٢٩
ﻢﻛ تﻮﺻاﺮﻓ ﺲﻜﻳﺪﻧا و ﺮﻴﺜﻜﺗ ،ناﻮﺗ
لﻮﻠﺳ ﺪﺷر يﺎﻫ يﺎﻫ
ﻦﻴﻐﻟﺎﺑ يدﺎﻴﻨﺑ
ﻲﻫاﺮﻤﻫ شﻮﻳراد
1
ﻲﺑارﻮﮔ ﺪﻴﻤﺣ
2
ﺎﺿرﺪﻤﺤﻣ نﺎﺒﻏﺎﺑ
ﻲﻣﻼﺳا
3داﮋﻧ
ﺮﻗﺎﺑﺪﻤﺤﻣ ناﺮﻴﺷ
4
ﻼﻴﻟ
5ﻲﺣور
ﺪﺷرا ﻲﺳﺎﻨﺷرﺎﻛ1
ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻚﻳﺰﻴﻓ ، نﺎﻳور هﺎﮕﺸﻫوﮋﭘ
هﺎﮕﺸﻫوﮋﭘ2
ور نﺎﻳ ، هوﺮﮔ ﻚﻴﺘﻧژ
ﺮﺘﻛد3
ا ي ﺢﻳﺮﺸﺗ مﻮﻠﻋ
، هﺎﮕﺸﻫوﮋﭘ نﺎﻳور
، هوﺮﮔ لﻮﻠﺳ يﺎﻫ
ﻦﻳدﺎﻴﻨﺑ ﻦﻴﻐﻟﺎﺑ
ﺮﺘﻛد4
ا ي ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻚﻳﺰﻴﻓ
، هوﺮﮔ ﻚﻳﺰﻴﻓ ﻲﻜﺷﺰﭘ هﺎﮕﺸﻧاد
مﻮﻠﻋ ناﺮﻬﺗ ﻲﻜﺷﺰﭘ
ﺮﺘﻛد5
يا ﺖﺴﻳز ﻲﺳﺎﻨﺷ
،يرﻮﻧﺎﺟ ﻦﻳﻮﻜﺗ ،ﻲﻣﻼﺳا دازآ هﺎﮕﺸﻧاد
دﺮﻛﺮﻬﺷ ﺪﺣاو
ﻪﻣﺪﻘﻣ
رﻮﺘﻛﺎﻓ زا ﻲﻜﻳ ﻲﻜﻴﻧﺎﻜﻣ تﺎﻧﺎﺳﻮﻧ و ﺪـﺷر ،ﺮﻴﺜﻜﺗ دﺮﺒﺸﻴﭘ رد ﻲﺳﺎﺳا يﺎﻫ
لﻮﻠﺳ ﺰﻳﺎﻤﺗ ﻪﺑ ﺖﻓﺎﺑ و ﻲﻟﻮﻠﺳ ﺪﻧﻮﻴﭘ رد ﺎﻫ
ﻲﻣ رﺎﻤﺷ ﺪـﻨﻳآ ] 1 [ . شور يﺎـﻫ
ﻪـﺘﻓﺮﮔ راﺮـﻗ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ فﺪﻫ ﻦﻳا ﻪﺑ ﻞﻴﻧ ياﺮﺑ ﻲﻔﻠﺘﺨﻣ
زا ﻪـﻛ ﺪـﻧا نآ
ﻲﻣ ﻪﻠﻤﺟ ﻣ رﺎـﺑ لﺎﻤﻋا ﻪﺑ ناﻮﺗ
هﺪـﻨﻧازﺮﻟ زا هدﺎﻔﺘـﺳا ،ﻲﻜﻴﻧﺎـﻜ و ﺎـﻫ
جﻮـﻣ
تﻮﺻاﺮﻓ ﻢﻛ ناﻮﺗ دﻮﻤﻧ هرﺎﺷا ]
1 و 2 [ . ﻢﻛ تﻮﺻاﺮﻓ جاﻮﻣا ﻣ رد ناﻮﺗ
ﻲﺳﺪﻨﻬ
ﻪﺑ ﺖﻓﺎﺑ
ﻲـﻣ ءﺎـﻔﻳا ار ﻲﻤﻬﻣ ﺶﻘﻧ يدﺮﺑرﺎﻛ ﺮﺛﺆﻣ ﻞﻣﺎﻋ ﻚﻳ ناﻮﻨﻋ ﻨﻛ
ـﻨ ﺪ .
نژ نﺎـﻴﺑ ﺶﻳاﺰـﻓا ﻲﻳﺎـﻧاﻮﺗ جاﻮـﻣا ﻦﻳا ،ﺮـﻴﺜﻜﺗ ﻪـﺑ ﻪﺘـﺴﺑاو صﺎـﺧ يﺎـﻫ
ناﻮﺗ لﻮﻠﺳ يﺰﻳﺎﻤﺗ و ﻲﺘﺴﻳز ﻲﻣ اراد ار ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ
ﺪﻨﺷﺎﺑ ] 1
، 3 و 4 [ . رد
راوﺮﻜﻴﻣ ﺮﮕﻳد ﺎﺑ درﻮﺧﺮﺑ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔ
رد ار دﻮـﺧ ﺖﻴﻠﺑﺎﻗ تﻮﺻاﺮﻓ جاﻮﻣا ﺰﻴﻧ ﺎﻫ
هداد نﺎـﺸﻧ ﺪﺷر و ﺮﻴﺜﻜﺗ ﺶﻳاﺰﻓا ﺪـﻧا
] 5 [ .
ﻪـﺑ تﻮـﺻاﺮﻓ جاﻮـﻣا زا ناﻮـﻨﻋ
ﻲـﻣ هدﺎﻔﺘـﺳا ﺰـﻴﻧ ﻲﻜﺷﺰﭘ فرﺎﺼﻣ رد ﻲﻤﺟﺎﻬﺗﺮﻴﻏ ﻲﻜﻳﺰﻴﻓ ﺖﻴﻤﻛ دﻮـﺷ
] 6 [ . هﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ ﺖﺳا
ﻢﻴﻣﺮـﺗ ﻲﻳﺎـﻧاﻮﺗ ناﻮـﺗ ﻢﻛ تﻮﺻاﺮﻓ جاﻮﻣا ﻪﻛ
ﻲﮕﺘﺴﻜﺷ ﺑ ار ﻲﻧاﻮﺨﺘﺳا يﺎﻫ ﻪ
ﻲﻨﻌﻣ ترﻮﺻ ﻲﻣ ﺶﻳاﺰﻓا يراد
ﻫد ـﻨ ﺪ ] 7 [ .
ﻌﻟﺎﻄﻣ زا ﻪﻛ ﻪﭽﻧآ ﺔ
هدر ﺎـﺑ تﻮـﺻاﺮﻓ ﺶﻨﻜﻤﻫﺮـﺑ ﻒـﻠﺘﺨﻣ ﻲﻟﻮﻠـﺳ يﺎـﻫ
ﻲﻣﺮﺑ ﻦﻳا ﺪﻳآ ﻪﻛ ﺖﺳا جاﻮﻣا
، نژ نﺎﻴﺑ ﺶﻳاﺰﻓا ﻲﻳﺎﻧاﻮﺗ ﺮـﻴﻈﻧ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ
نﺎﻜﻴﻠﮔﻮﺌﺗوﺮﭘ TGF ،ﺎﻫ
و نژﻼـﻛ ﻒـﻠﺘﺨﻣ عاﻮﻧا ،ﺎﻫ ...
ﻲـﻣ اراد ار ﺪﻨـﺷﺎﺑ
] 12 - 8 [ . هﺪﺷ مﺎﺠﻧا تﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﻂﺳﻮﺗ ﻪﻨﻴﻣز ﻦﻳا رد
Chapman نﺎـﺸﻧ
ﻪـﺑ ار ﻢﻴﺳﺎﺘﭘ نﻮﻳ جوﺮﺧ و دورو ﺶﻳاﺰﻓا ﻲﻳﺎﻧاﻮﺗ تﻮﺻاﺮﻓ ﻪﻛ ﺖﺳا هداد ﻲﻣ اراد لﻮﻠﺳ نورد ﺪﺷﺎﺑ
] 13 [ Ryaby . داد نﺎﺸﻧ نارﺎﻜﻤﻫ و ها
ﻪـﻛ ﺪـﻧ
ﺰﻳﺎـﻤﺗ و ﺪـﺷر يﺎﻫﺪـﻨﻳآﺮﻓ رد ﻢﻴـﺴﻠﻛ ناﺰـﻴﻣ ﺶﻳاﺰـﻓا ﺚـﻋﺎﺑ تﻮﺻاﺮﻓ
لﻮﻠﺳ ﺖﺸﻛ يﺎﻫ ﺪﺷ
ة ﻢـﺴﻴﻟﻮﺑﺎﺘﻣ خﺮﻧ ﺶﻳاﺰﻓا ﺰﻴﻧ و ناﻮﺨﺘﺳا و فوﺮﻀﻏ
نآ ﺎﻫ ﻲﻣ ﺖﺸﻛ ﻂﻴﺤﻣ رد دﻮﺷ
] 16 - 14 [.
اﺰﻓا ﻳ رد ﻪـﻳﻮﻧﺎﺛ ﺮﺒﻣﺎﻴﭘ ﻦﻳا ﺶ
و زﻼﻜﻴــﺳ تﻼﻴــﻧدآ ﺖــﻴﻟﺎﻌﻓ ﺶﻳاﺰــﻓا ﺚــﻋﺎﺑ لﻮﻠــﺳ TGF-β
ﺰﺘﻨــﺳ و
ﺖﺳﻼﺑﻮﺌﺘﺳا ﺪﺷ ﺪﻫاﻮﺧ ﺎﻫ
] 16 [ Wu . تﻮـﺻاﺮﻓ نداد ﺮﺛا ﺎﺑ نارﺎﻜﻤﻫ و
لﻮﻠﺳ ﺮﺑ ﻪﻛ ﺪﻧداد نﺎﺸﻧ فوﺮﻀﻏ يﺎﻫ ﺐﺟﻮﻣ
نژ ﻢﻴـﻈﻨﺗ و نﺎﻴﺑ ﺶﻳاﺰﻓا
ﺮﭘ و ﺗ ﺌ
ﺪـﺷ ﺪـﻫاﻮﺧ نآ ﻢﻴﻣﺮﺗ خﺮﻧ ﺶﻳاﺰﻓا و نﺎﻜﻴﻠﮔﻮ ]
17 [ . ﺎـﺑ ﻲـﻓﺮﻃ زا
ﺖﺴﻳز ﺶﻧاد نوﺰﻓا زور ﺖﻓﺮﺸﻴﭘ لﻮﻠـﺳ ﻒﺸﻛ و ﻲﻜﺷﺰﭘ و ﻲﺳﺎﻨﺷ
يﺎـﻫ
يدﺎﻴﻨﺑ
، ﺗ ﺐﻃ و ﺖﻓﺎﺑ ﻲﺳﺪﻨﻬﻣ رد ﻲﺑﻼﻘﺗا ﺑ ﻲﻤﻴﻣﺮ
ﻪ
ﺖـﺳا هﺪـﻣآ دﻮﺟو
] 21 - 18 و 22 [ . لﻮﻠﺳ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ ﻦﻴﻐﻟﺎﺑ يدﺎﻴﻨﺑ يﺎﻫ سﺮﺘﺳد رد
،ندﻮﺑ
ﻪﺑ ﺐﺳﺎﻨﻣ يﺰﻳﺎﻤﺗ ناﻮﺗ و ﻻﺎﺑ ﺖﺸﻛ ﺖﻴﻠﺑﺎﻗ ناﻮﻨﻋ
ﺐﻃ رد ﻲﺒﺳﺎﻨﻣ ﻊﺒﻨﻣ
ﻪﺑ ﻲﻤﻴﻣﺮﺗ ﻲﻣ رﺎﻤﺷ
ﺪﻧور ] 21 و 22 [ . لﻮﻠﺳ نﺎﻴﻣ ﻦﻳا رد ﻲﻤﻴﺸﻧاﺰﻣ يﺎﻫ
هﮋﻳو ﺖﻴﻤﻫا زا ناﻮﺨﺘﺳا ﺰﻐﻣ ادرﻮﺧﺮﺑ يا
ر ،ﺪﻧ اﺮﻳز ﻪﻧﻮﮔ مﺎﻤﺗ رد ًﺎﺒﻳﺮﻘﺗ ﺎـﻫ
ﻼﺧ ﻪﺻ
ﻪﻣﺪﻘﻣ : ﻢﻛ تﻮﺻاﺮﻓ ﺮﺛا ﻲﺳرﺮﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا زا فﺪﻫ ﺲﻜﻳﺪﻧا و ﺮﻴﺜﻜﺗ ﺮﺑ ناﻮﺗ
لﻮﻠﺳ رد ﺪﺷر يﺎﻫ ﺰﻐﻣ زا هﺪﺷاﺪﺟ يدﺎﻴﻨﺑ يﺎﻫ
ﺎﻣزآ ﻂﻴﺤﻣ رد تر ناﻮﺨﺘﺳا ﻳ
ﺖﺳا ﻲﻫﺎﮕﺸ .
ﻲﺳرﺮﺑ شور :
ﺲﻧﺎﻛﺮﻓ ﺎﺑ ﻪﺘﺳﻮﻴﭘ ﺪﻣ رد تﻮﺻاﺮﻓ جﻮﻣ 3MHz
تﺪﺷ ﺎﺑ و mW/cm2
IP/IAve=355 ﺪﺷ هﺪﻴﻧﺎﺑﺎﺗ . ﺰﻐﻣ
ﺘﺳا زا ناﻮﺨﺘﺳا ناﻮﺨ
ﺪﺷ هداد ﺖﺸﻛ يوﺎﮔ ﻦﻴﻨﺟ مﺮﺳ يوﺎﺣ ﻂﻴﺤﻣ رد و ﺪﺷ ﻪﺘﻓﺮﮔ تر يﺎﺒﻴﺗ و رﻮﻤﻓ يﺎﻫ .
لﻮﻠﺳ يﺎﻫ
ﺺﻟﺎﺧ ﺪﺷ ة رود ﻲﻃ رد و ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ تﻮﺻاﺮﻓ ﺶﺑﺎﺗ ﺖﺤﺗ مﻮﺳ ژﺎﺳﺎﭘ ة
ﺖﻔﻫ زور ة ﺮﻴﺜﻜﺗ ﺖﺸﻛ ﺪﺷ
ﺲﻜﻳﺪﻧا و نآ ﺪﺷر يﺎﻫ ﺎﻫ
ﺑ ﻪ ﻠﻴﺳو ﺔ ﺒﺳﺎﺤﻣ ﺔ ﺑاﺮﺑود ﺮ ﻲﺘﻴﻌﻤﺟ ﻲﮔﺪﺷ (PDN)
ﺑ درﻮﻣ ﺪﺷر ﻲﻨﺤﻨﻣ ﻢﺳر ﺰﻴﻧ و ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﻲﺳرﺮ
. ياﺮﺑ و رﺎﺑ ﻪﺳ ﺶﻳﺎﻣزآ ﺮﻫ
ﺑ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻦﻴﮕﻧﺎﻴﻣ و ﺪﺷ راﺮﻜﺗ ﻪﻧﻮﻤﻧ هد ﻪ
ﻠﻴﺳو ﺔ راﺰﻓا مﺮﻧ SPSS ﺔﺨﺴﻧ 16 ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﻲﺑﺎﻳزرا درﻮﻣ .
ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺎﻫ : هداد ﺪﺷر ﻲﻨﺤﻨﻣ يﺎﻫ
، ﻲﻨﻌﻣ ﺶﻳاﺰﻓا ﻲﻣ نﺎﺸﻧ لﺮﺘﻨﻛ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ تﻮﺻاﺮﻓ هوﺮﮔ رد ار يراد
ﺪﻫد ) 004 / p<0 ( هداد يﺎﻫ
ﻌﻤﺟ ﻲﮔﺪﺷ ﺮﺑاﺮﺑود تﻮﺻاﺮﻓ هوﺮﮔ رد ﻲﺘﻴ
39 /
±17 79 / 5 لﺮﺘﻨﻛ هوﺮﮔ رد و 69
/
±4 08 / 14 ﺎﺑ 005 / p<0 دﻮﺑ . لﻮﻠﺳ درﻮﻣ يﺎﻫ
ﻪﺑ هدﺎﻔﺘﺳا هدر ﻪﺑ ﻲﺘﺣار نآ يدﺎﻴﻨﺑ ﺖﻴﻫﺎﻣ ﺮﮕﻧﺎﻳﺎﻤﻧ ﻪﻛ ﺪﻨﺘﺷاد ﺰﻳﺎﻤﺗ ﻲﺑﺮﭼ و ﻲﻧاﻮﺨﺘﺳا يﺎﻫ
دﻮﺑ ﺎﻫ .
يﺮﻴﮔ ﻪﺠﻴﺘﻧ و ﺚﺤﺑ :
ﻞﻛرد
، ﻲﻣ دﺎﻬﻨﺸﻴﭘ دﻮﺷ
LIUS ﻪﻛ ﺮﻴﺜﻜﺗ دﺮﺒﺸﻴﭘ و دﻮﺒﻬﺑ ﻲﻳﺎﻧاﻮﺗ ﺲﻜﻳﺪﻧا و
لﻮﻠﺳ ﺪﺷر يﺎﻫ يﺎﻫ
دراد ﻲﻫﺎﮕﺸﻳﺎﻣزآ ﻂﻳاﺮﺷرد ارMSc .
هژاو يﺪﻴﻠﻛ يﺎﻫ :
ﻢﻛ تﻮﺻاﺮﻓ ﺲﻜﻳﺪﻧا ،ﺮﻴﺜﻜﺗ ،ﻲﻤﻴﺸﻧاﺰﻣ يدﺎﻴﻨﺑ لﻮﻠﺳ ،ناﻮﺗ
ﺪﺷر يﺎﻫ
لﻮﺌﺴﻣ ةﺪﻨﺴﻳﻮﻧ : ناﺮﻴﺷ ﺮﻗﺎﺑﺪﻤﺤﻣ
، ﻲﻜﺷﺰﭘ سﺪﻨﻬﻣ و ﻚﻳﺰﻴﻓ هوﺮﮔ
و ﻲﻜﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ناﺮﻬﺗ ﻲﻧﺎﻣرد تﺎﻣﺪﺧ
، ﺗ ﻦﻔﻠ : 88622647 ،
ا ﺖﺴﭘ ﻚﻴﻧوﺮﺘﻜﻟ [email protected] :
٣٠
ﻪﺑ ﺖﻓﺎﻳ رﻮﻓو ﻲﻣ
ﺪﻧﻮﺷ رد هدﺎﻔﺘـﺳا و يزﺎـﺳاﺪﺟ ياﺮـﺑ ﺪـﻳﺪﻧﺎﻛ ﻦﻴـﻟوا و
ﻲﻣ ناﻮﺨﺘﺳا ﺖﻓﺎﺑ هﮋﻳو ﻪﺑ ﺪﻧﻮﻴﭘ ﺪﻨـﺷﺎﺑ
] 23 [ . هﺎـﺗﻮﻛ ﻪـﺑ صﺎـﺧ ﻪـﺟﻮﺗ
ﺳوﺮﭘ ندﻮﻤﻧ ﺔ
لﻮﻠﺳ ﻦﻳا رد ﺖﺸﻛ ﺎـﻫ
زا زﺎـﺑﺮﻳد ﺔـﻏﺪﻏد ـﻘﻘﺤﻣ ﺎ هدﻮـﺑ ن
ﺖﺳا . ﻧﺎﻨﭼ ﻜ هﺪـﺷ ﻪﺘﻓﺮﮔ ﻚﻤﻛ يرﺎﻴﺴﺑ ﻲﻳﺎﻴﻤﻴﺷ داﻮﻣ زا درﻮﻣ ﻦﻳا رد ﻪ
ﺖﺳا ] 23 ، 24 و 33 - 25 [ ﺎﺘـﺳار ﻦﻳا رد ﻖـﻴﻘﺤﺗ ﻦـﻳا مﺎـﺠﻧا زا فﺪـﻫ
ﻪﺑ تﻮﺻاﺮﻓ زا هدﺎﻔﺘﺳا
رد و نازرا ﻲـﻜﻳﺰﻴﻓ ﺖـﻴﻤﻛ ﻚﻳ ناﻮﻨﻋ سﺮﺘـﺳد
ﻪﺑ ﺪﻧﺮﺒﺸﻴﭘ ﻞﻣﺎﻋ ناﻮﻨﻋ ة
ﺪﻨﻳاﺰﻓا و ﺪﺷر ة
تﺪـﻣ ﺶﻫﺎـﻛ فﺪـﻫ ﺎـﺑ ﺮﻴﺜﻜﺗ
رود نﺎﻣز ة ﻲﻣ ﺖﺸﻛ ﺪﺷﺎﺑ .
ﻲﺳرﺮﺑ شور
ﺪﺟ و ﺖﺸﻛ لﻮﻠﺳ يزﺎﺳا
ﻲﻤﻴﺸﻧاﺰﻣ يﺎﻫ :
داﺪﻌﺗ 10 داﮋﻧ ،تر ﺮﺳ Wistar
ﻲﺒﻳﺮﻘﺗ ﻦﺳ ﺎﺑ ، 10
- 8 ـﺑ ﻪﺘﻔﻫ ﻪ ﺔﻠﻴـﺳو
ﺪﺷ شﻮﻬﻴﺑ مﺮﻓوﺮﻠﻛ و ﺪﻧ
ناﻮﺨﺘﺳا ﺎﻴﺒﻴﺗ و رﻮﻤﻓ يﺎﻫ ﺪـﻳدﺮﮔ اﺪﺟ
. ﺖـﻓﺎﺑ
نآ فاﺮﻃا مﺮﻧ ﻂﻴـﺤﻣ ﻞﺧاد و ﺪﺷ كﺎﭘ ﺎﻫ
DMEM (Dulbecco’s
Minimum Essential Medium. Gibco. USA)
يﻮـﺘﺤﻣ
15 FBS (Gibco)ﺪﺻرد و
100 ﻦﻴـﺴﻳﺎﻣﻮﺘﭘﺮﺘﺳا ﻲـﻠﻠﻤﻟا ﻦﻴـﺑ ﺪﺣاو
(Gibco, Germany) و
100
ﻲــﻨﭘ ﻞــﻠﻤﻟا ﻦﻴــﺑ ﺪــﺣاو ﻦﻴﻠﻴــﺳ
(Gibco, Germany) ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ
. ناﻮﺨﺘـﺳا رﺎـﻬﭼ زا ناﻮﺨﺘـﺳا ﺰﻐﻣ
ﻪﺑ رﻮﻤﻓ و ﺎﻴﺒﻴﺗ زارد Flashing شور
ـﻟﻮﻟ ﻚـﻳ ﻞـﺧاد رد و ﺪـﺷ اﺪﺟ ﺔ
يوﺎﺣ 13 ﻲﻠﻴﻣ ﻂﻴـﺤﻣ ﺮـﺘﻴﻟ ﻲـﺘﻧآ وDMEM
ﺖـﻓﺮﮔ راﺮـﻗ ﻚـﻴﺗﻮﻴﺑ .
لﻮﻠﺳ ﻚﻳ زا ﺲﭘ قﻮﻓ يﺎﻫ رود ﺎـﺑ ژﻮﻔﻳﺮﺘﻧﺎﺳ رﺎﺑ
1200 ﻪـﺑ و ﻪـﻘﻴﻗد رد
تﺪﻣ 5 ﻚﺳﻼﻓ ﻚﻳ ﻪﺑ ﻪﻘﻴﻗد 75
ﻲﺘﻧﺎﺳ يوﺎﺣ ﻊﺑﺮﻣ ﺮﺘﻣ 12
ﻲﻠﻴﻣ ﺮـﺘﻴﻟ
ﻂﻴﺤﻣ ﻲﺘﻧآ يﻮﺘﺤﻣDMEM
و ﻚﻴﺗﻮﻴﺑ 15 FBSﺪﺻرد ﺪﺷ ﻞﻘﺘﻨﻣ ﺪﻧ
ﻂﻳاﺮﺷ رد و 5
CO2ﺪﺻرد يﺎـﻣد و 35 ـﺟرد ﺔ ﻲﺘﻧﺎـﺳ داﺮـﮔ ﺖـﺑﻮﻃر و
ﺪﻧﺪﺷ هداد ﺖﺸﻛ عﺎﺒﺷا .
48 ﺎـﺳ
لﻮﻠـﺳ ،ﺖـﺸﻛ زﺎـﻏآ زا ﺲـﭘ ﺖﻋ يﺎـﻫ
ﺎـﺑ ﻮـﺸﺘﺴﺷ و ﻂﻴﺤﻣ ﺾﻳﻮﻌﺗ مﺎﺠﻧا ﺎﺑ هﺪﻨﺒﺴﭼﺮﻴﻏ ﻪـﺘﺨﻳر رودPBS+
لﻮﻠﺳ ﻂﻴﺤﻣ نآ زا ﺲﭘ و ﺪﻧﺪﺷ ﺎﻫ
2 ﻚـﻳ زور
ﺪـﺷ ﺾﻳﻮـﻌﺗ رﺎـﺑ .
10 زور
،ﺖﺸﻛ زﺎﻏآ زا ﺲﭘ 90
- 80 ﻦﻳا رد ﻪﻛ ﺪﺷ لﻮﻠﺳ زا ﺮﭘ فﺮﻇ ﻒﻛ ﺪﺻرد
ﺖﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا ﻲﻟﻮﻠﺳ ژﺎﺳﺎﭘ ﻦﻴﻟوا نﺎﻣز .
لﻮﻠﺳ ژﺎـﺳﺎﭘ ﻪـﺳ ﺎﺗ ﺎﻫ فﺪـﻫ ﺎـﺑ
زا ﺺﻟﺎﺧ ًﺎﺒﻳﺮﻘﺗ ﻲﺘﻴﻌﻤﺟ ﻪﺑ نﺪﻴﺳر rMSCs
زا و ﺪﻧﺪـﺷ هدﺮـﺑ ﺶﻴﭘ
لﻮﻠﺳ ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا حﺮﻃ مﺎﺠﻧا ياﺮﺑ مﻮﺳ ژﺎﺳﺎﭘ يﺎﻫ .
تﻮﺻاﺮﻓ ﺶﺑﺎﺗ :
لﺪﻣ تﻮﺻاﺮﻓ هﺎﮕﺘﺳد (Phyaction 190i, Germany)
ﺲﻧﺎﻛﺮﻓ ﺎﺑ
3MHz
هﺮـﻔﺣ ةﺪـﻳﺪﭘ فﺬـﺣ و ﺶﻫﺎـﻛ ياﺮﺑ
ﺪـﺷ بﺎـﺨﺘﻧا يزﺎـﺳ ]
6 [ .
ﺪـﺷ مﺎـﺠﻧا ﻲﺸﺑﺎﺗ رﺎﺸﻓ شور زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ تﻮﺻاﺮﻓ ﻊﺒﻨﻣ نﻮﻴﺳاﺮﺒﻴﻟﺎﻛ .
ﻻﺎﺑ ﺖﻗد ﺎﺑ يوزاﺮﺗ ﻚﻳ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ شور ﻦﻳا رد )
دوﺪﺣ 001 / 0 مﺮـﮔ (
هزاﺪﻧا تﻮﺻاﺮﻓ جﻮﻣ ﻲﺸﺑﺎﺗ رﺎﺸﻓ يﺮﻴﮔ
ﺪـﻳدﺮﮔ . ود ﺔـﻴﺣﺎﻧ ر ﺔﻠـﺻﺎﻓ ﻦﻳﺮـﺗ
دﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ يرﻮﺤﻣ ﺑ ﮓﻧر و ﺬﻏﺎﻛ زا ه
ﻪ ﺑ ﻞﻜﺷ زا و ﺪﻣآ ﺖﺳد ﻪ
هﺪـﻣآ ﺖﺳد
تﺪـــﺷ ﻦﻳﺮﺘـــﺸﻴﺑ ﺔﺒـــﺳﺎﺤﻣ ياﺮـــﺑ تﻮـــﺻاﺮﻓ ناﺪـــﻴﻣ ياﺮـــﺑ
PeakIntensity) (
ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا ]
33 [ . زا نآ ﻖﻴﻗد ﺔﻘﻄﻨﻣ ﻦﺘﻓﺎﻳ ياﺮﺑ عﻮﻧ ﻞﭘﻮﻛﻮﻣﺮﺗ
دوﺪﺣ ﺖﻣﺎﺨﺿ ﺎﺑT 5
/ 0 ﻲﻠﻴﻣ
ﺪـﺷ هدﺎﻔﺘـﺳا ﺮـﺘﻣ .
زا ﺪـﻌﺑ
ﻦﺘﻓﺎﻳ LAM (Last Axial Maximum) ﺐـﺳﺎﻨﻣ نﺎـﻣز و تﺪـﺷ
ﺔـﻴﺣﺎﻧ رد ﺖـﺸﻛ فﺮﻇ نورد يﺎﻣد ندﻮﺑ ﺖﺑﺎﺛ يﺎﻨﺒﻣ ﺮﺑ ﺶﻳﺎﻣزآ ياﺮﺑ ﺖــﻴﻠﭘ رد وLAM 12
ــﺑ ﻲﻜﻫﺎــﭼ ﻪ
ﺪــﻣآ ﺖــﺳد )
زا ﺮــﺘﻤﻛ 1 ﺔــﺟرد
ﻲﺘﻧﺎﺳ دﻮـﺑ زﺎﺠﻣ ﺎﻣد ﺶﻳاﺰﻓا داﺮﮔ .(
ﺖـﻠﻋ ا ﺖـﺸﻛ فﺮـﻇ زا هدﺎﻔﺘـﺳ 12
دﻮﺑ تﻮﺻاﺮﻓ ناﺪﻴﻣ دﺎﻌﺑا ﺎﺑ نآ قﺎﺒﻄﻧا ﻲﻜﻫﺎﭼ .
ياﺮﺑ ﺖﺤـﺻ زا نﺎﻨﻴﻤﻃا
ﺶﻳﺎﻣزآ
، رد ﺰﻴﻧ و ﻚﻫﺎﭼ نوﺮﻴﺑ و نورد فﺮﻃ ود رد ﺎﻣد 2
ﻲﻠﻴﻣ يﺮـﺘﻣ
هﺪـﺷ بﺎـﺨﺘﻧا تﺪـﺷ ياﺮﺑ بآ ﻂﻴﺤﻣ رد نآ ﻒﻛ mW.cm-2)
355 (
ﺑ ﻪ ﺪﻣآ ﺖﺳد ] 9 [.
ﺪﺷر ﻲﻨﺤﻨﻣ ﻢﺳر (Growth Curve)
:
لﻮﻠﺳ
ـﻴﻠﺨﺗ ﺎـﺑ مود ژﺎـﺳﺎﭘ زا ﺺﻟﺎـﺧ ًﺎﺒﻳﺮﻘﺗ يﺎﻫ ﺔ
رﺎـﺑود ﻲـﻳور ﻂﻴـﺤﻣ
ﺑ ﻪ ﻠﻴﺳو ﺔ لﻮﻠﺤﻣ ﺪﺷ ﻪﺘﺴﺷPBS
ﺪﻧ ﺲﭙﺳ و ﺗ ﻦﻴـﺴﭙﻳﺮﺗ ﻢﻳﺰـﻧآ ﺮﺛا ﺖﺤ
ﺪﻧﺪﺷ اﺪﺟ فﺮﻇ ﻒﻛ زا .
رﺎﺑﻮﺌﻧ مﻻ ﻂﺳﻮﺗ ﻲﻟﻮﻠﺳ شرﺎﻤﺷ زا ﺲﭘ
، داﺪﻌﺗ
20000 ﺖﺸﻛ فﺮﻇ زا ﻚﻫﺎﭼ ﺮﻫ رد لﻮﻠﺳ 12
يﻮﺘﺤﻣ ﻲﻜﻫﺎﭼ ﻂﻴﺤﻣ
ﺖـﺸﻛ 15 ﺪـﺻرد DMEM +FCS ﻂﻳاﺮـﺷ رد و ﺪﻧﺪـﺷ هداد ﺖـﺸﻛ
يﺎﻣد 37 ﺟرد ﺔ ﻲﺘﻧﺎﺳ و داﺮﮔ 5 ﺪـﺻرد ﺖـﺑﻮﻃر وCO2
80 ﺪـﺻرد رد
ﺪﻧﺪﺷ يراﺪﻬﮕﻧ رﻮﺗﺎﺑﻮﻜﻧا .
لﻮﻠﺳ ﻪﺑ تﺪﻣ ﺎﻫ 24 ﺪـﺷ هداد ﺖـﺻﺮﻓ ﺖﻋﺎﺳ
ﺪﻨﺒﺴﭽﺑ دﻮﺧ ﺖﺸﻛ فﺮﻇ ﻒﻛ ﻪﺑ ﺎﺗ .
ﺮﻫ ياﺮﺑ ،ﻪـﻧﻮﻤﻧ ـﻧﻮﻤﻧ ﺔ لﺮـﺘﻨﻛزور
ﻧﻮﻤﻧ و ﺪﺷ ظﺎﺤﻟ ﺰﻴﻧ ﺔ
ﺶﻳﺎﻣزآ درﻮﻣ راﺮـﻗ تﻮـﺻاﺮﻓ جاﻮـﻣا ﺶﺑﺎـﺗ ﺖﺤﺗ
ﺖﻓﺮﮔ . لﻮﻠﺳ ﻂﻴﺤﻣ ﻚﻳ زور ود ﺮﻫ ﺎﻫ
رد ﺶﻳﺎـﻣزآ نﺎـﻳﺎﭘ ﺎـﺗ رﺎﺑ ود ﺮـﻫ
ﻳﻮﻌﺗ ﺪﻫﺎﺷ و لﺮﺘﻨﻛ هوﺮﮔ لﻮﻠﺳ رﺎﻴﺘﺧا رد هزﺎﺗ ﻂﻴﺤﻣ و ﺪﺷ ﺾ
راﺮـﻗ ﺎـﻫ
ﺖﻓﺮﮔ . ﻪـﺑ و زور ﺮﻫ مﺎﻤﺗا رد تﺪـﻣ
7 ﻲـﭘ زور
لﻮﻠـﺳ ﻲـﭘرد ًادﺪـﺠﻣ ﺎـﻫ
ﺪﺷ ﻪﻨﻴﺴﭙﻳﺮﺗ ﺪﻧ
و ﺑ ﻪ ﻠﻴﺳو ﺔ ﻲﻣ شرﺎﻤﺷ رﺎﺑﻮﺌﻧ مﻻ ﺪﻧﺪﺷ
.
ﻞﻛ ﻲﺘﻴﻌﻤﺟ ﻲﮔﺪﺷ ﺮﺑاﺮﺑود و ﻲﺘﻴﻌﻤﺟ ﻲﮔﺪﺷ ﺮﺑاﺮﺑود
(Population Doubling and Total Population Doubling Number):
نﺎـﺸﻧ ﻪـﻛ ﺖﺳا ﻲﺘﻴﻤﻛ ﻲﺘﻴﻌﻤﺟ ﻲﮔﺪﺷ ﺮﺑاﺮﺑود ﺪـﻨﻫد
ة تﺎـﻌﻓد داﺪـﻌﺗ
نﺪﺷ ﺮﺑاﺮﺑود
رود ﻚـﻳ رد لﻮﻠـﺳ ﻚـﻳ ة
ﻲـﻣ ﺖـﺸﻛ ﺪـﺷﺎﺑ
] 35 [ . ياﺮـﺑ
ﺑ ﻪ هداد زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ نآ راﺪﻘﻣ ندروآ ﺖﺳد رود ﻚﻳ يﺎﻫ
ة دوﺪﺤﻣ ﺖﺸﻛ
لﻮﻠﺳ داﺪﻌﺗ و ﻪﻴﻟوا داﺪﻌﺗ ﻦﺘﺴﻧاد و ﻲﺿﺎﻳر لﻮﻣﺮﻓ ﺎﺑ هرود يﺎﻬﺘﻧا رد ﺎﻫ
:
31 . 3
0
×
= N
Ln N PD
ﺑ ﻪ ﻲﻣ ﺖﺳد ﺪﻳآ . نآ رد ﻪﻛ ا داﺪـﻌﺗN0
ـﻴﻟو ﺔ لﻮﻠـﺳ ا رد ﺎـﻫ رود ياﺪـﺘﺑ ة
ﺖﺸﻛ N و ﺪﺷ شرﺎﻤﺷ داﺪﻌﺗ ة
لﻮﻠـﺳ ﺖـﺸﻛ شرﺎﻤـﺷ زور ﺮـﻫ رد ﺎـﻫ
دﻮﺑ ﺪﻫاﻮﺧ . ﺎﻬﻨﺗ و قﻮﻓ لﻮﻣﺮﻓ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﻞﻛ ﻲﺘﻴﻌﻤﺟ ﻲﮔﺪﺷ ﺮﺑاﺮﺑود
يراﺬﮕﻳﺎﺟ ﺎﺑ ﻪﺑN
لﻮﻠﺳ ﻲﻳﺎﻬﻧ ﻞﻛ داﺪﻌﺗ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﺎﻫ
ﺪﻣآ ﺪﻫاﻮﺧ ﺖﺳد .
لﻮﻠﺳ ﻲﻤﻴﺸﻧاﺰﻣ يدﺎﻴﻨﺑ ﺖﻴﻫﺎﻣ ﻲﺳرﺮﺑ ﺎﻫ
:
لﻮﻠﺳ رﺮﺑ ياﺮﺑ مﻮﺳ ژﺎﺳﺎﭘ يﺎﻫ ةدر ود ﻪﺑ ﻲﻤﻴﺸﻧاﺰﻣ يدﺎﻴﻨﺑ ﺖﻴﻫﺎﻣ ﻲﺳ
رد ﻲﺑﺮﭼ و ناﻮﺨﺘﺳا ﻂﻴﺤﻣ
ﻪـﺑ يﺰﻳﺎـﻤﺗ ءﺎﻘﻟا يﺎﻫ تﺪـﻣ
21 ﺰﻳﺎـﻤﺗ زور
ﺪﻧﺪﺷ هداد . ﮓﻧر ﻚﻴﻨﻜﺗ و در ﻦﻳراﺰﻴﻟآ يﺰﻴﻣآ RT-PCR
نژ ياﺮﺑ يﺎﻫ
ﻪـﺑ ﺰﻳﺎـﻤﺗ ﻲـﺳرﺮﺑ ياﺮـﺑ ﻦﻴﺘﻧﻮﭘﻮﺌﺘﺳا و ﻦﻴﺴﻠﻛﻮﺌﺘﺳا ،زﺎﺗﺎﻔﺴﻓ ﻦﻴﻟﺎﻜﻟآ
٣١
Primers of Osteogenic genes
Osteopontin Forward 5´-GATTATAGTGACACAGAC-3 287 bp Reverse 5´-AGCAGGAATACTAACTGC -3´
Osteocalcin Forward 5´-GTCCCACACAGCAACTCG -3´ 381bp Reverse 5´-CCAAAGCTGAAGCTGCCG-3´
Alkaline phosphatase
Forward 5´-
CGGACCCTGCCTTACCAACTCATTTGTG CC-3´
Reverse 5´- CGCACGCGATGCAACACCACTCAGG - 3´ 396 bp
Primers of adipogenic genes
PPAR-alpha Forward 5´-CCCTGCCTTCCCTGTGAACTGAC-3´
363 bp
Reverse 5´-GGGACTCATCTGTACTGGTGGGG-3´
PPAR- gamma2
Forward 5´-GGTGAAACTCTGGGAGATCCC -3´ 400 bp
Reverse 5´-CTCCATCTCTGCCACGGGCT-3´
C/EBP-alpha Forward 5´-ACGTGGAGACGCAGCAGAA-3´ 340 bp Reverse 5´-AGGCGGTCATTGTCACTGG-3´
Housekeeping gene GAPDH Forward 5'-TCGGTGTGAACGGATTTG-3'
Reverse 5'ACTCCACGACATACTCAGCAC-3' 612 bp لوﺪﺟ
1 : حﺮﻃ رد هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ يﺎﻫﺮﻤﻳاﺮﭘ ﻲﻟاﻮﺗ
0 50 100 150 200 250
0 1 2 3 4 5 6 7
Days
Cells Number(*10^3)
US Control
ﻞﻜﺷ 1 : لﻮﻠﺳ ﺪﺷر ﻲﻨﺤﻨﻣ رود رد تﻮﺻاﺮﻓ ﺮﻴﺛﺄﺗ ﺖﺤﺗ يدﺎﻴﻨﺑ يﺎﻫ
ة
7 زور ة ﺖﺸﻛ
(I=355mW/cm2, Frequency=3MHz)
ﮓﻧر و ناﻮﺨﺘﺳا ﻚـﻴﻨﻜﺗ و در ﻞﻳوا يﺰﻴﻣآ
RT-PCR نژ ياﺮـﺑ
يﺎـﻫ
PPAR-α, PPAR-γ, C/EBP-α ﻲـﺑﺮﭼ ﻪـﺑ ﺰﻳﺎـﻤﺗ ﻲـﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ ،
ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا ]
35 [.
لوﺪﺟ رد حﺮﻃ رد هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ يﺎﻫﺮﻤﻳاﺮﭘ ﻲﻟاﻮﺗ 1
ﺖﺳا هﺪﻣآ .
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻢﺠﺣ و يرﺎﻣآ نﻮﻣزآ :
داﺪﻌﺗ 10 لﻮﻠﺳ رد ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺮﻫ و ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳا رد
دﻮﺑ راﺮﻜﺗ ﻪﺳ ياراد ﻪﻧﻮﻤﻧ .
ﻬﻧرد هداد ﻦﻴﮕﻧﺎﻴﻣ ﺖﻳﺎ نﻮﻣزآ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺎﻫ
يرﺎﻣآ t-test ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﺰﻴﻟﺎﻧآ و ﻲﺳرﺮﺑ درﻮﻣ .
مﺮﻧ
هدﺎﻔﺘـﺳا درﻮـﻣ راﺰﻓا
ﺨﺴﻧSPSS ﺔ 16 دﻮﺑ .
ﺞﻳﺎﺘﻧ
ﺪﺷر ﻲﻨﺤﻨﻣ :
ﻲﻨﻌﻣ فﻼﺘﺧا لﻮﻠﺳ ﺪﺷر ناﺰﻴﻣ نﺎﻴﻣ يراد
و تﻮـﺻاﺮﻓ هوﺮـﮔ ود رد ﺎـﻫ
دراد دﻮﺟو لﺮﺘﻨﻛ )
005 / p≤0 .(
لﻮﻠﺳ ژﺎﺳﺎﭘ ﻦﻳا رد وﺮﮔ يﺎﻫ
تﻮﺻاﺮﻓ ه
راد ا زﺎﻓ ي ﺪﻧدﻮﺑ ﻲﻬﺑﺎﺸﻣ ًﺎﺒﻳﺮﻘﺗlag
. log زﺎﻓ د ر ﺐﻴﺷ ﺎﺑ تﻮﺻاﺮﻓ هوﺮﮔ
ﻪـﺑ ﻢـﺸﺷ زور زا ًﺎﺒﻳﺮﻘﺗ و ﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ لﺮﺘﻨﻛ هوﺮﮔ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ يﺮﺗﺪﻨﺗ platue زﺎﻓ زﺎـﻓ لﺮـﺘﻨﻛ هوﺮـﮔ رد ﻪﻛ دﻮﺑ ﻲﺗرﻮﺻرد ﻦﻳا ،ﺪﻴﺳر زاlog
زﺎﻓ ﻪﺑ ﺮﺗﺮﻳد ﺰﻴﻧ و دﻮﺑ رادرﻮﺧﺮﺑ يﺮﺘﻤﻛ ﺐﻴﺷ platue
ﺪﻴﺳر ) ﻜﺷ ﻞ 1 (.
ﻲﺘﻴﻌﻤﺟ ﻲﮔﺪﺷ ﺮﺑاﺮﺑود :
راﺪﻘﻣ لﺮـﺘﻨﻛ ﺔﻧﻮﻤﻧ ياﺮﺑPD
006 /
±0 63 / 5 تﻮـﺻاﺮﻓ ﺔـﻧﻮﻤﻧ ياﺮـﺑ و
16 /
±0 71 / 6
، نآ فﻼﺘﺧا ﻲﻨﻌﻣ ﺰﻴﻧ ﺎﻫ
دﻮﺑ راد ) 005 /
≤0 ) (p ﻞﻜـﺷ 2 (.
راﺪﻘﻣ و تﻮـﺻاﺮﻓ ﺔـﻧﻮﻤﻧ رد ﻞﻛPD
79 /
±5 3924 / 17 ﺔـﻧﻮﻤﻧ ياﺮـﺑ و
ﺮﺑاﺮﺑ نآ راﺪﻘﻣ لﺮﺘﻨﻛ 69
/
±4 07819 / 14 دﻮﺑ ) 004 /
≤0 (p ) ﻞﻜﺷ 3 .(
لﻮﻠﺳ يﺰﻳﺎﻤﺗ ﺖﻴﻫﺎﻣ ﻲﺳرﺮﺑ يدﺎﻴﻨﺑ يﺎﻫ
:
يﺰﻴﻣآ ﮓﻧر Oil-Red
ﮓـﻧر و ﻲـﺑﺮﭼ ﻪـﺑ ﺰﻳﺎـﻤﺗ ﺶﻳﺎﻤﻧ ياﺮﺑ يﺰـﻴﻣآ
Alizarin-Red يدﺎـﻴﻨﺑ ﺖﻴﻫﺎﻣ ﺪﻳﺆﻣ ناﻮﺨﺘﺳا ﻪﺑ ﺰﻳﺎﻤﺗ ﻲﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ
لﻮﻠــﺳ دﻮــﺑ حﺮــﻃ رد هدﺎﻔﺘــﺳا درﻮــﻣ يﺎــﻫ )
ب و ﻒــﻟا ﻞﻜــﺷ 4
.(
ﺞﻳﺎــﺘﻧ
RT-PCR
در ود ﻪـﺑ ﺰﻳﺎـﻤﺗ ﺖـﻴﻌﻄﻗ ﻞﻤﻜﻣ ة
ـﺑﺮﭼ و ناﻮﺨﺘـﺳا دﻮـﺑ ﻲ
) ﻞﻜﺷ 5 .(
٣٢
-1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
1 2 3 4 5 6 7
Days
Population Doubling No.
US Co
ﻞﻜﺷ 2 : لﻮﻠﺳ ﻲﺘﻴﻌﻤﺟ ﻲﮔﺪﺷ ﺮﺑاﺮﺑود ﺮﻴﺛﺄﺗ ﺖﺤﺗ يدﺎﻴﻨﺑ يﺎﻫ
تﻮﺻاﺮﻓ رود رد ة 7 زور ة ﺖﺸﻛ
(I=355mW/cm2, Frequency=3MHz)
ﻞﻜﺷ 3 : لﻮﻠﺳ ﻞﻛ ﻲﺘﻴﻌﻤﺟ ﻲﮔﺪﺷ ﺮﺑاﺮﺑود ﺮﻴﺛﺄﺗ ﺖﺤﺗ يدﺎﻴﻨﺑ يﺎﻫ
رود رد تﻮﺻاﺮﻓ ة
7 زور ة ﺖﺸﻛ
(I=355mW/cm2, Frequency=3MHz)
=*P<0.004
ﻞﻜﺷ 4 : ﻒﻟا ( ﺰﻳﺎﻤﺗ Osteogenic ﮓﻧر و
يﺰﻴﻣآ Alizarin-Red
ﻞﻜﺷ 4 : ب ( ﺰﻳﺎﻤﺗ Adipogenic ﮓﻧر و
يﺰﻴﻣآ Oil-Red
ﻞﻜﺷ 5 : ﻒﻟا ( ﺞﻳﺎﺘﻧ RT-PCR ناﻮﺨﺘﺳا ﻪﺑ ﺰﻳﺎﻤﺗ ﺮﮕﻧﺎﻳﺎﻤﻧ
ﻞﻜﺷ 5 : ب ( ﺞﻳﺎﺘﻧ RT-PCR ﻲﺑﺮﭼ ﻪﺑ ﺰﻳﺎﻤﺗ ﺮﮕﻧﺎﻳﺎﻤﻧ
يﺮﻴﮔ ﻪﺠﻴﺘﻧ و ﺚﺤﺑ
رد تﺎـﻘﻴﻘﺤﺗ و ﻲﻫﺎﮕﺸﻳﺎﻣزآ ﻂﻳاﺮﺷ رد تﻮﺻاﺮﻓ جاﻮﻣا زا هدﺎﻔﺘﺳا درﻮـﻣ
ﻲﮕﺘﺴﻜﺷ ﻣ يورﺮﺑ ﺎﻫ لﺪ
نﺎـﺸﻧ ﻒـﻠﺘﺨﻣ ﻲﻧاﻮـﻴﺣ يﺎـﻫ ﺪـﻨﻫد
ة ا ﺮﺛ يﺎـﻫ
ﺖـﻴﻟﺎﻌﻓ ﺮﺑ جاﻮﻣا ﻦﻳا يژﺮﻧا ﻲﺷﺰﻴﮕﻧاﺮﺑ نﺪـﺷ دازآ ،ﻲﻟﻮﻠـﺳ نورد يﺎـﻫ
نﺎﻛﻮﺘﻳﺎﺳ
ﻲﮕﺘـﺴﻜﺷ رد دﻮـﺒﻬﺑ ﺖﻋﺮﺳ ﺶﻳاﺰﻓا و ﺎﻫ ﺎـﻫ
ﻲـﻣ ﺪـﺷﺎﺑ ] 36 و
37 [ . ﻢﻛ تﻮﺻاﺮﻓ نورد ﻢﻴﺴﻠﻛ راﺪﻘﻣ ﺶﻳاﺰﻓا ﺎﺑ ناﻮﺗ
ﻢﻴﻘﺘﺴﻣ ﺮﺛا ﻲﻟﻮﻠﺳ
ﮋـﻳو ﺮـﺛا ﻪـﻛ ﺖﺷاﺬﮔ ﺪﻫاﻮﺧ لﻮﻠﺳ ﻚﻳژﻮﻟﻮﻳﺰﻴﻓ يﺎﻫﺪﻨﻳآﺮﻓ ﺮﺑ ار دﻮﺧ ة
هار ﻲﻟﻮﻠﺳ نورد ﻢﻴﺴﻠﻛ ﺶﻳاﺰﻓا نژ نﺎﻴﺑ ﻲﻟﺎﻨﮕﻴﺳ يﺎﻫﺮﻴﺴﻣ يزاﺪﻧا
يﺎﻫ
ﺖﺳا يﺮﻴﺜﻜﺗ ]
6
، 7
، 38 و 39 [ . ﺮـﺛا فﺬـﺣ ﻪـﺑ ﻪـﺟﻮﺗ ﺎﺑ ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳا رد
ﻲﺗراﺮﺣ LIUS
لﻮﻠـﺳ ﺮـﺑ تﻮﺻاﺮﻓ جﻮﻣ ﺺﻟﺎﺧ ﺮﺛا ﻲﺳرﺮﺑ ﺮﺑ ﻲﻌﺳ ، ﺎـﻫ
ﺖﺳا هدﻮﺑ . مﺎﻧ ﻪﺑ ار ﺮﺛا ﻦﻳا micro streaming
ﺪﻨﻳﻮﮔ ] 6
، 33
، 40 و
41 [.
ﺑ يژﺮﻧا لﺎﻘﺘﻧا ﻲﻳﺎﻧاﻮﺗ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗﺎﺑ ﺮﺛا ﻦﻳا ﻪ
ﻠﻴﺳو LIUSﺔ د ﻂﻴﺤﻣ ر
٣٣
و يژﻮﻟﻮﻴﺑ in vitro
لﻮﻜﻟﻮﻣ ﻲﻳﺎﻀﻓ يﺎﻫرﺎﺘﺧﺎﺳ رد ﺮﻴﻴﻐﺗ دﺎﺠﻳا و يﺎـﻫ
نورد ﻢﻴﺴﻠﻛ ناﺰﻴﻣ ﺶﻳاﺰﻓا ،ﻲﺗﺎﻴﺣ
نورد راﺪـﻘﻣ ﺶﻳاﺰـﻓا ،ﻲﻟﻮﻠﺳ و دﺮـﺑ
نوﺮــﺑ نﻮــﻳ ﺰــﻳر و ﺮــﻴﺜﻜﺗ ناﻮــﺗ ﺶﻳاﺰــﻓا ﺚــﻋﺎﺑ ﺖــﻳﺎﻬﻧ رد ﺮــﮕﻳد يﺎــﻫ
ﺲﻜﻳﺪﻧا لﻮﻠﺳ رد ﺪﺷر يﺎﻫ ﺖﺳا هﺪﺷ يدﺎﻴﻨﺑ يﺎﻫ
. ﻲـﻠﺒﻗ تﺎـﻌﻟﺎﻄﻣ رد
ــﺑLIUS ﺎ ــﺷ هداد نﺎــﺸﻧ ﻪﺑﺎــﺸﻣ ﻂﻳاﺮ ﺖــﺳا
شﺰــﻴﮕﻧاﺮﺑ ﻲﻳﺎــﻧاﻮﺗ ﻪــﻛ
ﺎﻫﺮﻴﺴﻣ ي رد ار ناﻮﺨﺘﺳا ﻪﺑ يﺰﻳﺎﻤﺗ ﻂﻳاﺮﺷ
رﻮـﻀﺣ نوﺪﺑ ﺖﺸﻛ ﻂﻴﺤﻣ
اﻮﻣ د ﻲﻣ اراد ﻲﻳﺎﻴﻤﻴﺷ ﺪﺷﺎﺑ
] 9 [ . ﻪﺑ ﻲﻣ ﺮﻈﻧ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺪﺳر ردLIUS
ﺔﺳوﺮﭘ ناﻮﺨﺘﺳا ﺖﻓﺎﺑ ﻲﺳﺪﻨﻬﻣ و ﺖﺸﻛ
، ﻲﻣ ندﻮﻤﻧ هﺎﺗﻮﻛ ﺮﺑ هوﻼﻋ ناﻮﺗ رود
ة لﻮﻠﺳ ﻪﺑ ﺖﺸﻛ نژ ياراد يﺎﻫ
نﺎﻴﺑ يﺎﻫ سﺎـﻴﻘﻣ رد هﺪﺷ mRNA
ﺖﻓﺎﻳ ﺖﺳد ناﻮﺨﺘﺳا ﺖﻓﺎﺑ ﻲﺳﺪﻨﻬﻣ رد هﺮﻬﺑ ﺶﻳاﺰﻓا و .
دﺎﻬﻨﺸﻴﭘ ﺎﻫ
ا ﺖﻓﺎﺑ ﻲﺳﺪﻨﻬﻣ رد لﻮﻠﺳ ﻲﺘﺴﻳز ناﻮﺗ ﻞﻀﻌﻣ ناﻮﺨﺘﺳ
هﺪـﺷ ﺪـﻧﻮﻴﭘ يﺎﻫ
هﺮﻬﺑ ﺶﻫﺎﻛ و زﻮﺘﭙﭘآ يﺎﻘﻟا ﺚﻋﺎﺑ هراﻮﻤﻫ ﻞﺤﻣ رد ﺖﺳا هﺪﺷ ﺪﻧﻮﻴﭘ يرو
.
ﻪﺑ ﻲﻣ ﺮﻈﻧ ﺮﺛا ﻲﺳرﺮﺑ ترﻮﺻ رد ﺪﺳر ﻲﺘـﺴﻳز ناﻮـﺗ ﺮﺑLIUS
MSCs
ﺶﻳاﺰﻓا ﺪﻳﺎﺷ ﻪﻛ ﺖﻓﺎﻳ ﺖﺳد ﻲﺠﻳﺎﺘﻧ ﻪﺑ ناﻮﺘﺑ ﺪﻨﻫد
ة هﺮـﻬﺑ ناﺰﻴﻣ زا يرو
ﺪﺷﺎﺑ ﺪﻧﻮﻴﭘ .
References
1. Takeuchi R. Low-intensity pulsed ultrasound activates the phosphatidylinositol 3 kinase/Akt pathway and stimulates the growth of chondrocytes in three-dimensional cultures: a basic science study.
Arthritis Research & Therapy 2008; 10.
2. Meng QQ. Enhanced antitumor effects of low- frequency ultrasound combined with adriamycin on human leukemia multidrug resistance cell line K562/A02. Chinese Journal of Cance 2008; 27(11):
436-9.
3. Tsai WC. Ultrasound stimulation of types I and III collagen expression of tendon cell and upregulation of transforming growth factor beta. J Orthop Res 2006; 24(6): 1310-6.
4. Iwashina T. Low-intensity pulsed ultrasound stimulates cell proliferation and proteoglycan production in rabbit intervertebral disc cells cultured in alginate. Biomaterials 2006; 27(3): 354-61.
5. Pitt WG, Ross SA. Ultrasound increases the rate of bacterial cell growth. Biotechnol Prog 2003; 19(3):
1038-44.
6. Wells PNT, Biomedical Ultrasonics. Academic Press 1977.
7. Harle J, Olsen FM, Salih V. Effects of ultrasound on transforming growth factor-b genes in bone cells.
European Cells and Materials 2005; 10: 70- 7.
8. Ding Y. Effect of low-intensity pulsed ultrasound on bone formation during mandible distraction osteogenesis in a canine model--a preliminary study.
J Oral Maxillofac Surg 2009; 67(11): 2431-9.
9. Hamrahi D, Shiran MB, Bagheban Eslaminegad MR, Gourabi H, Rohi L. Effect of low- Intensity Ultrasound on Osteogenic Differentiation of Rat Bone- Marrow Mesenchymal Stem Cell: An in vitro study. Lasers in Medicine 2008; 5(2): 6-11.
10. Kobayashi Y. Low- intensity pulsed ultrasound stimulates cell proliferation, proteoglycan synthesis and expression of growth factor related genes in human nucleus pulposus cell line. European Cells and Materials 2009; 17: 15-22.
11. Chan CW. Dose-dependent effect of low-intensity pulsed ultrasound on callus formation during rapid distraction osteogenesis. J Orthop Res 2006; 24(11):
2072-9.
12. Eberson CP. Effect of low-intensity ultrasound stimulation on consolidation of the regenerate zone in a rat model of distraction osteogenesis. J Pediatr Orthop 2003; 23(1): 46-51.
13. Chapman IV MN, Tucker S. Ultrasound-induced changes in rates of influx and efflux of potassium ions in rat thymocytes in vitro. Ultrasound Med Biol 1980; 6: 47-58.
14. Ryaby JT BE, Bendo JA, Dalton PF, Tannenbaum S, Pilla AA. Low intensity pulsed ultrasound increases calcium incorporation in both differentiating cartilage and bone cell cultures. Trans Orthop Res Soc 1989; 14.
15. RyabyJT MJ, Pilla AA, Duarte-Alves P. Low- intensity pulsed ultrasound modulates adenylate cyclase activity and transforming growth factor beta synthesis. Brighton CT, Pollack SR, editors Electromagnetics in medicine and biology. San Francisco: San Francisco Press 1991; 95-100.
16. RyabyJT MJ, Duarte-Alves P. Low intensity pulsed ultrasound affects adenylate cyclase activity and TGF-b synthesis in osteoblastic cells. Trans Orthop Res Soc 1992; 7.
17. WuCC LD, Bolander ME, Bronk J, Kinnick R, Greenleaf JF. Exposure to low intensity ultrasound stimulates aggrecan gene expression by cultured chondrocytes. Trans Orthop Res Soc 1996; 21: 622.
٣٤
18. Bruedigam C. Basic techniques in human mesenchymal stem cell cultures: differentiation into osteogenic and adipogenic lineages, genetic perturbations, and phenotypic analyses. Curr Protoc Stem Cell Biol 2011; 1: 3.
19. Catelas I. Human mesenchymal stem cell proliferation and osteogenic differentiation in fibrin gels in vitro. Tissue Eng 2006; 12(8): 2385-96.
20. Minguell JJ, Erices A, Conget P. Mesenchymal Stem Cells. Society for Experimental Biology and Medicine 2001; 0037-9727/01- 0507-2266: 507-20.
21. Wang S. Stem-cell-activated organ following ultrasound exposure: better transplant option for organ transplantation. Med Hypotheses 2010; 74(1):
147-9.
22. Fickert S. Human mesenchymal stem cell proliferation and osteogenic differentiation during long-term ex vivo cultivation is not age dependent. J Bone Miner Metab 2011; 29(2): 224-35.
23. Thibault RA. Osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells on pregenerated extracellular matrix scaffolds in the absence of osteogenic cell culture supplements. Tissue Eng Part A 2010; 16(2): 431-40.
24. Zhang P. Effects of naringin on the proliferation and osteogenic differentiation of human bone mesenchymal stem cell. Eur J Pharmacol, 2009;
607(1-3): 1-5.
25. Gong Z. Influence of culture medium on smooth muscle cell differentiation from human bone marrow-derived mesenchymal stem cells. Tissue Eng Part A 2009; 15(2): 319-30.
26. McClure SR. The effect of variable waveform low-intensity pulsed ultrasound in a fourth metacarpal osteotomy gap model in horses.
Ultrasound Med Biol 2010; 36(8): 1298-305.
27. Narita Y. Effects of transforming growth factor- beta 1 and ascorbic acid on differentiation of human bone-marrow-derived mesenchymal stem cells into smooth muscle cell lineage. Cell Tissue Res 2008;
333(3): 449-59.
28. Qian Z, Stoodley P, Pitt WG. Effect of low- intensity ultrasound upon biofilm structure from confocal scanning laser microscopy observation.
Biomaterials 1996; 17(20): 1975-80.
29. Saito M. Effect of low- and high-intensity pulsed ultrasound on collagen post-translational modifications in MC3T3-E1 osteoblasts. Calcif Tissue Int 2004; 75(5): 384-95.
30. Jaiswal RK. Adult human mesenchymal stem cell differentiation to the osteogenic or adipogenic lineage is regulated by mitogen-activated protein kinase. J Biol Chem 2000; 275(13): 9645-52.
31. Hildebrandt C, Buth H, Thielecke H. Influence of cell culture media conditions on the osteogenic differentiation of cord blood-derived mesenchymal stem cells. Ann Anat 2009; 191(1): 23-32.
32. Costa-Pinto AR. Adhesion, proliferation, and osteogenic differentiation of a mouse mesenchymal stem cell line (BMC9) seeded on novel melt-based chitosan/polyester 3D porous scaffolds. Tissue Eng Part a 2008; 14(6): 1049-57.
33. MQK, SM B, WD J. Effect of wave diffraction on the measurement of ultrasonic power output using the radiation force method with a plane reflecting target angled at 45°. Meas Sci Technol 1992; 3: 222- 7.
34. Gordanove. Stem Cell Culture Method Mac Grow Hill Press 2008.
35. Eslaminejad NS, Hosseini RH. Expression of the 1.2 surface antigen increases significantly during the murine mesenchymal stem cells cultivation period.
Dev Growth Differ 2007; 49: 351-64.
36. Malizos KN. Low-intensity pulsed ultrasound for bone healing: An overview. Injury, Int. J. Care Injured 2006; 37: S56-62.
37. Zhou S. Molecular Mechanisms of Low Intensity Pulsed Ultrasound in Human Skin Fibroblasts. The journal of biological chemistry 2004; 279(52):
54463–9.
38. Yang KH, Wang SJ. Exposure to low-intensity ultrasound increases aggrecan gene expression in a rat femur fracture model. J Orthop Res 1996; 14:
802-9.
39. Chapman IMN, Tucker S. Ultrasound-induced changes in the rates of influx and efflux of potassium ions in rat thymocytes in vitro. Ultrasound Med Biol 1980; 6: 47-58.
40. Ryaby JT, Bendo JA. Low intensity pulsed ultrasound increases calcium incorporation in both differentiating cartilage and bone cell cultures. Trans Orthop Res Soc 1989; 14:15.
41. Deyne PGD, Kirsch-Volders M. In Vitro Effects of Therapeutic Ultrasound on the Nucleus of Human Fibroblasts. Physical Therapy 1995; 75(7): 629- 34.
