Penetapan Kadar Campuran Isoniazid dan Vitamin B6 dalam Sediaan Tablet Campuran Etambutol, Isoniazid dan Vitamin B6 Secara Spektrofotometri Derivatif dengan Metode Zero Crossing

(1)

0

PENETAPAN KADAR CAMPURAN ISONIAZID DAN VITAMIN B6 DALAM SEDIAAN TABLET CAMPURAN ETAMBUTOL, ISONIAZID DAN VITAMIN B6 SECARA SPEKTROFOTOMETRI

DERIVATIF DENGAN METODE ZERO CROSSING

SKRIPSI

Diajukan Untuk Melengkapi Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

OLEH:

ELISA FITRI DAULAY

NIM 121524189

;2

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

(2)

1

SKRIPSI

Diajukan Untuk Melengkapi Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi Pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

OLEH:

ELISA FITRI DAULAY

NIM 121524189

;2

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

(3)

1

PENGESAHAN SKRIPSI

OLEH:

ELISA FITRI DAULAY NIM 121524189

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

Pada Tanggal : 17 Desember 2015

(4)

iv

KATA PENGANTAR

Puji syukur kepada Allah SWT atas segala limpahan rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini, serta shalawat beriring salam untuk Rasulullah Muhammad SAW sebagai suri tauladan dalam kehidupan. Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dengan judul “Penetapan Kadar Campuran Isoniazid dan Vitamin B6 dalam Sediaan Tablet Campuran Etambutol, Isoniazid dan Vitamin B6 Secara Spektrofotometri Derivatif dengan Metode Zero Crossing”.

(5)

v

Ucapan terima kasih dan penghargaan yang tulus tiada terhingga kepada Ayahanda H. Pirdaus Daulay, Ibunda Hj. Irma Suryani Siregar dan Suami Ahmad Fauzi ITM Siregar, S.Pd., M.Si., serta Mertua H. Imron Siregar dan Hj. Faijah Harahap yang telah memberikan cinta dan kasih sayang yang tidak ternilai dengan apapun, pengorbanan baik materi maupun motivasi serta doa yang tulus yang tidak pernah berhenti. Adik - adikku tersayang serta seluruh keluarga yang selalu mendoakan dan memberikan semangat.

Penulis juga tidak lupa mengucapkan terima kasih kepada teman-teman ekstensi farmasi angkatan 2012, dan sahabat-sahabatku yang telah memberikan bantuan dan semangat tak terhingga.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.

Medan, 17 Desember 2015 Penulis,

(6)

vi

PENETAPAN KADAR CAMPURAN ISONIAZID DAN VITAMIN B6

DALAM SEDIAAN TABLET CAMPURAN ETAMBUTOL, ISONIAZID

DAN VITAMIN B6 SECARA SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF

DENGAN METODE ZERO CROSSING

ABSTRAK

Campuran isoniazid dan vitamin B6 merupakan salah satu jenis kombinasi dalam sediaan tablet. Penetapan kadar tablet campuran isoniazid dan vitamin B6 tidak terdapat dalam monografi, baik pada Farmakope Indonesia edisi IV (1995) maupun USP (United States Pharmacopeia) edisi 30 (2007) sehingga diperlukan suatu metode analisis yang memenuhi uji validitas pada penetapan kadarnya. Tujuan penelitian ini adalah untuk menetapkan kadar campuran isoniazid dan vitamin B6 dengan menggunakan spektrofotometri derivatif.

Metode penelitian yang dilakukan adalah pengambilan sampel secara purposif terhadap campuran tablet isoniazid dan vitamin B6 yaitu tablet Pulna® Forte dilakukan secara spetrofotometri derivatif dengan metode zero crossing. Pelarut yang digunakan pada penelitian ini adalah HCl 0,1 N. Panjang gelombang analisis untuk menetapkan kadar campuran isoniazid dan vitamin B6 pada spectrum serapan kedua masing-masing adalah 227,40 nm dan 222,00 nm.

Hasil penelitian diperoleh kadar campuran isoniazid dan vitamin B6 yang dianalisis dalam tablet dipasaran memenuhi persyaratan yang tertera pada USP (United States Pharmacopeia) edisi 30 (2007). Hasil uji validasi yang dilakukan terhadap tablet memenuhi persyaratan validasi metode, untuk isoniazid diperoleh % recovery = 101,22% dengan Relative Standart recovery (RSD) = 1,86% dan untuk vitamin B6 diperoleh % recovery = 99,51% dengan Relative Standart

recovery (RSD) = 1,02%.

Dari hasil diatas dapat disimpulkan bahwa spektrofotometri derivatif metode zero crossing dapat digunakan untuk analisis campuran isoniazid dan vitamin B6.

Kata-kata kunci: isoniazid, piridoksin HCl, spektrofotometri derivatif, zero

(7)

vii

DETERMINATION OF ISONIAZID AND PYRIDOXINE HCl MIXTURE IN TABLETS OF ETHAMBUTOL ISONIAZID AND PYRIDOXINE HCl

MIXTURE BY DERIVATIVE SPECTROPHOTOMETRY METHOD WITH ZERO CROSSING TECHNIQUE

ABSTRACT

The compound of isoniazid and pyridoxine hydrochloride is one of combination in tablet. Determination of content of isoniazid and pyridoxine hydrochloride in tablet where not found in monography, either in the fourth edition Farmakope Indonesia (1995) or USP (United States Pharmacopeia) 30th edition (2007) that requires an analysis method that meets the test of validity in determining the content. The purpose of this research is to determine isoniazid and pyridoxine hydrochloride mixture using derivative spectrophotometry with zero crossing method.

The method of this research was done by purposive sampling to isoniazid and pyridoxine hydrochloride mixture of the sample Pulna®Forte tablets content using derivative spectrophotometry with zero crossing technique. The solvent used in this research is HCl 0.1 N. Wavelengths analysis to establish the levels of a mixture of isoniazid and pyridoxine hydrochloride in the second absorption spectrum each is 227.40 nm and 222.00 nm.

The results obtained mixture levels isoniazid and pyridoxine hydrochloride were analyzed in the tablet market meets the requirements described in the USP (United States Pharmacopeia) 30th edition (2007). Validation test results conducted on the tablets meet the requirements validation methods, for isoniazid obtained% recovery = 101.22% with Relative Standard recovery (RSD) = 1.86% and for pyridoxine hydrochloride was obtained% recovery = 99.51% with Relative Stan.ard recovery (RSD) = 1.02%.

Based on these result can be concluded that derivative spectrophotometry with zero crossing method can be used for analysis of mixtures isoniazid and pyridoxine hydrochloride.

Key words: isoniazid, pyridoxine hydrochloride, derivative spectrofotometry,

(8)

viii

DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ... i

HALAMAN PENGESAHAN ... ii

KATA PENGANTAR ... iii

ABSTRAK ... v

ABSTRACT ... vi

DAFTAR ISI ... vii

DAFTAR TABEL ... xii

DAFTAR GAMBAR ... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiv

BAB I PENDAHULUAN ... 1

1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Perumusan Masalah ... 4

1.3 Hipotesis ... 5

1.4 Tujuan Penelitian ... 5

1.5 Manfaat Penelitian ... 6

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 7

2.1 Uraian Bahan ... 7

2.1.1 Isoniazid ... 7

2.1.2 Piridoksin Hidroklorida ... 8

2.1.2 Etambutol ... 9

2.2 Spektrofotometri ... 10

(9)

ix

2.2.2 Kegunaan Spektrofotometri ... 13

2.3 Spektofotometri Derivatif ... 14

2.3.1 Komponen Spektrofotometri Derivatif ... 17

2.3.2 Kegunaan Spektrofotometri Derivatif ... 17

2.4 Validasi Metode ... 18

2.4.1 Akurasi ... 18

2.4.2 Presisi ... 20

2.4.3 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi... 20

2.4.4 Linearitas ... 21

2.4.1 Rentang ... 21

BAB III METODE PENELITIAN ... 22

3.1 Jenis Penitian ... 22

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ... 22

3.3 Alat ... 22

3.4 Bahan ... 22

3.5 Metode Pengambilan Sampel ... 22

3.6 Pengambilan Sampel ... 23

3.6.1 Pembuatan Pereaksi ... 23

3.6.2 Pembuatan Larutan Induk Baku dan Larutan Standar .. 23

3.6.2.2 Pembuatan Larutan Induk Baku Isoniazid BPFI ... 23

3.6.2.2 Pembuatan Larutan Induk Baku Vitamin B6 BPFI ... 23

2.6.2.3 Pembuatan Larutan Standar Isoniazid ... 24

(10)

x

3.6.3 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum ... 24

2.6.3.1 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Isoniazid ... 24

2.6.3.2 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Vitamin B6 ... 25

3.6.4 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif ... 25

2.6.4.1 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif Isoniazid ... 25

2.6.4.2 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif Vitamin B6 ... 25

3.6.5 Penentuan Zero Crossing ... 26

3.6.6 Penentuan Panjang Gelombang Analisis ... 26

3.6.7 Pembuatan dan Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi . 26

3.6.7.1 Pembuatan dan Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi Isoniazid ... 26

3.6.7.2 Pembuatan dan Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi Vitamin B6 ... 27

3.6.8 Penentuan Kadar Isoniazid dan Vitamin B6 dalam Tablet ... 27

3.6.9 Analisis Data Penetapan Kadar Secara Statistik ... 28

3.6.10 Uji Validasi ... 30

3.6.10.1 Uji Akurasi ... 30

3.6.10.2 Uji Presisi ... 30

BAB IV METODE PENELITIAN ... 32

4.1 Hasil Penentuan Spektrum Serapan Maksimum ... 32

4.2 Hasil Penentuan Spektrum Serapan ... 33

(11)

xi

4.3.1 Penentuan Zero Crossing pada serapan Derivat

Pertama ... 35

4.3.2 Penentuan Zero Crossing pada serapan Derivat Kedua ... 37

4.4 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Analisis Isoniazid Dan Vitamin B6 ... 39

4.5 Hasil Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi ... 42

4.5.1 Kurva Kalibrasi ... 42

4.5.2 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ... 43

4.6 Hasil Penentuan Kadar Isoniazid Dan Vitamin B6 dalam Sediaan Tablet ... 44

4.7 Hasil Uji Validasi ... 45

4.7.1 Hasil Uji Akurasi ... 45

4.7.2 Hasil Uji Presisi ... 46

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 47

5.1 Kesimpulan ... 47

5.2 Saran ... 47

DAFTAR PUSTAKA ... 48

(12)

xii

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

4.1 Panjang gelombang analisis dan absorbansi pada derivat

kedua ... 41 4.2 Kadar Isoniazid dan Vitamin B6 dalam tablet ... 45 4.3 Hasil perolehan kembali Isoniazid dan Vitamin B6 dengan

(13)

xiii

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

4.1 Spektrum Serapan Maksimum Isoniazid Konsentrasi 11 µg/mL ... 32 4.2 Spektrum Serapan Maksimum Vitamin B6 Konsentrasi 8 µg/mL .. 32 4.3 Spektrum Serapan Maksimum Isoniazid Konsentrasi 11 µg/mL

dan Vitamin B6 Konsentrasi 8 µg/mL ... 33 4.9 Spektrum Tumpang Tindih Serapan Isoniazid dan Vitamin B6

derivat pertama ... 36 4.10 Spektrum Serapan Isoniazid Konsentrasi 11 µg/mL derivat

kedua ... 37 4.11 Spektrum Serapan Vitamin B6 Konsentrasi 8 µg/mL derivat

kedua ... 38 4.12 Spektrum Tumpang Tindih Serapan Isoniazid dan Vitamin B6

pada Derivat Kedua ... 38 4.13 Spekrum Tumpang Tindih Serapan Isoniazid dan Vitamin B6

dan Campuran Isoniazid dan Vitamin B6 Pada Serapan Derivat Kedua ... 39 4.14 Panjang gelombang Analisis Isoniazid Pada Panjang

Gelombang 227,40 nm ... 40 4.15 Panjang Gelombang Analisis Vitamin B6 Pada Panjang

Gelombang 222,0 nm ... 40 4.16 Kurva Kalibrasi Isoniazid Pada Panjang Gelombang 227,40

(14)

xiv

4.17 Kurva Kalibrasi Vitamin B6 Pada Panjang Gelombang 222,00 nm ... 43

(15)

xv

9. Spektrum Serapan Panjang Gelombang Analisis Isoniazid Baku dan Vitamin B6 Baku ... 71

10. Data Kalibrasi Isoniazid BPFI, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi ... 72

11. Perhitungan Batas Deteksi (Limit of Detection, LOD) dan Batas Kuantitasi (Limit of Quantitation, LOQ) Isoniazid ... 74

12. Data Kalibrasi Vitamin B6 BPFI, Persamaan Regresi dan µg/mL dengan Spektrum Serapan Derivat Kedua Sampel ... 80

(16)

xvi

17. Contoh Perhitungan Kadar Isoniazid dan Vitamin B6 dalam

Sediaan Tablet P ... 82

18. Perhitungan Statistik Isoniazid pada Tablet P ... 86

19. Perhitungan Statistik Vitamin B6 pada Tablet P ... 88

20. Spektrum Serapan P pada Uji Perolehan Kembali Isoniazid dan Vitamin B6 ... 90

21. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Isoniazid pada Tablet P dengan Metode Penambahan Baku (Standard Addition Method) ... 93

22. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Vitamin B6 pada Tablet P dengan Metode Penambahan Baku (Standard Addition Method)® ... 94

23. Perhitungan Persen Perolehan Kembali ... 95

24. Perhitungan Rata-Rata, Standar Deviasi dan Relatif Standar deviasi Perolehan Kembali Isoniazid pada Tablet P ... 100

25. Perhitungan Rata-Rata, Standar Deviasi dan Relatif Standar deviasi Perolehan Kembali Vitamin B6 pada P ... 101

26. Data Hasil pengukuran Derivat Kedua ... 102

27. Daftar Nilai Distribusi t ... 103

28. Sertifikat Pengujian Isoniazid ... 104