Yade Metri Permata1, Jansen Silalahi2, Effendy De lux Putra3
1
FF USU sebagai kontak person; email: metriyade@gmail.com, Hp.085275929233
2
Departemen Kimia Farmasi FF USU; 3Departemen Kimia Farmasi FF USU
ABSTRAK
Minyak kelapa murni (Virgin Coconut Oil, VCO) adalah lemak rantai sedang (Medium Chain
Triglyceride, MCT) karena komponen utamanya yaitu asam laurat (C:12:0) suatu asam lemak rantai sedang
(Medium Chain Fatty Acids, MCFA). Hidrolisis parsial VCO akan menghasilkan asam lemak bebas dan
monogliserida terutama asam laurat dan monolaurin yang bersifat sebagai antibakteri. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh hidrolisis parsial dengan enzim terhadap aktivitas antibakteri minyak kelapa murni. VCO yang digunakan dalam penelitian ini adalah VCO yang di produksi oleh UD Sinar Nias. Hidrolisis enzimatik dengan lipozim dilakukan dalam waktu inkubasi, 3 jam, 6 jam, 9 jam dan 12 jam. Hasil hidrolisis diasamkan dengan HCl encer kemudian diekstraksi dengan heksan, kemudian heksan diuapkan. Pengujian antibakteri VCO dan hasil hidrolisis yang dibuat dalam bentuk emulsi a/m (5 g hasil hdrolisis dalam 10 ml akuades), selanjutnya diuji terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa (ATCC 25619), Staphylococcus aureus
(ATCC 29737), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228) dan bakteri Propionibacterium acnes (ATCC 6918)
dengan metode difusi agar, menggunakan pencadang kertas dengan diameter 6 mm. Sifat antibakteri dibandingkan dengan tetrasiklin dan ampisilin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa minyak kelapa murni tanpa hidrolisis tidak menunjukkan sifat antibakteri, tetapi hasil hidrolisis bersifat antibakteri. Makin lama inkubasi hidrolisis memperlihatkan sifat antibakteri yang makin tinggi. Hasil hidrolisis lebih efektif terhadap bakteri
Pseudomonas aeruginosa dibandingkan dengan ketiga bakteri lainnya. Aktivitas antibakteri dari tetrasiklin dan
ampsillin jauh lebih besar daripada hasil hidrolisis minyak kelapa murni.
Kata kunci: minyak kelapa murni, MCT, MCFA, asam laurat, monolaurin, antibakteri
PENDAHULUAN
Salah satu produk dari kelapa adalah minyak kelapa murni (Virgin Coconut Oil, VCO) yang
mengandung lemak rantai sedang (mediun chain triglyceride, MCT) dan sering digunakan dalam pengobatan (Conrado, 2000; Darmoyuwono, 2006). Mutu VCO ditentukan dari kadar asam lemak rantai sedang (medium chain fatty acid, MCFA) terutama asam laurat (C12:0), yang dipengaruhi oleh
varietas kelapa, tinggi tempat tumbuh, dan teknologi proses pembuatan VCO (Sari, 2009). Potensi medis dari produk-produk kelapa pertama kali ditemukan oleh Jon Kabara di tahun 70-an, yaitu aktivitas antibakteri, antivirus dan antijamur dari asam lemak rantai sedang, khususnya asam laurat dalam bentuk monogliserida (monolaurin atau ML) (Kabara, et al., 1972; Marina, et al., 2009).
VCO mengandung asam laurat yang tinggi yaitu berkisar antara 46 - 50% yang terikat dalam bentuk trigliserida. Di dalam tubuh manusia asam laurat diubah menjadi monolaurin, suatu senyawa monogliserida yang bersifat antivirus, antibakteri, dan antiprotozoa. Disamping itu, MCFA mudah diserap ke dalam sel kemudian ke dalam mitokondria, sehingga metabolisme meningkat, maka sel-sel bekerja lebih efisien membentuk sel-sel baru serta mengganti sel-sel yang rusak lebih cepat (Sari, 2009; Marina, et al., 2009; Syah, 2005).
Aktivitas antibakteri MCFA terbaik adalah dalam bentuk bebas dan monogliserida. Trigliserida dan digliserida tidak efektif sebagai antibakteri. Dari semua asam lemak jenuh, asam laurat memiliki aktivitas antimikroba lebih besar dari asam kaprilat (C8:0), asam kaprat (C10:0), dan asam miristat (C14:0). Secara umum dilaporkan bahwa asam lemak dan monogliserida menginaktivasi mikrobakteri dengan cara merusak membran plasma (lipid bilayer) dari mikrobakteri tersebut (Kabara, et al., 1972;
Enig, 1996).
Kombinasi antara asam lemak bebas dan monogliserida dari masing-masing asam lemak rantai pendek dan sedang didalam minyak kelapa mungkin akan mempengaruhi sifat antibakterinya, tetapi belum pernah dilakukan. Untuk memperoleh monogliserida dari trigliserida yang terkandung dalam VCO dilakukan hidrolisis menggunakan enzim yang spesifik bekerja hanya untuk menghidrolisis trigliserida pada posisi sn-1 dan sn-3. Enzim yang spesifik bekerja pada posisi sn-1 dan sn-3 adalah
enzim lipase yang berasal dari pankreas, Thermomyces lanuginose dam Mucor miehei (Silalahi,
2002). Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh hidrolisis parsial enzimatik terhadap aktivitas antibakteri dari VCO.
BAHAN DAN METODA
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah vortek (Bender, Jerman), neraca listrik maksimum 210 g (Sartorius, Jepang), hotplate (Heidolph, Jerman), autoklaf, oven, spektrofotometer (Shimadzu, Jepang), inkubator, penangas air, buret, statip, klem dan alat-alat gelas sesuai kebutuhan.
Bahan-bahan kimia yang digunakan dalam penelitian ini jika tidak dinyatakan lain, berkualitas pro analis produksi E. Merck (Jerman) yaitu n-heksana, kalium hidroksida, metanol, tris- hidroksimetilaminometana, asam klorida, kalsium klorida, natrium sulfat anhidrat, indikator fenolftalein (1% dalam alkohol) dan Lipozyme TL IM. Sampel VCO yang digunakan adalah VCO
yang diproduksi oleh UD Sinar Nias. Bahan untuk pembuatan media bakteri yaitu Nutrient Agar
(NA), Nutrien Broth (NB), dan Mueller Hinton Agar (MHA). Bakteri yang digunakan adalah Pseudomonas aeruginosa (ATCC 25619), Staphylococcus aureus (ATCC 29737), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228) dan bakteri Propionibacterium acnes (ATCC 6918). Pencadang yang
digunakan adalah pencadang kertas diameter 6 mm (Macherey-nagel). Aktivitas antibakteri VCO hasil hidrolisis dibandingkan dengan tetrasiklin dan ampisilin.
Pembuatan Pereaksi dan Media
Pereaksi-pereaksi yang digunakan adalah kalsium klorida 0,063 M, larutan penyangga Tris-HCl dengan pH 8, asam klorida 0,5 N, kalium hidroksida 0,5 N, indikator fenoftalen 1%. Pembuatan pereaksi dilakukan sebagaimana diuraikan di Farmakope Indonesia (Ditjen POM, 1995). Media yang digunakan adalah media Nutrient Agar (NA), Nutrien Broth (NB), dan Mueller Hinton Agar (MHA).
Pembuatan media dilakukan sebagaimana diuraikan di Difco Laboratory (Difco Laboratories, 1977).
Hidrolisis Enzimatik
Sebanyak 50 gram minyak ditimbang dalam erlenmeyer 250 ml ditambahkan 50 ml akuades, 12,5 ml CaCl2 0,063 M, 25 ml larutan buffer Tris-HCl dan 500 mg lipozyme. Campuran ini diaduk dengan pengaduk magnet selama 10 menit untuk dihomogenkan. Selanjutnya didiamkan dengan variasi lama pendiaman 3, 6, 9, dan 12 jam pada suhu 40 ± 0,5 oC, dan setiap 1 jam inkubasi dilakukan pengocokan selama 10 menit. Setelah waktu hidrolisis tercapai kemudian campuran dipindahkan ke dalam corong pisah, diekstraksi dengan 50 ml n-heksana dan terbentuk dua lapisan (Boyer, 1986; Satiawihardja, 2001). Lapisan atas (fraksi n-heksana) dipisahkan sebagai filtrat I. Lapisan bawah dikocok lagi dengan 50 ml n-heksana, setelah didiamkan beberapa saat diambil lapisan atas (filtrat II). Filtrat I dan II digabung kemudian ditambahkan 50 mg Na2SO4 anhidrat dan dibiarkan selama 15 menit. Selanjutnya diuapkan diatas penangas air dalam cawan penguap untuk menghilangkan n-heksana. Minyak hasil hidrolisis yang diperoleh digunakan dalam pengujian aktivitas antibakteri dan penentuan bilangan asam.
Penentuan Bilangan Asam
Penentuan asam lemak bebas dilakukan terhadap VCO dan hasil hidrolisis dengan penentuan bilangan asam yaitu minyak yang akan diuji ditimbang 5 gram di dalam erlenmeyer 200 ml. ditambahan 25 ml alkohol netral 95%, kemudian dipanaskan selama 10 menit dalam penangas air sambil diaduk. Larutan ini kemudian dititrasi dengan KOH 0,1 N dengan indikator larutan fenolftalein, sampai tepat terlihat warna merah jambu. Setelah itu dihitung bilangan asam dan kadar asam dari minyak (Ketaren, 2005).
Bilangan Asam (acid value) =
Keterangan:
A = jumlah ml KOH untuk titrasi N = normalitas larutan KOH G = bobot minyak (gram) BM KOH = 56,1
Pengujian Antibakteri
Pengujian antibakteri dilakukan terhadap VCO dan hasil hidrolisis dengan tetrasiklin dan ampisilin sebagai pembanding. Sebanyak 0,1 ml inokulum bakteri dicampur homogen dengan 15 ml MHA dicawan petri, kemudian dibiarkan sampai media memadat. Untuk bahan uji disiapkan dalam bentuk emulsi air dalam minyak (a/m) yaitu 5 gram bahan uji (VCO dan hasil hidrolisis) dicukupkan sampai 10 ml dengan akuadest steril (konsentrasi 500 mg/ml). Pada media yang telah padat ditanam pencadang kertas yang sebelumnya telah direndam dalam bahan uji selama 15 menit. Kemudian diikubasi pada suhu 36 - 37oC selama 24 jam. Selanjutnya masing-masing petri diukur diameter daerah bening disekitar pencadang menggunakan jangka sorong. Pengujian dilakukan sebanyak 3 kali terhadap VCO dan hasil hidrolisis (Ditjen POM, 1995; Ugbogu, et al., 2006). Untuk pembanding tetrasiklin dan ampisilin dilakukan prosedur yang sama seperti pengujian bahan uji dengan konsentrasi 5 mg/ml, 1 mg/ml dan 0,1 mg/ml.
Analisis Data
Analisis data yaitu menggunakan teknik ANOVA (Analisis of Variance = Analisis Ragam).
Bertujuan untuk menguji ada tidaknya perbedaan nilai rata-rata secara signifikan variabel terikat pada dua atau lebih kelompok secara bersamaan untuk menguji perbedaan yang signifikan antara rata-rata tiap kelompok jika probabilitas lebih kecil dari 0,05 (Walpole, 1993).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Bilangan Asam Hasil Hidrolisis Metode Enzimatik Minyak Kelapa Murni
Hidrolisis parsial VCO menghasilkan VCO dengan kandungan asam lemak bebas yang lebih tinggi. Bilangan asam merupakan salah satu ukuran dari jumlah asam lemak bebas yang terdapat dalam suatu minyak atau lemak. Bilangan asam dinyatakan sebagai jumlah milligram KOH yang digunakan untuk menetralkan asam lemak bebas yang terdapat dalam 1 gram minyak atau lemak (Ketaren, 2005). Bilangan asam VCO dan hasil hidrolisis baik metode enzimatik maupun metode penyabunan dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Bilangan asam hasil hidrolisis minyak kelapa murni
Metode Hidrolisis Variasi waktu (mg KOH/gram Minyak) Bilangan Asam n = 3
Tanpa Hidrolisis - 0,74 ± 0,153
Enzimatik 3 jam 72,02 ± 0,517
6 jam 79,05 ± 3,405
9 jam 108,08 ± 0,845
12 jam 150,88 ± 0,818
Dari Tabel 1 dapat dilihat bahwa terjadi peningkatan bilangan asam setelah dilakukan hidrolisis VCO. Makin lama waktu inkubasi meningkatkan bilangan asam. Hasil hidrolisis enzimatik adalah 2 molekul asam lemak bebas dan 1 molekul monogliserida untuk setiap trigliserida yang terkandung di dalam VCO (Kabara, 1972; Boyer, 1986; Fessenden dan Fessenden, 1989).
Daya Hambat Hasil Hidrolisis Minyak Kelapa Murni Terhadap Bakteri
VCO tidak memberikan hambatan pada keempat bakteri yang diuji, karena trigliserida dan digliserida tidak efektif sebagai antibakteri. Daya hambat hasil hidrolisis dapat dilihat pada Tabel 1 dan Gambar 1 (terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa).
Tabel 2. Daya hambat minyak kelapa murni hasil hidrolisis
Mikroba yang
diuji Hidrolosis Enzimatik dalam variasi waktu inkubasi (jam) Zona Hambat (mm)
3 6 9 12
P. aeruginosa 11,23±0,115 11,30±0,100 12,60±0,278a 13,43±0,208a S. aureus 10,10±0,278 10,10±0,350 10,55±0,150 11,28±0,362a S. epidermidis 9,03±0,076 9,68±0,161 10,65±0,477a 10,65±0,328a P. acnes 9,45±0,050 9,57±0,153 10,13±0,681 10,08±0,465
Keterangan: a) Daya hambat signifikan berbeda (ANOVA, P < 0,05) dibandingkan dengan
Gambar 1. Hasil uji antibakteri dari hidrolisis minyak kelapa murni, tetrasiklin dan
ampisilin terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa
Keterangan: (A) Zona hambat hasil hidrolisis enzimatik; (B) Zona hambat ampisilin; (C) Zona hambat tetrasiklin.
Gambar 2. Grafik perbandingan zona hambat hasil hidrolisis enzimatik
Hidrolisis VCO meningkatkan aktivitas antibakteri. Hasil hidrolisis enzimatik adalah asam laurat dan monolaurin. Aktivitas antibakteri MCFA terbaik adalah dalam bentuk bebas dan monogliserida dengan cara menginaktivasi mikrobakteri dengan cara merusak membran plasma (lipid bilayer) dari mikroba tersebut. Dari semua asam lemak jenuh, asam laurat memiliki aktivitas antimikroba lebih baik dibandingkan dengan asam kaprilat (C8:0), asam kaprat (C10:0), dan asam miristat (C14:0) (Kabara, 1972; Enig, 1996; Widiyarti, et al., 2009). Daya hambat dari hasil hidrolisis enzimatik 12 jam dibandingkan dengan tetrasiklin dan ampisillin (lihat Tabel 3).
Tabel 3. Daya hambat hasil hidrolisis VCO dan antibiotik terhadap bakteri yang diuji Mikroba yang
Diuji
Zona Hambat (mm) Metode hidrolisis pada konsentrasi
500 mg/ml Antibiotik (mg/ml) Enzimatik (12 jam) Tetrasiklin (0,1) Ampisilin (5) P. aeruginosa 13,43±0,208 15,90±0,391 - S. aureus 11,28±0,362 9,15±0,265 11,45±0,522 S. epidermidis 10,65±0,328 20,95±0,229 10,80±0,290 P.acnes 10,08±0,465 14,15±0,312 24,25±0,360
Keterangan (-) tidak ada hambat (diameter 6 mm)
VCO hasil hidrolisis diuji daya hambatnya terhadap pertumbuhan bakteri dalam pelarut air. Penggunaan air memungkinkan terjadinya difusi bahan uji dalam media uji karena VCO bersifat
0 2 4 6 8 10 12 14
P. aeruginosa S. aureus S. epidermidis P. acnes
Zon a Ha mb at (mm) 0 jam (VCO) 3 jam 6 jam 9 jam 12 jam 1 mg/ml 5 mg/ml C B 100 µg/ml A 5 mg/ml 1 mg/ml 100 µg/ml 6 jam 9 jam 3 jam 12 jam
hidrofobik dan tidak dapat berdifusi dalam media uji yang bersifat hidrofilik jika tidak dilarutkan dalam pelarut yang bersifat hidrofilik. Monolaurin merupakan monoester asam lemak dari lemak jenuh rantai sedang asam laurat dengan gliserol. Ester asam lemak dapat digunakan sebagai surfaktan. Monolaurin merupakan surfaktan non-ionik yang memiliki dua ujung dengan sifat berbeda, salah satu ujungnya bersifat hidrofobik (gugus asil) dan ujung yang lainya bersifat hidrofilik (dua gugus hidroksil) dan dapat menurunkan tegangan permukaan air (Widiyarti, et al., 2009; Fessenden dan Fessenden, 1989). Dengan adanya monolaurin yang terkandung dalam minyak akan bersifat sebagai emulgator sehingga sangat mudah membentuk suatu campuran bentuk emulsi air dan minyak. Emulsi yang terbentuk tergantung dari jumlah air yang ditambahkan. Dalam hal ini penambahan jumlah air lebih sedikit dibandingkan jumlah minyak sehingga disebut emulsi air dalam minyak (a/m). Dalam bentuk emulsi inilah pengujian aktifitas antibakteri dapat dilakukan. Emulsi yang terbentuk juga dapat membuktikan bahwa di dalam VCO hasil hidrolisis terkandung monolaurin.
VCO dalam pengujian ini tidak memiliki daya hambat bakteri karena asam lemak bebas yang dikandung dalam VCO sedikit dan banyak terikat dalam bentuk trigliserida. Daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri baik antara hasil hidrolisis menggunakan enzim menunjukkan hambatan terbesar pada bakteri Pseudomonas aeruginosa yang merupakan bakteri gram negatif diikuti oleh bakteri Staphylococcus aureus yang merupakan bakteri gram positif. Jika dibandingkan dengan VCO,
menunjukkan peningkatan yang berarti (lihat Tabel 2-3).
Kriteria aktivitas antimikroba yaitu antimikroba aktif dan sangat aktif memilki zona hambat lebih besar dari 11 mm, aktif sedang dengan zona hambat 6 mm - 11 mm, sedangkan tidak aktif bila zona hambat lebih kecil dari 6 mm. Berdasarkan kriteria ini disimpulkan bahwa VCO tidak aktif sebagai agen antimikroba, sedangkan hasil hidrolisis enzimatik 12 jam bersifat aktif sedang karena memilki diameter rata-rata 13,43 ± 0,208 mm dengan diameter pencadang sebesar 6 mm (Nurliana, et el., 2009).
Jika dibandingkan dengan pengujian VCO, asam lemak rantai pendek, asam lemak rantai sedang dan monolaurin, hasil yang diperoleh dalam penelitian ini mengenai VCO berbeda dengan penelitian sebelumnya, dimana VCO sangat efektif sebagai antibakteri terhadap kedua bakteri
Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus, dengan menggunakan pelarut gliserin (Ginting,
2008). Dalam penelitian ini VCO tidak efektif sebagai antibakteri karena kandungan asam lemak bebasnya sedikit, ditunjukkan dengan bilangan asam, sedangkan senyawa yang bersifat sebagai antibakteri adalah asam lemak rantai pendek, asam lemak rantai sedang dan monolaurin, tetapi kandungannya sangat sedikit dalam VCO sebelum hidrolisis, sehingga tidak memberikan daya hambat baik terhadap bakteri gram negatif, maupun gram positif.
Jika dibandingkan dengan penelitian monolaurin sintetik (Widiyarti, et al., 2009) dimana pada mengujian sifat antibakterinya diperoleh hasil daya hambat 7 mm (500 µg/ml) terhadap bakteri
Staphylococcus aureus. Hasil hidrolisis VCO dalam penelitian ini memberikan hambatan yang lebih
kecil yaitu berkisar antara 4 - 5 mm (500 mg/ml) terhadap bakteri yang sama. Ini mungkin disebabkan oleh perbedaan bahan uji yang digunakan adalah murni monolaurin, sedangkan pada penelitian ini adalah VCO hasil hidrolisis yang diperkirakan mengandung monolaurin akibat hidrolisis parsial trigliserida.
Daya hambat lebih besar pada bakteri gram negatif dibandingkan bakteri gram positif. Ini dikarenakan oleh kandungan senyawa yang bersifat dalam VCO bersifat nonpolar sehingga lebih mempengaruhi pada bakteri gram negatif yang membran luarnya merupakan lipopolisakarida yang terdiri dari lipid, polisakarida dan protein, sedangkan bakteri gram positif terdiri dari lapisan peptidoglikan yang lebih banyak dibandingkan bakteri gram negatif. Peptidoglikan adalah matriks kaku pada dinding sel bakteri yang terdiri dari N-asetil glukosamin dan N-asetil muramic acid yang tersusun dalam satu untaian yang terikat satu sama lain (cross-link) oleh rantai samping asam amino.
Tebalnya peptidoglikan yang dimiliki oleh bakteri gram positif menyebabkan bakteri ini resisten terhadap lisis osmotik dan perpanjangan cross-link oleh jembatan asam amino disetiap lapisan
menambah kekuatan dinding sel (Pratiwi, 2008; Waluyo, 2005; McKane dan Kandel, 1996).
Pseudomonas aerugiosa merupakan bakteri yang bersifat oportunistik, yaitu memanfaatkan
kerusakan pada mekanisme pertahanan inang untuk memulai suatu infeksi. Apabila mikroorganisme berada di dalam inang yang sistem kekebalannya telah terganggu, mikroorganisme dapat melintasi penghalang anatomi seperti pada luka bakar dan pembedahan. Lipopolisakarida merupakan salah satu faktor virulensi yang melindungi sel Pseudomonas aeruginosa dari pertahanan tubuh inang (Volk dan
Margaret, 1988; Desbois dan Smith, 2010). Salah satu hipotesis mengenai mekanisme kerja asam laurat dan monolaurin terhadap bakteri adalah dengan melarutkan lemak yang terdapat pada dinding sel bakteri (Delden dan Iglewski, 1998). Adanya pertahanan lipopolisakarida dari bakteri
Pseudomonas aeruginosa memungkinkan asam laurat dan monolaurin merusak dinding sel bakteri
tersebut.
Propionibacterium acnes merupakan bakteri gram positif yang pertumbuhannya tidak mampu
dihambat oleh VCO hasil hidrolisis. Bakteri ini merupakan penyebab jerawat pada kulit. Jerawat adalah peradangan lokal dari folikel rambut, terjadi dalam dua tahap. Selama tahap pertama, sekresi sebasea yang berlebihan terakumulasi dalam folikel rambut yang telah disumbat oleh sel-sel keratin (komedo). Dalam tahap kedua pembentukan jerawat, sebum berlebih diubah menjadi asam lemak oleh enzim lipase yang dihasilkan oleh Propionibacterium acnes, yang merupakan flora normal kulit pada
saluran folikel, dan menyebabkan inflamasi pada folikel. Mekanisme pengobatan jerawat adalah dengan mengurangi produksi sebum (asam retinoat) atau dengan pengangkatan komedo dan penurunan kadar asam lemak dan lipid pada kulit (benzoil peroksida) (McKane dan Kandel, 1996; Swanson, 2003).
Masih belum jelas persis bagaimana mekanisme aktivitas antibakteri asam lemak, tetapi target utamanya adalah membran sel bakteri dan berbagai proses penting yang terjadi pada membran. Beberapa efek merugikan pada sel-sel bakteri dapat dikaitkan dengan sifat deterjen dari asam lemak karena struktur amfoternya (gugus karboksil bersifat hidrofilik dan gugus metil bersifat hidrofobik). Hal ini memungkinkan asam lemak berinteraksi dengan membran sel untuk membuat pori-pori sementara atau permanen dengan ukuran yang bervariasi. Pada konsentrasi tinggi, deterjen, seperti asam lemak bebas, dapat melarutkan membran sedemikian rupa sehingga berbagai protein membran atau bagian yang lebih besar dari lipid bilayer dilepaskan. Asam lemak bebas juga mempengaruhi produksi energi yang berlangsung pada membran sel dengan mengganggu rantai transpor elektron dan posporilasi oksidatif (Delden dan Iglewski, 1998).
Proses lainnya yang mungkin akan menyebabkan hambatan pertumbuhan bakteri atau kematian adalah lisis sel, penghambatan aktivitas enzim, penghambatan sisntesis makromolekul, penurunan serapan nutrisi atau denaturasi protein dan DNA. Mekanisme kerja monolaurin mungkin menyerupai mekanisme tersebut di atas (Delden dan Iglewski, 1998, Skrivanova, et al., 2006).
VCO tidak memilki aktivitas antibakteri, tetapi hidrolisis parsial dapat meningkatkan daya hambat pertumbahan bakteri. Makin lama waktu hidrolisis dengan enzim (lipozim) yang diterapkan makin tinggi bilangan asam. Makin lama inkubasi maka semakin banyak asam laurat dan monolaurin yang dihasilkan, sehingga aktivitas antibakteri semakin meningkat. Hasil hidrolisis lebih efektif terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa (gram negatif) dibandingkan bakteri lainnya. Sifat
antibakteri dari tetrasiklin dan ampisillin jauh lebih tinggi dari hasil hidrolisis minyak kelapa murni. Ampisillin tidak efektif terhadap Pseudomonas aureginosa.
DAFTAR PUSTAKA
Boyer RF. 1986. Modern Experimental Biochemistry. Canada: Addison Wesley Publishing Company,
pp 361-368.
Conrado SD. β000. Coconut Oil In Health And Diseaseμ Its And Monolaurin’s Potential As Cure For
HIV/AIDS. Cocotech Meeting Chennai XXXVII.
Darmoyuwono W. 2006. Gaya Hidup Sehat dengan Virgin Coconut Oil. Jakarta: Penerbit PT Indeks
Kelompok Gramedia, hal 1-10, 15-20.
Delden CV. Iglewski BH. 1998. Cell-to-cell Signaling and Pseudomonas aeruginosa Infections. Emerging Infectious Diseases 4(4): 551-560.
Desbois AP. Smith VJ. 2010. Antibacterial Free Fatty Acids: Activities, Mechanisms of Action and Biotechnological Potential. Appl Microbiol Biotechnol 85: 1629-1642.
Difco Laboratories. 1977. Difco Manual of Dehydrated Culture Media and Reagents for Microbiology and Clinical Laboratory Procedures. Edisi IX. Detroit Michigan: Difco
Laboratories, pp 32, 64.
Enig MG. 1996. Health and Nutritional Benefits from Coconut Oil: An Important Functional Food for the 21st Century. AVOC Lauric Oil Symposium. 1996: 25 April. Ho Chi Min City. Vietnam. Fessenden RJ. Fessenden JS. 1989. Kimia Organik. Jilid 2. Edisi III. Jakarta: Penerbit Erlangga, hal
408-412.
Ginting DP. 2008. Pembuatan dan Uji Aktivitas Antibakteri Krim Minyak Kelapa Murni (VCO/Virgin Coconut Oil) Terhadap Staphylococcus aureus ATCC 29737 dan Pseudomonas aeruginosa ATCC 25619. Skripsi. Fakultas Farmasi. Universitas Sumatera Utara.
Kabara JJ. Swieczkowski DM. Conley AJ. Truant JP. 1972. Fatty Acids and Derivatives as Antimicrobial Agents. Antimicrobial Agents Chemotheraphy 2(1): 23-28.
Ketaren S. 2005. Minyak dan Lemak Pangan. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia, hal 49-65.
Marina AM. Che Man YB. Nazimah SAH. Amin I. 2009. Chemical Proerties of Virgin Coconut Oil. J Am Oil Chem Soc 86: 301-307.
McKane L. Kandel J. 1996. Microbiology: Essential and Applications. Edisi II. New York: Mc Graw-
Hills.Inc, hal 76-84, 645.
Nurliana Sudarwanto M. Sudirman LI. Sanjaya AW. 2009. Prospek Makanan Tradisional Aceh Sebagai Makanan Kesehatan: Deteksi awal Aktivitas Antimikroba Minyak Pliek U dan Ekstrak Kasar Dari Pliek U. Disertasi. Program Studi Sains Veteriner. Sekolah Pasca Sarjana Institut
Pertanian Bogor.
Pratiwi ST. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga, hal 23, 111-117.
Sari N. 2009. Efek Pemberian Virgin Coconut Oil (VCO) Terhadap Profil Imunohistokimia Antioksidan Superoxide Dismutase (SOD) Pada Jaringan Ginjal Tikus Diabetes Mellitus.
Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor.
Satiawihardja B. 2001. Studi Pembuatan Mentega Coklat Tiruan dari Minyak Sawit dengan Proses Interesterifikasi Enzimatik. Jurnal Teknologi Indonesia Pertanian 10(3): 129-138.
Silalahi J. 2002. Fats and Oils: Modification and Substitution. Lecture Notes. Postgraduate Section.
Universitas Sumatera Utara, hal 45.
Skrivanova E. Marounek M. Benda V. Brezina P. 2006. Susceptibility of Eschericia coli, Salmonella
sp. and Clostridium perfringens to Organic Acids and Monolaurin. Veterinarni Medicina 51(3):
81-88.
Swanson JK. 2003. Antibiotic Resistance of Propionibacterium acnes in Acne Vulgaris. Dermatology Nursing 15(4): 359-362.
Syah ANA. 2005. Perpaduan Sang Penakluk Penyakit VCO + Minyak Buah Merah. Jakarta: Penerbit
Agro Media Pustaka, hal 5-6, 14-18, 22-23.
Ugbogu OC. Onyeagba RA. Chigbu OA. 2006. Lauric Acid Content and Inhibitory Effect of Palm Kernel Oil on Two Bacterial Isolated and Candida albicans. African Journal of Biotechnology
5(11): 1045-1047.
Volk AW. Margaret FW. 1988. Mikrobiologi Dasar. Edisi V. Jakarta: Erlangga, hal 235.
Walpole RE. 1993. Pengantar Statistika. Edisi III. Jakarta: Penerbit Gramedia Pustaka Utama, hal
401-408.
Waluyo L. 2005. Mikrobiologi Umum. Cetakan kedua. Malang: Penerbit UMM Press, hal 191-212.
Widiyarti G. Hanafi M. Suwarso WP. 2009. Study on The Synthesis of Monolaurin as Antibacterial Agent Against Staphylococcus aureus. Indo. J. Chem 9(1): 99-106.