PERBAN D I N GAN H ASI L PEM ERI KSAAN M ETOD A
I M M U N OCH ROM ATOGRAPH I C TEST ( I CT) D EN GAN PERW ARN AAN GI EM SA PAD A I N FEKSI M ALARI A FALCI PARU M
D ESRI N AW ATI
Ba g ia n I lm u Ke se h a t a n An a k Fa k u lt a s Ke d ok t e r a n U n iv e r sit a s Su m a t e r a U t a r a
BAB I
P E N D A H U L U A N
1 .1 . LATAR BEL A K A N G
Malar ia adalah peny ak it y ang disebabk an oleh sat u at au lebih dar i em pat Plasm odia y an g m en gin fek si m an u sia : P. Falcipar um , P. Viv ax , P. ov ale dan P. m alar iae.1 Dua spesies y ang per t am a ( P. falcipar um , P. v iv ax ) m er upak an peny ebab
lebih dar i 95% k asus malar ia di dunia.2 P. falcipar um dit em uk an t er ut am a di daer ah
t r opis dan r esik o k em at ian lebih besar bagi or ang y ang t idak im un, k ar ena dapat
m eny er ang sel dar ah m er ah disem ua um ur dan obat biasany a r esist ensi.1 Ter dapat
buk t i bahw a peny ak it ini m em puny ai t ingk at endem isit as y ang t inggi di beber apa k aw asan pem uk im an di daer ah t r opis dan subt r opis sej ak m asa pr asej ar ah. Hal ini ber hubungan dengan m odifik asi t er hadap lingk ungan alam i y ang dilak uk an oleh
m anusia.3 Sam pai saat ini m alar ia m asih m er upak an pr oble m didaer ah t r opis negar a
y ang ber k em bang dengan 300- 5 0 0 j u t a k asu s dan 2- 3 m eninggal per t ahunny a. 1
Kh u su sn y a pada bay i dan an ak an gk a k em at ian dan k esak it an pada u m u r dibaw ah 5 t ahun adalah 6% dan 11% , di Afr ik a 10% angk a k em at ian y ang disebabk an oleh
peny ak it m alar ia.4,5 Di I ndonesia sam pai saat ini peny ak it m alar ia m asih m er upak an
m asalah k esehat an m asy ar ak at .6,7 Angk a k esak it an peny ak it ini m asih cuk up t inggi,
t er ut am a di daer ah endem is dan y ang non endem is m alar ia.6 Di daer ah t er sebut
m asih ser ing t er j adi let u san w abah y an g m en im bu lk an ban y ak k em at ian . Lapor an per t am a t en t an g adan y a m alar ia di I n don esia oleh t en t ar a Belan da. Dilapor k an
adany a w abah di Cir ebon pada t ahun 1852 - 1854.7
Peny ebar an peny ak it m alar ia di Pr opinsi Sum at er a Ut ar a t er ut am a dij um pai sepanj ang pant ai t im ur dan bar at . Pada dar at an t inggi k asus m alar ia j ar ang dit em uk an. Dar i hasil sur v ai m alar iom et r ik y ang dilak uk an dar i t ahun 1990 sam pai dengan t ahun 1 9 9 3 di sebelas Kabupat en t elah dit em uk an dua spesies par asit y ait u P. falcipar um dan P. v iv ax . Dar i sur v ai t er sebut diper oleh angk a m alar ia 2. 7% . Peny ebar an par asit m alar ia ber dasar k an sur v ai m alar iom et r ik adalah dipant ai,
daer ah per buk it an dan daer ah y ang ber dek at an dengan hut an lebat .8 Hasil sur v ai
m alar iom et r ik pada daer ah en dem is m alaria di pr opin si Su m at er a Ut ar a selam a k ur un w ak t u 1989 sam pai 1993 diper oleh angk a par asit e r at e ( PR) y ang t inggi di beber apa daer ah ( PR> 2% ) dan pada daer ah lainny a r endah ( PR< 2% ) . Kecam at an dengan p ar asit e r at e y ang t inggi dit em uk an di Kabupat en Mandailing Nat al ( Madina
) , Asahan, Nias, Tapanuli Ut ar a, Kar o dan Labuhan Bat u.8 Tahun 1999/ 2000 pada
High Pr ev alensi Ar ea ( HPA) dij um pai PR> 4% dim ana y ang t er t inggi Madina y ait u 10,65% .9
Kabu pat en Man dailin g Nat al t er let ak dian t ar a 00- 1050 lint ang ut ara dan 980
50- 100010 buj ur t im ur dan luas w ilay ah k ir a - k ir a 6. 620. 70 k m 2, m em puny ai 8
343. 715 j iw a, pada desa Peny abungan j ae j um lah lak i- lak i 1. 071 dan per em puan ber j um lah 1, 172 j iw a.
Dengan bany ak ny a k asus m alar ia, m ak a k ebut uhan ak an suat u m et oda unt uk m enegak k an diagnosis peny ak it m alar ia y ang sifat ny a sensit if dan m enduk ung
gej ala - gej ala k linis sangat lah per lu.4 Di Thailand pada t ahun 1971 m endiagnosis
m alar ia secar a sim t om at ik seh in gga t er j adi diagn osis y an g m en in gk at .1 1 Oleh karena
it u diagn osis dini diper luk an unt uk m enur unk an angk a k esak it an dan k em at ian.3
Biasany a diagnosis m alar ia dit egak k an dengan m et oda k onv ensional m em ak ai per w ar n aan Giem sa pada apu san dar ah dan pem er ik saan di baw ah sin ar m ik r osk op, pem er ik saan ini sam pai saat ini m asih m er u pak an gold st andar d . Nam u n pem er ik saan ini m asih t er dapat beber apa k endala dan k et er bat asan. Sebagai
k onsek w ensiny a diper luk an pengem bangan ber bagai m et oda alt er nat if.4
1 .2 . PERU M U SAN M ASALAH
Ber dasar k an lat ar belak an g t er sebu t diat as, dim an a Madin a m er u pakan daer ah m alar ia dengan pr ev alensi t er t inggi di Sum at er a Ut ar a, m ak a k ebut uhan ak an suat u m et oda unt uk diagnosis m alar ia y ang sifat ny a m udah, cepat dan sensit iv e sangat lah diper luk an. Sam pai saat ini Met oda Giem sa m er upak an gold st andar d. Kelebih an dar i met oda Giem sa ini adalah biay a r elat if m ur ah. Mesk ipun dem ik ian m asih t er dapat k endala y ait u m em er luk an t enaga labor at or ium y ang t er lat ih dan hasil diper oleh dalam w ak t u y ang lebih lam a (t im e con su m in g) .4 Unt uk
m engat asi k elem ahan ini Par r a dan k aw an- k aw an ( 1991) m em per k enalk an
I m m u n och r om at ogr aph ic t est ( I CT) unt uk m endet ek si P. falcipar um t r ophozoit e hist idine r ich pr ot ein - I I ( Pf HRP- I I ) . Uj i ini lebih cepat dilak uk an dan t idak
m em but uhk an per alat an labor at or ium dan pr ak t is dipak ai di lapangan.1 2 I CT ini
h argan y a Rp. 2 0 . 0 0 0
1 .3 . H I POTESI S
Tidak ada per bedaan sensit ifit as dan spesifisit as ant ar a pem er ik saan I CT dengan pew ar naan Giem sa.
1 .4 . TU JU AN PEN ELI TI AN
Unt uk m enget ahui sensit ifit as dan spesifisit as uj i t er sebut t er hadap infek si P.falcipar um
1 .5 . M AN FAAT PEN ELI TI AN
Pen elit ian in i dih ar apk an ber m an f aat sebagai alat diagn ost ik alt er n at if dalam m enegak k an diagnosis peny ak it m alar ia falcipar um secar a cepat dengan m et oda seder hana.
BAB I I
TI N JAU AN PU STAKA
Diagnosis m alar ia dapat dilak uk an secar a m ik r osk opis dan non mik r osk opis. Uj i m ik r osk opis dapat dilihat secar a langsung di baw ah m ik r osk op, seper t i pem er ik saan dar ah t epi, Quant it at iv e Buffy Coat ( QBS) , Acr idine or ange ( AO) . Sedangk an uj i non m ik r osk opis ber guna unt uk m engident ifik asi pada ant igen par asit at au ant ib odi ant iplasm odial at au pr oduk si m et abolik par asit , seper t i uj i Poly m er ase Chain React ion, Det ect ion of ant ibodies by Radio I m m uno Assay , I ndir ect Hem aglut inat ion, Deox y r ibonucleic acid dan Rapid Manual Test .13
I secar a fenot ip t er k ait dengan ek spr esi t onj olan y ang m ir ip k nob pada m em br an per m uk aan er it r osit y ang t er infek si. PfHRP I t am pak ny a t er k ait dengan m em br an sel dar ah m er ah, k hususny a sit osk let on dan hany a m em puny ai k nob posit if. PfHRP I I diek spr esik an secar a k nob posit if m aupun k nob negat if pada sel dar ah m er ah. Rangk aian DNA t elah m em buk t ik an bahw a PfHRP I I m engandung 35 hist idin dan j uga k andungan alanin dan aspar t at y ang r elat if t inggi m asing- m asing 40% dan 12% PfHRP I I I dengan r angk aian k lon DNA m engandung 30% hist idin dan 29% alanin.14
Penem uan How ar d ant ibodi m onok lonal 8 7 ber eak si secar a spesifik dengan
PfHRP I I dan ini sangat ber beda dengan HRP I dan HRP I I I .14
Uj i I CT ini um um ny a digunak an dalam bent uk uj i st r ip y ang m engandung ant ibodi m onok lonal y ang ber langsung pada ant igen par asit . Pem er ik saan ser ologi r apid im unok r om at ologr afi pr insipny a adalah det ek si ant igen ber dasar k an r eak si k om plek s ant igen- ant ibodi pada bahan n it r oselu lose acet at dim ana kom pleks t er sebut diber i m ar k a m onok lonal ant ibodi ( Mab) y ang ber label zat w ar na ( colloidal gold) sebagai penanda, sedangk an ant igen non spesifik lainny a dipisahk an, sehingga m u n cul suat u t anda y ang m eny at ak an hasil posit if/ negat if.17
Uj i I CT dapat m endet ek si P. falcipar um dan non falcipar um , t et api t idak dapat m em bedak an ant ar a P. v iv ax , P. ov ale dan P. Malar iae, m au pu n m em bedak an in fek si falcipar um m ur ni dar i infek si cam pur an y ang ter m asuk P. Falcipar um .1 1
Uj i I CT m er upak an uj i y ang lebih cepat , m udah dilak uk an dan t idak m em er luk an labor at or ium k husus, seper t i sent r ifus, dan m ik r osk op. Uj i ini lebih pr ak t is digunak an di lapangan. Diagnosis y ang cepat dan ak ur at adalah k unci
penanganan y ang efek t if unt uk m engat asi peny ak it m alar ia.1 2
Selain I CT ada beber apa car a lain y ang ber dasar k an hist idine r ich pr ot ein I I y ait u : Par aSight - F, Par ach eck . Selain it u sudah dik em bangk an pula uj i Plasm odium Lact at e Dehy dr ogenase ( pLDH) . Test ini ber da sar k an det ek si enzim gly colit ic solu ble
y ang dik eluar k an oleh par asit dengan k adar y ang t inggi dalam dar ah.1 3
Hingga saat ini diagnosis m alar ia dilak uk an dengan car a k onv ensional y ait u den gan m em bu at sediaan dar ah t ebal dan t ipis y an g dipu las den gan pew arn aan Giem sa dan diper ik sa di baw ah m ik r osk op cahay a. Hasil pem er ik saan negat if t idak selalu ber ar t i t idak m engidap peny ak it m alar ia, k hususny a pada or ang- or ang y ang m endapat pengobat an ant i m alar ia at aupun m er ek a y ang t inggal di daer ah hipoendem is. Sediaan dar ah t ebal ber guna unt uk m engk onsent r asik an par asit di dalam bidang sediaan, j adi unt uk m enegak k an diagnosis m alar ia har us m enggunak an sediaan dar ah t ebal. Sediaan dar ah t ipis ber guna unt uk m elihat m or fologi par asit sek aligus m enent uk an spesies par asit .1 8
Kelebihan dar i pew ar naan Giem sa ini adalah biay a r elat if m ur ah. Mesk ipun dem ik ian m asih t er dapat beber apa k endala dan k et er bat asan, dengan t enaga labor at or ium y ang ber pengalam an sek alipun, m em ak an w ak t u dan m em but uhk an upay a y ang int ensif, t er ut am a bila par asit sedik it at au t idak dij um pai di dalam dar ah pada saat pem er ik saan.4 , 1 8
BAB I I I
M ETOD OLOGI PEN ELI TI AN
3 .1 . D ESAI N PEN ELI T I AN
Met ode y ang digunak an adalah diagnost ik dengan car a t er sam ar ganda unt uk m enilai sensit iv it as, spesifisit as, nilai pr edik si posot if, nilai pr edik si negat if, ak ur asi dam pr ev alensi.
3 .2 . TEM PAT D AN W AKTU PEN ELI TI AN
Penelit ian dilak uk an di daer ah Kabupat en Mandailing Nat al Kecam at an Peny abungan pada 2 Pusk esm as dan 1 Rum ah Sak it y ait u :
3.2.1. Pusk esm as Peny abungan j ae
3.2.2. Pusk esm as Mom pang
3.2.3. Ru m ah Sak it Pen y abu n gan
Wakt u penelit ian 8 Apr il - 22 Apr il 2001
3 .3 . P O P U LASI P EN ELI T I AN
Sam pel diam bil dar i pasien y ang ber k unj ung k e pusk esm as dan Rum ah Sak it . Um ur sam pel y ang diam bil : sem ua golongan um ur
3 .4 . BESAR SAM P EL
Besar sam pel dit ent uk an : 2 0
2 2
d
PQ
z
n
=
α
P = Pr opor si peny ak it at au k eadaan y ang ak an dicar i Q = 1 – P
D = Tingk at k et epat an absolut e y ang dik ehendak i
α = Tin gk at k em ak n aan
P = 0,5 zα = 1,96 d = 10
Dengan m em ak ai r um us diat as m ak a diper oleh j um lah sam pel m inim al 96 or ang.
3 .5 . KRI TERI A I N KLU SI D AN EKSLU SI 3.5.1. Krit eria inklusi :
Set iap pasien y ang dat ang dengan k eluhan : 3.5.1.1. Dem am = 3 7 , 50C
3.5.1.2. Pu cat
3.5.1.3. Mencr et
3.5.1.4. Sak it Kepala
3.5.2. Kr it er ia ekslusi :
3.5.2.1. Pender it a dengan infek si lain ( hepat it is, flebit is)
3.5.2.2. Adany a r iw ay at m ak an obat ant im alar ia dalam sat u m inggu
sebelum ny a.
3.5.2.3. Pender it a y ang t idak ber sedia diper ik sa at au t idak m au m engik ut i
dalam pene lit ian ini.
3 .6 . I Z I N PEN ELI TI AN
3 .7 . CARA KERJA
Pasien y ang dat ang k e pusk esm as dengan k eluhan dem am , pucat , m encr et dan sak it k epala dila k uk an pem er ik saan suhu t ubuh, fr ek uensi j ant ung, fr ek uensi nafas, pem er ik saan hepar dan lien. Kem udian pasien diber i izin subj ek ( lam pir an 1 ) unt uk dit anda t angani. Set iap pasien di am bil dar ah unt uk pem er ik saan m alar ia dengan dua m et oda y ait u ( m et oda Giemsa dan I CT) j uga dilak uk an pem er ik saan hem oglobin ( lam pir an 2)
3.7.1. Met oda k onv ensional ( pulasan Giem sa)
Dar ah t ipis sam pel pada k aca obj ek , set elah k er ing difik sasi dengan m et anol selam a 5 det ik k em udian diw ar nai dengan Giem sa selam a 30 m enit . Cuci dengan air m engalir k em udian k er ingk an. Hasil pulasan dilihat dibaw ah m ik r osk op cahay a biasa unt uk ident ifik asi par asit spesies. Sediaan adalah posit if bila dit em uk an spesies par asit pada pulasan Giem sa. I nt i par asit t er lihat ber w ar na m er ah dan sit oplasm a ber w ar n a bir u k eungu- unguan dengan pigm en t er lihat ber w ar na cok lat k ehit am an.
3.7.2. Met oda I CT
I CT ber bent uk k ar t u segi em pat m er upak an uj i diagnost ik im m unologik unt uk m endet ek si P. falcipar um didalam dar ah.
Ta b e l 6 . Se n sit iv it a s t e r h a d a p I CT b e r d a sa r k a n j u m la h p a r a sit e m ia dari laki- lak i y ait u 32: 19. Hal ini ber beda dengan penelit ian Husein Albar dim ana
laki - laki lebih banyak.2 1 Bila dilihat dar i k elom pok um ur y ang t er bany ak posit if
ini sam a dengan penelit ian Husein Albar dan Susant o.4,21
nilai pr edik si negat if 96,2% .2 5 di Ber lin Rum ah Sak it Vir chow Cam pus m elak uk an per bandingan k it opt iMAL den gan I CT den gan h asil sen sit ifit as I CT 9 2 , 5 % dan n ilai spesifisit as 98, 3% , nilai pr edik si posit if 94, 2% dan nilai pr edik si negat if 97, 8% .
Dibandingk an dengan opt iMAL n ilai p r ed ik si negat if 96, 7% 2 6 Di Teheran, I ran nilai
sensit iv it as 93% dan spesifisit as 100% .27 Univ er sit y of Zur ich Tr av el Clinic, I nst it ut e
for Social and Pr ev ent iv e Medicine, Sw izer land m em bandingk an Malaguick ( I CT) dan Par aSight - F, k edua penelit ian ini t idak ber beda ber m ak n a.2 8
Beadle dk k m elapor k an penelit ian di Keny a dengan nilai ak ur asi dipst ick an t igen capt u r e assay pada P. falcipar um Hist idine - Rich Prot ein- I I ( PfHRP- I I ) hasilny a sensit iv it as 96,5 – 100% unt uk m endet ek si lebih dar i 60 par asit asex ual P. falciparum /µ1 dar ah dar ah, sensit iv it as 70 - 81% unt uk 11- 6 0 p ar asit /µ1 dan sen sit iv it as 1 1- 6 7 % u n t u k 1 0 par asit /µ.2 9 Pada penelit ian ini dij um pai par asit em ia/ m m 3 dar ah 0- 1 0 0 , m ak a nilai sensit iv it as 8 0 % , bila par asit em ia 1 0 0 1-5000 nilai sensit iv it as 100% , dan bila > 1-5000 nilai sensit iv it asny a 75% . Hum ar m em per oleh nilai sensit iv it as uj i diagnost ik 93% unt uk par asit em ia 100 par asit /µl30
BAB V
KESI M PU LAN D AN SARAN
5 .1 . KESI M PU LAN D AN PEN ELELI TI AN .
Dar i penelit ian ini disim pulk an I CT dapat digunak an sebagai alat diagnost ik alt er nat if dalam m enegak k an diagnosis peny ak it m alar ia falcipar um di lapangan secar a t epat dan seder h an a, oleh k ar en a n ilai sen sit iv it as dan spesif isit as cu k u p t inggi.
5 .2 . SA R A N
Diper luk an penelit ian lanj ut an unt uk m em bandingk an m et oda I CT dengan Rapid Man u al Test y ang lain seper t i Par ach ech unt uk m endapat k an nilai sensit iv it as dan spesifisit as y ang t inggi dan dengan har ga y ang lebih m ur ah.
D AFTAR PU STAKA
1 . Kr ogt ad DJ. Plasm odium Species ( m alar ia) . Dalam : Pr inciples and pr act ice of
infect ious disease. Edisi k e - 5. New Yor k : Chur chill Liv ingst one, 2000. h. 2817-29.
2 . Lubis CP. Ser o- epidem iologi m alar ia. Maj alah k edok t er an Nusant ar a 1 9 9 0 ;
3 : 1 3 5- 46.
3 . Poolsuw an S. Malar ia in pr ehist or ic Sout heast er n Asia. Sout heast J Tr op Me
Public Healt h 1995; 26: 3- 22.
4 . Susant o L. Pr ibadi W, Ast ut y H. Diagnosis of m alar ia by t he r apid m anual t est .
Med J I ndones 1995; 4: 24- 9 .
5 . Diallo AB, Ser r es GD, Beav ogui AB, Lapoint e C, Viens P. Hom e car e of m alar ia
in f ect ed ch ildr en of less t h an 5 y ear s of age in a r u r al ar ea of t h e Repu blic of Guinea. WHO 2001; 79: 28- 31.
6 . Ram pengan TH. Malar ia. Dalam : Ram pengan TH, Laur ant z I R, peny unt ing
7 . Gem ij at i S. Masalah m alar ia di I ndonesia. Dalam : Pr ibadi W, Muly ono R,
10.Dinas Kesehat an Kabupat en Mandailing Nat al r encana st r at egis t ahun
2001-2005.
26. Jelinek T, Gr obbusch M. P, Schw enk e S et al. Sen sit iv it y an d specificit y of dipst ick t est for r apid diagnosis of m alar ia in nonim m une t r av eler s. J Clin Micr obiol 1999; 37: 721- 3.
27. Ph ar m D GHE, Afsh ar A, Moh sen n i G. Rapid im m u n och r om at ogr aph ic t est
“ I CT m alar ia Pf” in diagnosis of Plasm odium falcipar um and it s applicat ion in t he v iv o dr ug suscept ibilit y t est . WHO : MAP : 1999.
28.Funk M, Schlagenhauf P, Tschopp A, St effen R. Malaquick v er sus Par aSigh t - F
as a diagnost ic aid in t r av eller s’s m alar ia. Tr ans R Soc Tr op Med Hy g 1999; 93: 268- 272.
29.Beadle C, Long WG, Weiss RW at al. Diagnosis of m alar ia by det ect ion of
Plasm odium falcipar um HRP- 2 an t igen w it h a r apid dipst ick an t igen - capt ur t e assay . Lancet 1994; 343: 564- 8 .
