Penetapan Kadar Mineral Kalsium, Natrium dan Magnesium Pada Daun Salam (Eugenia polyantha Wight) Secara Spektrofotometri Serapan Atom

(1)

(2)

Lampiran 2. Sampel yang digunakan

Gambar 2. Daun Salam

Gambar 1. Pohon Salam

(3)

Lampiran 3. Gambar Alat yang digunakan

Gambar 4. Alat Spektrofotometer Serapan Atom Hitachi Z-2000

(4)

Lampiran 4. Hasil Analisis Kualitatif

Gambar 6. Kristal Kalsium Sulfat (perbesaran 10x10)

Gambar 7. Kristal Natrium Pikrat (Perbesaran 10x10)

Gambar 8. Endapan Merah Terang (+ magnesium)

Kristal Kalsium Sulfat

(5)

Lampiran 5. Bagan Alir Proses Destruksi Kering

1. Bagan Alir Proses Destruksi Sampel ( Daun Salam Segar )

Dibersihkan dari pengotoran

Di siram dengan akua demineralisata kemudian ditiriskan dan di keringkan dengan cara diangin-anginkan dan dipotong-ptong kira-kira ± 1 cm

Di haluskan dengan blender

Ditimbang sebanyak 10 g didalam krus porselen Di arangkan di atas hot plate

Diabukan di tanur dengan temperatur awal 100° C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan menjadi 500° C dengan interval 25° C setiap 5 menit

Dilakukan selama 48 jam dan dibiarkan dingin dalam desikator

di tambahkan 5 ml HNO3 (1:1) diuapkan di atas hot plate

di masukkan kembali kedalam tanur dengan tempe-ratur awal 100° C dan perlahan-lahan tempe-

ratur dinaikkan menjadi 500° C dengan interval 25° C setiap 5 menit

dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin dalam desikator

500g Daun Salam Segar

Sampel yang telah dihaluskan

(6)

Lampiran 5. (Lanjutan)

2. Bagan Alir Proses Destruksi Sampel (Daun Salam Rebus)

Dibersihkan dari pengotoran dan di cuci dengan air mengalir,

Dipanaskan air hingga mendidih dan direbus daun salam segar selama 7 menit

Diangkat dan ditiriskan

Di keringkan dengan cara diangin-anginkan Dihaluskan dengan blender

Ditimbang sebanyak 10 g didalam krus porselen Di arangkan diatas hot plate

Diabukan di tanur dengan temperatur awal 100° C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan menjadi 500° C dengan interval 25° C setiap 5 menit Dilakukan selama 48 jam dan dibiarkan dingin dalam desikator

di tambahkan 5 ml HNO3 (1:1) diuapkan di atas hot plate

di masukkan kembali kedalam tanur dengan temperatur awal 100° C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan menjadi 500° C dengan interval 25° C setiap 5 menit

dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin dalam desikator

500g Daun Salam Segar

Sampel yang telah dihaluskan

(7)

Lampiran 6. Bagan Alir Pembuatan Larutan Sampel

Dilarutkan dengan 5 mL HNO3 (1:1) dalam krus Dipindahkan ke dalam labu tentukur 50 mL Dibilas krus porselen sebanyak tiga kali

dengan aquademineralisata dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda

Disaring dengan menggunakan kertas saring Whatman No. 42

Dibuang 5 mL untuk menjenuhkan kertas saring

Dilakukan pengujian kualitatif

Dilakukan pengujian kuantitatif dengan Spektrofotometer serapan Atom pada λ 422,7 nm untuk logam kalsium, λ 589,0 nm untuk logam natrium, dan λ 285,2 nm untuk magnesium

Sampel Hasil Destruksi

Larutan Sampel

(8)

Lampiran 7. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Kalsium dan Perhitungan Persamaan Garis Regresi Kalsium dan koefisien korelas (r)

1. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Kalsium No Konsentrasi (µg/ml) (X) Absorbansi (Y)

1 0,000 0,0000

2 2,000 0,0975

3 4,000 0,1764

4 6,000 0,2716

5 8,000 0,3566

6 10,000 0,4426

2. Perhitungan Persamaan Garis Regresi Kalsium

No. X Y XY X2 Y2

1. 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,00000000 2. 2,0000 0,0975 0,1950 4,0000 0,00950625 3. 4,0000 0,1764 0,7056 16,0000 0,03111696 4. 6,0000 0,2716 1,6296 36,0000 0,07376656 5. 8,0000 0,3566 2,8528 64,0000 0,12716356 6. 10,0000 0,4426 4,4260 100,0000 0,19589476

∑

30 1,3447 9,809 220 0,43744809 X_{= 5}_Y_{= 0,22411}

a = ∑�� −(∑�)(∑�)/�

∑x2−(∑�)2/n

=

9,809 − (30)(1,3447 )/6

220 − (30)2/6

=

9,809 –6,7235

(9)

=

3,0855

70

a

=

0,0440785 b

= y – ax

= 0,22411 - (0,0440785) (5) = 0,0037175

Maka persamaan garis regresinya adalah Y= ax + b

Y= 0,0440785X + 0,0037175 Maka koefisien korelasi (r):

r = �.∑�� −(∑�)(∑�)

�[�.(∑�2)−(∑�)2)][�.(∑�2)−(∑�)2)

=

(6�9,809)−(30)(1,3447 )

�[6�220−(30)2)][6�0,43744809−(1,3447 )2)

=

18,513

�(420)(0,81647045 )

=

18,513 √342,917589

=

18,513

18,518

(10)

Lampiran 8. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Natrium dan Perhitungan Persamaan Garis Regresi Natrium dan Koefisien Korelasi (r)

1. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Natrium No Konsentrasi (µg/ml) (X) Absorbansi (Y)

1 0,000 0,0000

2 0,200 0,0099

3 0,400 0,0186

4 0,600 0,0284

5 0,800 0,0369

6 1,000 0,0450

2. Perhitungan Persamaan Garis Regresi Natrium

No. X Y XY X2 Y2

1. 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,00000000 2. 0,2000 0,0099 0,00198 0,0400 0,00009801 3. 0,4000 0,0186 0,00744 0,1600 0,00034596 4. 0,6000 0,0284 0,01704 0,3600 0,00080656 5. 0,8000 0,0369 0,02952 0,6400 0,00136161 6. 1,0000 0,0450 0,0450 1,0000 0,002025

∑ 3 0,1388 0,10098 2,2 0,00463714 X_{= 0,5}_Y_{= 0,02313}

a = ∑�� −(∑�)(∑�)/�

∑x2−(∑�)2/n

=

0,10098 − (3)(0,1388 )/6

2,2− (3)2/6

=

0,10098 –0,0694

(11)

Lampiran 8. (Lanjutan)

=

0,03158

0,7

a

=

0,0451143 b

= y – ax

= 0,02313 - (0,0451143) (0,5) = 0,0005728

r = �.∑�� −(∑�)(∑�)

�[�.(∑�2)−(∑�)2)][�.(∑�2)−(∑�)2)

=

(6�0,10098 )−(3)(0,1388 )

�[6�2,2−(3)2)][6�0,00463714−(0,1388 )2)

=

0,18948 �(4,2)(0,0085574 )

=

0,18948 √0,03594108

=

0,18948

0,18958

(12)

Lampiran 9. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Magnesium dan Perhitungan Persamaan Garis Regresi Magnesium dan Koefisien Korelasi (r)

1. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Magnesium No Konsentrasi (µg/ml) (X) Absorbansi (Y)

1 0,000 0,0000

2 0,500 0,2229

3 1,000 0,4284

4 1,500 0,6065

5 2,000 0,8317

6 2,500 1,0133

2. Perhitungan Persamaan Garis Regresi Magnesium

No. X Y XY X2 Y2

1. 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,00000000 2. 0,5000 0,2229 0,11145 0,2500 0,04968441 3. 1,0000 0,4284 0,4284 1,0000 0,18352656 4. 1,5000 0,6065 0,90975 2,2500 0,36784225 5. 2,0000 0,8317 1,6634 4,0000 0,69172489 6. 2,5000 1,0133 2,53325 6,2500 1,02677689

∑

7,5 3,1028 5,64625 13,75 2,319555 X _{= 1,25}_Y_{= 0,51713}

a = ∑�� −(∑�)(∑�)/�

∑x2−(∑�)2/n

=

5,64625 – (7,5)(3,1028 )/6

13,75 − (7,5)2/6

=

5,64625 –3,8785

(13)

Lampiran 9. (Lanjutan)

=

1,76775

4,375

a

=

0,4040571 b

= y – ax

= 0,51713 - (0,4040571) (1,25) = 0,0120619

r = �.∑�� −(∑�)(∑�)

�[�.(∑�2)−(∑�)2)][�.(∑�2)−(∑�)2)

=

(6�5,64625 )−(7,5)(3,1028)

�[6�13,75−(7,5)2)][6�2,319555−(3,1028 )2)

=

10,6065

�(26,25)(4,28993216 )

=

10,6065 √112,6107192

=

10,6065

10,6118

(14)

Lampiran 10. Hasil Analisis Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel

A.Sampel Daun Salam Segar

1. Hasil Analisis Kadar Kalsium

No Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi (µg/ml)

Kadar (mg/100g)

1 10,0175 0,1726 3,8314 764,9413

2 10,0192 0,1723 3,8246 763,4541

3 10,0176 0,1723 3,8246 763,5761

4 10,0163 0,1725 3,8291 764, 5737

5 10,0182 0,1722 3,8223 763, 0712

6 10,0196 0,1719 3,8155 761,6072

2. Hasil Analisis Kadar Natrium

No Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

1 10,0175 0,0277 0,6012 30,0074

2 10,0192 0,0276 0,5990 29,8926

3 10,0176 0,0277 0,6012 30,0071

4 10,0163 0,0278 0,6035 30,1258

5 10,0182 0,0279 0,6057 30,2299

6 10,0196 0,0280 0,6079 30,3355

3. Hasil Analisis Kadar Magnesium

No Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

1 10,0175 0,5786 1,4021 139,9650

2 10,0192 0,5781 1,4009 139,8215

(15)

4 10,0163 0,5788 1,4026 140,0052

5 10,0182 0,5786 1,4021 139,9818

6 10,0196 0,5787 1,4024 139,9657

B.Sampel Daun Salam Rebus

1. Hasil Analisis Kadar Kalsium

No Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

1 10,0054 0,1529 3,3844 676, 5146

2 10,0145 0,1538 3,4049 679, 9940

3 10,0034 0,1538 3,4049 680,7485

4 10,0097 0,1535 3,3981 678, 9614

5 10,0154 0,1535 3,3981 678, 5750

6 10,0297 0,1531 3,3890 675,7929

2. Hasil Analisis Kadar Natrium

No Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

1 10,0054 0,0226 0,4882 24,3968

2 10,0145 0,0227 0,4904 24,4844

3 10,0034 0,0229 0,4949 24,7365

4 10,0097 0,0228 0,4926 24,6061

5 10,0154 0,0227 0,4904 24,4822

6 10,0297 0,0228 0,4926 24,5570

3. Hasil Analisis Kadar Magnesium

No Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

(16)

2 10,0172 0,5035 1,2163 121,4211

3 10,0034 0,5031 1,2153 121,4887

4 10,0097 0,5032 1,2155 121,4322

5 10,0154 0,5028 1,2145 121,2632

(17)

Lampiran 11. Contoh perhitungan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium Dalam Sampel

A. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium pada Daun Salam Segar

1. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium

Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0175 gram Absorbansi (Y) = 0,1726

Persamaan Regresi:Y= 0,0440785X + 0,0037175

X = 0,1726−0,0037175

0,0440785 = 3,8314 µg/ml

Konsentrasi Kalsium = 3,8314 µg/ml

(g) Sampel Berat

n pengencera Faktor

x (ml) Volume x

(µg/ml) i

Konsentras

Kalsium

Kadar =

=

g 10,0175

400 x ml 50 x µg/ml 3,8314

= 7649, 413 µg/g = 764, 9413 mg/100g

2. Contoh Perhitungan Kadar Natrium

X = 0,0277−0,0005728

0,0451143 = 0,6012 µg/ml

(18)

Lampiran 11. (Lanjutan) (g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras Natrium

Kadar =

= g 10,0175 100 x ml 50 x µg/ml 0,6012

= 300,074 µg/g = 30,0074 mg/100g 3. Contoh Perhitungan Kadar Magnesium

X = 0,5786−0,0120619

0,4040571 = 1,4021 µg/ml

Konsentrasi Magnesium = 1,4021 µg/ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras Magnesium

Kadar =

= g 10,0175 200 x ml 50 x µg/ml 1,4021

= 1399,650 µg/g = 139,9650 mg/100g

(19)

Lampiran 11. (Lanjutan)

B. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium pada Daun Salam Rebus

1. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium

X = 0,1529−0,0037175

0,0440785 = 3,3844 µg/ml

Konsentrasi Kalsium = 3,3844 µg/ml

(g) Sampel Berat

n pengencera Faktor

x (ml) Volume x

(µg/ml) i

Konsentras

Kalsium

Kadar =

=

g 10,0054

400 x ml 50 x µg/ml 3,3844

= 6765, 146 µg/g = 676, 5146 mg/100g

2. Contoh Perhitungan Kadar Natrium

X = 0,0226−0,0005728

0,0451143 = 0,4882 µg/ml

(20)

Lampiran 11. (Lanjutan) (g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras Natrium

Kadar =

= g 10,0054 100 x ml 50 x µg/ml 0,4882

= 243, 968 µg/g = 24, 3968 mg/100g 3. Contoh Perhitungan Kadar Magnesium

X = 0,5033−0,0120619

0,4040571 = 1,2158 µg/ml

Konsentrasi Magnesium = 1,2158 µg/ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras Magnesium

Kadar =

= g 10,0178 200 x ml 50 x µg/ml 1,2158

= 1213,639 µg/g = 121,3639 mg/100g

(21)

Lampiran 12. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium pada Sampel

1. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium pada Daun Salam Segar

No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 764,9413 1,404 1,971216

2 763,4541 -0,0832 0,00692224

3 763, 5761 0,0388 0,00150544

4 764, 5737 1,0364 1,07412496

5 763, 0712 -0,4661 0,21724921

6 761, 6072 -1,9301 3,72528601

Σ 4581, 2236 6,99630386

�� 763, 5373

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

6,99630386

6−1

= 1,18290

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =6, dk (n-1) = 5 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 2,5706.

Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung = n SD X Xi / ) ( −

thitung1 =

6 / 1,18290 404 , 1 = 0,482917 4041 , 1

= 2,9073 (ditolak)

thitung2 = 0,482917 0,0832 -= 0,1722 thitung3 = 0,482917 0388 , 0 = 0,0803

thitung4 =

(22)

thitung6 =

0,482917 9301 , 1

−

= 3,9967 (ditolak)

Data ke-1 dan ke-6 ditolak, oleh karena itu perhitungan diulangi dengan cara yang sama tanpa mengikutsertakan data ke-1 dan ke-6.

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

2 763, 4541 -0,2147 0,04609609

3 763, 5761 -0,0927 0,00859329

4 764, 5737 0,9049 0,81884401

5 763, 0712 -0,5976 0,35712576

Σ 3054, 6751 1,23065915

�� 763, 6688

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

1,23065915

4−1

= 0,640484

Data diterima jika thitung ≤ ttabel

thitung = n SD X Xi / ) ( −

thitung2 =

4 / 0,640484 2147 , 0 − = 320242 , 0 2147 , 0 − = 0,6704

thitung3 =

(23)

Lampiran 12. (Lanjutan)

thitung4 =

320242 ,

0

9049 , 0

= 2,8257

thitung5 =

320242 ,

0

5976 , 0

−

= 1,8650

Dari hasil perhitungan di atas diperoleh semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Maka kadar kalsium sebenarnya dalam daun salam segar µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 763, 6688 ± (3,1824 x 0,640484 /√4) = (763, 6688 ± 1,019138) mg/100g.

2. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium pada Daun Salam Rebus

No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 676,5146 -1,9165 3,67297225

2 679,9940 1,5629 2,44265641

3 680,7485 2,3174 5,37034276

4 678,9614 0,5303 0,28121809

5 678, 5750 0,1439 0,02070721

6 675,7929 -2,6382 6,96009924

Σ 4070, 5864 18,74799596

�� 678,4311

SD =

( )

1 -n

X

-Xi 2

∑

=

�

18,74799596

6−1

(24)

Lampiran 12. (Lanjutan)

Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung =

n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 6 / 1,9363882 9165 , 1 − = 7905272 , 0 9165 , 1 − = 2,4243 thitung2 = 7905272 , 0 1,5629 = 1,9770

thitung3 =

7905272 , 0 3174 , 2

= 2,9314 (ditolak)

thitung4 = 7905272 , 0 5303 , 0 = 0,6708

thitung5 =

7905272 , 0 1439 , 0 = 0,1820 thitung6 = 7905272 , 0 6382 , 2 −

= 3,3372 (ditolak)

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 676,5146 -1,9967 3,98681089

2 679,9940 1,4827 2,19839929

4 678,9614 0,4501 0,20259001

5 678,5750 0,0637 0,00405769

Σ 2714, 045 6,39185788

�� 678,5113

SD =

( )

(25)

=

�

6,39185788

4−1

= 1,4596641

thitung =

n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 4 / 1,4596641 9967 , 1 − = 7298320 , 0 9967 , 1 − = 2,7358 thitung2 = 7298320 , 0 4827 , 1 = 2,0316

thitung4 =

7298320 , 0 4501 , 0 = 0,6167 thitung5 = 7298320 , 0 0637 , 0 = 0,0873

Maka kadar kalsium sebenarnya dalam daun salam rebus µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

(26)

Lampiran 13. Perhitungan Statistik Kadar Natrium pada Sampel

1. Perhitungan Statistik Kadar Natrium pada Daun Salam Segar

No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 30,0074 -0,0923 0,00851929

2 29,8926 -0,2071 0,04289041

3 30,0071 -0,0926 0,00857476

4 30,1258 0,0261 0,00068121

5 30,2299 0,1302 0,01695204

6 30,3355 0,2358 0,05560164

Σ 180,5983 0,13321935

�� 30,0997

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,13321935

6−1

=0,163229

thitung1 =

6 / 0,163229 0923 , 0 − = 0666380 , 0 0923 , 0 − = 1,3850 thitung2 = 0666380 , 0 0,2071

-= 3,1078 (ditolak)

thitung3 =

(27)

thitung4 = 0666380 , 0 0261 , 0 = 0,3916 thitung5 = 0666380 , 0 1302 , 0 = 1,9538

thitung6 = 0666380 , 0 2358 , 0

= 3,5385 (ditolak)

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 30,0074 -0,0851 0,00724201

3 30,0071 -0,0854 0,00729316

4 30,1258 0,0333 0,00110889

5 30,2299 0,1374 0,01887876

Σ 120,3702 0,03452282

�� 30,0925

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,03452282

4−1

= 0,107274

(28)

thitung1 = 4 / 0,107274 0851 , 0 − ₌ 053637 , 0 0851 , 0 − = 1,5865

thitung3 =

053637 , 0 0854 , 0 − = 1,5921

Lampiran 13. (Lanjutan)

thitung4 = 053637 , 0 0333 , 0 = 0,6208

thitung5 =

053637 , 0 1374 , 0 = 2,5616

Maka kadar natrium sebenarnya dalam daun salam segar µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 30,0925 ± (3,1824 x 0,107274 /√4) = (30,0925± 0,170694) mg/100g.

2. Perhitungan Statistik Kadar Natrium pada Daun Salam Rebus

No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 24,3968 -0,147 0,021609

2 24,4844 -0,0594 0,00352836

3 24,7365 0,1927 0,03713329

4 24,6061 0,0623 0,00388129

5 24,4822 -0,0616 0,00379456

6 24,5570 0,0132 0,00017424

Σ 147,263 0,07012074

�� 24,5438

SD =

( )

(29)

=

�

0,07012074

6−1

= 0,118423

Lampiran 13. (Lanjutan)

n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 6 / 0,118423 147 , 0 − = 048345 , 0 147 , 0 −

= 3,0406 (ditolak)

thitung2 = 048345 , 0 0,0594 -= 1,2286 thitung3 = 048345 , 0 1927 , 0

= 3,9859 (ditolak)

thitung4 = 048345 , 0 0623 , 0 = 1,2886

thitung5 =

048345 , 0 0616 , 0 − = 1,2741 thitung6 = 048345 , 0 0132 , 0 = 0,2730

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 24,4844 -0,048 0,002304

2 24,6061 0,0737 0,00543169

4 24,4822 -0,0502 0,00252004

5 24,5570 0,0246 0,00060516

Σ 98,1297 0,01086089

(30)

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,01086089

4−1

= 0,060169

Data diterima jika thitung≤ ttabel

thitung = n SD X Xi / ) ( −

thitung2 =

4 / 0,060169 048 , 0 − = 030084 , 0 048 , 0 − = 1,5955

thitung4 =

030084 , 0 0737 , 0 = 2,4498 thitung5 = 030084 , 0 0502 , 0 − = 1,6686 thitung6 = 030084 , 0 0246 , 0 = 0,8177

Maka kadar natrium sebenarnya dalam daun salam rebus µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

(31)

Lampiran 14. Perhitungan Statistik Kadar Magnesium pada Sampel

1. Perhitungan Statistik Kadar Magnesium pada Daun Salam Segar

No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 139,9650 0,0345 0,00119025

2 139,8215 -0,109 0,011881

3 139,8439 -0,0866 0,00749956

4 140,0052 0,0747 0,00263169

5 139,9818 0,0513 0,00558009

6 139,9657 0,0352 0,00123904

Σ 839,5831 0,03002163

�� 139,9305

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,03002163

6−1

= 0,077487

thitung1 =

6 / 0,077487 0345 , 0 = 031634 , 0 0345 , 0 = 1,0906 thitung2 = 031634 , 0 0,109

(32)

thitung3 = 031634 , 0 0866 , 0 −

= 2,7376 (ditolak)

thitung4 = 031634 , 0 0513 , 0 = 1,6217

thitung5 =

031634 , 0 0747 , 0 = 2,3614

thitung6 = 031634 , 0 0352 , 0 = 1,1128

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 139,9650 -0,0144 0,00020736

4 139,9818 0,0024 0,00000576

5 140,0052 0,0258 0,00066564

6 139,9657 -0,0137 0,00018769

Σ 559,9177 0,00106645

�� 139,9794

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,00106645

4−1

= 0,018854

(33)

thitung = n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 4 / 0,018854 0144 , 0 − = 009427 , 0 0144 , 0 − = 1,5275 thitung4 = 009427 , 0 0024 , 0 = 0,2546

Lampiran 14. (Lanjutan)

thitung5 =

009427 , 0 0258 , 0 = 2,7368 thitung6 = 009427 , 0 0137 , 0 − = 1,4533

Maka kadar magnesium sebenarnya dalam daun salam segar µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 139,9747 ± (3,1824 x 0,018854 /√4) = (139,9747± 0,03) mg/100g.

2. Perhitungan Statistik Kadar Magnesium pada Daun Salam Rebus

No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 121,3639 -0,0402 0,00161604

2 121,4211 0,017 0,000289

3 121,4887 0,0846 0,00715716

4 121,4322 0,0281 0,00078961

5 121,2632 -0,1409 0,01985281

6 121,4559 0,0518 0,00268324

Σ 728,425 0,03243222

(34)

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,03243222

6−1

= 0,0805385

Lampiran 14. (Lanjutan)

n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 6 / 0,0805385 0402 , 0 − = 032879 , 0 0402 , 0 − = 1,2226 thitung2 = 032879 , 0 017 , 0 = 0,5170

thitung3 =

032879 , 0 0846 , 0

= 2,5730 (ditolak)

thitung4 = 032879 , 0 0281 , 0 = 0,8546

thitung5 =

032879 , 0 1409 , 0 −

= 4,285 (ditolak)

thitung6 = 032879 , 0 0518 , 0 = 1,5754

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 121,3639 -0,0544 0,00295936

2 121,4211 0,0028 0,00000784

4 121,4322 0,0139 0,00019321

(35)

Σ 485,6731 0,00457417

�� 121,4183

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,00457417

4−1

= 0,0390477

thitung = n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 4 / 0,0390477 0,0554 -= 0,019524 0,0554 = 2,7863 thitung2 = 0,019524 0,0028 = 0,1434 thitung4 = 0,019524 0,0139 = 0,719

thitung6 =

019524 , 0 0376 , 0 = 1,9258

Maka kadar magensium sebenarnya dalam daun salam rebus µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

(36)

Lampiran 15. Persentase penurunan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Daun Salam Segar dan Daun Salm Rebus

1. Kalsium

Kadar kalsium Daun Salam Segar adalah 763,6688 mg/100g Kadar kalsium Daun Salam Rebus adalah 678,5113 mg/100g Persentase penurunan Kadar Kalsium Daun Salam adalah :

�� (�� − ��)�� − �� (�� − ��)��

�� (�� − ��) � 100%

(763,6688−678,5113)

763,6688 � 100% = 11,15 %

2. Natrium

Kadar natrium Daun Salam Segar adalah 30,0925 mg/100g Kadar kalsium Daun Salam Rebus adalah 24,5324 mg/100g Persentase penurunan Kadar natrium Daun Salam adalah :

�� (�� − ��)�� − �� (�� − ��)��

�� (�� − ��) � 100%

(30,0925 −24,5324)

30,0925 �100% = 18,48 %

3. Magnesium

Kadar Magnesium Daun Salam Segar adalah139,9747 mg/100g Kadar Magnesium Daun Salam Rebus adalah mg/100g

(37)

�� (�� − ��)�� − �� (�� − ��)��

�� (�� − ��) � 100%

(139,9747−121,4183)

139,9747 � 100% = 13,25%

Lampiran 16. Perhitungan Uji Akurasi Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel Daun Salam

A.Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Kalsium dalam Daun Salam

Berat sampel rata-rata uji recovery = 10,0202 gram Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A):

C*A =

�� ℎ��

�� −�� x ml yang di tambahkan

= 1000 µg/ml

10,0202 � x 8 ml

= 798,3872 µg/g = 79,8387 mg/100 g

1) Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0254 gram Absorbansi (Y) = 0,1898

Persamaan regresi: Y = 0,0440785 X + 0,0037175

X= 0,1898 − 0,0037175

0,0440785 = 4,2216 µg /ml

Konsentrasi Kalsium setelah ditambahkan larutan baku = 4,2216 µg /ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Kalsium

Kadar =

g 10,0254 400 x ml 50 x µg/ml 4,2216 =

(38)

= 842, 1808 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 763, 6688 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 842, 1808 mg/100g

Maka % Perolehan Kembali Kalsium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 79,8387 mg/100g 763,6688) -(842,1808 x 100%

= 98,33 %

X= 0,1899 − 0,0037175

0,0440785 = 4,2239 µg /ml

Kadar =

g 10,0217 400 x ml 50 x µg/ml 4,2239 =

= 8429,508 µg /g = 842,9508 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 763, 6688 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 842,9508 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Kalsium = CF-CA

C*A

(39)

= mg/100g 79,8387 mg/100g 763,6688) -(842,9508 x 100%

= 99,30 %

Lampiran 16. (Lanjutan)

Persamaan regresi: 0,0440785 X + 0,0037175

X= 0,1896 − 0,0037175

0,0440785 = 4,2171 µg /ml

Kadar =

g 10,0135 400 x ml 50 x µg/ml 4,2171 =

= 8422,829 µg/g = 842, 2829 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 763, 6688 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 842, 2829 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Kalsium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 79,8387 mg/100g 6688) 763, -2829 (842, x 100%

= 98,46 %

B.Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Natrium dalam Daun Salam

(40)

C*A =

�� ℎ��

= 1000 µg/ml

10,0202 � x 0,3 mL

= 29,939 µg/g = 2,9939 mg/100 g

1. Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0254 gram Absorbansi (Y) = 0,0303

Lampira 16. (Lanjutan)

X= 0,0303 − 0,0005728

0,0451143 = 0,6589 µg /ml

Konsentrasi Natrium setelah ditambahkan larutan baku = 0,6589 µg /ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Natrium

Kadar =

g 10,0254 100 x ml 50 x µg/ml 0,6589 =

= 328,615 µg/g = 32,8615 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 30,0925 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 32,8615 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Natrium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 2,9939 mg/100g 30,0925) -(32,8615 x 100%

= 92,48 %

(41)

X= 0,0304 − 0,0005728

0,0451143 = 0,6611 µg /ml

Konsentrasi Natrium setelah ditambahkan larutan baku = 0,6611 µg /ml

Lampiran 16. (Lanjutan)

Kadar =

g 10,0217 100 x ml 50 x µg/ml 0,6611 =

= 329, 834µg/g = 32, 9834 mg/100g

C*A

x 100% = mg/100g 2,9939 mg/100g 30,0925) -(32,9834 x 100%

= 96,55 %

X= 0,0305 − 0,0005728

0,0451143 = 0,6633 µg /ml

(42)

Kadar =

g 10,0135 100 x ml 50 x µg/ml 0,6633 =

= 331,203 µg/g = 33,1203 mg/100g

Lampiran 16. (Lanjutan)

C*A

x 100% = mg/100g 2,9939 mg/100g 30,0925) -(33,1203 x 100%

= 101,13 %

C.Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Magnesium dalam Daun

Salam

Berat sampel rata-rata uji recovery = 10,0202 gram Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A):

C*A =

�� ℎ��

= 1000 µg/ml

10,0202 � x 1,4 mL

= 139,717 µg/g = 13,9717 mg/100 g

(43)

Persamaan regresi: Y = 0,404057142 X + 0,012061904 X= 0,6377 − 0,012061904

0,404057142 = 1,5484 µg /ml

Konsentrasi Magnesium setelah ditambahkan larutan baku = 1,5484 µ g /ml

Lampiran 16. (Lanjutan)

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Magnesium

Kadar =

g 10,0254 200 x ml 50 x µg/ml 1,5484 =

= 1544,477 µg/g = 154,4477 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 139,9747 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 154,4477 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Magnesium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 13,9717 mg/100g 139,9747) -(154,4477 x 100%

= 103,59 %

0,404057142 = 1,5476 µg /ml

(44)

Kadar =

g 10,0217 200 x ml 50 x µg/ml 1,5476 =

= 1544,248 µg/g = 154,4248 mg/100g

Lampiran 16. (Lanjutan)

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 139,9747 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 154,4248 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Magnesium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 13,9717 mg/100g 139,9747) -(154,4248 x 100%

= 103,42 % 3. Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0135 gram Absorbansi (Y) = 0,6387

0,404057142 = 1,5509 µg /ml

Konsentrasi Magnesium setelah ditambahkan larutan baku = 1,5509 µ g /ml

Kadar =

10,0135g 200 x ml 50 x µg/ml 1,5509 =

= 1548,809 µg/g = 154,8809 mg/100g

(45)

Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 154,8809 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Magnesium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 13,9717 mg/100g 139,9747) -(154,8809 x 100%

= 106,69 %

Lampiran 17. Perhitungan Uji Presisi Kadar Mineral Kalsiun, Natrium dan Magnesium dalam Daun Salam

1. Perhitungan Uji Presisi Kadar Kalsium

No % Kadar Perolehan Kembali(Xi) (Xi-X ₎ (Xi-X ₎2

1 98,33 -0,37 0,1369

2 99,30 0,6 0,36

3 98,46 0,24 0,0576

∑ 296,09 0,5545

X 98,70

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 3 0,5545 − = 0,5265 RSD = x

X SD

_ 100%

= 100%

70 , 98 5265 , 0 x

= 0,5334 %

2. Perhitungan Uji Presisi Kadar Natrium

(46)

1 92,48 -4,24 17,9776

2 96,55 -0,17 0,0289

3 101,13 4,41 19,4481

∑ 290,16 37,4546

X 96,72

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 3 37,4546 −

= 4,3275

RSD = x X SD

_ 100%

= 100%

72 , 96 3275 , 4 x

= 4,47 %

3. Perhitungan Uji Presisi Kadar Magnesium

No % Kadar Perolehan Kembali(Xi) (Xi-X ₎ (Xi-X ₎2

1 103,59 -0,98 0,9604

2 103,42 -1,15 1,3225

3 106,69 2,12 4,4944

∑ 313,7 6,7773

X 104,57

SD =

( )

(47)

= 100% 57 , 104 840830 , 1 x

= 1,7603 %

Lampiran 18. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) pada Kalsium, Natrium dan Magnesium

1. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi mineral kalsium

Y = 0,04407X + 0,0037 Slope = 0,04407

No

Konsentrasi (µg /ml)

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 0,0000 _0,0037 _-0,0037 _0,00001369

2 2,0000 0,0975 _0,09184 _0,00566 _0,0000320356 3 4,0000 0,1764 _0,17998 _-0,00358 _0,0000128164 4 6,0000 0,2716 _0,26812 _0,00348 _0,0000121104 5 8,0000 0,3566 _0,35626 _0,00034 _0,0000001156

6 10,0000 0,4426 _0,4444 _-0,0018 _0,00000324

∑ 30 _0,000074008

SB=

(

)

2 2 − −

∑

n Yi Y = 4 8 0,00007400 = 0,0043014

Batas deteksi (LOD) =

(48)

= 0,2928 µg/ml Batas kuantitasi (LOQ) =

slope SB x 10 = 0,04407 0,0043014 10 x

= 0,9760 µg/ml

2. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi mineral Natrium

Y = 0,04511X + 0,0005 Slope = 0,04511

No

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 0,0000 _0,0005 _-0,0005 _0,00000025

2 0,2000 0,0099 _0,009522 _0,000378 _{0,000000142884} 3 0,4000 0,0186 _0,018544 _0,000056 _{0,000000003136} 4 0,6000 0,0284 _0,027566 _0,00834 _{0,000000695556} 5 0,8000 0,0369 _0,36588 _0,000312 _{0,000000097344}

6 1,0000 0,0450 _0,4561 _-0,00061 _0,0000003721

∑ _{0,00000156102}

SB=

(

)

2 2 − −

∑

n Yi Y = 4 102 0,00000156 = 0,00062470

slope SB x 3 = 0,04511 0,00062470 3 x

(49)

Batas kuantitasi (LOQ) = slope SB x 10 = 0,04511 0,00062470 10 x

= 0,1385 µg/ml

3. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi mineral magnesium

Y = 0,40405X + 0,0120 Slope = 0,40405

No

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,000 0,0000 _0,0120 _-0,0120 _0,000144

2 0,500 0,2229 _0,214025 _0,008875 _{0,000078765625}

3 1,000 0,4284 _0,41605 _0,01235 _0,0001525225

4 1,500 0,6065 _{0,618075 -0,011575 0,000133980625}

5 2,000 0,8317 _0,8201 _0,0116 _0,00013456

6 2,500 1,0133 _{1,022125 -0,008825 0,000077880625}

∑ _{0,000721709375}

SB=

(

)

2 2 − −

∑

n Yi Y = 4 9375 0,00072170 = 0,01343232

slope SB x 3 = 0,40405 0,01343232 3 x

(50)

Batas kuantitasi (LOQ) =

slope SB x

10

=

0,40405 0,01343232 10 x

= 0,3324 µg/ml

Lampiran 19. Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalsium dalam Sampel Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus

No Daun Salam Segar Daun Salam Rebus

1 X1 = 763,6688 X2 = 678,5113

2 S1 = 0,6404 S2 = 1,4596

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2).

H0 : σ1 = σ2

H1 : σ1 ≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,05/2, (3,3)) adalah = 15,44

- Daerah kritis penolakan: hanya jika F0 ≥ 15,44

F0=

S12

S22

F0=

0,64042 1,45962

F0=0,41011216

2,13043216

(51)

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga

disimpulkan bahwa σ1 = σ2.

- Kemudian dilanjutkan dengan uji beda rata -rata menggunakan distribusi t. - Simpangan bakunya adalah:

Sp =

�

(n1− 1)S12� + �(n2− 1)S22�

n₁+ n2−2

=

�

�(4 − 1) 0,41011216� + �(4 − 1) 2,13043216�

4 + 4 − 2

=

�

7,62163296

6 = 1,12706

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 95% dengan nilai α = 5% t0,05/2 = ± 2,4469 untuk df = 4 + 4– 2 = 6

- Daerah kritis penerimaan: – 2,4469 ≤ t0≤ 2,4469 - Daerah kritis penolakan: t0< – 2,4469 dan t0>2,4469 to =

�X�1- X�2�

��1 n1

� �+ �1� �_n2

=(763,6688−678,5113 )

1,12706 �1 4⁄ + 1 4⁄

=106,8540

(52)

Lampiran 20. Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Natrium dalam Sampel Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus

1 X1 = 30,0925 X2 = 24,5324

2 S1 = 0,107274 S2 = 0,060169

H0 : σ1 = σ2

H1 : σ1 ≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,05/2, (3,3)) adalah = 15,44 - Daerah kritis penolakan: hanya jika F0≥ 15,44

F0=S1

2

S22

F0=

0,1072742 0,0601692

F0= 0,011507711

0,003620308561

(53)

Sp =

�

(n1− 1)S12� + �(n2− 1)S22�

n₁+ n2−2

=

�

�(4 − 1) 0,011507711� + �(4 − 1) 0,003620308561�

4 + 4 − 2

=

�

0,045384058

6 = 0,08697

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 95% dengan nilai α = 5%

t0,05/2 = ± 2,4469 untuk df = 4 + 4– 2 = 6

�X�1- X�2�

��1 n1

� �+ �1� �_n2

=(30,0925−24,5324 )

0,08697 �1 4⁄ + 1 4⁄

= 90,4124

(54)

Lampiran 21. Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Magnesium dalam Sampel Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus

1 X1 = 139,9747 X2 = 121,4183

2 S1 = 0.018854 S2 = 0,0390477

H0 : σ1 = σ2

H1 : σ1 ≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,05/2, (3,3)) adalah = 15,44 - Daerah kritis penolakan: hanya jika F0≥ 15,44

F0=S1

2

S22

F0=

0.0188542 0,03904772

F0=0,000355473316

0,001524722875

(55)

Sp =

�

(n1− 1)S12� + �(n2− 1)S22�

n₁+ n2−2

=

�

�(4 − 1) 0,000355473316� + �(4 − 1) 0,001524722875�

4 + 4 − 2

=

�

0,005640588573

6 = 0,03066

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 95% dengan nilai α = 5%

t0,05/2 = ± 2,4469 untuk df = 4 + 4– 2 = 6

�X�1- X�2�

��1 n1

� �+ �1� �_n2

=(139,9747−121,4183 )

0,03066 �1 4⁄ + 1 4⁄

= 855,926

(56)

(57)

(58)

DAFTAR PUSTAKA

Agoes, H. A. (2010). Tanaman Obat Indonesia. Jakarta: Salemba Medika. Hal. 25-26.

Almatsier, S. (2004). Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama. Hal. 228, 230, 235, 246 - 247.

Anhar, S. (2006). Kandungan Magnesium Pada Biomassa Tanaman Acacia

mangium Willd dan Pada Podsolik Merah Kuning di HPHTI PT Musi

Hutan Persada, Sumatera Selatan. Skripsi. Fakultas Kehutanan Institut Pertanian Bogor. Hal. 2.

Anonim. (2008). Taksonomi Koleksi Tanaman Obat Kebun Tanaman Obat

Citeureup. Jakarta: Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik

Indonesia. Hal. 39.

Ditjen POM RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 650, 737.

Ditjen POM RI. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 1135,1172,1183.

Ermer, J. dan McB. Miller, J. H. (2005). Method Validation in Pharmaceutical

Analysis. Weinheim: Wiley-VchVerlag GmbH & Co. KGaA. Hal. 171.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Review Artikel. Majalah Ilmu Kefarmasian. Hal. 117-119, 121-122, 127-128, 130.

Harris, D. C. (2010). Quantitative Chemical Analysis. Eighth Edition. New York: W. H. Freeman and Company. Hal. 455.

Isaac, R. A. (1990). Metals in Plants. Dalam: Helrich, K. (1990). Official Methods

Of The Association of Official Analytical Chemist. Edisi Kelima belas.

Virginia: Association of Official Analytical Chemist International. Hal. 42 Khopkar, S. M. (1990). Basic Concepts of Analytical Chemistry. Penerjemah:

Saptoraharjo, A., dan Nurhadi, A. (2008). Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: UI-Press. Hal. 275, 283.

Kristianingrum, S. (2012). Kajian Berbagai Proses Destruksi Sampel dan Efeknya. Prosiding Seminar Nasional Penelitian, Pendidikan dan

penerapan MIPA. Fakultas MIPA, Universitas Negeri Yogyakarta.

Kartasapoetra, G dan Marsetyo, H. (2008). Ilmu Gizi: Korelasi Gizi, Kesehatan

(59)

Lajuck, P. (2012). Ekstrak Daun Salam (Eugenia Poliantha) Lebih Efektif Menurunkan Kadar Kolesterol Total dan LDL Dibandingkan Statin Pada Penderita Dislipidemia. Tesis. Program Pascasarjana Universitas Udayana Denpasar. Hal. 34.

Nuratmi, B., Winarno, M. W dan Sundari, S. (1999). Khasiat Daun Salam (Eugenia polyantha Wight) Sebagai Antidiare Pada Tikus Putih. Media

Litbangkes Edisi Khusus “Obat Asli Indonesia”. Vol. 7 (3&4) : 14-17.

Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal. 298, 305-306, 311-312, 319-321.

Rosmarkam, A dan Yuwono, N. W. (2002). Ilmu Kesuburan Tanah. Yogyakarta: Kanisius. Hal. 31dan 60.

Salamah, E., Purwaningsih, S dan Kurnia, R. (2012). Kandungan Mineral Remis (Corbicula javanica) Akibat Proses Pengolahan. Jurnal Akuatika. Vol 3 (1): 74-83.

Sinaga, R.M. (2009). Pengetahuan Pengobat Tradisional Tentang Penyakit dan Cara Pembuatan Obat Tradisional. Tesis. Sekolah Pascasarjana Universitas Sumatera Utara. Hal. 16.

Svehla, G. (1979). Vogel’s Textbook of Macro and Semimicro Qualitative

Inorganic Analysis. Bagian I. Penerjemah: L. Setiono dan Hadyana

Pudjaatmaka. (1990). Analisis Anorganik Kualitatif Makro dan Semimikro. Jakarta: Penerbit Kalman Media Pustaka. Hal. 301,311.

Sudjana. (2005). Metode Statistika. Cetakan II. Edisi VI. Bandung: Tarsito. Hal. 168, 227, 249.

Sundari, D., Almasyhuri., dan Lamid, A. (2015). Pengaruh Proses Pemasakan Terhadap Komposisi Zat Gizi Bahan Pangan Sumber Protein. Media

Litbangkes. Vol 25 (4): 235-242.

Surbakti, S. (2010). Asupan Bahan Makanan dan Gizi Bagi Atlet Renang. Jurnal

Ilmu Keolahragaan. Fakultas Ilmu Keolahragaan UNIMED Medan Vol

8(2) : 108-122.

United States Department of Agriculture America. (2014). Nutrient Database for

Standard Reference Release 28 Basic Report 02004, Spices, bay leaf.

Diakses: 04 Juni

Winarno, F.G. (1992). Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Hal. 154, 156.

(60)

BAB III

METODE PENELITIAN

Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode penelitian deskriptif, yang bertujuan menggambarkan suatu keadaan secara sistematis yaitu untuk mengetahui perbedaan kadar mineral kalsium, natrium dan magnesium antara daun salam segar dan daun salam rebus.

3.1 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan di Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi dan Laboratorium Kimia Farmasi Kualitatif Universitas Sumatera Utara pada bulan Maret – Mei 2016.

3.2 Alat-Alat

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah alat-alat gelas (Pyrex dan Oberol), hotplate (BOECO Germany), kertas saring Whatman No. 42, Krus porselen, neraca analitik (AND GF-200), Spektrofotometer Serapan Atom dengan nyala udara-asetilen dengan lampu katoda Ca, Na dan Mgdan tanur (stuart).

3.3 Bahan-Bahan

3.3.1 Sampel

(61)

3.3.2 Pereaksi

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini berkualitas pro analisis keluaran E. Merck yaitu asam nitrat 65% v/v, asam pikrat 1% b/v, asam sulfat 98% v/v, Natrium Hidroksida, larutan baku kalsium 1000 μg/mL, larutan baku kalsium natrium1000 μg/mL dan larutan baku magnesium 1000 μg/mL kecuali akua demineralisata (Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi USU).

3.4 Identifikasi Sampel

Identifikasi sampel daun salam dilakukan di Herbarium Medanense, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara.

3.5 Pembuatan Pereaksi

3.5.1 Larutan HNO3 (1:1)

Asam Nitrat 65% v/v sebanyak 100 mL diencerkan dengan 100 mL aqua demineralisata (Ditjen POM, 1979).

3.5.2 Larutan H2SO4 1 N

Sebanyak 2,7 mL larutan asam sulfat 98% diencerkan dengan aquades hingga 100 mL (Ditjen POM RI, 1995).

3.5.3 Larutan asam pikrat 1% b/v

Sebanyak 1 gram asam pikrat dilarutkan dalam akuabides hingga 100 mL (Ditjen POM RI, 1979).

3.5.4 Larutan Kuning Titan 0,1% b/v

(62)

3.5.5 Larutan NaOH 2 N

Sebanyak 4 gram natrium hidroksida dilarutkan dalam akua demineralisata hingga 50 mL (Ditjen POM RI, 1979).

3.6 Prosedur Penelitian

3.6.1 Pengambilan Sampel

Metode pengambilan sampel dilakukan dengan cara sampling purposif yang dikenal juga sebagai sampling pertimbangan dimana sampel ditentukan atas pertimbangan bahwa populasi sampel adalah homogen dan sampel yang diambil mempunyai karakteristik yang sama dengan sampel yang sedang diteliti (Sudjana, 2005).

3.6.2 Penyiapan Sampel

Daun salam sebanyak 1000 gram, dibersihkan dari pengotornya kemudian di siram dengan akua demineralisata dan ditiriskan sampai air cuciannya kering, kemudian masing-masing dibagi menjadi 500 gram untuk yang segar dan direbus, sampel segar kemudian dihaluskan dengan blender. Sedangkan untuk sampel direbus, dilakukan perebusan selama 7 menit pada suhu 80 - 100°C, kemudian ditiriskan air rebusannya, selanjutnya dihaluskan dengan blender (tidak ditentukan kadar airnya).

3.6.3 Proses Destruksi

(63)

hingga sampel menjadi abu yang berwarna putih, kemudian dibiarkan hingga dingin didalam desikator. Abu yang diperoleh ditambahkan 5 ml HNO3 (1:1), diuapkan pada hotplate sampai kering, dimasukkan kembali dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit, dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin didalam desikator (suhu ± 27ºC) (Isaac, 1990).

3.6.4 Pembuatan Larutan Sampel

Sampel yang telah didestruksi dilarutkan dalam 5 mL HNO3 (1:1), lalu dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan krus porselen dibilas dengan aqua demineralisata sebanyak 3 kali, kemudian cukupkan hingga tanda. Kemudian saring dengan menggunakan kertas Whatman no.42 dan 5 mL filtrat pertama dibuang untuk menjenuhkan kertas saring, kemudian filtrat selanjutnya ditampung dalam botol. Filtrat ini digunakan sebagai larutan sampel untuk analisis kuantitatif. Perlakuan yang sama diulang sebanyak enam kali untuk masing-masing sampel.

3.6.5 Analisis Kualitatif

3.6.5.1 Kalsium

Uji kristal kalsium dengan asam sulfat 1N

Larutan sampel hasil destruksi sebanyak 1 - 2 tetes diteteskan pada object

glass kemudian ditetesi dengan larutan asam sulfat 1N terbentuk endapan putih

(64)

3.6.5.2 Natrium

Uji kristal natrium dengan asam pikrat 1% b/v

Larutan zat diteteskan 1 - 2 tetes pada object glass kemudian ditetesi dengan larutan asam pikrat 1% b/v, dibiarkan ± 5 menit lalu diamati di bawah mikroskop. Jika terdapat natrium, akan terlihat kristal berbentuk jarum halus tersusun di pinggir (Svehla, 1979).

3.6.5.3 Magnesium

Kedalam tabung reaksi dimasukkan 2 mL larutan sampel, ditambah 5-6 tetes NaOH 2 N dan 3 tetes pereaksi Titan yellow( 0.1% b/v). Dihasilkan endapan atau larutan warna merah (Svehla, 1979).

3.6.6 Pemeriksaan Kuantitatif

3.6.6.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalsium

Larutan baku kalsium (konsentrasi 1000 µg/mL) dipipet sebanyak 2,5 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan dicukupkan hingga garis tanda dengan menggunakan aqua demineralisata (larutan induk baku II konsentrasi 50 µg/mL). Larutan untuk kurva kalibrasi kalsium dibuat dengan memipet larutan baku induk II sebanyak 1; 2; 3; 4; dan 5 mL dilarutkan dalam labu tentukur 25 mL dan dicukupkan sampai garis tanda menggunakan aqua demineralisata hingga diperoleh konsentrasi berturut-turut (2; 4; 6;8; dan 10 µ g/mL) dan diukur pada panjang gelombang 422,7 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.6.6.2 Pembuatan kurva kalibrasi natrium

Larutan baku natrium (1000 μg/mL) sebanyak 0,5 mL dimasukkan kedalam labu tentukur 50 mL lalu diencerkan dengan akua demineralisata hingga

(65)

mL; 1,5 mL; 2,0 mL; dan 2,5 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL dan diencerkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda sehingga diperoleh

larutan dengan konsentrasi 0,2 μg/mL; 0,4 μg/mL; 0,6 μg/mL; 0,8 μg/mL; dan 1

μg/mL, lalu dilakukan pengukuran pada panjang gelombang 589,0 nm dengan tipe nyala udara-asetilen.

3.6.6.3 Pembuatan Kurva Kalibrasi Magnesium

Dipipet larutan baku magnesium(1000 μg/mL) sebagai LIB I (larutan induk baku I) sebanyak 2,5 mL, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda(konsentrasi 50 μg/mL) digunakan sebagai LIB II (larutan induk baku II). Dari larutan LIB II tersebut (50

μg/mL) dipipet masing-masing0,25 mL; 0,5 mL; 0,75 mL; 1,0 mL dan 1,25 mL, kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda sehingga diperoleh konsentrasi berturut-turut 0,5 μg/mL; 1,,0 μg/mL; 1,5 μg/mL; 2,0 μg/mL dan 2,5 μg/mL. Kemudian diukur kurva kalibrasi magnesiumpada panjang gelombang 285,2 nm dengan tipe nyala udara-asetilen.

3.6.6.4 Penetapan kadar Kalsium

(66)

3.6.6.5 Penetapan kadar natrium

Larutan sampel hasil destruksi dipipet sebanyak 0,5 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan diencerkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda (faktor pengenceran 100 kali). Larutan diukur absorbansinya dengan spektrofotometer serapan atom pada panjang gelombang 589,0 nm dengan tipe nyala udara-asetilen. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku natrium. Konsentrasi natrium dalam sampel dihitung berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.6.6 Penetapan Kadar Mineral Magnesium

Dipipet masing-masing larutan sampel sebanyak 0,5 mL, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 mL (faktor pengenceran = 200 kali) dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda. Lalu diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer serapan atom yang telah dikondisikan dan diatur metodenya, dimana pengujian kadar magnesium dilakukan pada panjang gelombang 285,2 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku magnesium. Konsentrasi magnesium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.7 Perhitungan Kadar Kalsium, Natrium, dan Magnesium dalam Sampel

Menurut Rohman (2007), Kadar kalsium, natrium dan magnesium dalam sampel dapat dihitung dengan cara sebagai berikut:

Kadar (µg/g) =C × V × Fp W

Keterangan:

(67)

Fp = Faktor pengenceran W = Berat sampel (g)

3.6.8 Analisis Data Secara Statistik

Menurut (Sudjana, 2005), kadar yang diperoleh dari hasil pengukuran masing-masing larutan sampel dianalisis secara statistik dengan cara mengitung standar deviasi menggunakan rumus sebagai berikut:

��=�∑(Xi−X�)

2 n−1

Keterangan:

Xi = Kadar sampel

X � = Kadar rata-rata sampel n = Jumlah pengulangan

Kadar yang diperoleh dari hasil pengukuran masing-masing ke enam larutan sampel, diuji secara statistik dengan uji t.

Untuk mengetahui data ditolak atau diterima dilakukan dengan uji t yang dapat dihitung dengan rumus:

t_hitung = |Xi − X�| SD

√n

Hasil pengujian atau nilai thitung yang diperoleh ditinjau terhadap tabel distribusi t, apabila thitung > ttabel maka data tersebut ditolak.

(68)

μ=��±�₍1 2�,��)

SD⁄√n

μ = kadar logam

X �= kadar rata-rata sampel

t = harga t tabel sesuai dengan dk = n-1

α = tingkat kepercayaan

SD = standar deviasi n = jumlah pengulangan 3.6.9 Validasi Metode

3.6.9.1 Uji Perolehan Kembali (Recovery)

Uji perolehan kembali atau recovery dilakukan dengan metode adisi (penambahan baku). Dalam metode adisi dengan menambahkan sejumlah larutan standar dengan konsentrasi tertentu pada sampel yang diperiksa, lalu dianalisis. Persen perolehan kembali ditentukan dengan menentukan berapa persen analit yang ditambahkan dapat ditemukan. Larutan baku yang ditambahkan yaitu, 8 mL larutan baku kalsium (konsentrasi 1000 μg/mL), 0,3 mL larutan baku natrium

(konsentrasi 1000 μg/mL), dan 1,4 mL larutan baku magnesium (konsentrasi 1000

μg/mL).

Sampel yang telah dihaluskan ditimbang secara seksama sebanyak 10 g di dalam krus porselen, lalu ditambahkan 8 mL larutan baku kalsium (konsentrasi

(69)

Persen Perolehan Kembali = ��−��

�_�∗

�

100%

Keterangan:

CA = Kadar logam dalam sampel sebelum penambahan baku CF = Kadar logam dalam sampel setelah penambahan baku C∗A = Kadar larutan baku yang ditambahkan

3.6.9.2 Uji Keseksamaan (Presisi)

Uji keseksamaan atau presisi diukur sebagai simpangan baku relatif atau koefisien variasi. Keseksamaan atau presisi merupakan ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji individual ketika suatu metode dilakukan secara berulang untuk sampel yang homogen. Nilai simpangan baku relatif yang memenuhi persyaratan menunjukkan adanya keseksamaan metode yang dilakukan (Harmita, 2004).

Menurut Harmita (2004), rumus untuk menghitung simpangan baku relatif adalah:

RSD = SD

X� × 100%

Keterangan :

�̅ : Kadar rata-rata sampel SD : Standard Deviation

RSD : Relativ Standard Deviation

3.6.9.3 Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi

(70)

merupakan kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama.

Menurut Harmita (2004), batas deteksi dan batas kuantitasi ini dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:

Simpangan Baku: �∑( Y−Yi )2 n−2

Batas Deteksi (LOD): 3 ×SB

Slope

Batas Kuantitatif (LOQ): 10 ×SB

Slope

2.5.3.1Pengujian Beda Nilai Rata-Rata

Menurut Sudjana (2005), sampel yang dibandingkan adalah independen dan jumlah pengamatan masing-masing lebih kecil dari 30 dan varians (σ) tidak diketahui sehingga dilakukan uji F untuk mengetahui apakah varians kedua populasi sama (σ1 = σ 2) atau berbeda (σ1 ≠ σ 2) dengan menggunakan rumus:

Fo = �1

2

�22

Keterangan:

Fo = Beda nilai yang dihitung

S1 = Standar deviasi sampel daun salam segar (mg/100g)

S2 = Standar deviasi sampel daun salam yang direbus (mg/100g)

Apabila dari hasilnya diperoleh Fo tidak melewati nilai kritis F maka dilanjutkan uji dengan distribusi t dengan rumus:

to = �X�1- X�2� ��\_�1₁+1

�2

Sp =

�

(�1−1)�1

2₊₍_�₂₋₁₎_�₂2

(71)

Keterangan :

X1 = kadar rata-rata sampel daun salam segar (mg/100g) X2 = kadar rata-rata sampel daun salam rebus (mg/100g) Sp = simpangan baku (mg/100g)

n1 = jumlah pengulangan sampel daun salam segar n2 = jumlah pengulangan sampel daun salam rebus S1 = Standar deviasi sampel daun salam segar (mg/100g) S2 = Standar deviasi sampel daun salam rebus (mg/100g)

Dan jika Fo melewati nilai kritis F maka dilanjutkan uji dengan distribusi t dengan rumus:

to = �X�1- X�2� ��\�_�12₁+�22

�2

Keterangan :

X1 = kadar rata-rata sampel daun salam segar (mg/100g) X2 = kadar rata-rata sampel daun salam rebus (mg/100g) Sp = simpangan baku (mg/100g)

n1 = jumlah pengulangan sampel daun salam segar n2 = jumlah pengulangan sampel daun salam rebus S1 = Standar deviasi sampel daun salam segar (mg/100g) S2 = Standar deviasi sampel daun salam rebus (mg/100g)

(72)

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Analisis Kualitatif

[image:72.595.116.517.305.411.2]

Hasil identifikasi secara kualitatif digunakan untuk mengetahui ada atau tidaknya mineral kalsium, natrium dan magnesium dalam sampel. Data dapat dilihat pada Tabel 4.1 dan Lampiran 4, halaman 45.

Tabel 4.1 Hasil analisis kualitatif pada sampel daun salam yang telah di destruksi

No Mineral Pereaksi Hasil Reaksi Hasil

1 Kalsium Asam Sulfat 1N Kristal jarum +

2 Natrium Asam Pikrat 1% b/v Kristal jarum

halus + 3 Magnesium Titan Yellow dan NaOH

Endapan merah teran

g

+ Keterangan : + : Mengandung mineral

Berdasarkan Tabel 4.1, larutan sampel yang diperiksa mengandung mineral kalsium, natrium dan magnesium. Sampel positif mengandung mineral kalsium dengan penambahan asam sulfat 1 N akan membentuk Kristal jarum, juga dengan penambahan asam pikrat 1% b/v menghasilkan kristal jarum halus dari natrium , dengan penambahan titan yellow 0,1% b/v dalam keadaan basa menghasilkan endapan berwarna merah terang positif untuk magnesium.

4.2 Analisis Kuantitatif

4.2.1 Kurva Kalibrasi Kalsium, Natrium dan Magnesium

(73)

garis regresi yaitu Y = 0,0440785X + 0,0037175 untuk kalsium, Y = 0,0451143X + 0,0005728 untuk natrium dan Y = 0,4040571X + 0,0120619 untuk magnesium.

Kurva kalibrasi larutan kalsium, natrium dan magnesium dapat dilihat pada Gambar 4.1-4