١
يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ﻪﯿﻬﺗ ﺮﺗﻮﻧ
ﯿﮐ ﺐ لﺎﻧﻮﻠﮐﻮﻧﻮﻣ ﺮﺑ
ﻪﯿﻠﻋ نﻮﯿﺗﺎﺗﻮﻠﮔ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ سا
زاﺮﻔﺴﻧاﺮﺗ
زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺗ
ﮑ ژﻮﻟﻮﻨ ي Phage Display
رﻮﭘﺮﻔﺻ ﻦﯿﺴﺣ
2 و 1
،*
داﮋﻧﺮﻔﺻ ﺎﺿرﺪﻤﺤﻣ
، 2
ﺪﻟاﻼﻋ ﯾ ﺞﯿﺋﺎﻧدﺮﮐ ﻦ يرﺎﯾﺮﻬﺷ ﻪﻤﻃﺎﻓ ،1
3 و
ﯽﺟﺎﻧ ﺪﻤﺤﻣ ﺮﯿﻣا ،2
،1
1 - اد ،يزروﺎﺸﮐ مﻮﻠﻋ هﺪﮑﺸﻧاد ،يزروﺎﺸﮐ يژﻮﻟﻮﻨﮑﺗﻮﯿﺑ هوﺮﮔ ناﺮﻬﺗ ،ﺪﻫﺎﺷ هﺎﮕﺸﻧ
2 - جﺮﮐ ،يزروﺎﺸﮐ يژﻮﻟﻮﻨﮑﺗﻮﯿﺑ هﺪﮑﺸﻫوﮋﭘ ،ﯽﺘﺴﯾز ﯽﻨﻤﯾا و ﯽﺑوﺮﮑﯿﻣ يژﻮﻟﻮﻨﮑﺗﻮﯿﺑ ﺶﺨﺑ
3 - ناﺮﻬﺗ ،سرﺪﻣ ﺖﯿﺑﺮﺗ هﺎﮕﺸﻧاد ،يزروﺎﺸﮐ هﺪﮑﺸﻧاد ،ﯽﻫﺎﯿﮔ ﯽﺳﺎﻨﺷ يرﺎﻤﯿﺑ هوﺮﮔ
هﺪﯿﮑﭼ :
يرﺎﻤﯿﺑ ﺎﯿﻧﺎﻣوﺰﯾار يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾﺮﺘﺑﺮﺨﻣ زا ﯽﮑﯾ
ﻗ رﺪﻨﻐﭼ يﺎﻫ ﺖﺳا ﺪﻨ
. ا ﻞـﻣﺎـﻋ ﯾ گﺮـﺒﮔر ﮏﯿﺗوﺮﮑﻧ يدرز سوﺮــﯾو يرﺎﻤﯿﺑ ﻦ
رﺪـﻨﻐﭼ چرﺎﻗ و ،ﺪــﻨﻗ Polymyxa betae
ا ﯽﻌﯿﺒﻃ ﻞﻗﺎﻧ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﯾ
ﺖﺳا هﺪﺷ ﻪﺘﺧﺎﻨﺷ سوﺮﯾو ﻦ .
،ﺮﺿﺎﺣ لﺎﺣ رد ﺋﺎﺳﺎﻨﺷ
ﯽ ﮔ ﯿ نﺎﻫﺎ
ﯽﭘﻮﮑﺳوﺮﮑﯿﻣ هﺪﻫﺎﺸﻣ سﺎﺳا ﺮﺑ هدﻮﻟآ
، شور ﺎﻫ ي ﻟﻮﻣ ﮑ ﻟﻮ ﯽ ﺒﻗ زا ﯿ ﻞ Real time-PCR ﯾ
شور ﺎ ﺎﻫ ي ژﻮﻟوﺮﺳ ﯽﮑﯾ ﺪﻨﻧﺎﻣ DAS-
ELISA
، ﺬﭘ ﯽﻣ مﺎﺠﻧا ﯾ
دﺮ . ﻠﻋ ﯽ ﻠﺑﺎﻗ و ﺖﻟﻮﻬﺳ ﻢﻏر ﯿ
ﻻﺎﺑ ﺖ ي شور زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﻫ
ي ژﻮﻟوﺮﺳ ﯽﮑﯾ ﺋﺎﺳﺎﻨﺷ رد ﯽ
نژﻮﺗﺎﭘ ﺎﻫ ي ﮔ ﯿ ﻫﺎ ﯽ
، ﻬﺗ ﯿ ﻪ
ﺘﻧآ ﯽ دﺎﺑ ي ﺎﻫ ي ﺻﺎﺼﺘﺧا ﯽ ﺮﺘﻤﻬﻣ زا هراﻮﻤﻫ ﯾ
ﺖﺳا هدﻮﺑ نآ زا هدﺎﻔﺘﺳا رد ﻊﻧاﻮﻣ ﻦ .
ﻖﯿﻘﺤﺗ ﻦﯾا رد ،رﺎﺑ ﻦﯿﻟوا ياﺮﺑ
ﮏﯿﻨﮑﺗ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ
ﺪﯾﺪﺟ Phage display
، لﺎﻧﻮﻠﮐﻮﻧﻮﻣ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ﺮﺗﻮﻧ
ﯿﮐ ﺐ زاﺮﻔﺴﻧاﺮﺗ سا نﻮﯿﺗﺎﺗﻮﻠﮔ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻪﯿﻠﻋ ﺪﺷ ﻪﯿﻬﺗ 1
. يﺎﻫﺰﯿﻟﺎﻧآ ﺎﺘﯾﺎﻬﻧ
ﯽﻠﯿﻤﮑﺗ ELISA تﻼﺑ نﺮﺘﺳو و
ﺘﻧآ ندﻮﺑ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا ﻮﻤﻧ ﺪﯿﯾﺎﺗ ار هﺪﻣآ ﺖﺳﺪﺑ يﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽ
ﺪﻧد .
ﻪﻣﺪﻘﻣ : ﺎﯿﻧﺎﻣوﺰﯾار يرﺎﻤﯿﺑ ﺪﻨﻗرﺪﻨﻐﭼ ﮏﯿﺗوﺮﮑﻧ درز گﺮﺒﮔر سوﺮﯾو ﻂﺳﻮﺗ 2
Beet necrotic yellow vein virus
(BNYVV) ﯽﻣ دﺎﺠﯾا
دﻮﺷ . بﺮﺨﻣ زا ﯽﮑﯾ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾﺮﺗ
ﺪﻨﻗ رﺪﻨﻐﭼ يﺎﻫ (Beta vulgaris L.)
ﻪﺘﺧﺎﻨﺷ
ﺖﺳا هﺪﺷ ﺖﻓﺎﯾ ﺎﯿﻧد ﻖﻃﺎﻨﻣ ﺮﺘﺸﯿﺑ رد ﻪﮐ هﺪﺷ .
ﺖﺳا هﺪﻏ يور ناواﺮﻓ ﯽﻋﺮﻓ يﺎﻫ ﻪﺸﯾر دﺎﺠﯾا يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا ﻪﻧﺎﺸﻧ ﻦﯾﺮﺘﻤﻬﻣ .
ﺖﻟﺎﺣ ﻦﯾا
ﯽﯾﻮﻣ ﻪﺸﯾر ار )
hairy root (
ﯽﻣ يﺪﯿﻟﻮﺗ ﺪﻨﻗ ناﺰﯿﻣ ﺶﻫﺎﮐ ﺚﻋﺎﺑ ﻪﮐ ﺪﻨﯾﻮﮔ ﺪﻧدﺮﮔ
. ﻂﺳﻮﺗ يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا ﯽﻌﯿﺒﻃ لﺎﻘﺘﻧا
ﯽﻤﺴﯿﻧﺎﮔراوﺮﮑﯿﻣ ﻪﺑ چرﺎﻗ
مﺎﻧ P. betae ﻪﺧﺎﺷ زا
plasmodiophoromycota ترﻮﺻ
دﺮﯿﮔ ﯽﻣ . ،يرﺎﯿﺑآ بآ ﻂﺳﻮﺗ ﻞﻗﺎﻧ ﻦﯾا
تاودا ﯽﻣ ﻞﻘﺘﻨﻣ روﺎﺠﻣ ﻖﻃﺎﻨﻣ ﻪﺑ دﺎﺑ و يزروﺎﺸﮐ دﻮﺷ
. دﺎﺠﯾا زا ﺪﻌﺑ سوﺮﯾو ،ﻪﻋرﺰﻣ رد ﯽﮔدﻮﻟآ راﺮﻘﺘﺳا و
BNYVV تﺪﻣ ﻪﺑ
25
ﯽﺘﺣاﺮﺘﺳا يﺎﻫرﻮﭙﺳا نورد ﺖﺳا ردﺎﻗ لﺎﺳ ﺪﻧﺎﻤﺑ ﯽﻗﺎﺑ رﻮﮐﺬﻣ چرﺎﻗ
(Abe & Tamada, 1986) .
P.betae ﻪﺸﯾر يرﺎﺒﺟا ﻞﮕﻧا
هﺮﯿﺗ نﺎﻫﺎﯿﮔ Chenopodiaceae
ﯽﻣ رﺎﻤﺷ ﻪﺑ دور
. ﯽﻠﻋ و ﺎﯿﻧﺎﻣوﺰﯾار يرﺎﻤﯿﺑ فﻼﺧ ﺮﺑ ﻐﭼ ﻖﻃﺎﻨﻣ ﺐﻠﻏا رد رﻮﻀﺣ ﻢﻏر
ﻦﯾا ،يرﺎﮐ رﺪﻨ
دراﺪﻧ ﯽﻬﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗ يدﺎﺼﺘﻗا ترﺎﺴﺧ لﺪﺘﻌﻣ ﻖﻃﺎﻨﻣ رد چرﺎﻗ .
ﻪﺑ ﺎﺗ هﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا لﺮﺘﻨﮐ رد ﺮﺛﻮﻣ ﻞﻣﺎﻋ ﺎﻬﻨﺗ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ،ﺖﻣوﺎﻘﻣ ﯽﻌﯿﺒﻃ يﺎﻫ نژ لﺎﺣ ﺪﻧا
. نژ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑRz1
لﺎﺳ رد يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا ﻪﺑ ﺖﻣوﺎﻘﻣ ﻊﺒﻨﻣ ﻦﯿﻟوا 1983
ﺪﺷ ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ .
ﻣﺎﻧﺮﺑ رد ﺎﻫﺪﻌﺑ ﻪﮐ نژ ﻦﯾا رﺪﻨﻐﭼ ﯽﺣﻼﺻا يﺎﻫ ﻪ
هدﺎﻔﺘﺳا ﺪﻨﻗ
ﭗﯿﺗﻮﺗﺎﭘ عاﻮﻧا ﻪﺑ دﺎﯾز ﺖﻣوﺎﻘﻣ دﺎﺠﯾا ﺚﻋﺎﺑ ،ﺪﯾدﺮﮔ يﺎﻫ
وA ﺪﯾدﺮﮔ يرﺎﻤﯿﺑ ﻞﻣﺎﻋ سوﺮﯾوB .
نژ ﺞﯾرﺪﺗ ﻪﺑ يﺎﻫ
،Rz2 وRz3
Rz4
ﺪﻧﺪﺷ ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ ﺖﻣوﺎﻘﻣ ﺪﯾﺪﺟ ﻊﺑﺎﻨﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ .
وﺎﻘﻣ ياراد ﺪﻧﻮﺷ ﯽﻣ ﺖﺸﮐ نﺎﻬﺟ ﺮﺳاﺮﺳ رد ﻪﮐ ﺎﯿﻧﺎﻣوﺰﯾار ﻪﺑ موﺎﻘﻣ مﺎﻗرا ﺐﻠﻏا ﺖﻣ
1 - Glutathion-S-transferase (GST)
2 - Rhizomonia
٢
ﻪﯾﻮﺳ ﺎﺑ ﺖﻣوﺎﻘﻣ زا عﻮﻧ ﻦﯾا نﺪﺷ ﻞﯾاز نﺎﮑﻣا هراﻮﻤﻫ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا ﻪﺑ ﯽﻧژ ﮏﺗ يرﺎﻤﯿﺑ ﺖﯿﻠﺑﺎﻗ ﺎﺑ سوﺮﯾو زا ﯽﯾﺎﻫ
دﺎﯾز ﯽﯾاز
دراد دﻮﺟو (Biancardi et al., 2002)
.
مرژ زا هدﺎﻔﺘﺳا و ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ ،ﺎﯿﻧﺎﻣوﺰﯾار يرﺎﻤﯿﺑ ﻪﺑ ﺖﻣوﺎﻘﻣ دﺎﺠﯾا ياﺮﺑ ﻦﯾﺰﮕﯾﺎﺟ ﺖﻟﺎﺣ ﮏﯾ ﻢﺳﻼﭘ
موﺎﻘﻣ يﺎﻫ ﻪﺑ
چرﺎﻗ
P.betae ﯽﻣ
سوﺮﯾو دورو و لﺎﻘﺘﻧا رد ﻪﻠﯿﺳو ﻦﯾا ﻪﺑ ﺎﺗ ﺪﺷﺎﺑ BNYVV
دﻮﺷ دﺎﺠﯾا لﻼﺘﺧا هﺎﯿﮔ ﻪﺑ .
رد دﻮﺟﻮﻣ يرﺎﺠﺗ مﺎﻗرا ﺮﺘﺸﯿﺑ
ﻪﺑ ﺎﯿﻧد چرﺎﻗ P.betae ﺪﻨﺷﺎﺑ ﯽﻣ سﺎﺴﺣ
(Asher et al., 2002) .
ﺮﺑاﺮﺑ رد ﯽﻌﯿﺒﻃ ﺖﻣوﺎﻘﻣ چرﺎﻗ
P. betae يﺎﻫ ﻪﻧﻮﮔ ﯽﺧﺮﺑ رد
ﺪﻨﻧﺎﻣ ﯽﺸﺣو Beta patellaris
ﺖﺳا هﺪﺷ هﺪﯾد .
،ﯽﺸﺣو ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯾا رد چرﺎﻗ
P.betae ﻞﯿﻤﮑﺗ ﻪﺑ ردﺎﻗ ،ﻪﯿﻟوا ﯽﮔدﻮﻟآ دﺎﺠﯾا زا ﺲﭘ
ﺸﯾاز و ﯽﺸﯾور ﻞﮑﯿﺳ ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻤﻧ دﻮﺧ ﯽ
. ﺮﻈﻧ ﻪﺑ ﯽﻓﺎﮐ ﺎﯿﻧﺎﻣوﺰﯾار ﻪﺑ ﯽﮔدﻮﻟآ زا يﺮﯿﮔﻮﻠﺟ ﺖﻬﺟ رد ﺮﺛﻮﻣ ﯽﻠﻣﺎﻋ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﺖﯿﻌﺿو ﻦﯾا
ﯽﻣ ﺪﺳر (Paul et al.,1992) .
مرژ ﺖﻣوﺎﻘﻣ ﯽﺑﺎﯾزرا ﭘ
ﻢﺳﻼ ﻪﺑ ﺎﻫ P.betae كﺎﺧ ﻂﯾاﺮﺷ رد ﺪﻧاﻮﺘﺑ ﺎﺗ دراد ﻖﯿﻗد ﯽﺸﺠﻨﺳ و ﯽﺼﯿﺨﺸﺗ ﻢﺘﺴﯿﺳ ﮏﯾ ﻪﺑ زﺎﯿﻧ
زا ﯽﮐﺪﻧا مﻮﻠﮐﻮﻨﯾا ناﺰﯿﻣ ياراد ﻪﮐ ار ﯽﻧﺎﻫﺎﯿﮔ ،هدﻮﻟآ ﺪﯾﺎﻤﻧ ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ ،ﺪﻨﺘﺴﻫ چرﺎﻗ
. شور لﺎﺣ ﻪﺑ ﺎﺗ ﻞﯿﺒﻗ زا ﯽﻔﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ
نﻮﯿﺳاﺪﯾﺮﺒﯿﻫ ،DNA
ﯽﻤﮐPCR شور و3
ﯽﮑﯾژﻮﻟوﺮﺳ يﺎﻫ ﺑ ،ﺺﯿﺨﺸﺗ ياﺮﺑ4
ﻪﺑ ﺖﻣوﺎﻘﻣ ﯽﺑﺎﯾزرا و ﯽﮔدﻮﻟآ ناﺰﯿﻣ ﯽﻤﮐ ﯽﺳرﺮ چرﺎﻗ
P.betae رﺎﮐ ﻪﺑ
ﺖﺳا ﻪﺘﻓر .
ﺪﻧﺮﯿﮔ ﯽﻣ راﺮﻗ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ ﯽﻫﺎﯿﮔ يﺎﻫ يرﺎﻤﯿﺑ ﺖﯾﺮﯾﺪﻣ و ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ ياﺮﺑ مﻮﺳﺮﻣ ترﻮﺻ ﻪﺑ ﯽﮑﯾژﻮﻟوﺮﺳ يﺎﻫ شور .
ﻪﺑ
ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﺎﻫ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺮﺘﻤﮐ يراﺪﯾﺎﭘ ﻞﯿﻟد ﻤﺗ ﺖﯿﻠﺑﺎﻗ ﯽﮑﯾژﻮﻟوﺮﺳ ﯽﺼﯿﺨﺸﺗ يﺎﻫ شور ،DNA
ندﻮﺑ هﺪﻧز ﺎﯾ و هدﺮﻣ ﻦﯿﺑ ﺰﯾﺎ ار چرﺎﻗ
ﺪﻧراد . تاﺰﯿﻬﺠﺗ ﻪﺑ يزﺎﯿﻧ شور ﻦﯾا زا هدﺎﻔﺘﺳا و دراد ﺰﯿﻧ ار ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﯽﻤﮐ ﯽﺑﺎﯾزرا ﺖﯿﻠﺑﺎﻗ اﺰﯿﻟا ﯽﮑﯾژﻮﻟوﺮﺳ شور ،ﻦﯾا ﺮﺑ هوﻼﻋ
دراﺪﻧ ﯽﻫﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ ﻪﺘﻓﺮﺸﯿﭘ .
مﺮﻓ رد ﺎﺻﻮﺼﺧ ،ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ يﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ single chain fragment variable (scFv)
دﻮﺷ ﯽﻣ ﺪﯿﻟﻮﺗ نازرا و هﻮﺒﻧا ترﻮﺻ ﻪﺑ و هﺪﯾدﺮﮔ نﺎﯿﺑ يﺮﺘﮐﺎﺑ رد ﯽﺘﺣار ﻪﺑ ، .
ﯽﺘﻧآ ﻞﯿﺒﻗ ﻦﯾا ،لﺎﺣ ﻪﺑ ﺎﺗ يدﺎﺑ
ﻞﻣاﻮﻋ ﺺﯿﺨﺸﺗ ياﺮﺑ ﺎﻫ
هﺪﯾدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا ﯽﭼرﺎﻗ و ﯽﺳوﺮﯾو ﻒﻠﺘﺨﻣ ﺪﻧا
(Kingnorth et al., 2003) .
ﻞﯿﺒﻗ زا ،ﯽﻫﺎﯿﮔ يﺎﻫ نژﻮﺗﺎﭘ ﻪﯿﻠﻋ ﺮﺑ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ﺪﯿﻟﻮﺗ ياﺮﺑ ﻪﺴﯾر ﺎﯾ و ﺖﻓﺎﺑ ﺺﻟﺎﺧ هرﺎﺼﻋ ،از يرﺎﻤﯿﺑ يﺎﻫ چرﺎﻗ
ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ يروﺮﺿ نژﻮﻧﻮﻤﯾا ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ چرﺎﻗ يﺎﻫ .
،ﺖﺸﮐ ﻂﯿﺤﻣ يور ﺮﺑ ﺪﺷر ﺖﯿﻠﺑﺎﻗ مﺪﻋ ﺖﻠﻋ ﻪﺑ ،يرﺎﺒﺟا ﺖﯾزارﺎﭘ يﺎﻫ چرﺎﻗ درﻮﻣ رد
ﯽﻣ ﻞﮑﺸﻣ ﯽﯾاز ﯽﻨﻤﯾا ﺖﻬﺟ چرﺎﻗ هﺪﺷ ﺺﻟﺎﺧ ﻊﺑﺎﻨﻣ ندروآ ﻢﻫاﺮﻓ ﺪﺷﺎﺑ
. درﻮﻣ رد ﻦﯾاﺮﺑﺎﻨﺑ چرﺎﻗ
P.betae ﻪﺑ
ﻋ ﮏﯾ ناﻮﻨ ﻞﮕﻧا چرﺎﻗ
ﺖﻟﺎﺣ ﯽﻣﺎﻤﺗ رد دﻮﺟﻮﻣ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا نژﻮﻧﻮﻤﯾا ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﮏﯾ ﻦﯿﯿﻌﺗ ،ﻪﺴﯾر ﺪﻗﺎﻓ و يرﺎﺒﺟا ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ يروﺮﺿ ،چرﺎﻗ ﯽﮑﯾژﻮﻟﻮﻓرﻮﻣ يﺎﻫ
.
نﻮﯿﺗﺎﺗﻮﻠﮔ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ -
سا - زاﺮﻔﺴﻧاﺮﺗ ﺖﻟﺎﺣ ﯽﻣﺎﻤﺗ رد دﻮﺟﻮﻣ ﮏﯾژﻮﻟﻮﯿﺑ هدروآﺮﻓ ﮏﯾ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ
،رﻮﭙﺳﻮﺋز ﻞﯿﺒﻗ زا يﺪﺷر يﺎﻫ
ﭙﺳا و مﻮﯾﮋﻧارﻮﭙﺳا ﯽﻣ ،ﺪﻧور ﯽﻣ رﺎﻤﺷ ﻪﺑ ﺰﯿﻧ يﻮﻗ نژﻮﻧﻮﻤﯾا ﻪﮐ ﯽﺘﺣاﺮﺘﺳا يﺎﻫرﻮ
ﺎﻨﻣ ﻪﻨﯾﺰﮔ ﮏﯾ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ ياﺮﺑ ﯽﺒﺳ
ﻦﯾا ﺪﺷﺎﺑ چرﺎﻗ .
ﻢﯾﺰﻧآ زا ﯽﻫوﺮﮔ ﻞﻣﺎﺷ ﺎﻫ GST ﺪﻨﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﺎﻫ هدﺎﻣ ﺶﯿﭘ عاﻮﻧا رد ﺶﻨﮐاو ﻦﯾﺪﻨﭼ مﺎﺠﻧا ﻪﺑ ردﺎﻗ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ ﺎﻫ
.
(Hayes and Pulford, 1995) .
يﺎﻫ ﯽﺳرﺮﺑ سﺎﺳا ﺮﺑ ﻪﯿﻠﻋ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ لﺎﻧﻮﻠﮐﻮﻨﻣ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ نﻮﻨﮐ ﺎﺗ ،هﺪﻣآ ﻞﻤﻋ ﻪﺑ
چرﺎﻗ P. betae
هﺪﺸﻧ ﻪﯿﻬﺗ
ﺎﺑ ﯽﺘﻧآ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺎﻓﺮﺻ چرﺎﻗ ﻦﯾا ﺺﯿﺨﺸﺗ ياﺮﺑ ﯽﮑﯾژﻮﻟوﺮﺳ يﺎﻫ نﻮﻣزآ مﺎﺠﻧا و ﺖﺳا ﺖﺳا هﺪﺷ مﺎﺠﻧا لﺎﻧﻮﻠﮐ ﯽﻠﭘ يﺎﻫ يد
. رد
لﺎﻧﻮﻠﮐﻮﻨﻣ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ رﺎﺑ ﻦﯿﻟوا ياﺮﺑ ﻖﯿﻘﺤﺗ ﻦﯾا ﻪﯿﻠﻋ ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ
ﺺﯿﺨﺸﺗ ياﺮﺑ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ ﻪﮐ ﺪﺷ ﺪﻫاﻮﺧ ﻪﯿﻬﺗ رﻮﮐﺬﻣ چرﺎﻗ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻦﯾا رد ﯽﮔدﻮﻟآ ناﺰﯿﻣ ﯽﻤﮐ ﻦﯿﯿﻌﺗ و هدﻮﻟآ يﺎﻫ ﻪﻧﻮﻤﻧ دور رﺎﮐ ﻪﺑ ﺎﻫ
.
3 - Quantitative PCR
4 - Serological method
٣
ﺎﻫ شور و داﻮﻣ
ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ لﺎﻧﻮﻠﮐﻮﻨﻣ يﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ يزﺎﺳاﺪﺟ :
ﺺﻟﺎﺧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ هﺪﺷ ﻪﯿﻬﺗGST
) ،نارﺎﮑﻤﻫ و تﺮﯿﺼﺑ ﻂﺳﻮﺗ 1390
( بﻮﯿﺗﻮﻧﻮﻤﯾا رد ﺖﺑﺎﺛ
نﺪﺷ ﻪﮐﻮﻠﺑ زا ﺲﭘ و هﺪﯾدﺮﮔ
ﯽﺑﺮﭼ نوﺪﺑ ﺮﯿﺷ ﻂﺳﻮﺗ ﯽﻟﺎﺧ يﺎﻫﺎﻀﻓ 2
% ژﺎﻓ تارذ ، )
يژﺎﻓ ﻪﻧﺎﺨﺑﺎﺘﮐ زا Tomlinson I & J
( ﺮﯿﻏ يﺎﻫژﺎﻓ و هدوﺰﻓا ﻪﻟﻮﻟ ﻪﺑ
فﺬﺣ ﺎﻬﻧآ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا ﺪﻧﺪﺷ
. ﺲﭙﺳ ﺑ و يزﺎﺳاﺪﺟ ،بﻮﯿﺗ ﻪﺑ ﻞﺼﺘﻣ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا يﺎﻫژﺎﻓ لﻮﻠﺳ دراو ﺮﯿﺜﮑﺗ ياﺮ
ﻪﯾﻮﺳ ﺪﺷر لﺎﺣ رد يﺎﻫ
E.coli TG1 ﺪﻧﺪﯾدﺮﮔ
. ﻪﺑ لﺎﺼﺗا ﺖﯿﻠﺑﺎﻗ ياراد ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا تارذ ﺶﯾاﺰﻓا ياﺮﺑ و هﺪﺷ يزﺎﺳ اﺪﺟ هرﺎﺑود ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺮﯿﺜﮑﺗ يﺎﻫژﺎﻓ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ
راﺮﮑﺗ قﻮﻓ ﻞﮑﯿﺳGST ﺪﺷ
. دوﺪﺣ رد ،قﻮﻓ ﻪﺧﺮﭼ رود ﻪﺳ مﺎﺠﻧا زا ﺲﭘ 96
ﺪﺷ يزﺎﺳاﺪﺟ يﺎﻫژﺎﻓ ياراد ﯽﻧﻮﻠﮐ ﮏﺗ دﺪﻋ و بﺎﺨﺘﻧا ه
ﺪﯿﻟﻮﺗ ﺖﻬﺟ و هﺪﺷ ﺖﺸﮐ ﻪﻧﺎﮔاﺪﺟ ترﻮﺻ ﻪﺑ ﺎﺑ ﻪﻃﻮﺑﺮﻣscFv
ﮏﯾﺮﺤﺗ IPTG ﺪﻧﺪﺷ . ﻂﯿﺤﻣ دراو يﺮﺘﮐﺎﺑ رد هﺪﺷ ﺪﯿﻟﻮﺗ scFv
نﻮﻠﮐ ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ و اﺰﯿﻟا ﺖﺴﺗ ياﺮﺑ ژﻮﯿﻔﯾﺮﺘﻧﺎﺳ ﺎﺑ يزﺎﺳاﺪﺟ زا ﺲﭘ و هﺪﯾدﺮﮔ ﺖﺸﮐ راﺮﻗ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا يﺎﻫ
ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ . نﻮﻠﮐ
ﺪﻟﻮﻣ يﺎﻫ زﺎﺳاﺪﺟ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا scFv
يﺎﻫ شور ﺎﺑ عﻮﻨﺗ ﻦﯿﯿﻌﺗ ياﺮﺑ و ي فداﺮﺗ ﻦﯿﯿﻌﺗ وRFLP
ﯽﺳرﺮﺑ ﺪﻧﺪﺷ . ﯽﻠﯿﻤﮑﺗ يﺎﻫﺰﯿﻟﺎﻧآ
يور ﺮﺑ اﺰﯿﻟا و ﮓﻨﯿﺗﻼﺑ نﺮﺘﺳو ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ ترﻮﺻ دﺮﻔﻨﻣ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا يﺎﻫscFv
(Safarnejad et al., 2009, Safarnejad et al.,
2008) .
- ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ يﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ هﻮﺒﻧا ﺪﯿﻟﻮﺗ و يزﺎﺳ ﺺﻟﺎﺧ :
ﺎﺧ ياﺮﺑ ﯽﯾﺎﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ﻪﯾﻮﺳ ،ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ يﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ هﻮﺒﻧا ﺪﯿﻟﻮﺗ و يزﺎﺳ ﺺﻟ E.coli HB2151
ﺎﯾ و BL21-DE3 ﺎﺑ
يﺎﻫﺪﯿﻤﺳﻼﭘ يﺎﻫ نژ ﻞﻣﺎﺣpIT
ﯽﺻﺎﺼﺘﺧاscFv ﻪﺘﺨﯾراﺮﺗ
ﺪﻧﺪﺷ . ﺖﺸﮐ ﻂﯿﺤﻣ رد ﻪﺘﺨﯾراﺮﺗ يﺮﺘﮐﺎﺑ ﮏﯿﺗﻮﯿﺑ ﯽﺘﻧآ يوﺎﺣLB
رد ﻦﯿﻠﯿﺳ ﯽﭙﻣآ 37
ﻪﮐ ﯽﻣﺎﮕﻨﻫ و ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺪﺷر داﺮﮕﯿﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد ﻂﯿﺤﻣOD
،ﺪﯿﺳر ﮏﯾ ﻪﺑ ﺖﺸﮐ ﯽﯾﺎﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ﺖﺸﮐ ﻪﺑ ﻞﯾﺮﺘﺳاIPTG
ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺗ هﺪﺷ هدوﺰﻓا 1mM
يﺎﻣد رد ﺖﺸﮐ و 30
ﺖﻓﺎﯾ ﻪﻣادا داﺮﮔ ﯽﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد .
ﺎﺑ ﯽﯾﺎﯾﺮﺘﮐﺎﺑ يﺎﻫ لﻮﻠﺳ ﺖﻋﺎﺳ ﻪﺳ زا ﺲﭘ
و يزﺎﺳاﺪﺟ ژﻮﯿﻔﯾﺮﺘﻧﺎﺳ ﯾﺎﻤﺳﻼﭘ ﺶﯿﭘ يﺎﻀﻓ رد ﻪﺘﻓﺎﯾ ﻊﻤﺠﺗ scFv
اﺪﺟ يﺰﻤﺳا كﻮﺷ شور ﺎﺑ ﯽ دﺮﮔ
ﯾﺪ . يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ يزﺎﺳ ﺺﻟﺎﺧ
دﻮﺟﻮﻣ ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ )
(scFv نﻮﺘﺳ يور ﺮﺑ Ni-NTA-agarose
ﺪﺷ مﺎﺠﻧا .
ﺎﺑ ﻪﻠﺻﺎﺣ ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ناﺰﯿﻣ و صﻮﻠﺧ ﻦﯿﯿﻌﺗ
يﺎﻫ شور SDS-PAGE
ﺖﻓﺮﮔ ترﻮﺻ يﺮﺘﻣﻮﺘﻓوﺮﺘﮑﭙﺳا و (Safarnejad et al., 2008)
.
ﺚﺤﺑ و ﺞﯾﺎﺘﻧ :
ﻂﺳﻮﺗ ﯽﻠﯿﻤﮑﺗ ﺰﯿﻟﺎﻧآ نﻮﻣزآ
تﻼﺑ نﺮﺘﺳو و اﺰﯾﻻا يﺎﻫ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﻪﮐ ﺪﺷ مﺎﺠﻧا
نﻮﻣزآ ﻦﯾا ﺪﯿﯾﺎﺗ ار هﺪﺷﺪﯿﻟﻮﺗ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ دﺮﮐرﺎﮐ ﺖﺤﺻ ﺎﻫ
ﺪﻧدﻮﻤﻧ ) لوﺪﺟ 1 ﻞﮑﺷ و 1 .(
7 دﺪﻋ زا ﺮﺗﻻﺎﺑ يرﻮﻧ بﺬﺟ ﺐﯾﺮﺿ اﺰﯿﻟا ﺖﺴﺗ رد ﻪﮐ ﯽﯾﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ زا ﻪﻧﻮﻤﻧ 3
،ﺪﻧداد نﺎﺸﻧ ار ﺶﻨﮐاو ﯽﺳرﺮﺑ ﺖﻬﺟ
ﻊﻃﺎﻘﺘﻣ
، و بﺎﺨﺘﻧا يﺎﻫ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺎﺑ ﺶﻨﮐاو رد
، GST BSA5
و IMP6 راﺮﻗ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ درﻮﻣ ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ
.
5 - Bovine Serum Albumin
6 - Immunodominant membrane protein
٤
ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺎﺑ ﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا لﺎﺼﺗا ﺖﯿﻠﺑﺎﻗ ﺪﯿﯾﺎﺗ ﺖﻬﺟ ﯽﯾﺎﻬﻧ ﺰﯿﻟﺎﻧآ
مﺎﺠﻧا ﮓﻨﯿﺗﻼﺑ نﺮﺘﺳو ﻂﺳﻮﺗ ،GST
ﺖﻓﺮﮔ . ﺪﻧزﺎﺳ ﺮﻫﺎﻇ ار رﺎﻈﺘﻧا درﻮﻣ ﺪﻧﺎﺑ ﺪﻨﺘﺴﻧاﻮﺗ ﯽﺑﺎﺨﺘﻧا يﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ﻪﻤﻫ ﻪﮐ ﺪﺷ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﺖﯾﺎﻬﻧ رد )
ﻞﮑﺷ 1 .(
ﻞﮑﺷ ) 1 :(
ﺎﺑ هﺪﺷ ﺪﯿﻟﻮﺗ يﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ﺶﻨﮐاو ﯽﺳرﺮﺑ ﺖﻬﺟ تﻼﺑ نﺮﺘﺳو نﻮﻣزآ ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧGST
.
ﻦﯾا زا يدوﺪﺤﻣ دراﻮﻣ ﺎﻬﻨﺗ و هدﻮﺑ ﺎﻫ سوﺮﯾو ﻪﺑ فﻮﻄﻌﻣ ﺮﺘﺸﯿﺑ نﻮﻨﮐﺎﺗ ﯽﻫﺎﯿﮔ يﺎﻫ نژﻮﺗﺎﭘ ﻪﯿﻠﻋ لﺎﻧﻮﻠﮐﻮﻧﻮﻣ يﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ﺪﯿﻟﻮﺗ دﻮﺷ ﯽﻣ ﺎﻫ چرﺎﻗ ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ ﺎﻫ ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ .
G M
:M ﺮﮐرﺎﻣ
ﯽﻨﯿﺌﺗوﺮﭘ :G
٥
ﺎﺠﻧآ زا ﮑﯿﯾ ﺗ ﻪ ﮑ ژﻮﻟﻮﻨ ي ﺎﻤﻧ ﯾ ژﺎﻓ ﺶ ي اراد ي ﺮﮕﻟﺎﺑﺮﻏ ترﺪﻗ ي
ﻟﺎﻧآ و ﯿ ﻮﻗ ﺰ ي ﻣ ﯽ ﺎﺟ ﺪﺷﺎﺑ ﯾ ﺰﮕ ﯾ ﺎﻬﺷور ﻦ ي د ﯾ ﺮﮕ ي ﺗ ﺪﻨﻧﺎﻣ ﮑ ژﻮﻟﻮﻨ ي
ﻫﯿ ﺮﺒ ﯾ اﺮﺑ ﺎﻣوﺪ ي ﻟﻮﺗ ﯿ ﺘﻧآ ﺪ ﯽ دﺎﺑ ي ﻮﻧﻮﻣ ﮐ ﺖﺳا هﺪﺷ لﺎﻧﻮﻠ .ﺗ
ﮑ ژﻮﻟﻮﻨ ي ﺎﻤﻧ ﯾ ژﺎﻓ ﺶ ي ﺴﺑ ﯿ ﺬﭘ فﺎﻄﻌﻧا رﺎ ﯾ
ﻤﻫ ﻪﺑ و هدﻮﺑ ﺮ ﯿ
ﻟد ﻦ ﯿ رد ﻢﻫ ﻞ
ﺤﻣ ﯿ ﻂ invitro ﺤﻣ رد ﻢﻫ و
ﯿ ﻂ invivo ﺎﺠﻧا ﻞﺑﺎﻗ ﺖﺳا م . شور رد invitro ﺌﺗوﺮﭘ
ﯿ ﺎﻫ ﻦ ي ﺎﻤﻧ ﯾ ﺎﻬﻨﺗ ﻪﻧ ژﺎﻓ ﺢﻄﺳ رد هﺪﺷ هداد ﺶ
ﻠﻋ ﯿ ﻃ ﻪ ﯿ ﺳو ﻒ ﯿﻌ ﯽ ﻟﻮﻣ زا ﮑ ﺎﻫ لﻮ ي ﺑ فﺪﻫ ﯿ ژﻮﻟﻮ ﯽﮑﯾ ﻣ لﺎﺑﺮﻏ ﯽ ﻠﺑ ﺪﻧﻮﺷ ﮑ ﻠﻋ ﺮﺑ ﻪ ﯿ ﻟﻮﻣ ﻪ ﮑ ﺎﻫ لﻮ ي ﮐ ﭼﻮ ﮏ ﻈﻧ ﯿ ﻧ مﻮﻤﺳ و ﺎﻫ ﻦﺘﭘﺎﻫ ﺮ ﯿ
ﺰ
ﻤﻣ ﮑ ﺮﮕﻟﺎﺑﺮﻏ ﺖﺳا ﻦ ي
ﮔ ترﻮﺻ ﯿ دﺮ . لﺎﺜﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺪﻨﺘﺴﻧاﻮﺗ نارﺎﮑﻤﻫ و Hu
،يژﻮﻟﻮﻨﮑﺗ ﻦﯾا ﺖﻬﺟ
يزﺎﺳ ﯽﺜﻨﺧ
،مﻮﯾرازﻮﻓ چرﺎﻗ ﻦﯿﺴﮐﻮﺗﻮﮑﯾﺎﻣ لﺎﻧﻮﻠﮐﻮﻧﻮﻣ يﺎﻫ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ
ﺪﻨﻨﮐ ﺪﯿﻟﻮﺗ )
Hu et al, 2008 .(
ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻪﯿﻠﻋ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا لﺎﻧﻮﻠﮐﻮﻧﻮﻣ يدﺎﺑ ﯽﺘﻧآ ﺪﯿﻟﻮﺗ ،ﻖﯿﻘﺤﺗ ﻦﯾا ﯽﻠﺻا فﺪﻫ ناﻮﺘﺑ نآ ﻪﻠﯿﺳﻮﺑ ﺎﺗ ﺖﺳاGST
ﺖﺴﺗ ندﺮﮐ ﻪﻨﯿﻬﺑ ﺎﺑ
ﻣوﺎﻘﻣ ﯽﺑﺎﯾزرا ياﺮﺑ ار ﻪﻨﯿﻣز ،اﺰﯿﻟا مرژ ﺖ
ﻢﺳﻼﭘ ﻪﺑ ﺎﻫ P.betae دﺮﮐ ﻢﻫاﺮﻓ
. مرژ ﻢﺳﻼﭘ موﺎﻘﻣ يﺎﻫ و ﯽﺣﻼﺻا يﺎﻫ ﻪﻣﺎﻧﺮﺑ رد ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﯽﻣ
ﺪﻧﻮﺷ رﻮﺸﮐ ﺪﻨﻗرﺪﻨﻐﭼ لﻮﺼﺤﻣ نﺎﻣﺪﻧار ﺶﯾاﺰﻓا ﺚﻋﺎﺑ ﺖﯾﺎﻬﻧ رد و ﺪﻧﺮﯿﮕﺑ راﺮﻗ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ ﯽﻋارز .
٦
ﻊﺑﺎﻨﻣ :
Abe H., and Tamada T. 1986. Association of beet necrotic yellow vein virus with isolates of polymyxa betaeKeskin. Ann. Phytopathol. Soc. jpn., 52:232-247.
Asher, M. J. C. 2001, Diagnostics for sugar beet pathogens, Institute of Arable Crops Research Report, 2000-2001, pp. 40-43.
Biancardi E, Lewellen RT, De Biaggi M, Erichsen AW,Stevanato P, 2002. The origin of rhizomania resistance in sugar beet. Euphytica 127, 383–97.
Hayes, J. D. and D. J. Pulford. 1995. The glutathione S-transferase supergene family: regulation of GST and the contribution of the isoenzymes to cancer chemoprotection and drug resistance. Crit Rev Biochem Mol Biol 30:445-600.
Kingsnorth, C. S., Asher, M. J. C., Keane, G. J. P., Chwarszczynska, D. M.,Luterbacher, m. c., Mutasa- Gottgens, E. S. 2003, Development of a recombinant antibody ELISA test for the detection of polymyxa betae and its use in resistance screening, Plant Pathology 52, 673-680
Paul, H., Henken, B., M. Debock, T. S., and W. Lange. 1992. Resistance to Polymyxa betae in Beta species of the section procumbentes, in hybrids with Beta vulgaris and in monosomic chromosome additions of Beta procumbens in Beta vulgaris Plant Breeding-Zeitschrift für Pflanzenzuchtung 109:265–
273.
Safarnejad M.R., Fischer R, and U. Commandeur 2008. Generation and characterization of functional recombinant antibody fragments against Tomato yellow leaf curl virus replication-associated protein.
Comm Agri Appl Biol Sci 73: 311-323
Safarnejad M R, Fischer R, and U. Commandeur 2009 Recombinant antibody-mediated resistance against Tomato yellow leaf curl virus in Nicotiana benthamiana. Archives of Virology 154: 457-467