114125346-4-Laporan-Praktikum-Teknik-Isolasi-Bakteri.pdf

(1)

NO. MAHASISWA

NO. MAHASISWA : P0713111105: P071311110555 SEMESTER

SEMESTER : : 3 3 (TIGA)(TIGA) TANDA

TANDA TANGAN TANGAN ::

I.

I. Acara Acara Praktikum Praktikum : : Teknik Teknik Isolasi Isolasi BakteriBakteri

II.

II. Sub Sub Acara Acara Praktikum Praktikum :: A.

A. Teknik GoresanTeknik Goresan B.

B. Teknik TaburanTeknik Taburan C.

C. Teknik UsapTeknik Usap D.

D. Bakteri UdaraBakteri Udara

III.

III. Tujuan Tujuan Praktikum Praktikum :: A.

A. Mengetahui teknik isolasi bakteri.Mengetahui teknik isolasi bakteri. B.

B. Mempelajari morfologi koloni yang tumbuh dalam kultur murni hasil isolasi.Mempelajari morfologi koloni yang tumbuh dalam kultur murni hasil isolasi.

IV.

IV. Hari, Hari, Tanggal Tanggal :: A.

A. Sterilisasi Sterilisasi alat alat : : Selasa, Selasa, 9 9 Oktober Oktober 20122012 B.

B. Isolasi Isolasi bakteri bakteri : : Kamis, Kamis, 11 11 Oktober Oktober 20122012 C.

C. Pengamatan Pengamatan koloni koloni bakteri bakteri : : Senin, Senin, 15 15 Oktober Oktober 20122012

V.

V. Dasar Dasar Teori Teori ::

Dalam mempelajari mikrobia tidak bisa dilakukan secara kasat mata. Dalam mempelajari mikrobia tidak bisa dilakukan secara kasat mata. Sedangkan dalam suatu lokasi yang menurut manusia sudah cukup kecil, disana masih Sedangkan dalam suatu lokasi yang menurut manusia sudah cukup kecil, disana masih terdapat bakteri dalam jumlah besar dan juga bermacam-macam jenisnya. Selain itu, terdapat bakteri dalam jumlah besar dan juga bermacam-macam jenisnya. Selain itu, di alam

(2)

Trusted by over 1 million members

Try Scribd FREE for 30 days to access over 125 million titles without ads or interruptions!

Start Free Trial Cancel Anytime.

(3)

terlepas dari spesies yang lain. Mikrobia lebih sering ditemukan dalam bentuk koloni terlepas dari spesies yang lain. Mikrobia lebih sering ditemukan dalam bentuk koloni dan bersama-sama dengan mikrobia yang lain(Seiler, 2000). Oleh karena itu, dalam dan bersama-sama dengan mikrobia yang lain(Seiler, 2000). Oleh karena itu, dalam mempelajarinya, bakteri harus diambil dari alam lalu diisolasikan dalam suatu biakan mempelajarinya, bakteri harus diambil dari alam lalu diisolasikan dalam suatu biakan murni. Biakan murni adalah biakan yang hanya berisi 1 jenis bakteri(Pelczar et murni. Biakan murni adalah biakan yang hanya berisi 1 jenis bakteri(Pelczar et al.,1988).

al.,1988).

Untuk mempelajari sifat karakteristik mikrobia, baik morfologi, pertumbuhan Untuk mempelajari sifat karakteristik mikrobia, baik morfologi, pertumbuhan maupun fisiologinya, maka masing-masing jenis mikrobia harus dipisahkan satu maupun fisiologinya, maka masing-masing jenis mikrobia harus dipisahkan satu dengan lainnya dalam suatu kultur yang disebut kultur murni, yaitu suatu biakan yang dengan lainnya dalam suatu kultur yang disebut kultur murni, yaitu suatu biakan yang terdiri dari sel-sel yang terdiri dari satu spesies atau satu galur mikrobia. Sehingga terdiri dari sel-sel yang terdiri dari satu spesies atau satu galur mikrobia. Sehingga untuk tujuan ini maka media yang digunakan untuk penanaman harus steril, dan tidak untuk tujuan ini maka media yang digunakan untuk penanaman harus steril, dan tidak terkontaminasi oleh jenis-jenis mikrobia lain tumbuh di dalamnya. Dalam kegiatan ini terkontaminasi oleh jenis-jenis mikrobia lain tumbuh di dalamnya. Dalam kegiatan ini langkah demi langkah cara memindahkan biakan murni harus dengan teknik aseptis. langkah demi langkah cara memindahkan biakan murni harus dengan teknik aseptis. A.

A. Teknik Aseptis dalam InokulasiTeknik Aseptis dalam Inokulasi

Untuk memindahkan sel-sel mikrobia dari satu medium ke medium yang Untuk memindahkan sel-sel mikrobia dari satu medium ke medium yang lain, baik bertujuan untuk peremjaan mikrobia(subculturing), maupun lain, baik bertujuan untuk peremjaan mikrobia(subculturing), maupun memisahkan jenis tertentu dari jenis yang lain (isolasi), digunakan ose yang memisahkan jenis tertentu dari jenis yang lain (isolasi), digunakan ose yang sebelumnya harus dipijarkan agar ujung dari ose untuk sementara steril karena sebelumnya harus dipijarkan agar ujung dari ose untuk sementara steril karena mikrobia akan mati dengan pemijaran.

mikrobia akan mati dengan pemijaran.

Dalam pemindahan kultur, kedua tabung(suspensi biakan murni dan Dalam pemindahan kultur, kedua tabung(suspensi biakan murni dan tabung media baru) dipegang dengan tangan kiri, kemudian tangan kanan sambil tabung media baru) dipegang dengan tangan kiri, kemudian tangan kanan sambil memegang ose yang sudah dipijarkan(sementara menjadi dingin), membuka tutup memegang ose yang sudah dipijarkan(sementara menjadi dingin), membuka tutup kapas dengan menjepit diantara jari-jari. Jangan meletakkan tutup kapas diatas kapas dengan menjepit diantara jari-jari. Jangan meletakkan tutup kapas diatas meja, hal ini akan menyebabkan kontaminasi pada medium. Dalam beberapa detik meja, hal ini akan menyebabkan kontaminasi pada medium. Dalam beberapa detik dengan didekatkan (±10 cm) pijaran api, pindahkan ose yang sudah dicelupkan dengan didekatkan (±10 cm) pijaran api, pindahkan ose yang sudah dicelupkan pada

pada suspensi suspensi biakan biakan murni murni ke ke tabung tabung media media penanaman penanaman yang yang baru. baru. SetelahSetelah selesai dekatkan kedua mulut tabung diatas pijaran api dan segera tutup kembali selesai dekatkan kedua mulut tabung diatas pijaran api dan segera tutup kembali kedua tabung. Demikian teknik aseptis selalu lakukan untuk teknik penanaman kedua tabung. Demikian teknik aseptis selalu lakukan untuk teknik penanaman yang lain seperti goresan dan taburan di dalam plate.

yang lain seperti goresan dan taburan di dalam plate. B.

B. Teknik IsolasiTeknik Isolasi

Isolasi bakteri adalah proses mengambil bakteri dari medium atau Isolasi bakteri adalah proses mengambil bakteri dari medium atau lingkungan asalnya dan menumbuhkannya di medium buatan sehingga diperoleh lingkungan asalnya dan menumbuhkannya di medium buatan sehingga diperoleh

(4)

(5)

1.

1. Tusukan(Stab), yaitu untuk melihat sifat aerob dan anaerob mikrobia (padaTusukan(Stab), yaitu untuk melihat sifat aerob dan anaerob mikrobia (pada media tabung tegak).

media tabung tegak). 2.

2. Gores (Streak), yaitu untuk melihat sifat pertumbuhan dan morfologi koloniGores (Streak), yaitu untuk melihat sifat pertumbuhan dan morfologi koloni mikrobia, teknik ini ada beberapa cara, antara lain :

mikrobia, teknik ini ada beberapa cara, antara lain : a.

a. Streak pada tabung miringStreak pada tabung miring b.

b. Streak plate, yaitu goresan pada medium plateStreak plate, yaitu goresan pada medium plate 3.

3. Tuang (Pour plate), yaitu untu mengetahui morfologi dan jumlah koloni padaTuang (Pour plate), yaitu untu mengetahui morfologi dan jumlah koloni pada perhitungan jumlah bakteri dengan

perhitungan jumlah bakteri dengan metode pengenceran.metode pengenceran. 4.

4. Tabur (Spread plate), yaitu untuk mengetahui morfologi koloni bakteri.Tabur (Spread plate), yaitu untuk mengetahui morfologi koloni bakteri. 5.

5. Bakteri udaraBakteri udara

Metode pemaparan pada udara terbuka adalah metode untuk mengisolasi Metode pemaparan pada udara terbuka adalah metode untuk mengisolasi bakteri

bakteri udara. udara. Metode Metode ini ini sangat sangat simpel, simpel, yaitu yaitu dengan dengan memaparkan memaparkan mediummedium pada udara terbuka, dengan harapan ada bakteri yang

pada udara terbuka, dengan harapan ada bakteri yang menempel dan kemudianmenempel dan kemudian akan tumbuh menjadi koloni.

akan tumbuh menjadi koloni.

VI.

VI. Alat Alat dan dan Bahan Bahan :: A.

A. Alat :Alat : 1.

1. PetridishPetridish 2.

2. Tabung reaksiTabung reaksi 3.

3. Jarum oseJarum ose 4. 4. BunsenBunsen 5. 5. OvenOven 6. 6. AutoklafAutoklaf 7.

7. Kertas payung (coklat)Kertas payung (coklat)

B.

B. Bahan :Bahan : 1.

1. Nutrien Agar Nutrien Agar 2.

2. Suspensi bakteriSuspensi bakteri E.coli E.coli 3.

3. Suspensi bakteri Bacilus spSuspensi bakteri Bacilus sp 4.

4. Rambut yang dikeramasRambut yang dikeramas dan tidak dikeramas

dan tidak dikeramas 5.

5. KukuKuku 6.

6. KapasKapas 7.

(6)

(7)

VII.

VII. Cara Cara Kerja Kerja :: A.

A. PersiapanPersiapan 1.

1. Sterilisasi PetridishSterilisasi Petridish a.

a. Menyiapkan petridish yang akan disterilkanMenyiapkan petridish yang akan disterilkan b.

b. Membungkus peridish dengan kertas coklat(payung)Membungkus peridish dengan kertas coklat(payung) c.

c. Memasukkan petridish yang telah dibungkus dalam Memasukkan petridish yang telah dibungkus dalam oven pada suhu 180º Coven pada suhu 180º C selama 120 menit

selama 120 menit 2.

2. Pembuatan Media (Nutrien Agar/NA)Pembuatan Media (Nutrien Agar/NA) a.

a. Menimbang NA bubuk lalu mencampurnya dengan aquadesMenimbang NA bubuk lalu mencampurnya dengan aquades b.

b. Memanaskan larutan NA sampai medidihMemanaskan larutan NA sampai medidih c.

c. Menuangkan larutan NA kedalam tabung reaksi dan ditutup dengan kapasMenuangkan larutan NA kedalam tabung reaksi dan ditutup dengan kapas d.

d. Mensterilkan tabung reaksi yang sudah berisi media dalam autoklaf padaMensterilkan tabung reaksi yang sudah berisi media dalam autoklaf pada suhu 121ºC, tekanan 1 atm selama 15 menit

suhu 121ºC, tekanan 1 atm selama 15 menit B.

B. Teknik IsolasiTeknik Isolasi 1.

1. Teknik GoresanTeknik Goresan a.

a. Mencairkan NA pada penangas airMencairkan NA pada penangas air b.

b. Menuangkan NA yang masih cair suam-suam kuku kedalam petridishMenuangkan NA yang masih cair suam-suam kuku kedalam petridish secara aseptis

secara aseptis c.

c. Membiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidakMembiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidak rusak/bergerak)

rusak/bergerak) d.

d. Mengambil 1 ose bakteri secara aseptis kemudian menggoreskan padaMengambil 1 ose bakteri secara aseptis kemudian menggoreskan pada permukaan agar secara goresan lurus dan goresan zig-zag

permukaan agar secara goresan lurus dan goresan zig-zag e.

e. Memberi label pada petridish agar tidak tertukarMemberi label pada petridish agar tidak tertukar f.

f. Membuat kontrol terhadap media yang digunakanMembuat kontrol terhadap media yang digunakan g.

g. Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat)Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat) h.

h. Membiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hariMembiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hari i.

i. Mengamati pertumbuhan koloni pada permukaan mediaMengamati pertumbuhan koloni pada permukaan media 2.

2. Teknik taburanTeknik taburan a.

a. Teknik Tabur 1Teknik Tabur 1 1)

1) Mencairkan NA pada penangas airMencairkan NA pada penangas air 2)

(8)

(9)

4)

4) Membiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidakMembiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidak rusak/bergerak)

rusak/bergerak) 5)

5) Memberi label pada petridish agar tidak tertukarMemberi label pada petridish agar tidak tertukar 6)

6) Membuat kontrol terhadap media yang digunakanMembuat kontrol terhadap media yang digunakan 7)

7) Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat)Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat) 8)

8) Membiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hariMembiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hari 9)

9) Mengamati pertumbuhan koloni pada permukaan mediaMengamati pertumbuhan koloni pada permukaan media b.

b. Teknik tabur 2Teknik tabur 2 1)

1) Mencairkan NA pada penangas airMencairkan NA pada penangas air 2)

2) Mengambil 1 ose suspensi bakteri lalu dimasukkan ke dalam petridishMengambil 1 ose suspensi bakteri lalu dimasukkan ke dalam petridish secara aseptis

secara aseptis 3)

3) Menuangkan media yang masih cair suam-suam kuku kedalamMenuangkan media yang masih cair suam-suam kuku kedalam petridish secara aseptis

petridish secara aseptis 4)

4) Membiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidakMembiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidak rusak/bergerak)

rusak/bergerak) 5)

5) Memberi label pada petridish agar tidak tertukarMemberi label pada petridish agar tidak tertukar 6)

6) Membuat kontrol terhadap media Membuat kontrol terhadap media yang digunakanyang digunakan 7)

7) Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat)Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat) 8)

8) Membiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hariMembiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hari 9)

9) Mengamati pertumbuhan koloni pada permukaan mediaMengamati pertumbuhan koloni pada permukaan media 3.

3. Teknik usapTeknik usap a.

a. Mencairkan NA pada penangas airMencairkan NA pada penangas air b.

b. Menyiapkan sampel kuku, rambut yang dikeramas dan rambut yang tidakMenyiapkan sampel kuku, rambut yang dikeramas dan rambut yang tidak dikeramas

dikeramas c.

c. Memasukkan sampel tersebut (kuku atau rambut yang dikeramas atauMemasukkan sampel tersebut (kuku atau rambut yang dikeramas atau rambut yang tidak dikeramas) ke dalam aquades yang steril

rambut yang tidak dikeramas) ke dalam aquades yang steril d.

d. Menuangkan media yang masih cair suam-suam kuku kedalam petridishMenuangkan media yang masih cair suam-suam kuku kedalam petridish secara aseptis

secara aseptis e.

e. Membiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidakMembiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidak rusak/bergerak)

rusak/bergerak) f.

(10)

(11)

h.

h. Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat)Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat) i.

i. Membiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hariMembiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hari j.

j. Mengamati pertumbuhan koloni pada permukaan mediaMengamati pertumbuhan koloni pada permukaan media C.

C. Bakteri udaraBakteri udara 1.

1. Mencairkan NA pada penangas airMencairkan NA pada penangas air 2.

2. Menuangkan NA yang masih cair suam-suam kuku kedalam petridish secaraMenuangkan NA yang masih cair suam-suam kuku kedalam petridish secara aseptis

aseptis 3.

3. Membiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidakMembiarkan media sampai dingin dan padat/mengeras (dibalik tidak rusak/bergerak)

rusak/bergerak) 4.

4. Memberi label pada petridish agar tidak tertukarMemberi label pada petridish agar tidak tertukar 5.

5. Memaparkan media pada udara bebas selama 5 menit dan 10 menit di limaMemaparkan media pada udara bebas selama 5 menit dan 10 menit di lima tempat berbeda yaitu kelas, kantin, jalan, tempat

tempat berbeda yaitu kelas, kantin, jalan, tempat parkir dan perpustakaanparkir dan perpustakaan 6.

6. Menutup kembali petridish setelah selesai pemaparan selama 5 menit dan 10Menutup kembali petridish setelah selesai pemaparan selama 5 menit dan 10 menit

menit 7.

7. Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat)Membalik lalu membungkus petridish dengan kertas payung(coklat) 8.

8. Membiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hariMembiarkan petridish dalam suhu ruang selama 4 hari 9.

(12)

(13)

VIII.

VIII. Hasil Praktikum dan PembahasanHasil Praktikum dan Pembahasan A.

A. Hasil praktikumHasil praktikum No No urut urut Perlakuaa Perlakuaa n n Mi

Mi krkro o GGaammbbaar r PengmPengmaattaan n KKeett

1 Goresan 1 Goresan

lurus lurus

E.

E. coli coli SepanjangSepanjang goresan goresan Media rata,media Media rata,media terluka terdapan terluka terdapan kontaminan kontaminan 26 Goresan 26 Goresan lurus lurus E.

E. coli coli -Sepanjang-Sepanjang goresan goresan

-ada titik di luar -ada titik di luar goresan

goresan

Ada kontaminan Ada kontaminan bakteri media

bakteri media terlukaterluka media rata media rata 2 Goresan 2 Goresan lurus lurus B.subtilis

B.subtilis -sepanjang-sepanjang goresan goresan -ada goresan -ada goresan yang patah yang patah -ada titik di luar -ada titik di luar garisan

garisan

-media rata -media rata

-ada satu goresan -ada satu goresan yang luka,ada yang luka,ada kontaminan jamur kontaminan jamur dan bakteri dan bakteri 27 Goresan 27 Goresan lurus lurus B.subtilis

B.subtilis -di -di luar luar goresangoresan -menyebar -menyebar -ada titik di luar -ada titik di luar goresan goresan -media rata -media rata -media terluka -media terluka -ada kontaminana -ada kontaminana bakteri bakteri

(14)

(15)

Start Free Trial Cancel Anytime. 4 Goresan 4 Goresan zigzag zigzag E.coli

E.coli SepanjangSepanjang goresan,di luar goresan,di luar dan dan terkotaminana terkotaminana -Terkontaminasi -Terkontaminasi bakteri orange bakteri orange

-media rata,tidak ada -media rata,tidak ada luka luka 29 Goresan 29 Goresan zigzag zigzag E.coli

E.coli SepanjangSepanjang goresan,di luar goresan,di luar dan dan terkotaminana terkotaminana -Terkontaminasi -Terkontaminasi bakteri krem bakteri krem -media rusak,ada -media rusak,ada luka luka 5 Goresan 5 Goresan zigzag zigzag B.subtilis

B.subtilis SepanjangSepanjang goresan,di luar goresan,di luar dan dan terkotaminana terkotaminana -Terkontaminasi -Terkontaminasi bakteri krem bakteri krem

-media rata,tdk ada -media rata,tdk ada luka luka 30 Goresan 30 Goresan zigzag zigzag B.subtilis

B.subtilis SepanjangSepanjang goresan,di luar goresan,di luar dan dan terkotaminana terkotaminana -Terkontaminasi -Terkontaminasi bakteri krem bakteri krem

-media rata,tdk ada -media rata,tdk ada luka luka -goresan tidak -goresan tidak berbentuk zigz berbentuk zigzagag 6 Goresan 6 Goresan zigzag zigzag Kontrol

Kontrol terkotaminana terkotaminana -Kontaminasi-Kontaminasi jamur(krem jamur(krem))

-media rata -media rata

(16)

(17)

Start Free Trial Cancel Anytime. 7 Taburan 7 Taburan cara 1 cara 1 E.coli E.coli -Tdk-Tdk terkontaminan terkontaminan -pertumbuhan -pertumbuhan media rata media rata Ada kontaminan Ada kontaminan warna kuning warna kuning 32 Taburan 32 Taburan cara 1 cara 1 E.coli

E.coli PertumbuhanPertumbuhan merata merata Ada kontaminan Ada kontaminan warna kuning warna kuning 8 Taburan 8 Taburan cara 1 cara 1 B.subtilis

B.subtilis -Pertumbuhan-Pertumbuhan merata merata -tdk ada -tdk ada kontaminan kontaminan Media rata Media rata 33 Taburan 33 Taburan cara 1 cara 1 B.subtilis

B.subtilis -Pertumbuhan-Pertumbuhan merata merata -tdk ada -tdk ada kontaminan kontaminan Media rata Media rata 9 Taburan 9 Taburan cara 1 cara 1 Kontrol

Kontrol -tdk -tdk adaada pertumbuhan pertumbuhan

Media rata Media rata

(18)

(19)

Start Free Trial Cancel Anytime. 35 Taburan 35 Taburan cara 2 cara 2 E.coli

E.coli -kontaminan -kontaminan -1 -1 titik titik kolonikoloni berwarna kre berwarna kremm 11 Taburan 11 Taburan cara 2 cara 2 B.subtilis

B.subtilis -Koloni-Koloni menyebar menyebar

–

– tdak ratatdak rata

Tdk ada kontaminan Tdk ada kontaminan 36 Taburan 36 Taburan cara 2 cara 2 B.subtilis

B.subtilis -Koloni-Koloni menyebar menyebar

–

– tdak ratatdak rata

Tdk ada kontaminan Tdk ada kontaminan 12 Taburan 12 Taburan cara 2 cara 2 Kontrol

Kontrol Tidak Tidak ada ada Tidak Tidak adaada kontaminan kontaminan

37 Taburan

(20)

(21)

Start Free Trial Cancel Anytime. 13 Teknik 13 Teknik usap usap Rambut Rambut habis di habis di cuci cuci Tumbuh jamur Tumbuh jamur dan bakteri dan bakteri Jamur berwarna Jamur berwarna hijau,bakteri hijau,bakteri berwarna putih berwarna putih 50 Teknik 50 Teknik usap usap Rambut Rambut habis habis dicuci dicuci 14 Teknik 14 Teknik usap usap Rambut Rambut tdk di tdk di keramas keramas Tdk Tdk terkontaminasi terkontaminasi

Bersih dan tidak ada Bersih dan tidak ada mikroba mikroba 39 Teknik 39 Teknik usap usap Rambut Rambut tdk di tdk di keramas keramas Tdk Tdk terkontaminasi terkontaminasi

Bersih dan tidak ada Bersih dan tidak ada mikroba mikroba 15 Teknik 15 Teknik usap usap Kuku Tumbuh Kuku Tumbuh beberapa ba beberapa bakterikteri

Bakteri merah lebih Bakteri merah lebih besar drpda y

(22)

(23)

Start Free Trial Cancel Anytime. 16 Teknik 16 Teknik udara udara dikls(R.lebi dikls(R.lebi h sepi) h sepi) Ditemukan Ditemukan jamur dan jamur dan bakteri bakteri -Tdk terlalu banyak -Tdk terlalu banyak terbntuk terbntuk bulat,lonjong bulat,lonjong -Media rata -Media rata 41 Teknik 41 Teknik udara dikls udara dikls (R.lebih (R.lebih sepi) sepi) Ditemukan Ditemukan jamur dan jamur dan bakteri bakteri -Tdk terlalu banyak -Tdk terlalu banyak terbntuk terbntuk bulat,lonjong bulat,lonjong 17 Teknik 17 Teknik udara dikls udara dikls (R.lebih (R.lebih sepi) sepi) Ditemukan Ditemukan jamur dan jamur dan bakteri bakteri

-Bakteri lebih banyak -Bakteri lebih banyak dibandingkn dgn dibandingkn dgn jamur bntuk bulat jamur bntuk bulat dan tdak beraturan dan tdak beraturan -media rata -media rata 42 Teknik 42 Teknik udara dikls udara dikls (R.lebih (R.lebih sepi) sepi) Ditemukan Ditemukan jamur dan jamur dan bakteri bakteri

-Bakteri lebih banyak -Bakteri lebih banyak dibandingkn dgn dibandingkn dgn jamur bntuk bulat jamur bntuk bulat dan tdak beraturan dan tdak beraturan -media rata -media rata 18 Bakteri 18 Bakteri udara di udara di kantin 5’ kantin 5’ Bakteri Bakteri udara udara Terdapat Terdapat bermacam bermacam22 bakteri ada bakteri ada hitam,kuning,or hitam,kuning,or ange,putih dan ange,putih dan ada bercak2 ada bercak2 putih,melebar putih,melebar hampir ½ hampir ½ petridish petridish Terkontaminasi Terkontaminasi bakteri bakteri

(24)

(25)

44

44 Kantin 10’Kantin 10’ BakteriBakteri Udara Udara

Terkontamina

Terkontaminasi si -Terdapat -Terdapat jamurjamur putih,hitam putih,hitam -bakteri -bakteri krem,putih,kuning. krem,putih,kuning. 20

20 Jalan 5’Jalan 5’ BakteriBakteri Udara Udara Jamur dan Jamur dan bakteri tumbuh bakteri tumbuh tidak sebanyan tidak sebanyan pd perlakuan pd perlakuan 10’ 10’ -Terdapat koloni yg -Terdapat koloni yg berwarna ora

berwarna orange dannge dan putih bentuk bulat putih bentuk bulat

kecil kecil -jamur berwarna -jamur berwarna krem krem 45

45 Jalan 5’Jalan 5’ BakteriBakteri Udara Udara Jamur dan Jamur dan bakteri tumbuh bakteri tumbuh tidak sebanyak tidak sebanyak pd perlakuan pd perlakuan 10’ 10’ -Terdapat koloni yg -Terdapat koloni yg berwarna ora

berwarna orange dannge dan putih bentuk bulat putih bentuk bulat

kecil kecil

21

21 Jalan 10’Jalan 10’ BakteriBakteri Udara Udara Banyak tumbuh Banyak tumbuh jamur dan jamur dan -terdapat bermacam2 -terdapat bermacam2 bakteri bakteri

(26)

(27)

berwarna berwarna putihputih 47

47 Parkiran 5’Parkiran 5’ BakteriBakteri udara udara -penyebaran tdk -penyebaran tdk merata merata -terdapat -terdapat pertumbuhan pertumbuhan bakteri berwarn bakteri berwarnaa orange,kuning,p orange,kuning,p utih dan jamur utih dan jamur berwarna putih berwarna putih -media yg digunakan -media yg digunakan rata rata -terdapat kontaminan -terdapat kontaminan jamur dan bak

jamur dan bakteriteri

23 Parkiran 23 Parkiran 10’ 10’ Bakteri Bakteri udara udara -Penyebaran tdk -Penyebaran tdk rata rata -ada yg di -ada yg di pinggir dan di pinggir dan di tengah tengah -media yg digunakan -media yg digunakan rata rata -terdapat kontaminan -terdapat kontaminan jamur dan bak

jamur dan bakteriteri 48 Parkiran 48 Parkiran 10’ 10’ Bakteri Bakteri udara udara -Penyebaran tdk -Penyebaran tdk rata rata -ada yg di -ada yg di pinggir dan di pinggir dan di tengah tengah -media yg digunakan -media yg digunakan rata rata -terdapat kontaminan -terdapat kontaminan jamur dan bak

jamur dan bakteriteri 24 Bakteri 24 Bakteri udara udara perpus 5’ perpus 5’ Bakteri Bakteri udara udara -bakteri ada 2 -bakteri ada 2 warna orange warna orange dan kuningada dan kuningada yg sudah tumbu yg sudah tumbu banyak dan a banyak dan adada

yg baru sedikit yg baru sedikit Tdk ada jamur Tdk ada jamur 49 Bakteri 49 Bakteri udara udara Bakteri Bakteri udara udara bakteri ada 2 bakteri ada 2 warna orange warna orange Tdk ada jamur Tdk ada jamur

(28)

(29)

B.

B. PembahasanPembahasan

Laporan praktikum mikrobiologi kali ini yang berjudul teknik isolasi bakteri Laporan praktikum mikrobiologi kali ini yang berjudul teknik isolasi bakteri bertujuan

bertujuan untukuntuk mengetahui teknik isolasi bakteri dan mempelajari morfologi kolonimengetahui teknik isolasi bakteri dan mempelajari morfologi koloni yang tumbuh dalam kultur murni hasil isolasi. Adapun teknik isolasi yang dilakukan yang tumbuh dalam kultur murni hasil isolasi. Adapun teknik isolasi yang dilakukan pada

pada praktikum praktikum kali kali ini ini antara antara lain lain teknik teknik goresan, goresan, teknik teknik taburan, taburan, teknik teknik usap usap dandan pemaparan

pemaparan bakteri bakteri udara. udara. Sebelum Sebelum melakukan melakukan tahap tahap isolasi isolasi bakteri, bakteri, saya saya melakukanmelakukan tahap persiapan. Antara lain penyeterilan alat dan

tahap persiapan. Antara lain penyeterilan alat dan pembuatan Nutrien Agar.pembuatan Nutrien Agar.

Penyeterilan alat, penyeterilan petridish dengan menggunakan oven bersuhu Penyeterilan alat, penyeterilan petridish dengan menggunakan oven bersuhu 180º C selama 120 menit yang sebelumnya petridish dibungkus terlebih dahulu 180º C selama 120 menit yang sebelumnya petridish dibungkus terlebih dahulu dengan kertas payung (coklat). Selanjutnya pembuatan nutrien agar yaitu pembuatan dengan kertas payung (coklat). Selanjutnya pembuatan nutrien agar yaitu pembuatan media untuk penanaman bakteri atau jamur. Adapun langkah yang ditempuh sebagai media untuk penanaman bakteri atau jamur. Adapun langkah yang ditempuh sebagai berikut , yang pertama

berikut , yang pertama saya lakukan saya lakukan yaitu menimbang NA bubuk lalu yaitu menimbang NA bubuk lalu mencampurnyamencampurnya dengan aquades, selanjutnya memanaskan larutan NA sampai medidih lalu dengan aquades, selanjutnya memanaskan larutan NA sampai medidih lalu menuangkannya kedalam tabung reaksi dan ditutup kapas dan yang terakhir menuangkannya kedalam tabung reaksi dan ditutup kapas dan yang terakhir disterilkan dengan autoklaf.

disterilkan dengan autoklaf.

Teknik isolasi bakteri adalah proses mengambil bakteri dari medium atau Teknik isolasi bakteri adalah proses mengambil bakteri dari medium atau lingkungan asalnya dan menumbuhkannya di medium buatan sehingga diperoleh lingkungan asalnya dan menumbuhkannya di medium buatan sehingga diperoleh biakan

biakan yang yang murni. murni. Teknik Teknik isolasi isolasi yang dipraktiyang dipraktikan kan dalam dalam praktikum praktikum kali kali ini ini antaraantara lain teknik goresan, teknik taburan, teknik usap dan pemaparan bakteri udara.

(30)

(31)

luka dan terdapat kontaminan seperti jamur. Sedangkan hasil praktikan yang satu luka dan terdapat kontaminan seperti jamur. Sedangkan hasil praktikan yang satu sel-sel bakterinya menyebar tidak sesuai pola lurus, terdapat kontaminan dan medianya sel bakterinya menyebar tidak sesuai pola lurus, terdapat kontaminan dan medianya juga

juga ada ada yang yang rusak. rusak. Hal Hal ini ini dikarenakan dikarenakan pada pada saat saat pemindahan pemindahan suspensi suspensi bakteribakteri kurang hati-hati sehingga melukai media.

kurang hati-hati sehingga melukai media.

Sedangkan untuk hasil kontrolnya, terdapat kontaminan dan medianya rusak. Hal ini Sedangkan untuk hasil kontrolnya, terdapat kontaminan dan medianya rusak. Hal ini mungkin dikarenakan proses pembuatan media atau penuangan agar kurang aseptis mungkin dikarenakan proses pembuatan media atau penuangan agar kurang aseptis sehingga dapat terkontaminasi dari lingkungan.

sehingga dapat terkontaminasi dari lingkungan.

Selanjutnya teknik goresan zig-zag dengan suspensi bakteri

Selanjutnya teknik goresan zig-zag dengan suspensi bakteri E.coli E.coli terdapat terdapat kontaminasi medianya pun ada yang rusak dan tidak rata. Untuk teknik goresan kontaminasi medianya pun ada yang rusak dan tidak rata. Untuk teknik goresan zig-zag dengan suspensi bakteri

zag dengan suspensi bakteri B.subtilis B.subtilis juga sama terdapat kontaminan dan medianya juga sama terdapat kontaminan dan medianya ada yang rusak dan tidak rata.

ada yang rusak dan tidak rata. Dan untuk kontrolnya semua terkontaminasi oleh jamurDan untuk kontrolnya semua terkontaminasi oleh jamur berwarna krem.

berwarna krem.

Teknik tabur bertujuan untuk mengamati morfologi bakteri. Masih Teknik tabur bertujuan untuk mengamati morfologi bakteri. Masih menggunakan suspensi bakteri

menggunakan suspensi bakteri E.coli E.coli dan dan B.subtilis B.subtilis. Dalam pratikum ini terdapat 2. Dalam pratikum ini terdapat 2 macam teknik taburan. Teknik tabur 1 yaitu dengan cara memasukkan suspensi macam teknik taburan. Teknik tabur 1 yaitu dengan cara memasukkan suspensi bakteri

bakteri kke kke dalam dalam medi medi agar, agar, selanjutnya selanjutnya media media dituang dituang ke ke petridish. petridish. HasilnyaHasilnya keseluruhan dengan suspensi

keseluruhan dengan suspensi E.coli E.coli dada B.subtilis B.subtilis pertumbhannya merata dan media pertumbhannya merata dan media masih rata. Dan bagian dengan suspensi

masih rata. Dan bagian dengan suspensi E.coli E.coli terdapat kontaminan. Untuk kontrol terdapat kontaminan. Untuk kontrol tabuan 1 hasilnya tidak ada pertumbuhan dan media rata.

(32)

(33)

rendaman sampel di atas permukaan media secara aseptis. Dan setelah itu saya rendaman sampel di atas permukaan media secara aseptis. Dan setelah itu saya mebalik dan membungkusnya kembali untuk disimpan dalam suhu ruang selama 4 mebalik dan membungkusnya kembali untuk disimpan dalam suhu ruang selama 4 hari. Tujuan dari membalikkan petridish sebelum akhirnya dibungkus adalah untuk hari. Tujuan dari membalikkan petridish sebelum akhirnya dibungkus adalah untuk mencegah terjadinya tetesan air pada permukaan agar dari hasil kondensasi uap air. mencegah terjadinya tetesan air pada permukaan agar dari hasil kondensasi uap air. Hasil yang saya peroleh tidak terjadi pertumbuhan apapun pada sampel rambut tidak Hasil yang saya peroleh tidak terjadi pertumbuhan apapun pada sampel rambut tidak keramas, sedangkan pada smpel rambut

keramas, sedangkan pada smpel rambut keramas justru ditemukan jamuuuur berwarnakeramas justru ditemukan jamuuuur berwarna hijau dan bakteri berwarna putih. Hal ini mungki disebabkan pada saat pemindahan hijau dan bakteri berwarna putih. Hal ini mungki disebabkan pada saat pemindahan sampel kurang aseptis, sehingga media terkontaminasi. Untuk sampel dengan kuku sampel kurang aseptis, sehingga media terkontaminasi. Untuk sampel dengan kuku hasilnya tumbuh beberapa bakteri ada yang merah dan putih.

hasilnya tumbuh beberapa bakteri ada yang merah dan putih.

Bakteri udara, teknik ini dilakukan dengan cara memaparkan media pada Bakteri udara, teknik ini dilakukan dengan cara memaparkan media pada tempat tertentu dengan waktu tertentu. Pada praktikum kali ini digunakan lima tempat tertentu dengan waktu tertentu. Pada praktikum kali ini digunakan lima tempat, kelas, kantin, jalan, parkian dan perpustakaan. Dengan waktu masing-masing tempat, kelas, kantin, jalan, parkian dan perpustakaan. Dengan waktu masing-masing 5 dan 10 menit. Dari keseluruhan yang terdapat bakteri paling banyak adalah di jalan 5 dan 10 menit. Dari keseluruhan yang terdapat bakteri paling banyak adalah di jalan

(34)

DAFTAR PUSTAKA DAFTAR PUSTAKA

Ismail, Elza dkk.2005.

Ismail, Elza dkk.2005. Paduan Praktikum Mikrobiologi Pan Paduan Praktikum Mikrobiologi Pangangan.Yogyakarta:.Yogyakarta: Departemen Kesehataan RI Politeknik Kesehatan Yogyakarta Jurusan Gizi

Departemen Kesehataan RI Politeknik Kesehatan Yogyakarta Jurusan Gizi

http://diago46owner.blog

http://diago46owner.blogspot.com/2011/11spot.com/2011/11/isolasi-bakteri.htm/isolasi-bakteri.htmll diunduh tanggal 16 Oktoberdiunduh tanggal 16 Oktober 2012

2012

http://monruw.wordpre

http://monruw.wordpress.comss.com/2011/06/18/isolasi-bakteri//2011/06/18/isolasi-bakteri/diunduh tanggal 16 Oktober 2012diunduh tanggal 16 Oktober 2012

http://ekmon-sa

http://ekmon-saurus.blogspot.com/2008urus.blogspot.com/2008/11/bab-4-isolasi-m/11/bab-4-isolasi-mikroorganismeikroorganisme.html.html diunduhdiunduh tanggal 16 Oktober 2012