ﺶﻬﺟ ﻲﺳرﺮﺑ نوﺰﮔا يﺎﻫ
يﺎﻫ 8 و 17 C-KIT نژ
دﺎﺣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ ﻪﺑ نﺎﻳﻼﺘﺒﻣ رد
ناﺮﻳا رد
ﺮﻛاذ دﺎﻫﺮﻓ ﺮﺘﻛد* I
هدازﺪﻤﺤﻣ ﺪﻤﺤﻣ II
ﻲﺋﺎﻗآ زﺎﻨﻬﻣ ﺮﺘﻛد رﻮﭘ
III
يرﻻ رﺎﮕﺘﺳر ﻢﺳﺎﻗ ﺮﺘﻛد IV
ﻪﻣﺪﻘﻣ
ﭘ ــ ﻴﺌﺗوﺮ ــــ ﻦ C-KIT ﭘ ، ــ ــﻧﺮﻳﺬ ـ رﻮﺘﻛﺎــﻓ هﺪ ﻴﻨﺑ لﻮﻠــﺳ
ــــ يدﺎ
) SCF-R = stem cell factor-Receptor (
ﻲـﻣ ﻊـﻳزﻮﺗ ﻪـﻛ ﺪـﺷﺎﺑ
ﺶﻴﭘ يﺎﻬﻟﻮﻠﺳ يور ﺮﺑ ﻲﻌﻴﺳو
ﺖﺳﺎﻣ ،يزﺎﺴﻧﻮﺧ زﺎﺳ
ﻞـﺳ ،ﺎـﻫ
ﺖﻴﺳﻮﻧﻼﻣ
ﺶﻴـﭘ يﺎﻬﻟﻮﻠـﺳ و ﺎـﻳاز يﺎﻬﻟﻮﻠـﺳ ،ﺎﻫ
هﺎﮕﺘـﺳد زﺎـﺳ
دراد ﺎﻬﺘﻓﺎﺑ ﺮﻳﺎﺳ ﺰﻴﻧ و شراﻮﮔ .
C-KIT ﺎــﺑ ﻲﻨﻴﺌﺗوﺮﭘﻮــﻜﻴﻠﮔ 145
ءﺰــﺟ ،نزو نﻮــﺘﻟادﻮﻠﻴﻛ
اﻮﻧﺎﺧ هد III
ﺮﻳﺎـﺳ ﺪﻨﻧﺎﻤﻫ و هدﻮﺑ زﺎﻨﻴﻛ ﻦﻳزوﺮﻴﺗ يﺎﻫرﻮﺘﭙﺳر
ياراد هداﻮﻧﺎﺧ ﻦﻳا يﺎﻀﻋا 3
ﻞﻣﺎـﺷ ﻪﻛ ﺖﺳا ﺺﺨﺸﻣ ﺶﺨﺑ 5
لﻼـﺧ هﺎـﺗﻮﻛ ﻪﻌﻄﻗ ،لﻮﻠﺳ جرﺎﺧ رد ﻦﻴﻟﻮﺑﻮﻠﮔﻮﻧﻮﻤﻳا ﻪﻴﺒﺷ ﻪﻌﻄﻗ يزﺎـﻨﻴﻛ ﻦــﻳزوﺮﻴﺗ ﺖــﻴﻟﺎﻌﻓ ﺎﺑ ﻲـﻤﺳﻼﭘﻮﺘﻴﺳ ﻦـﻣود و ﻲـﻳﺎﺸﻏ ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ
).
3 - 1
نژ (
C-KIT وﺮﻛ ﺪﻨﻠﺑ يوزﺎﺑ رد موزﻮﻣ
4 ﻪﻴﺣﺎﻧ ، 1 و
يﺎﻫﺪﻧﺎﺑ 2 و 1 ) 4q11-q12 (
موزﻮـﻣوﺮﻛ رد و ﻲﻧﺎﺴـﻧا 5
ﻲـﺷﻮﻣ
ﺖـﺳا ﻪـﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ .
ياراد نژ ﻦـﻳا 21
گرﺰـﺑ زا و نوﺰـﮔا
ﻦﻳﺮـﺗ
ﻲﻣ نﺎﺴﻧا مﻮﻧژ رد دﻮﺟﻮﻣ يﺎﻬﻧژ ﺪﺷﺎﺑ
).
4 و 5
(
هﺪﻴﻜﭼ
فﺪﻫ و ﻪﻨﻴﻣز :
نژ رد ﺶﻬﺟ C-KIT
ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ
ﺶﻴـﭘ ﻚـﻳ و هﺪـﺷ ﻚﻴﻤـﺳﻮﻟ يﺎﻬﻟﻮﻠﺳ لﺮﺘﻨﻛ نوﺪﺑ ﺮﻴﺜﻜﺗ ﻪـﺑ ار ﺪـﺑ ﻲـﻬﮔآ
دراد هاﺮﻤﻫ . نﺪﺷ ﻪﻓﺎﺿا و فﺬﺣ دﻮﺟو deletion and insertion)
( نوﺰﮔا 8 ﻲﻨﻴﻟﻮﺑﻮﻠﮔﻮﻧﻮﻤﻳا ﻦﻣود ﻦﻴﻤﺠﻨﭘ ﻪﻛ C-KIT
ار
ﻲﻣ ﺪﻛ ﻪﻄﻘﻧ ﺶﻬﺟ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ و ﺪﻨﻛ يا
Point mutation) (
نوﺰﮔا رد 17 يزﺎﻨﻴﻛ ﻦﻳزوﺮﻴﺗ ﻪﻴﺣﺎﻧ ﻪﻛ C-KIT
ار ﻲـﻣ ﺪﻛ رد ،ﺪـﻨﻛ
ﺪﻧراد راﺮﻗ ﺖﻴﻤﻫا درﻮﻣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ دﺎﺣ ﻲﻤﺳﻮﻟ .
و ﺺﻴﺨﺸـﺗ ياﺮـﺑ رﻻﻮـﻜﻟﻮﻣ تﺎﺸـﻳﺎﻣزآ ندﺮﻛ ﻲﺋاﺮﺟا ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا زا فﺪﻫ
ﺶﻬﺟ ﻦﻳا يﺮﮕﻟﺎﺑﺮﻏ دﻮﺑ دﺎﺣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﻴﺑ رد ﺎﻫ
.
ﺑ شور ﺮ ﻲﺳر : 212 نژ رد ﺶـﻬﺟ ﺮـﻈﻧ زا دﺎـﺣ يﺪـﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤـﺳﻮﻟ ﻪـﺑ ﻼﺘـﺒﻣ رﺎﻤﻴﺑ C-KIT
هﺪﻫﺎﺸـﻣ ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮـﻣ يا
ﺪـﺷ شراﺰﮔ ﺶﻬﺟ زوﺮﺑ ﺪﺻرد و ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﻲﻔﻴﺻﻮﺗ .
نوﺰـﮔا ﺶـﻬﺟ 8
نژ رد C-KIT مﺎـﺠﻧا ﺎـﺑ
)PCR
polymerase
chain reaction (
زا ﻞـﺻﺎﺣ ﺪـﻧﺎﺑ ﺖـﻛﺮﺣ زا ﺪـﻌﺑ و ﺪـﺷ مﺎـﺠﻧا هﺪـﺷ ﻲـﺣاﺮﻃ يﺎـﻫﺮﻤﻳاﺮﭘ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ و لژ يور PCR
CSGE
دﺮﮔ ﻲﺳرﺮﺑ نژ ﻦﻳا يور ﺮﺑ ﺶﻬﺟ دﻮﺟو ، ﺪﻳ
.
ﻪـﻄﻘﻧ ﺶـﻬﺟ درﻮـﻣ رد نوﺰـﮔا رد يا
17 نژ ، C-KIT زا ﺪـﻌﺑ ، PCR
يور
نارﺎﻤﻴﺑ تﻻﻮﺼﺤﻣ ،نارﺎﻤﻴﺑ ﻦﻳا ﻚﻴﻣﻮﻧژ DNA
ﺮﺛﻻادوﺪـﺤﻣ ﻢﻳﺰﻧآ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ هﺪﺷ PCR ArtII
ﻚـﻴﻨﻜﺗ و RFLP
ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ .
ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺎﻫ : نوﺰﮔا ﺶﻬﺟ 8
رد 4 / 1 %
ﻣ درﻮـﻣ دﺎـﺣ يﺪـﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤـﺳﻮﻟ ﻪـﺑ نﺎﻳﻼﺘﺒﻣ ﺮـﻳز ياﺮـﺑ ﻪـﻛ ﺪـﻳدﺮﮔ هﺪﻫﺎﺸـﻣ ،ﻪـﻌﻟﺎﻄ
هوﺮﮔ
دﻮﺑ توﺎﻔﺘﻣ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻦﻳا ،ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ .
ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ 7 / 4 %
ﻪﻄﻘﻧ ﺶﻬﺟ ،ﻢﻫ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ نارﺎﻤﻴﺑ زا
D816 يا نوﺰﮔا رد 17 ار
هوﺮﮔ ﺮﻳز رد ﺎﻬﻧآ ﻊﻳزﻮﺗ ﻪﻛ ﺪﻨﺘﺷاد دﻮﺒﻧ نﺎﺴﻜﻳ دﺎﺣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ يﺎﻫ
.
ﻪﺠﻴﺘﻧ يﺮﻴﮔ : ﺶﻬﺟ ﻪﻛ داد نﺎﺸﻧ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا يﺎﻫ
نژ C-KIT يﺪـﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤـﺳﻮﻟ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﻴﺑ زا ﻲﻬﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗ ﺪﺻرد ،
دﺎﺣ ) هوﺮﮔ ﺮﻳز يﺎﻫ ،M2
(M4
ﻲﻣ ﻞﻣﺎﺷ ار ناﺮﻳا رد
ﻲﻣ ﻪﻛ دﻮﺷ
ﺶﻬﺟ ﻦﻳا ﻲﻟﻮﻜﻟﻮﻣ ﺺﻴﺨﺸﺗ ﺎﺑ ناﻮﺗ
ﻞـﻜﺗوﺮﭘ درﻮـﻣ رد ،ﺎﻫ
ﺖﻓﺮﮔ ﻢﻴﻤﺼﺗ ﺢﻴﺤﺻ ﻲﻧﺎﻣرد .
هژاوﺪﻴﻠﻛ ﺎﻫ : –1 دﺎﺣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ
–2 نﻮﻴﺳﺎﺗﻮﻣ ﻲﺳ يﺎﻫ
ـ ﺖﻴﻛ –3 هﺮﻴﺠﻧز ﺶﻨﻛاو ﻲﻠﭘ يا
زاﺮﻣ
–4
ﻲﻠﭘ تﺎﻌﻄﻗ ﻲﻟﻮﻃ دوﺪﺤﻣ ﻢﺴﻴﻓرﻮﻣ
(I و رﺎﻴﺸﻧاد ﺪﻬﺑ تﺎﻣﺪﺧ و ﻲﻜﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ناﺮﻤﭼ و ﺖﻤﻫ ﺪﻴﻬﺷ هاﺮﮔرﺰﺑ ﻊﻃﺎﻘﺗ ،ﻲﻜﺷﺰﭘاﺮﻴﭘ هﺪﻜﺸﻧاد ،يژﻮﻟﻮﺗﺎﻤﻫ PhD
ناﺮﻳا ،ناﺮﻬﺗ ،ناﺮﻳا ﻲﻧﺎﻣرد ـ ﻲﺘﺷا
*) ﻒـﻟﺆﻣ
لوﺆﺴﻣ .(
(II ناﺮﻳا ،ناﺮﻬﺗ ،ناﺮﻳا ﻲﻧﺎﻣرد ـ ﻲﺘﺷاﺪﻬﺑ تﺎﻣﺪﺧ و ﻲﻜﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ناﺮﻤﭼ و ﺖﻤﻫ ﺪﻴﻬﺷ هاﺮﮔرﺰﺑ ﻊﻃﺎﻘﺗ ،ﻲﻜﺷﺰﭘاﺮﻴﭘ هﺪﻜﺸﻧاد ،يژﻮﻟﻮﺗﺎﻤﻫ ﺪﺷرا سﺎﻨﺷرﺎﻛ .
(III ،ناﺮﻬﺗ ،ناﺮﻳا نﻮﺧ لﺎﻘﺘﻧا نﺎﻣزﺎﺳ ،يژﻮﻟﻮﺗﺎﭘ ﺺﺼﺨﺘﻣ و رﺎﻳدﺎﺘﺳا ناﺮﻳا
.
(IV و رﺎﻳدﺎﺘﺳا ناﺮﻳا ،ناﺮﻬﺗ ،ناﺮﻳا ﻲﻧﺎﻣرد ـ ﻲﺘﺷاﺪﻬﺑ تﺎﻣﺪﺧ و ﻲﻜﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ناﺮﻤﭼ و ﺖﻤﻫ ﺪﻴﻬﺷ هاﺮﮔرﺰﺑ ﻊﻃﺎﻘﺗ ،ﻲﻜﺷﺰﭘاﺮﻴﭘ هﺪﻜﺸﻧاد ،يژﻮﻟﻮﺗﺎﻤﻫ PhD
.
ﻪـﺑ لﺎﺼـﺗا ﺎﺑSCF
C-KIT نﺪـﺷ لﺎـﻌﻓ ﺐـﺟﻮﻣ C-KIT
و
ﻲﻣ ﻲﻟﻮﻠﺳ ﺮﻴﺜﻜﺗ ﺖﻬﺟ رد ﻲﻫﺪﻣﺎﻴﭘ
ﻲﻟو دﻮﺷ دﺎـﺣ ﻲﻤﺳﻮﻟ رد
يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ )
AML=Acute myeloid leukemia (
ترﻮﺻ ود ﻪﺑ
ﻲﻣ ﺪﺣ زا ﺶﻴﺑ ﺮﻴﺜﻜﺗ ياﺮﺑ ﻲﻫﺪﻣﺎﻴﭘ ﻞﻣﺎﻋ
ددﺮﮔ : رد ﻪـﻜﻨﻳا لوا
عﻮـﻧ رد هﮋﻳﻮـﺑ و AML
و M2
رد ﺶـﻬﺟ ،M4
ASP816 )
رد
نوﺰــﮔا 17 ( ﺎــﻳ و ASP419 )
نوﺰــﮔا رد 8
C-KIT ( و هداد خر
يدﻮﺨﺑدﻮﺧ نﺪﺷ لﺎﻌﻓ ﺚﻋﺎﺑ C-KIT
ﻲﻣ ﻣود و ددﺮﮔ ﺖـﻟﺎﺣ ﻦﻴ
دﺎــﻳز ﻲﺤﻄــﺳ زوﺮــﺑ زا ﻲــﺷﺎﻧ )
Overexpression (
C-KIT رد
ﻪــﻛ ﺖــﺳا AML C-KIT
رد 90 - 80 % ﺖــﺳﻼﺑ زا زوﺮــﺑ ﺎــﻫ
ﻲﻣ ﺑﺎﻳ ــ
)ﺪ
6 و 7
(
ﺑ و ـــ ﻴﻟد ﻪ ـــ لﻮﻠـﺳ رﻮﺘﻛﺎـﻓ ناواﺮـﻓ رﻮﻀـﺣ ﻞ
ﻐﻣ لﺎﻣوﺮﺘــﺳا يﺎﻬﻟﻮﻠــﺳ ﺢﻄــﺳ ﺮــﺑ يدﺎــﻴﻨﺑ ــــ
ﺨﺘﺳا ﺰ ــــ ،ناﻮ
نﺪـﺷ لﺎـﻌﻓ ﺐﺟﻮﻣ C-KIT
ﺪـﺣ زا ﺶﻴـﺑ ﻲﻟﻮﻠـﺳ ﺮـﻴﺜﻜﺗ و ﺎـﻫ
ﻲﻣ دﻮﺷ
).
8
(
هﺪﻨﻨﻛ رﺎﻬﻣ هزوﺮﻣا
ﻪﺘﺧﺎـﺳ ﻲـﻧاواﺮﻓ يزﺎـﻨﻴﻛ ﻦﻳزوﺮﻴﺗ يﺎﻫ
هﺪﺷ ﺎـﻬﻨﺗ نﺎﻴﻣ ﻦﻳا زا ﻪﻛ ﺪﻧا imatinib
زﻮـﺠﻣ ﺖـﺳا ﻪﺘﺴـﻧاﻮﺗ
دﺮﻴﮕﺑ ار ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ هدﺎﻔﺘﺳا
) 9
نﺎـﻴﻣ زا ﻪﻛ ﺖﺳا ﻦﻳا ﻢﻬﻣ ﻪﺘﻜﻧ ﻲﻟو (
ﺶﻬﺟ هﺪﻨﻨﻛ ﺮﻴﮔرد يﺎﻫ C-KIT
نوﺰـﮔا ﺶﻬﺟ ، 17
ﻪـﺑ موﺎـﻘﻣ
imatinib ﺖــﺳا
) 10
ــﻨﻨﻛ رﺎــﻬﻣ ﻪــﻛ ﺪــﻨﭼ ﺮــﻫ (
مﺎــﻨﺑ يﺮــﮕﻳد هﺪ
PKC412 ﺶﻬﺟ ﺖﺳا ﻪﺘﺴﻧاﻮﺗ
نوﺰـﮔا يﺎﻫ 17
ﺪـﻳﺎﻤﻧ رﺎـﻬﻣ ار
دراﺪﻧ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ هدﺎﻔﺘﺳا زﻮﻨﻫ ﻲﻟو
).
10
ﺎﻫﺮﺴﻧﺎﻛ نﺎﻣرد ﻲﻠﻛ رﻮﻄﺑ (
ﻲـﻣ ﺖـﻣوﺎﻘﻣ ﻪـﺑ ﺮـﺠﻨﻣ ،ﺪﺣاو يوراد ﺎﺑ
ددﺮـﮔ
) 11
ﻲـﻓﺮﻃ زا و (
ﻲﻣ نﺎﺸﻧ تﺎﻘﻴﻘﺤﺗ
نوﺰـﮔا ﺶـﻬﺟ ﻪـﻛ ﺪـﻫد 8
C-KIT ﺐـﺟﻮﻣ
دﻮـﻋ ناﺰـﻴﻣ ﺶﻳاﺰﻓا )
relapse rate (
ـﻓا رد ﻪـﺑ ﻼﺘـﺒﻣ داﺮ AML
ﻲﻣ
)دﻮﺷ
12
ﺶﻬﺟ ترﻮﺻ رد ﻪﻛ (
C-KIT ﻊﻳﺮﺳ ﻪﭼ ﺮﻫ ﺪﻳﺎﺑ ، ﺮﺗ
هﺪــﻨﻨﻛرﺎﻬﻣ زا نآ يﺎــﻫ
) ﺮﻳﺎــﺳ ياﺮــﺑ ﺮــﮕﻳد يﺎــﻫوراد رﺎــﻨﻛ رد
ﻞﻣاﻮﻋ ( دﺮﻛ هدﺎﻔﺘﺳا .
هوﺮﮔ ﺮﻳز
يﺎﻫ ﻞﻣﺎـﺷAML
وM2 M4
ﺪﻨﺘﺴﻫ ﻲﺑﻮﻠﻄﻣ زﻮﻨﮔوﺮﭘ ياراد
) 13
(
ﺶﻬﺟ ﺮﺛا رد ﻲﻟو
يﺎﻫ 816
نوﺰﮔا ﺎﻳ و 8
C-KIT ﻠﻄﻣﺎﻧ زﻮﻨﮔوﺮﭘ ﻦﻴﻴﻌﺗ اﺬﻟ ؛ﺪﺷ ﺪﻫاﻮﺧ بﻮ
ﺪــﻫاﻮﺧ نﻮﻴــﺳﺎﺗﻮﻣ ود ﻦــﻳا ﻦﻴــﻴﻌﺗ يﺎــﻫدﺮﺑرﺎﻛ زا ،زﻮــﻨﮔوﺮﭘ دﻮﺑ
).
14
(
ﻪﺘﻔﮔ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ
ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ نﻮـﻨﻛ ﺎـﺗ ﻪـﻜﻨﻳا و قﻮﻓ يﺎﻫ
ﺮـﺑ يا
ﺶﻬﺟ ﻦﻳا يور
ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﻴﺑ رد ﺎﻫ مﺎـﺠﻧا ناﺮـﻳا رد AML
ياﺮﺑ ﻲﻳﺎﻬﺷور ﻲﺣاﺮﻃ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا مﺎﺠﻧا زا فﺪﻫ ،ﺖﺳا هﺪﺸﻧ ﺟ يﺮﮕﻟﺎــﺑﺮﻏ ﺶــﻬ
يزﺎﺴــﻟﺎﻌﻓ يﺎــﻫ C-KIT
ندﺮــﻛ ﻲــﺋاﺮﺟا و
ﺶﻬﺟ ﻦﻳا رﻻﻮﻜﻟﻮﻣ ﺺﻴﺨﺸﺗ يﺎﻬﺷور
ﻲـﻧاواﺮﻓ ﻲﺳرﺮﺑ و ﺎﻫ
ﻪـﺑ ﻼﺘـﺒﻣ داﺮﻓا نﺎﻴﻣ رد ﺎﻬﻧآ زوﺮﺑ AML
هوﺮـﮔ ﺮـﻳز رد
يﺎـﻫ
ﻒﻠﺘﺨﻣ
)FAB
French American British (
دﻮﺑ . ﻲﺳرﺮﺑ شور
ﻪﻧﻮﻤﻧ داﺪﻌﺗ ﻲﻧﻮﺧ يﺎﻫ 250
ﻪﺑ لﺎﺴﮔرﺰﺑ نﺎﻳﻼﺘﺒﻣ زا ﺮﻔﻧ
ﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ
هوﺮﮔﺮﻳز ﺎﺑ دﺎﺣ يﺪﻴ
ﻪـﻘﺒﻃ ﻒـﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ
يﺪـﻨﺑ
FAB
نﺎﺘﺳرﺎﻤﻴﺑ نﻮﺧ ﺶﺨﺑ زا ،
ﺰﻛﺮﻣ و ﻲﺘﻌﻳﺮﺷ ﺮﺘﻛد يﺎﻫ
ﺖــﻬﺟ ﺎــﺗ ﺪــﺷ ﻪــﻴﻬﺗ نﻮــﺧ لﺎــﻘﺘﻧا نﺎﻣزﺎــﺳ يﺮﺘﻣﻮﺘﻴــﺳﻮﻠﻓ ﺺﻴﻠﺨﺗ ﻲﺳرﺮﺑ وDNA
راﺮـﻗ هدﺎﻔﺘـﺳا درﻮـﻣ يﺪـﻌﺑ يﺎـﻫ
دﺮــﻴﮔ . ﻲﻤــﺳﻮﻟ ﻦــﻳا ﺺﻴﺨﺸــﺗ ،يژﻮــﻟﻮﻓرﻮﻣ سﺎــﺳاﺮﺑ ﺎــﻫ
ﻂــﺳﻮﺗ يﺮﺘﻣﻮﺘﻴــﺳﻮﻠﻓ ﺰــﻴﻧ و ﻲﻳﺎﻴﻤﻴــﺷﻮﺘﻴﺳ ﻦﻴﺼــﺼﺨﺘﻣ
هﺎﮕﺸــﻳﺎﻣزآ دﻮــﺑ هﺪــﺷ ﺪــﻴﻳﺄﺗ ﺎــﻫ
. هﺪﻫﺎﺸــﻣ ﻪــﻌﻟﺎﻄﻣ عﻮــﻧ يا
ﺪـﺷ شراﺰـﮔ ﺶـﻬﺟ زوﺮـﺑ ﺪـﺻرد و دﻮـﺑ ﻲﻔﻴﺻﻮﺗ .
ﺖـﻬﺟ
زﺎــﻨﻴﺌﺗوﺮﭘ شور زا ،جاﺮﺨﺘــﺳا ﺪــﺷ هدﺎﻔﺘــﺳا ﻞــﻨﻓ و K
).
15 (
ﻪﻟﻮﻟ ﺺﻴـﻠﺨﺗ نﺎـﻣز ﺎـﺗ نﻮـﺧ يوﺎـﺣ يﺎﻫ رﺰـﻳﺮﻓ ردDNA
ﺪﻧﺪﺷ يراﺪﻬﮕﻧ .
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻦﻳا نﺎﻴﻣ زا ،ﺎـﻫ
212 ياراد ﻪـﻛ ﻪـﻧﻮﻤﻧ
)OD
Optical
density ( ﺖــﻬﺟ ﺐــﺳﺎﻨﻣ ﺪﻧﺪــﺷ بﺎــﺨﺘﻧا ،ﺪــﻧدﻮﺑPCR
. ياﺮــﺑ
نوﺰــﮔا رد ﺶــﻬﺟ ﺺﻴﺨﺸــﺗ 8
يﺮﮕﻟﺎــﺑﺮﻏ شور زا ، CSGE
) conformational sensitive Gel electrophoresis (
هدﺎﻔﺘـﺳا
ﺪــﺷ
).
16
يﺎــﻫﺮﻤﻳاﺮﭘ زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎــﺑ اﺪــﺘﺑا ﻪــﻛ ﺐــﻴﺗﺮﺗ ﻦــﻳا ﻪــﺑ (
،ﻢﻴﻘﺘﺴـﻣ 5'-TTC TGC CCT TTG AAC TTG CT-3'
و
سﻮﻜﻌﻣ ، 5'-AAA CTA GAA GCC ACA TGG AAA-3'
ﻪﻣﺎﻧﺮﺑ
نﻮﻴﺳارﻮﭼﺎﻧد ؛ﺪﺷ مﺎﺠﻧا ﺮﻳز ترﻮﺼﺑPCR
initial
تﺪﻣ ﻪﺑ هرود ﻚﻳ 5
تراﺮﺣ رد ﻪﻘﻴﻗد 94
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد
داﺮـﮔ
و 35
ﻞﻣﺎﺷ ﻞﻜﻴﺳ ﺮﻫ ﻪﻛ يراﺮﻜﺗ ﻞﻜﻴﺳ )
ﻪـﺑ نﻮﻴﺳارﻮﭼﺎﻧد
تﺪﻣ
30 رد ﻪﻴﻧﺎﺛ 94
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد
،داﺮﮔ annealing تﺪﻣ ﻪﺑ
1 رد ﻪﻘﻴﻗد 58
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد
و داﺮﮔ elongation تﺪـﻣ ﻪـﺑ
1
رد ﻪﻘﻴﻗد 72
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد داﺮﮔ
( ًﺎـﺘﻳﺎﻬﻧ و Final elongation
تﺪــﻣ ﻪــﺑ 6
رد ﻪــﻘﻴﻗد 72
ﻲﺘﻧﺎــﺳ ﻪــﺟرد ﺪــﺷ مﺎــﺠﻧا داﺮــﮔ
.
تﻻﻮﺼﺤﻣ يﺎﻣد ﺎﺗ ﻪﻠﺻﺎﺣ PCR
98
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد
ﻪـﺑ داﺮـﮔ
تﺪﻣ 5 ﺲﭙـﺳ و ﺪﻧدﺮﮔ هرﻮﺗﺎﻧد ﺎﺗ ﺪﻧﺪﺷ هداد تراﺮﺣ ﻪﻘﻴﻗد
ﻪﺑ ﺎﻣد ﺶﻫﺎﻛ ﺎﺑ 65
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد
تﺪﻣ ﻪﺑ داﺮﮔ 30
رد ،ﻪﻘﻴﻗد
،ﺶﻬﺟ دﻮﺟو ترﻮﺻ ﺲﻜﻠﺑودوﺮﺘﻫ
ﺪﻧﺪﺷ ﻞﻴﻜﺸﺗ ﺎﻫ .
ﺲﭙـﺳ
لژ رد تﻻﻮﺼﺤﻣ 10
% ﻞﻣﺎﺷ CSGE
99 ﻪﺑ 1 ﺪـﻴﻣﻼﻳﺮﻛا زا
ﻪــــﺑ ) fluka (
)BAP
biscaryloylpiperazine (
10 % ﻦﻠﻴــــﺗا
لﻮـــﻜﻴﻠﮔ )
sigma ( ، 15 % ﺪـــﻳﺎﻣﺎﻣﺮﻓ )
fluka ( و 5X / 0 ﺮﻓﺎـــﺑ زا
)TTE
Tris Taurine EDTA ) (
TTE 1X = 89 ﻲــﻠﻴﻣ رﻻﻮــﻣ
،ﺲﻳﺮﺗ 5 / 28 ﻲﻠﻴﻣ و ﻦﻳرﻮﺗ رﻻﻮﻣ 2
/ 0 ﻲﻠﻴﻣ رﻻﻮـﻣ
(EDTA
،
ﮓـﻧر ﺪـﻳﺎﻣوﺮﺑ مﻮﻳﺪﻴﺗا ﺎﺑ ﺪﻌﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ رد زرﻮﻓوﺮﺘﻜﻟا
يﺰـﻴﻣآ
ﺪـﺷ يرادﺮﺒﺴـﻜﻋ ﺞﻳﺎﺘﻧ و ﺪﻧﺪﺷ .
ﻪـﻄﻘﻧ ﺶـﻬﺟ درﻮـﻣ رد
يا
ﻢﻴﻘﺘﺴـﻣ يﺎـﻫﺮﻤﻳاﺮﭘ زا هدﺎﻔﺘـﺳا ﺎـﺑD816
5'-TGT ATT
CAC AGA GAC TTG GCA-3' سﻮـﻜﻌﻣ و
5'-TAA
TTA GAA TCA TTC TTG ACG-3' ﻪــﻣﺎﻧﺮﺑ
PCR
نﻮﻴﺳارﻮﭼﺎﻧد ؛ﺪﺷ مﺎﺠﻧا ﺮﻳز ترﻮﺼﺑ initial
ﻪـﺑ هرود ﻚﻳ
تﺪﻣ 4 تراﺮﺣ رد ﻪﻘﻴﻗد 94
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد
ﻲـﺳ و داﺮﮔ
ﺞﻨـﭘو
ﻞﻣﺎﺷ ﻞﻜﻴﺳ ﺮﻫ ﻪﻛ يراﺮﻜﺗ ﻞﻜﻴﺳ )
تﺪـﻣ ﻪـﺑ نﻮﻴﺳارﻮﭼﺎﻧد
30 رد ﻪﻴﻧﺎﺛ 94
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد
،داﺮﮔ annealing تﺪـﻣ ﻪـﺑ
30
رد ﻪﻴﻧﺎﺛ 45
ﻪﺟرد ﻲﺘﻧﺎـﺳ و داﺮـﮔ elongation
تﺪـﻣ ﻪـﺑ 30
رد ﻪﻴﻧﺎﺛ 72
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد داﺮـﮔ
( ًﺎـﺘﻳﺎﻬﻧ و final elongation
تﺪﻣ ﻪﺑ 6
رد ﻪﻘﻴﻗد 72
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد
ﺪﺷ مﺎﺠﻧا داﺮﮔ .
ﺲﭙـﺳ
ﻪـــﻄﻘﻧ ﺶـــﻬﺟ ﻦﺘﻓﺎـــﻳ ياﺮـــﺑ يا
ﻚـــﻴﻨﻜﺗ سﺎـــﺳاﺮﺑD816
)RFLP
Restriction fragment length polymorphysm (
و
ﻢﻳﺰــﻧآ زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎــﺑ )
Biolabs (
AaTII لﻮﺼــﺤﻣ ﻪــﺑPCR
تﺪﻣ 16 يﺎﻣد رد و ﻪﺘﺷاﺬﮔ ،رﻮﺗﺎﺑﻮﻜﻧا رد ﺖﻋﺎﺳ 37
ﻪﺟرد
ﻲﺘﻧﺎﺳ
ﺪﺷ ﻪﺑﻮﻜﻧا داﺮﮔ
).
18
(
ﮓـﻧر زا ﺲـﭘ
مﻮﻳﺪـﻴﺗا رد يﺰـﻴﻣآ
ﻲـﺳرﺮﺑ لژ ﺖﻴﻌﺿو ،ﺮﻄﻘﻣ بآ ﺎﺑ ﻮﺸﺘﺴﺷ ﺲﭙﺳ و ﺪﻳﺎﻣﺮﺑ
ﻪـﻧﻮﻤﻧ و ﺪﺷ
هداد راﺮـﻗ يرادﺮﺒﺴـﻜﻋ و ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮـﻣ ،ﺎـﻫ
ﺪﻧﺪﺷ .
ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺎﻫ
زا 212 ﻣ رﺎــﻤﻴﺑ درﻮــﻣ دﺎــﺣ يﺪــﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤــﺳﻮﻟ ﻪــﺑ ﻼﺘــﺒ
،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا رد ﻲﺳرﺮﺑ
3 نوﺰﮔا رد ﺶﻬﺟ رﺎﻤﻴﺑ 8
ﺪﻨﺘﺷاد .
شور رد
و ﺮﮕﻳﺪـﻜﻳ ﺎـﺑ ﻒـﻠﺘﺨﻣ تﺎﻌﻄﻗ نﺪﺷ ﺖﻔﺟ ،CSGE
ﻦﻴـﺑ بﺎﺒﺣ دﺎﺠﻳا 2
ﺐـﺟﻮﻣ ،ﺶـﻬﺟ ياراد ﻪـﻴﺣﺎﻧ رد ﻪﺘـﺷر
ﻲﻣ دﺪﻌﺘﻣ ﻲﻳﺎﻫﺪﻧﺎﺑ دﺎﺠﻳا و تﺎﻌﻄﻗ توﺎﻔﺘﻣ ﺖﻛﺮﺣ
ﻪـﻛ دﻮﺷ
لژ هﺪﻨﻨﻛ هرﻮﺗﺎﻧد ﻂﻳاﺮﺷ
ﻧ CSGE توﺎﻔﺘﻣ ﺖﻛﺮﺣ ﻦﻳا ﻪﺑ ﺰﻴ
ﻲﻣ ﻚﻤﻛ ﺪﻨﻛ . هرﺎﻤـﺷ ﻞﻜـﺷ رد ﻪﻛ يرﻮﻄﻧﺎﻤﻫ ﻞﻴﻟد ﻦﻴﻤﻫ ﻪﺑ
1
ﻲﻣ هﺪﻳد
يﺎﻬﻔﻳدر رد ،دﻮﺷ 7
، 11 و 13 طﻮـﺑﺮﻣ ﺐـﻴﺗﺮﺗ ﻪﺑ
نارﺎﻤﻴﺑ ﻪﺑ ،M4
وM2 ،M4 3
ﻲـﻣ هﺪـﻳد توﺎﻔﺘﻣ ﺪﻧﺎﺑ
دﻮـﺷ
ﻒﻳدر ﺮﻳﺎﺳ رد ﻲﻟو
نوﺰـﮔا ﻪﻛ ﺎﻫ 8
ﺖـﺳا ﻲﺸـﺣو عﻮـﻧ زا ،
ﻲﻣ ار ﻲﻠﺻا ﺪﻧﺎﺑ ﻚﻳ ﺎﻬﻨﺗ
ﺖﻓﺎﻳ ناﻮﺗ .
ﺪـﻧﺎﺑ ﻦﻳا هزاﺪﻧا ﺖﺤﺻ
ﻲﻠــﺻا ) 386 ﺖــﻔﺟ زﺎــﺑ ( ﺮﻛرﺎــﻣ ﺎــﺑ ﻪﺴــﻳﺎﻘﻣ رد )
(M رﺎﻜــﺷآ
ﻲﻣ دﻮﺷ . ﻒﻳدر 12 ﺪـﻗﺎﻓ ﻪـﻛ ﺖـﺳا ﻲـﻔﻨﻣ لﺮـﺘﻨﻛ ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ
ﻲﻤﻧ هﺪﻳد يﺪﻧﺎﺑ ﭻﻴﻫ اﺬﻟ و هدﻮﺑDNA دﻮﺷ
.
هرﺎﻤﺷ ﻞﻜﺷ 1
-
نوﺰﮔا ﺶﻬﺟ هﺪﻫﺎﺸﻣ 8
نژ رد C-KIT لژ رد
هوﺮﮔ ﺮﻳز رد CSGE ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﻴﺑ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ
؛دﺎﺣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ ﻪﺑ
ﻒﻳدر رد نارﺎﻤﻴﺑ يﺎﻫ
7 ، 11 و 13 ﺪﻨﺘﺴﻫ تﻮﮕﻳزوﺮﺘﻫ ﺶﻬﺟ ياراد
.
زا 212
ـﻤﺳﻮﻟ ﻪـﺑ ﻼﺘـﺒﻣ رﺎﻤﻴﺑ ـ
درﻮـﻣ دﺎـﺣ يﺪـﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲ
،ﻪــﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦــﻳا رد ﻲــﺳرﺮﺑ 10
ﻪــﻄﻘﻧ ﺶــﻬﺟ ﺮــﻔﻧ D816 يا
ﺪﻨﺘــﺷاد .
ﻢﻳﺰــﻧآ Aat II ﻲﻟاﻮــﺗ
5'…GACGTC…3' ار
ﻲﻣ ﻲﻳﺎﺳﺎﻨﺷ
ﻲﺸﺣو عﻮﻧ رد ﻪﻛ ﺪﻨﻛ
C-KIT ﻪﺘﺷاد رﻮﻀﺣ
لﻮﺼﺤﻣ اﺬﻟ و 106
ﻢﻳﺰـﻧآ ﺮﺛا رد يزﺎﺑ ﺖﻔﺟ Aat II
ﻪـﺑ ، 2
ﻪﻌﻄﻗ 85 و 21
ﻲﻣ ﻪﺘﺴﻜﺷ زﺎﺑ ﺖﻔﺟ
دﻮﺷ . ترﻮـﺻ رد ﻲـﻟو
رد ﺶﻬﺟ
هزاﺪـﻧا ﻪـﺑ و هﺪﺸـﻧ ﻪﺘﺴـﻜﺷ طﻮﺑﺮﻣ ﻪﻌﻄﻗ D816
106
ﻲـﻣ ﻲﻗﺎﺑ زﺎﺑ ﺖﻔﺟ
ﺪـﻧﺎﻣ . هرﺎﻤـﺷ ﻞﻜـﺷ 2
ﻪـﻧﻮﻤﻧ زا يا
ﺶﻬﺟ ﻲﺳرﺮﺑ يﺎﻬﻟژ لﺎﻜﺷا
ﻲﻣ D816 ﻞﻜـﺷ ﻦﻳا رد ؛ﺪﺷﺎﺑ
در ﻒــﻳ يﺎــﻫ 1 ، 2 ، 3 ، 6 ، 7 ، 9 ، 10 و 12 نارﺎــﻤﻴﺑ ﻪــﺑ طﻮــﺑﺮﻣ
ﺶﻬﺟ ﺪﻗﺎﻓ ﻲﻣ D816
ﺪـﻧﺎﺑ ،ﺮﻛرﺎـﻣ ﺎـﺑ ﻪﺴﻳﺎﻘﻣ رد ﻪﻛ ﺪﻨﺷﺎﺑ
85 ﺖﻔﺟ
ﻲﻣ هﺪﻳد يزﺎﺑ
ﺪﻧﺎﺑ و دﻮﺷ 21
لژ زا ﺰﻴﻧ يزﺎﺑ ﺖﻔﺟ
ﺪﻧﺎﺑ رﻮﻀﺣ و ﺖﺳا هﺪﺷ جرﺎﺧ 85
ﻲﻨﻤﺿ رﻮﻄﺑ يزﺎﺑ ﺖﻔﺟ
ﺪﻧﺎﺑ رﻮﻀﺣ ﺮﮕﻧﺎﻴﺑ 21
ﺖﻔﺟ
ﻲـﻣ ﺰﻴﻧ يزﺎﺑ
ﺪـﺷﺎﺑ . ﻒـﻳدر 11
طﻮﺑﺮﻣ ﺪﻗﺎﻓ ﻪﻛ ﺖﺳا ﻲﻔﻨﻣ لﺮﺘﻨﻛ ﻪﺑ ﭻﻴـﻫ اﺬﻟ و هدﻮﺑ DNA
ﻲــﻤﻧ هﺪــﻳد يﺪــﻧﺎﺑ دﻮــﺷ
. يﺎــﻬﻔﻳدر رد 4
، 5 و 8 رد ﺶــﻬﺟ ،
ﺖﺴـﻜﺷ ﻪـﻴﺣﺎﻧ ﻲﻟاﻮـﺗ ﺮـﻴﻴﻐﺗ ﺮـﺛا رد اﺬﻟ و هداد خر D816 ــﻳﺰﻧآ ـ ــﻌﻄﻗ ،ﻢ ـ ﻪ 106 ﺖــﻔﺟ ــﺑ ـ ﺘﺴــﻜﺷ يزﺎ ـ
هﺪــﻳد و هﺪﺸــﻧ ﻪ
ﻲــﻣ دﻮــﺷ . ﻀــﺣ ـ ﺪــﻧﺎﺑ رﻮ 85
ﺖــﻔﺟ رﻮﻀــﺣ ﻞــﻴﻟد ،يزﺎــﺑ
نﻮﻠﻛ
ﻳزوﺮﺘﻫ ﺎﻳ و لﺎﻣﺮﻧ يﺎﻫ ﮕ
ـ ﺑ تﻮ ـ ﺳا ندﻮ ـ ﻦـﻳا رد ﻪﻛ ﺖ
ﻲﻣ خر نارﺎﻤﻴﺑ ﺪﻨﻫد
.
هرﺎﻤﺷ ﻞﻜﺷ 2
-
ﺶﻬﺟ هﺪﻫﺎﺸﻣ نژ رد D816
C-KIT رد
هوﺮﮔﺮﻳز رد نارﺎﻤﻴﺑ ؛دﺎﺣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﻴﺑ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ
ﻒﻳدر يﺎﻫ 4 ، 5 و 8 ﺪﻨﺘﺴﻫ ﺶﻬﺟ ياراد
.
هرﺎﻤــﺷ لوﺪــﺟ رد ﻪــﻛ رﻮﻄﻧﺎــﻤﻫ ﻲــﻠﻛ رﻮــﻄﺑ 1
هﺪــﻳد
ﻲﻣ
،دﻮﺷ
زا 212 دﺎـﺣ يﺪـﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤـﺳﻮﻟ ﻪـﺑ ﻼﺘﺒﻣ رﺎﻤﻴﺑ
،ﻪــﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦــﻳا رد ﻲــﺳرﺮﺑ درﻮــﻣ
3 رﺎــﻤﻴﺑ ) 4 / 1 (%
ﺶــﻬﺟ
نوﺰﮔا 8 داﺪﻌﺗ و 10
رﺎﻤﻴﺑ ) 7 / 4 (%
ﻪـﻄﻘﻧ ﺶـﻬﺟ
يا D816
نژ رد C-KIT ﻦــﻳا ﻊــﻳزﻮﺗ ﺮــﻳز لوﺪــﺟ رد ﻪــﻛ ﺪﻨﺘــﺷاد
ﺶﻬﺟ
هوﺮـﮔ ﺮـﻳز رد ﺎـﻫ
ﻪـﻘﺒﻃ ﻒـﻠﺘﺨﻣ يﺎـﻫ
يﺪـﻨﺑ FAB
ﻲﻣ ﺺﺨﺸﻣ ﺪﺷﺎﺑ
.
هرﺎﻤﺷ لوﺪﺟ 1
-
ﺟ ﻊﻳزﻮﺗ ﺶﻬ C-KIT يﺎﻫ دﺎﺣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ رد
عﻮﻧ
FAB ﺶﻬﺟ
D816 ﺶﻬﺟ
نوﺰﮔا 8 ﺶﻬﺟ عﻮﻤﺠﻣ
C-KIT رد ﻢﺠﺣ
ﻪﻧﻮﻤﻧ
) M0 0 (%
0 )
0 (%
0 )
0 (%
0 6
) M1 7 / 3 (%
1 ) 0 (%
0 ) 7 / 3 (%
1 27
) M2 8 / 9 (%
8 ) 2 / 1 (%
1 ) 8 / 9 (%
8 81
) M3 0 (%
0 )
0 (%
0 )
0 (%
0 25
) M4 8 / 1 (%
1 ) 7 / 3 (%
2 ) 5 / 5 (%
3 54
) M5 0 (%
0 )
0 (%
0 )
0 (%
0 12
) M6 0 (%
0 )
0 (%
0 )
0 (%
0 6
) M7 0 (%
0 )
0 (%
0 )
0 (%
0 1
TOTAL )
7 / 4 (%
10 ) 4 / 1 (%
3 ) 6 / 5 (%
12 212
ﻲﻣ هﺪﻫﺎﺸﻣ رﻮﻛﺬﻣ لوﺪﺟ رد ﻪﻛ يرﻮﻄﻧﺎﻤﻫ
ﻲـﻜﻳ ،دﻮـﺷ
ﻪــﻧﻮﻤﻧ زا يﺎــﻫ
نوﺰــﮔا رد ﺶــﻬﺟ نﺎــﻣﺰﻤﻫ M2
8 و D816
ﺖﺷاد . ﺚﺤﺑ
ﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا رد ــ
ﻪ 212 ﻓ ــ ﺘﺒﻣ دﺮ ـــ يﺪـﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤـﺳﻮﻟ ﻪـﺑ ﻼ
،دﺎﺣ
ﮔا ﺶـﻬﺟ زوﺮـﺑ ناﺰـﻴﻣ ﻦﺘﻓﺎـﻳ ياﺮـﺑ ـــ
نوﺰ 8 ﺶـﻬﺟ و
ﻪــﻄﻘﻧ نوﺰــﮔا يا 17
، نژD816 C-KIT راﺮــﻗ ﻪــﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮــﻣ
ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ . نوﺰـﮔا ﺶﻬﺟ ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ نارﺎﻤﻴﺑ رد 8
رد 2 / 1 % زا
دراﻮﻣ وM2
7 / 3 % دراﻮﻣ زا رد وM4
4 / 1 )%
3 درﻮـﻣ ( ﻞـﻛ زا
ﺖﺳا هداد خر دﺎﺣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ دراﻮﻣ .
ﺚـﻋﺎﺑ ﺶـﻬﺟ ﻦﻳا
ا و فﺬﺣ
ﻲـﻣ نژ رد ﺪـﻴﺗﻮﺌﻠﻛﻮﻧ نﺪـﺷ ﻪﻓﺎﺿ
ﻞـﻳﺎﻤﺗ ﻪـﻛ دﻮـﺷ
ﺶﻴﺑ نﻮﻴﺳاﺰﻳﺮﻤﻴﻠﭘ ﻪﺑ ﻪﻃﻮﺑﺮﻣ رﻮﺘﭙﺳر ﻲﻣ ﺮﺗ
ددﺮﮔ
).
19
(
ﻬﺟ ــ ﺶـﻬﺟ ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا رد ﺮﮕﻳد ﺶ نوﺰـﮔا D816
17 نژ
C-KIT
ﺶﻴﺑ ﻪﻛ دﻮﺑ
رد ﻪـﻛ ﺖـﺳا ﻲﻧاواﺮﻓ ﺮﻈﻧ زا ﺶﻬﺟ ﻦﻳﺮﺗ
نژ C-KIT
ﻲﻣ قﺎﻔﺗا
ﺪﺘﻓا .
ﻪـﻄﻘﻧ ﺶﻬﺟ ﻚﻳ ﺶﻬﺟ ﻦﻳا
ﺖـﺳا يا
ﺪﻴـــﺳا نآ رد ﻪـــﻛ ﺖـــﻴﻌﻗﻮﻣ رد ﻚﻴﺗرﺎﭙـــﺳآ ﺪﻴـــﺳا ﻪـــﻨﻴﻣآ
816 )
(D816
ﻪﻨﻴﻣآ ﺪﻴﺳا ﺎﺑ
ﻦﻴﻟاو ،ﻦﻳزوﺮﻴﺗ ﻞﻴﺒﻗ زا يﺮﮕﻳد يﺎﻫ
و ...
ﻲﻣ ﻦﻳﺰﮕﻳﺎﺟ
پﻮـﻟ دﺎـﺠﻳا ﻪـﺑ ﺮﺠﻨﻣ فﻼﺨﺘﺳا ﻦﻳا ﻪﻛ دﻮﺷ
لﺎﻌﻓ يزﺎﺳ ) activation Loop (
ﻲﻣ ددﺮﮔ
).
20 و 21
(
زا 212 ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ دﺎﺣ يﺪﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤﺳﻮﻟ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ رﺎﻤﻴﺑ
ﺶــﻬﺟ رد D816
7 / 3 % دراﻮــﻣ زا ،M1
8 / 9 % دراﻮــﻣ زا و M2
8 / 1 % دراﻮﻣ زا رد و M4
7 / 4 )%
10 درﻮﻣ ( ﻼﺘـﺒﻣ دراﻮـﻣ ﻞﻛ زا
رد ﻪــﻛ ﻲﻟﺎــﺣ رد ،دﻮــﺑ هداد خر دﺎــﺣ يﺪــﻴﺋﻮﻠﻴﻣ ﻲﻤــﺳﻮﻟ ﻪــﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻂـﺳﻮﺗ يا Schnittger
ﻦـﻳا عﻮـﻗو ﺪـﺻرد نارﺎـﻜﻤﻫ و
ﺐﻴﺗﺮﺗ ﻪﺑ ﺶﻬﺟ 9
/ 0
% ، 1 / 3
% ، 8 / 1 % و 7 / 1 %
ﺖـﺳا هدﻮﺑ
).
22
رد (
ﮕﻳد تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺶﻴﺑ ،ﺮ
نﻮﻴـﺳﺎﺗﻮﻣ عﻮﻴـﺷ ﻦﻳﺮﺗ
يﺎـﻫ C-KIT رد
ﻲﻤـــﺳﻮﻟ يﺎـــﻫ
ﭗـــﻳﺎﺗAML يﺎـــﻫ وM2
ﺎـــﺑ ﻂﺒﺗﺮـــﻣM4
نﻮﻴﺳﺎﻛﻮﻠﺴﻧاﺮﺗ
يﺎﻫ 8;21) t( و 16) inv( ﻪـﻛ ﺖﺳا هﺪﺷ شراﺰﮔ
ﻲــﻣ نآ ﺪــﻳﺆﻣ ﻢــﻫ ﺮــﺿﺎﺣ ﻪــﻌﻟﺎﻄﻣ ﺪــﺷﺎﺑ
).
12 ، 23 و 24
رد ًﺎﻨﻤــﺿ (
ﺶﻬﺟ ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ دراﻮﻣ ردD816
و M2 ﺶﻴﺑ ،M1 زا ﺮـﺗ
نﻮﻨﻛﺎـﺗ هﺪﺷ شراﺰﮔ ﻂﺳﻮﺘﻣ ﻲـﻣ
ﺪـﺷﺎﺑ . ـﻄﻧﺎﻤﻫ ـ رد ﻪـﻛ يرﻮ
ﺮـﮕﻳد تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ
ﻲﻣﻮـﻗ ﻪـﻨﻴﻣز ،ﺖـﺳا هﺪـﺷ ﺮـﻛذ ﻢـﻫ توﺎـﻔﺘﻣ
ﻲﻣ
توﺎﻔﺗ ﻦﻳا ﺮﺑ ﻢﻜﺤﻣ ﻞﻴﻟد ﺪﻧاﻮﺗ
ﺪﺷﺎﺑ ﺎﻫ
).
22
(
ﻳﺎﺑ ﻪﺘﺒﻟا ـ دوﺰﻓا ﺪ
ﺶﻬﺟ ﺖﺒﺜﻣ دراﻮﻣ ﻲﻣﺎﻤﺗ ﻪﻛ
راﺮـﻜﺗ رﺎـﺑ ﺪﻨﭼ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا رد ﺎﻫ
هﺪﺷ ﻧا ــ دراﻮـﻣ و ﻲـﻜﻴﻨﻜﺗ تﻻﺎﻜـﺷا لﺎـﻤﺘﺣا ﺐﻴﺗﺮﺗ ﻦﻳا ﻪﺑ و ﺪ
ﻓ بذﺎﻛ ﺖﺒﺜﻣ قﻮ
ﻌﻟا ــ
هﺪﻣآ ﻦﻴﻳﺎﭘ هدﺎ
ﺪﻧا . ﻲـﻘﻴﻗد ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﺪﻨﭼ ﺮﻫ
،زﻮــﻨﮔوﺮﭘ درﻮــﻣ رد ﺖــﺳﻼﺑ و WBC
و ﻲــﻄﻴﺤﻣ نﻮــﺧ يﺎــﻫ
ﺳﺎﭘ ناﺰﻴﻣ ــ
ﻲﻤﺳﻮﻟ رد وراد ﻪﺑ ﺦ
ﺖﺴـﻴﻧ ﺖـﺳد رد ناﺮﻳا يﺎﻫ
ﻫاﻮﺷ ﻲﻟو ــ
ﻛﺎﺣ ﺪ ـ دﻮـﻋ يدﺎﻳز ،زﻮﻨﮔوﺮﭘ ندﻮﺑ بﻮﻠﻄﻣﺎﻧ زا ﻲ
ﻲﻤﺳﻮﻟ رد ءﺎﻘﺑ ﺶﻫﺎﻛ و
ﻲﻣ ناﺮﻳا يﺎﻫ
نآ زا ﻲﺸـﺨﺑ ﻪﻛ ﺪﺷﺎﺑ
ﺎﻤﺘﺣا
نﻮﻴﺳﺎﺗﻮﻣ ﺎﺑ ﻂﺒﺗﺮﻣ ًﻻ
يﺎﻫ C-KIT
ﺖـﺳا . نﻮـﭼ ،ًﺎـﺘﻳﺎﻬﻧ
رﺎﻤﻴﺑ ﻚﻳ
نوﺰﮔا ﺶﻬﺟ نﺎﻣﺰﻤﻫM2
8 و اﺬـﻟ ؛ﺖﺷاد ارD816
داﺪﻌﺗ 12 زا ﺮﻔﻧ 212 رﺎﻤﻴﺑ ) 6 / 5 (%
رد ﺶﻬﺟ C-KIT
ﺪﻨﺘﺷاد ار
ﺶﻬﺟ ،توﺎﻔﺘﻣ تﺎﺷراﺰﮔ رد ﻪﻛ
يﺎﻫ C-KIT ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﻴﺑ رد
ﻪﺑ ﺎﺗ AML 5 % ﺖﺳا هﺪﺷ ﻦﻴﻴﻌﺗ
).
6 و 25
(
دوﺪﺤﻣ زا ﺖﻳ
ﻚﻴﻨﻜﺗ ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا يﺎﻫ ياﺮـﺑ ﻪـﻛ دﻮﺑCSGE
نﻮﻴﺳﺎﺗﻮﻣ يﺮﮕﻟﺎﺑﺮﻏ
ﻲـﻣ رﺎـﻜﺑ ﺎـﻫ
نآ ﺖﻴﺳﺎﺴـﺣ و دور 90
%
ﻲﻣ يﺎﻬـﺷور ،ﻲـﻠﻴﻤﻜﺗ تﺎـﻌﻟﺎﻄﻣ ﻪﺑ زﺎﻴﻧ ترﻮﺻ رد اﺬﻟ ؛ﺪﺷﺎﺑ ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ ﻚـﻳ ﻪـﺑ ﺎـﻬﻧآ مﺎـﺠﻧا ﻪـﻛ ﺖـﺳا زﺎـﻴﻧ درﻮﻣ ﻢﻫ يﺮﮕﻳد
ﻊﻣﺎﺟ ﻲﻣ ﺪﻨﻣزﺎﻴﻧ يﺮﺗ ﺪﺷﺎﺑ
.
ﻪﺠﻴﺘﻧ يﺮﻴﮔ
ﺶﻬﺟ يﺎﻫ C-KIT ﺪﺻرد رد
هوﺮﮔﺮﻳز زا ﻲﻬﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗ
يﺎﻫ
و M2 ﻪـﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﻴﺑ زا M4 AML
ﻲـﻣ ﺖـﺒﺜﻣ
ﻪـﺑ و ﺪـﺷﺎﺑ
ﻲﻣ دﺎﻬﻨﺸﻴﭘ نﺎﻜﺷﺰﭘ
ﭗـﻳﺎﺗ درﻮـﻣ رد ﻞﻗاﺪـﺣ دﻮﺷ
يﺎـﻫ وM2
نﻮﻴــﺳﺎﺗﻮﻣ ،M4 ﻪــﺑ ﻪــﺟﻮﺗ ﺎــﺑ و ﺪﻧﻮــﺷ ﻲــﺳرﺮﺑ قﻮــﻓ يﺎــﻫ
ﺶﻬﺟ ﻦﻳا ﺪﺑ زﻮﻨﮔوﺮﭘ
نﺎﻣرد و يﺮﻴﮕﻴﭘ ،ﻲﺋوراد ﺖﻣوﺎﻘﻣ و ﺎﻫ
دﺮﻴﮔ ترﻮﺻ ﺐﺳﺎﻨﻣ .
ﺮﻜﺸﺗ و ﺮﻳﺪﻘﺗ
مﻮــﻠﻋ هﺎﮕﺸــﻧاد ﻲﻟﺎــﻣ ﺖــﻳﺎﻤﺣ زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎــﺑ ﻖــﻴﻘﺤﺗ ﻦــﻳا حﺮـﻃ ﺐـﻟﺎﻗ رد ناﺮـﻳا ﻲﻧﺎـﻣرد ـ ﻲﺘـﺷاﺪﻬﺑ تﺎﻣﺪـﺧ و ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻲﺗﺎﻘﻴﻘﺤﺗ )
ﺖـﺒﺛ هرﺎﻤـﺷ :
604 ( ﻦﻳﺪـﺑ ﻪـﻛ ﺖـﺳا هﺪـﻳدﺮﮔ مﺎـﺠﻧا
زا ار دﻮـﺧ ﺮﻜﺸـﺗ و ﺮﻳﺪـﻘﺗ ﺐـﺗاﺮﻣ ﻪـﻟﺎﻘﻣ نﺎﮔﺪﻨﺴـﻳﻮﻧ ﻪﻠﻴﺳو و ﺰــﻛﺮﻣ نآ ﻦﻴﻟوﺆﺴــﻣ ﻲﻟﻮــﻜﻟﻮﻣ و ﻲﻟﻮﻠــﺳ تﺎــﻘﻴﻘﺤﺗ ﺰــﻛﺮﻣ
و تﺎﺸـﻳﺎﻣزآ مﺎـﺠﻧا ﺖـﻬﺟ ﻪـﺑ ناﺮـﻳا ﻲﻜـﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ﺖـﻬﺟ ﻪـﺑ ﻲﺘﻌﻳﺮـﺷ نﺎﺘـﺳرﺎﻤﻴﺑ و ناﺮﻳا نﻮﺧ لﺎﻘﺘﻧا نﺎﻣزﺎﺳ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻦﻴﻣﺄﺗ ﻲﻣ زاﺮﺑا ،مزﻻ يﺎﻫ
ﺪﻧراد .
ﻊﺑﺎﻨﻣ ﺖﺳﺮﻬﻓ
1- Broudy VC. Sterm Cell Factor and Hematopoiesis.
Blood 1997; 90: 1345-64.
2- Akin C, Metcalfe DD. The biology of Kit in disease and the application of pharmacogenetics. J Allerg Clinic Immun 2004; 114(1): 13-19.
3- Gari Goodeve A, Wilson G, Winship P, Langabeer S, Linch D, et al. C-KIT proto-oncogene exon 8 in-frame deletion plus insertion mutations in acute myeloid leukaemia. Br J Haematol 1999; 105: 894-900.
4- Spritz RA, Giebel LB, Holmes SA. Dominant negative and loss of function mutations of the c-kit (mast/sterm cell growth factor receptor) proto-oncogene in human piebaldism. Am J Hum Genet 1992; 50(2): 261-9.
5- Ogawa M, Matsuzaki Y, Nishikawa S, Hayashi SI, Kunisada T, Sudo T, et al. Expression and Function of c-kit in Hemopoietic Progenitor Cells. J Exp Med 1991; 174: 63- 71.
6- Beghini AP, Peterlongo CB, Ripamonti L, Larizza R, Cairoli E. C-kit mutation in core binding factor leukemias.
Blood 2000; 95: 726-7.
7- Pardanani A, Tefferi A. Imatinib targets other than bcr/abland their clinical relevance in myeloid disorders.
Blood 2004; 104: 1931-8.
8- Adleigh M, DeAngelo DJ, Griffin JD, Stone RM. After chronic myelogenous leukemia: tyrosinekinase inhibitors in other hematologic malignancies. Blood 2005; 105: 22-28.
9- Fabbro D, Ruetz S, Buchdunger E, Cowan-Jacob SW, Fendrich G, Liebetanz J, et al. Protein kinases as targets for anticancer agents: from inhibitors to useful drugs. Pharm Therap 2003; 93: 79-98.
10- Frost MJ, Ferrao PT, Hughes TP, Ashman LK.
Juxtamembrane mutant V560G kit is more sensitive to imatinib(STI571) compared with wild-type c-kit whereas the kinase domain mutant D816V kit is resistant. Mol Cancer Therap 2002; 1: 1115-24.
11- Sattler M, Salgia R. Targeting c-kit mutation: basic science to novel therapies. Leuk Res 2004; 28sl: sll-s20.
12- Care RS, Salgia R. Incidence and prognosis of c-kit and Flt-3 mutation in CBF leukemias. Br J Haematol 2003;
121: 775-7.
13- Hoffman R, Benz EJ, Shattil SJ, Furie B, Cohen HJ, Silberstein LE, et al. Hematology basic principles and practice. 4 th ed. Elsevier: Churchill Livingstone; 2005. p.
1059-61 and 1086-91.
14- Reilly JT. Receptor tyrosine kinases normal and malignant haematopoiesis. Blood Rev 2003; 17: 241-8.
15- Sambrook J, Russell D. Molecular cloning, a laboratory manual. 3 th ed. New York: Cold spring harbor laboratory press; 2001. p. 64-8.
16- Ganguly A, Rock MJ, Prockop DJ. Conformation- sensitive gel electrophoresis for rapid detection of single- base differences in double-stranded PCR products and DNA fragments: Evidence for solvent-induced bends in DNA heteroduplexes. Proc Natl Acad Sci 1992; 90: 10325-9.
17- Rapley EA, Hockley S, Warren W, Johnson L, Huddart R, Crockford G, et al. Somatic mutations of KIT in familial testicular germ cell tumours. Br J Cancer 2004; 90:
2397-401.
18- Looijenga LHJ, Leeuw H, Oorschot MV, VanGurp R, Stoop H, Gillis AJM, et al. Sterm Cell Factor Receptor(c- KIT) codon 816 Mutations Predict development of bilateral testicular germ-cell tumore. Cancer Res 2003; 63: 7674-8.
19- Kohl TM, Schnittger S, Ellwart JW, Hiddemann W, Spiekermann K. KIT exon 8 mutations associated with core- binding factor(CBF)-acute myeloid leukemia(AML) cause hyperactivation of the receptor in response to stem cell factor. Blood 2005; 105: 3319-21.
20- Hashimoto K, Matsumura I, Tsujimura T, Kim DK, Ogihara H, Ikeda, et al. H.Necessity of tyrosine 719 and phosphatidylinositol 3'-kinase-mediated signal pathway in constitutive activation and oncogenic potential of c-kit receptor tyrosine kinase with the Asp 814 Val mutation.
Blood 2003; 101: 1094-102.
21- Roskoski R. Structure and regulation of Kit protein- tyrosine kinase- The stem cell factor receptor. Bioch Bioph Res Commun 2005; 2128: 1307-15.
22- Schnittger S, Kohl TM, Haferlach T, Kern W, Hiddemann W, Spiekermann K, et al. KIT-D816 mutations in AML1-ETO-positive AML are associated with impaired event-free and overall survival. Blood 2006; 107(5): 1791-9.
23- Cairoli R, Beghini A, Grillo G, Nadali G, Elice F, Ripamonti CB, et al. Prognostic impact of c-KIT mutations in core binding factor leukemias. An Italian retrospective study. Blood 2006; 107: 3463-8.
24- Goeman BF, Zwaan CM, Miller M, Zimmermann M, Harlow A, Meshinchi S, et al. Mutations in KIT and RAS are frequenct events in pediatric core-binding factor acute myeloid leukemia. Leukemia 2005; 19: 1536-42.
25- Mrzek K, Bloomfield CD. Chromsome abberations gene mutations and expression changes and prognosis in adult AML. Hematology 2006; First edition: 169-177.
Study of Mutations in c-kit Exons 8&17 in Iranian Patients with Acute Myeloid Leukemia
I II III
* F.Zaker, PhD M.Mohammadzadeh,MSc M.Aghaeepoor,MD IV
Gh.Rastegar Lari, PhD
Abstract
Background & Aim: Mutations in c-kit gene cause autonomously proliferation of leukemic cells with an unfavorable prognosis.These mutations including exon 8 deletion and insertion in the fifth extracellular Ig-like domain and exon 17 point mutation in tyrosine kinase domain of c-kit receptors are important in acute myeloid leukemia. The aim of this study was to set up molecular diagnosis and screening of these mutations in AML patients.
Patients and Method: This observational descriptive study of mutations in c-kit receptors was done on 212 patients with AML. Exon 8 mutations were analyzed by PCR method with specific primers.Then, PCR products were run in 10% CSGE and the results were documented. We also studied exon 17 point mutations with RFLP technique and using AatII enzyme on PCR products of these patients.
Results: Exon 8 mutations were seen in 1.4% of AML patients; though, the results were different in different subtypes. Also, 4.7% of the patients showed D816 (exon 17) mutations with different findings in the subtypes of AML .
Conclusion: This study revealed that c-kit mutations constitute a significant percentage of AML (M2&M4 subtypes) cases in Iran. Thus, molecular diagnosis of these mutations could help to select a better treatment.
Key Words: 1)AML(Acute Myeloid Leukemia) 2)C-Kit Mutations
3)PCR (Polymerase Chain Reaction) 4)RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)
I) Associate Professor of Hematology. Faculty of Paramedical Sciences. Cellular and Molecular Research Center. Shahid Hemmat Expressway. Shahid Chamran Crossroads. Iran University of Medical Sciences and Health Services .Tehran, Iran. (* Corresponding Author) II) MSc in Hematology. Faculty of Paramedical Sciences. Iran University of Medical Sciences and Health Services. Tehran, Iran.
III) Assistant Professor of Pathology. Iran Blood Transfusion Organization. Tehran, Iran.
IV) Assistant Professor of Hematology. Faculty of Paramedical Sciences. Iran University of Medical Sciences and Health Services. Tehran, Iran.
