Laporan-Isolasi-Piperin

LAPORAN PRAKTIKUM FITOKIMIA LAPORAN PRAKTIKUM FITOKIMIA

ISOLASI PIPERIN DARI FRUCTUS PIPERIS NIGRI ATAU ALBI ISOLASI PIPERIN DARI FRUCTUS PIPERIS NIGRI ATAU ALBI

OLEH OLEH

KELOMPOK 3-R  KELOMPOK 3-R  H

Haaiirruunnnniissyyaah h AAssffaarriinnaa ((113322221100110011005566))  Nur laily khomsiah

 Nur laily khomsiah (13221010106(132210101062)2) F

Fiirrdda a RRaattnna a SS ((113322221100110011006600)) S

Suuggi i HHaarrttoonnoo ((113322221100110011006622)) Amirotu

Amirotu Saidah Saidah (132210101066)(132210101066) !

!uulli i AAnnttiikka a "" ((11332222110011001100##22))  Nina Am

 Nina Amaliaalia (1322101010#(1322101010#6)6) S

Srri i AAnniitta a $ $ A A "" ((11332222110011001100%%00)) A

A&&hhmmaad d SSuu''hhaan n  ((11332222110011001100%%%%)) 

oonnii&&a a SSaannttoossoo ((11332222110011001100**00))

BAGIAN BIOLOGI FARMASI BAGIAN BIOLOGI FARMASI

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS JEMBER  FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS JEMBER 

2015 2015

BAB I

PENDAHULUAN 1. Tuju! P"#$%#u&

ahasis+a dihara,kan da,at m-mahami ,rinsi, dan m-lakukan isolasi  ,i,-rin dari $i,-ris nigri fru&tus atau $i,-ris al'i fru&tus '-s-rta analisis kualitatif 

hasil isolasi d-ngan m-tod- kromatografi la,isan ti,is. 2. L$" B'(#!)

/ndon-sia m-ru,akan n-gara ro,is s-hingga tidak h-ran ika /ndon-sia m-miliki 'anyak tum'uhtum'uhan tidak t-rk-&uali r-m,ahr-m,ahan yang sangat m-lim,ah di N-gara kita ini. rang /ndon-sia k-'anyakan hanya m-nggunakan R-m,ahr-m,ahan s-'agai 'um'u da,ur ,adahal uga da,at digunakan s-'agai o'at.

 Piperis nigrii m-ru,akan satu dari 'anyak r-m,ah yang m-ngandung khasiat s-'agai o'at.  Piperis nigrii  uga m-ngandung s-nya+a m-ta'olit s-kund-r yaitu s-nya+a alkaloid '-ru,a ,i,-rin. $i,-rin m-ru,akan suatu s-nya+a yang sangat  '-rmanfaat dalam k-s-hatan misalnya ,i,-rin '-rkhasit s-'agai o'at &a&ing anti asma anti ny-ri. $i,-rin 'anyak dit-mukan ,ada sim,lisia yang t-rmasuk dalam k-luarga ,i,-ra&-a- yaitu ,ada ,i,-ris nigrii fru&tus ,i,-ris al'i fru&tus ,i,-ris r-trofra&ti fru&tus dll. anaman yang t-rmasuk dalam k-luarga ,i,-ra&-a- sangat  'anyak dit-mukan ham,ir s-luruh dataran r-ndah di /ndon-sia kar-na tanaman ini tidak tahan d-ngan g-nangan air. $i,-ris nigri sangatlah mudah dit-mukan di s-luruh da-rah di /ndon-sia d-ngan harga yang r-lati4- r-ndah. $ada umumnya kandungan  ,i,-rin dalam ,i,-ris nigri s-'anyak 1# #.

$-,-rin m-ru,akan s-nya+a m-ta'olit s-kund-r yang di,-rol-h dari 'uah lada (Piper ningrum 7.) d-ngan &ara m-ngisolasi. -tod- yang digunakan untuk  m-ngisolasi ,i,-rin dari lada hitam t-rs-'ut adalah -kstraksi so8hl-t yang m-ru,akan  ,-misahan satu atau '-'-ra,a 'ahan dari suatu ,adatan d-ngan m-nggunakan 'antuan  ,-larut ,-larut yang digunakan dalam m-tod- ini yaitu -tanol. $i,-rin m-ru,akan s-nya+a ,olar '-gitu,un d-ngan -tanol s-hingga -tanol mam,u m-larutkan ,i,-rin yang t-rda,at dalam lada s-suai d-ngan ,rinsi, like dissolved like.  9-rdasarkan 7it-ratur 'ah+a ,i,-rin m-ru,akan s-nya+a alkaloid yang da,at larut dalam alkohol yaitu -tanol dimana antara ,i,-rin d-ngan -tanol mam,u untuk m-m'-ntuk ikatan hidrog-n.

TINJAUAN PUSTAKA 1.1 K(*%+%#*% T!&! L, H%$&  Piper nigrum L.

-nurut itroso-,omo (200#) klasifikasi tanaman lada adalah s-'agai '-rikut :

• ;ingdom : $lanta-• <i4isi : S,-rmato,hyta • Su'di4isi : Angios,-rma-• ;-las : <i&otyl-don-a-• rdo : $i,-ral-s • Familia : $i,-ra&-a-• =-nus : Piper

• S,-&i-s : Piper nigrum 7.

1.2 S'j"/ T!&! L,

anaman lada dit-mukan ,-rtama kali di da-rah "-st-rn =hast /ndia. anaman lada dit-mukan tum'uh liar di da-rah ,-gunungan Assam (/ndia) dan utara 9urma. anaman ini mudian mulai di'udidayakan dan m-nadi 'arang '-rharga tika mulai diintroduksi k->ro,a dan dik-nal ol-h 'angsa !unani dan Roma+i kuno. S-orang filsafat !unani '-rnama h-o,hratus (3#22#% 9.?) yang dik-nal s-'agai 9a,ak 9otani m-ny-'utkan dua ti,- lada yang digunakan di !unani dan Roma+i yaitu black pepper (lada hitam)  Piper nigrum dan long pepper (lada ,anang) Piper longum. 7ada mudian m-ny-'ar dari ala'ar (/ndia) k-da-rahda-rah >ro,a dan Asia t-rmasuk /ndon-sia. 7ada k-mungkinan masuk k- /ndon-sia di'a+a ol-h masyarakat Hindu k- da-rah @a+a antara 100 9.? dan 600 A.< ($urs-glo4- et  al. 1*%1).

1.3 T!&! L,

7ada m-ru,akan tanaman tahunan yang m-manat dari k-luarga $i,-ra&-a- (9alittri 200#). anaman lada m-miliki akar tunggang d-ngan akar utama da,at m-n-m'us tanah sam,ai k-dalaman 12 m. 9atang tanaman lada '-r'uku'uku dan '-r'-ntuk sulur yang da,at dik-lom,okkan m-nadi -m,at ma&am sulur yaitu sulur gantung sulur ,anat sulur 'uah dan sulur tanah. <aun lada m-ru,akan daun tunggal d-ngan duduk daun '-rs-ling dan tum'uh  ,ada s-tia, 'uku. "arna daun hiau muda ,ada +aktu muda dan daun tua '-r+arna hiau m-ngkilat ,ada ,-rmukaan atas. $-rtulangan daun m-l-ngkung d-ngan t-,i daun

 '-rg-lom'ang atau rata. 9unga'unga t-rda,at ,ada &a'ang plagiotrophic (horiontal) yang t-rsusun dalam 'ulir ( spica) atau untai (amentum). 9uah lada t-masuk 'uah 'uni '-r'-ntuk   'ulat '-r+arna hiau dan ,ada +aktu masak '-r+arna m-rah. 9ii lada '-r+arna ,utih &ok-lat

d-ngan ,-rmukaan li&in (=am'ar 1) ("ahid 1**6).

anaman lada m-ru,akan tanaman tahunan yang tingginya da,at m-n&a,ai 10 m dan diam-t-r tauk da,at m-n&a,ai 15 m 'ila di'udidayakan d-ngan 'aik ("ahid 1**6). Sulur   ,anat tum'uh l-'ih 'aik dalam lingkungan kurang &ahaya (fototro,ism- n-gatif) s-dangkan

sulur 'uah dalam k-adaan &uku, &ahaya (fototro,im- ,ositif). /nt-nsitas &ahaya yang di'utuhkan '-rkisar antara 50 sam,ai #5. 7ada da,at tum'uh d-ngan 'aik di da-rah d-ngan k-tinggian 0500 m d,l. ?urah huan yang ,aling 'aik untuk tanaman lada adalah 2000 B 3000 mmCtahun d-ngan hari huan 1101#0 hari dan musim k-marau 23 'ulanCtahun. ;-l-m'a'an udara yang s-suai adalah s-kitar #0 sam,ai *0 d-ngan kisaran suhu 25 35o?. anaman lada da,at tum'uh ,ada s-mua -nis tanah t-rutama tanah '-r,asir dan g-m'ur d-ngan unsur hara yang &uku, s-rta ,H tanah yang s-suai '-rkisar antara 565 (9alittri 200#).

=am'ar 1. anaman lada hitam ( Piper nigrum 7.) ($arthasarathy et al . 200%)

1. K!,u!)! ,! M!+$ L, H%$&  Piper nigrum L.

;adam et al. (2013) m-nyatakan 'ah+a 'uah lada hitam m-ngandung minyak 4olatil alkaloid tannin f-nolik fla4onoid kar'ohidrat dan ,rot-in. 7ada hitam diuluki d-ngan D King of SpicesE kar-na aroma dan fla4or yang m-ny-ngat yang '-rasal dari kom,osisi

minyak 4olatil- s-dangkan k-,-dasannya dit-ntukan ol-h alkaloid yang tidak mudah m-ngua, salah satunya ,i,-rin (>,st-in et al. 1**3).

9uah lada hitam m-ngandung 'ahan aktif s-,-rti amida f-nolat asam f-nolat dan fla4onoid yang '-rsifat antioksidan (antiradikal '-'as) sangat kuat (-gh+al dan =os+ami 2012). Antioksidan adalah s-nya+a yang da,at m-n-tralkan radikal '-'as d-ngan &ara m-m'-rikan -l-ktron atau atom H k-,ada radikal '-'as. S-nya+a antioksidan tidak m-nadi radikal 'aru kar-na m-m,unyai struktur mol-kul yang sta'il (Halli+-ll dan =utt-ridg- 1***). idak hanya s-nya+a antioksidan ,i,-rin yang t-rkandung dalam 'uah lada hitam uga  'anyak '-r,-ran dalam a,likasi klinis.

;-gunaan kandungan lada hitam da,at dilihat ,ada ta'a-l a'-l 1 '-rikut ini : a'-l 1. Farmakologi dan a,likasi klinis lada hitam ( Piper nigrum 7.)

(-gh+al dan =os+ami 2012)

9-'-ra,a at aktif dari 'uah lada hitam adalah s-'agai '-rikut: . P%'"%!

9uah lada hitam m-ngandung 5* alkaloid yang s-'agian '-sar t-rdiri dari ,i,-rin (>,st-in et al. 1**3). $i,-rin digunakan untuk k-,-rluan farmakologi (a'-l 1) diantaranya s-,-rti analg-sik anti,ir-tik antiinflamasi s-rta m-m,-rlan&ar ,ros-s ,-n&-rnaan (-gh+al dan =os+ami 2012).

=am'ar 3. Struktur kimia ,i,-rin . A&%, F'!($

Amida f-nolat adalah s-nya+a yang t-rdiri dari &in&in f-nolik dan gugus kar'onil (?) yang '-rikatan d-ngan atom Nitrog-n (N). -nurut -gh+al dan =os+ami (2012) amida f-nolat yang t-rkandung dalam 'uah lada hitam m-miliki fungsi s-'agai antioksidan (a'-l 1). Hal ini di,-rkuat ol-h ,-n-litian yang dilakukan ol-h Nakatani et al. (1*%6) m-nunukkan 'ah+a s-mua amida f-nolat yang t-rkandung dalam 'uah lada hitam m-miliki akti4itas antioksidan yang signifikan.

=am'ar . Struktur kimia amida f-nolat 4. A*& F'!($

Asam f-nolat adalah s-nya+a yang t-rdiri dari &in&in f-nolik dan gugus asam kar'oksilat (?H) d-ngan struktur kimia ?6?1. -nurut -gh+al dan =os+ami (2012) asam f-nolat yang t-rkandung dalam 'uah lada hitam m-miliki fungsi s-'agai antioksidan (a'-l 1).

=am'ar 5. Struktur kimia asam f-nolat ,. F(!%,

Fla4onoid t-rmasuk dalam golongan s-nya+a f-nolik d-ngan struktur kimia ?6?3 ?6. Akti4itas antioksidatif fla4onoid s-'agai salah satu k-lom,ok antioksidan alami yang t-rda,at ,ada 'uah lada hitam t-lah di,u'likasikan (a'-l 1) (-gh+al dan =os+ami 2012). Hal ini di,-rkuat ol-h ,-n-litian yang dilakukan ol-h "ido+ati et al . (2005) m-nunukkan  'ah+a fla4onoid m-miliki akti4itas antioksidan yang kuat.

=am'ar 6. Struktur kimia fla4onoid

1.5 K"&$)"+% L%* T%%* KLT

;romatografi 7a,is i,is ialah m-tod- ,-misahan fisikokimia. yang t-rdiri atas 'ahan  '-r'utir'utir (fas- diam) dit-m,atkan,ada ,-nyangga '-ru,a ,-lat g-las logam atau la,isan yang &o&ok.?am,uranyang akan di,isah '-ru,a larutan ditotolkan '-ru,a '-r&ak atau ,ita. S-t-lah ,-lat atau la,isan dil-takan di dalam '-ana t-rtutu, ra,at yang '-risi larutan,-ng-m'ang yang &o&ok (fas- g-rak) ,-misahan t-radi s-lama ,-ram'atanka,il-r  (,-ng-m'angan). S-lanutnya s-nya+a yang tidak '-r+arna harusditam,akkan (did-t-ksi) (Stahl 1*%5).

;romatogarafi 7a,is i,is m-ru,akan &ara analisis &-,at yang m-m-rlukan 'ahan yang s-dikit.Gntuk ,-n-liti ,-ndahuluan kandungan fla4onoid suatu -kstrak sudah m-nadi k-'iasaan umum untuk m-nggunakan ,-ng-m'ang '-ralkohol ,ada ,-ng-m'angan ,-rtama d-ngan kromatografi la,is ti,is misalnya 'utanolasam as-tatair (arkham 1*%%).

;romatografi 7a,is i,is digunakan untuk m-misahkan s-nya+as-nya+a yang sifatnya hidrofo' s-,-rti li,idali,ida dan hidrokar'on. S-'agai fas- diamdigunakan s-nya+a yang tak '-r-aksi s-,-rti sili&a g-l atau alumina.Sili&a g-l'iasa di'-ri ,-ngikat yang dimaksudkan untuk m-m'-rikan k-kuatan ,ada la,isan dan m-nam'ah ad-si ,ada g-las  ,-nyokong. $-ngikat yang 'iasa digunakan adalah kalsium sulfat (Sastrohamidoo 2002). -tod- s-d-rhana dalam ;7 adalah d-ngan m-nggunakan nilai R-tardation fa&tor (Rf) yang did-finisikan d-ngan ,-rsamaan :

-ta,i ,ada gugusgugus yang '-sar dari s-nya+as-nya+a yang susunannya miri, s-ringkali harga Rf '-rd-katan satu sama lainnya (Sastroshamidoo 2002).

1.6 A!(%*%* K'&u"!%!

Analisis k-murnian s-nya+a hasil isolasidilakukan d-ngan kromatografi la,is ti,is (;7) danui titik l-'ur. ;7 dilakukand-ngan m-ng-lusi larutan sam,-l yang ditotolkan  ,ada l-m,-ng sili&a g-l 60 F25 d-nganfas- g-rak '-ru,a -lu-n -til as-tath-ksan (:6).

9-r&ak yang ada diamati d-ngan sinar tam,ak G25 dan G366. ;-murnian s-nya+a dit-ta,kan s-&ara s-mikuantitatif d-ngan d-nsitom-t-r ,ada I maks  3# nm. S-nya+a hasil analisis dikatakan murni a,a'ila m-m'-rikan ,-ak tunggal ,ada ;7 d-ngan '-r'agai Fas-g-rak (argono dan -ndrato 2006).

S-dangkan titik l-'ur m-ru,akan &iri ,-nting s-nya+a organik ,adat. itik l-'ur  m-miliki arti ,-nting dalam id-ntifikasi dan ,-ngukuran k-murnian. $-nggunaan untuk  id-ntifikasi didasarkan ,ada fakta 'ah+a s-mua s-nya+a murni m-m,unyai titik l-'ur yang taam atau m-m,unyai titik t-m,-ratur yang sangat k-&il k-tika '-ru'ah s-m,urna dari ,adat k- &air. S-lain itu ,-nggunaan titik l-'ur untuk id-ntifikasi uga didasarkan ,ada fakta 'ah+a s-nya+a yang tidak murni m-nunukkan 2 f-nom-na ,-rtama yaitu suhu l-'ur yang l-'ih r-ndah dan k-dua m-miliki arak l-'ur yang l-'ih l-'ar. Alat yang digunakan untuk m-ngui titik l-'ur suatu s-nya+a adalah t-rmo,an.Gntuk id-ntifikasi kualitatif titik l-'ur m-ru,akan t-ta,an fisika yang ,-nting t-rutama untuk suatu s-nya+a hasil sint-sis isolasi mau,un kristalisasi (Hadi,ra'o+o 200*).

R-ntang titik l-'ur suatu s-nya+a m-ru,akan ,-tunuk k-murnian dari suatu s-nya+a. S-'aliknya ika r-ntangan l-'ih '-sar dari harga t-rs-'ut da,at dikatakan 'ah+a s-nya+a t-rs-'ut kurang murni dan da,at dilakukan taha,taha, ,-murnian l-'ih lanut misal r-kristalisasi. itik l-'ur suatu kristal ,adat adalah suhu k-tika ,adatan mulai '-ru'ah m-nadi &airan ,ada t-kanan udara 1 atm. @ika suhu dinaikkan mol-kul s-nya+a akan m-ny-ra, -n-rgi. akin tinggi suhu makin 'anyak -n-rgi yang dis-ra, maka akan m-naikkan g-rakan 4i'rasi dan rotasi mol-kul. @ika suhu t-rus dinaikkan m-ngaki'atkan rusaknya mol-kul dan  '-ru'ah dari ,adatan m-nadi &airan.$ada k-adaan &airan mol-kul masih t-rikat satu d-ngan

BAB III

BAHAN7 ALAT DAN METODE 3.1 B/!

• $i,-r nigrum atau ,i,-r al'um

• >tanol *6

• ;H -tanolik 10

• Silika =-l =F 25

• <iklorom-tana

• >til as-tat

• Anisald-hid asam sulfat 3.2 A($ • So8hl-t • ;-rtas saring • 9atu didih • Alat g-las • Hot,lat-• 4-n

• >ksikator yang dil-ngka,i ka,ur tohor  3.3 C" K'"j

3.3.1 /solasi

30 gram s-r'uk m-ri&a ditim'ang dan dimasukkan k- dalam alat ,-nyari so8hl-t yang t-lah di,asang d-ngan k-rtas saring.

J

am'ahkan -tanol *6 s-'nayak 2 kali sirkulasi (± 120 ml) dan tam'ahkan 'atu didih.

J

7akukan ,-nyarian s-lama 2 am d-ngan k-&-,atan sirkulasi 6% sirkulasi ,-r am. J

S-t-lah dingin ,isahkan sari dari 'agian yang tidak t-rlarut d-ngan ,-nyaringan m-lalui k-rtas saring.

J

Filtrat- yang di,-rol-h diua,kan diatas ,-manas air sam,ai k-ring atau k-ntal. J

am'ahkan 10 ml ;H-tanolik 10 sam'il diadukaduk hingga tim'ul -nda,an. J

S-t-lah t-rda,at -nda,an ,isahkan sari dari 'agian yang tidak larut m-lalui glass +ool.

J

Sari -rnih yang dida,at didiamkan dalam almari -s sam,ai ,-m'-ntukan kristal o,timal.

3.3.2 $-murnian

;ristal yang tim'ul di,isahkan di&u&i d-ngan -tanol *6 dingin dan dik-ringkan dalam l-mari ,-ng-ring suhu 0K? s-lama 305 m-nit.

J

S-l-sai dik-ringkan sim,an dalam -ksikator yang dil-ngka,i d-ngan ka,ur tohor. J

;ristal yang di,-rol-h ditim'ang dan diid-ntifikasi d-ngan ;7.

3.3.3 /d-ntifikasi

Am'il s-dikit ,adatan d-ngan uung s,at-l k-&il dan larutkan dalam -tanol. J

<ilakukan analisis d-ngan ;7 d-ngan kondisi analisis s'':  Fas- diam : sili&a g-l =F 25

 Fas- g-rak : diklorom-tana : -til as-tat (#5 : 25)

 ?u,likan : larutan sam,-l dan larutan standar ,i,-rin

 <-t-ksi : G 25 dis-m,rot d-ngan anisald-hid asam sulfat dan di,anaskan 110K? s-lama 10 m-nit

J

?atat dan 'andingkan harga RF yang di,-rol-h s-rta +arna yang t-r'-ntuk.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

$ada ,raktikum kali ini ,raktikan m-lakukan isolasi s-nya+a piperin dari s-nya+a  piperis nigris fructus. $raktikan m-lakukan tiga taha,an utama ,-r&o'aan yakni : isolasi  ,-murnian dan id-ntifikasi. $ada taha,an isolasi ,raktikan m-nim'ang 30 g 'u'uk m-ri&a

k-mudian di t-m,atkan ,ada '-ak-r glass 50 ml d-ngan ,-nutu, alumunium foil. ;-mudian  'u'uk m-ri&a di'ungkus d-ngan m-nggunakan k-rtas saring dan di'-ntuk silind-r d-ngan

k-dua uung ditutu, ra,at. $-nutu,an hanya 'ol-h dilakukan d-ngan m-li,at k-rtas saring kar-na ika di'-ri l-m atau 'ahan ,-r-kat lain akan m-m,-ngaruhi hasil isolasi. <iam-t-r   'u'uk m-ri&a dis-suaikan d-ngan diam-t-r t-m,at -kstrak ,ada so8hl-t s-hingga -kstrak  da,at dimasukkan d-ngan 'aik. $anang silind-r 'ungkusan 'u'uk m-ri&a uga dis-suaikan d-ngan ,anang ta'ung k-&il ,ada so8hl-t dimana ,anang 'ungkusan 'u'uk m-ri&a harus l-'ih ,-nd-k dari ,anang ta'ung k-&il ,ada so8hl-t ( #5 &m). Hal ini dilakukan agar ,ros-s isolasi da,at '-ralan d-ngan s-m,urna. ;-mudian 'u'uk m-ri&a di masukkan k- dalam ta'ung so8hl-t '-sar. $raktikan m-m'uat larutan yang digunakan untuk isolasi yakni -tanol *6 s-'anyak 120 ml. ;-mudian ,raktikan m-nuangkan 7arutan -tanol s-&ara ,-rlahan k-dalam lu'ang s-'anyak 28 sirkulasi s-lama 6 B % kali sirkulasi ,-r am. S-t-lah dingin filtrat di ,isahkan sari dari 'agian yang tidak t-rlarut d-ngan ,-nyaringan m-lalui k-rtas saring. S-t-lah itu ,raktikan m-ngua,kan filtrat diatas ,-nangas air sam,ai konsist-nsi k-ntal. S-t-lah itu ,raktikan m-nam'ahkan ;H -tanolik 10 sam'il diaduk aduk sam,ai tim'ul -nda,an S-t-lah m-ng-nda, ,raktikan m-misahkan sari dari 'agian yang tidak larut d-ngan m-nggunakan glass woll. S-t-lah m-nda,atkan sari -rnih ,raktikan m-nyim,an sari t-rs-'ut di dalam l-mari -s s-lama satu minggu. Hal ini '-rtuuan agar m-nda,atkan hasil kristal yang o,timal.

aha,an s-lanutnya adalah ,-murnian. Sari -rnih yang disim,an di dalam l-mari -s di am'il kristalnya lalu di tim'ang. <ida,atkan '-rat kristal 012 g. ;ristal k-mudian di&u&i d-ngan -tanol dingin *6 s-lama 30 B 5 m-nit ,ada suhu 0o_{?. aha,an s-lanutnya adalah}

id-ntifikasi d-ngan m-nggunakan ;romatografi 7a,is i,is (;7). $raktikan m-ngam'il s-dikit ,adatan kristal yang t-r'-ntuk d-ngan uung s,at-l k-&ilk-mudian m-larutkannya k-dalam -tanol. 7arutan t-rs-'ut dianalasis d-ngan kromatografi la,is ti,is (;7) d-ngan kondisi s-'agai '-rikut :

a. Fas- diam : Silika g-l F25

 '. Fas- g-rak : <iklorom-tana : >til as-tat ( #5 : 25 ) &. ?u,likan : larutan sam,-l dan larutan standar ,i,-rin

d. _{<-t-ksi : G 25 dis-m,rot d-ngan anisald-hid asam sulfat dan di,anaskan}

110o_{? s-lama 10 m-nit.}

9-rdasarkan hasil ,raktikum isolasi ,i,-rin dari $i,-r nigri fru&us dida,atkan r-nd-m-n s-umlah 0.3. ika dilihat dari r-nd-m-n yang dihasilkan umlahnya sangat

s-dikit hal ini 'isa dis-'a'kan t-m,at tum'uh tanaman  Piper nigrum kondisi &ua&a  ,ros-s ,-man-nan yang kurang s-m,urna dan +aktu ,-man-nan yang kurang t-,at. l-h kar-na itu hasil r-nd-m-n yang dihasilkan kurang m-m-nuhi standar yang harus di,-nuhi. ;-mudian hasil dari ;7 d-ngan fas- g-rak diklorom-tana dan -til as-tat d-ngan ,-r'andingan #5 : 25. S-hingga dihasilkan nilai Rf s-'-sar 0.5 dimana noda yang dit-m,uh sam,-l  &m dan arak -lu-n % &m. dari hasil t-rs-'ut da,at dik-tahui a,akah s-nya+a yang t-rkandung itu '-ru,a ,i,-rin. Hali ini uga m-nd-kati nilai Rf ,i,-rin ,ada  ,-n-litian Saha (200*) m-nunukkan 'ah+a nilai Rf yang t-r'-ntuk dari hasil isolasi $i,-r nigri fru&tus adalah 0.5. ol-h kar-na itu hasil yang dida,atkan ,ada ,raktikum kali ini '-ru,a ,i,-rin. S-lain itu hasil ,-n-litian s-'-lumnya m-nggunakan kromatografi kolom dan d-ngan fas- g-rak '-ru,a '-n-na dan kloroform d-ngan ,-r'andingan # :1. @ika dilihat dari nilai Rf yang dihasilkan m-mang m-iliki ,-r'-daan yang tidak  signifikaan hal itu 'isa t-radi kar-na adanya ,-r'-daan m-tod- dan fas- g-rak yang digunakan kar-na ,ada ,raktikum kali ini digunakan m-tod- so8hl-tasi dan fas- g-rak   '-ru,a diklorom-tana : -tilas-tat d-ngan ,-r'andingan #5 : 25.

S-dangkan noda yang dihasilkan '-r+arna kuning &-rah s-dangkan noda standar  tidak tam,ak. S-hingga ,-r'-daan +arna t-rs-'ut 'ias di,-ngaruhi ol-h adanya ,-r'-daan kons-ntrasi s-rta ,-ny-m,rotan anisald-hidasam sulfat kurang s-m,urna s-hingga noda yang dihasilkan ,un uga tidak s-m,urna.

DAFTAR PUSTAKA

 9alai $-n-litian anaman /ndustri dan $-ny-gar (9A7/R/). 200#. -knologi Gnggulan anaman 7ada. 9A7/R/ : htt,:CC'alittri.lit'ang.,-rtanian.go.id

 Hadi,ra'o+o . 200*. Optimasi Sintesis Analog Kurkumarin 1!"#is" ($"%idroksi"!"  &etoksi #en'ilidin) rea pada entang p% !"$. (Skri,si). Surakarta : Gni4-rsitas

uhammadiyah Surakarta.

 Halli+-l 9. @..?. =utt-ridg-. 1***. *ree adicals in #iolog+ and &edicine. N-+ !ork : 8ford Gni4-rsity $r-ss.

 ;adam S.SL ahadik ;.RL 9othara ;.=. 2013.  Principle of &edicinal ,hemistr+. 10th >d Nirali $rakashan.

 argono S.A. dan R.N. -ndrato. 2006. Sint-sis <ias-til =ama4uton0 d-ngan m-nggunakan As-til ;lorida s-'agai A&ylating ag-nt. &. *ar. -ndo 18(1): 2531.

 arkham ;.R. 1*%%. ,ara &engidentifikasi *lavonoid  dit-r-mahkan ol-h ;osasih $adma+inata. 9andung : /9.

 -gh+al . dan .;. =os+ami. 2012. Nutritional ?onstitu-nt of 9la&k $-,,-r as -di&inal ol-&ul-s: A R-4i-+. Open Access Scientific eports. 1: 1#.

 $arthasarathy N. Arthur S-l+yn . and Gdayakumar . 200%. ropical dr+ evergreen forests of peninsular -ndia/ ecolog+ and conservation significance. ropical  ,onservation Science ol.1(2):%*110. A4aila'l- onlin-: tro,i&al&ons-r4ations&i-n&-.org

 $urs-glo4- @. ". >. =. 9ro+n ?. 7. =r--n S. R. @. Ro''ins. 1*%1. Spices/ volume 0.  N-+ !ork : 7ongman /n&..

 Saha kartika ?handra. 200*. /solation and &hara&t-riation of ,i,-rin- from th- fruits of 'la&k ,-,,-r ( Piper nigrum). @. 9anglad-sh Agril. Gni4. 11(1): 11B16

 Sastrohamidoo H. 2002. Kimia &in+ak Astiri. !ogyakarta : F/$A G=.

 Stahl >. 1*%5.  Analisis Obat Secara kromatografi dan &ikroskopi dit-r-mahkan ol-h ;osasih $adma+inata dan /+ang So-diro. 9andung : /9.

 itroso-,omog-m'ong. 200#. &orfologi umbuhan. !ogyakarta : G=

 "ahid $. 1**6.  -dentifikasi anaman 2ada.  &onograf anaman 2ada. 9A7/R: htt,:CC'alittro.lit'ang.,-rtanian.go.id

 "ido+ati " R Safitri R Rumum,uk M  Siahaan. 2005.  Penapisan aktivitas  superoksida dismutase pada berbagai tanaman. 3urnal Kesehatan &as+arakat (3K&)

5(1): 33%.