BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Bakteri adalah mikroorganisme dengan struktur sederhana, memiliki sel tunggal, tanpa membran inti, dan berukuran mikroskopis. Pengelompokkan bakteri dilakukan berdasarkan beberapa kriteria seperti bentuk, jumlah dan letak flagel, kebutuhan terhadap oksigen, karakteristik dinding sel, dan cara mendapatkan makanan. Keanekaragaman jenis bakteri di alam memerlukan identifikasi melalui pengujian. Metode identifikasi bisa berdasarkan morfologi sel, uji aktivitas biokimia, analisis DNA, dan uji serologis. Identifikasi morfologi sel melibatkan pemeriksaan mikroskopis untuk bentuk, ukuran, dan kelompok bakteri (uji gram, uji tahan asam), serta struktur seperti flagel, kapsul, spora, granula, dan nukleus (Fatma dkk, 2023).
Bakteri adalah mikroorganisme prokariotik (sel tunggal) yang hidup berkoloni dan tidak memiliki selubung inti, tetapi bisa hidup di berbagai tempat. Sebagian bakteri termasuk dalam golongan Gram positif atau Gram negatif, seperti Staphylococcus aereus, yang dapat menyebabkan penyakit jika jumlahnya mencapai 1.000.000 atau 106 per gram. Jumlah ini cukup untuk memproduksi toksin (Fatma dkk, 2023).
Pengamatan bakteri menjadi sulit bukan hanya karena ukurannya yang kecil, tetapi juga karena sifat transparan dan tidak berwarnanya. Dalam bidang mikrobiologi, kombinasi prosedur pewarnaan dan pencahayaan mikroskopis menjadi alat utama untuk mempelajari sifat-sifat bakteri dan mengelompokkannya ke dalam kategori yang lebih spesifik. Teknik-teknik pewarnaan yang beragam digunakan untuk menggambarkan, membedakan, dan mengelompokkan bakteri berdasarkan morfologi dan struktur sel mereka. Salah satu tipe teknik pewarnaan adalah pewarnaan sederhana (simple staining), yang menggunakan satu jenis zat warna untuk menggambarkan bentuk dan formasi morfologi bakteri. Sementara itu, pewarnaan diferensial menggunakan dua jenis zat warna untuk mengelompokkan bakteri ke dalam kelas tertentu seperti dalam pewarnaan Gram (Fatma dkk, 2023).
KEMENTERIAN PENDIDIKAN TINGGI , SAINS, DAN TEKNOLOGI DEPARTEMEN TEKNIK LINGKUNGAN
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI LINGKUNGAN Kampus Unand Limau Manis Padang 25163
Telp. (0751) 7862901, Fax (0751 72566)
1.2 Maksud dan Tujuan Percobaan 1.2.1 Maksud Percobaan
Maksud dari praktikum ini adalah untuk memenuhi syarat kelulusan mata kuliah Mikrobiologi Lingkungan dan untuk mengidentifikasi suatu mikroba sehingga diketahui jenis dan karakteristiknya.
1.2.2 Tujuan Percobaan
Adapun tujuan dari praktikum pewarnaan Gram ini adalah:
1. Mengenal dasar teori pewarnaan biologis;
2. memahami cara pembuatan preparat bakteri;
3. memahami cara kerja dan teori dasar pewarnaan sederhana dan pewarnaan negatif;
4. memahami cara kerja dan teori dasar pewarnaan diferensial seperti pewarnaan Gram dan spora.
1.3 Prinsip Percobaan
Adapun prinsip percobaan dari praktikum pewarnaan Gram adalah:
1. Membedakan warna dasar (kristal violet) setelah pencucian dengan alkohol 96%;
2. pewarnaan Gram, bakteri dibedakan menjadi 2 kelompok yaitu bakteri Gram positif (+) dan Gram negatif (-);
3. bakteri Gram positif (+) mempunyai sel-sel yang berwarna ungu yang dapat tetap mempertahankan warna kristal violet sedangkan bakteri Gram negatif (-) mengikat safranin yang berwarna merah;
4. secara umum pewarnaan bakteri dapat dibedakan atas beberapa golongan, yaitu:
a. Pewarnaan Sederhana
Pewarnaan positif;
pewarnaan negatif;
pewarnaan sel ragi.
b. Pewarnaan Diferensial
Pewarnaan Gram;
pewarnaan tahan asam.
Saskia Ayu Azahra (2310941026) I-2
KEMENTERIAN PENDIDIKAN TINGGI , SAINS, DAN TEKNOLOGI DEPARTEMEN TEKNIK LINGKUNGAN
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI LINGKUNGAN Kampus Unand Limau Manis Padang 25163
Telp. (0751) 7862901, Fax (0751 72566)
c. Pewarnaan Struktural
Pewarnaan inti sel;
pewarnaan endospora;
pewarnaan dinding sel;
pewarnaan kapsul;
pewarnaan flagella.
d. Pewarnaan untuk menguji adanya komponen tertentu dalam sel
Pewarnaan glikogen;
pewarnaan lipida.
1.4 Ruang Lingkup Percobaan
Ruang lingkup percobaan ini adalah mengetahui cara pewarnaan Gram terhadap bakteri untuk mengetahui jenis spesiesnya. Sampel yang digunakan pada percobaan ini adalah biakan bakteri pada media NA hasil praktikum isolasi mikroba dari udara di ruangan Kepala Laboratorium Mikrobiologi Lingkungan Universitas Andalas.
Bakteri tersebut diamati dan digolongkan ke dalam bakteri Gram positif atau Gram negatif berdasarkan warna yang diikatnya.
1.5 Sistematika Penulisan Laporan
Adapun sistematika penulisan laporan pada percobaan ini adalah:
BAB I PENDAHULUAN
Berisikan tentang latar belakang penulisan laporan, maksud dan tujuan, prinsip, ruang lingkup percobaan dan sistematika penulisan laporan.
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
Menguraikan tentang referensi dalam pembuatan laporan dan acuan lainnya yang berhubungan dengan percobaan isolasi mikroba.
BAB III PROSEDUR PERCOBAAN
Berisikan tentang alat-alat dan bahan yang digunakan serta cara kerja yang dilakukan saat praktikum.
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
Berisi tentang hasil percobaan dan pembahasan hasil yang di dapat dari praktikum.
Saskia Ayu Azahra (2310941026) I-3
KEMENTERIAN PENDIDIKAN TINGGI , SAINS, DAN TEKNOLOGI DEPARTEMEN TEKNIK LINGKUNGAN
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI LINGKUNGAN Kampus Unand Limau Manis Padang 25163
Telp. (0751) 7862901, Fax (0751 72566)
BAB V PENUTUP
Berisi tentang kesimpulan dan saran yang didapat dari praktikum.
DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN
Saskia Ayu Azahra (2310941026) I-4