55
Lampiran 3. Gambar Daun Segar dan Simplisia Daun Nipah
Tumbuhan Nipah
56 Lampiran 3. (Lanjutan)
Simplisia Daun nipah
57 Lampiran 4. Gambar Alat Yang Digunakan
Alat cek Gluco Dr®
58 lampiran 4. (Lanjutan)
Oral Sonde
59 Lampiran 5. Hasil Mikroskopik
Penampang melintang Daun Nipah (Pembesaran 40x10)
Keterangan:
1. epidermis atas 2. palisade 3. parenkim
4. kalsium kristal oksalat 5. tetes minyak
6. stomata
7. berkas pembuluh
1
2
3
4
5 6
60 Lampiran 5. (Lanjutan)
Serbuk Simplisia Daun Nipah (Pembesaran 40x10)
Keterangan:
1. stomata (tipe parasitik) 2. berkas pembuluh
1
61 Lampiran 6. Hewan Percobaan
62 Lampiran 7. Skema Penelitian
Daun nipah muda dan segar
Skrining fitokimia
Maserat II
ampas Maserat I
200 g serbuk simplisia karakterisasi Serbuk simplisia
simplisia
Dibuang lidi daun
Dicuci dari pengotor sampai bersih Ditiriskan
Ditimbang berat basahnya
Dirajang dan dikeringkan pada suhu ±40-500C dalam lemari pengering Ditimbang berat keringnya
Dihaluskan dengan blender Disimpan dalam wadah yang tertutup rapat sebelum digunakan
Dimasukkan kedalam wadah (toples kaca) Ditambahkan pelarut etanol 70%
sebanyak 75 bagian
Direndam selama 5 hari, sambil sering diaduk
Disaring dengan kertas saring 2 lapis
Ditambahkan 25 bagian pelarut etanol 70% Direndam selama 2 hari
63 Lampiran 7. (Lanjutan)
Kadar Glukosa Darah (mg/dL)
Uji penurunan KGD pada hewan uji dengan metode induksi aloksan
Dicampurkan maserat II dan maserat I Dipekatkan dengan rotary evaporator
64
Lampiran 8. Perhitungan Penetapan Kadar Air Serbuk Simplisia % kadar air =��������� (��)
����������� (�)� 100%
Sampel Berat sampel (g) Volume air (ml)
1 5,00 0,4
2 5,10 0,4
3 5,06 0,4
Sampel 1 = 0,4
5,00 � 100% = 8,00%
Sampel 2 =0,4
5,10 � 100% = 7,84%
Sampel 3 =0,4
5,06 � 100% = 7,90%
% Rata-rata kadar air =8,00+7,84+7,90
65
Lampiran 9. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut Air Serbuk Simplisia % kadar sari larut dalam air = ����� ����(�)
����� ���������(�) � 100
20 � 100%
Sampel Berat simplisia (g) Berat sari (g)
1 5,005 0,167
% Rata-rata kadar sari larut air =16,68+16,48+16,29
66
Lampiran 10. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut Etanol Serbuk Simplisia % kadar sari larut dalam etanol = ����� ����(�)
����� ���������(�) � 100
20 � 100%
Sampel Berat simplisia (g) Berat sari (g)
1 5,004 0,158
% Kadar sari larut etanol sampel 2 = 0,087
5,007� 100
20 �100% = 8,68%
% Kadar sari larut etanol sampel 3 = 0,154
5,006� 100
20 �100% = 15,38%
% Rata-rata kadar sari larut etanol =15,78+8,68+15,38
67
Lampiran 11. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total Serbuk Simplisia % kadar abu total = ����� ���(�)
����� ���������(�) � 100%
Sampel Berat simplisia (g) Berat abu (g)
1 2,003 0,105
2 2,006 0,117
3 2,004 0,125
% Kadar abu total sampel 1 =0,105
2,003�100% = 5,24%
% Kadar abu total sampel 2 =0,117
2,006�100% = 5,83%
% Kadar abu total sampel 3 =0,125
2,004�100% = 6,23%
% Rata- rata abu total = 5,24+5,83+6,23
68
Lampiran 12. Perhitungan penetapan kadar abu tidak larut asam serbuk Simplisia % kadar abu tidak larut asam = ����� ���(�)
����� ���������(�) � 100%
Sampel Berat simplisia (g) Berat abu (g)
1 2,003 0,0621
2 2,006 0,0591
3 2,004 0,0490
% Kadar abu tidak larut asam sampel 1 =0,0621
2,003 �100% = 3,10%
% Kadar abu tidak larut asam sampel 2 =0,0591
2,006 �100% = 2,94%
% Kadar abu tidak larut asam sampel 3 =0,0490
2,004 �100% = 2,44%
% Rata-rata kadar abu tidak larut asam =3,10+2,94+2,44
69 Lampiran 13. Contoh Perhitungan Dosis
Tabel konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia Mencit * (Syamsudin dan Darmono, 2011)
Contoh perhitungan dosis metformin yang akan diberikan pada mencit secara per oral (p.o)
- Tiap tablet metformin mengandung 500 mg metformin-HCl - Dosis maksimum untuk manusia dewasa = 500 mg – 3000 mg
- Volume maksimum untuk hewan percobaan mencit secara peroral (p.o) adalah 1 ml (ada di lampiran 14).
- Konversi dosis manusia (70 kg) ke dosis untuk hewan uji mencit dikali 0,0026.
- Dosis metformin untuk mencit (20 g) = (500 mg – 3000 mg) x 0,0026 - = 1,3 mg - 7,8 mg
70
- Dosis metformin yang diberikan (mg/kg bb) = 1,3 mg/20 g = 65 mg/kg bb (dikalikan 50 agar mencapai 1 kg), atau
- 1,3 ��
- Maka dosis metformin adalah 65 mg/kg bb. Menurut FI edisi III, penetapan kadar tablet = 20 tablet
- Maka diambil 20 tablet metformin, digerus dan ditimbang berat totalnya =10.810 mg
- Berat bahan aktif metformin-HCl dalam 20 tablet metformin adalah = 500 mg x 20 tab = 10.000 mg.
- Maka, serbuk metformin yang ditimbang untuk digunakan: = 65 ��
10.000 ��
=
� 10.810 ��X = 70,26 mg = 70 mg (mengandung zat aktif metformin setara 65 mg). Cara pembuatan suspensi metformin:
- timbang sebanyak 70 mg serbuk metformin dilarutkan dalam 10 ml larutan suspensi CMC 0,5%.
- Berapa volume suspensi metformin yang akan diberikan pada mencit ? - Mis : BB mencit = 20 g
Jumlah metformin dosis 65 mg/kg bb =65 ��
1000 � � 20 �= 1,3 ��
Volume larutan yang diberikan =1,3 ��
71 Atau dengan cara:
- Tiap tablet metformin mengandung 500 mg metformin dilarutkan dalam 100 ml larutan suspensi CMC 0,5%.
- Maka kadar suspensi metformin = 500 mg/100 ml = 5 mg/ml = 0,5 % Contoh perhitungan dosis metformin 65 mg/kg bb untuk mencit 20 g.
- 65 mg/kg bb = 65 mg/1000 g x 20 g = 1,3 mg
72 Lampiran 13. (Lanjutan)
Contoh perhitungan dosis Ekstrak Etanol Daun Nipah (EEDN) yang akan diberikan pada mencit
- Dosis suspensi EEDN yang akan dibuat adalah 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb dan 300 mg/kg bb.
- Cara pembuatan suspensi EEDN:
Timbang 100 mg, 200 mg dan 300 mg EEDN, masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspensi CMC 0,5%.
- Berapa volume suspensi EEDN yang akan diberikan pada mencit ? - Mis : BB mencit = 20 g
Jumlah EEDN dosis 100 mg/kg bb = 100 ��
1000 � � 20 �= 2 ��
Volume larutan yang diberikan = 2 ��
100 �� � 10 ��= 0,2 ��
- Jumlah EEDN dosis 200 mg/kg bb = 200 ��
1000 � � 20 �= 4 ��
Volume larutan yang diberikan = 4 ��
200 �� � 10 ��= 0,2 ��
- Jumlah EEDN dosis 300 mg/kg bb = 300 ��
1000 � � 20 �= 6 ��
Volume larutan yang diberikan = 6 ��
73 Lampiran 13. (lanjutan)
Contoh perhitungan dosis Aloksan
Dosis pemberian secara i.v (intravena): 65 mg/kg bb
Dosis pemberian secara i.p (intraperitoneal): 2-3 kali dosis i.v
Dalam penelitian ini dosis yang digunakan adalah 175 mg/kg bb secara i.p
Konsentrasi aloksan yang dibuat adalah 1 % (1 g dalam 100 ml infus NaCl 0,9%) = 10 mg/ml
Contoh perhitungan dosis untuk mencit berat 20 g dengan dosis 175 mg/kg bb = 175 ��
1000 � � 20 �= 3,5 ��
Volume aloksan yang diberikan = 3,5 ��
74
Lampiran 14. Volume Maksimum Larutan Sediaan Uji Sesuai Jalur Pemberian
Jenis hewan uji
Volume maksimal (ml)
sesuai jalur pemberian
i.v i.m i.p s.c p.o
75 Lampiran 15. Tabel Hasil Pengukuran KGD
76 Lampiran 16. Tabel Persen Penurunan KGD
Kelompok Perulangan Hari ke-
77 Lampiran 16. (Lanjutan)
78
EEDN 300 mg/kg bb Hari ke 3 = 305−393,8
305 � 100 = −29,11%
Hari ke 6 = 305−299
305 � 100 = 1,96%
Hari ke 9 = 305−228
305 � 100 = 25,24%
Hari ke 12 = 305−204
305 � 100 = 33,11%
Hari ke 15 = 305−167,6
305 � 100 = 45,05%
Metformin dosis 65 mg/kg bb Hari ke 3 = 395,8−339,8
395,8 � 100 = 14,14%
Hari ke 6 = 395,8−252,6
395,8 � 100 = 36,17%
Hari ke 9 = 395,8−207,8
395,8 � 100 = 47,50%
Hari ke 12 = 395,8−154,4
395,8 � 100 = 60,99%
Hari ke 15 = 395,8−109,6
79
Lampiran 17. Hasil Analisis Data Secara Statistik Menggunakan SPSS Tests of Normality
perlakuan Kolmogorov-Smirnova
Shapiro-Wilk metformin dosis 65
mg/kg bb metformin dosis 65
mg/kg bb metformin dosis 65
mg/kg bb metformin dosis 65
mg/kg bb metformin dosis 65
mg/kg bb
,260 5 ,200* ,893 5 ,370
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variances
80 Lampiran 17. (Lanjutan)
ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
hari_ke3 Between Groups 7356,969 4 1839,242 5,402 ,004
Within Groups 6809,638 20 340,482
Total 14166,607 24
hari_ke6 Between Groups 18488,876 4 4622,219 5,443 ,004
Within Groups 16983,145 20 849,157 Total 35472,021 24
hari_ke9 Between Groups 20818,304 4 5204,576 3,655 ,022
Within Groups 28475,667 20 1423,783 Total 49293,971 24
hari_ke12 Between Groups 8865,859 4 2216,465 9,397 ,000 Within Groups 4717,525 20 235,876
Total 13583,383 24
hari_ke15 Between Groups 8665,096 4 2166,274 9,696 ,000
Within Groups 4468,199 20 223,410
Total 13133,295 24
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
81 Lampiran 17. (Lanjutan)
hari_ke6
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
hari_ke9
82 Lampiran 17. (lanjutan)
hari_ke12
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
hari_ke15
83 Lampiran 17. (Lanjutan)
N Mean Std. Deviation Std. Error
metformin dosis 65 mg/kg bb 5 58,8200 11,71820 5,24054
84 Lampiran 17. (Lanjutan)
N Mean Std. Deviation Std. Error
EEDN100 5 3.4800E2 115.85336 51.81120
EEDN200 5 3.8120E2 132.91238 59.44022
EEDN300 5 3.0500E2 65.24569 29.17876
MTF65 5 3.9580E2 123.05568 55.03217
Total 25 3.4080E2 104.79583 20.95917
Test of Homogeneity of Variances
Levene Statistic df1 df2 Sig.
Within Groups 5706.000 20 285.300
Total 6761.360 24
KGDalloxan Between Groups 52264.400 4 13066.100 1.237 .327
Within Groups 211307.600 20 10565.380
