PENETAPAN KADAR NIPAGIN PADA KECAP MI INSTAN
SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
SKRIPSI
OLEH:
ELFRIDAWATI SIALLAGAN
NIM 071501049
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN
PENETAPAN KADAR NIPAGIN PADA KECAP MI INSTAN
SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
SKRIPSI
Diajukan untuk Melengkapi Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
ELFRIDAWATI SIALLAGAN
NIM 071501049
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
PENETAPAN KADAR NIPAGIN PADA KECAP MI INSTAN
SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
OLEH:
ELFRIDAWATI SIALLAGAN NIM 071501049
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Pada tanggal: Juni 2011
Pembimbing I, Panitia Penguji,
Drs. Syafruddin, MS., Apt. Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. NIP 194811111976031003 NIP 195201041980031002
Pembimbing II, Drs. Immanuel S. Meliala, M.Si., Apt.
NIP 195001261983031002
Prof. Dr. Jansen Silalahi, M.App.Sc., Apt.
NIP 195006071979031001 Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt. NIP 195406281983031002
Drs. Syafruddin, MS., Apt.
NIP 194811111976031003
Dekan,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kepada Allah yang telah melimpahkan berkat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Penetapan Kadar Nipagin Pada Kecap Mi Instan secara Spektrofotometri Sinar Tampak”. Tujuan penelitian ini adalah untuk menetapkan kadar nipagin pada kecap mi instan secara spektrofotometri sinar tampak mengunakan pereaksi deniges. Skripsi ini diajukan
sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang tiada terhingga kepada Papa St. J. Siallagan, Mama R. Butarbutar, Kakak Aferlita Siallagan, S. Kep., Adik Tuppal Siallagan, Adik Afriani Siallagan, serta semua keluarga yang tidak dapat disebutkan satu per satu, yang telah banyak memberikan doa dan dorongan serta bantuan moril dan materil kepada penulis selama menempuh pendidikan S-1 Farmasi.
Penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Drs. Syafruddin, MS., Apt. dan kepada Bapak Prof. Dr. Jansen Silalahi, M. App. Sc., Apt. selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan dan bantuan yang sangat berarti mulai dari penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini.
Pada kesempatan ini penulis juga menyampaikan ucapan terima kasih kepada:
1. Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi, Universitas Sumatera Utara.
2. Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., selaku Dosen Penasehat Akademik yang telah memperhatikan dan membimbing penulis selama masa perkuliahan.
3. Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., Bapak Drs. Immanuel S. Meliala, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan dan saran kepada penulis hingga selesainya penulisan skripsi ini.
4. Seluruh Staf Pengajar dan Pegawai Tata Usaha di Fakultas Farmasi, serta seluruh Asisten di Laboratorium yang telah banyak membimbing penulis selama perkuliahan dan membantu penulis dalam menyelesaikan penelitian ini.
5. Kelompok KTB “Desciple” (Danny Philipe, Bane Doli, Jonni Aristo, Betty, Fraptin, Septien, Gustina, Firman Apul, Nova, dan Robecka).
6. Kelompok kecilku “Ofel Okuli” (Santa, Ira, Eviyani, Aprilla, Michael, Claudian, Samuel, dan Desi).
7. Sahabat-sahabatku “Rejoicing in Love” ( Santa, Ira, Debi, Alex, Eva,
Novalina, Via, Triwati, Martianus, Vintha, Juwita, Sari, Jimmy, Sandro, Melati, Cory, Rachmad, Ernal, Hendry, Febri, Wandi, Fanny, Silvana, Melisa, dan Sylvia).
8. Teman-teman Farmasi 2007 khususnya konsentrasi Sains dan Teknologi Farmasi serta semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu. Tidak ada gading yang tak retak. Penulis menyadari bahwa tulisan ini masih memiliki banyak kekurangan, oleh karena itu dengan segala kerendahan
hati penulis bersedia menerima kritik dan saran yang membangun pada skripsi ini. Semoga skripsi ini bermanfaat bagi kita semua.
Medan, Juni 2011
Penulis,
Elfridawati Siallagan
PENETAPAN KADAR NIPAGIN PADA KECAP MIE INSTAN SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
Abstrak
Nipagin adalah bahan pengawet yang diizinkan penggunaannya dalam makanan, tetapi kadarnya tidak boleh melebihi batas maksimum yang ditetapkan oleh Permenkes. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan kadar nipagin yang terdapat dalam kecap mie instan dengan metode spektrofotometri sinar tampak menggunakan pereaksi deniges dan natrium nitrit 2% b/v.
Sampel yang diperiksa dalam penelitian ini adalah kecap yang terdapat dalam mie instan merk A, B, dan C yang diambil dari supermarket. Sampel diekstraksi menggunakan dietil eter dalam suasana asam (pH 1). Hasil ekstraksi dipanaskan dengan pereaksi deniges lalu ditambahkan larutan natrium nitrit 2% b/v dan didiamkan selama 42 menit.warna pink yang terbentuk diukur absorbansinya pada panjang gelombang 504 nm.
Kurva kalibrasi dibuat dalam konsentrasi 0, 15, 20, 22, 25, dan 30 mcg/ml dan diperoleh persamaan regresi Y = 0,0195X – 0,0017. Dari persamaan regresi diperoleh adanya hubungan yang linier antara konsentrasi dan absorbansi dengan koefisien korelasi (r2) = 0,9995. Kadar nipagin dalam kecap mie instan masing-masing yaitu 146,5 ± 10,6 mg/kg, 183,4 ± 2,4 mg/kg, dan 191,5 ± 4,5 mg/kg. Validasi metode menunjukkan akurasi yang memuaskan dengan persen perolehan kembali 87,62%. Dari hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa tidak satupun dari sampel yang diuji mengandung nipagin yang melebihi batas maksimum yang ditetapkan oleh Permenkes RI No. 722/Menkes/Per/IX/88 tentang bahan tambahan makanan yaitu 250 mg/kg.
Kata kunci: pengawet, kecap, nipagin, spektrofotometri sinar tampak, pereaksi deniges
ANALYSIS OF NIPAGIN IN SOY SAUCE INSTANT NOODLES WITH VISIBLE SPECTROPHOTOMETRY
Abstract
Nipagin is allowed to use as preservatives in foods, but the levels should not exceed the maximum limit set by Permenkes. The purpose of this research was to determinate the level of nipagin contained in soy sauce instant noodles with visible spectrophotometric method using deniges’ reagent and sodium nitrite 2% w/v.
Samples examined in this research were soy sauce of instant noodles A, B, and C were taken from the supermarket. The sample was extracted using diethyl ether in acidic condition (pH 1). The extract was heated with deniges’ reagent followed by addition of sodium nitrite solution 2% w/v and allowed to stand for 42 minutes. The absorbance of the pink colour produced was measured at 504 nm.
Calibration curve made by concentrations of 0, 15, 20, 22, 25, and 30 mcg/ml and obtained regression equation Y = 0,0195 X – 0,0017. From the regression equation showed a linear correlation between concentration and absorbance with correlation coefficient (r2) = 0,9995. The levels of nipagin in soy sauce instant noodles were 146,5 ± 10,6 mg/kg, 183,4 ± 2,4 mg/kg, and 191,5 ± 4,5 mg/kg, respectively. The Validation methods showed a satisfactory accuracy with the percent recovery of 87,62%. From the results obtained showed that none of the samples tested contained nipagin that exceeded the maximum limit set by Permenkes RI No. 722/Menkes/Per/IX/88 about food additives that is 250 mg/kg. Key words: preservatives, soy sauce, nipagin, visible spectrophotometry,
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vii
ABSTRACT ... viii
DAFTAR ISI ... ix
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN ... 1 1.1 Latar Belakang ... 1 1.2 Perumusan Masalah ... 3 1.3 Hipotesis ... 3 1.4 Tujuan Penelitian ... 3 1.5 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Mi Instan ... 5
2.2 Kecap ... 6
2.3 Bahan Pengawet ... 6
2.3.1 Jenis-jenis Bahan Pengawet ... 7
2.4 Nipagin ... 8
2.5 Teknik Pemisahan dalam Analisis ... 10
2.5.1 Ekstraksi Cair-cair ... 10
2.6 Spektrofotometri UV-Visibel ... 11
2.7 Parameter Validasi ... 13
2.8 Analisis Nipagin dalam Kecap ... 15
BAB III METODE PENELITIAN ... 17
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ... 17
3.2 Bahan-bahan ... 17
3.2.1 Sampel ... 17
3.2.2 Pereaksi ... 17
3.3 Alat-alat ... 17
3.4 Pembuatan Pereaksi ... 18
3.4.1 Larutan NaCl jenuh ... 18
3.4.2 Larutan H2SO4 10% v/v ... 18
3.4.3 Pereaksi Deniges ... 18
3.4.4 Larutan Natrium Nitrit 2% b/v ... 18
3.5 Prosedur Penelitian ... 18 3.5.1 Pengambilan Sampel ... 18 3.5.2 Penyiapan Bahan ... 19 3.5.3 Proses Ekstraksi ... 19 3.5.4 Analisis Kualitatif ... 19 3.5.5 Analisis Kuantitatif ... 20 3.5.5.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Nipagin . 20
3.5.5.2 Penentuan Waktu Kerja ... 20
3.5.5.3 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ... 20
3.5.5.4 Penentuan Kurva Kalibrasi Larutan Standar Nipagin ... 21
3.5.5.5 Penetapan Kadar Nipagin dalam Sampel . 21 3.5.6 Analisis Data Secara Statistik ... 22
3.5.7 Uji Perolehan Kembali ... 22
3.5.8 Simpangan Baku Relatif ... 23
3.5.9 Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ... 23
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 25
4.1 Analisis Kualitatif ... 25
4.2 Analisis Kuantitatif ... 27
4.2.1 Penentuan Waktu Kerja ... 27
4.2.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ... 27
4.2.3 Kurva Kalibrasi Nipagin ... 27
4.2.4 Analisis Kadar Nipagin pada Kecap Mi Instan ... 28
4.2.5 Uji Perolehan Kembali ... 29
4.2.6 Simpangan Baku Relatif ... 30
4.2.7 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ... 31
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 32
5.1 Kesimpulan ... 32
5.2 Saran ... 32
DAFTAR PUSTAKA ... 33
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 1 Hasil Analisis Kualitatif Nipagin dengan Pereaksi Deniges
dan Natrium Nitrit 2% b/v ... 25 Tabel 2 Kadar Pengawet Nipagin pada Kecap Mie Instan ... 29 Tabel 3 Persen Uji Perolehan Kembali (recovery) Nipagin dalam
Sampel ... 30
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar 1 Spektrum dari Nipagin BPFI Konsentrasi 22 µg/ml dan
Nipagin dalam Larutan Sampel ... 26 Gambar 2 Kurva Kalibrasi Larutan Standar Nipagin dengan Pereaksi
Deniges pada Panjang Gelombang 504 nm ... 28 Gambar 3 Hasil Analisis kualitatif Sampel dan Larutan Standar ... 36 Gambar 4 Grafik Penentuan Waktu Kerja Nipagin dengan Pereaksi
Deniges pada λ = 504 nm ... 39 Gambar 5 Alat Spektrofotometer UV-Visibel ... 63
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman Lampiran 1. Hasil Analisis Kualitatif dengan Pereaksi Deniges dan
Natrium Nitrit 2% b/v ... 36
Lampiran 2. Data Hasil Penentuan Waktu Kerja Nipagin pada λ = 504 nm ... 37
Lampiran 3. Grafik Penentuan Waktu Kerja Nipagin dengan Pereaksi Deniges pada λ = 504 nm ... 39
Lampiran 4. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Nipagin ... 40
Lampiran 5. Perhitungan Persamaan Garis Regresi Larutan Standar Nipagin ... 41
Lampiran 6. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Nipagin pada Sampel ... 42
Lampiran 7. Hasil Analisis Kadar Nipagin dalam Sampel ... 43
Lampiran 8. Contoh Perhitungan Kadar Nipagin dalam Sampel Mie Instan Merk A ... 44
Lampiran 9. Perhitungan Statistik Kadar Nipagin dalam Sampel ... 45
Lampiran 10. Perhitungan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Nipagin 54 Lampiran 11. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Perolehan Kembali Nipagin ... 56
Lampiran 12. Hasil Uji Perolehan Kembali Nipagin Setelah Penambahan Larutan Standar ... 57
Lampiran 13. Persen Perolehan Kembali Nipagin dalam Sampel ... 58
Lampiran 14. Contoh Perhitungan Persen Perolehan Kembali Nipagin dalam Sampel ... 59
Lampiran 15. Perhitungan Statistik Uji Perolehan Kembali ... 60
Lampiran 16. Alat Spektrofotometer UV-Visibel ... 63
Lampiran 17. Tabel Distribusi t ... 64
