١
لﺎﻘﺘﻧا نژ ﻪﺑ هﺎﻴﮔ ترذ و ﻲﻳاززﺎﺑ ﻪﻧاﻮﺟ
ﻲﻳﺎﻬﺘﻧا
ﺪﻨﻣرﻮﭘدﺎﺠﺳ
و1
نﺎﻴﻛﻮﺘﻓﻦﻴﺴﺣﺪﻤﺤﻣ،2
،2
داﮋﻧﻲﺋﺎﻳرآهﺮﻬﺷ
* رﻮﭘﻦﺴﺤﻣهﺮﻬﻄﻣ،2
،2
ﺲﻤﺷﺎﺿرﺪﻤﺤﻣ .2
1 - هﺪﻜﺸﻧاد يزروﺎﺸﻛ هﺎﮕﺸﻧاد
،ﺪﻫﺎﺷ
،ناﺮﻬﺗ ناﺮﻳا .
2
،ﻲﺘﺴﻳزﻲﻨﻤﻳاوﻚﻴﺘﻧژﻲﺳﺪﻨﻬﻣﺶﺨﺑ- يﺮﺑا)ناﺮﻳايژﻮﻟﻮﻨﻜﺗﻮﻴﺑهﺪﻜﺸﻫوﮋﭘ
،(
،جﺮﻛ ﻳا ناﺮ .
هﺪﻴﻜﭼ
ترذ zea mays L.
ﻪﺑ ﻞﻴﻟد ﻦﺘﺷاد تﺎﻴﺻﻮﺼﺧ بﻮﻠﻄﻣ
زا ﻪﻠﻤﺟ ترﺪﻗ يرﺎﮔزﺎﺳ ﻻﺎﺑ زا هﺎﮕﻳﺎﺟ هﮋﻳو يا درﻮﺧﺮﺑ را ﺖﺳا و زا ﺮﻈﻧ
ﺖﻴﻌﺿو
،ﺪﻴﻟﻮﺗ ﺢﻄﺳ ﺖﺷادﺮﺑ و دﺮﻜﻠﻤﻋ ﺲﭘ زا مﺪﻨﮔ و ﺞﻧﺮﺑ ﻦﻳﺮﺘﺸﻴﺑ ﻲﺿارا يزروﺎﺸﻛ نﺎﻬﺟ
ار ﻪﺑ دﻮﺧ صﺎﺼﺘﺧا هداد
ا ﺖﺳ ﺰﻴﻣ . نا
ﺪﻴﻟﻮﺗ ترذ ﻪﺑ ﻲﻠﻳﻻد ﺪﻨﻧﺎﻣ
،تﺎﻓآ ﻒﻠﻋ يﺎﻫ
،زﺮﻫ
،ﺎﻬﻳرﺎﻤﻴﺑ ﻲﻜﺸﺧ يﺰﻴﺨﻠﺻﺎﺣ كﺎﺧ
ﺖﺤﺗ ﺮﻴﺛﺎﺗ راﺮﻗ ﻲﻣ دﺮﻴﮔ ﺎﺑ . يزﺎﺳز ترذ ﻪﺑ ناﻮﻨﻋ
ﻲﻜﻳ زا ﻦﻳﺮﺘﻤﻬﻣ تﻻﻮﺼﺤﻣ
،تﻼﻏ زا ﻦﻴﻨﺟ يﺎﻫ
،ﻎﻟﺎﺑﺎﻧ ﻚﻳ شور راﻮﺷد ﺖﺳا ﻦﻳا . ﻞﻜﺸﻣ ﻲﺷﺎﻧ زا مﺪﻋ ﻲﺳﺮﺘﺳد ﻪﺑ رذ ت رد مﺎﻤﺗ لﺎﺳ
ﺖﺳا رد . ﻦﻳا ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻬﺟ ﺖ دﺎﺠﻳا ﺖﻣوﺎﻘﻣ ﻪﺑ ﺖﻓآ و
،ﺶﻜﻔﻠﻋ لﺎﻘﺘﻧا نژ ﺎﺑ هدﺎﻔﺘﺳا زا مﻮﻳﺮﺘﻛﺎﺑوﺮﮔا يوﺎﺣ
ﺪﻴﻤﺳﻼﭘ PBI121 و
ﺎﻬﻧژ ي
EPSPS و Cry1a.10 هدﺎﻔﺘﺳا
ﺪﻳدﺮﮔ لﺎﻘﺘﻧا . نژ ﻪﺑ ﺖﻓﺎﺑ ﻢﺘﺴﻳﺮﻣ ﻪﻧاﻮﺟ ﺪﻟاو يردﺎﻣ ترذ ﻢﻗر نﺎﻘﻫد KE72012/12 ﻮﺻ
تر ﺖﻓﺮﮔ .
ﺲﭘ زا لﺎﻘﺘﻧا
،نژ رﻳ ﻪﻧﻮﻤﻧﺰ ﺎﻫ ﻲﻃ ﻠﺣاﺮﻣ ﻲ ﺎﺑ تﺪﻣ ﺎﻣز ن ﺺﺨﺸﻣ ﻪﺑ ﻂﻴﺤﻣ يﺎﻫ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻲﻧﻮﻣرﻮﻫ ﺎﻘﻟا ي ﻪﺧﺎﺷ از ﻲﻳ و رﻳ ﻪﺸ از ﻲﻳ لﺎﻘﺘﻧا
هداد ﺪﻧﺪﺷ نﻮﻣرﻮﻫ . يﺎﻫ
،BA 2,4-D و ﺎﺑTDZ ﻪﺟﻮﺗ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﻦﻴﺴﻛا ﻪﺑ ﻦﻴﻨﻛﻮﺘﻳﺎﺳ رد
ﺖﻬﺟ ﻪﺧﺎﺷ ﻲﻳاز رد ﻪﺳ ﺤﻣ ﻂﻴ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻪﺑ
ترﻮﺻ ﻪﻧﺎﮔاﺪﺟ و ﺎﻳ ﻲﺒﻴﻛﺮﺗ درﻮﻣ هدﺎﻔﺘﺳا راﺮﻗ ﺖﻓﺮﮔ ﺲﭘ. زا اززﺎﺑ ﻲﻳ ﮔﻴ نﺎﻫﺎ راﺮﺗ ﻳ ﻪﺘﺨ ﻟﺎﻤﺘﺣا ﻲ ﺘﻤﺴﻗ ﻲ زا ﺎﺑ ﺖﻓ گﺮﺑ ﮔﻴ هﺎ ياﺮﺑ ﺰﻴﻟﺎﻧآ ﻫ يﺎ
ﻲﻟﻮﻜﻟﻮﻣ و ﺖﻬﺟ ﺎﺗ ﻴﻳ ﺪ رد ﻳ ﺖﻓﺎ يﺎﻬﻧژ درﻮﻣ ﺮﻈﻧ ﺶﻳﺎﻣزآ ﺪﺷ زا . نﺎﻴﻣ ﻦﻳا ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ ﺎﻫ يداﺪﻌﺗ ﻪﻛ يﺎﻬﻧژ درﻮﻣ ﺮﻈﻧ را ﺖﻓﺎﻳرد هدﺮﻛ ﺪﻧدﻮﺑ
رﺬﺑ هداد و ﻞﺴﻧ T1
ار دﺎﺠﻳا ﺪﻧدﺮﻛ .
هژاو يﺎﻫ يﺪﻴﻠﻛ شﺰﻳراﺮﺗ:
،ترذ
Cry1a.105
،
EPSPS
، ﻞﺴﻧ
T1
.
Gene Transformation to Maize (Zea mays) and Regeneration from Shoot Apex Explants
, ohsenpour2
M otahhareh M
,
*2
Shohreh Ariaeenejad ,
Fotokian1
Mohammad Hossein
2 ,
Sajjad Pourmand1
Reza Shams2
Mohammad
1-Agricultural College, Shahed University, Tehran, Iran
2-Genetic Engineering and Biosafety Department, Agricultural Biotechnology Research Institute of Iran (ABRII), Karaj, Iran
Abstract
Due to its desirable characteristics, including high compatibility, maize has a high status and the highest agricultural economical value in terms of production, harvesting and yield, after wheat and rice. The amount of corn production is affected by factors such as pests, weeds, diseases, dryness of soil fertility.
Regeneration of maize, as one of the most important cereal crops, from immature embryo is a complex procedure. This difficulty comes from the maize unavailability all year round. An efficacious method for in vitro regeneration and genetic transformation was developed from shoot apex explants of Zea mays using two-step- culture procedures. This culture procedure is an efficient and widely applicable method for corn regeneration, that was used in this study for EPSPS and Cry3Bb1 genes transformation.
Iranian genotypes were assessed for their regeneration potential. The maximum response for regeneration of shoot induction was obtained from explants cultured on supplemented with thidiazuron, N6-benzylaminopurine and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and TDZ. The analysis of variance revealed that the plant regeneration response varied greatly among the genotypes. The transformation has been done successfully in T1 plants. The molecular assays of T1 Plants confirm the integration of foreign genes into the plant genome.
Keywords: Transformation of maize,Cry1a.105, EPSPS, T1 Plants.
٢
ﻪﻣﺪﻘﻣ
ﺎﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﻪﺑ رﺎﻣآ يﺎﻫ
،دﻮﺟﻮﻣ ﺖﻴﻌﻤﺟ نﺎﻬﺟ ﺎﺗ لﺎﺳ ﻪﺑ2050 5 / ﺮﻔﻧدرﺎﻴﻠﻴﻣ9 ﺪﻫاﻮﺧ
)ﺪﻴﺳر (1 .
و ﺎﺑ ﺶﻳاﺰﻓا ﺖﻴﻌﻤﺟ ﺎﺿﺎﻘﺗ ياﺮﺑ تﺎﻳروﺮﺿ ﻪﻴﻟوا
ﻲﮔﺪﻧز ﺶﻳاﺰﻓا ﻲﻣ ﺪﺑﺎﻳ لﺎﺣ ﻪﻜﻧآ ﻊﺑﺎﻨﻣ ﻲﻌﻴﺒﻃ رد لﺎﺣ زا ﻦﻴﺑ ﻦﺘﻓر ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ رد . ﻦﻳا
ﺪﻧور ﺪﻴﻟﻮﺗ ﻲﻧﺎﻬﺟ اﺬﻏ ﻢﻫ ﺪﻳﺎﺑ ﺶﻳاﺰﻓا ﺑﺎﻳ ﺪ و ﺎﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﻪﺑ ﻪﻜﻨﻳا تﻼﻏ ﻊﺒﻨﻣ ﻲﻠﺻا اﺬﻏ و يژﺮﻧا ﻲﻣ
،ﺪﺷﺎﺑ ﻴﻟﻮﺗ ﺪ ﺎﻬﻧآ ﺎﺗ لﺎﺳ ﺪﻳﺎﺑ2050 ود
ﺮﺑاﺮﺑ ددﺮﮔ ) 2 ( ﻦﺘﻓﺎﻳ . ﻊﺑﺎﻨﻣ ﺪﻳﺪﺟ ياﺮﺑ آﺮﺑ هدرو ندﺮﻛ زﺎﻴﻧ ﻲﻳاﺬﻏ ﺮﺸﺑ و يﺎﻘﺑ تﺎﻴﺣ رﺎﻴﺴﺑ ﺰﺋﺎﺣ ﺖﻴﻤﻫا ﻲﻣ ﺷﺎﺑ ﺪ .
ﺲﭘ زا مﺪﻨﮔ و ﺞﻧﺮﺑ ﻦﻳﺮﺘﺸﻴﺑ ﻲﺿارا يزروﺎﺸﻛ نﺎﻬﺟ
ﻪﺑ ترذ صﺎﺼﺘﺧا د
درا ترذ . ﻪﺑ ﻞﻴﻟد ﻦﺘﺷاد تﺎﻴﺻﻮﺼﺧ ﻮﻠﻄﻣ
ب زا ﻪﻠﻤﺟ
ترﺪﻗ يرﺎﮔزﺎﺳ ﻻﺎﺑ
زا هﺎﮕﻳﺎﺟ هﮋﻳو يا رادرﻮﺧﺮﺑ ﺖﺳا
هزوﺮﻣا . ﻦﻳا هﺎﻴﮔ ﻪﺑ ﺖﻠﻋ ﻦﺘﺷاد عﻮﻨﺗ مﺎﻗرا و ترﺪﻗ ﺎﻄﺗ ﻖﺑ ﺎﺑ ﻂﻳاﺮﺷ ﻲﻤﻴﻠﻗا
نﻮﮔﺎﻧﻮﮔ رد ﺮﺘﺸﻴﺑ يﺎﻫرﻮﺸﻛ نﺎﻬﺟ
زا ﻪﻠﻤﺟ ناﺮﻳا ﺖﺸﻛ ﻲﻣ دﻮﺷ ﻖﺒﻃ . ﺶﻴﭘ ﻲﻨﻴﺑ ﺪﻴﻟﻮﺗFAO
ﻲﻧﺎﻬﺟ ترذ رد لﺎﺳ ﻪﺑ2020 ﺶﻴﺑ زا 830
نﻮﻴﻠﻴﻣ ﻦﺗ ﺪﻫاﻮﺧ ﺪﻴﺳر ﻲﻟو رد ﻞﻤﻋ ﻢﻫ نﻮﻨﻛا زا ﻦﻳا راﺪﻘﻣ ﺮﺗاﺮﻓ ﻪﺘﻓر ﺖﺳا ﻦﻳا . رد ﻲﻟﺎﺣ ﺖﺳا ﻪﻛ ﻲﻜﻳ زا ﻧاﻮﻣ ﻊ دﻮﺟﻮﻣ رد ﺶﻳاﺰﻓا ﺪﻴﻟﻮﺗ
ترذ دﻮﺟو تﺎﻓآ يرﺎﻤﻴﺑو يﺎﻫ ﻲﻫﺎﻴﮔ
،ﺖﺳا رد ﻦﻳا نﺎﻴﻣ ﻪﻗﺎﺳ راﻮﺧ ترذ ﻲﻜﻳ زا ﻦﻳﺮﺘﻤﻬﻣ تﺎﻓآ ترذ ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﻛ ﺑ ﻦﻳﺮﺘﺸﻴ ﺴﺧ ترﺎ ار ﻪﺑ
ترذ دراو ﻲﻣ ﺪﻨﻛ ) 3 لﺎﻘﺘﻧا ( نژ ﻪﺑ ترذ ﺎﺑ فﺪﻫ ﺶﻳاﺰﻓا ﺖﻣوﺎﻘﻣ ﻪﺑ ﺶﻜﻔﻠﻋ ﺖﻓآو ﻲﻜﻳ زا فاﺪﻫا ﻲﺣﻼﺻا ﺪﻣ ﺮﻈﻧ رد ﻦﻳا هﺎﻴﮔ ﺖﺳا .
ترﺎﺴﺧ ﻲﺷﺎﻧ زا ﻒﻠﻋ يﺎﻫ
،زﺮﻫ زا تﺎﻓآ يرﺎﻤﻴﺑو ﺎﻫ ﺮﺘﺸﻴﺑ ﺖﺳا ﻪﺑ يرﻮﻃ ﻛ ﻪ رد ﻛ يﺎﻫرﻮﺸ ﻪﻌﺳﻮﺗ ﻳ ﻪﺘﻓﺎ ﻣﻴ ناﺰ اﻳ ﻦ ﺧ تارﺎﺴ ﺑﻴ ﻦ ﺎﺗ10 15
ﺪﺻرد ﻛ ﻞ لﻮﺼﺤﻣ ﻤﺨﺗ ﻴ ﻦ هدز هﺪﺷ و اﻳ ﻦ ﻢﻗر رد ﻛ يﺎﻫرﻮﺸ رد لﺎﺣ ﻪﻌﺳﻮﺗ و ﻖﻃﺎﻨﻣ اﻮﺘﺳا ﻲﻳ ﺑﻴ ﺮﺘﺸ ﺖﺳا ﻪﺑ . ﻦﻴﻤﻫ ﻴﻟد ﻞ ﺐﻠﻏا تﺎﻗوا
دوﺪﺣ ﻒﺼﻧ و ﻫﺎﮔ ﻲ ﺑﻴ ﺮﺘﺸ زا شﻼﺗ ﻛ
،نازروﺎﺸ فﺮﺻ
ﻛ لﺮﺘﻨ ﻒﻠﻋ يﺎﻫ زﺮﻫ ﻲﻣ دﻮﺷ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫو ﻒﻠﻋ
يﺎﻫ زﺮﻫ ﻲﻜﻳ زا اﻮﻋ ﻞﻣ هﺪﻨﻫﺎﻛ
لﻮﺼﺤﻣ ﺖﺳا ﻪﺑ ﻪﻜﻳرﻮﻃ ﻪﻛ ﻲﻫﺎﮔ ﺐﺒﺳ ﺶﻫﺎﻛ 50 لﻮﺼﺤﻣ% ﻲﻣ دﻮﺷ ) 8 ( .
ﻒﻠﻋ ﺶﻛ يﺎﻫ ﻲﻔﻠﺘﺨﻣ ياﺮﺑ لﺮﺘﻨﻛ ﻦﻳا ﻞﻣاﻮﻋ ترﺎﺴﺧ از درﻮﻣ هدﺎﻔﺘﺳا راﺮﻗ ﻲﻣ ﺪﻧﺮﻴﮔ ﻪﻛ ﻲﻣ ﺪﻨﻧاﻮﺗ رﻮﻄﺑ ﻲﺑﺎﺨﺘﻧا ﺎﻳ ﺮﻴﻏ ﻲﺑﺎﺨﺘﻧا ﺖﻴﻟﺎﻌﻓ
ﺪﻨﻨﻛ ﻦﻳﺮﺘﻤﻬﻣ . ﻒﻠﻋ ﺶﻛ ﺮﻴﻏ ﻲﺑﺎﺨﺘﻧا ﺖﻳزﻮﻔﻴﻠﮔ و
ﺖﻨﻳزﻮﻓﻮﻠﮔ ﺖﺳا
ﻢﺴﻴﻧﺎﻜﻣ . ﻞﻤﻋ ﺖﻳزﻮﻔﻴﻠﮔ ﻲﻨﺘﺒﻣ
ﺮﺑ ﺖﻌﻧﺎﻤﻣ زا ﻓ ﺖﻴﻟﺎﻌ ﻢﻳﺰﻧآ لﻮﻧا
وﺮﻴﭘ ﻞﻴﺋ تﺎﻤﻴﻜﻴﺷ 3
تﺎﻔﺴﻓ- زﺎﺘﻨﺳ EPSP) ﺖﺳا ( ﻦﻳا . ﻢﻳﺰﻧآ ﻪﻛ ﺮﺑ ﺮﻴﺴﻣ ﻚﻴﻤﻴﻜﻴﺷ ﺪﻴﺳا
ﺮﻴﺛﺎﺗ ﻲﻣ دراﺬﮔ و لﻮﺌﺴﻣ ﺳ ﺰﺘﻨ يﺎﻫﺪﻴﺳاﻮﻨﻴﻣآ
،نﺎﻓﻮﺘﭙﻳﺮﺗ ﻦﻳزوﺮﻴﺗ
و ﻞﻴﻨﻓ ﻦﻴﻧﻻآ ﺖﺳا و ﻦﻳاﺮﺑﺎﻨﺑ طﺎﺒﺗرا ﻢﻴﻘﺘﺴﻣ ﺎﺑ ﺪﺷر هﺎﻴﮔ دراد نﻮﭼ. رد تﺎﻧاﻮﻴﺣ ﻦﻳا ﻣ ﺮﻴﺴ دﻮﺟو دراﺪﻧ ﻦﻳا ﻒﻠﻋ ﻛ ﺶ
ياﺮﺑ
،تاﺮﺸﺣ اﻮﻴﺣ تﺎﻧ و
،نﺎﺴﻧا نﺎﮔﺪﻧﺮﭘ و ﻲﻫﺎﻣ ﺎﻫ ﻲﺑ ﺮﻄﺧ ﺖﺳا ) 1 ( ﺖﻨﻳزﻮﻓﻮﻠﮔ. زا
ﺖﻴﻟﺎﻌﻓ ﻢﻳﺰﻧآ ﻦﻴﻣﺎﺗﻮﻠﮔ ﻨﺳ زﺎﺘ يﺮﻴﮔﻮﻠﺟ ﻲﻣ
ﺪﻨﻛ و
ﺎﺑ ﻦﻳا ﻞﻤﻋ ﺚﻋﺎﺑ يﺮﻴﮔﻮﻠﺟ زا
ﻞﻳﺪﺒﺗ تﺎﻣﺎﺗﻮﻠﮔ و
كﺎﻴﻧﻮﻣآ ﻪﺑ ﻦﻴﻣﺎﺗﻮﻠﮔ ﻲﻣ دﻮﺷ و ناﺰﻴﻣ كﺎﻴﻧﻮﻣآ رد لﻮﻠﺳ ﺎﻫ ﻓا ﺶﻳاﺰ ﻪﺘﻓﺎﻳ ﻪﺑو ﻦﻳا ﺐﻴﺗﺮﺗ
ﺐﺒﺳ گﺮﻣ لﻮﻠﺳ ﺎﻫ ﻲﻣ دﻮﺷ ) 4،9-10 .(
ﻪﻗﺎﺳ راﻮﺧ ترذ رد ناﺮﻳا رد ﻪﺟرد
،لوا ﺖﻓآ يﺪﻴﻠﻛ ترذ بﻮﺴﺤﻣ هﺪﺷ ﻲﻟو ﻪﺑ ﻲﻧﺎﻫﺎﻴﮔ ﻞﺜﻣ
،ﻒﻨﻛ
،ﻪﺒﻨﭘ ﺞﻧﺮﺑ و ﺮﻜﺸﻴﻧ ﺰﻴﻧ ﻪﻠﻤﺣ ﻲﻣ
ﺪﻨﻛ ) 7 ( ﺖﻓآ . قﻮﻓ نﺎﺑﺰﻴﻣ200
ﻲﻋارز و ﺮﻴﻏ ﻲﻋارز دراد و ﻚﻳ ﺖﻓآ ﻲﻠﭘ ژﺎﻓ ﺖﺳا ﻦﻳا . هﺮﺸﺣ زا ﻪﺘﺳار اﺪﻜﻟﻮﭙﻟﺎﺑ نار (Lepidoptera) و
هداﻮﻧﺎﺧ Pyralidae هدﻮﺑ
و ﺮﻳز ﻪﻧﻮﮔ نآ رد ناﺮﻳا Ostrinia nubilalis persica ﻲﻣ
ﺪﺷﺎﺑ .
ﺎﻫورﻻ ﻚﻳ ﺖﻓآ ﺲﭘ زا ﻪﻳﺬﻐﺗ زا گﺮﺑ
،ﺎﻫ ﻪﻗﺎﺳ ار خارﻮﺳ هدﺮﻛ ﻪﺑ ﻞﺧاد ﻪﻗﺎﺳ ذﻮﻔﻧ هدﺮﻛ و ﺎﺑ ﻪﻳﺬﻐﺗ زا ﺎﺳ ﻪﻗ لﺎﻧﺎﻛ ﻲﻳﺎﻫ ار ﻞﺧاد نآ
دﺎﺠﻳا ﻲﻣ ﺪﻨﻨﻛ ﻦﻳا . لﺎﻧﺎﻛ ﺎﻫ ﺖﻣﺎﻘﺘﺳا ﻪﻗﺎﺳ ﺎﻫ ار رد راﺪﻬﮕﻧ ي نزو ﻪﺗﻮﺑ ﺎﻫ و ﺖﻣوﺎﻘﻣ رد ﺮﺑاﺮﺑ شزو دﺎﺑ ﺶﻫﺎﻛ هداد و ﺐﺒﺳ هﺪﻨﻨﻜﺷ نﺪﺷ
ﻪﺗﻮﺑ ﺎﻫ ﻲﻣ ﺪﻧﻮﺷ ورﻻ . يﺎﻫ ﻦﻳا ﺖﻓآ هوﻼﻋ ﺮﺑ ﻪﻗﺎﺳ ﻪﺑ لﻼﺑ ﺰﻴﻧ ﻪﻠﻤﺣ ﻲﻣ ﺪﻨﻨﻛ
،گﺮﺑ . ﻪﻗﺎﺳ و ﻪﻧاد يﺎﻫ لﻼﺑ ﮔ ﻲﻫﺎ ﻂﺳﻮﺗ ﺎﺗ10 دﺪﻋ20
ورﻻ درﻮﻣ ﻪﻠﻤﺣ راﺮﻗ ﻲﻣ ﺪﻧﺮﻴﮔ ناﺰﻴﻣ . ترﺎﺴﺧ ﻦﻳا ﺖﻓآ رد طﺎﻘﻧ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﺘﻣ توﺎﻔ هدﻮﺑ و زا ﺎﺗ10 ﺪﺻرد 50 شراﺰﮔ هﺪﺷ ﺖﺳا ﻪﻗﺎﺳ .
راﻮﺧ ﻲﻳﺎﭘورا ترذ هوﻼﻋ ﺮﺑ ترﺎﺴﺧ
،ﻢﻴﻘﺘﺴﻣ ﺚﻋﺎﺑ ﺶﻳاﺰﻓا ﻲﮔﺪﻴﺳﻮﭘ لﻼﺑ
ﻲﺷﺎﻧ زا چرﺎﻗ مﻮﻳرازﻮﻓ ﻲﻣ دﻮﺷ ياﺮﺑ . ﻣ هزرﺎﺒ ﺎﺑ نآ زا مﻮﻤﺳ
هﺮﺸﺣ ﺶﻛ هدﺎﻔﺘﺳا ﻲﻣ دﻮﺷ و رد ﻚﻳ ﻞﺼﻓ ﺖﺷﺎﻛ
ًﻻﻮﻤﻌﻣ ﺞﻨﭘ ﺖﺑﻮﻧ ﻲﺷﺎﭙﻤﺳ ﻪﻴﻠﻋ نآ مﺎﺠﻧا ﻲﻣ دﻮﺷ و ﻲﻜﻳ زا دﺮﺒﻫار يﺎﻫ ﺮﺛﻮﻣ رد ﺪﻴﻟﻮﺗ
ترذ هدﺎﻔﺘﺳا زا مﻮﻤﺳ ﺖﺳاBT
ﻦﻴﻟوا . شراﺰﮔ ﺪﻴﻟﻮﺗ ترذ ﺖﺨﻳراﺮﺗ ﻪﺑ
ﻪﻄﺳاو مﻮﻳﺮﺘﻛﺎﺑوﺮﮔا رد
لﺎﺳ ﺪﺷمﺎﺠﻧا1988 ) 8 ( ﻦﻳﺪﻨﭼ زوﺮﻣا.
هﺪﺷﻲﻜﻴﺘﻧژحﻼﺻاﻚﻴﺘﻧژﻲﺳﺪﻨﻬﻣزاهدﺎﻔﺘﺳاﺎﺑﻒﻠﺘﺨﻣيﺎﻫرﻮﺸﻛردترذﭗﺒﻴﺗﻮﻧژ )ﺪﻧا
6 .(
٣
رد ﻖﻴﻘﺤﺗﻦﻳا زا
نژ يﺎﻫ Cry1a.105 و
EPSPS رد ﻚﻳ رﺎﺘﺧﺎﺳ يﺪﻴﻤﺳﻼﭘ ﺎﺑ
ﻚﻳ T-DNA هدﺎﻔﺘﺳا
ﺪﺷ نژ. Cry1a.105 ياراد
ﭘﻴ ﺮﺒﺸ
ﻫﻴ ﺮﺒ ﻳ ﺪ CaMV35S وﻳ)
سوﺮ ازﻮﻣ ﻴﻳ ﻚ ﻞﮔ ﻢﻠﻛ و ﺘﻛا ﻴ ﻦ ﺞﻧﺮﺑ و ( نﺎﻳﺎﭘ كﻮﺷﺮﺑ ﻲﺗراﺮﺣ مﺪﻨﮔ ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ و نژ EPSPS راد يا ﺮﺒﺸﻴﭘ ﻦﻴﺘﻛا
ﺞﻧﺮﺑ (promoter-Act) و
نﺎﻳﺎﭘ ﺮﺑ ﻦﻴﻟﺎﭘﻮﻧ زﺎﺘﻨﻴﺳ (Nos terminator) ﻲﻣ
ﺪﺷﺎﺑ .
داﻮﻣ و شور ﺎﻫ
يﺮﺘﻛﺎﺑ ﺪﻴﻤﺳﻼﭘو
ﻦﻳارد حﺮﻃ زا مﻮﻳﺮﺘﻛﺎﺑوﺮﮔا ﻲﻣﻮﺗ
ﺲﻨﻴﺷﺎﻓ Agrobacterium tumefaciens)
ﻪﻳﻮﺳ ( LBA4404 هدﺎﻔﺘﺳا
ﺪﺷ ﻦﻳا . يﺮﺘﻛﺎﺑ يوﺎﺣ
ﺪﻴﻤﺳﻼﭘ PBI121 ﻲﻣ
ﺪﺷﺎﺑ رد ﻦﻳا ﻲﺳرﺮﺑ زا نژ يﺎﻫ Cry1a.105 و
EPSPS رد ﻚﻳ رﺎﺘﺧﺎﺳ يﺪﻴﻤﺳﻼﭘ ﺎﺑ
ﻚﻳ T-DNA ﺳا
هدﺎﻔﺘ ﺪﺷ .
نژ Cry1a.105 ياراد
ﭘﻴ ﺮﺒﺸ ﻫﻴ ﺮﺒ ﻳ ﺪ CaMV35S) وﻳ(
سوﺮ ازﻮﻣ ﻴﻳ ﻚ ﻞﮔ ﻢﻠﻛ و ﺘﻛا ﻴ ﻦ ﺞﻧﺮﺑ ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﻛ ﻪﺑ ترﻮﺻ ﻲﻤﺋاد رد هﺎﻴﮔ نﺎﻴﺑ
ﻲﻣ دﻮﺷ و نﺎﻳﺎﭘ كﻮﺷﺮﺑ ﻲﺗراﺮﺣ مﺪﻨﮔ ﺖﺳا و نژ EPSPS ياراد ﺮﺒﺸﻴﭘ ﻦﻴﺘﻛا ﺞﻧﺮﺑ promoter-Act) و (
نﺎﻳﺎﭘ ﺮﺑ ﻦﻴﻟﺎﭘﻮﻧ زﺎﺘﻨﻴﺳ (Nos
terminator) ﻲﻣ
ﺪﺷﺎﺑ .
ﻪﻴﻴﻬﺗ ﺰﻳر ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ و ﻢﻫ ﻲﺘﺸﻛ
يﺎﻫرﺬﺑ درﻮﻣ هدﺎﻔﺘﺳا رد ﻦﻳا ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳﻻ يردﺎﻣ ﻢﻗر ﺪﻳﺮﺒﻴﻫ نﺎﻘﻫد KE 72012/12) دﻮﺑ(
ﻪﻛ زا ﻪﺴﺳﻮﻣ تﺎﻘﻴﻘﺤﺗ لﺎﻬﻧ
رﺬﺑو ﻪﻴﻴﻬﺗ ﺪﺷ .
ﺲﭘ زا ﻪﻧاﻮﺟ ندز روﺬﺑ
،ترذ رد ﺮﻳز دﻮﻫ ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ يﺎﻫ ﻚﭼﻮﻛ ار زا ﺖﻤﺴﻗ ﻪﺘﺧوﺪﻧا يا هﺎﻴﮔ اﺪﺟ ﻲﻣ ﻢﻴﻨﻛ و ﻬﻧآ ﺎ را ﻞﻳﺮﺘﺳا ﻲﻣ ﻢﻴﻨﻛ ﻪﺳو
ﻪﺒﺗﺮﻣ ﺎﺑ بآ ﻮﺗا وﻼﻛ هﺪﺷ ﻮﺸﺘﺴﺷ ﻲﻣ
؛ﻢﻴﻫد ﺲﭙﺳ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ ار ﺮﺑ يور ﺬﻏﺎﻛ ﻲﻓﺎﺻ ﻞﻳﺮﺘﺳا هﺪﺷ راﺮﻗ ﻲﻣ ﻢﻴﻫد ﺗﺎ بآ ﻲﻓﺎﺿا ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ
بﺬﺟ ﺪﻧﻮﺷ ﺲﭙﺳ . رﻮﺤﻣ يﻻﺎﺑ ﻪﭙﻟ ار زا رﻮﺤﻣ ﺮﻳز ﻪﭙﻟ اﺪﺟ ﻲﻣ
؛ﻢﻴﻨﻛ رد ﻪﻠﺣﺮﻣ ﺪﻌﺑ ﻪﺑ ﻚﻤﻛ ﺲﻨﭘ ﺮﭙﻟﺎﻜﺳاو فﻼﻏ ﻛ ﻞﻴﺘﭘﻮﺌﻠ ار زا رﻮﺤﻣ
يﻻﺎﺑ ﻪﭙﻟ اﺪﺟ هدﺮﻛ و گﺮﺑ ﺎﻫ ار ﻲﻜﻳ ﻲﻜﻳ فﺬﺣ ﻲﻣ ﻢﻴﻨﻛ ﻦﻳاو ﻞﻤﻋ ار ﺎﺗ ﻲﻳﺎﺟ ﻪﻣادا ﻲﻣ ﻢﻴﻫد ﻪﻛ ﻪﺑ ﻢﺘﺴﻳﺮﻣ ﺮﺑ ﻢﻴﺳ ﺲﭙﺳ ﻪﺑ ﻚﻤﻛ كﻮﻧ
ﺮﭙﻟﺎﻜﺳا ﻢﺘﺴﻳﺮﻣ ار ﻢﺧز ﻲﻧز ﻲﻣ ﻢﻴﻨﻛ ﺪﻌﺑ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ ار ﻪﺑ ﻂﻴﺤﻣ PHI-B ﻪﻛ ﻞﻣﺎﺷ داﻮﻣ ﻂﻴﺤﻣ هوﻼﻌﺑMS
7 / مﺮﮔ0 ﺮﺘﻴﻟرد لا
،ﻦﻴﻟوﺮﭘ- 5 / مﺮﮔ0
،MES ﻲﻠﻴﻣ1,5
مﺮﮔ رد ﺮﺘﻴﻟ D) 4- (2،
، 425 / ﻲﻠﻴﻣ0 مﺮﮔ رد هﺮﻘﻧ ﺮﺘﻴﻟ
،تاﺮﺘﻴﻧ 62 / مﺮﮕﻴﻠﻴﻣ 19 رد ﺮﺘﻴﻟ ﻦﻜﻨﻳﺮﺳﻮﺘﺳا
، مﺮﮔ0,4 رد ﺮﺘﻴﻟ لا -
،ﻦﻴﺘﺴﻴﺳ 154 / مﺮﮔ 0 ﺮﺘﻴﻟ رد DDT ) ,1 4 لﻮﺘﻳد - يد - لا لﻮﺘﻳﺮﺗ-
،( و 5 / ﻲﻠﻴﻣ0 ﺮﺘﻴﻟ رد ﺮﺘﻴﻟ ﻦﻴﻣﺎﺘﻳو N6 ) 1 / مﺮﮔ 0
،ﻦﺴﻳﻼﮔ 05 / مﺮﮔ 0
ﻦﻴﻣﺎﻴﺗ ورﺪﻴﻫ ﺪﻳﺮﻠﻛ
، 025 / مﺮﮔ0 ﻚﻴﻨﻴﺗﻮﻜﻴﻧ ﺪﻴﺳا
، 025 / مﺮﮔ0 ﻦﻴﺴﻛوﺪﻳﺮﻴﭘ ﺪﻳﺮﻠﻛورﺪﻴﻫ
ار رد ﻲﺳ50 ﻲﺳ بآ ﺮﻄﻘﻣ ﺎﺑ ( لدﺎﻌﻣPH 8 / 5
،دﻮﺑ لﺎﻘﺘﻧا ﻲﻣ ﻢﻴﻫد .
رد ﻦﻳا ﻪﻠﺣﺮﻣ ﻪﺑ ﻚﻤﻛ ﺮﻠﭙﻤﺳ ﺎﺗ2 ﺮﺘﻴﻟوﺮﻜﻴﻣ5 زا يﺮﺘﻛﺎﺑ يﺎﻫ ﻂﻴﺤﻣ PHI-A ﻪﻛ ﻞﻣﺎﺷ ﻲﺳ100 ﻲﺳ رد ﻴﻟ ﺮﺘ MS(10X)
، 7 / مﺮﮔ0 رد
ﺮﺘﻴﻟ لا
،ﻦﻴﻟوﺮﭘ- 5 / مﺮﮔ0 رد ﻴﻟ MESﺮﺘ
، 5 / مﺮﮔ68 رد ﺮﺘﻴﻟ
،زرﺎﻛﺎﺳ مﺮﮔ36
رد ﺮﺘﻴﻟ
،ﺰﻛﻮﻠﮔ 5 / ﻲﻠﻴﻣ1 مﺮﮔ رد ﺘﻴﻟ نﻮﻣرﻮﻫﺮ D)
4 - (2،
، ﻲﻠﻴﻣ1
ﺮﺘﻴﻟ رد ﺮﺘﻴﻟ ﻦﻴﻣﺎﺘﻳو
،N6 62 / ﻲﻠﻴﻣ19 مﺮﮔ رد ﺮﺘﻴﻟ ﻦﻜﻨﻳﺮﺳﻮﺘﺳا ﺎﺑ
لدﺎﻌﻣPH 2 /
،دﻮﺑ5 ﻪﺑ ﻢﺘﺴﻳﺮﻣ يﺎﻫ ﻳﺎﻬﺘﻧا ﻲ ﺰﻳر ﺎﻬﻧﻮﻤﻧ ﻲﻣ ﻢﻳﺰﻳر مزﻻ) ﻪﺑ
ﺮﻛذ ﺖﺳا ﻪﻛ يﺮﺘﻛﺎﺑ ﺎﻫ دﻮﺟﻮﻣ د ر ﻂﻴﺤﻣ PHI-A ﻪﺑ تﺪﻣ ﺖﻋﺎﺳ4 رد ﺮﻜﻴﺷ رﻮﺗﺎﺑﻮﻜﻧا ﻪﺟرد28
ﻲﺘﻧﺎﺳ داﺮﮔ و رود200 رد ﻪﻘﻴﻗد راﺮﻗ هداد
ﺪﺷ ﺎﺗ درﻮﻣOD زﺎﻴﻧ يﺮﺘﻛﺎﺑ ﻪﻛ ﻦﻴﺑ 5 / ﺎﺗ0 ﻲﻣ1 ﺪﺷﺎﺑ ار ﻦﻴﻣﺄﺗ ﺪﻳﺎﻤﻧ ﺲﭙﺳ .(
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ ﻪﺑ ﻂﻴﺤﻣ ﻚﻳرﺎﺗ لﺎﻘﺘﻧا د هدا ﻲﻣ دﻮﺷ ﺪﻌﺑ . زا ﺖﺷﺬﮔ
ﺖﻋﺎﺳ24 ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ ﻪﺑ ﻂﻴﺤﻣ ﻲﻳاززﺎﺑ ﻘﺘﻧا لﺎ اد هد ﻲﻣ دﻮﺷ .
ﻲﻳاززﺎﺑ
ﺪﻌﺑ زا لﺎﻘﺘﻧا نژ ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﻲﺑﺎﻴﺘﺳد ﻪﺑ ﺮﺜﻛاﺪﺣ ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ مرﻮﻔﺴﻧاﺮﺗ ﺰﻳر،هﺪﺷ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ ار ﻪﺑ ﻂﻴﺤﻣ يﺎﻫ ﺎﺑ ﻲﻳازز لﺎﻘﺘﻧا ﻲﻣ
،ﻢﻴﻫد ﻂﻴﺤﻣ
ﻪﺧﺎﺷ ﻲﻳاز (SIM)لوا
، ﻞﻣﺎﺷ داﻮﻣ ﻂﻴﺤﻣ هوﻼﻌﺑMS
ﻚﻳ ﻲﻠﻴﻣ مﺮﮔ D) 4- (2،
، 5 / ﻲﻠﻴﻣ1 مﺮﮔ رد ﺮﺘﻴﻟ نﻮﻣرﻮﻫ
،BAP ﻲﻠﻴﻣ100
مﺮﮔ رد
ﺮﺘﻴﻟ
،ﻢﻴﺴﻛﻮﺗﺎﻔﺳ ﻚﻳ
ﻲﻠﻴﻣ مﺮﮔ رد ﺮﺘﻴﻟ
،ﻦﻴﺴﻳﻼﮔ 850
/ ﻲﻠﻴﻣ0 مﺮﮔ رد ﺮﺘﻴﻟ تاﺮﺘﻴﻧ
،هﺮﻘﻧ ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﻧﻮﻤﻧﺰﻳر. ﻫﺎ ﻪﺑ تّﺪﻣ ود ﻪﺘﻔﻫ رد ﻦﻳا ﻂﻴﺤﻣ
راﺮﻗ
،ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ ﺲﭙﺳ ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ دﺎﺠﻳا كﻮﺷ رد ﺪﻨﻳاﺮﻓ ﻪﺧﺎﺷ ﻲﻳاز ﻪﺑ ﻂﻴﺤﻣ مود ﻪﺧﺎﺷ ﻲﻳاز ﻪﻛ يوﺎﺣ داﻮﻣ ﻂﻴﺤﻣ ﺎﺑSIM ﻪﺳ ﺮﻴﻴﻐﺗ : 1 فﺬﺣ-
ﻧ تاﺮﺘﻴ
،هﺮﻘﻧ 2 ﺶﻫﺎﻛ- نﻮﻣرﻮﻫ ﻪﺑBA
3 / ﻲﻠﻴﻣ0 مﺮﮔ رد ﺮﺘﻴﻟ و ندوﺰﻓا 76 / ﻲﻠﻴﻣ5 مﺮﮔ رد ﺮﺘﻴﻟ نﻮﻣرﻮﻫ
،ﺖﺳاTDZ لﺎﻘﺘﻧا هداد ﺷ ﺪﻧﺪ .
۴
ﻪﺸﻳر ﻲﻳاز
ﺖﻬﺟ ﻪﺷر راد ندﺮﻛ ﻪﻧﻮﻤﻧ يﺎﻫ اززﺎﺑ هﺪﺷ ﺎﻬﻧآ ار ﻪﺑ ﻂﻴﺤﻣ يارادMS
6 / ﻲﻠﻴﻣ0 مﺮﮔ رد ﺮﺘﻴﻟ نﻮﻣرﻮﻫ D) 4- (2، ﺎﻘﺘﻧا ل ﻢﻳداد ﺲﭙﺳ . ﻪﺧﺎﺷ
يﺎﻫ ﺸﻳر ﻪ راد هﺪﺷ ﻪﻛ لﻮﻃ ﻪﺸﻳر يﺎﻫ ﻬﻧآ ﺎ ﺶﻴﺑ زا ﻲﺘﻧﺎﺳ3 ﺮﺘﻣ دﻮﺑ ﻪﺑ كﺎﺧ ﻚﺒﺳ ياراد ﺖﺒﺴﻧ يوﺎﺴﻣ زا ﻦﺷ ﺖﻴﭘ : ﺖﻴﻟﺮﭘ: ) 1:1:1 (
لﺎﻘﺘﻧا هداد ﺪﻧﺪﺷ ﻪﺑ . رﻮﻈﻨﻣ ﻖﻴﺒﻄﺗ اﺪﻴﭘ ندﺮﻛ ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ ﺎﻫ ﺎﺑ اﺮﺷ ﻂﻳ ﻲﻄﻴﺤﻣ ﺎﺑ ناﻮﻴﻟ يﺎﻫ فﺎﻔﺷ ﻲﻜﻴﺘﺳﻼﭘ رﺎﺒﻜﻳ
فﺮﺼﻣ ﺶﺷﻮﭘ ﻲﺒﺳﺎﻨﻣ ار
ياﺮﺑ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ دﺎﺠﻳا ﻢﻳدﺮﻛ و ﻪﺑ روﺮﻣ نﺎﻣز ﺎﺑ دﺎﺠﻳا خارﻮﺳ ﻲﻳﺎﻫ رد يﺎﻬﺘﻧا ناﻮﻴﻟ ﺎﻫ ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ ﺎﻫ ار ﺎﺑ ﻂﻳاﺮﺷ ﻲﻄﻴﺤﻣ ﻖﻴﺒﻄﺗ ﻢﻳداد ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ. ﺎﻫ ار
ﺲﭘ زا
ّﺪﻣ ﻲﺗ ﻪﺑ ﻪﻧﺎﺨﻠﮔ لﺎﻘﺘﻧا ﻢﻳداد ﺪﻌﺑ. زا ﺪﺷر ﻲﺸﻳور ﭽﻫﺎﻴﮔ ﻪ ﺎﻫ دراو زﺎﻓ ﻲﺸﻳاز ﺪﻧﺪﺷ ﺲﭙﺳو زا ﺎﻬﻧآ رﺬﺑ يﺮﻴﮔ ﺪﺷ .
ﻪﻳﺰﺠﺗ ﻞﻴﻠﺤﺗو PCR
رﻮﻀﺣ نژ يﺎﻫ Cry1a.105 و
EPSPS رد
نﺎﻫﺎﻴﮔ ﻪﺘﺨﻳراﺮﺗ ﺎﺑ هدﺎﻔﺘﺳا زا PCR ﺪﻴﻳﺄﺗ ﺪﺷ ﻪﺑ . ﻦﻳا رﻮﻈﻨﻣ ﺘﺑا اﺪ يDNA ﻲﻣﻮﻧژ ﻪﺑ
شور SoltisLab CTABDNAExtraction زا
گﺮﺑ ناﻮﺟ و هزﺎﺗ نﺎﻫﺎﻴﮔ ﻲﮔﺮﺑ5 لﺎﻘﺘﻧا ﻪﺘﻓﺎﻳ ﻪﺑ
،ﻪﻧﺎﺨﻠﮔ ﻪﻴﻴﻬﺗ ﺪﺷ ﭘ ﺲ زا ﻦﻴﻴﻴﻌﺗ
ﺖﻈﻠﻏ ﻪﻧﻮﻤﻧ
،ﺎﻫ ﻮﻧﺎﻧ50 مﺮﮔ زا يDNA درﻮﻣ ﺮﻈﻧ اﺮﺑ ي ﻪﻳﺰﺠﺗ و ﻞﻴﻠﺤﺗ ﻪﺑPCR ﺐﻴﺗﺮﺗ ﺎﺑ يﺎﻫﺮﮔزﺎﻏآ ﺮﺒﺸﻴﭘ
CaMV35S دراوﺮﻓ
ﺎﺑ
ﻲﻟاﻮﺗ ﻲﺣاﺮﻃ هﺪﺷ GCTCCTACAAATGCCATC ﺮﻤﻳاﺮﭘو
CaMV35S
رﻮﻳر GATAGTGGGATTGTGCGTC ﺮﻴﺜﻜﺗ
ﺎﺑ
ﺮﺒﺸﻴﭘ CaMV35S ﺐﺒﺳ
دﺎﺠﻳا تﺎﻌﻄﻗ ﺖﻔﺟ195 يزﺎﺑ ﺪﻳدﺮﮔ هوﻼﻋ. ﺮﺑ يDNA نﺎﻫﺎﻴﮔ ﻪﺘﺨﻳراﺮﺗ زا ﺪﻫﺎﺷ يﺎﻫ ﺐﺳﺎﻨﻣ ﺷ ﻣﺎ ﻞ يDNA
نﺎﻫﺎﻴﮔ ﺮﻴﻏ
،ﻪﺘﺨﻳراﺮﺗ ﺶﻨﻛاو
نوﺪﺑPCR وDNA ﻚﻳ ﺶﻨﻛاو ﺎﺑ يDNA يﺪﻴﻤﺳﻼﭘ هدﺎﻔﺘﺳا
ﺪﺷ ﺎﺗ لﺮﺘﻨﻛ يﺎﻫ ﺐﺳﺎﻨﻣ رد ﻦﻴﺣ ﺶﻳﺎﻣزآ
مﺎﺠﻧا دﻮﺷ يﺎﻣد . لﺎﺼﺗا ياﺮﺑ لﺎﺼﺗا ياﺮﺑ رﻮﺗﻮﻣوﺮﭘ CaMV35S ﻪﺟرد55
ﻲﺘﻧﺎﺳ داﺮﮔ دﻮﺑ .
ﺞﻳﺎﺘﻧ ﺚﺤﺑو
ﻞﻴﻜﺸﺗ ﻪﺧﺎﺷ يﺎﻫ ﻪﺘﺨﻳراﺮﺗ و ﻪﺸﻳر ﻲﻳاز
ﺪﺻرد60 ﻪﻧﻮﻤﻧﺰﻳر ﺎﻫ ﺲﭘ زا دوﺪﺣ زور15 عوﺮﺷ ﻪﺑ ﻪﺧﺎﺷ ﻲﻳاز ﺪﻧدﺮﻛ زا . ﺮﻫ ﺰﻳر ﻪﻧﻮﻤﻧ دوﺪﺣ ﺎﺗ10 دﺪﻋ12 ﻪﺧﺎﺷ ﺪﻴﻟﻮﺗ ﺪﺷ ﻪﻛ ﺮﺜﻛا
ﻪﺧﺎﺷ يﺎﻫ لﺎﻘﺘﻧا ﻪﺘﻓﺎﻳ ﻪﺑ ﻂﻴﺤﻣ ﻪﺸﻳر ﻲﻳاز ﻪﺑ روﺮﻣ نﺎﻣز ﻪﺑ) ﻞﻴﻟد ﺖﺨﺳ ﻪﺸﻳر ﻲﻳاز زا ( ﻦﻴﺑ ﺪﻨﺘﻓر . 25 ﻪﻧﻮﻤﻧ% ﻫﺎ ﻪﺸﻳر راد ﺪﻧﺪﺷ .
ﻪﻳﺰﺠﺗ ﻞﻴﻠﺤﺗو PCR
ﻪﻳﺰﺠﺗ ﻞﻴﻠﺤﺗو ﻲﻟﻮﻜﻟﻮﻣ ردPCR
نﺎﻫﺎﻴﮔ ﻪﺑ ﺖﺳد هﺪﻣآ ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﺪﻴﻳﺄﺗ رﻮﻀﺣ نژ و ﺎﻳ مﺪﻋ رﻮﻀﺣ نژ يﺎﻫ Cry1a.105 و
EPSPS
مﺎﺠﻧا ﺪﺷ ﺞﻳﺎﺘﻧ . ﻪﻳﺰﺠﺗ ﻞﻴﻠﺤﺗو PCR ﻞﺴﻧ T0
نﺎﺸﻧ داد 60 ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ% يﺎﻫ دﻮﺟﻮﻣ ياراد نژ يﺎﻫ 105 a.
1 وCry S EPSP ﺪﻧدﻮﺑ ﺰﻴﻟﺎﻧآ .
ياﺮﺑPCR ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ يﺎﻫ T1
نﺎﺸﻧ داد دوﺪﺣ 50 زا% ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ يﺎﻫ ﻞﺴﻧ
1 يارادT نژ يﺎﻫ 105 a.
1 وCry EPSPS ﺪﻧدﻮﺑ
.
ﻪﻳﺰﺠﺗ و ﻞﻴﻠﺤﺗ نﺎﻫﺎﻴﮔ T1
ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ يﺎﻫ ﻞﺴﻧ T0
ﺪﺷر رﺎﻴﺴﺑ ﻲﻔﻴﻌﺿ ﺪﻨﺘﺷاد ﻪﺑ يرﻮﻃ ﻪﻛ يرﺎﻴﺴﺑ زا ﺎﻬﻧآ دراو زﺎﻓ ﻲﺸﻳاز ﺪﻧﺪﺸﻧ و نوﺪﺑ ﺬﺑ ﻲﻫدر زا ﻦﻴﺑ ﺪﻨﺘﻓر ﺎﻣا
زا ﻦﻳا نﺎﻴﻣ ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ ﻲﻳﺎﻫ دﻮﺟو ﺪﻨﺘﺷاد ﻪﻛ رﻮﻬﻇ يﺎﺠﺑ ماﺪﻧا
هدﺎﻣ هﺮﮔرد ﻢﺠﻨﭘ ﻢﺸﺷو ﺎﻬﻧآ يﺎﻫرﺎﺗ ﻲﻤﺸﻳﺮﺑا ﻲﻤﻛ د ر ﺖﻤﺴﻗ جﺎﺗ و رد
نﻮﻣاﺮﻴﭘ ماﺪﻧا ﺎﻬﻧآﺮﻧ ﻇ ﺮﻫﺎ ﺪﺷ و رد نﺎﻤﻫ نﺎﻜﻣ داﺪﻌﺗ ﻲﻤﻛ رﺬﺑ ﺮﻫﺎﻇ ﺪﺷ رد عﻮﻤﺠﻣ زا ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ12 T0
، ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ25 T1
دﺎﺠﻳا ﺪﺷ ﻪﻛ دوﺪﺣ
ﻪﭽﻫﺎﻴﮔ13 ﺖﺒﺜﻣ ﺪﻧﺪﺷ ﻪﺑ. ﻈﻧ ﺮ ﻲﻣ ﺳر ﺪ ﻦﻳا هﻮﻴﺷ لﺎﻘﺘﻧا ﻚﻳ ﻴﺷ هﻮ ﺮﺛﻮﻣ رد ﺪﻨﻳاﺮﻓ مرﻮﻔﺳاﺮﺗ هﺎﻴﮔ ترذ ﻲﻣ ﺪﺷﺎﺑ ز اﺮﻳ داﺪﻌﺗ نژاﺮﺗ هﺪﻫﺎﺸﻣ
هﺪﺷ يﺎﻳﻮﮔ ﻦﻳا ﺖﺳﺎﻋﺪﻣ .
T1يﺎﻫﻪﭽﻫﺎﻴﮔ -6ﺎﺗ2 ،ﺮﻛرﺎﻣﺰﻳﺎﺳ -1)T1يﺎﻫﻪﭼﺎﻴﮔ CaMV35Sﺮﺒﺸﻴﭘﻪﺑطﻮﺑﺮﻣﺪﻧﺎﺑﺮﻴﺜﻜﺗ-1ﻞﻜﺷ
، -7 ﻚﻫﺎﭼ ﻲﻟﺎﺧ
، 8
ﺪﻴﻤﺳﻼﭘ- - E - pBI
C105 -
، 9 بآ -
، 10 ﺪﻫﺎﺷ- ﺮﻴﻏ ﺖﺨﻳراﺮﺗ . (
۵
ﻣ ﻊﺑﺎﻨ
1. Bakshi, S., & Dewan, D. (2013). Status of transgenic cereal crops: a review. Clon Transgen, 3(119), 2.
2. Fao, F. (2008). Agriculture Organization (2009). The state of food insecurity in the world.
3. Fernandez, G. C. (1992, August). Effective selection criteria for assessing plant stress tolerance. In Proceedings of the international symposium on adaptation of vegetables and other food crops in temperature and water stress (pp. 257-270).
4. Herbert, S. (1996). The geopolitics of the police: Foucault, disciplinary power and the tactics of the Los Angeles Police Department. Political Geography, 15(1), 47-59.
5. Ishida, Y., Saito, H., Hiei, Y., & KOMARI, T. (2003). Improved protocol for transformation of maize (Zea mays L.) mediated by Agrobacterium tumefaciens. Plant Biotechnology, 20(1), 57-66.
6. Ji, Q., Xu, X., & Wang, K. (2013). Genetic transformation of major cereal crops. International Journal of Developmental Biology, 57(6-7-8), 495-508.
7. Khanjani, M., & Ueckermann, E. A. (2003). Two new species of the genus Raphignathus Dugés (Acari:
Raphignathidae) from Iran. Acarologia, 43(3), 299-306.
8.Rashed Mohasel, M. H., Najafi, H., & Abarzade, M. D. (2001). Biology and weed control. Mashhad, Iran, 600.
9. Sauer, B. (1987). Functional expression of the cre-lox site-specific recombination system in the yeast Saccharomyces cerevisiae. Molecular and cellular biology, 7(6), 2087-2096.
10. Tachibana, K. (1986). Excitation of the 1 s 5, 1 s 4, 1 s 3, and 1 s 2 levels of argon by low-energy electrons. Physical Review A, 34(2), 1007.
