ﻭﺩ ﺏﻮﻨﺟ ﺐﻃ ﻪﻣﺎﻨﻠﺼﻓ
ﺶﻫﻭﮋﭘ ﺰﮐﺮﻣ ﺱﺭﺎﻓ ﺞﻴﻠﺧ ﺖﻣﻼﺳ ﯼﺎﻫ
ﺎﻣﺪﺧ ﻭ ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻡﻮﻠﻋ ﻩﺎﮕﺸﻧﺍﺩ ﺮﻬﺷﻮﺑ ﻲﻧﺎﻣﺭﺩ ﻲﺘﺷﺍﺪﻬﺑ ﺕ
ﻝﺎﺳ ﻢﺘﺸﻫ ﻩﺭﺎﻤﺷ ، ٢
، ﻪﺤﻔﺻ ١٠٩ – ۱۰۳ ) ﺪﻨﻔﺳﺍ ۱۳۸۴ (
،ﺯﺍﺮﻴﺷ *
،ﺪﻧﺯ ﻥﺎﺑﺎﻴﺧ ﺏﻭﺮﻜﻴﻣ ﺕﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﺰﻛﺮﻣ ،ﻱﺯﺎﻤﻧ ﻥﺎﺘﺳﺭﺎﻤﻴﺑ
ﻲﺘﺴﭘ ﺪﻛ ،ﻱﺯﺮﺒﻟﺍ ﺩﺎﺘﺳﺍ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ ﻲﺳﺎﻨﺷ ۱۱۳۵۱
‐ ۷۱۹۳۷
ﻦﻔﻠﺗ : ۶۲۶۲۲۲۵
‐ ۰۷۱۱ ﺲﻛﺎﻓ ، : ۶۲۸۷۰۷۱
‐ ۰۷۱۱
[email protected] Email:
ﮓﻨﺳ ﺭﺩ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻡﻮﻧﮊ ﺺﻴﺨﺸﺗ ﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻱﺎﻫ
ﺍ
ﺵﻭﺭ ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺎﺑ Multiplex-PCR
ﺩﺎﺷﺮﻓ ﻩﺮﻬﺷ ﺮﺘﻛﺩ
۱* ، ﻱﺯﺮﺒﻟﺍ ﺏﺎﻫﻮﻟﺍﺪﺒﻋ ﺮﺘﻛﺩ ﻚﻠﻣ ﻲﻠﻋ ﺮﺘﻛﺩ ،۲
ﻲﻨﻴﺴﺣ ﻲﻧﻮﭘﺍﮊ ﺰﻳﺰﻋ ﺮﺘﻛﺩ ،۳
ﻱﺩﻮﺒﻋ ﺕﺍﺮﺑ ﺮﺘﻛﺩ ،۴
ﻱﺮﻴﺼﻧ ﻞﻴﻠﺟ ،5
۶
ﺭﺎﻳﺩﺎﺘﺳﺍ۱
ﻣ ﻴ ﺏﺮﮑ ﺳﺎﻨﺷ ﻲ ، ﺏﻭﺮﻜﻴﻣ ﺕﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﺰﻛﺮﻣ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ ﻲﺳﺎﻨﺷ
ﺯﺍﺮﻴﺷ ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻡﻮﻠﻋ ﻩﺎﮕﺸﻧﺍﺩ ،ﻱﺯﺮﺒﻟﺍ ﺩﺎﺘﺳﺍ
ﻱﺭﺎﻤﻴﺑ ﺩﺎﺘﺳﺍ۲
ﺏﻭﺮﻜﻴﻣ ﺕﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﺰﻛﺮﻣ ،ﻥﺎﻛﺩﻮﻛ ﻲﻧﻮﻔﻋ ﻱﺎﻫ ﺯﺍﺮﻴﺷ ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻡﻮﻠﻋ ﻩﺎﮕﺸﻧﺍﺩ ،ﻱﺯﺮﺒﻟﺍ ﺩﺎﺘﺳﺍ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ ﻲﺳﺎﻨﺷ
ﻲﺣﺍﺮﺟ ﺩﺎﺘﺳﺍ۳
ﻣﻮﻤﻋ ﻲ ﺯﺍﺮﻴﺷ ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻡﻮﻠﻋ ﻩﺎﮕﺸﻧﺍﺩ ،ﻱﺯﺎﻤﻧ ﻥﺎﺘﺳﺭﺎﻤﻴﺑ ،
ﺭﺎﻳﺩﺎﺘﺳﺍ۴
ﻣ ﻴ ﺏﺮﮑ ﺳﺎﻨﺷ ﻲ ، ﺏﻭﺮﻜﻴﻣ ﺕﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﺰﻛﺮﻣ ﺳﺎﻨﺷ
ﺯﺍﺮﻴﺷ ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻡﻮﻠﻋ ﻩﺎﮕﺸﻧﺍﺩ ،ﻱﺯﺮﺒﻟﺍ ﺩﺎﺘﺳﺍ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ ﻲ
ﻲﺑﺮﻣ5
ﺎﻣﺯﺁ ﻡﻮﻠﻋ ﻳ ﻫﺎﮕﺸ ﻲ ، ﺏﻭﺮﻜﻴﻣ ﺕﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﺰﻛﺮﻣ ﺯﺍﺮﻴﺷ ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻡﻮﻠﻋ ﻩﺎﮕﺸﻧﺍﺩ ،ﻱﺯﺮﺒﻟﺍ ﺩﺎﺘﺳﺍ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ ﻲﺳﺎﻨﺷ
ﻩﺎﮕﺸﻳﺎﻣﺯﺁ ﺱﺎﻨﺷﺭﺎﻛ۶
، ﺏﻭﺮﻜﻴﻣ ﺕﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﺰﻛﺮﻣ ﺯﺍﺮﻴﺷ ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻡﻮﻠﻋ ﻩﺎﮕﺸﻧﺍﺩ ،ﻱﺯﺮﺒﻟﺍ ﺩﺎﺘﺳﺍ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ ﻲﺳﺎﻨﺷ
ﻩﺪﻴﮑﭼ
ﻪﻨﻴﻣﺯ : ﻴﻘﺤﺗ ﺎﻀﻋﺍ ﺯﺍ ﻲﻀﻌﺑ ﺯﺍ ﻲﺷﺎﻧ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﻦﻴﺑ ﻁﺎﺒﺗﺭﺍ ﻚﻳ ﺩﻮﺟﻭ ﻝﺎﻤﺘﺣﺍ ﺯﺍ ﻲﻛﺎﺣ ﺮﻴﺧﺍ ﺕﺎﻘ ﺀ
ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ ﻞﻴﻜﺸﺗ ﻭ
ﻲﻣ ﺪﻨﺷﺎﺑ . ﺺﻴﺨﺸﺗ ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳﺍ ﺯﺍ ﻑﺪﻫ ﻱﺮﺘﮐﺎﺑ
ﮓﻨﺳ ﺭﺩ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻱﺭﺎﻤﻴﺑ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ ﻥﺍﺭﺎﻤﻴﺑ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻱﺎﻫ
ﺍﺮﻔﺻ ﻩﺎﮕﺘﺳﺩ ﻱﺎﻫ ﻭ
ﻩﺩﻮﺑ ﻱ
ﺖﺳﺍ . ﺵﻭﺭ ﻭ ﺩﺍﻮﻣ ﺎﻫ
: ﮓﻨﺳ ﺎﻫ ﻱ ﺮﻔﺻ ﻭﺍ ﻱ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻭ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻱﺎﻫ ۳۳
ﺭﺎﻤﻴﺑ ﺖﺴﺗ ﺎﺑ ﻩﺭﻭﺍ ﻱﺎﻫ ﺁ ﻭ ﺖﺸﻛ ،ﻊﻳﺮﺳ ﺯ ﻩﺮﻴﺠﻧﺯ ﺶﻨﻛﺍﻭ
ﺯﺍﺮﻤﻴﻠﭘ ﻱﺍ
ﻲﻳﺎﺗﺪﻨﭼ Multiplex-PCR) (
ﻥﮊ ﻭﺩ ﺱﺎﺳﺍ ﺮﺑ ﻪﻛ 16S rRNA
ﺕﺍﺮﺘﻴﺳﻭﺰﻳﺍ ﻭ ﺪﻴﻫﺩ
ﺯﺎﻧﮊﻭﺭ ﺍﺮﺑ ﻱ ﹺﺺﻴﺨﺸﺗ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺲﻨﺟ ﺐﻴﺗﺮﺗ ﻪﺑ ﻭ
ﻧﻮﮔ ﺔ ﺘﻓﺮﮔ ﺭﺍﺮﻗ ﻲﺳﺭﺮﺑ ﺩﺭﻮﻣ ،ﺪﺷ ﻲﺣﺍﺮﻃ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺪﻨ
. ﻳﺍ ﺵﻭﺭ ﻦ ﺮﺑ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ PCR
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻱﻭﺭ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻱﺎﻫ
۴۰ ﻪﺴﻴﻛ
ﻭ ﻩﺪﺷ ﻲﺴﭘﻮﺗﺍ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻩﻭﺮﮔ ﻥﺍﻮﻨﻌﺑ ،ﻱﮊﻮﻟﻮﺗﺎﭘ ﺮﻈﻧ ﺯﺍ ﻝﺎﻣﺮﻧ
ﺪﻫﺎﺷ ﺖﻓﺮﮔ ﻡﺎﺠﻧﺍ .
ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺎﻫ : ﺭﺩ ۱ / ۱۸ ﮓﻨﺳ ﺯﺍ ﺪﺻﺭﺩ ﻭ ﺎﻫ
۱ / ۱۲ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺯﺍ ﺪﺻﺭﺩ ﺵﻭﺭ ﺎﺑ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻡﻮﻧﮊ ،ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻱﺎﻫ
ﺪﺷ ﻩﺩﺍﺩ ﺺﻴﺨﺸﺗ PCR .
ﺖﺴﺗ ﺍ ﻱﺎﻫ ﻩﺭﻭ ﺁ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻪﻴﻠﻛ ﻱﺍﺮﺑ ﺖﺸﻛ ﻭ ﻊﻳﺮﺳ ﺯ ﺩﻮﺑ ﻲﻔﻨﻣ ﺎﻫ
. ﺵﻭﺭ ﺎﺑ ﻝﺮﺘﻨﻛ ﻩﻭﺮﮔ ﺭﺩ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻡﻮﻧﮊPCR
ﺪﺸﻧ ﻲﻳﺎﺳﺎﻨﺷ .
ﻪﺠﻴﺘﻧ ﻱﺮﻴﮔ : ﺭﺩ ﻉﻮﻤﺠﻣ ﺭﺩ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳﺍ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺭﺩ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ DNA ﺪـﺷ ﻩﺪﻫﺎﺸﻣ ﻥﺍﺭﺎﻤﻴﺑ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ ﻱﺎﻫ
، ـﻣﺍ ﺩﺭﻮـﻣ ﺭﺩ ﺎ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻦﻳﺍ ﺭﺩ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ ﻦﻳﺍ ﻥﺩﻮﺑ ﻩﺪﻧﺯ ﺎﻫ
ﺪﺸﻧ ﻞﺻﺎﺣ ﻥﺎﻨﻴﻤﻃﺍ .
ﻪﻧﻮﮔ ﻲﻜﻴﻨﻴﻠﻛ ﺶﻘﻧ ﻥﺩﻮﻤﻧ ﺭﺎﻜﺷﺁ ﻱﺍﺮﺑ ﻱﺭﺎـﻤﻴﺑ ﺭﺩ ﺮﺘﻛﺎـﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻱﺎﻫ
ﻱﺎـﻫ
ﺕﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ،ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻩﺩﺮﺘﺴﮔ
ﺮﺗ ﺻﻮﺗ ﻴ ﻣ ﻪ ﻲ ﺩﻮﺷ .
ﻱﺪﻴﻠﮐ ﻥﺎﮔﮊﺍﻭ
: ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ ،ﺍﺮﻔﺻ ،ﻱﺭﻮﻠﻴﭘ Multiplex-PCR،
ﻪﻟﺎﻘﻣ ﺖﻓﺎﻳﺭﺩ :
۲ / ۳ ۸۴/
‐ ﻪﻟﺎﻘﻣ ﺵﺮﻳﺬﭘ :
۲۰ / ۱۲ ۸۴/
۱۰۴ / ﺏﻮﻨﺟ ﺐﻃ
ﻝﺎﺳ ﻢﺘﺸﻫ ﻩﺭﺎﻤﺷ ۲ / ﺪﻨﻔﺳﺍ ۱۳۸۴
ﻪﻣﺪﻘﻣ ﺱﺎﺳﺍ ﺮﺑ ﺕﺎﻌﻟﺎﻄﻣ
ﻥﺍﻭﺍﺮﻓ
، ﺖﻧﻮﻔﻋ ﺶﻘﻧ
ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘ
H. Pylori) (
ﻳﺮﺘﺳﺎﮔ ﺰﻧﮊﻮﺗﺎﭘ ﺭﺩ ﺖ
ﻥﺎﻃﺮﺳ ﺵﺮﺘﺴﮔ ﻭ ﺮﺸﻋ ﻲﻨﺛﺍ ﻢﺧﺯ ،ﻦﻣﺰﻣ ﻩﺪﻌﻣ
ﺖﺳﺍ ﻩﺪﺷ ﺺﺨﺸﻣ )
-۳ ۱ .(
ﻲﺳﺭﺮﺑ ﺮﻴﺧﺍ ﻱﺎﻫ ﺩﺎﻬﻨﺸﻴﭘ
ﻲﻣ ﻪﻧﻮﮔ ﻪﻛ ﺪﻨﻨﻛ ﻪﻛ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺑ ﻡﻭﺎﻘﻣ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻱﺎﻫ
ﻲﻣ ﺖﻓﺎﻳ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﺭﺩ ﻱﺭﺎﻤﻴﺑ ﺎﺑ ﺖﺳﺍ ﻦﻜﻤﻣ ﺪﻧﻮﺷ
ﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﺪﻨﺷﺎﺑ ﻁﺎﺒﺗﺭﺍ ﺭﺩ ﺍﺮﻔ )
۴ ﻭ ۵ .(
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺭﺩ ﻱﺎﻫ
ﻱﺮﺘﻛﺎﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻁﺎﺨﻣ ﻭ ﺍﺮﻔﺻ ﺪﺷ ﻲﻳﺎﺳﺎﻨﺷ ﻲﻳﺎﻫ
ﺑ ﻪﻛ ﻪ ﺪﻧﺭﺍﺩ ﺖﻫﺎﺒﺷ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ )
۹ ‐ ۶ (
، ﻩﻭﻼﻌﺑ
ﺖﺳﺍ ﻦﻜﻤﻣ ﺶﻧﺍﺭﺎﻜﻤﻫ ﻭ ﺍﺭﻮﮕﻴﻓ ﺩﺎﻬﻨﺸﻴﭘ ﺱﺎﺳﺍ ﺮﺑ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺭﺩ ﺮﺿﺎﺣ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻚﻳ ﺍﺮﻔﺻ ﻱﺎﻫ
ﮓﻨﺳ ﻞﻴﻜﺸﺗ ﺭﺩ ﺭﻮﺘﻛﺎﻓ ﻚﺴﻳﺭ ﻪﺴﻴﻛ ﻱﺎﻫ
ﺍﺮﻔﺻ
ﺪﺷﺎﺑ ) ۸ .(
ﻪﻧﻮﮔ ﻥﻮﻴﺳﺍﺰﻴﻧﻮﻠﻛ ﺭﺩ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻱﺎﻫ
ﻪﺴﻴﻛ ﺍﺮﻔﺻ ﻲﻣ ﺭﺩ ﻦﻣﺰﻣ ﺏﺎﻬﺘﻟﺍ ﻚﻳ ﺚﻋﺎﺑ ﺪﻧﺍﻮﺗ
ﻪﺴﻴﻛ ﻁﺎﺨﻣ
ﺩﻮﺷ ﺍﺮﻔﺻ .
ﺖﺳﺍ ﻦﻜﻤﻣ ﺏﺎﻬﺘﻟﺍ ﻦﻳﺍ
ﻭ ﻁﺎﺨﻣ ﺭﺩ ﺪﻴﺳﺍ ﺢﺷﺮﺗ ﺭﺩ ﻝﻼﺘﺧﺍ ﺚﻋﺎﺑ ﺩﻮﺧ ﻪﻛ ﺩﺩﺮﮔ ﻪﺴﻴﻛ ﻞﺧﺍﺩ ﻱﺍﻮﺘﺤﻣ ﻥﻮﻴﺳﺎﻜﻴﻔﻳﺪﻴﺳﺍ ﹼﻠﺣ ﺶﻫﺎﻛ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ ﻚﻤﻧ ﺖﻴﻟﺎ
ﻭ ﺍﺮﻔﺻ ﺭﺩ ﻢﻴﺴﻠﻛ ﻱﺎﻫ
ﺍ ﻲﻣ ﻦﻣﻮﻟ ﺭﺩ ﺎﻬﻧﺁ ﺏﻮﺳﺭ ﺮﻄﺧ ﺶﻳﺍﺰﻓ ﺩﻮﺷ
) ۱۰ .(
ﺭﻮﻀﺣ ﺱﺎﺳﺍ ﺮﺑ ﺰﻴﻧ ﻲﺳﺭﺮﺑ ﻚﻳ ﺞﻳﺎﺘﻧ DNA
ﮓﻨﺳ ﺭﺩ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻁﺎﺒﺗﺭﺍ ،ﻲﻟﻭﺮﺘﺴﻠﻛ ﻱﺎﻫ
ﺭﺩ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﻦﻴﺑ ﻞﻴﻜﺸﺗ ﺎﺑ ﺍﺮﻔﺻ
ﮓﻨﺳ ﺯﺍ ﻲﻋﺍﻮﻧﺍ ﻲﻣ ﻥﺎﺸﻧ ﺍﺭ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻱﺎﻫ
ﺪﻫﺩ
) ۱۱ .(
ﻱﺎﻀﻋﺍ ﺶﻘﻧ ﺩﺭﻮﻣ ﺭﺩ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻦﻳﺍ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ ﻨﺟ ﺩﺎﺠﻳﺍ ﺭﺩ ﻞﻣﺎﻋ ﻚﻳ ﻥﺍﻮﻨﻌﺑ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺲ
ﻱﺭﺎﻤﻴﺑ ﻲﻣ ﺮﻈﻨﺑ ،ﻱﻭﺍﺮﻔﺻ ﻩﺎﮕﺘﺳﺩ ﻱﺎﻫ ﻱﺎﻫﺭﺎﻛ ﺪﺳﺭ
ﺗ ﻭ ﻲﻠﻴﻤﻜﺗ ﺄ
ﻳ ﻲﻣ ﺯﺎﻴﻧ ﻱﺮﺘﺸﻴﺑ ﻱﺪﻴ ﺪﺷﺎﺑ
. ﻦﻳﺍﺮﺑﺎﻨﺑ
ﺲﻨﺟ ﻡﻮﻧﮊ ﺩﻮﺟﻭ ﻲﺑﺎﻳﺯﺭﺍ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳﺍ ﺯﺍ ﻑﺪﻫ ﻧﻮﮔ ﻭ ﻲﻠﻛﺭﻮﻄﺑ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺔ
ﺭﻮﻄﺑ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ
ﮓﻨﺳ ﺭﺩ ﻲﺻﺎﺼﺘﺧﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺎﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻱﺎﻫ
ﺯﺍ
PCR ﺵﻭﺭ ﺖﺳﺍ .
ﺵﻭﺭ ﻭ ﺩﺍﻮﻣ
ﺭﺎﮐ
ﻒﻟﺍ
‐ ﻥﺍﺭﺎﻤﻴﺑ
ﺩﺍﺪﻌﺗ ۳۳ ﻭ ﺎﻧﺩ ﻥﺎﺘﺳﺭﺎﻤﻴﺑ ﺭﺩ ﻪﻛ ﺭﺎﻤﻴﺑ ﺯﺍﺮﻴﺷ ﻱﺯﺎﻤﻧ
ﺭﺍﺮﻗ ﻲﻣﻮﺘﻜﺘﺴﻴﺳ ﻪﻠﻛ ﻚﻴﭘﻮﻜﺳﻭﺭﺎﭘﻻ ﻞﻤﻋ ﺖﺤﺗ ﺩﺭﺍﻭ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳﺍ ﺭﺩ ،ﺪﻧﺩﻮﺑ ﻪﺘﻓﺮﮔ ﺪﻧﺪﺷ
. ﻞﻤﻋ ﻕﺎﺗﺍ ﺭﺩ
ﻪﺘﻓﺮﮔ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻭ ﮓﻨﺳ ﻞﻣﺎﺷ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻭﺩ ﺭﺎﻤﻴﺑ ﺮﻫ ﺯﺍ ﺪﺷ . ﻤﺴﻗ ﻚﻳ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺮﻫ ﺯﺍ ﻱﻭﺎﺣ ﻪﻟﻮﻟ ﻚﻳ ﺭﺩ ﺖ
ﻝﺎﻘﺘﻧﺍ ﻂﻴﺤﻣ Brain Heart Infusion broth)
( ﻲﻨﻏ
ﺎﺑ ﻩﺪﺷ ۲۰ ﺪﺻﺭﺩ ﺰﻛﻮﻠﮔ ) ۱۲ ( ﻪﺑ ﻪﻠﺻﺎﻓﻼﺑ ،ﻩﺩﺍﺩ ﺭﺍﺮﻗ
ﻭ ﻞﻘﺘﻨﻣ ﻩﺎﮕﺸﻳﺎﻣﺯﺁ
ﺪﻣ ﺭﺩ ﺯﺍ ﺮﺘﻤﻛ ﺕ ۲
ﺖﻬﺟ ﺖﻋﺎﺳ
ﺪﺷ ﻩﺩﺍﺩ ﺖﺸﻛ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻱﺯﺎﺳﺍﺪﺟ .
ﺮﮕﻳﺩ ﺶﺨﺑ ﻚﻳ
ﺭﺩ ﻭ ﻩﺩﺍﺩ ﺭﺍﺮﻗ ﻞﻳﺮﺘﺳﺍ ﻪﺸﻴﺷ ﻚﻳ ﺭﺩ ﺰﻴﻧ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺮﻫ ﺯﺍ ﺕﺭﺍﺮﺣ ۷۰
‐ ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟﺭﺩ ﻡﺎﺠﻧﺍ ﻥﺎﻣﺯ ﺎﺗ ﺩﺍﺮﮔ
PCR
ﺪﺷ ﻱﺭﺍﺪﻬﮕﻧ .
ﻪﺴﻴﻛ ﻲﺳﺭﺮﺑ ﻱﺍﺮﺑ ﺰﻴﻧ ﺍﺮﻔﺻ ﻱﺎﻫ
ﺮﺑ ﻭ ﺪﺷ ﻝﺎﺳﺭﺍ ﻱﮊﻮﻟﻮﺗﺎﭘ ﻩﺎﮕﺸﻳﺎﻣﺯﺁ ﻚﻳ ﻪﺑ ﻚﻳﮊﻮﻟﻮﺗﺎﭘ ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺱﺎﺳﺍ ﻚﻳﮊﻮﻟﻮﺗﺎﭘ ﻱﺎﻫ
، ﹼﻠﻛ ﺭﻮﻄﺑ ﻥﺍﺭﺎﻤﻴﺑ ﻭﺩ ﻪﺑ ﻲ
ﺪﻧﺪﺷ ﻢﻴﺴﻘﺗ ﻩﻭﺮﮔ :
ﺴﻴﮐ ﺏﺎﻬﺘﻟﺍ ﻪ
ﻔﺻ ﺮ ﺍ ﻱ ﻒﻴﻔﺧ ﻦﻣﺰﻣ
) ﺩﺍﺪﻌﺗ
= ۲۵ ( ﻭ ﺴﻴﮐ ﮓﻨﺳ ﻪ
ﻋ ﻥﻭﺪﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﺖﻣﻼ
) ﺩﺍﺪﻌﺗ
= ۸ .(
ﺏ
‐ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻝﺎﻣﺮﻧ ﻝﺮﺘﻨﻛ ﻱﺎﻫ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺯﺍ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻱﺎﻫ ۴۰
ﻩﺪﺷ ﻲﺴﭘﻮﺗﺍ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ
ﺗﺎﭘ ﺮﻈﻧ ﺯﺍ ﻪﻛ ـ
،ﺪﻧﺩﻮﺑ ﻩﺪﺷ ﻩﺩﺍﺩ ﺺﻴﺨﺸﺗ ﻝﺎﻣﺮﻧ ﻱﮊﻮﻟﻮ
ﺭﺩ ﻝﺎﻣﺮﻧ ﻝﺮﺘﻨﻛ ﻥﺍﻮﻨﻌﺑ ﺶﻳﺎﻣﺯﺁ ﺩﺭﻮﻣ ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳﺍ
PCR
ﺘﻓﺮﮔ ﺭﺍﺮﻗ ـ ﺪﻨ .
ﺝ
‐ ﺖﺸﻛ
ﮓﻨﺳ ﺪﺷ ﻩﺰﻴﻧﮊﻮﻤﻫ ﻲﻣﺍﺭﺁ ﻪﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻱﺎﻫ ﺪﻧ
ﺮﺑ ﻭ
ﺭ ﻩﺭﻭﺍ ﺖﺴﺗ ﻂﻴﺤﻣ ﻱﻭ ﻼﺳﻭﺮﺑ ﻭ ﻊﻳﺮﺳ ﺯﺁ
ﻱﻭﺎﺣ ﺭﺎﮔﺁ
۱۰ ﺪﺻﺭﺩ ﺰﻴﻟ ﺐﺳﺍ ﻥﻮﺧ ﺪﻧﺪﻳﺩﺮﮔ
ﻲﺘﻧﺁ ﻭ ﻚﻴﺗﻮﻴﺑ ﻱﺎﻫ
ﻦﻴﺴﻳﺮﺗﻮﻔﻣﺁ ﻱﺮﺗ ،B
ﺪﻴﺳﺍ ﻚﻴﺴﻠﻜﻳﺪﻴﻟﺎﻧ ﻭ ﻢﻳﺮﭘﻮﺘﻣ
ﺪﻧﺪﺷ ﻩﺩﺍﺩ ﺖﺸﻛ .
۵۰ ﺰﻴﻧ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺮﻫ ﺯﺍ ﺮﺘﻴﻟﻭﺮﻜﻴﻣ
ﻂﻴﺤﻣ ﻪﺑ ﺪﻧﺪﺷ ﻩﺩﺍﺩ ﻝﺎﻘﺘﻧﺍ ﻪﺑﺎﺸﻣ ﻱﺎﻫ
. ﻂﻴﺤﻣ ﻱﺎﻫ
ﻼﺳﻭﺮﺑ ﻜﻴﻣ ﻂﻳﺍﺮﺷ ﻚﻳ ﺭﺩ ﺭﺎﮔﺁ ﺭﺩ ﻚﻴﻠﻴﻓﻭﺮﺋﺁﻭﺮ
۳۷
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟﺭﺩ ﺕﺪﻣ ﻱﺍﺮﺑ ﺭﺎﺟ ﻚﻳ ﺭﺩ ﻭ ﺩﺍﺮﮔ
۱۰
‐ ۵
ﺮﺘﮐﺩ ﺩﺎﺷﺮﻓ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﮐ ﮓﻨﺳ ﺭﺩ ﯼﺭﻮﻠﻴﭘ ﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻡﻮﻧﮊ ﻥﺍﺭﺎﮑﻤﻫ ﻭ /
۱۰۵
ﺪﻧﺪﺷ ﻱﺭﺍﺪﻬﮕﻧ ﺯﻭﺭ )
۱۲ ( . ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻭ ﺍﺮﻔﺻ ﻱﺎﻫ
ﮓﻨﺳ ﺩﻮﺟﻭ ﺮﻈﻧ ﺯﺍ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ ﻩﺪﺷ ﻩﺰﻴﻧﮊﻮﻤﻫ ﻱﺎﻫ
ﻱﺰﻴﻣﺁ ﮓﻧﺭ ﺵﻭﺭ ﺎﺑ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻠﻴﻜﻫ ﻡﺮﮔ
ﻢﻴﻘﺘﺴﻣ ﺭﻮﻄﺑ
ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ ﺭﺍﺮﻗ ﻲﺳﺭﺮﺑ ﺩﺭﻮﻣ .
ﺩ
‐ ﺝﺍﺮﺨﺘﺳﺍ DNA
۱
‐ ﮓﻨﺳ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻱﺎﻫ :
ﺳ ﮓﻨ ﻛ ﻱﺎﻫ ﺯﺍ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴ
ﺩﺭﻭﺁ ﺭﺩ ﺭﺰﻳﺮﻓ ﻩ
ﺪﺷ ﭖﻮﻴﺗ ﻚﻳ ﺭﺩ ﻭ ۵
/ ١ ﻲﻠﻴﻣ ﻱﺮﺘﻴﻟ
ﻥﺁ ﻪﺑ ﻑﺭﻭﺪﻨﭘﺍ ٢٠٠
ﺮﻓﺎﺑ ﺮﺘﻴﻟﻭﺮﻜﻴﻣ ﻩﺪﻨﻨﮐ ﻢﻀﻫ
ﻞﻳﺮﺘﺳﺍ Tris-HCl 20mM [PH , 8], EDTA-)
N2 2mM, Triton-X100 1.2%
ﻭ ﺪﺷ ﻪﻓﺎﺿﺍ (
ﻪﻟﻮﻟ ﺕﺎﻳﻮﺘﺤﻣ ﻞﻳﺮﺘﺳﺍ ﺭﻮﻄﺑ ﻤﻫ ﺎﻫ
ﻮ ﺪﻧﺪﺷ ﻩﺰﻴﻧﮊ .
ﺮﻫ ﻪﺑ
ﻪﻟﻮﻟ ٧ ﻢﻳﺯﻭﺰﻴﻟ ﺮﺘﻴﻟﻭﺮﻜﻴﻣ )
۵۰ ﻠﻴﻣ ﻲ ﻲﻠﻴﻣ ﺮﺑ ﻡﺮﮔ ﺮﺘﻴﻟ
(
ﺪﻤﺑ ﻭ ﻪﻓﺎﺿﺍ ﺕ
٣٠ ﺭﺩ ﻪﻘﻴﻗﺩ ﯼﺎﻣﺩ
۳۷ ﻪﺟﺭﺩ
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﺩﺍﺮﮔ ﺪﺷ ﻱﺭﺍﺪﻬﮕﻧ .
ﺕﺪﻣ ﻦﻳﺍ ﺯﺍ ﺲﭘ
، ١٠
ﺯﺎﻨﻴﺌﺗﻭﺮﭘ ﺮﺘﻴﻟﻭﺮﻜﻴﻣ ) K
۲۰ ﻲﻠﻴﻣ ﻲﻠﻴﻣ ﺮﺑ ﻡﺮﮔ ﺮﺘﻴﻟ
( ﻪﺑ
ﺭﺩ ﻭ ﻪﻓﺎﺿﺍ ﻪﻟﻮﻟ ﺮﻫ ۵۶
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟﺭﺩ ﺩﺍﺮﮔ
ﺕﺪﻣ ﻪﺑ ٢
ﺪﻧﺪﺷ ﻪﺑﻮﻜﻨﻳﺍ ﺖﻋﺎﺳ .
ﺕﺎﻧﮊﻮﻤﻫ ﻦﻳﺍ ﺲﭙﺳ ﺭﺩ ﺎﻫ
٣٧
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟﺭﺩ ﺮﮔ
ﺩﺍ ﺪﻧﺪﺷ ﻱﺭﺍﺪﻬﮕﻧ ﺪﻌﺑ ﺯﻭﺭ ﺎﺗ .
ﺭﺩ
ﺖﻳﺎﻬﻧ
، ﺕﺍﺰﻴﻟ ﻪﺑ ﻲﻳﻭﺭ ﻊﻳﺎﻣ ﻭ ﮊﻮﻔﻳﺮﺘﻧﺎﺳ ﺎﻫ
ﺏﻮﻴﺗﻭﺮﻜﻴﻣ ﺪﻧﺪﺷ ﻞﻘﺘﻨﻣ ﺪﻳﺪﺟ ﻱﺎﻫ
) ١٠ ( .
۲ ـ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻪﻧﻮﻤﻧ :
ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺮﻫ ﺯﺍ ١٠٠
ﺮﺘﻴﻟﻭﺮﻜﻴﻣ
، ۳
‐ ٢ ﺎﺑ ﺭﺎﺑ ﻩﺩﺍﺩ ﻮﺸﺘﺴﺷ PBS
ﺪﺷ
، ﻲﻧﺎﻣﺯ ﺎﺗ
PH ﻪﻛ ﺎﺗ ﻥﺁ ﺪﺣ ۶ / ۷
‐ ۴ / ٧ ﻢﻴﻈﻨﺗ ﺪﺷ . ﺭﺩ ﻥﺁ ﺏﻮﺳﺭ
٢٠٠
‐ ١٧٠ ﺮﻓﺎﺑ ﺮﺘﻴﻟﻭﺮﻜﻴﻣ ﻩﺪﻨﻨﻛ ﺰﻴﻟ
) ١
% ،SDS
۱۰۰mM
،NaCl
۱۰۰mM
،EDTA
] ۸ ، [PH
۵۰mM
Tris-HCl
( ﻪﻓﺎﺿﺍ ﻪﺑ ۰
/ ۵ ﻲﻠﻴﻣ ﻲﻠﻴﻣ ﺮﺑ ﻡﺮﮔ ﺮﺘﻴﻟ
ﺯﺎﻨﻴﺌﺗﻭﺮﭘ ﺭﺩ ﻭ ﺪﺷ ﻞﺣ K
۵۶ ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟﺭﺩ ﺩﺍﺮﮔ
ﻪﺑ
ﺕﺪﻣ ۲ ﺪﺷ ﻪﺑﻮﻜﻨﻳﺍ ﺖﻋﺎﺳ .
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺲﭙﺳ ﺪﻌﺑ ﺯﻭﺭ ﺎﺗ ﺎﻫ
ﺭﺩ ۳۷ ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟﺭﺩ ﺩﺍﺮﮔ
ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ ﺭﺍﺮﻗ )
۱۰ ( . ﺯﺍ ﺲﭘ
ﻧﺎﺳ ﻮﻔﻳﺮﺘ ﮊ ﺏﻮﻴﺗﻭﺮﻜﻴﻣ ﻪﺑ ﻲﻳﻭﺭ ﻊﻳﺎﻣ ﻞﻘﺘﻨﻣ ﺪﻳﺪﺟ ﻱﺎﻫ
ﺪﺷ . ﻡﺮﻓﻭﺮﻠﻛ ﻞﻨﻓ ﺵﻭﺭ ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺎﺑ DNA ،
ﻊﻳﺎﻣ ﺯﺍ ﻱﺎﻫ
ﻭ ﺪﺷ ﺝﺍﺮﺨﺘﺳﺍ ﻞﺒﻗ ﻞﺣﺍﺮﻣ ﺭﺩ ﻩﺪﻣﺁ ﺖﺳﺪﺑ ﻲﻳﻭﺭ ۱۰
ﺯﺍ ﺮﺘﻴﻟﻭﺮﻜﻴﻣ ﺭﺩ ﻮﮕﻟﺍ ﻥﺍﻮﻨﻌﺑ ﻩﺪﺷ ﺺﻴﻠﺨﺗ DNA
ﺖﻓﺭ ﺭﺎﻜﺑ PCR .
ـﻫ DNAـ ﺖﺒﺜﻣ ﻝﺮﺘﻨﻛ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺯﺍ ﺷ ﺍﺪﺟ ﺺﻟﺎﺧ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻱﺎﻫ ﺯﺍ ﻩﺪ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻮﻴﺑ ﻱﺎﻫ ﭘ ﺭﺩ ﻱﮊﻮﻟﻮﻓﺭﻮﻣ ﺱﺎﺳﺍ ﺮﺑ ﻪﻛ ﻩﺪﻌﻣ ﻲﺴ
ﺖﺴﺗ ،ﻢﻴﻘﺘﺴﻣ ﻡﻻ ﺭﻭﺍ ﻭ ﺯﻻﺎﺗﺎﻛ ،ﺯﺍﺪﻴﺴﻛﺍ ﺖﺒﺜﻣ ﻱﺎﻫ
ﺯﺁ
ﺗ ﻊﻳﺮﺳ ﻳﺄ ﺪﻧﺩﻮﺑ ﻩﺪﺷ ﺪﻴ
، ﺭﺩ ﺖﺒﺜﻣ ﻝﺮﺘﻨﻛ ﻥﺍﻮﻨﻌﺑ PCR
ﺪﺷ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ .
ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ ﻦﻳﺍ ﻡﻮﻧﮊ ﻞﻨﻓ ﺵﻭﺭ ﺎﺑ ﺰﻴﻧ ﺎﻫ
ﺪﻳﺩﺮﮔ ﺝﺍﺮﺨﺘﺳﺍ ﻡﺮﻓﻭﺮﻠﻛ .
ﻭ ﻩﺮﻴﺠﻧﺯ ﺶﻨﻛﺍﻭ ـ ﺯﺍﺮﻤﻴﻠﭘ ﻱﺍ
ﺭﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ ﺭﻮﻄﺑ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺲﻨﺟ ﻥﺎﻣﺰﻤﻫ ﺺﻴﺨﺸﺗ
ﺰﻴﻧ ﻭ ﻲﺻﺎﺼﺘﺧﺍ ﺭﻮﻄﺑ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻪﻧﻮﮔ ﻭ ﻲﻠﻛ ﺶﻨﻛﺍﻭ ﺕﺎﻌﻓﺩ ﺩﺍﺪﻌﺗ ﺶﻫﺎﻛ ﻚﻳ ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳﺍ ﺭﺩ ،PCR
Multiplex-PCR ﺵﻭﺭ ﺮﭘ ﻱﺮﺳ ﻭﺩ ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺎﺑ
ﺍ ﺮﻤﻳ
ﺪﺷ ﻲﺣﺍﺮﻃ .
ﺮﭘ ﻱﺮﺳ ﻚﻳ ﺍ
ﻲﻧﮊ ﻑﺩﺍﺮﺗ ﺱﺎﺳﺍ ﺮﺑ ﺮﻤﻳ
S rRNA۱۶ ﻑﺩﺍﺮﺗ ﺎﺑ ﻭ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺲﻨﺟ
5′-GTA AAG GCT CAC CAA GGC TAT-3′
5′-CCA CCT ACC TCT CCC ACA CTC-3′ ﻭ ﻪﻌﻄﻗ ﻚﻳ ﺮﻴﺜﻜﺗ ﻱﺍﺮﺑ ۳۸۹
bp‐ ﺑ ﻪ ﺖﻓﺭ ﺭﺎﻛ )
۱۳ .(
ﺮﭘ ﻡﻭﺩ ﻱﺮﺳ ﺍ
ﻥﮊ ﻑﺩﺍﺮﺗ ﺱﺎﺳﺍ ﺮﺑ ﻪﻛ ﺎﻫﺮﻤﻳ
ﻪﻧﻮﮔ ﺯﺎﻧﮊﻭﺭﺪﻴﻫﺩ ﺕﺍﺮﺘﻴﺳﻭﺰﻳﺍ H. pylori
ﻑﺩﺍﺮﺗ ﺎﺑ ﻭ
5′-TCA CAT GTT TTC AAT CAT CAC GC-3′
5′-ATG GCT TAC AAC CCT AAA ATT ﻭ TTA CAA AAG CC-3′
ﻚﻳ ﺮﻴﺜﻜﺗ ﻱﺍﺮﺑ ،ﺪﻧﺩﻮﺑ
ﻪﻌﻄﻗ ۱۲۰۰ bp‐ ﺪﻨﺘﻓﺭ ﺭﺎﻜﺑ )
۱۴ PCR .(
ﻢﺠﺣ ﻚﻳ ﺭﺩ
۵۰ ﻱﻭﺎﺣ ﻱﺮﺘﻴﻟﻭﺮﻜﻴﻣ pmol۵۰
ﺮﭘ ﺮﻫ ﺯﺍ ﺍ
،ﺮﻤﻳ µl۱۰
DNA ﺯﺍ ،ﻪﻧﻮﻤﻧ ۲ ﻢﻳﺰﻧﺁ ﺪﺣﺍﻭ TagDNA
،ﺯﺍﺮﻤﻴﻠﭘ
۰ / mM ۲ ﻱﺩ ﻭ ﺕﺎﻔﺴﻓ ﻱﺮﺗ ﺪﻳﺯﻮﺌﻠﻛﻮﻧ ﻲﺴﻛﺍ mM۲
MgCl2 ﺯﺍ ﺖﻓﺮﮔ ﻡﺎﺠﻧﺍ
. ﺶﻨﻛﺍﻭ ﻞﻣﺎﺷ PCR
ﻪﺳ
ﺩﻮﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ .
ﻠﺣﺮﻣ ﺔ
ﻭﺍ ﻝ ۵ ﺭﺩ ﻪﻘﻴﻗﺩ ۹۴
ﻪﺟﺭﺩ
ﻲﺘﻧﺎﺳ
،ﺩﺍﺮﮔ ﻠﺣﺮﻣ ﺔ
ﻭﺩ ﻱﺍﺮﺑ ﻪﻛ ﻡ ۳۰
ﺪﺷ ﻡﺎﺠﻧﺍ ﻞﻜﻴﺳ
،
ﻞﻣﺎﺷ ۱ ﺭﺩ ﻪﻘﻴﻗﺩ ۹۴
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟﺭﺩ ، ﺩﺍﺮﮔ
٢ ﺭﺩ ﻪﻘﻴﻗﺩ
۵۵ ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟﺭﺩ ﺩﺍﺮﮔ
ﻭ ۲ ﺭﺩ ﻪﻘﻴﻗﺩ ۷۲
ﻪﺟﺭﺩ
ﻲﺘﻧﺎﺳ ﺩﺍﺮﮔ ﺩﻮﺑ . ﻠﺣﺮﻣ ﺭﺩ ﺔ ﺮﺧﺁ ﺕﺪﻣ ﻪﺑ ﺰﻴﻧ ۱۰
ﻪﻘﻴﻗﺩ
۱۰۶ / ﺏﻮﻨﺟ ﺐﻃ
ﻝﺎﺳ ﻢﺘﺸﻫ ﻩﺭﺎﻤﺷ ۲ / ﺪﻨﻔﺳﺍ ۱۳۸۴
bp-٣٨٩ bp-١٢٠٠ ١ ٢ ٣ ٤ ٥ ٦ ٧ ٨ ٩ ١٠١١
ﺭﺩ ۷۲ ﻲﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟﺭﺩ ﺩﺍﺮﮔ
ﺭﺍﺮﻗ ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ . ﻝﻮﺼﺤﻣ ﺲﭙﺳ
ﺮﺑ PCR ﺯﻭﺭﺎﮔﺁ ﻝﮊ ﻱﻭﺭ ۵
/ ۱ ﻭ ﺪﺷ ﺰﻴﻟﺎﻧﺁ ﻱﺪﺻﺭﺩ
ﺯﺍﺪﻧﺍ ﺓ ﻱﺎﻫﺮﻛﺭﺎﻣ ﺎﺑ ﻪﺴﻳﺎﻘﻣ ﺭﺩ ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺮﻴﺜﻜﺗ ﺕﺎﻌﻄﻗ
۱۰۰ pb‐ ﺪﻳﺩﺮﮔ ﻦﻴﻴﻌﺗ .
ﻪﻠﺣﺮﻣ ﺮﻫ ﺭﺩ ﺶﻨﻛﺍﻭ ،PCR
ﺎﺑ ﺖﺒﺜﻣ ﻭ ﺮﻄﻘﻣ ﺏﺁ ﺎﺑ ﻲﻔﻨﻣ ﻝﺮﺘﻨﻛ ﺝﺍﺮﺨﺘﺳﺍ DNA
ﻲﻣ ﻡﺎﺠﻧﺍ ﺰﻴﻧ ﺖﺒﺜﻣ ﻝﺮﺘﻨﻛ ﺯﺍ ﻩﺪﺷ ﺖﻓﺮﮔ
.
ﺖﻴﺳﺎﺴﺣ ﻦﻴﻴﻌﺗ ـﺯ
ﺖﻗﺭ ﺎﻫ ﻩﺩ ﻲﻟﺍﻮﺘﻣ ﻱ ﺯﺍ ﻲﺼﺨﺸﻣ ﺖﻈﻠﻏ ﻚﻳ ﺯﺍ ﻲﻳﺎﺗ
ﺺﻟﺎﺧ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﺯﺍ ﻩﺪﺷ ﺝﺍﺮﺨﺘﺳﺍ DNA )
ﻪﻴﻬﺗ
ﺖﻈﻠﻏ ﺯﺍ ﻩﺪﺷ ۱۰
‐ ۱ ﺎﺗ ۱۰
‐ ۶ ( Multiplex-PCR ﻭ ﺮﺑ
ﺖﻓﺮﮔ ﻡﺎﺠﻧﺍ ﺎﻬﻧﺁ ﻱﻭﺭ .
ﻲﻟﻮﻜﻟﻮﻣ ﻥﺯﻭ ﺱﺎﺳﺍ ﺮﺑ ﺲﭙﺳ
ﺖﺴﺗ ﻦﻳﺍ ﺖﻴﺳﺎﺴﺣ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻲﻣﻮﻧﮊ DNA ﺖﻗﺭ ﻦﻳﺮﺗﻻﺎﺑ ﻱﺎﻨﺒﻣ ﺮﺑ ﺕﺎﻌﻄﻗ ﻥﺁ ﺭﺩ ﻪﻛ DNA
ﺩﺭﻮﻣ
ﺪﻳﺩﺮﮔ ﻦﻴﻴﻌﺗ ﺪﻧﺩﻮﺑ ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺮﻴﺜﻜﺗ ﺮﻈﻧ )
۱۵ .(
ﺡ ﻲﮔﮋﻳﻭ ﻦﻴﻴﻌﺗ ـ
ﻲﮔﮋﻳﻭ Multiplex-PCR ﺎﺑ ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳﺍ ﺭﺩ ﻪﺘﻓﺭ ﺭﺎﻜﺑ
ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺯﺍ ﻩﺪﺷ ﺝﺍﺮﺨﺘﺳﺍ DNA
۹ ﺮﻴﻏ ﻝﺮﺘﻨﻛ ﻱﺮﺘﻛﺎﺑ
ﻣﺎﺷ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻞ
: ﻲﻔﻴﺗ ﻼﻧﻮﻤﻟﺎﺳ Salmonella typhi)
( ،
ﻲﻠﮐ ﺎﻴﺸﻳﺮﺷﺍ E. coli)
( ﺘﭘﺮﺘﺳﺍ ، ــ ﺲﻧﺪﻳﺮﻳﻭ ﺱﻮﮐﻮﮐﻮ
Streptococeus viridance) (
ﻮﺌﺗﻭﺮﭘ ، ﺲﻴﻠﻴﺑﺍﺮﻴﻣ ﺱ
Proteus mirabilis) (
ﻤﻫ ، ــــ ﻴﻓﻮ ــ ﻔﻧﺍ ﺱﻮﻠ ــ ﺍﺰﻧﺍﻮﻠ
Heamophilus influenza) (
ﭙﻤﮐ ، ــ
ﺑﻮﻠﻴ ــ ﺘﮐﺎ ــ ﺮ
Campylobacter sp) (
ﻴﺷ ، ــ ﻼﮕ Shigella sp) (
،
ﺒﻠﮐ ـ ﺴ ــ ﻼﻴ Klebsiella sp) (
ﻧﺍ ﻭ ــ ﺑﻭﺮﺘ ــ ﺘﮐﺎ ــ ﺮ
Enterobacter sp) (
ﺪﻳﺩﺮﮔ ﻦﻴﻴﻌﺗ .
ﻁ ﺍﺮﻔﺻ ﻲﮔﺪﻨﻨﻛ ﺭﺎﻬﻣ ﺖﺴﺗ ـ
ﺶﻨﻛﺍﻭ ﺮﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﺕﺎﺒﻴﻛﺮﺗ ﻲﮔﺪﻨﻨﻛ ﺭﺎﻬﻣ ﺮﺛﺍ ﻦﻴﻴﻌﺗ ﻱﺍﺮﺑ ﺯﺍ ،PCR ﺎﺑ ﻝﺩﺎﻌﻣ ﻲﺘﻈﻠﻏ ﺺﻟﺎﺧ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ
ﻪﻟﻮﻟ ۵ / ۰ ﺖﻗﺭ ﻭ ﻪﻴﻬﺗ ﺪﻨﻟﺭﺎﻓ ﻚﻣ ﻲﻟﺎﻳﺮﺳ ﻲﻳﺎﺗ ﻩﺩ ﻱﺎﻫ
ﺪﺷ ﻢﻫﺍﺮﻓ ﻥﺁ ﺯﺍ .
ﺖﻗﺭ ﻦﻳﺍ ﺲﭙﺳ ﻪﺑ ﺎﻫ
۵ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﻧﻮﻤﻧ
PCR ﻪﻛ ﺩﻮﺑ ﻲﻔﻨﻣ ﺎﻬﻧﺁ ﺪﻳﺩﺮﮔ ﻪﻓﺎﺿﺍ
DNA . ﻛﺎﺑ ﻱﺮﺘ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻦﻳﺍ ﺯﺍ ﺭﺩ ﺰﻴﻧ ﺍﺮﻔﺻ ﻱﺎﻫ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺮﻳﺎﺳ ﺭﺎﻨﻛ ﺎﻫ
ﺮﺑ ﻭ ﺪﺷ ﺝﺍﺮﺨﺘﺳﺍ ﺎﻬﻧﺁ ﻱﻭﺭ
ﻡﺎﺠﻧﺍ PCR ﺖﻓﺮﮔ . ﻪﺘﻓﺎﻳ
ﺎﻫ ﻩﺭﻭﺍ ،ﺖﺸﻛ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻱﺍﺮﺑ ﻢﻴﻘﺘﺴﻣ ﻡﻻ ﻭ ﻊﻳﺮﺳ ﺯﺁ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺩﻮﺟﻭ ﺮﻈﻧ ﺯﺍ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻭ ﮓﻨﺳ ﻱﺎﻫ
ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘ
ﺩﻮﺑ ﻲﻔﻨﻣ .
ﺭﺩ ﺶﻳﺎﻣﺯﺁ ﺎﺑ ﻪﻜﻴﻟﺎﺣ
Multiplex-PCR ﺩﺭﻮﻣ ﻪﻌﻄﻗ ﻭﺩ
ﻥﺯﻭ ﺎﺑ ﺮﻈﻧ ﻱﺎﻫ
ﻲﻟﻮﻜﻟﻮﻣ bp ۳۸۹
ﻭ bp ۱۲۰۰ ﺭﺩ ۱ / ۱۸ ﺪﺻﺭﺩ ﺯﺍ
ﮓﻨﺳ ﺎﻫ ﻭ ۱ / ۱۲ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺯﺍ ﺪﺻﺭﺩ ﺮﻴﺜﻜﺗ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻱﺎﻫ
ﺩﻮﺟﻭ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ ﻪﻛ ﺖﻓﺎﻳ ﺭﺩ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ DNA
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺩﺍﺪﻌﺗ ﻦﻳﺍ ﺩﻮﺑ ﺎﻫ
) ﻞﻜﺷ ۱ .(
ﻪﺠﻴﺘﻧ ﻱﺍﺮﺑ PCR
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺯﺍ ﻡﺍﺪﻜﭽﻴﻫ ﺮﺘﻨﻛ ﻩﻭﺮﮔ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻱﺎﻫ
،ﻝ ﺩﻮﺒﻧ ﺖﺒﺜﻣ .
ﻞﻜﺷ ١ : ﺮﻴﺜﻜﺗ ﻪﻴﺣﺎﻧ S rRNA۱۶ )
٣٨٩ bp‐ ( ﻥﮊ ﻭ
ﺯﺎﻧﮊﻭﺭﺪﻴﻫﺩ ﺕﺍﺮﺘﻴﺳﻭﺰﻳﺍ )
١٢٠٠ bp‐ ( ﻱﺭﻮﻠﻴﭘ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ :
ﺍﺮﻔﺻ ﺖﺒﺜﻣ ﻪﻧﻮﻤﻧ )
١ ( ﻪﻧﻮﻤﻧ ، ﺍﺮﻔﺻ ﻲﻔﻨﻣ )
٢ ( ، ﺖﺒﺜﻣ ﻪﻧﻮﻤﻧ
ﮓﻨﺳ ) ٨
، ۵
، ٣ ( ﮓﻨﺳ ﻲﻔﻨﻣ ﻪﻧﻮﻤﻧ ، )
۷،۶،۴ ( ﻲﻔﻨﻣ ﻝﺮﺘﻨﻛ ، )
۹ (
،
ﺖﺒﺜﻣ ﻝﺮﺘﻨﻛ )
١٠ ( ﻲﻟﻮﻜﻟﻮﻣ ﻥﺯﻭ ﺮﻛﺭﺎﻣ ، )
١١ .(
Multiplex-PCR ﻦﻳﺍ ﺪﺻ
ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻱﺍﺮﺑ ﺪﺻ ﺭﺩ
ﻪﻧﻮﮔ ﺮﻳﺎﺳ ﻱﺍﺮﺑ ﻲﺑﺫﺎﻛ ﺖﺒﺜﻣ ﻪﻧﻮﮕﭽﻴﻫ ﻭ ﺩﻮﺑ ﻲﺻﺎﺼﺘﺧﺍ ﻱﺎﻫ
ﺪﺸﻧ ﻩﺪﻫﺎﺸﻣ ﺶﻳﺎﻣﺯﺁ ﺩﺭﻮﻣ ﻲﻳﺎﻳﺮﺘﻛﺎﺑ .
ﺰﻴﻧ ﺖﺴﺗ ﻦﻳﺍ ﺖﻴﺳﺎﺴﺣ
ﻞﻗﺍﺪﺣ ۰۳ / ۰ ﻡﺮﮔﻮﻜﻴﭘ ﻝﺩﺎﻌﻣ ﻲﻨﻌﻳ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ DNA
ﺎﺑ ۱۵۰ ﺪﻳﺩﺮﮔ ﻦﻴﻴﻌﺗ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ .
ﻌﻄﻗ ﻭﺩ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ ﺔ
ﺭﺩ ﺮﻈﻧ ﺩﺭﻮﻣ
ﻲﻣﺎﻤﺗ ۵ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻭ
ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﺎﻬﻧﺁ ﻪﺑ ﻪﻛ ﻱ
ﺖﻓﺎﻳ ﺮﻴﺜﻜﺗ ﺩﻮﺑ ﻩﺪﺷ ﻪﻓﺎﺿﺍ ﺺﻟﺎﺧ
، ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺭﺩ ﻪﻜﻴﻟﺎﺣ ﺭﺩ ﻱﺎﻫ
ﺩﻮﺑ ﻩﺪﺸﻧ ﻪﻓﺎﺿﺍ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﺎﻬﻧﺁ ﻪﺑ ﻪﻛ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ PCR
ﺮﺘﮐﺩ ﺩﺎﺷﺮﻓ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﮐ ﮓﻨﺳ ﺭﺩ ﯼﺭﻮﻠﻴﭘ ﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻡﻮﻧﮊ ﻥﺍﺭﺎﮑﻤﻫ ﻭ /
۱۰۷
ﺩﻮﺑ ﻲﻔﻨﻣ . ﺍﺮﻔﺻ ﻲﮔﺪﻨﻨﻛ ﺭﺎﻬﻣ ﺮﺛﺍ ﻡﺪﻋ ﺯﺍ ﻲﻛﺎﺣ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ
ﺮﺑ ﺶﻨﻛﺍﻭ ﻱﻭﺭ ﺪﻧﺩﻮﺑ PCR
.
ﺚﺤﺑ
ﻭﺍ ﺯﺍ ﻦﻴﻟ ﺭﺎﺑ ﺺﻴﺨﺸﺗ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ
ﺭﺩ ﺍﺮﻔﺻ
ﻂﺳﻮﺗ ﻦﻴﻟ Lin) ( ﻝﺎﺳ ﺭﺩ ﻥﺍﺭﺎﻜﻤﻫ ﻭ ۱۹۹۵
،
ﻦﻳﺍ ﺺﻴﺨﺸﺗ ﺮﺑ ﻲﻨﺒﻣ ﻲﻀﻴﻘﻧ ﻭ ﺪﺿ ﺕﺎﺷﺭﺍﺰﮔ ﻱﺭﺎﻤﻴﺑ ﺭﺩ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ ﺩﻮﺟﻭ ﻥﺎﺴﻧﺍ ﻱﺪﺒﻛ ﻱﻭﺍﺮﻔﺻ ﻱﺎﻫ
ﺩﺭﺍﺩ ) ۷ ﻭ ۱۶ .(
ﻡﻮﻧﮊ ﻩﺪﻫﺎﺸﻣ ﺎﺑ ﺵﺭﺍﺰﮔ ﻚﻳ ﺭﺩ
ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﺵﻭﺭ ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺎﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﺭﺩ
PCR
ﺡﺮﻄﻣ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ ﻞﻴﻜﺸﺗ ﺮﻄﺧ ﺶﻳﺍﺰﻓﺍ ﻝﺎﻤﺘﺣﺍ ﺖﺳﺍ ﻩﺪﺷ )
۸ .(
ﻟﺎﺣ ﺭﺩ ﻦﻳﺍ ﺍ ﻲ
ﻪﻛ ﺖﺳ ﻦﭼ Chen) ( ﻭ
ﻪﺴﻴﻛ ﺭﺩ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻡﻮﻧﮊ ﺩﻮﺟﻭ ﻩﺪﻫﺎﺸﻣ ﺎﺑ ﻥﺍﺭﺎﻜﻤﻫ ﺭﺩ ﺰﻴﻧ ﻭ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ ﻥﺍﺭﺎﻤﻴﺑ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻩﻭﺮﮔ ﺪﻫﺎﺷ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﻪﻛ ﺪﻧﺩﺮﻛ ﻝﻻﺪﺘﺳﺍ ،
ﺑﺎﻗ ﺶﻘﻧ ﻲﻳﺎﻬﻨﺗ ﻪﺑ ﺖﺳﺍ ﻦﻜﻤﻣ ﻞﻴﻜﺸﺗ ﺭﺩ ﻲﻬﺟﻮﺗ ﻞ
ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷﺍﺪﻧ ﮓﻨﺳ )
۱۷ .(
ﺪﻨﭼﺮﻫ
، ﻦﺘﺴﻧﻮﻣ
Monstein) (
ﻭ ﻥﺍﺭﺎﮑﻤﻫ ﺩﻮﺟﻭ
DNA
ﺭﺩ ﺍﺭ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ۵۵
ﺪﺻﺭﺩ ﮓﻨﺳ ﺯﺍ ﻱﺎﻫ
ﻩﺩﻮﻤﻧ ﺵﺭﺍﺰﮔ ﻲﻟﻭﺮﺘﺴﻠﻛ ﺍ
ﺪﻧ . ﻌﻟﺎﻄﻣ ﺭﺩ ﺔ ﻪﺑﺎﺸﻣ ،ﺮﺿﺎﺣ
ﺭﺩ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺺﻴﺨﺸﺗ ﻪﻨﻴﻣﺯ ﺭﺩ ﺕﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺮﻳﺎﺳ ﺎﺑ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺵﻭﺭ ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺎﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻱﺎﻫ ﺖﺸﻛ
) ۵ ( ،
ﻊﻳﺎﻣ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺯﺍ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ ﻦﻳﺍ ﻱﺯﺎﺳ ﺍﺪﺟ ﻪﺑ ﻖﻓﻮﻣ ﺰﻴﻧ ﺎﻣ ﻢﻳﺪﺸﻧ ﺍﺮﻔﺻ ﮓﻨﺳ ﻭ .
ﻲﻣ ﻥﺁ ﻞﻳﻻﺩ ﺯﺍ ﻲﻜﻳ ﻦﻳﺍ ﺪﻧﺍﻮﺗ
ﺵﻮﺳ ﻪﻛ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﻠﺌﺴﻣ ﺮﻳﺎﺳ ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺎﺑ ﻪﻛ ﻲﻳﺎﻫ
ﺵﻭﺭ ﻲﻳﺎﺳﺎﻨﺷ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﺭﺩ ﺖﺸﻛ ﺵﻭﺭ ﺯﺍ ﺮﻴﻏ ﺎﻫ
ﻩﺪﺷ ﺵﻮﺳ ،ﺪﻧﺍ ﻲﻣ ﺖﺸﻛ ﻞﺑﺎﻗ ﺮﻴﻏ ﻱﺎﻫ
ﺪﻨﺷﺎﺑ . ﻦﻳﺍ ﺎﺑ
ﺩﻮﺟﻭ ﺗ ﺪﻨﻳﺁﺮﻓ ، ﺪﻨﻳﺁﺮﻓ ﻚﻳ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﺭﺩ ﮓﻨﺳ ﻞﻴﻜﺸ
ﺪﻣ ﻲﻧﻻﻮﻃ ﺕ
ﺖﺳﺍ ﻭ ﻱﺮﺘﻛﺎﺑ ﺮﻴﮔ ﮓﻨﺳ ﻥﻭﺭﺩ ﻪﻛ ﻲﻳﺎﻫ
ﻲﻣ ﻭ ﻪﺘﺸﻛ ﺖﺳﺍ ﻦﻜﻤﻣ ﺪﻨﺘﻓﺍ ﺪﻧﻮﺷ ﺐﻳﺮﺨﺗ ﺎﻳ
.
ﻦﻳﺍﺮﺑﺎﻨﺑ ﻚﻴﻨﻜﺗ ﻪﻜﻨﻳﺍ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ ، ﻭ ﻲﮔﮋﻳﻭ ﺯﺍ PCR
ﺵﻭﺭ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﻲﻳﻻﺎﺑ ﺖﻴﺳﺎﺴﺣ ﺖﺸﻛ ﻦﻴﺗﻭﺭ ﻱﺎﻫ
ﺖﺳﺍ ﺭﺍﺩﺭﻮﺧﺮﺑ ،
ﻖﻴﻘﺤﺗ ﺭﺩ ﺮﺿﺎﺣ
ﻡﻮﻧﮊ ﺺﻴﺨﺸﺗ ﻱﺍﺮﺑ
ﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺭﺩ ﺮﺘﻛﺎ ﺵﻭﺭ ﻚﻳ ﺎﻫ
Multiplex-PCR ﻲﺣﺍﺮﻃ ﺮﻤﻳﺮﭘ ﺖﻔﺟ ﻭﺩ ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺎﺑ
ﺪﺷ . ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺎﺑ
ﺭﺩ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘ ﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻡﻮﻧﮊ ﺵﻭﺭ ﻦﻳﺍ ۱
/ ۱۸ ﺯﺍ ﺪﺻﺭﺩ
ﮓﻨﺳ ﻭ ﺎﻫ ۱ / ۱۲ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺯﺍ ﺪﺻﺭﺩ ﻱﻭﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻱﺎﻫ
ﻲﻳﺎﺳﺎﻨﺷ ﺪﺷ
. ﺒﺜﻣ ﺩﺭﺍﻮﻣ ﻲﻣﺎﻤﺗ ـ
ﻴﻧ ﺖ ـ ﺑﺮﻣ ﺰ ـ ﺑ ﻁﻮ ـ ﻪ
ﻴﺑ ـ ﺘﺒﻣ ﻥﺍﺭﺎﻤ ـ
ﺑ ﻼ ـ ﻪ
Mildchroniccholecystitis
ﺩﻮﺑ . ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺯﺍ ﻡﺍﺪﻜﭽﻴﻫ ﻝﺮﺘﻨﻛ ﻩﻭﺮﮔ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻱﺎﻫ
PCR ﺭﺩ ﺪﻧﺩﻮﺒﻧ ﺖﺒﺜﻣ .
ﻲﻣ ﺮﻈﻨﺑ ﻞﺻﺎﺣ ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻪﻛ ﺪﺳﺭ
ﻪﻛ ﺪﻧﺭﺍﺪﻧ ﻲﻧﺍﻮﺨﻤﻫ ﻢﻫ ﺎﺑ ﻥﺎﻬﺟ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻁﺎﻘﻧ ﺯﺍ ﻲﻣ ﻥﺁ ﺯﺍ ﻲﺸﺨﺑ ﻪﻧﻮﮔ ﺭﺎﺸﺘﻧﺍ ﺭﺩ ﺕﻭﺎﻔﺗ ﺖﻠﻌﺑ ﺪﻧﺍﻮﺗ
ﻱﺎﻫ
ﺪﺷﺎﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺑ ﻡﻭﺎﻘﻣ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ .
ﻦﻳﺍ ﺮﮕﻳﺩ ﺖﻠﻋ
ﮕﻨﻫﺎﻤﻫﺎﻧ ﻲ ﻲﻣ ﺎﻫ ﺖﺴﺗ ﺖﺤﺻ ﻪﺑ ﻁﻮﺑﺮﻣ ﺪﻧﺍﻮﺗ ﻱﺎﻫ
ﺪﺷﺎﺑ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻲﺼﻴﺨﺸﺗ .
ﺕﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﺭﺩ ﻪﻛ ﻲﻳﺎﺠﻧﺁ ﺯﺍ
ﺮﭘ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﺍ
ﺺﻴﺨﺸﺗ ﻱﺍﺮﺑ ﻲﺗﻭﺎﻔﺘﻣ ﻱﺎﻫﺮﻤﻳ
ﻪﺘﻓﺭ ﺭﺎﻜﺑ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﺮﮕﻳﺩ ﺯﺍ ﻲﻀﻌﺑ ﺎﺑ ﻪﻛ ﺪﻧﺍ
ﻪﻧﻮﮔ ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻱﺎﻫ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ ﺮﮕﻳﺩ ﻲﺘﺣ ﻭ
ﻱﺎﻫ
ﺪﻧﺭﺍﺩ ﻊﻃﺎﻘﺘﻣ ﺶﻨﻛﺍﻭ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻪﺑﺎﺸﻣ )
۱۸ ﻭ
۱۹ (
، ﻭﺭ Roe) ( ﺖﺴﺗ ﺭﺩ ﻥﺍﺭﺎﻜﻤﻫ ﻭ ﻚﻳ ﺯﺍ ﺩﻮﺧ ﻱﺎﻫ
ﺮﭘ ﺖﻔﺟ ﺍ ﻥﺍﻮﻨﻌﺑ ،ﺕﻭﺎﻔﺘﻣ ﻥﮊ ﻚﻳ ﻪﺑ ﻁﻮﺑﺮﻣ ﻪﻳﻮﻧﺎﺛ ﺮﻤﻳ
ﺗ ﻞﻣﺎﻋ ﺄ ﻳ ﺩﻮﻤﻧ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﻱﺪﻴ )
۵ .(
ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳﺍ ﺭﺩ ﺰﻴﻧ
ﺎﺑ
ﺮﭘ ﺯﺍ ﻩﺩﺎﻔﺘﺳﺍ ﺍ
ﻭﺩ ﻱﺎﻫﺮﻤﻳ ﺕﺍﺮﺘﻴﺳﻭﺰﻳﺍ ﻥﮊ
ﺯﺎﻧﮊﻭﺭﺪﻴﻫﺩ
icd) ( ﻭ S Rrna۱۶
، Multiplx-PCR ﻚﻳ ﻭ ﻲﺣﺍﺮﻃ
ﺭﺎﻜﺑ ﺖﻓﺭ . ﻪﻛ ﺮﮕﻳﺩ ﺩﺭﻮﻣ ﻲﻣ
ﻁﺎﺒﺗﺭﺍ ﻱﺭﺍﺮﻗﺮﺑ ﺭﺩ ﺪﻧﺍﻮﺗ
ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﻦﻴﺑ ﻞﻴﺧﺩ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ ﻭ
ﻦﻳﺍ ﺪﺷﺎﺑ ﺍ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﺕﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺭﺩ ﻪﻛ ﺖﺳ ﻱﺎﻫ
ﻪﺘﻓﺮﮔ ﺭﺍﺮﻗ ﺶﻳﺎﻣﺯﺁ ﺩﺭﻮﻣ ﻲﺗﻭﺎﻔﺘﻣ ﺪﻧﺍ
) ۱۱ ﻭ ۱۷ .(
ﺭﺩ
ﻲﮔﺩﻮﻟﺁ ﻝﺎﻤﺘﺣﺍ ﻪﻧﻮﮔ ﺮﻫ ﺩﺭ ﻱﺍﺮﺑ ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﮓﻨﺳ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ ﺎﺑ ﺎﻫ ﺩﻮﺟﻮﻣ ﻱﺎﻫ
ﻥﺍﻮﻨﻌﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﺭﺩ
ﻮﻠﻓ ﻝﺎﻣﺮﻧ ﺭ ﻧﻮﻤﻧ ﻥﺎﻣﺰﻤﻫ ﺎﻣ ، ﺔ
ﺎﺑ ﺍﺭ ﮓﻨﺳ ﻭ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ
ﻢﻳﺩﺍﺩ ﺭﺍﺮﻗ ﻲﺳﺭﺮﺑ ﺩﺭﻮﻣ ﻢﻫ .
ﺮﺛﺍ ﻲﺳﺭﺮﺑ ﺭﺩ ،ﻩﻭﻼﻌﺑ
ﺮﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻲﮔﺪﻨﻨﻛ ﺭﺎﻬﻣ ﺶﻨﻛﺍﻭ ﻱﻭﺭ
PCR
ﺪﺸﻧ ﻩﺪﻫﺎﺸﻣ ﻲﮔﺪﻨﻨﻛ ﺭﺎﻬﻣ ﺮﺛﺍ ﻪﻧﻮﮕﭽﻴﻫ .
ﺮﺑ ﻦﻳﺍﺮﺑﺎﻨﺑ
ﻲﻣ ﺮﻈﻨﺑ ﺕﺎﻋﻼﻃﺍ ﻦﻳﺍ ﺱﺎﺳﺍ ﺩﻮﺟﻭ ﻪﻛ ﺪﺳﺭ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺭﺩ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻣ ﺭﺩ ﮓﻨﺳ ﻱﺎﻫ
ﺎﺑ ﻪﺴﻳﺎﻘ
ﺺﺧﺎﺷ ﺍﺮﻔﺻ ﻊﻳﺎﻣ ﻲﻤﻧ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ ﻦﻳﺍ ﻭ ﺖﺳﺍ ﺮﺗ
ﺪﻧﺍﻮﺗ
۱۰۸ / ﺏﻮﻨﺟ ﺐﻃ
ﻝﺎﺳ ﻢﺘﺸﻫ ﻩﺭﺎﻤﺷ ۲ / ﺪﻨﻔﺳﺍ ۱۳۸۴
ﺭﻮﻠﻓ ﺪﺷﺎﺑ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻂﻴﺤﻣ ﻝﺎﻣﺮﻧ .
ﻥﻮﻨﮐﺍ ﻝﺍﺆﺳ ﻦﻳﺍ
ﺡﺮﻄﻣ ﺖﺳﺍ ﻡﻮﻧﮊ ﻪﻛ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﺭﺩ
ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ
ﺍﺮﻔﺻ ﺸﻨﻣ ﻪﭼ ﺄ ﺩﺭﺍﺩ ﻲﻳ ﺩﻮﺟﻭ ﻥﺁ ﻱﺍﺮﺑ ﻝﺎﻤﺘﺣﺍ ﻦﻳﺪﻨﭼ ؟
ﺩﺭﺍﺩ
؛ ﻪﻜﻨﻳﺍ ﻲﻜﻳ ﻩﺪﻳﺪﭘ ﻦﻳﺍ
ﺶﺧﺮﭼ ﺖﻠﻌﺑ DNA
ﺍﺮﻔﺻ ﻱﺪﺒﻛ ﻢﺘﺴﻴﺳ ﻥﻭﺭﺩ ﻲﻣ ﻱﻭ
ﺪﺷﺎﺑ . ﺮﮕﻳﺩ ﻑﺮﻃ ﺯﺍ
ﻚﻳ ﻥﺍﻮﻨﻌﺑ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﺖﺳﺍ ﻦﻜﻤﻣ ﻪﺘﺷﺍﺩ ﺶﻘﻧ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ ﻞﻴﻜﺸﺗ ﺭﺩ ﺮﮔﺯﺎﻏﺁ ﻞﻣﺎﻋ ﺪﺷﺎﺑ . ﺎﻳ ﻭ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﺖﻟﺎﺣ ﻭﺩ ﺮﻫ ﺭﺩ DNA
ﻲﻣ ﻥﺁ ﺮﻴﮔ ﻥﺁ ﻥﻭﺭﺩ ﮓﻨﺳ ﻞﻴﻜﺸﺗ ﻞﺣﺍﺮﻣ ﻲﻃ ﺭﺩ ﺪﻧﺍﻮﺗ
ﺩﺩﺮﮔ ﻆﻴﻠﻐﺗ ﻭ ﺪﺘﻓﺍ .
ﺭﺩ ﺖﻳﺎﻬﻧ ﺭﺩ ﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻡﻮﻧﮊ ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳﺍ
ﺭﺩ ﻱﺭﻮﻠﻴﭘﺮﺘﮐ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺩ ﺺﻴﺨﺸﺗ ﻥﺍﺭﺎﻤﻴﺑ ﻱﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ ﻱﺎﻫ ﻩﺩﺍ
ﺪﺷ
ﻣﺍ ، ﺎ ﺍ ﻤﻃ ﻴ ـ ﻲﻧﺎﻨ ﻧﺯ ﺮﺑ ـ ﻥﺩﻮﺑ ﻩﺪ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ ﻦﻳﺍ ﻞﺻﺎﺣ
ﺪﺸﻧ . ﻪﻧﻮﮔ ﻲﻜﻴﻨﻴﻠﻛ ﺶﻘﻧ ﻥﺩﻮﻤﻧ ﻦﺷﻭﺭ ﻱﺍﺮﺑ ﻱﺎﻫ
ﺮﺘﻛﺎﺑﻮﻜﻴﻠﻫ ﻱﺭﺎﻤﻴﺑ ﺭﺩ
ﺕﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﻱﺎﻫ
ﺖﺴﺗ ﻪﻳﺎﭘ ﺮﺑ ﻱﺮﺘﺸﻴﺑ ﺮﺑ ﻭ ﺢﻴﺤﺻ ﻱﺎﻫ
ﺩﺍﺪﻌﺗ ﻱﻭﺭ
ﻩﻭﺮﮔ ﻭ ﺭﺎﻤﻴﺑ ﻱﺮﺘﺸﻴﺑ ﻲﻣ ﺯﺎﻴﻧ ﻝﺮﺘﻨﻛ
ﺺﺨﺸﻣ ﺎﺗ ﺪﺷﺎﺑ
ﻞﻴﻜﺸﺗ ﺭﺩ ﻝﺎﻌﻓ ﻞﻣﺎﻋ ﻚﻳ ﻢﺴﻴﻧﺎﮔﺭﺍ ﻦﻳﺍ ﺎﻳﺁ ﻪﻛ ﺩﻮﺷ ﻩﺭﺎﻈﻧ ﺎﻳ ﻭ ﺖﺳﺍ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﻛ ﮓﻨﺳ ﻲﺑ ﻱﺮﮔ
ﺮﻴﺛﺄﺗ ﺶﻴﺑ
ﺖﺴﻴﻧ . ﻲﻧﺍﺩﺭﺪﻗ ﻭ ﺮﻜﺸﺗ :
ﻲﺸﻫﻭﮋﭘ ﺡﺮﻃ ﺯﺍ ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳﺍ ﻡﺎﺠﻧﺍ ﺖﻬﺟ ﻡﺯﻻ ﺭﺎﺒﺘﻋﺍ ﻩﺭﺎﻤﺷ -۳ ۸۱ ﺏﻭﺮﻜﻴﻣ ﺕﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﺰﻛﺮﻣ ﻪﺑ ﻁﻮﺑﺮﻣ ﻲﺳﺎﻨﺷ
ﺗ ﻱﺯﺮﺒﻟﺍ ﺩﺎﺘﺳﺍ ﻲﻨﻴﻟﺎﺑ ﺄ
ﻣ ﺖﺳﺍ ﻩﺪﺷ ﻦﻴ .
ﻱﺎﻗﺁ ﺏﺎﻨﺟ ﺯﺍ
ﻪﻴﻬﺗ ﺭﺩ ﻪﻛ ﺰﻴﻧ ﻲﻫﺎﻨﭘ ﺮﺘﻛﺩ ﻢﻧﺎﺧ ﺭﺎﻛﺮﺳ ﻭ ﻲﻤﻈﻧ ﺮﺘﻛﺩ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻭ ﺮﻜﺸﺗ ﺪﻨﺘﺷﺍﺩ ﻱﺭﺎﻜﻤﻫ ﺎﻣ ﺎﺑ ﻲﺴﭘﻮﺗﺍ ﻱﺎﻫ
ﻲﻣ ﻲﻧﺍﺩﺭﺪﻗ ﺩﺩﺮﮔ
.
References: __________________________________________________
1. Marshall BJ, Warren JR. Unidentified curved bacilli in the stomach of patients with gastric and peptic ulceration. Lancet 1984; 1: 1311-4.
2. Cover TL, Blaser MJ. Helicobacter pylori and gastroduodenal disease. Annu Rev Med 1992;
43: 135-45.
3. McGowan CC, Cover TL, Blaster MJ.
Helicobacter pylori and gastric acid: biological and therapeutic implications. Gastroenterology 1996; 110: 926-38.
4. Fox JG, Dewhirst FE, Shen Z, et al. Hepatic Helicobacter species identified in bile and gallbladder tissue from Chileans with chronic cholecystitis. Gastroenterology 1998; 114: 755- 63.
5. Roe IH, Kim JT, Lee H, Lee JH. Detection of Helicobacter DNA in Bile from Bile Duct Disease. J Korean Med Sci 1998; 14: 182-6.
6. Kawaguchi M, Saito T, Ohno H, et al.
Bacteria closely resembling Helicobacter pylori detected immunohistologically and genetically in resected gallbladder mucosa. J. Gastroenterol.
1996; 31: 294-8.
7. Lin TT, Yeh CT, Wu CS, et al. Detection and partial sequence analysis of Helicobacter pylori in the bile samples. Dig Dis Sci 1995; 40: 2214-9.
8. Figura N, Cetta F, Angelico M, et al. Most Helicobacter pylori-infected patients have specific antibodies, and some also have H.
pylori antigens and genomic material in bile. Is
it a risk factor for gallstone formation? Dig Dis Sci 1998; 43: 854-62.
9. Myung SJ, Kin MH, Shim KN, et al.
Detection of Helicobacter pylori DNA in human biliary tree and its association with Hepatolithiasis. Dig Dis Sci 2000; 45: 1405-12.
10. Monstein HJ, Jonsson Y, Zdolsek J, et al.
Identification of Helicobacter pylori in human cholesterol gallstones. Scand J Gastroenterol 2002; 37: 112-9.
11. Cetta F, Figura N, Montalto G, et al.
Helicobacter pylori in the bile could play a facilitating role in the pathogenesis of some types of gallstones. Gastroenterology 2000; 118:
Supple 2:7a
12. Farshad F, Rasouli M, Alborzi A.
Simultaneous Detection of Helicobacter Genus and Helicobacter pylori species using a Multiplex PCR Method. Iran Biomed J 2004; 8:
205-9.
13. Choi YK, Han JH, Joo HS. Identification of novel Helicobacter species in pig stomachs by PCR and partial sequencing. J Clin Microbiol 2001;39:3311-5.
14. Argyros FC, Ghosh M, Huang L, et al.
Evaluation of a PCR Primer Based on the isocitrate Dehydrogenase gene for Detection of Helicobacter pylori in Feces. J Clin Microbiol 2000; 38: 3755-8.
15. Goosen C, Theran J, Ntsala M, et al.
Evaluation of a novel heminested PCR assay
ﺮﺘﮐﺩ ﺩﺎﺷﺮﻓ ﺍﺮﻔﺻ ﻪﺴﻴﮐ ﮓﻨﺳ ﺭﺩ ﯼﺭﻮﻠﻴﭘ ﺮﺘﮐﺎﺑﻮﮑﻴﻠﻫ ﻡﻮﻧﮊ ﻥﺍﺭﺎﮑﻤﻫ ﻭ /
۱۰۹
based on the phosphoglucosamine mutase gene for detection of Helicobacter pylori in saliva and dental plaque. J Clin Microbiol 2002; 40:
205-9.
16. Mendez-Sanchez N, Pichardo R, Gonzalez J, et al. Lack of association between Helicobacter sp. colonization and gallstone disease. J Clin Gastroenterol 2001; 32:138-41.
17. Chen W, Li D, Gannan RJ, Subbs RS.
Common presence of Helicobacter DNA in the
gallbladder of patients with gallstone diseases and controls. Dig Liver Dis 2003; 35: 237-43.
18. Clayton CL, Kleanthous H, Coates PJ, et al.
Sensitive detection of Helicobacter pylori by using the polymerase chain reaction. J Clin Microbial 1992; 30: 192-200.
19. Fallone CA, Tran S, Semert M, et al.
Helicobacter DNA in bile: Correlation with hepato-biliary disease. Aliment Pharmacol Ther 2003; 17:453-8.
