لﺎﻌﻓ رد نازﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫﺮﻤﻴﻠﭘﻮﻧﺎﻧ ﺮﺛا لﻮﻠﺳ يزﺎﺳ
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﻖﺘﺸﻣ شﻮﻣ ناﻮﺨﺘﺳا ﺰﻐﻣ زا هﺪﺷ
يﺪﻨﻤﺸﻧاد ﺪﻴﻌﺳ ،1
ﻲﻠﻋ رﻮﭘ ﺮﺒﻛا ﺢﺘﻓ
2ﻪﻟا هﺪﻧزوﺮﻓ يﺪﻬﻣ ،
3مﺪﻘﻣ
هﺪﻴﻜﭼ
ﻪﻨﻴﻣز فﺪﻫ و
ﺪﻌﺘﻣ تﻼﻜﺸﻣ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ: لﺎﻌﻓ رد ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻞﻣاﻮﻋ د
لﻮﻠﺳ يزﺎﺳ ﺦﺳﺎﭘ و ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﻫ هدﺎﻣ ﻪﺑ زﺎﻴﻧ ،ﻲﻨﻤﻳا يﺎ يا
،ﻦﺌﻤﻄﻣ ﺮّﺛﺆﻣ يﺎﻫﺪﻧور رد يدﺮﺑرﺎﻛ و ﻦﻤﻳا
ﻲﻧﺎﻣرد ا ﺖﺳ . نازﻮﺘﻴﭼ
،
دﺎﻣ ه يا ﺮّﺛﺆﻣ و نژ لﺎﻘﺘﻧا ياﺮﺑ ﺰﻴﻧ
ﺖﺴﺑرادﻮﻧﺎﻧ زا ﻲﺋﺰﺟ ﺖﺳﺎﻫ
. رد
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا
، لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ نازﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫﺮﻤﻴﻠﭘﻮﻧﺎﻧ ﺮﺛا ﻦﻴﻴﻌﺗ ﻪﺑ ﻪﺘﺧادﺮﭘ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﺪﺷ .
شور ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا رد : ﻲﺑﺮﺠﺗ ﻪ
، نازﻮﺘﻴﭼ لﻮﻠﺤﻣ )
150 نﻮﺘﻟادﻮﻠﻴﻛ (
، ﺪﻴﺳا رد ﻚﻴﺘﺳا 1%
زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ
NaNO2
ﻪﺑ ترﻮﺻ
يﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟا 10
ﺪﻣآ رد نﻮﺘﻟادﻮﻠﻴﻛ .
رذ ﺮﻣﻮﮕﻴﻟا تا
، زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ 2NaOH
ﺪﻳدﺮﮔ ﻞﺻﺎﺣ لﺎﻣﺮﻧ .
لﻮﻠﺳ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ
GM-CSF
شﻮﻣ ناﻮﺨﺘﺳا ﺰﻐﻣ زا ﺪﻧﺪﺷ ﺪﻴﻟﻮﺗ ﺎﻫ
. لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ رﺎﻤﻴﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ
، يﺎﻫﺮﮕﻧﺎﺸﻧ غﻮﻠﺑ
،CD40 CD86
MHC-II و ﺪﻴﻟﻮﺗ و ﺪﺷ ﻲﺳرﺮﺑ يﺮﺘﻣﻮﺘﻴﺳﻮﻠﻓ شور ﺎﺑ
TNF-α
، شور ﺎﺑ
ELISA
لﻮﻠﺳ ﺮﻴﺜﻜﺗ و
T يﺎﻫ ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﻲﺑﺎﻳزرا درﻮﻣ .
ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺎﻫ ،ﻢﺘﺸﻫ زور رد: لﻮﻠﺳ صﻮﻠﺧ
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، زا ﺶﻴﺑ
% 90 دﻮﺑ . ﻪﻤﻫ رد ﺶﻳاﺰﻓا ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ
يﺎﻫ ﻲﺳرﺮﺑ غﻮﻠﺑ
CD40 هﺪﺷ
CD86 ،
MHC-II و
، ﻪﺑ ﺺﺨﺸﻣ ترﻮﺻ دﻮﺑ هﺪﻨﻨﻛ
) 05 /
P<0 .(
TNF-α ﺢﺷﺮﺗ ﺎﻘﻟا و ي لﻮﻠﺳ ﺮﻴﺜﻜﺗ
T يﺎﻫ لﻮﻠﺳ ﻂﺳﻮﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
رﺎﻤﻴﺗ نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ
، ﺑ ﻪ ﺺﺨﺸﻣ رﻮﻃ لﻮﻠﺳ زا ﺮﺘﺸﻴﺑ
دﻮﺑ ﻚﻳﺮﺤﺗ نوﺪﺑ يﺎﻫ )
05 /
P<0 .(
ﻪﺠﻴﺘﻧ يﺮﻴﮔ نازﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫﺮﻤﻴﻠﭘﻮﻧﺎﻧ ﻪﻛ داد نﺎﺸﻧ ﺞﻳﺎﺘﻧ:
، ﻲﻣ ﺎﻘﺗرا ﺚﻋﺎﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ي
ﺶﻴﭘ ﻦﻳﺎﻛﻮﺘﻳﺎﺳ ﺪﻴﻟﻮﺗ ،غﻮﻠﺑ ﭗﻴﺗﻮﻨﻓ ﺎﻘﻟا و ﻲﺑﺎﻬﺘﻟا
ي
لﻮﻠﺳ ﺮﻴﺜﻜﺗ
T يﺎﻫ ﺪﻧدﺮﮔ
؛ ﺲﻜﻠﭙﻤﻛﻮﻧﺎﻧ ،ﻦﻳاﺮﺑﺎﻨﺑ ﺖﺴﺑراد و ﺎﻫ
نازﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫ
، ﻲﻣ ﺎﻘﺗرا و هﺪﺷ ﺎﻘﻟا ﺚﻋﺎﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ي
لﻮﻠﺳ يﺎﻫدﺮﻜﻠﻤﻋ يﺎﻫ
ﺦﺳﺎﭘ و ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد ﺪﻧﻮﺷ ﺐﺒﺳ ار ﻲﻨﻤﻳا يﺎﻫ
.
هژاو يﺪﻴﻠﻛ يﺎﻫ ﭼ:
ﻴ نازﻮﺘ
؛ رﺪﻧد لﻮﻠﺳ ﻳﺘ ﻴ ﻚ
TNF-α؛
؛ لﻮﻠﺳ
؛T
ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ غﻮﻠﺑ
ﺪﻨﺟﺮﻴﺑ ﻲﻜﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ﻲﻤﻠﻋ ﻪﻠﺠﻣ .
1393
؛ 21 ) 2 :(
160 - 168 .
ﺖﻓﺎﻳرد : 06 / 05 / 1392 شﺮﻳﺬﭘ : 09 / 10 / 1392
ﻮﺠﺸﻧاد1
ي اﺮﺘﻛد ي اﻳ ﻨﻤ ﻲ ﺳﺎﻨﺷ ﻲ
، ا هوﺮﮔ ﻳ ﻨﻤ ﻲ ﺳﺎﻨﺷ ﻲ
، ﻜﺷﺰﭘ هﺪﻜﺸﻧاد ﻲ
، ﺑﺮﺗ هﺎﮕﺸﻧاد ﻴ ﺖ ا ،ناﺮﻬﺗ ،سرﺪﻣ ﻳ
ناﺮ
؛
لوﺆﺴﻣ هﺪﻨﺴﻳﻮﻧ2
؛ دﺎﺘﺳا
؛ ﻲﻨﻤﻳا هوﺮﮔ ناﺮﻳا ،ناﺮﻬﺗ ،سرﺪﻣ ﺖﻴﺑﺮﺗ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﻲﻜﺷﺰﭘ هﺪﻜﺸﻧاد ،ﻲﺳﺎﻨﺷ
؛
ﻲﺘﺴﭘ سردآ : ناﺮﻬﺗ - سرﺪﻣ ﺖﻴﺑﺮﺗ هﺎﮕﺸﻧاد -
ﻲﻜﺷﺰﭘ هﺪﻜﺸﻧاد -
ﻲﻨﻤﻳا هوﺮﮔ ﻲﺳﺎﻨﺷ
ﻦﻔﻠﺗ : 02182884529
ﺮﺑﺎﻤﻧ : 02182884555
ﻜﻟا ﺖﺴﭘ ﻜﻴﻧوﺮﺘ ﻲ [email protected] :
دﺎﺘﺳا3
، يژﻮﻟﻮﻨﻜﺗﻮﻴﺑ هوﺮﮔ ناﺮﻳا ،ناﺮﻬﺗ ،سرﺪﻣ ﺖﻴﺑﺮﺗ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﻲﻜﺷﺰﭘ هﺪﻜﺸﻧاد ،
.
ﻪﻣﺪﻘﻣ لﻮﻠﺳ ﻪﺿﺮﻋ ﻪﻛ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ ﻲﺘﻧآ هﺪﻨﻨﻛ
و نژ
لﺎﻌﻓ هﺪﻨﻨﻛ ﺎﺑ يﺎﻫ
ﻴﻤﻫا
ﺖ ﺦﺳﺎﭘ ﺪﻨﺘﺴﻫ ﻲﻨﻤﻳا يﺎﻫ
، ﺶﻘﻧ
ﺦﺳﺎﭘ ﻢﻴﻈﻨﺗ و عوﺮﺷ رد ﻲﺼﺨﺸﻣ ﺪﻧراد ﻲﻨﻤﻳا يﺎﻫ
. زا
لﻮﻠﺳ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، ﺑ ﻪ ﻪﻫد رد هدﺮﺘﺴﮔ رﻮﻃ ﺮﻴﺧا يﺎﻫ
، رد
يرﺎﻤﻴﺑ ﺑ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ ﻪ
ﺖﺳا هﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا نﺎﻃﺮﺳ هﮋﻳو )
1 .(
لﻮﻠﺳ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، ﺖﺷادﺮﺑ و ﻲﺟرﺎﺧ ﻞﻣﺎﻋ ﺎﺑ ﻪﻬﺟاﻮﻣ رد
ﻲﺘﻧآ و هداد ﺮﻴﻴﻐﺗ ار دﻮﺧ ﭗﻴﺗﻮﻨﻓ ،نژ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ
ﻲﻳﺎﻫ ﺪﻨﻧﺎﻣ :
،CD40 و CD86
MHC-II ﺶﻳاﺰﻓا دﻮﺧ ﺢﻄﺳ يور ﺮﺑ ار
ﻲﻣ لﻮﻜﻟﻮﻣ ﻦﻳا ﻪﻛ ﺪﻫد ﺎﻫ
، ﻲﺘﻧآ ﻪﺿﺮﻋ ياﺮﺑ ﺖﺷادﺮﺑ نژ
هﺪﺷ
لﻮﻠﺳ ﻪﺑ T يﺎﻫ
ﻲﻣ ﺖﻛﺮﺷ ﺪﻨﻨﻛ
. هﺎﮕﺸﻳﺎﻣزآ رد
، ﻲﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ
ﻲﺘﻧآ ﻪﺿﺮﻋ ترﺪﻗ و ﻲﻳﺎﻧاﻮﺗ لﻮﻠﺳ ﻲﻧژ
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، زا
ﻦﻳا ﺶﺠﻨﺳ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ
ﻲﻣ هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﻫ دﻮﺷ
؛ لﻮﻠﺳ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ يﺎﻫ
د ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧ
، لﺎﻌﻓ ﺎﺑ نﺪﺷ ﻲﺠﻧﺎﻴﻣ ، يﺎﻫ
رد ﺰﻴﻧ ﻲﻔﻠﺘﺨﻣ ﻲﺑﺎﻬﺘﻟا
ﺎﻘﺗرا ﺖﻬﺟ ي
ﺦﺳﺎﭘ ﻲﻣ ﺪﻴﻟﻮﺗ ﺎﻫ ﺎﻬﻧآ ﻪﻠﻤﺟ زا ﻪﻛ ﺪﻨﻨﻛ
ﻦﻳﺎﻛﻮﺘﻳﺎﺳ TNF-α
ﺖﺳا TNF-α .
، ﺑ ﻢﻬﻣ ﻲﻨﻳﺎﻛﻮﺘﻳﺎﺳ ﻪ
هﮋﻳو
ﺦﺳﺎﭘ عوﺮﺷ و ﻲﻌﺿﻮﻣ بﺎﻬﺘﻟا دﺎﺠﻳا رد ﺖﺳا ﻚﻴﺗﺎﻤﺘﺴﻴﺳ يﺎﻫ
) 2 (
؛ ﻪﺒﻨﺟ زا ﻲﻜﻳ ،ﺮﮕﻳد يﻮﺳ زا درﻮﻣ ًاﺮﻴﺧا ﻪﻛ ﻲﻳﺎﻫ
راﺮﻗ ﻪﺟﻮﺗ
نژ ،ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺮﮔ يرﺎﻜﺘﺳد و ﻲﻧﺎﻣرد
لﻮﻠﺳ رد ﺎﻫ يﺎﻫ
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد
، ﻪﺑ ﺎﻘﺗرا رﻮﻈﻨﻣ ي
ﺦﺳﺎﭘ ﻲﻳارﺎﻛ ﺖﺳا ﻲﻨﻤﻳا يﺎﻫ
) 1
،
2 (
؛ ﻦﻳﺪﺑ لﺎﻘﺘﻧا ﻦﻳا ياﺮﺑ و رﻮﻈﻨﻣ ﺮّﺛﺆﻣ
ﻪﺘﺷﺬﮔ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ، زا ،
ﺪﻨﻤﻧاﻮﺗ ﻮﻧﺎﻧ دﺎﻌﺑا ﺎﺑ اﺰﺟا ﻦﻳا ندﻮﺑ
، ﺪﻧراد ﺖﻳﺎﻜﺣ )
3 .(
ﻲﺗﺎﻌﻟﺎﻄﻣ
هداد نﺎﺸﻧ لﻮﻜﻠﻣ ﻪﻛ ﺪﻧا
نازﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫ
، ﻞﺑﺎﻗ ﻲﻳﺎﻧاﻮﺗ رد ﻲﻬﺟﻮﺗ
لﻮﻜﻟﻮﻣ ﻪﺑ لﺎﺼﺗا DNA يﺎﻫ
ﺪﻧراد لﺎﻘﺘﻧا رد ﺎﻬﻧآ ﺖﻇﺎﻔﺣ و
) 3 .(
ّﺨﺸﻣ زا ﻪﺼ
راذﻮﻧﺎﻧ ﻪﻛ يﺮﮕﻳد يﺎﻫ ا
نارﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ يﺪﻴﻟﻮﺗ ت
ﺎﻧاﻮﺗ ،ﺪﻧراد ﻳ
لﻮﻠﺳ ﻲ ﻪﺑ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ عوﺮﺷ ناﻮﻨﻋ
هﺪﻨﻨﻛ يﺎﻫ
ﺟ رد ﻲﻨﻤﻳا ﺦﺳﺎﭘ ﻮﻧﺎﻧ ﻦﻳا ﻪﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗ و ﻲﺻﺎﺼﺘﺧا بﺬ
تارذ
ﻲﻣ هدﺎﻔﺘﺳا ﻪﻛ ﺪﺷﺎﺑ ﺮّﺛﺆﻣ
نﺎﻜﻣا ار ﺎﻬﻧآ زا ﻲﻣ ﺮﻳﺬﭘ
دزﺎﺳ ) 4 .(
زا
نازﻮﺘﻴﭼ تازﺎﻴﺘﻣا ﺮﮕﻳد ﻮﻧﺎﻧ رد نآ دﺮﺑرﺎﻛ ،
ﺖﺴﺑارد ﻪﻛ ﺖﺳﺎﻫ
ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺎﻳ ﻲﻧاواﺮﻓ هدﺎﻔﺘﺳا .
ﺮﺿﺎﺣ لﺎﺣ رد
، ﺖﺸﻛ ﻂﻳاﺮﺷ
ﻂﻴﺤﻣ رد لﻮﻠﺳ ﺎﺑ ﻲﻬﺑﺎﺸﺗ ناﺪﻨﭼ ﻪﻛ ﺖﺳا يﺪﻌﺑود يﺎﻫ
لﻮﻠﺳ ﺪﺷر ﻲﻌﻗاو ﻂﻴﺤﻣ دراﺪﻧ ﺎﻫ
. ﻴﺧا تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ رد شﻼﺗ ﺮ
ﻲﻣ لﻮﻠﺳ ﺖﺸﻛ ﺎﺑ دﻮﺷ ﻫ
ﻮﻧﺎﻧ يور ﺮﺑ ﺎ ﺖﺴﺑارد
ناﻮﺘﺑ ،ﺎﻫ
لﻮﻠﺳ نآ رد ﻪﻛ دﺮﻛ ﻢﻫاﺮﻓ ار ﻲﻄﻳاﺮﺷ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﺖﺤﺗ يﺎﻫ
، رد
ﻪﺑﺎﺸﻣ ﻂﻳاﺮﺷ رد و ﻲﻌﻴﺒﻃ ﺖﻓﺎﺑ ﺎﺑ ﻪﺑﺎﺸﻣ ﻲﻄﻴﺤﻣ in vivo
ﺪﻨﺷﺎﺑ ) 5 .(
نازﻮﺘﻴﭼ هدﺮﺘﺴﮔ هدﺎﻔﺘﺳا دﻮﺟو ﺎﺑ
، ﻦﻳا تاﺮﺛا زﻮﻨﻫ
لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ هدﺎﻣ ﺳرﺮﺑ ﻲﻨﻤﻳا ﻢﺘﺴﻴﺳ يﺎﻫ
ﻲﻬﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗ ﻲ
ﺖﺳا هﺪﺸﻧ
؛ ﺮﮕﻳد يﻮﺳ زا
،
دﺎﻣ ﻦﺘﻓﺎﻳ ه
و ﺪﻴﻔﻣ ﻲﺗاﺮﺛا ﻪﻛ يا
لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ يدﺮﺑرﺎﻛ ﻲﻨﻤﻳا يﺎﻫ
ﻪﺘﺷاد ﻲﻣ ،ﺪﺷﺎﺑ ﺪﻧاﻮﺗ
ﺪﺷﺎﺑ بﻮﻠﻄﻣ
؛ ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳاﺮﺑﺎﻨﺑ
، ﻪﺑ تاﺮﺛا ﻦﻴﻴﻌﺗ رﻮﻈﻨﻣ
يﻮﻠﺳ ﺪﺷر يور ﺮﺑ نارﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟاﻮﻧﺎﻧ و ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﻴﺗﻮﻨﻓ ﺮﺑ ﻪﻛ ﻲﺗاﺮﺛا ﻦﻴﻴﻌﺗ ﺰﻴﻧ لﻮﻠﺳ دﺮﻜﻠﻤﻋ و ﭗ
يﺎﻫ
ﻲﻣ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد ﺪﻳدﺮﮔ ﻲﺣاﺮﻃ ،ﺪﻧراﺬﮔ
.
شور ﻖﻴﻘﺤﺗ
ﻲﺑﺮﺠﺗ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا
، لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ زا ﻞﺻﺎﺣ يﺎﻫ
شﻮﻣ داﮋﻧ يﺎﻫ Balb/c
8 - 10 ﻪﺘﻔﻫ ﺖﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا يا .
زﻮﺠﻣ
تﺎﻧاﻮﻴﺣ قﻮﻘﺣ ﺖﻳﺎﻋر ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ
، ﻲﻜﺷﺰﭘ قﻼﺧا ﻪﺘﻴﻤﻛ زا
ﺪﻳدﺮﮔ ﺖﻓﺎﻳرد هﺎﮕﺸﻧاد .
لﻮﻠﺳ ﺪﻴﻟﻮﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ياﺮﺑ لﻮﻠﺳ ﺪﻴﻟﻮﺗ لﻮﻠﺳ ،ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﺮﺌﻠﻛﻮﻧﻮﻧﻮﻣ يﺎﻫ
،
ﺎﻴﺒﻴﺗ و رﻮﻤﻓ ناﻮﺨﺘﺳا زا
، ﻪﺑ ﺖﺸﻛ ﻂﻴﺤﻣ ﻚﻤﻛ
، ﻊﻤﺟ يروآ
ﺪﻳدﺮﮔ . لﻮﺒﻠﮔ ﺰﻣﺮﻗ يﺎﻫ
، مﻮﻴﻧﻮﻣآ ﺪﻳﺮﻠﻛ لﻮﻠﺤﻣ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ
،
ﺖﺸﻛ ﻂﻴﺤﻣ رد ،ﻮﺸﺘﺴﺷ زا ﺲﭘ و ﺪﻳدﺮﮔ ﺰﻴﻟ ﻞﻣﺎﻛ RPMI
) يوﺎﺣ 10 FBS %
، 100 و ﻦﻴﺴﻳﺎﻣﻮﺘﭘﺮﺘﺳا مﺮﮔوﺮﻜﻴﻣ 100
ﺪﺣاو ﻦﻴﻠﻴﺴﻴﻨﭘ ( تروﺎﺠﻣ رد 20
ﻲﻠﻴﻣ رد مﺮﮔﻮﻧﺎﻧ زا ﺮﺘﻴﻟ
GM-CSF ﻪﺑ
تﺪﻣ 3 ﺪﺷ هداد ﺖﺸﻛ زور .
مﻮﺳ زور رد
، راﺪﻘﻣ
ﻪﺑ ﻦﻳﺎﻛﻮﺘﻳﺎﺳ ﻪﻴﻟوا يوﺎﺴﻣ هزﺎﺗ ﺖﺸﻛ ﻂﻴﺤﻣ هاﺮﻤﻫ
، ﻪﺑ
لﻮﻠﺳ ﺪﻳدﺮﮔ ﻪﻓﺎﺿا ﺎﻫ .
زور رد ﻒﺼﻧ ﺰﻴﻧ ﻢﺘﻔﻫ و ﻢﺠﻨﭘ يﺎﻫ
لﻮﻠﺳ ژﻮﻴﻓﺮﺘﻧﺎﺳ زا ﺲﭘ و ﺪﺷ ﻪﺘﺷادﺮﺑ ﻲﻳور ﻂﻴﺤﻣ يﺎﻫ
ﺪﻧﺎﻤﻴﻗﺎﺑ ه ﺎﺑ و هزﺎﺗ ﻞﻣﺎﻛ ﺖﺸﻛ ﻂﻴﺤﻣ ﻪﻴﻟوا ﻢﺠﺣ GM-CSF
ﺪﻳدﺮﮔ ﻦﻳﺰﮕﻳﺎﺟ .
لﻮﻠﺳ ﺰﻳﺎﻤﺗ ﺎﺗ ﺪﻧﺪﺷ ﺖﺸﻛ زور ﺖﺸﻫ ﺎﺗ ﺎﻫ
لﻮﻠﺳ ﻢﺘﺸﻫ زور رد و ددﺮﮔ ﻞﻣﺎﻛ ﻎﻟﺎﺑﺎﻧ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
،
لﻮﻠﺳ ﺖﺷادﺮﺑ ﻢﻛ ﻲﮔﺪﻨﺒﺴﭼ ﺎﺑ يﺎﻫ هﺪﺷ
، ﻪﺑ لﻮﻠﺳ ناﻮﻨﻋ يﺎﻫ
نﻮﻣزآ رد ﻎﻟﺎﺑﺎﻧ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد ﺪﻧﺪﻳدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﻫ
.
ﺎﺠﻳا ﺮﻣﻮﮕﻴﻟا د نازﻮﺘﻴﭼﻮﻧﺎﻧ يﺎﻫ
ﻮﻧﺎﻧ يﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟا دﺎﺠﻳا ياﺮﺑ لﻮﻠﺤﻣ ،ﺎﻫﺮﻤﻴﻠﭘ زا نازﻮﺘﻴﭼ
ﻚﻳ نازﻮﺘﻴﭼ ﺪﺻرد )
نﺎﻤﻟآ ﺎﻤﮕﻴﺳ (
ﺪﻴﺳا رد ﻚﻴﺘﺳا 1 % ﻪﻴﻬﺗ
و ﺪﺷ 4 ﻲﻠﻴﻣ لﻮﻠﺤﻣ ﻦﻳا زا ﺮﺘﻴﻟ
، ﺎﺑ 2 / 0 ﻲﻠﻴﻣ لﻮﻠﺤﻣ ﺮﺘﻴﻟ
ﻢﻳﺪﺳ ﺖﻳﺮﺘﻴﻧ NaNO2) (
1 / 0 رﻻﻮﻣ
، ﻪﺑ تﺪﻣ 3 طﻮﻠﺨﻣ ﺖﻋﺎﺳ
ﺪﻧﻮﺷ ﻞﻴﻜﺸﺗ ﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟا ﺎﺗ ﺪﻳدﺮﮔ .
ﺖﻳﺎﻬﻧ رد
، ﺎﺑ ﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟا
2NaOH زا ﺲﭘ و ﺪﺷ هداد بﻮﺳر لﺎﻣﺮﻧ
5 ﺎﺑ ﻮﺸﺘﺴﺷ رﺎﺑ
ﺪﻴﺳا رد ،PBS ﻚﻴﺘﺳا
ﻚﻳ ﺪﻳدﺮﮔ ﺮﺘﻠﻴﻓ و هﺪﺷ ﻞﺣ ﺪﺻرد .
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ لﻮﻠﺳ رﺎﻤﻴﺗ هﻮﺤﻧ
لﻮﻠﺳ ﻎﻟﺎﺑﺎﻧ يﺪﻴﻟﻮﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، ﻂﻴﺤﻣ ﻂﻳاﺮﺷ رد
ﻞﻣﺎﻛ ﺖﺸﻛ
، ﺮﻣﻮﮕﻴﻟا لﻮﻠﺤﻣ ﺎﺑ راﺪﻘﻣ يوﺎﺣ هﺪﺷ
5 مﺮﮔوﺮﻜﻴﻣ
ﻮﺘﻴﭼ زا ﺪﻳدﺮﮔ روﺎﺠﻣ ناز .
لﻮﻠﺳ ﻦﻳا لﻮﻠﺳ و ﺎﻫ
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
رﺎﻤﻴﺗ هﺪﺸﻧ
، تﺪﻣ ﻪﺑ 24 يﺎﻣد رد ﺖﻋﺎﺳ 37
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد داﺮﮔ
و 5 % يد ﺪﻴﺴﻛا ﺪﺷ هداد ﺖﺸﻛ ﻦﺑﺮﻛ .
زا ﺲﭘ 24 پﻮﺳ ،ﺖﻋﺎﺳ
ﺪﻴﻟﻮﺗ ﻲﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ و ﺪﺷ ﺖﺷادﺮﺑ لﻮﻠﺳ ﻲﻳور TNF-α
ﻪﺑ اﺰﻳﻻا شور eBioscience)
، نﺎﻤﻟآ ( راﺮﻗ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ
ﺖﻓﺮﮔ . ﺖِّﻴﻤﺳ ناﺰﻴﻣ ﻲﺳرﺮﺑ
يور ﺮﺑ ﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟا ﻪﺘﻴﺴﻴﺴﻛﻮﺗ ناﺰﻴﻣ ﻲﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ لﻮﻠﺳ
،ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ ﻲﻃ زا ﺲﭘ
24 ناﺰﻴﻣ ،ﺖﺸﻛ ﺖﻋﺎﺳ
يﺎﻘﺑ لﻮﻠﺳ ﺎﻫ ي ﺖﺸﻛ هداد هﺪﺷ
، شور زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ MTT
ﺪﺷ هﺪﻴﺠﻨﺳ
؛ رﻮﻈﻨﻣ ﻦﻳﺪﺑ
، 20 وﺮﻜﻴﻣ ﺮﺘﻴﻟ ) 5 ﻲﻠﻴﻣ رد مﺮﮔ
ﻲﻠﻴﻣ رد ﺮﺘﻴﻟ (PBS
)MTT -Merk
نﺎﻤﻟآ ( ﻚﻫﺎﭼ ﻪﺑ ﺎﻫ
ﻪﺑ و ﻪﻓﺎﺿا تﺪﻣ
4 رد ﺖﻋﺎﺳ 37ºC
ﺪﺷ ﻪﺑﻮﻜﻧا .
زا ﺲﭘ
نﻮﻴﺳﺎﺑﻮﻜﻧا
، ور ﻂﻴﺤﻣ ﻳ
و ﺪﺷ ﻪﺘﺷادﺮﺑ ﻲﻣارآ ﻪﺑ ﺖﺸﻛ ﻲ 100
لﻮﻧﺎﭘوﺮﭘوﺰﻳا ﺮﺘﻴﻟوﺮﻜﻴﻣ 5
HCl % ) ﺎﻤﮕﻴﺳ ( ﻚﻫﺎﭼ ﻪﺑ ﻪﻓﺎﺿا ﺎﻫ
ﺪﻳدﺮﮔ لﺎﺘﺴﻳﺮﻛ ﺎﺗ ﻞﻴﻜﺸﺗ نازﺎﻣﺮﻓ يﺎﻫ
هﺪﺷ
، و ﺪﻧدﺮﮔ ﻞﺣ
ﺪﻧﻮﺷ ﮓﻧر دﺎﺠﻳا ﺐﺒﺳ .
ﻚﻫﺎﭼ بﺬﺟ ناﺰﻴﻣ رد ﺎﻫ
540nm
ﺧ ﺪﺷ هﺪﻧاﻮ .
ﺑ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻪ ﺖﺳد هﺪﻣآ ﺎﻘﺑ ﺲﻛﺪﻧا ﺐﺴﺣ ﺮﺑ ، (SI)
ﺪﻳدﺮﮔ ﻪﺒﺳﺎﺤﻣ SI .
ناﺰﻴﻣ 540OD
ﻪﺑ ﺖﺴﺗ ﺮﻫ 540OD
ﻲﻔﻨﻣ لﺮﺘﻨﻛ )
لﻮﻠﺳ رﺎﻤﻴﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ هﺪﺸﻧ
( ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ .
ﻲﺳرﺮﺑ ﺑ يﺎﻫﺮﮕﻧﺎﺸﻧ غﻮﻠ
ﻲﺳرﺮﺑ يﺎﻫﺮﮕﻧﺎﺸﻧ ﻲﺤﻄﺳ غﻮﻠﺑ
لﻮﻠﺳ رد ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﻲﺘﻧآ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺮﻈﻧ درﻮﻣ هوﺮﮔ ود يدﺎﺑ
ﻫ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ يﺎ
ﻲﺻﺎﺼﺘﺧا PE-CD40
PE-CD86 ، PE-MHC-II و
و ﺰﻴﻧ
ﻲﺘﻧآ ﻲﺻﺎﺼﺘﺧا يدﺎﺑ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ
لﻮﻠﺳ
؛ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ ﻲﻨﻌﻳ
،
PEcy5-CD11c ﺖﻛﺮﺷ زا
eBioscience و ﺪﻳدﺮﮔ مﺎﺠﻧا
يﺮﺘﻣﻮﺘﻳﺎﺳﻮﻠﻓ هﺎﮕﺘﺳد زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ BD)
ﺎﻜﻳﺮﻣآ ، ( هزاﺪﻧا يﺮﻴﮔ
ﺪﺷ . ﻲﺘﻴﺳﻮﻜﻟ ﻂﻠﺘﺨﻣ ﺶﻨﻛاو
لﻮﻠﺳ دﺮﻜﻠﻤﻋ ﻲﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ رﺎﻤﻴﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
هﺪﺷ
) شﻮﻣ زا ﻪﺘﻓﺮﮔﺮﺑ Balb/c
(
، لﻮﻠﺳ ﻦﻳا ﺎﻫ
لﻮﻠﺳ ﺎﺑ T يﺎﻫ
ﺪﺟ ا شﻮﻣ يوﺎﻔﻨﻟ دﺪﻏ زا هﺪﺷ C57/B6 يﺎﻫ
ﺶﻨﻛاو رد
ﻲﺘﻴﺳﻮﻜﻟ ﻂﻠﺘﺨﻣ MLR)
( ﺪﻧﺪﻳدﺮﮔ روﺎﺠﻣ
؛ ﻦﻳﺪﺑ دﺪﻏ ،رﻮﻈﻨﻣ
شﻮﻣ يوﺎﻔﻨﻟ C57/B6
ﺪﻳدﺮﮔ جرﺎﺧ و
ﻪﻟ زا ﺲﭘ ،ندﺮﻛ
لﻮﻠﺳ ﻊﻤﺟ ﺎﻫ يروآ و لﻮﺒﻠﮔ ﻮﻠﺤﻣ ﺎﺑ ﺰﻣﺮﻗ يﺎﻫ ﺪﻳﺮﻠﻛ ل
مﻮﻴﻧﻮﻣآ
، ﺮﺘﻠﻴﻓ زا و ﺰﻴﻟ mesh)
( ﺪﻧﺪﺷ هداد رﻮﺒﻋ .
لﻮﻠﺳ ﺖﺳد ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ رﺎﻤﻴﺗ و هدرﻮﺨﻧ
ﺎﺑ هﺪﺷ
لﻮﻠﺳ T يﺎﻫ
ﻞﺻﺎﺣ
، ﺖﺒﺴﻧ ﻪﺑ 1
/ 10 ) 20000 لﻮﻠﺳ
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد /
200000 T لﻮﻠﺳ
( ﻚﻫﺎﭼ رد ﺖﻴﻠﭘ يﺎﻫ
96
ﻪﻧﺎﺧ يا
، رد 200 ﺖﺸﻛ ﻂﻴﺤﻣ ﺮﺘﻴﻟوﺮﻜﻴﻣ ﻞﻣﺎﻛ RPMI
،
ﺪﻧﺪﺷ هداد ﺖﺸﻛ .
ﻪﺑ ﮔ ناﻮﻨﻋ لﺮﺘﻨﻛ هوﺮ
، لﻮﻠﺳ T يﺎﻫ
، ﻪﺑ ﺎﻬﻨﺗ
يوﺎﺴﻣ داﺪﻌﺗ )
200000 ﻚﻫﺎﭼ ﺮﻫ رد
( ﺪﻧﺪﺷ هداد ﺖﺸﻛ .
ﺲﭘ
ﺖﺷﺬﮔ زا 72
ﺖﻋﺎﺳ
، ﻂﻳاﺮﺷ رد 37
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد و داﺮﮔ
5 %
يد لﻮﻠﺳ ﺮﻴﺜﻜﺗ ناﺰﻴﻣ ،ﻦﺑﺮﻛ ﺪﻴﺴﻛا T يﺎﻫ
زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ
نﻮﻣزآ ﺪﺷ هﺪﻴﺠﻨﺳMTT
.
يرﺎﻣآ ﺰﻴﻟﺎﻧآ
ﻪﺑ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻦﻴﮕﻧﺎﻴﻣ ترﻮﺻ اﺰﮔ رﺎﻴﻌﻣ فاﺮﺤﻧا±
ﺪﺷ شر و
ﻦﻴﺑ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻪﺴﻳﺎﻘﻣ 2
هوﺮﮔ
، نﻮﻣزآ ﻂﺳﻮﺗ -test
ﻲﺳرﺮﺑ T
ﺪﻳدﺮﮔ . ﺎﺑ ﺞﻳﺎﺘﻧ 05 /
≤0
،P ﻪﺑ ﻲﻨﻌﻣ ترﻮﺻ ﺪﻳدﺮﮔ ﺮﻴﺴﻔﺗ راد
.
ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺎﻫ لﻮﻠﺳ صﻮﻠﺧ يﺪﻴﻟﻮﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، ﺶﻴﺑ ﻢﺘﺸﻫ زور رد
زا
% 90 دﻮﺑ . ﺎﻘﺑ ناﺰﻴﻣ ﻲﺳرﺮﺑ رد ي
لﻮﻠﺳ رد ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
د رد ﺎﻘﺑ ناﺰﻴﻣ ،نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ ﻪﻬﺟاﻮﻣ هوﺮﮔ و
، ﻲﻨﻌﻣ توﺎﻔﺗ يراد
ﺖﺷاﺪﻧ ) 05 /
>0 (P ﻪﺠﻴﺘﻧرد ؛ لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ نازﻮﺘﻴﭼ
يﺎﻫ
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد
، ﺖﺷاﺪﻧ ﻲﻬﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗ ﺖﻴﻤﺳ )
رادﻮﻤﻧ 1 .(
ﺎﻘﺑ ﺪﺻرد ﺮﻳدﺎﻘﻣ ي
لﻮﻠﺳ لﻮﻠﺳ و ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧ يﺎﻫ يﺎﻫ
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد +
ﻪﺑ نازﻮﺘﻴﭼ ﺐﻴﺗﺮﺗ
: 2 /
±12 3 / 100 و 6 /
±8 4 / 95
دﻮﺑ . لﻮﻠﺳ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻲﺳرﺮﺑ رﺎﻤﻴﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﺑ هﺪﺷ نازﻮﺘﻴﭼ ﺎ ﻠﻓ نﻮﻣزآ رد
ﻮ يﺮﺘﻣﻮﺘﻳﺎﺳ
، نﺎﺸﻧ هﺪﻨﻫد ﻪﻤﻫ ﺶﻳاﺰﻓا ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ
يﺎﻫ
لﻮﻠﺳ غﻮﻠﺑ ﻲﺳرﺮﺑ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﺎﺑ ﻪﻬﺟاﻮﻣ رد هﺪﺷ
نارﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟاﻮﻧﺎﻧ دﻮﺑ
. رﺎﻤﻴﺗ و هﺪﺷرﺎﻤﻴﺗ هوﺮﮔ رد هﺪﺸﻧ
،
رد توﺎﻔﺗ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ
)CD40 043 / 0 P= (
، رد ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ CD86
) 012 / 0 P= ( و ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ MHC-II
) 031 / 0 P= ( ﺮﻈﻧ زا
دﻮﺑ راد ﻲﻨﻌﻣ يرﺎﻣآ )
رادﻮﻤﻧ 2 و 3 .(
ناﺰﻴﻣ ﺶﺠﻨﺳ رد TNF-
ﺖﺸﻛ پﻮﺳ رد يﺪﻴﻟﻮﺗ α )
رادﻮﻤﻧ 4 ( لﻮﻠﺳ ، ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
رﺎﻤﻴﺗ نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ
، ﺑ ﻪ ﻲﺼﺨﺸﻣ رﻮﻃ TNF-α
ﺪﻴﻟﻮﺗ يﺮﺗﻻﺎﺑ
ﺪﻧدﺮﻛ ) 0071 / 0 P= (.
رادﻮﻤﻧ 1 ﺎﻘﺑ ناﺰﻴﻣ- ي لﻮﻠﺳ نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ ﻪﻬﺟاﻮﻣ رد ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ .
ناﺰﻴﻣ ﺎﻘﺑ
ﻲﻨﻌﻣ توﺎﻔﺗ هوﺮﮔ ود رد ﺖﺷاﺪﻧ يراد
) 05 /
>0 .(p
رادﻮﻤﻧ 4 ناﺰﻴﻣ ﺶﺠﻨﺳ - TNF-α
لﻮﻠﺳ ﺖﺸﻛ پﻮﺳ رد يﺪﻴﻟﻮﺗ يﺎﻫ
لﻮﻠﺳ و ﺎﻬﻨﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد ﻪﺟاﻮﻣ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ .
لﻮﻠﺳ يﺎﻫ
رﺎﻤﻴﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ
، ﺑ ﻪ ﻲﺼﺨﺸﻣ رﻮﻃ
TNF-α
ﺪﻴﻟﻮﺗ يﺮﺗﻻﺎﺑ
ﻲﻣ ﺪﻨﻨﻛ ) 0071 / 0
P= .(
رادﻮﻤﻧ
2 لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ يﺮﺘﻣﻮﺘﻳﺎﺳﻮﻠﻓ نﻮﻣزآ - ﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﻚ
A . : رادﻮﻤﻧ
ﻦﻴﻴﻌﺗ و ﺐﻘﻋ ﻪﺑ ور و ﻮﻠﺟ ﻪﺑ ور يﺎﻫﻮﺗﺮﭘ
gating) ( لﻮﻠﺳ رد ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
؛مﺎﺗ ﺖﻴﻌﻤﺟ :B
ﻲﺘﻧآ يدﺎﺑ ﺖﺒﺜﻣ ﻪﻧﺎﺘﺳآ ﻦﻴﻴﻌﺗ و ﭗﻴﺗوﺰﻳا يﺎﻫ .
رادﻮﻤﻧ 3 لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ يﺮﺘﻣﻮﺘﻳﺎﺳﻮﻠﻓ نﻮﻣزآ ﺞﻳﺎﺘﻧ - ﻤﻴﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
هﺪﺷرﺎ
نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ
A.
B و : ﺮﻛﺎﻣ رد توﺎﻔﺗ )CD40
043 / 0
p= (
C ؛
D و : رد توﺎﻔﺗ
ﺮﻛﺎﻣ )CD86
012 / 0
p= (
E ؛
F و : رد توﺎﻔﺗ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ
MHC-II
) 031 / 0
P=
.(
ﺮﻳدﺎﻘﻣ TNF-α لﻮﻠﺳ هوﺮﮔ ياﺮﺑ يﺪﻴﻟﻮﺗ
و ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
لﻮﻠﺳ هوﺮﮔ روﺎﺠﻣ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ
، ﻪﺑ ﺐﻴﺗﺮﺗ :
1 /
±8 2 / 75 و 5 /
±13 7 / 142 دﻮﺑ ) 0071 / 0 P= ( . ﺶﻨﻛاو
ﻲﺘﻴﺳﻮﻜﻟ ﻂﻠﺘﺨﻣ MLR)
( لﻮﻠﺳ ﺮﻴﺜﻜﺗ T يﺎﻫ
، ﺖﺸﻛ رد
نﺎﻣﺰﻤﻫ لﻮﻠﺳ هوﺮﮔ ﺎﺑ
روﺎﺠﻣ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ
،
ﻪﺑ دﻮﺑ ﺮﺗﻻﺎﺑ يراد ﻲﻨﻌﻣ رﻮﻃ )
6 /
±22 3 / 185 ﺎﺑ ﻪﺴﻳﺎﻘﻣ رد
4 /
±17 1 / 125 () 012 / 0 P= ) ( رادﻮﻤﻧ 5 .(
رادﻮﻤﻧ 5 - ﻴﺳﻮﻜﻟ ﻂﻠﺘﺨﻣ ﺶﻨﻛاو ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻪﺴﻳﺎﻘﻣ ﻲﺘ
) .(MLR
ﺮﻴﺜﻜﺗ
لﻮﻠﺳ
T يﺎﻫ هداد روﺎﺠﻣ هوﺮﮔ رد نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ
، ﻪﺑ ﻲﻨﻌﻣ رﻮﻃ دﻮﺑ ﺮﺗﻻﺎﺑ يراد
) 012 / 0
P= .(
ﺚﺤﺑ لﻮﻠﺳ لﻮﻠﺳ ،ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ ﻪﻓﺮﺣ يﺎﻫ
ﻪﺿﺮﻋ يا هﺪﻨﻨﻛ
ﻲﺘﻧآ (APC) نژ
يﻮﻗ و كﺮﺤﻣ ﻦﻳﺮﺗ لﻮﻠﺳ يﺎﻫ
T يﺎﻫ
ﺖﺳد ﻲﻣ هدرﻮﺨﻧ ﺪﻨﺷﺎﺑ
ﻪﻛ ﺦﺳﺎﭘ ﻦﻳا عوﺮﺷ رد ﻲﻨﻤﻳا يﺎﻫ
،
ﻠﻛ ﻲﺸﻘﻧ ﻲﻣ ﺎﻔﻳا يﺪﻴ ﺪﻨﻨﻛ
) 1
، 2 .(
ﺶﻴﭘ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ نﺎﺸﻧ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ
هداد لﻮﻠﺳ غﻮﻠﺑ ﻪﻛ ﺪﻧا ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، رد ار ﺎﻬﻧآ ﻲﻳﺎﻧاﻮﺗ
لﻮﻠﺳ ﻚﻳﺮﺤﺗ T يﺎﻫ
ﻲﺘﻧآ ﻲﺻﺎﺼﺘﺧا ﻲﻣ ﺶﻳاﺰﻓا نژ
ﺪﻫد ) 1
،
3 (
، ﻪﻴﻟوا ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺮﺘﺸﻴﺑ رد ﻲﻟو
، لﻮﻠﺳ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
هﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا ﻎﻟﺎﺑﺎﻧ ﺪﻧا
. ﺮﻴﺧا ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ
، ار ﻲﻧاﺮﮕﻧ ﻦﻳا
هدﻮﻤﻧ حﺮﻄﻣ لﻮﻠﺳ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﻪﻛ ﺪﻧا
،ﻎﻟﺎﺑﺎﻧ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﺪﻫد ﺶﻫﺎﻛ ار ﻲﻨﻤﻳا ﺦﺳﺎﭘ ﺖﺳا ﻦﻜﻤﻣ .
تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﻲﺧﺮﺑ
، ﺎﺑ
ﻲﻨﻤﻳا ﻪﺴﻳﺎﻘﻣ لﻮﻠﺳ ﻲﻳاز
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ ﺮﺑاﺮﺑ رد ﻎﻟﺎﺑﺎﻧ
لﻮﻠﺳ ﻫ هداد نﺎﺸﻧ ،ﻎﻟﺎﺑ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎ ﺪﻧا
ﻪﻛ غﻮﻠﺑ
، ﺎﻘﻟا ياﺮﺑ ي
ﺦﺳﺎﭘ نارﺎﻤﻴﺑ رد ﻲﻨﻤﻳا يﺎﻫ ﺖﺳا يروﺮﺿ ﻲﻧﺎﻃﺮﺳ
) 6 .(
Dhoadpkar نارﺎﻜﻤﻫ و
، شراﺰﮔ ﻧدﺮﻛ
ﺪ ﻪﻛ ﻖﻳرﺰﺗ
لﻮﻠﺳ ﻎﻟﺎﺑﺎﻧ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، دﺮﻜﻠﻤﻋ رﺎﻬﻣ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ T CD8
ﻲﺘﻧآ ﻲﺻﺎﺼﺘﺧا ﺪﻴﻟﻮﺗ ﺶﻫﺎﻛ و نژ
IFN-γ لﻮﻠﺳ ﻂﺳﻮﺗ يﺎﻫ
ﻲﺘﻧآ ﻲﺻﺎﺼﺘﺧا T ﺪﺷ ﻚﻳﺮﺤﺗ زا ﺲﭘ نژ
) 7 .(
،نآ زا ﺮﺘﻤﻬﻣ
ﺪﻳﺎﺷ ﺪﻳﺎﻴﺑ ﺮﻈﻧ ﻪﺑ ﻪﻛ
لﻮﻠﺳ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﻫ
ﻎﻟﺎﺑ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد ي
،
ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاد ﺮﺘﻬﺑ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ ﻪﺠﻴﺘﻧ ﺎﺑ ﻲﻤﻴﻘﺘﺴﻣ ﻪﻄﺑار )
8 .(
لﻮﻠﺳ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، ﻲﻣ كﺮﺤﻣ ﺎﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﻞﻣﺎﺷ ﻲﻋﻮﻨﺘﻣ يﺎﻫ
:
TNF-α CD40L ،
ﻲﭙﻴﺗﻮﻨﻓ ﺮﻈﻧ زا ،ﻢﻴﺴﻠﻛ يﺎﻫرﻮﻓﻮﻧﻮﻳا و
ًﺎﻣوﺰﻟ ﻲﻟو ،ﺪﻧﻮﺷ ﻎﻟﺎﺑ تﺎﺒﻴﻛﺮﺗ ﻪﻤﻫ
، و ﺐﺳﺎﻨﻣ غﻮﻠﺑ ﺚﻋﺎﺑ
ﻪﻤﻫ لﻮﻠﺳ ﻪﺒﻧﺎﺟ ﻲﻤﻧ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﻪﺑ ؛ﺪﻧﻮﺷ ﻪﻧﻮﻤﻧ ناﻮﻨﻋ
،
تﺎﺒﻴﻛﺮﺗ ﻦﻳا ﻪﻤﻫ
، ﺪﻴﻟﻮﺗ ﺶﻳاﺰﻓا ﺐﺟﻮﻣ IL-12
ﻪﻛ ﻞﻣﺎﻋ
لﻮﻠﺳ كﺮﺤﻣ ﻢﻬﻣ T يﺎﻫ
ﻲﻤﻧ ،ﺖﺳا ﺪﻧﻮﺷ
. هﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ
ﺖﺳا يوﺎﺣ ﻪﻛ ﻲﺗﺎﺒﻴﻛﺮﺗ ﻂﻘﻓ ﻪﻛ IFN-γ
CD40L و ﺪﻨﺷﺎﺑ
،
ﺎﻘﻟا ﺚﻋﺎﺑ ي
ﻞﺑﺎﻗ ﺪﻴﻟﻮﺗ IL-12 ﻪﺟﻮﺗ
لﻮﻠﺳ ﻂﺳﻮﺗ يﺎﻫ
ﻲﻣ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد ﺪﻧﻮﺷ
) 9 Czerniechki .(
ﺎﻜﻤﻫ و نار
، هﺪﻫﺎﺸﻣ
ﺪﻧدﺮﻛ ﻪﻛ ﻦﻴﻛﻮﺘﻳﺎﺳ ﻞﻣﺎﺷ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ
TNF-α : IL-4 ،
،
GM-CSF ،ﻢﻴﺴﻠﻛ يﺎﻫرﻮﻓﻮﻧﻮﻳا ،
وIL-3 ﻲﻣ ،PGE2
ﺪﻨﻧاﻮﺗ
لﻮﻠﺳ غﻮﻠﺑ ﺪﻨﻳﺎﻤﻧ ﺎﻘﻟا ار ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، لﻮﻠﺳ ﻂﻘﻓ ﻲﻟو يﺎﻫ
لﺎﻌﻓ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد ﺎﺑ هﺪﺷ
TNF-α IFN-γ ،
GM-CSF ، و
CD40L
، ﻬﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗ ﺮﻳدﺎﻘﻣ IL-12 ﻲ
ﺪﻧدﺮﻛ ﺪﻴﻟﻮﺗ )
10 ( . رد
ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺮﺘﺸﻴﺑ ﺮﺿﺎﺣ لﺎﺣ
، TNF-α زا ﻞﺘﻛﻮﻛ ﻚﻳ ﺎﻳ
ﻞﻣﺎﺷ ﻲﻨﻴﻛﻮﺘﻴﺳ TNF-α :
IL-6 ، IL-1β ، PGE2 و
،
ﻪﺑ ناﻮﻨﻋ ﻞﻣاﻮﻋ ﻲﻣ هدﺎﻔﺘﺳا غﻮﻠﺑ ﻲﻨﻴﻛﻮﺘﻴﺳ ﻞﺘﻛﻮﻛ ﻦﻳا ؛ﺪﻨﻨﻛ
،
نﺎﻴﺑ ﺪﻳدﺮﮔ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﻪﻛ ﺪﺷ بﺎﺨﺘﻧا سﺎﺳا ﻦﻳا ﺮﺑ ،CD83
HLA-DR CD86 و
، ﻪﺑ لﻮﻠﺳ ﻪﻠﻴﺳو ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
،
ﻳ ﺶﻳاﺰﻓا لﻮﻠﺳ رد ار يﺮﺘﺸﻴﺑ ﺮﻴﺜﻜﺗ و ﺖﻓﺎ
ﺎﻘﻟا نژﻮﻟآ T دﺮﻛ
) 11 .(
ﻞﺧاد ﻲﻟو ندﻮﻤﻧ
ﻲﻨﻴﻛﻮﺘﻴﺳ ﻞﺘﻛﻮﻛ ﻦﻳا رد PGE2
،
ﻤﻌﺗ مﺰﻠﺘﺴﻣ ﺖﺳا يﺮﺘﺸﻴﺑ ﻖ
؛ اﺮﭼ هﺪﺷ شراﺰﮔ ﻪﻛ ﻪﻛ ﺖﺳا
،PGE2 ﺢﺷﺮﺗ IL-12 ﻪﺑ لﻮﻠﺳ ﻪﻠﻴﺳو رﺎﻬﻣ ار ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﻲﻣ ﺪﻨﻛ ) 12 ( ﺮﮕﻳد يﻮﺳ زا و
، لﻮﻠﺳ تﺮﺟﺎﻬﻣ ﺚﻋﺎﺑ يﺎﻫ
ﻪﺑ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد هﺮﮔ
يوﺎﻔﻨﻟ يﺎﻫ ﻲﻣ
ﺶﻴﭘ ﻊﻗاو رد ﻪﻛ دﻮﺷ زﺎﻴﻧ
لﻮﻠﺳ ﻚﻳﺮﺤﺗ T يﺎﻫ
ﺖﺳا ) 13 .(
ﺖﺴﻴﻧﻮﮔا IFN-γ يﺎﻫ
،
IL-12 IL-2 ،
TLR و ﺰﻴﻧ ﻪﺑ ناﻮﻨﻋ ﻞﻣاﻮﻋ ﺎﻳ ﻲﺑﺎﻬﺘﻟا
ﻞﻳﺪﻌﺗ هﺪﺷ شراﺰﮔ ﻲﻨﻤﻳا هﺪﻨﻨﻛ ﺪﻧا
. ﺖﺴﻴﻧﻮﮔا TLR يﺎﻫ
ﻞﺜﻣ :
،LPS ﻪﺘﺷر ود RNA
poly I:C ،يا CpG ﺎﻳ
، ﻲﻣ رد ﺪﻨﻧاﻮﺗ
ﻣاﻮﻋ ﺮﻳﺎﺳ بﺎﻴﻏ ﻲﺑﺎﻬﺘﻟا ﻞ
، لﻮﻠﺳ غﻮﻠﺑ ﺎﻘﻟا ار ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﺮﺘﺸﻴﺑ تﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﻦﻣﺎﺿ ﺖﺳا ﻦﻜﻤﻣ ﻦﻳا و ﺪﻨﻳﺎﻤﻧ ﺮﺑ
ﺎﻬﻧآ يور
،
ﻪﺑ ﺪﺷﺎﺑ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ تﺎﻘﻴﻘﺤﺗ رد هﻮﻘﻟﺎﺑ هدﺎﻔﺘﺳا رﻮﻈﻨﻣ )
14 .(
دﻮﺟو ﺎﺑ
لﻮﻠﺳ ﺎﺑ نﻮﻴﺳﺎﻨﻴﺴﻛاو ﻖﻴﻘﺤﺗ و ﻂﺴﺑ ﻪﺑ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
رﻮﻈﻨﻣ
ﻪﻨﻴﻬﺑ ﻪﻳﺎﭘ تﻼﻜﺸﻣ ﻊﻗاو رد ،نﺎﻃﺮﺳ نﺎﻣرد د يزﺎﺳ
نﺎﻣر
، ﺎﺑ
ﺖﺳا هﺪﺸﻧ ﻊﻔﺗﺮﻣ شور ﻦﻳا
؛ فﻼﺧﺮﺑ ﺚﺤﺑ
ﻪﻛ يدﺪﻌﺘﻣ يﺎﻫ
ﺎﻘﺗرا ﻲﮕﻧﻮﮕﭼ درﻮﻣ رد ي
نﻮﻴﺳﺎﻨﻴﺴﻛاو ياﺮﺑ ﺪﻴﻟﻮﺗ شور
و غﻮﻠﺑ ،ﻪﻴﻬﺗ ياﺮﺑ ﻲﻣﻮﻤﻋ شور ﭻﻴﻫ ،ﺖﺳا هﺪﺷ نارﺎﻤﻴﺑ ﺲﻟﺎﭘ لﻮﻠﺳ ندﺮﻛ ﻪﺑ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ex vivo ترﻮﺻ دﻮﺟو
دراﺪﻧ
؛ ﺮﮕﻳد يﻮﺳ زا
، هدﺎﻣ ﻪﻛ نازﻮﺘﻴﭼ ﻪﻳﺰﺠﺗ
ﺴﻳز ﺮﻳﺬﭘ ﻲﺘ
يا
هدﺮﺘﺴﮔ يﺎﻫدﺮﺑرﺎﻛ ،ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺎﻳ ﻦﻳﻮﻧ ﻲﻜﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ رد يا
ﺖﺳا . ﺖﺸﻛ ﻂﻴﺤﻣ ود ،ﻲﻧﻮﻨﻛ يﺎﻫ
ﻲﻠﺻا هﺎﮕﻳﺎﺟ و يﺪﻌﺑ
لﻮﻠﺳ ﺎﻫ
، ﻪﺳ لﻮﻠﺳ و ﺖﺳا يﺪﻌﺑ راﺮﻗ ﻲﺴﻜﻳﺮﺗﺎﻣ ﺖﻓﺎﺑ رد ﺎﻫ
ﻪﺘﻓﺮﮔ ﺪﻧا . ﻂﻴﺤﻣ ﻪﻛ ﺖﺳا هﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ ود يﺎﻫ
يﺪﻌﺑ 2D) (
،
نﺎﻣرد رد
ﺪﺿ يﺎﻫ ارﺎﻛ يرﻮﻣﻮﺗ
ﻳ ﺪﻧراﺪﻧ ار مزﻻ ﻲ )
15 .(
نﺎﺸﻧ
ﻂﻴﺤﻣ ﻪﻛ ﺖﺳا هﺪﺷ هداد ﺖﺸﻛ يﺎﻫ
in vitro ود
يﺪﻌﺑ
،
لﺪﻣ ﺎﺑ ﻪﺴﻳﺎﻘﻣ رد يرﻮﻣﻮﺗ ﭗﻴﺗﻮﻨﻓ رد ﺮﻴﻴﻐﺗ و ﺶﻫﺎﻛ ﺐﺟﻮﻣ in vivo ﻲﻣ رﻮﻣﻮﺗ
ﺪﻧدﺮﮔ ) 16 .(
دﺎﻬﻨﺸﻴﭘ ﻲﻧﻮﻨﻛ يﺎﻫ
، رد
ﻂﻴﺤﻣ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﻪﺳ يﺎﻫ
يﺪﻌﺑ 3D) ( ﻪﺑ لﺪﻣ ﻦﻳﺰﮕﻳﺎﺟ ناﻮﻨﻋ
يرﻮﻣﻮﺗ ﺖﺳا ) 17 .(
نازﻮﺘﻴﭼ
، ﻪﻳﺰﺠﺗ داﻮﻣ زا ﺮﻳﺬﭘ
ﻲﺘﺴﻳز ﺖﺳا
ارﺎﻛ ﻪﻛ ﻳ
ﻤﺳ مﺪﻋ و ﻲ
،نآ ﺖﻴ ﻲﺘﻓﺎﺑ ﻲﺳﺪﻨﻬﻣ لﺪﻣ ﻦﻳﺪﻨﭼ رد
؛ﺖﺳا هﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ
،ﻪﻠﻤﺟ زا ﺪﻴﻟﻮﺗ يور ﺮﺑ ﻪﻛ ﻲﺗﺎﻌﻟﺎﻄﻣ
هﺪﻳدﺮﮔ مﺎﺠﻧا فوﺮﻀﻏ و ناﻮﺨﺘﺳا )
18 ( ﺮﺑ ﻪﻛ ﻲﺗﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺎﻳ و
لﻮﻠﺳ يزﺎﺳزﺎﺑ يور ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺮﮔ ترﻮﺻ يدﺎﻴﻨﺑ يﺎﻫ
) 19 .(
ﻳد ﻲﻜﻳ ﻮﻧﺎﻧ درﻮﻣ رد يدﺮﺑرﺎﻛ تﺎﻜﻧ زا ﺮﮕ ﺖﺴﺑراد
ﺎﻫ
، نﺎﻜﻣا
ﻧآ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﻬ
ﻪﺑ لﺪﻣ ناﻮﻨﻋ In vitro يﺎﻫ
ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ ؛ﺖﺳا
لﺪﻣ درﻮﻣ رد ﻪﻛ يدﺪﻌﺘﻣ تﻼﻜﺸﻣ ،دراد دﻮﺟو ناﻮﻴﺣ رد ﺎﻫ
ﺪﻨﻧﺎﻣ : ﻪﻨﻳﺰﻫ ،هدﺮﺘﺴﮔ ﻲﺳﺮﺘﺳد و ﺖﻴﻠﺑﺎﻗ مﺪﻋ تاﺮﺛا ،دﺎﻳز يﺎﻫ
ﻲﺒﻧﺎﺟ ﻞﻣاﻮﻋ ﻪﻠﺧاﺪﻣ و ﻒﻠﺘﺨﻣ لﺪﻣ ناﻮﻴﺣ يور ﺮﺑ ﺮﮔ
ﻲﻫﺎﮕﺸﻳﺎﻣزآ و
...
، نازﻮﺘﻴﭼ ﻲﻣ ار
ﻪﺑ ناﻮﺗ سﺮﺘﺳد رد ترﻮﺻ
لﺪﻣ عاﻮﻧا ياﺮﺑ دﻮﻤﻧ ﻪﻴﻬﺗ ﺎﻫ
. لﻮﻠﺳ زا هدﺎﻔﺘﺳا يور ﺮﺑ يﺎﻫ
ﺖﺴﺑرادﻮﻧﺎﻧ يور ﺮﺑ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد نازﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫ
، ﻲﺼﺨﺸﻣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
،ﺖﺳا هﺪﺸﻧ مﺎﺠﻧا ﺎﻣا
تارذﻮﻧﺎﻧ ﻪﻛ ﺖﺳا هﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ
نازﻮﺘﻴﭼ
، ﻲﻣ ﻪﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﻞﻗﺎﻧ ترﻮﺻ
لﺎﻘﺘﻧا ياﺮﺑ ﺐﺳﺎﻨﻣ يﺎﻫ
لﻮﻜﻟﻮﻣ DNA يﺎﻫ
ﻦﻴﺌﺗوﺮﭘ و ﺪﻨﻳﺎﻤﻧ ﻞﻤﻋ ﺎﻫ
) 20 .(
ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ
ﺐﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا ﻪﺑ دﺮﺑرﺎﻛ لﺎﻤﺘﺣا و
ﻲﻣ ﻪﻛ ﻲﻔﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ دﻮﺟو ﺪﻧاﻮﺗ
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا رد ،ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاد ﻮﻧﺎﻧ تاﺮﺛا ﻲﺳرﺮﺑ ﻪﺑ ،
يﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟا
لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ نازﻮﺘﻴﭼ ﺘﺧادﺮﭘ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﺪﺷ ﻪ . اﺪﺘﺑا رد
نازﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟا ﻪﻛ داد نﺎﺸﻧ ﻪﺘﻴﺴﻴﺴﻛﻮﺗﻮﺘﻴﺳ ﻲﺳرﺮﺑ
،
ﺺﺨﺸﻣ ﺖﻴﻤﺳ هﺪﻨﻨﻛ
لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ يا يﺎﻫ
؛دراﺪﻧ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد
ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ ﺎﻘﺑ ناﺰﻴﻣ
ي لﻮﻠﺳ رﺎﻤﻴﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ هﺪﺷ
، يراﺪﻘﻣ
نﺎﺸﻧ ار ﺎﻘﺑ رد ﺶﻫﺎﻛ داد
ﻲﻣ ﻪﻛ ﻪﺑ ﺪﻧاﻮﺗ ﺪﻴﺳا دﻮﺟو ﺖﻠﻋ
ﺪﺷﺎﺑ ﻂﻴﺤﻣ رد ﻚﻴﺘﺳا .
ﺪﻴﻟﻮﺗ ياﺮﺑ ﻪﻛ ﺖﺳا ﺮﻛذ ﻪﺑ مزﻻ
رذﻮﻧﺎﻧ ﺖﺴﺑرادﻮﻧﺎﻧ و تا ﺎﻫ
، ﻪﺑ نازﻮﺘﻴﭼ ﻠﺤﻣ ترﻮﺻ
رد لﻮ
ﻲﻣ راﺮﻗ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ ﻚﻴﺘﺳاﺪﻴﺳا دﺮﻴﮔ
. ﻪﻛ داد نﺎﺸﻧ ﺞﻳﺎﺘﻧ
ﻪﻤﻫ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ ﻲﺳرﺮﺑ غﻮﻠﺑ يﺎﻫ CD40 هﺪﺷ
CD86 ، MHC- و
،II لﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ هﺪﺷ ﻪﺟاﻮﻣ نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ ﻪﻛ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
ﺪﻧدﻮﺑ
، ﻪﺑ ﻲﻣ ﺶﻳاﺰﻓا ﻲﺼﺨﺸﻣ ترﻮﺻ ﺪﺑﺎﻳ
MHC-II .
،
ﻲﺘﻧآ ﻪﻛ ﺖﺳا ﻲﻟﻮﻜﻟﻮﻣ نژ
لﻮﻠﺳ ﻪﺑ ار ﺎﻫ T يﺎﻫ
ﺿﺮﻋ ﻪ ﻲﻣ ﺪﻨﻛ
CD40 و CD86 و
لﻮﻜﻟﻮﻣ ﻪﻠﻤﺟ زا ﻚﻤﻛ يﺎﻫ
ﻲﻜﻳﺮﺤﺗ
مﺎﻴﭘ ﻪﻛ ﺪﻨﺘﺴﻫ لﺎﻌﻓ رد ار ﻪﻳﻮﻧﺎﺛ يﺎﻫ
لﻮﻠﺳ يزﺎﺳ T يﺎﻫ
ﻲﻣ دﺎﺠﻳا ﺪﻨﻳﺎﻤﻧ
. لﻮﻜﻟﻮﻣ ﻦﻳا نﺎﻴﺑ ﺶﻳاﺮﻓا ﺎﻫ
، زا ﺖﻳﺎﻜﺣ
ﺎﻘﺗرا ي ﻲﺘﻧآ ﻪﺿﺮﻋ ترﺪﻗ لﻮﻠﺳ ﻲﻧژ
ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ دراد
. ﻦﻳا
ﭗﻴﺗﻮﻨﻓ
، ﺎﻘﻟا ﻲﺳرﺮﺑ رد ي
ﻪﺑ ﺰﻴﻧ ﻲﺘﻴﺳﻮﻔﻨﻟ ﺮﻴﺜﻜﺗ ترﻮﺻ
ﻲﻠﻤﻋ
ﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ .
ﺶﻨﻛاو رد
،MLR لﻮﻠﺳ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
رﺎﻤﻴﺗ نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ
، ﻪﺑ ﺺﺨﺸﻣ رﻮﻃ لﻮﻠﺳ ﺮﻴﺜﻜﺗ
T يﺎﻫ ار
ﺎﻘﺗرا ﺪﻧداد . ﺶﻴﭘ ﻦﻳﺎﻛﻮﺘﻳﺎﺳ ﻲﺳرﺮﺑ رد ﻲﺑﺎﻬﺘﻟا
TNF-α ﺰﻴﻧ
ﻪﻛ
زا ﺦﺳﺎﭘ عوﺮﺷ و ﻲﻌﺿﻮﻣ بﺎﻬﺘﻟا رد ﻢﻬﻣ يرﻮﺗﺎﻳﺪﻣ ،ﺖﺳﺎﻫ
ﺪﻴﻟﻮﺗ ناﺰﻴﻣ ﻪﻛ داد نﺎﺸﻧ ﺞﻳﺎﺘﻧ TNF-α
رﺎﻤﻴﺗ رد نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ
ﻲﻣ ﺶﻳاﺰﻓا ﺪﺑﺎﻳ
. ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد ،ﻪﻄﺑار ﻦﻳا رد ﺖﺳا هﺪﺷ نﺎﻴﺑ يا
نازﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟا ﻪﻛ
، نﺎﻴﺑ ﺶﻳاﺰﻓا ﺚﻋﺎﺑ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ
يﺎﻫ
MHC-II CD80 ،
CD86 و ﻲﻣ
ﺎﻘﺗرا ﺐﺟﻮﻣ ﺎﻣا ،ﺪﻧﻮﺷ ي
ﻦﻳﺎﻛﻮﺘﻳﺎﺳ ﺶﻴﭘ يﺎﻫ
ﻲﻤﻧ و هﺪﺸﻧ ﻲﺑﺎﻬﺘﻟا ﻚﻳﺮﺤﺗ ﺐﺟﻮﻣ ﺪﻧاﻮﺗ
لﻮﻠﺳ ﺮﻴﺜﻜﺗ و T يﺎﻫ
ددﺮﮔ ) 21 .(
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد ﺮﮕﻳد يا
، ﺲﻜﻋ
و هﺪﺷ نﺎﻴﺑ ﺐﻠﻄﻣ ﻦﻳا ﻪﻛ ﺖﺳا هﺪﺷ ﻪﺘﻔﮔ
لﻮﻠﺳ يﺎﻫ
رﺎﻤﻴﺗ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد نﺎﻴﺑ ﺶﻳاﺰﻓا ﺮﺑ هوﻼﻋ ،نازﻮﺘﻴﭼ ﺎﺑ هﺪﺷ
ﺶﻳاﺰﻓا ﺮﻳدﺎﻘﻣ ،CD86 ﻦﻴﻛﻮﺘﻳﺎﺳ ﻪﺘﻓﺎﻳ
ﺶﻴﭘ يﺎﻫ ﻲﺑﺎﻬﺘﻟا
TNF-α IL-1β و
ﻲﻣ ﺢﺷﺮﺗ ار
ﺪﺿ ﻦﻴﻛﻮﺘﻳﺎﺳ ناﺰﻴﻣ و ﺪﻨﻨﻛ
ﻲﺑﺎﻬﺘﻟا IL-10 ﻲﻣ ﺶﻫﺎﻛ ﺎﻬﻧآ رد ﺪﺑﺎﻳ
) 22 .(
رد ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻴﻤﻫ
نازﻮﺘﻴﭼ ﻪﻛ ﺖﺳا هﺪﺷ نﺎﻴﺑ
، ﺐﺟﻮﻣ ﺎﻫژﺎﻓوﺮﻛﺎﻣ يور ﺮﺑ
نﺎﻴﺑ ﺶﻫﺎﻛ MHC-II
CD86 و ﺢﺷﺮﺗ و TNF-α
و هﺪﺷ
ﻦﻳﺎﻛﻮﺘﻳﺎﺳ ناﺰﻴﻣ يﺎﻫ
ﺪﺿ ﻲﺑﺎﻬﺘﻟا IL-10 TGF-β و
ار
ﻲﻣ ﺶﻳاﺰﻓا ﺪﻫد
) 22 .(
ﻪﺠﻴﺘﻧ
يﺮﻴﮔ
رد نازﻮﺘﻴﭼ يﺎﻫﺮﻣﻮﮕﻴﻟا يﺪﻨﻤﻧاﻮﺗ زا ﻲﻛﺎﺣ ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
،غﻮﻠﺑ يﺎﻫﺮﻛﺎﻣ ﺶﻳاﺰﻓا TNF-α ﺢﺷﺮﺗ
ﺎﻘﺗرا و ي ﺮﻴﺜﻜﺗ
لﻮﻠﺳ T يﺎﻫ ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ . ﻲﻣ ًﻻﺎﻤﺘﺣا ﺎﻘﻟا ياﺮﺑ نازﻮﺘﻴﭼ زا ناﻮﺗ
ي
لﻮﻠﺳ دﺮﻜﻠﻤﻋ و غﻮﻠﺑ ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
، ﻒﻠﺘﺨﻣ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ رد
لﻮﻠﺳ ﻲﻧﺎﻣرد نﻮﻴﺳﺎﻨﻴﺴﻛاو دﻮﻤﻧ هدﺎﻔﺘﺳا ﻚﻴﺘﻳرﺪﻧد يﺎﻫ
.
ﺮﻜﺸﺗ و ﺮﻳﺪﻘﺗ
ﻲﻨﻤﻳا هوﺮﮔ رد اﺮﺘﻛد ﻪﻟﺎﺳر زا ﻲﺘﻤﺴﻗ ﻪﻟﺎﻘﻣ ﻦﻳا ﻲﺳﺎﻨﺷ
ﺸﻧاد ﺖﺒﺛ هرﺎﻤﺷ ﺎﺑ سرﺪﻣ ﺖﻴﺑﺮﺗ هﺎﮕ 5278611
ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ .
زا نﺎﮔﺪﻨﺴﻳﻮﻧ يﺎﻀﻋا
هوﺮﮔ ﻲﻨﻤﻳا ﻲﺳﺎﻨﺷ ﻲﻜﺷﺰﭘ هﺪﻜﺸﻧاد
ﻪﺘﺷاد يرﺎﻜﻤﻫ ﻪﻛ سرﺪﻣ ﺖﻴﺑﺮﺗ هﺎﮕﺸﻧاد ار ﺮﻜﺸﺗ لﺎﻤﻛ ،ﺪﻧا
ﻲﻣ ﺪﻳﺎﻤﻧ .
ﻊﺑﺎﻨﻣ :
1- Onaitis M, Kalady MF, Pruitt S, Tyler DS. Dendritic cell gene therapy. Surg Oncol Clin N Am. 2002; 11(3): 645-60.
2- Pletinckx K, Döhler A, Pavlovic V, Lutz MB. Role of dendritic cell maturity/costimulation for generation, homeostasis, and suppressive activity of regulatory T cells. Front Immunol. 2011; 2: 39.
3- Mao HQ, Roy K, Troung-Le VL, Janes KA, Lin KY, Wang Y, et al. Chitosan-DNA nanoparticles as gene carriers:
synthesis, characterization and transfection efficiency. J Control Release. 2001; 70(3): 399-421.
4- Kim TH, Jin H, Kim HW, Cho MH, Cho CS. Mannosylated chitosan nanoparticle-based cytokine gene therapy suppressed cancer growth in BALB/c mice bearing CT-26 carcinoma cells. Mol Cancer Ther. 2006; 5(7):1723-32.
5- Li H, Wijekoon A, Leipzig ND. 3D differentiation of neural stem cells in macroporous photopolymerizable hydrogel scaffolds. PLoS One. 2012; 7(11): e48824.
6- de Vries IJ, Lesterhuis WJ, Scharenborg NM, Engelen LP, Ruiter DJ, Gerritsen MJ, et al. Maturation of dendritic cells is a prerequisite for inducing immune responses in advanced melanomapatients. Clin Cancer Res. 2003; 9(14):
5091-100.
7- Dhodapkar MV, Steinman RM, Krasovsky J, Munz C, Bhardwaj N. Antigen-specific inhibition of effector T cell function in humans after injection ofimmature dendritic cells. J Exp Med. 2001; 193(2): 233-8.
8- McIlroy D, Gregoire M. Optimizing dendritic cell-based anticancerimmunotherapy: maturation state does have clinical impact. Cancer Immunol Immunother. 2003; 52(10): 583-91.
9- Mosca PJ, Hobeika AC, Clay TM, Nair SK, Thomas EK, Morse MA, et al. A subset of human monocyte-derived dendritic cells expresses high levels of interleukin-12 in response to combinedCD40 ligand and interferon-gamma treatment. Blood. 2000; 96(10):3499-504.
10- Czerniecki BJ, Cohen PA, Faries M, Xu S, Roros JG, Bedrosian I. Diverse functional activity ofCD83þ monocyte- derived dendritic cells and the implications for cancer vaccines. Crit Rev Immunol. 2001; 21(1-3): 157-78.
11- Jonuleit H, Kühn U, Müller G, Steinbrink K, Paragnik L, Schmitt E, et al. Pro-inflammatory cytokines and prostaglandinsinduce maturation of potent immunostimulatory dendritic cells underfetal calf serum-free conditions.
Eur J Immunol. 1997; 27(12): 3135-42.
12- Kaliński P, Schuitemaker JH, Hilkens CM, Kapsenberg ML. Prostaglandin E2 induces the final maturation of IL- 12-deficient CD1a+CD83+ dendritic cells: the levels of IL-12 are determined during the final dendritic cell maturation and are resistant to further modulation. J Immunol. 1998;161(6):2804-9.
13- Scandella E, Men Y, Gillessen S, Förster R, Groettrup M. Prostaglandin E2is a key factor for CCR7 surface expression and migration of monocyte-deriveddendritic cells. Blood. 2002;100(4):1354-61.
14- Pasare C. Medzhitov R. Toll-like receptors: Linking innate and adaptiveimmunity. Microbes Infect. 2004;6(15):
1382-7.
15- Hambley TW, Hait WN. Is anticancer drug development heading in the right direction? Cancer Res. 2009; 69(4):
1259-62.
16- Smalley KS, Lioni M, Herlyn M. Life isn't flat: taking cancer biology to the next dimension. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2006; 42(8-9): 242-7.
17- Lutolf MP, Hubbell JA. Synthetic biomaterials as instructive extracellular microenvironments for morphogenesis in tissue engineering. Nat Biotechnol. 2005; 23: 47-55.
18- Li Z, Leung M, Hopper R, Ellenbogen R, Zhang M. Feeder-free self-renewal of human embryonic stem cells in 3D porous natural polymer scaffolds. Biomaterials 2010; 31(3): 404-12.
19- Shen G, Shen F, Shi Z, Liu W, Hu W, Zheng X, et al. Identification of cancer stem-like cells in the C6 glioma cell line and the limitation of current identification methods. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2008; 44(7): 280-9.
20- Raghuwanshi D, Mishra V, Das D, Kaur K, Suresh MR. Dendritic Cell Targeted Chitosan Nanoparticles for Nasal DNA Immunization against SARS CoV Nucleocapsid Protein. Mol Pharm. 2012; 9(4): 946-56.
21- Villiers C, Chevallet M, Diemer H, Couderc R, Freitas H, Van Dorsselaer A, et al. From secretome analysis to immunology: chitosan induces major alterations in the activation of dendritic cells via a TLR4-dependent mechanism.
Mol Cell Proteomics. 2009; 8(6): 1252-64.
22- Oliveira MI, Santos SG, Oliveira MJ, Torres AL, Barbosa MA. Chitosan drives anti-inflammatory macrophage polarisation and pro-inflammatory dendritic cell stimulation. Eur Cell Mater. 2012; 24: 136-52.
Abstract Original Article
Chitosan nanopolymers effect in activating of mouse bone marrow derived dendritic cells
Saeed Daneshmandi1, Ali Akbar Pourfathollah2, Mehdi Forouzandeh-Moghaddam3
Background and Aim: Regarding to various problems in the activation of dendritic cells and immune system’s responses, finding of a safe, effective and applicable agent is highly desirable. Chitosan is an effective gene delivery agent and also a part of nanoscaffolds. In the present study, chitosan nanopolymers effect on dendritic immune cells were assessed.
Materials and Methods: In this experimental-laboratory study, chitosan (150 KD) in acetic acid 1%
solution was depolymerized to 10 KD oligomers using NaNO2. The oligomers particles were obtained by means of 2 normal NAOH molecules. Denderitic cells were derived from the rats’ bone marrow using GM- SCF. On the treated denderitic cells CD40, CD86 and MHC-II maturation markers were evaluated by flowcytometery; and TNF-α release was evaluated using ELISA method and T cell proliferation.
Results: It was observed that dendrtic cells purity on the 8th day was more than 90%. Flowcytometery analysis showed an increase in all evaluated CD40, CD86 and MHC-II maturation markers (p<0.05). TNF-α release and T cell proliferation significantly increased by chitosan treated denderitic cells compared to unstimulated or lipofectamin treated cells (P<0.05).
Conclusion: Results showed that chitosan nanopolymers significantly increased dendertic cell maturation phenotype, proinflamatory cytokine production, and induction of T cell proliferation. Therefore, chitosan nanocomplexes and scaffolds can induce and accelerate immune responses.
Key Words: Chitosan; Denderitic cell; TNF-α; T cell; Maturation marker
Journal of Birjand University of Medical Sciences. 2014; 21 (2): 160-168.
Received: July 28, 2013 Accepted: December 30, 2013
1PhD. student of Immunology, Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University,Tehran, Iran;
2Corresponding author, Professor of Immunology, Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran [email protected]
3
