036
= 1,2648
Dari hasil perhitungan di atas didapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.
Kadar Natrium Sakarin dalam sirup KAPTEN: µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )
= 776,2667 mg/kg± (4,60 x 5,1334 / √5 ) = (776,2667 ± 10,5603) mg/kg
sebenarnya dari penyuntikanSirup PIRAMID UNTA
No Kadar
(X)
(
X−X)
(
X−X)
2
1 622,1010 11,1856 125,1177
2 620,2047 9,2893 86,2911
3 618,1618 7,2464 52,5103
4 600,0677 -10,8477 117,6726
5 594,2394 -16,676 278,0889
6 610,7176 -0,1978 0,0391
∑X= 3665,4922
X = 610,9154
∑= 659,7197
SD =
(
)
1 -n X -Xi 2
∑
= 1 6 659,7197 − = 11,4867Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 5, diperoleh nilai
t tabel = 4,03.
Data diterima jika t hitung< t tabel. t hitung =
n SD X Xi / −
t hitung 1 =
6 / 11,4867
11,1856
= 2,3853
t hitung 2 =
6 / 4867 , 11 9,2893 = 1,9809
t hitung 3 =
6 / 11,4867
7,2464
= 1,5453
t hitung 4 =
t hitung 5 =
6 / 11,4867
16,676
= 3,5561
t hitung 6 =
6 / 11,4867
0,1978
= 0,0422
Dari hasil perhitungan di atas didapat semua t.hitung < t.tabel, maka semua data tersebut diterima.
Kadar Natrium Sakarin dalam sirup PIRAMID UNTA: µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )
Lampiran 18. Analisis data statistik untuk mencari kadar Natrium Sakarin sebenarnya dari penyuntikanSirup POHON PINANG
No Kadar
(X)
(
X−X)
(
X−X)
2
1 938,3690 95,9272 9.202,0277
2 1.033,7836 0,5126 0,2628
3 1.026,2785 8,0177 64,2835
4 1.035,7042 1,408 1,9825
5 1.046,2596 11,9634 143,1229
6 1.125,3824 91,0862 8.296,6958
∑X= 6.205,7773
X =1.034,2962
∑= 17.708,3752
SD =
(
)
1 -n X -Xi 2
∑
= 1 6 2 17.708,375 − = 59,5119Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 5, diperoleh nilai
t tabel = 4,03.
Data diterima jika t hitung< t tabel. t hitung =
n SD X Xi / −
t hitung 1 =
6 / 59,5119
95,9272
= 3,9483
t hitung 2 =
6 / 5119 , 59 0,5126 = 0,02109
t hitung 3 =
6 / 59,5119
8,0177
= 0,3300
t hitung 4 =
6 / 59,5119
1,408
t hitung 5 =
6 / 59,5119
11,9634
= 0,4924
t hitung 6 =
6 / 59,5119
91,0862
= 3,7491
Dari hasil perhitungan di atas didapat semua t.hitung < t.tabel, maka semua data tersebut diterima.
Kadar Natrium Sakarin dalam sirup POHON PINANG: µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )
= 1.034,2962 mg/kg± (4,03 x 59,5119 / √6 ) = (1.034,2962 ± 97,9624) mg/kg
1. SirupABC
No. Batch : MD 149310242310 Tgl.Kadaluwarsa: 20 Januari 2014
Komposisi : Air, Gula, Pengatur Keasaman, Perisa Jeruk,
pemanis buatan Natrium Siklamat 0,7 g/kg minuman siap saji,pengawet Natrium benzoat, pewarna
Tartrazin Cl 15985, sari buah jeruk. 2. SirupJAMES
No. Batch : MD 149402005121 Tgl.Kadaluwarsa: -
Komposisi : Gula pasir, Food Colour, Essence, Sodium Cyclamate
3. SirupKAPTEN
No. Batch : MD 209121212467 Tgl.Kadaluwarsa: 31 Agustus 2014
Komposisi : Air, Na. Benzoat, Na. Siklamat, Asam Sitrat, Aroma Lychee, Pewarna Makanan Tartrazin Cl 19140 4. SirupPIRAMID UNTA
No. Batch : MD 149402017027 Tgl.Kadaluwarsa: 15 Oktober 2014
Komposisi : Air, Gula, Natrium Benzoat, Asam sitrat, Aroma Melon, Pewarna Cl No.19140/Cl No. 42090 5. SirupPOHON PINANG
No. Batch : MD 149402017027 Tgl.Kadaluwarsa: 16 Juli 2014
Komposisi : Air, Gula pasir, Sari Marquisa, Na. Benzoat, Na. Siklamat, Asam sitrat, FCF Cl 15985
Gambar 21.Alat KCKT (Shimadzu)
Gambar 22. Syringe KCKT
Gambar 23.Sonifikator (Branson 1510)
Gambar 25.Sonifikator Kudos