Transformasi tanaman obat
Hyocyamus muticus
penghasil alkaloid tropane
dengan penembakan partikel
Hakim H.K
Nurul Fazri
Abstrak
Umumnya dikenal sebagai semacam tumbuhan, juga dikenal sebagai nightshade bau atau semacam tumbuhan hitam, adalah tanaman dari keluarga Solanaceae yang berasal dari Eurasia, meskipun sekarang didistribusikan secara global.
Saat ini satu-satunya sistem transformasi seluruh
tanaman tersedia untuk hyocyamus spp. adalah Agrobacterium Transfer rhizogenes dimediasi gen ke hyocyamus muticus (sevon et al., 1995). Namun, sistem ini memiliki keterbatasan terkait dengan manipulasi alkaloid metabolisme karena A. rhizogenes gen rol memiliki terbukti mempengaruhi metabolisme alkaloid tropane.
Gen rol muncul untuk meningkatkan produksi
Kami menemukan bahwa penembakan partikel
pada
eksplan daun adalah prosedur yang lebih
sederhana dan efisien untuk transformasi H.
muticus.
Produksi
kalus
tahan
kanamisin
transgenik
terjadi
mudah
dengan pemboman. Tidak seperti Nicotiana
tabacum
(Leech et al., 1998) H. muticus tidak membentuk
tunas
Bahan & Metode
Plants Material & Tissue Culture
Vektor transformasi dan penembakan partikel
Setelah pemboman, eksplan daun diinkubasi pada 25
C selama 24 jam dalam gelap. Eksplan kemudian
dipindahkan ke medium basal MS yang mengandung
3% sukrosa, 0,8% agar dan ditambah dengan
1-napthalene asam asetat (NAA; 2mg ml-1) dan 6
benzilamino purin (BAP; 0.5mg ml-1). Mereka
diinkubasi selama 48 jam (12-h penyinaran) tanpa
seleksi.seleksi dilakukan 72 jam setelah
Pewarnaan histokimia GUS
