Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

(1)

(2)

(3)

Lampiran 3.

Skema Penelitian

1. Respon Hipersensitivitas

2. Titer Antibodi

Mencit berat 30-40 g

Diaklimatisasi + 7 hari

Ditimbang dengan neraca hewan

Diinjeksikan SDMS 1% sebanyak 0,1 ml pada hari 0

secara i.p

Dioralkan kontrol (CMC Na), EEDMD 50, 100, 200

mg/kg BB, dan levamisole 25 mg/kg BB selama 7 hari

Dihari ke 7 dihitung V0 (Volume awal kaki)

Diinjeksikan SDMS 1% 0,1 ml secara intraplantar

Setelah 24 jam (hari ke 8) dihitung Vt (Volume kaki akhir)

Hasil data, diolah

secara statistika

Mencit berat 30-40 g

Diaklimatisasi + 7 hari

Ditimbang dengan neraca hewan

Diinjeksikan SDMS 1% sebanyak 0,1 ml pada hari 0

secara i.p

Dioralkan kontrol (CMC Na), EEDMD 50, 100, 200

mg/kg BB, dan levamisole 25 mg/kg BB selama 7 hari

Dihari ke 7 setelah 2-3 jam pemeberian oral, darah diambil

pada bagian vena ekor mencit

Disentrifuse 1900 rpm selama 10 menit

Pada microtitration plate 25 µl serum + PBS 25 µl (lubang

1), dari lubang 1 diambil 25 µl untuk lubang ke 2, begitu

seterusnya

Diteteskan 25 µl SDMS 1%

Didiamkan + 1 jam

(4)

Lampiran 4.

Perhitungan Hewan

Rumus Federer:

(t-1) (n-1) > 15

(5-1) (n-1) > 15

5n-5-n+1 > 15

4n-4 > 15

4n > 15+4

4n > 19

n >

9 n > 4,75

Maka, n dibulatkan menjadi 5, sehingga hewan yang dipakai adalah 5 ekor.

Keterangan:

t : jumlah perlakuan

(5)

Lampiran 5.

Perhitungan Serbuk Levamisole yang Ditimbang

Berat bobot 20 tablet

= 5,799 g

Kandungan Levamisol tablet

= 29,46 mg

Serbuk sampel yang ditimbang setara 25 mg Levamisol:

=

x g

x bobot 20 tablet

=

g

(6)

Lampiran 6.

Contoh perhitungan dosis

a)

Perhitungan dosis CMC Na 1%

=

g

= 10 mg/ml

Perhitungan CMC Na 1% pada mencit 30 g

=

x 30 g = 0,3 ml

Volume yang diberikan = 0,3 ml

b)

Perhitungan dosis EEDMD

1. Untuk dosis 50 mg/kg BB

Jumlah ekstrak yang diberikan =

g

x 30 g = 1,5 mg

Jumlah volume yang diberikan =

, g

g

x 10 ml = 0,3 ml

2. Untuk dosis 100 mg/kg BB

Jumlah ekstrak yang diberikan =

g

x 30 g = 3 mg

Jumlah volume yang diberikan =

g

x 10 ml = 0,3 ml

3 Untuk dosis 200 mg/kg BB

.Jumlah ekstrak yang diberikan =

g

x 30 g = 6 mg

Jumlah volume yang diberikan =

g

(7)

Lampiran 7.

Volume Pembengkakan Kaki Mencit dan Nilai Titer Antibodi

NO Perlakuan

Volume kaki mencit (ml)

Nilai Titer Antibodi

V

0 V

t

ΔV

Vt = Volume pembengkakan kaki mencit

(8)

Lampiran 8.

Gambar Alat-alat

Pletysnometer Digital

Centrifuse PLC Series

(9)

Lampiran 9.

Hewan Percobaan

(10)

Lampiran 10.

Pembengkakan Kaki Mencit dan Hemaglutinasi

Sebelum Induksi Antigen

24 Jam Setelah Induksi Antigen

Hemaglutinasi Titer Antibodi

CMC Na 1%

EEDMD 50 mg/kg BB

1

2

3

4

5 1

2

3

4

(11)

EEDMD 100 mg/kg

BB

EEDMD 200 mg/kg

BB

Levamisole 25 mg/kg

BB

1

2

3

4

5

1

2

3

4

5

1

2

3

4

(12)

Lampiran 11.

Tabel Hasil Perhitungan

Interval for Mean

(13)

Tabel Uji

Post Hoc Tukey

Perlakuan (J) Perlakuan

(14)

EEDMD 200

(15)

Tabel Homgoneous

Tablet Levamisole 5 ,7700

Sig. 1,000 1,000 1,000 ,132

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Titerantibodi

Tablet Levamisole 5 4,2500

Sig. 1,000 ,372 ,725

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.