ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ ﻲﺳرﺮﺑ ﻂﺳﻮﺗB1
ﻮﻧﺎﻧ تارذ ﻂﻳاﺮﺷ رد ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ ﺰﻟﻮﻠﺳ
ﻲﺜﻨﺧ و يزﺎﺑ ،يﺪﻴﺳا
نﺎﮔﺪﻨﺴﻳﻮﻧ :
نﺎﻘﻫدﺮﻴﻣ تادﺎﺴﻟا ﻪﺒﻴﻃ
ﻲﺘﻤﻜﺣ ﻦﻴﺴﺣ ﺪﻴﺳ ،1
مﺪﻘﻣ ﻲﻟﺎﺒﺟ ﻲﻠﻋ ،2 3
1 .
،ﺪﺷرا ﻲﺳﺎﻨﺷرﺎﻛ يﻮﺠﺸﻧاد دﺰﻳ ﺖﻔﺗ رﻮﻧ مﺎﻴﭘ هﺎﮕﺸﻧاد
2 . ﻲﻜﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ، ﻲﻫﺎﮕﺸﻳﺎﻣزآ مﻮﻠﻋ هوﺮﮔ رﺎﻴﺸﻧاد ﻲﻧﺎﻣرد ﺖﺷاﺪﻬﺑ تﺎﻣﺪﺧ و
ﻗوﺪﺻ ﺪﻴﻬﺷ ﻲ
دﺰﻳ
3 . لﻮﺌﺴﻣ هﺪﻨﺴﻳﻮﻧ :
ﻲﻜﺷﺰﭘ ﻦﻳﻮﻧ يﺎﻫ يروﺎﻨﻓ و مﻮﻠﻋ هوﺮﮔ رﺎﻳدﺎﺘﺳا ﻲﻜﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،
ﻲﻧﺎﻣرد ﺖﺷاﺪﻬﺑ تﺎﻣﺪﺧ و ﺪﻴﻬﺷ
دﺰﻳ ﻲﻗوﺪﺻ ﺗ
سﺎﻤﺗ ﻦﻔﻠ : 09390348478
[email protected] Email:
هﺪﻴﻜﭼ
ﻪﻣﺪﻘﻣ ﺪﺒﻛ نﺎﻃﺮﺳ ﺚﻋﺎﺑ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ ﻢﺳ : ﻲﻣ
دﻮﺷ و ﺖﺳا يروﺮﺿ رﺎﻴﺴﺑ ﻲﻳاﺬﻏ داﻮﻣ رد نآ بﺬﺟ .
زا فﺪﻫ
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ ﻲﺳرﺮﺑ
يزﺎﺑ ،يﺪﻴﺳا ﻂﻳاﺮﺷ رد ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ ﺰﻟﻮﻠﺳ تارذﻮﻧﺎﻧ ﻂﺳﻮﺗB1
دﻮﺑ ﻲﺜﻨﺧ و .
شور ﻲﺳرﺮﺑ رﺪﻴﻫ شور ﺎﺑ ﺰﻟﻮﻠﺳ تارذﻮﻧﺎﻧ ﺖﺴﺨﻧ: و ﺰﺘﻨﺳ يﺪﻴﺳا ﺰﻴﻟو
ﻚﻤﻛ ﺎﺑ ﺲﭙﺳ ﻪﺑ ﺮﻜﻨﻴﻟ ساﺮﻛ
ﺮﻣﺎﺘﭘآ
هﺪﺷ حﻼﺻا ﺪﻳدﺮﮔ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ
.
،ﺪﻌﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ رد ﺖﻈﻠﻏ
هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ تارذﻮﻧﺎﻧ لﺎﻳﺮﺳ يﺎﻫ mg/mL)
6 / 0 و 25 / 1
و 5 / 2 و 5 و 10 ( ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ لﻮﻠﺤﻣ ﺎﺑ ﻪﻧﺎﮔاﺪﺟ رﻮﻄﺑ µg/mL
1000 يﺎﻣد رد و طﻮﻠﺨﻣ 37ºC
رد و
يﺎﻫpH 1
، 7
، 13 تﺪﻤﺑ 5 / 0 ﺪﻧﺪﻳدﺮﮔ ﻪﺑﻮﻜﻧا ﺖﻋﺎﺳ .
جﻮﻣ لﻮﻃ رد ﻪﻟﻮﻟ ﺮﻫ ياﺮﺑ بﺬﺟ ﺪﺻرد ﺲﭙﺳ 340
ﺪﻳدﺮﮔ ﻪﺒﺳﺎﺤﻣ ﺮﺘﻣﻮﻧﺎﻧ .
ﻪﺘﻓﺎﻳ ﺎﻫ ﺶﻫﺎﻛ : دوﺪﺣ ﺎﺗ بﺬﺟ ﺶﻳاﺰﻓا ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣpH
40 ﺪﺷ ﺪﺻرد . راﺪﻘﻣ ﻦﻴﺑ يراد ﻲﻨﻌﻣ توﺎﻔﺗ ،يرﺎﻣآ ﺮﻈﻧ زا
ﺪﺷ هﺪﻳد ﻲﺜﻨﺧ و يزﺎﺑ ﻂﻳاﺮﺷ رد بﺬﺟ راﺪﻘﻣ ﺎﺑ يﺪﻴﺳا ﻂﻳاﺮﺷ رد بﺬﺟ )
05 / P<0 .(
يﺮﻴﮔ ﻪﺠﻴﺘﻧ ﻲﻣ ﻲﺑﻮﺧ ﻪﺑ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ:
دﻮﺷ بﺬﺟ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ تارذﻮﻧﺎﻧ ﻪﺑ ﺪﻧاﻮﺗ رد بﺬﺟ ترﺪﻗ ﻦﻳا و
ﺪﺑﺎﻳ ﻲﻣ ﺶﻳاﺰﻓا يﺪﻴﺳا ﻂﻳاﺮﺷ .
هژاو يﺎﻫ يﺪﻴﻠﻛ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ ،بﺬﺟ: ﺮﻣﺎﺘﭘآ ،ﺰﻟﻮﻠﺳ تارذﻮﻧﺎﻧ ،B1
ﺖﺷاﺪﻬﺑ عﻮﻠﻃ
ﻲﺸﻫوﮋﭘ ﻲﻤﻠﻋ ﻪﻣﺎﻨﻫﺎﻣ ود
دﺰﻳ ﺖﺷاﺪﻬﺑ هﺪﻜﺸﻧاد
ﻢﻫدرﺎﻬﭼ لﺎﺳ
هرﺎﻤﺷ : ﻢﺸﺷ
ﻪﻣﺎﻧ هﮋﻳو 1394
ﻞﺴﻠﺴﻣ هرﺎﻤﺷ :
54
لﻮﺻو ﺦﻳرﺎﺗ :
16 / 9 / 1393
شﺮﻳﺬﭘ ﺦﻳرﺎﺗ :
19 / 10 / 1393
زا ﻲﺧﺮﺑ چرﺎﻗ
ﺎﻫ ﻲﺻﺎﺧ ﻪﻳﻮﻧﺎﺛ يﺎﻫ ﺖﻴﻟﻮﺑﺎﺘﻣ ﺰﺘﻨﺳ ﻲﻳﺎﻧاﻮﺗ
ﺎﻫ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻮﻜﻳﺎﻣ ناﻮﻨﻋ ﺖﺤﺗ ﺪﻧرادار
ﻪﻛ ﻣ ﻲ ﺪﻨﻧاﻮﺗ تاﺮﺛا
ﺮﺑ ﻲﺑﻮﻠﻄﻣﺎﻧ لﻮﻠﺳ
ﺎﻫ ي ﻲﻧﺎﺴﻧا ﺪﻨﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاد ﻲﻧاﻮﻴﺣ و )
1 ( .
ﺮﻈﻧزا
وﺰﺟ ﺎﻫ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ ﻲﻧﺎﻬﺟ ﺖﺷاﺪﻬﺑ نﺎﻣزﺎﺳ
ﻢﻬﻣ ﺮﺗ ﻳ ﻦ
ﻪﻛ هدﻮﺑ ﺎﻫ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻮﻜﻳﺎﻣ
ًﺎﺗﺪﻤﻋ
يﺎﻫ شﻮﺳ ﻂﺳﻮﺗ
ﺪﻴﻟﻮﺗ سﻮﻜﻴﺘﻳزارﺎﭘ سﻮﻠﻳژﺮﭙﺳآ و سووﻼﻓ سﻮﻠﻳژﺮﭙﺳآ ﻣ ﻲ ددﺮﮔ ) 2 ( . نﺎﺸﻧ تﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﻣ
ﻲ ﺪﻫد ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ عاﻮﻧا ﻪﻛ
B1, B2,G1,G2) ﻦﻳا ﻂﺳﻮﺗ (
چرﺎﻗ ﺎﻫ ﺰﺘﻨﺳ ﻣ ﻲ ددﺮﮔ ﻲﻟو
ﻢﻬﻣ ﺮﺗ ﻳ ﻦ و كﺎﻧﺮﻄﺧ ﺮﺗ ﻳ ﻦ نآ ﺎﻫ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ B1
ﻪﻛ هدﻮﺑ
ﺖﻴﺗﺎﭙﻫ و ﺪﺒﻛ نﺎﻃﺮﺳ دﺎﺠﻳا ﺚﻋﺎﺑ ﻣ
ﻲ دﺮﮔ د . ﻢﻫ ﻨﭼ ﻴ ﻦ
ﻂﻘﺳ ﻨﺟ ﻴ ﻦ يزروﺎﺸﻛ تﻻﻮﺼﺤﻣ ﺖﻴﻔﻴﻛ ﺶﻫﺎﻛ ، ﻲﻳازﺎﻧ ،
و ماد روﺮﭘ ي ﻪﻠﻤﺟزا ﻢﺳ ﻦﻳا بﻮﻠﻄﻣﺎﻧ تاﺮﺛا ﺖﺳا
.
ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ B1
ندرﻮﺧ زا ﺪﻌﺑ ﻪﺑ
ﺘﺣار ﻲ هﺎﮕﺘﺳد رد
نﻮﺧ نﺎﻳﺮﺟ دراو و بﺬﺟ شراﻮﮔ ﻣ
ﻲ ددﺮﮔ رد ﺲﭙﺳ و
ﺖﻓﺎﺑ ﺎﻫ ي ﻛ ، ﻪﻳر ﺮﻴﻈﻧ ﻒﻠﺘﺨﻣ اﺪﻴﭘ ﻊﻤﺠﺗ ﺪﺒﻛ و ﻪﻴﻠ
ﻣ ﻲ ﺪﻨﻛ . ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ رد B1
لﻮﻠﺳ ﺎﻫ ي ﻦﻳا ﺖﻓﺎﺑ ﺎﻫ )
ًﺎﺗﺪﻤﻋ
ﺪﺒﻛ ( ﺎﺑ و هدﺮﻛ ذﻮﻔﻧ ﺪﻴﻟﻮﺗ و هداد ﻞﺑﺎﻘﺘﻣ ﺶﻨﻛاو DNA
رﺎﻬﻣ ارRNA ﻣ ﻲ ﺪﻨﻛ ﺪﺒﻛ نﺎﻃﺮﺳ ﺖﻳﺎﻬﻧرد و ﻪﺑ
دﻮﺟو ﻣ ﻲ آ ﻳ ﺪ
. (3) هار ﺎﻫ ي فﺬﺣ و ﺰﺘﻨﺳ زا يﺮﻴﮔﻮﻠﺟ ياﺮﺑ ﻲﺗوﺎﻔﺘﻣ
ﺖﺳا هﺪﻳدﺮﮔ شراﺰﮔ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻦﻴﻘﻘﺤﻣ ﻂﺳﻮﺗ ﻢﺳ ﻦﻳا
ًﻼﺜﻣ
اﺮﻓ ﻳ ﺎﻫﺪﻨ ي داﻮﻣ زا هدﺎﻔﺘﺳا و ﻊﻳﺮﺳ ندﻮﻤﻧ ﻚﺸﺧ ،ﻲﺗراﺮﺣ
، كﺎﻴﻧﻮﻣآ ﺮﻴﻈﻧ ﻲﻳﺎﻴﻤﻴﺷ ﻪﻠﻤﺟزا
هار ﺎﻫ ي ﺖﺳا يدﺎﻬﻨﺸﻴﭘ
ﺎﻫرﺎﻜﻫار ﻦﻳا ﻲﻟو
ًﺎﻀﻌﺑ ار ﻲﺗﻼﻜﺸﻣ
ﻲﻳاﺬﻏ داﻮﻣ ياﺮﺑ
دﺎﺠﻳا ﻣ ﻲ ﺪﻨﻨﻛ ) 4 (.
ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ B1
ﻢﺳ ﺖﻈﻠﻏ ﺶﻫﺎﻛ تﺎﺒﺟﻮﻣ و هﺪﺷ ﻞﺼﺘﻣ
دﻮﺷ ﻲﻳاﺬﻏ داﻮﻣ رد دازآ .
نﺎﺸﻧ تﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﻣ
ﻲ ﺪﻫد هراﻮﻳد
ﻲﺧﺮﺑ ﻲﻟﻮﻠﺳ ﺮﺘﻛﺎﺑ
ي ﺎﻫ ﺎﻫﺮﻤﺨﻣ و ﻢﺳ ﻦﻳا بﺬﺟ ﻲﻳﺎﻧاﻮﺗ
ﺪﻧرادار ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ ، ﻲﺧﺮﺑ
تﺎﺒﻴﻛﺮﺗ
، ﺎﻫ ﺖﻴﻟﻮﺋز ﺮﻴﻈﻧ
ﺲﻴﻠﻴﺳ ﺪﻴﺴﻛا ﺖﻳزﻮﭙﻣﺎﻛﻮﻧﺎﻧ و لﺎﻌﻓ ﻦﺑﺮﻛ ، ﺖﻴﻧﻮﻠﻳرﻮﻤﺘﻧﻮﻣ -
ﺰﻴﻧ مﻮﻳﺰﻴﻨﻣ ﺪﻴﺴﻛا ﻪﺑ
ﺑﻮﺧ ﻲ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ ﻪﺑ B1
ﻞﺼﺘﻣ
ﻣ ﻲ ﺪﻧدﺮﮔ ) 5 , 6 (.
ﻪﻛ داﻮﻣ ﻦﻳا ﻪﻛ ﺖﺷاد ﻪﺟﻮﺗ ﺪﻳﺎﺑ ﻪﺑ
ناﻮﻨﻋ
ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بذﺎﺟ ﻲﻓﺮﻌﻣB1
دﺮﮔ ﻳ هﺪ ﺪﻧا ، ﻫ ﻴ ﭻ ﻳ ﻚ بذﺎﺟ
و هدﻮﺒﻧ ﻲﺼﺼﺨﺗ
ًﻻﺎﻤﺘﺣا دﻮﺷ بﺬﺟ ﺰﻴﻧ داﻮﻣ ﺮﻳﺎﺳ ﻪﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺘﺑ .
ﻦﻳا ﺮﺜﻛا ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ بذﺎﺟ
ﺎﻫ ياراد ﻪﻋﻮﻤﺠﻣ ا ي ﻛا زا تاﺰﻠﻓ ﺪﻴﺴ
نﺎﻜﻣا ﻪﻛ هدﻮﺑ مﻮﻴﻧﺎﺘﻴﺗ ﺪﻴﺴﻛا و مﻮﻴﻨﻴﻣﻮﻟآ ﺪﻴﺴﻛا ﺮﻴﻈﻧ زﺎﺳدازآ ي يﻻﺎﺑ ﺖﻴﻤﺳ و نآ
ﺎﻫ دراد دﻮﺟو )
7 ( .
زا ﻪﻛ ﻲﻔﻴﺻﻮﺗ ﺎﺑ ﻪﻠﺌﺴﻣ
بذﺎﺟ ﻚﻳ ﻪﺋارا تروﺮﺿ ،ﺪﺷ ﻪﺋارا
ﻞﻗاﺪﺣ ، ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ ترﺪﻗ ﺮﺑ هوﻼﻋ ﻪﻛ ﻲﺼﺼﺨﺗ ﻮﻴﺣ و نﺎﺴﻧا ياﺮﺑ ار ﺖﻴﻤﺳ سﺎﺴﺣا ﺪﻨﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاد نا
ﻣ ﻲ ددﺮﮔ . زا فﺪﻫ ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳا
ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ ﻲﺳرﺮﺑ
ﻂﺳﻮﺗB1 ﻮﻧﺎﻧ تارذ د ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ ﺰﻟﻮﻠﺳ ﻂﻳاﺮﺷ ر
ﻲﺜﻨﺧ و يزﺎﺑ ،يﺪﻴﺳا ﺖﺳا
. ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﻫ لﻮﻜﻟﻮﻣ ﺎﻫ ﻲﻳ ﺲﻨﺟ زا
و هدﻮﺑ ﺪﻴﺗﻮﺌﻠﻛﻮﻧﻮﮕﻴﻟا ﻣ
ﻲ ﺪﻨﻧاﻮﺗ رﺎﺘﺧﺎﺳ دﺎﺠﻳا ﺎﺑ ﻪﺳ
ﺪﻌﺑ ي
ﺪﻨﻨﻛ ﻲﻳﺎﺳﺎﻨﺷ ار دﻮﺧ فﺪﻫ .
ﻲﻧژورﺪﻴﻫ يﺎﻫﺪﻧﻮﻴﭘ دﺎﺠﻳا
ﻠﺻا ﻲ ﺮﺗ ﻳ ﻦ ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ فﺪﻫ لﻮﻜﻟﻮﻣ ﻲﺼﺼﺨﺗ لﺎﺼﺗا ياﺮﺑ ﻞﻣﺎﻋ
ﺖﺳا .
ﻲﺳرﺮﺑ شور
ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳا رد ﻛورﺪﻴﻫ
ﻢﻳﺪﺳ ﺪﻴﺴ
، ﺳا ﻴ ﺳﺪ ﻴ ﺮﺘ ﻳ ﻚ ،
ﺳا ﻴ رﻮﻔﻟﻮﺳﺪ ﻳ ﻚ
، ﺮﻜﻨﻴﻟ ساﺮﻛ )EDC
ﺪﻴﻤﻳا يدﻮﺑﺮﻛ (
زا
ﺪﻳدﺮﮔ ﻪﻴﻬﺗ نﺎﻤﻟآ كﺮﻣ ﺖﻛﺮﺷ .
ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ ﺮﻣﺎﺘﭘآ حﻼﺻا هﺪﺷ
زا ﺖﺴﻳز ﻮﭘﺎﻜﺗ ﺖﻛﺮﺷ ﺪﺷ يراﺪﻳﺮﺧ
. ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ زا ﺰﻴﻧB1
قﺮﺷ روﺎﻨﻓ ﺖﺴﻳز ﺖﻛﺮﺷ ﺪﺷ ﻪﻴﻬﺗ
. ﺰﻟﻮﻠﺳ تارذﻮﻧﺎﻧ ﺰﺘﻨﺳ ياﺮﺑ
ﺖﺴﺨﻧ 1 / 0 زا مﺮﮔ ﻮﺗ مﺎﺧ ﻪﺒﻨﭘ نورد و ﻦﻳز
ﻪﻟﻮﻟ ﺎﻣزآ ﻳ ﺶ
دادراﺮﻗ ﺲﭙﺳ ،ﺪﺷ 2mL
ﻚﻳرﻮﻔﻟﻮﺳﺪﻴﺳا
% 70 ﻮﺸﺘﺴﺷ ﻪﺒﻨﭘ ﻪﺑ
هداد هﺪﺷ و ﻪﻓﺎﺿا
ًارﻮﻓ ﺪﻳدﺮﮔ طﻮﻠﺨﻣ .
زا ﺪﻌﺑ ﺮﻘﺗ ﻳ
ًﺎﺒ ﻪﻴﻧﺎﺛ ود
ﺪﻴﺳا ندﺮﻛ ﻲﺜﻨﺧ ياﺮﺑ ،ﻪﺒﻨﭘ ﻞﻣﺎﻛ ﺰﻴﻟورﺪﻴﻫ زا ﺪﻌﺑ ﻲﻨﻌﻳ بﻮﺳر و ﻪﻟﻮﻟ رد دﻮﺟﻮﻣ ﻮﻧﺎﻧ
تارذ mL زا 2 لﻮﻠﺤﻣ 5 رﻻﻮﻣ
ﺪﻳدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا NaOH .
اﺪﺘﺑا ،تارذ ﻮﻧﺎﻧ ﺺﻴﻠﺨﺗ ياﺮﺑ ﻮﻧﺎﻧ
تارذ بﻮﺳر هدﺮﻛ ﻪﺑ تﺪﻣ 2 رود رد ﻪﻘﻴﻗد 3500
و ژﻮﻔﻳﺮﺘﻧﺎﺳ
ﺪﺷ هداد ﻮﺸﺘﺴﺷ ﻪﺒﺗﺮﻣ ﻪﺳ ﺮﻄﻘﻣ بآ ﺎﺑ ﺲﭙﺳ )
8 ( . ياﺮﺑ
ﻮﻧﺎﻧ ندﻮﻤﻧ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ رد ،ﺰﻟﻮﻠﺳ تارذ
لوا ﻪﻠﺣﺮﻣ ﻮﻧﺎﻧ
تارذ
ﺰﻟﻮﻠﺳ ﺎﺑ هوﺮﮔ
،ﺪﻳدﺮﮔ حﻼﺻا ﻞﻴﺴﻛﻮﺑﺮﻛ يﺎﻫ ﺪﺑ
ﻳ ﻦ ترﻮﺻ
مﺎﻤﺗ ﻪﺑ ﺖﺴﺨﻧ ﻪﻛ ﻮﻧﺎﻧ
تارذ ﻮﺸﺘﺴﺷ هداد هﺪﺷ ،ﻪﻟﻮﻟ رد دﻮﺟﻮﻣ
10 ﻣﻴ ﻠ ﻲ ﻟﻴ ﺮﺘ ﺪﻳدﺮﮔ ﻪﻓﺎﺿا ﺮﻄﻘﻣ بآ .
مﺮﮔ ﻚﻳ ﺪﻌﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ رد
ﺳا ﻴ ﺳﺪ ﻴ ﺮﺘ ﻳ ﻚ نﻮﻴﺴﻧﺎﭙﺳﻮﺳ ﻪﺑ ﻮﻧﺎﻧ
ﺰﻟﻮﻠﺳ رد ﺲﭙﺳ و ﻪﻓﺎﺿا
يﺎﻣد 100 ﻪﺟرد ﻪﺑ تﺪﻣ 5 ﻪﺑﻮﻜﻧا ﻪﻘﻴﻗد ﺪﻳدﺮﮔ
. ﺪﻌﺑ زا
،نﻮﻴﺳﺎﺑﻮﻜﻧا ﺳا
ﻴ ﺳﺪ ﻴ ﺮﺘ ﻳ ﻚ ژﻮﻔﻳﺮﺘﻧﺎﺳ ﺎﺑ ﻲﻓﺎﺿا رود رد
3500 ﻪﺑ
تﺪﻣ 2 اﺪﺟ ﻪﻘﻴﻗد ﺪﻳدﺮﮔ
. ﺪﻌﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ رد 5mL
/ 0 ﺮﻄﻘﻣ بآ
ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﻪﺑ ﺮﺧ ﻳ راﺪ ي هﺪﺷ و ﻪﻓﺎﺿا 450 ﻪﻟﻮﻟ ﻪﺑ نآ زا ﺮﺘﻴﻟ وﺮﻜﻴﻣ
يوﺎﺣ ﻮﻧﺎﻧ تارذ ﺰﻟﻮﻠﺳ حﻼﺻا هﺪﺷ ﺎﺑ هوﺮﮔ ﺎﻫ ي ﻞﻴﺴﻛﻮﺑﺮﻛ تﺪﺸﺑ و ﺪﺷ ﻪﻓﺎﺿا
ﻪﺑ ﻢﻫ ﺪﺷ هدز . ﺸﻴﭘ ﺖﻬﺟ ﺪﻌﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ رد دﺮﺒ
ﻚﻳ ﺰﻴﻧ ﺶﻨﻛاو ﻣﻴ
ﻠ ﻲ ﻟﻴ ﺮﺘ ﺮﻜﻨﻴﻟ ساﺮﻛ و ﻪﻓﺎﺿا نﻮﻴﺴﻧﺎﭙﺳﻮﺳ ﻪﺑ
ﻪﺑ تﺪﻣ رﻮﺗﺎﺗور يور ﺮﺑ ﻂﻴﺤﻣ يﺎﻣد رد ﺖﻋﺎﺳ ﻚﻳ
ًﻼﻣﺎﻛ ﻪﺑ
ﻢﻫ ﺪﺷ هدز . ﺶﻨﻛاو ﻪﻟﻮﻟ قﻮﻓ ﻞﺣاﺮﻣ ﺪﻨﻧﺎﻣ ،نﻮﻴﺳﺎﺑﻮﻜﻧا زا ﺪﻌﺑ
رود رد 3500 ﻪﺑ تﺪﻣ 2 و ژﻮﻔﻳﺮﺘﻧﺎﺳ ﻪﻘﻴﻗد ﻪﺗ
ﺸﻧ ﻴ ﻦ رﺎﺑ ود ﺰﻴﻧ ﺎﺑ
ﺪﺷ هداد ﻮﺸﺘﺴﺷ ﺮﻄﻘﻣ بآ .
ﺰﻟﻮﻠﺳ تارذ ﻮﻧﺎﻧ ﺪﻌﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ رد
رﻮﺗﺎﺑﻮﻜﻧا ﻪﺑ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ 37
ددﺮﮔ ﻚﺸﺧ ﺎﺗ ﻞﻘﺘﻨﻣ ﻪﺟرد .
ﺎﻬﻧرد ﻳ ﺖ 4 / 0 زا مﺮﮔ ﻮﻧﺎﻧ تارذ بآ ﺎﺑ و ﻦﻳزﻮﺗ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ
ﻢﺠﺣ ﻪﺑ ﺮﻄﻘﻣ 40mL
ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺗ ﺪﺷ هﺪﻴﻧﺎﺳر 10
ﻣﻴ ﻠ ﻲ مﺮﮔ ﺮﺑ
ﻣﻴ ﻠ ﻲ ﻟﻴ ﺮﺘ ددﺮﮔ ﻪﻴﻬﺗ نآ زا .
يرﺎﺘﺧﺎﺳ ﻲﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ شور زا
ﻮﺼﺗ ﻳ رادﺮﺑﺮ ي ﻲﺸﺑور ﻲﻧوﺮﺘﻜﻟا پﻮﻜﺳوﺮﻜﻴﻣ ﺎﺑ هدﺎﻔﺘﺳا
ﺪﻳدﺮﮔ . ﻲﺑﺎﻳزرا ياﺮﺑ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ
تارذ ﻮﻧﺎﻧ ﻂﺳﻮﺗB1
ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ هوﺮﮔ ﻪﺳ
ﺪﺷ ﻪﺘﻓﺮﮔ ﺮﻈﻧ رد ﻲﻠﺻا :
رد
لوا هوﺮﮔ 500µL
ﺖﻈﻠﻏ زا لﺎﻳﺮﺳ يﺎﻫ ﻮﻧﺎﻧ
تارذ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ
هﺪﺷ mg/mL) 6
/ 0 و 25 / 1 و 5 / 2 و 5 و 10 ( ﻪﺑ رﻮﻃ ﻪﻧﺎﮔاﺪﺟ
µL ﺎﺑ 500 ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ لﻮﻠﺤﻣ زا
µg/mL
1000
يﺎﻣد رد و طﻮﻠﺨﻣ 37ºC
pHو لدﺎﻌﻣ 1 ﻪﺑ تﺪﻣ 5 / 0 ﺖﻋﺎﺳ
ﺪﻧﺪﻳدﺮﮔ ﻪﺑﻮﻜﻧا .
مود هوﺮﮔ رد 500µL
ﺖﻈﻠﻏ زا لﺎﻳﺮﺳ يﺎﻫ
ﻮﻧﺎﻧ تارذ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ mg/mL)
6 / 0 و 25 / 1 و 5 / 2 و 5 و
10 ( ﻪﺑ رﻮﻃ ﺎﺑ ﻪﻧﺎﮔاﺪﺟ 500 µL
آ لﻮﻠﺤﻣ زا ﺎﺑ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓ
µg/mL ﺖﻈﻠﻏ 1000
يﺎﻣد رد و طﻮﻠﺨﻣ 37 ºC
pH و
لدﺎﻌﻣ 7 ﻪﺑ تﺪﻣ 5 / 0 ﺪﻧﺪﻳدﺮﮔ ﻪﺑﻮﻜﻧا ﺖﻋﺎﺳ .
مﻮﺳ هوﺮﮔ رد
500 µL ﺖﻈﻠﻏ زا لﺎﻳﺮﺳ يﺎﻫ
ﻮﻧﺎﻧ تارذ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ
mg/mL) 6
/ 0 و 25 / 1 و 5 / 2 و 5 و 10 ( ﻪﺑ رﻮﻃ ﺎﺑ ﻪﻧﺎﮔاﺪﺟ µL
500 ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ لﻮﻠﺤﻣ زا µg/mL
1000 ﻠﺨﻣ طﻮ
ﺪﻧﺪﻳدﺮﮔ ﻪﺑﻮﻜﻧا .
هوﺮﮔ ﺮﻫ ياﺮﺑ 2
رد ﺰﻴﻧ ﻚﻧﻼﺑ ﻚﻳ و لﺮﺘﻨﻛ
ﻞﻣﺎﺷ ،ﺪﺷ ﻪﺘﻓﺮﮔ ﺮﻈﻧ :
لﺮﺘﻨﻛ 1 : ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ و ﺮﻄﻘﻣ بآ يوﺎﺣ ﻪﺑ
ﺎﻬﻨﺗ ﻲﻳ
لﺮﺘﻨﻛ 2 : و ﺮﻄﻘﻣ بآ يوﺎﺣ ﻮﻧﺎﻧ
تارذ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ ﻪﺑ
ﺎﻬﻨﺗ ﻲﻳ
ﻚﻧﻼﺑ : ﺮﻄﻘﻣ بآ
لﻮﻣﺮﻓ 3 - 1 ﻛ يرﻮﻧ بﺬﺟ ﻲﻔﻨﻣ لﺮﺘﻨ
/ 100 × ) بﺬﺟ عﻮﻤﺠﻣ
يرﻮﻧ لﺮﺘﻨﻛ ﺎﻫ - ﺖﺴﺗ ﻪﻟﻮﻟ يرﻮﻧ بﺬﺟ = (
بﺬﺟ ﺪﺻرد ﺪﻌﺑ
ﻪﻟﻮﻟ ﻲﻣﺎﻤﺗ ،نﻮﻴﺳﺎﺑﻮﻜﻧا مﺎﻤﺗا زا رود رد ﺎﻫ
3500 ﻪﺑ تﺪﻣ 5
زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﻲﺋور لﻮﻠﺤﻣ يرﻮﻧ بﺬﺟ ناﺰﻴﻣ و ژﻮﻔﻳﺮﺘﻧﺎﺳ ﻪﻘﻴﻗد ﺖﺤﺗ ﺮﺘﻣﻮﺘﻓوﺮﺘﻜﭙﺳا هﺎﮕﺘﺳد لﻮﻃ
جﻮﻣ 340 ﻮﻧﺎﻧ ﺪﺷ ﺖﺋاﺮﻗ ﺮﺘﻣ
ﺬﺟ ﺪﺻرد و هرﺎﻤﺷ لﻮﻣﺮﻓ ﺎﺑ ب
1 ﺪﺷ ﻪﺒﺳﺎﺤﻣ .
مزﻻ ﻪﺑ ﺮﻛذ
هوﺮﮔ ﻪﻤﻫ ﺖﺳا ﺎﻫ
ﻪﺑ ترﻮﺻ 2 ﻦﻴﮕﻧﺎﻴﻣ ﺲﭙﺳ و مﺎﺠﻧا راﺮﻜﺗ رﺎﺑ
نآ رﺎﻴﻌﻣ فاﺮﺤﻧا و ﺪﻳدﺮﮔ ﻪﺒﺳﺎﺤﻣ ﺎﻫ
. ﻲﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ
ﻲﻨﻌﻣ فﻼﺘﺧا هوﺮﮔ ﻦﻴﺑ راد
نﻮﻣزآ زا ﺎﻫ T-test
و ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا
زا ﺮﺘﻤﻛP 0.05 ﻪﺑ ناﻮﻨﻋ ﻲﻨﻌﻣ ﺢﻄﺳ ﺘﻓﺮﮔ ﺮﻈﻧ رد راد
ﺪﺷ ﻪ .
ﻞﻜﺷ
1 زا يﺮﻳﻮﺼﺗ ﻮﻧﺎﻧ
تارذ
ﻂﺳﻮﺗ ار ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ
نﺎﺸﻧ ﻲﺸﺑور ﻲﻧوﺮﺘﻜﻟا پﻮﻜﺳوﺮﻜﻴﻣ ﻣ
ﻲ ﺪﻫد . نﺎﻤﻫ رﻮﻃ ﻪﻛ
هﺪﻳد ﻣ ﻲ دﻮﺷ ﻮﻧﺎﻧ تارذ لﺎﻜﺷا رد و ﺰﻳر رﺎﻴﺴﺑ هﺪﺷ ﺰﺘﻨﺳ
ﺰﻳﺎﺳ رد و ﻒﻠﺘﺨﻣ ﺮﻘﺗ
ﻳ nm ًﺎﺒ 10 ﺎﺗ 100 ﺪﻧدﻮﺑ . ﻞﻜﺷ 2 و 3 و
4 ﺰﻴﻧ ﻪﺑ ﺗﺮﺗ ﻴ ﺐ رد ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ يﺎﻫpH
1 و 7 و 13
نﺎﺸﻧ ﻣ ﻲ ﺪﻫد . لوا هوﺮﮔ رد نﺎﻤﻫ
رﻮﻃ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﻪﻛ ﻣ
ﻲ ددﺮﮔ
ﺶﻫﺎﻛ دوﺪﺣ ﺎﺗ بﺬﺟ ﺶﻳاﺰﻓا ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣpH
40
هﺪﺷ ﺪﺻرد
ﺖﺳا . ﻞﺑﺎﻗ ﻪﺟﻮﺗ بﺬﺟ ناﺰﻴﻣ ﺮﺑ ﺖﻈﻠﻏ ﺶﻫﺎﻛ ﻪﻜﻧآ نآ
نﺎﻨﭼ
ﺛﺄﺗ ﻴ راﺬﮔﺮ دﻮﺒﻧ .
بﺬﺟ راﺪﻘﻣ ﺖﻈﻠﻏ ﺶﻳاﺰﻓا ﺎﺑ مود هوﺮﮔ رد
ﺖﻓﺎﻳ ﺶﻳاﺰﻓا .
رد بﺬﺟ راﺪﻘﻣ رﻮﻛﺬﻣ ﻂﻳاﺮﺷ ﺖﺤﺗ ﺖﻈﻠﻏ ود
10 و 5 ناﺰﻴﻣ ﻪﺑ و نﺎﺴﻜﻳ 22
دﻮﺑ ﺪﺻرد .
هوﺮﮔ رد و مود مﻮﺳ
ﻣ ﻲ ناﻮﺗ ﺶﻳاﺰﻓا ﻪﻛ دﻮﻤﻧ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﺪﺻرد ﺶﻫﺎﻛ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣpH
بﺬﺟ هﺪﺷ ﺖﺳا . توﺎﻔﺗ ﻨﻌﻣ ﻲ راد ي رد بﺬﺟ راﺪﻘﻣ ﻦﻴﺑ
هﺪﻳد ﻲﺜﻨﺧ و يزﺎﺑ ﻂﻳاﺮﺷ رد بﺬﺟ راﺪﻘﻣ ﺎﺑ يﺪﻴﺳا ﻂﻳاﺮﺷ ﺪﺷ ) 05 /
<0 .(p
ﻞﻜﺷ 1 : وﺮﺘﻜﻟا پﻮﻜﺳوﺮﻜﻴﻣ ﺮﻳﻮﺼﺗ زا ﻲﺸﺑور ﻲﻧ
ﻮﻧﺎﻧ تارذ ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ .
ﻞﻜﺷ 2 : ﻂﺳﻮﺗ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ ﺪﺻرد ﺖﻈﻠﻏ
ﺎﻫ ي ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻮﻧﺎﻧ تارذ يﺎﻣد رد ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ ﺰﻟﻮﻠﺳ 37ºC
pH ، لدﺎﻌﻣ 1
نﻮﻴﺳﺎﺑﻮﻜﻧا نﺎﻣز و 5
/ 0 ﺖﻋﺎﺳ .
ﻞﻜﺷ 3 : ﻂﺳﻮﺗ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ ﺪﺻرد ﺖﻈﻠﻏ
ﺎﻫ ي ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻮﻧﺎﻧ تارذ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ ﺰﻟﻮﻠﺳ يﺎﻣد رد ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ هﺪﺷ
37ºC pH ، لدﺎﻌﻣ 7
نﻮﻴﺳﺎﺑﻮﻜﻧا نﺎﻣز و 5
/ 0 ﺖﻋﺎﺳ . ﺢﻄﺳ رد يارد ﻲﻨﻌﻣ هرﺎﺘﺳ ﺖﻣﻼﻋ 0.5
ار رد ﺎﻘﻣ ﻳ ﻪﺴ ﺮﻳﺎﺳ ﺎﺑ هوﺮﮔ ﺎﻫ نﺎﺸﻧ ﻣ ﻲ ﺪﻫد .
ﻞﻜﺷ 4 : ﻂﺳﻮﺗ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ ﺪﺻرد ﺖﻈﻠﻏ
ﺎﻫ ي ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻮﻧﺎﻧ تارذ يﺎﻣد رد ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ ﺰﻟﻮﻠﺳ 37ºC
pH ، لدﺎﻌﻣ 13
نﻮﻴﺳﺎﺑﻮﻜﻧا نﺎﻣز و 5
/ 0 ﺖﻋﺎﺳ .
ﻦﻴـﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬـﺟ ﺖـﻴﻠﺑﺎﻗ ﻲـﺳرﺮﺑ ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا زا فﺪﻫ B1
ﺎﺑ هﺪﺷ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ تارذ ﻮﻧﺎﻧ ﻂﺳﻮﺗ ﺮﻣﺎﺘﭘآ
و يﺪﻴـﺳا ﻂﻳاﺮـﺷ رد
ﻲﺜﻨﺧ و يزﺎﺑ دﻮﺑ
. ﺖﺴﺨﻧ ﺖﻴﻠﺑﺎﻗ ﻦﻳا ﻲﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ ﻮﻧﺎـﻧ
ﺰﻟﻮﻠـﺳ
لﻮـﻜﻟﻮﻣ ﺎﺑ ﺲﭙﺳ و ﺪﻳدﺮﮔ ﺰﺘﻨﺳ ﺮﻣﺎـﺘﭘآ
ﺪـﻳدﺮﮔ ﻪـﮔوﮋﻧﻮﻛ .
رد
ﺰﺘﻨـﺳ ياﺮـﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا ﻮﻧﺎـﻧ
ﺰﻟﻮﻠـﺳ شور زا ﻫ ـﻴ ﻟورﺪ ﻴ ﺰ ـﺳا ﻴ ﺪ ي
ﺰﻴﻧ ﻦﻴﻘﻘﺤﻣ ﺮﻳﺎﺳ ﻂﺳﻮﺗ ًﻼﺒﻗ ﻪﺘﺒﻟا ﻪﻛ ﺪﻳدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا مﺎﺧ ﺰﻟﻮﻠﺳ دﻮﺑ هﺪﻳدﺮﮔ شراﺰﮔ )
9 ( . ﺖـﺴﺨﻧ نﻮﻴﺳﺎﮔوﮋﻧﻮﻛ ياﺮﺑ ﻦﻴﻨﭽﻤﻫ
هوﺮﮔ ﺎﺑ ﺰﻟﻮﻠﺳ تارذ ﻮﻧﺎﻧ يﺎـﻫ
ﻞﻴـﺴﻛﻮﺑﺮﻛ ﺎـﺑ ﺲﭙـﺳ و حﻼـﺻا
لﻮﻜﻟﻮﻣ ﺮﻣﺎﺘﭘآ حﻼﺻا هﺪﺷ ﻦﻴﻣآ هوﺮﮔ ﺎﺑ ﺪـﻳدﺮﮔ ﻪﮔوﮋﻧﻮﻛ
. رد
،نﻮﻴــﺳﺎﮔوﮋﻧﻮﻛ شور ﻦــﻳا ﺎﻬﻧرد
ــﻳ ﺖ دﺎــﺠﻳا يﺪــﻴﻣآ ﺪــﻧﻮﻴﭘ
ﻲﻣ ،ددﺮﮔ ﻪﺑ ﻮﺤﻧ ي ﻪﻛ لﻮﻜﻟﻮﻣ رد ﻞﻴﺴﻛﻮﺑﺮﻛ هوﺮﮔ ﻦﻴﺑ طﺎﺒﺗرا
ﻮﻧﺎﻧ ﺰﻟﻮﻠﺳ زا ﻳ ﻚ فﺮﻃ ﻦﻴﻣآ هوﺮﮔ و ﺮﻣﺎﺘﭘآ رد
حﻼـﺻا هﺪـﺷ زا
راﺮﻗﺮﺑ ﺮﮕﻳد ﻲﻓﺮﻃ ﻣ
ﻲ ددﺮﮔ ) 11
، 10 ( . ﻂﺳﻮﺗ يﺪﻴﻣآ ﺪﻧﻮﻴﭘ ﻦﻳا
FTIR شور ﻞﺑﺎﻗ تﺎﺒﺛا ﺖﺳا .
ﻲﺑﺎـﻳ ﻪـﺼﺨﺸﻣ و هﺪـﺷ ﻪـﮔوﮋﻧﻮﻛ ﺰﻟﻮﻠـﺳ تارذ ﻮﻧﺎﻧ ﻪﻴﻬﺗ زا ﺪﻌﺑ نآ ﺎﻫ رد ﻲﻟﻮـﻜﻟﻮﻣ بﺬﺟ ترﺪﻗ نآ
ﺎـﻫ pHرد
ﻒـﻠﺘﺨﻣ يﺎـﻫ
ﺪﻳدﺮﮔ ﻲﺑﺎﻳزرا .
بﺎﺨﺘﻧا ﻞﻴﻟد ﺪـﻨﻳاﺮﻓ ﻲـﺳرﺮﺑ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫpH
ﻮــﺑ شراﻮــﮔ ﻪــﻟﻮﻟ رد بﺬــﺟ د
. ﻪــﻤﻫ ﺪــﻨﻧﺎﻣ ﺰــﻴﻧ بﺬــﺟ ﺪــﻨﻳآﺮﻓ
ﺶﻨﻛاو ﻲﻣ ،ﻲﻳﺎﻴﻤﻴﺷ يﺎﻫ و ،نﺎـﻣز ،ﺎـﻣد ،ﺖـﻈﻠﻏ زا ﺮﺛﺄﺘﻣ ﺪﻨﻧاﻮﺗ
ﺪﺷﺎﺑpH . ﻦﻳا ﻪﻠﺌﺴﻣ و هﺪـﻳدﺮﮔ ناﻮـﻨﻋ ﺰـﻴﻧ ﻪﺑﺎـﺸﻣ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ رد
ﺳرﺮﺑدرﻮﻣ ﻲ
ﻪﺘﻓﺮﮔراﺮﻗ دﻮﺑ
) 15 - 12 ( . نﺎﻤﻫ رﻮﻃ ﻪﻛ رد ﺖﻤـﺴﻗ
ﻮﻧﺎـﻧ ﻂـﺳﻮﺗ ﻦﻴـﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬـﺟ ﺪﻨﻳآﺮﻓ ﺪﻳدﺮﮔ ﺮﻛذ ﺰﻴﻧ ﺞﻳﺎﺘﻧ هﺪـﺷ ﻪـﮔوﮋﻧﻮﻛ ﺰﻟﻮﻠﺳ تارذ ﻪـﺑ
رﻮـﻃ
ﺮﻴﺛﺄـﺗ ﺖـﺤﺗ ﻲﺒـﺴﻧ وpH
دﻮﺑ ﺖﻈﻠﻏ ﺖـﺷاد ﻪﺑﺎﺸﻣ تﺎﻘﻴﻘﺤﺗ ﺮﻳﺎﺳ ﺎﺑ ﻲﻠﻣﺎﻛ ﻲﮕﻨﻫﺎﻤﻫ ﻪﻛ
ﻧﻴ ﺖــﺴ و ــﻣ ﻲ ﺎﺑ ﻳ ﺘــﺴ ﻲ ﺮــﻈﻧزا ددﺮــﮔ ﻲﺑﺎــﻳزرا ﻲﻟﻮــﻜﻟﻮﻣ .
بﺬــﺟ
ﻂـــﺳﻮﺗ ﻦﻴـــﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ ﻮﻧﺎـــﻧ
تارذ ﻂـــﺳﻮﺗ هﺪـــﺷ ﻪـــﮔوﮋﻧﻮﻛ
ﻪــﻋﻮﻤﺠﻣ ا ي زا ﻧ ــﻴ وﺮ ي ﺎــﻫ ي و ﻚﻴﺗﺎﺘــﺳاوﺮﺘﻜﻟا ،ﻚﻴﺑﻮﻓورﺪــﻴﻫ
ﻲﻧژورﺪﻴﻫ ﺖﺳا
ﺮـﻴﻴﻐﺗ ﻪـﻛ ﻢﻳروﺎـﺑ ﻦـﻳا ﺮـﺑ ﺎـﻣ اﺬﻟ ًﻻﺎـﻤﺘﺣاpH
ﻪﺑ رﻮﻃ ﺎـﻳ ﻢﻴﻘﺘﺴﻣ ﻏ
ﻴ ﻘﺘـﺴﻣﺮ ﻴ ﻢ يﺎـﻫوﺮﻴﻧ يور ﺮـﺑ ـﺑ
ﻴ ﻦ ﻟﻮـﻜﻟﻮﻣ ﻲ
ﺛﺄﺗ ﻴ راﺬﮔﺮ ﺖﺳا ﻞﻘﺘـﺴﻣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻪﺑ طﻮﻨﻣ نآ تﺎﺒﺛا و ﻲﺳرﺮﺑ ﻪﻛ
ﺖــﺳا يﺮــﮕﻳد .
ﻪــﺘﻜﻧ ﻞــﺑﺎﻗ ﺚــﺤﺑ شور ﺮــﮕﻳد هزاﺪــﻧا
ﮔ ــﻴ ﺮ ي
ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ ﺖﺳا
. نﺎﻤﻫ رﻮﻃ ﺮﻛذ ﺰﻴﻧ رﺎﻛ شور ﺖﻤﺴﻗ رد ﻪﻛ
رد يرﻮﻧ بﺬﺟ شور زا ﻖﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳا رد ﺪﻳدﺮﮔ ﻃ
لﻮ جﻮـﻣ 340
ﺪﻳدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا ﺮﺘﻣﻮﻧﺎﻧ ﻪﻛاﺮﭼ
ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ لﻮﻜﻟﻮﻣ ﻦﻳا ردB1
لﻮﻃ جﻮﻣ ﻲﺑﺬﺟ ﻚﻴﭘ ياراد ﺖﺳا
) 17
، 16 ( و ـﻣ ﻲ ناﻮـﺗ نآ زا
رد ﺖـﻈﻠﻏ ﻦﻴــﻴﻌﺗ ياﺮـﺑ لﻮــﻠﺤﻣ
ﺎـﻫ ﻲﻳ ﺲﻧﺎــﺳرﻮﻠﻓ ﻪـﻠﺧاﺪﻣ ﻪــﻛ
ﺎﻣا ،دﺮﻛ هدﺎﻔﺘﺳا دراﺪﻧ دﻮﺟو يﺮﮕﻳد
ًﺎﻤﻠـﺴﻣ ﺖﺒـﺴﻧ شور ﻦـﻳا
ﻊﻳﺎﻣ ﻲﻓاﺮﮔﻮﺗﺎﻣوﺮﻛ شور ﻪﺑ رﺎﻛﺎﺑ
آ ﻲﻳ ﻻﺎـﺑ HPLC) ( ﻲـﺷور
ﺮــﺘﻤﻛ ﺖــﻗد و ﺖﻴــﺳﺎﺴﺣ ﺎــﺑ ﺖــﺳا
) 18 ( . و مﺮــﺗوﺰﻳا يﻮــﮕﻟا
ﺰﻴﻧ ﺰﻟﻮﻠﺳ تارذ ﻮﻧﺎﻧ ﻂﺳﻮﺗ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬﺟ ﺪﻨﻳآﺮﻓ ﻚﻴﺘﻨﻴﺳ دﻮﺑ جرﺎﺧ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا فاﺪﻫا زا .
مزﻻ ﻪـﺑ ﺮـﻛذ زا فﺪـﻫ ﺖـﺳا
،بﺬﺟ لﺪﻣ ﻪﺋارا ﺖﻬﺟ ﻲﺿﺎﻳر يﻮﮕﻟا ﻦﻳﺮﺘﻬﺑ ﻦﺘﻓﺎﻳ
ﭘﻴ ﺶ ﺑﻴ ـﻨ ﻲ
بﺬــﺟ ﺪــﻨﻳآﺮﻓ ﺖــﺳا
. ﺎــﺑ ﻪــﺑ ﺖــﺳد ،مﺮــﺗوﺰﻳا يﻮــﮕﻟا ندروآ
ﻲﻣ ار بذﺎﺟ رﺎﺘﻓر ناﻮﺗ ﻪﺑ
رﻮﻃ ﻖﻴﻗد ﭘﻴ ﺶ ﺑﻴ ﻨ ﻲ دﻮﻤﻧ . يﻮﮕﻟا ﻦﻳا
ﻲــﺿﺎﻳر ﻪــﺑ رﻮــﻃ هدﺎــﻣ و بذﺎــﺟ ﻲﻟﻮــﻜﻟﻮﻣ رﺎﺘﺧﺎــﺳ ﻪــﺑ يﺮﺛﺆــﻣ
بﺬﺟ هﺪﻧﻮﺷ ﻦﻴﺑ ﺶﻨﻛ و ﻢﺗا
ﺎـﻫ ي دراد ود ﻦـﻳا .
ﺎـﺠﻧآزا ﻲﻳ ﻪـﻛ
ﻣ يﺎﻫوﺮﻴﻧ ﺲﻟاورﺪﻧاو ،ﻲﻧژورﺪﻴﻫ ،ﻚﻴﺗﺎﺘﺳاوﺮﺘﻜﻟا ﺪﻨﻧﺎﻣ ﻲﻔﻠﺘﺨ
بﺬــﺟ ﺪــﻨﻳآﺮﻓ رد ﺎــﻫوﺮﻴﻧ ﻦــﻳا زا ﻲﻋﻮــﻤﺠﻣ ﺎــﻳ بﻮﻓورﺪــﻴﻫ و
ﻣ ﻲ ﺪﻧاﻮﺗ مﺮﺗوﺰﻳا و ﻚﻴﺘﻨﻴﺳ زا ﻲﻔﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫﻮﮕﻟا اﺬﻟ ،ﺪﺷﺎﺑ ﺮﺛﺆﻣ
ياﺮﺑ بذﺎﺟ ﺎﻫ ي و ﻒـﻠﺘﺨﻣ ﻪـﻠﻤﺟزا
سﺪـﺣ ﻞـﺑﺎﻗ بذﺎـﺟ ﻦـﻳا
ﺖﺳا ) 19 ( .
رذ ﻮﻧﺎﻧ رﺎﺑ ﻦﻴﻟوا ياﺮﺑ ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا رد هﺪـﺷ ﻪـﮔوﮋﻧﻮﻛ ﺰﻟﻮﻠﺳ تا
ﺮﻣﺎﺘﭘآ ﺎﺑ و ﻲﺳرﺮﺑ ﻪـﺑ
ناﻮـﻨﻋ
ﺪـﻳدﺮﮔ شراﺰـﮔ ﺐـﺳﺎﻨﻣ بذﺎـﺟ .
ﻪﺑﺎﺗ لﺎﺣ ﺷراﺰﮔ دﻮـﺟو ﻲﺗﺎـﻋﻼﻃا ﻊﺑﺎﻨﻣ رد هرذﻮﻧﺎﻧ عﻮﻧ ﻦﻳا زا ﻲ
ﻲﻤﻧ اﺬﻟ و ﺖﺳا ﻪﺘﺷاﺪﻧ ﻪﺴﻳﺎﻘﻣ ناﻮﺗ
ﻪﻨﻴﻣز يا دﺮﻳﺬـﭘ مﺎﺠﻧا يا .
ﺎـﺑ
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﻳا ﺞﻳﺎﺘﻧ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ رد رﺎﺘﺧﺎـﺳ ﻮﻧﺎـﻧ ﻦـﻳا زا ناﻮﺘﺑ ًﻻﺎﻤﺘﺣا
دﻮــﺟو ترﻮــﺻ رد ﺎــﺗ دﻮــﻤﻧ هدﺎﻔﺘــﺳا ﻲﻳاﺬــﻏ داﻮــﻣ ﻞــﺧاد ،ﻲﻳاﺬـﻏ هدﺎﻣ رد ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ بﺬـﺟ
هﺪـﺷ د زا ﺲﭙـﺳ و هﺎﮕﺘـﺳ
دﻮﺷ جرﺎﺧ شراﻮﮔ .
ﺎﺠﻧآزا ﻲﻳ ﻪـﻛ ﻦـﻳا ﻮﻧﺎـﻧ رﺎﺘﺧﺎـﺳ ﺲﻨـﺟ زا
ﻢﻳﺰـﻧآ و ﺖـﺳا ﺰﻟﻮﻠﺳ و ﻢـﻀﻫ ﻪـﺑ ردﺎـﻗ ﻲﻧﺎـﺴﻧا ﻲـﺷراﻮﮔ يﺎـﻫ
نآ بﺬﺟ ﻧﻴ
ﺖﺴ شراﻮﮔ هﺎﮕﺘﺳد رد ، ﺖﺳد
هدرﻮﺨﻧ ﻗﺎـﺑ ﻲ هﺪـﻧﺎﻣ
ﻂﻘﻓ و ﻪﺑ ناﻮـﻨﻋ
ﻲـﻣ ﻞـﻤﻋ بذﺎـﺟ ﺪـﻨﻛ
.
ﻲـﻣ ﻪﻴـﺻﻮﺗ رد ددﺮـﮔ
ﺐـﺳﺎﻨﻣ ﻲﻫﺎﮕـﺸﻳﺎﻣزآ ناﻮﻴﺣ يداﺪﻌﺗ يﺮﮕﻳد ﻞﻘﺘﺴﻣ ﺶﻳﺎﻣزآ ﺎـﺑ هاﺮـﻤﻫ ﺲﭙﺳ و دﺮﻴﮔ راﺮﻗ ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ ضﺮﻌﻣ رد و بﺎﺨﺘﻧا نآ ﻪﺑ ﻲﻳاﺬﻏ ،ﻢﺳ ﻦﻳا يوﺎـﺣ ﻪـﻛ دﻮـﺷ هﺪـﻧارﻮﺧ ﺎﻫ
ﻮﻧﺎـﻧ تارذ
نﺎــﻣز ﻲــﻃ و ﺪــﺷﺎﺑ هﺪــﺷ ﻪــﮔوﮋﻧﻮﻛ ناﺰــﻴﻣ ﻒــﻠﺘﺨﻣ يﺎــﻫ
نآ نﻮـﺧ و عﻮﻓﺪـﻣ ﻪـﻧﻮﻤﻧ رد ﻦﻴﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ
ددﺮـﮔ ﻲﺑﺎـﻳزرا ﺎـﻫ .
ﻪﭽﻧﺎﻨﭼ ﻦﻳا ﻲﻳارﺎﻛ ﺰﻴﻧ ﻪﻠﺣﺮﻣ ﻦﻳا رد ﻮﻧﺎﻧ
رﺎﺘﺧﺎﺳ ﺪﻴﻳﺄﺗ ﻪﺑ ﺪﺳﺮﺑ
نآ زا هﺪﻨﻳآ رد ناﻮﺘﺑ ﺪﻳﺎﺷ ﻪﺑ
ناﻮـﻨﻋ ﻦﻴـﺴﻛﻮﺗﻼﻓآ ﻢـﺳ بذﺎـﺟ
نﺎﺴﻧا ﻂﺳﻮﺗ ﻲﻳاﺬﻏ داﻮﻣ ﺎﺑ هاﺮﻤﻫ ﻧﻴ
ﺰ فﺮﺼﻣ دﻮﺷ .
ﺮﻜﺸﺗ و ﺮﻳﺪﻘﺗ
زا ﻞﺻﺎﺣ ﻪﻟﺎﻘﻣ ﻦﻳا ﺎﭘ
ﻳ نﺎ ﻪﻣﺎﻧ ﻢﻧﺎـﺧ تادﺎـﺴﻟا ﻪـﺒﻴﻃ ﻣ
ـﻴ ﺮ نﺎـﻘﻫد
ﺖﺳا . ﻖـﻴﻘﺤﺗ ﻦﻳا رد ﻪﻛ ﻲﻧﺎﺴﻛ ﻲﻣﺎﻤﺗ زا ﻪﻟﺎﻘﻣ ﻦﻳا نﺎﮔﺪﻨﺴﻳﻮﻧ
ﺗ لﺎــﻤﻛ ﺪــﻧدﺮﻛ يرﺎــﻳ ار ﺎــﻣ ﺮﻜــﺸ
ﺪــﻧرادار . ﻪــﺑ و ــﻳ هﮋ ﻞﻨــﺳﺮﭘ زا
ﻞﻤﻋ ﻪﺑ ﻲﻧارﺪﻗ ﺶﻫوﮋﭘ هﺎﮕﺸﻳﺎﻣزآ ﻣ
ﻲ آ ﻳ ﺪ .
References
1-Smith LE, RJ Stoltzfus, and A Prendergast. Food chain mycotoxin exposure, gut health, and impaired growth: a conceptual framework. Advances in Nutrition: An International Review Journal 2012;3(4):526- 531.
2-Gnonlonfin GJB, K Hell, Y Adjovi, P Fandohan ,DO Koudande, GA Mensah, A Sanni, and L Brimer.
A review on aflatoxin contamination and its implications in the developing world: A sub-Saharan African perspective. Critical reviews in food science and nutrition 2013;53(4):349-365.
3-Shirabe K, T Toshima, A Taketomi, K Taguchi, T Yoshizumi, H Uchiyama, N Harimoto, K Kajiyama, A Egashira, and Y Maehara. Hepatic aflatoxin B1‐DNA adducts and TP53 mutations in patients with hepatocellular carcinoma despite low exposure to aflatoxin B1 in southern Japan. Liver International 2011;31(9):1366-1372.
aflatoxin-contaminated corn and ethanol fermentation. Applied and environmental microbiology 1982;43(4):961-963.
5-Desheng Q, L Fan, Y Yanhu, and Z Niya. Adsorption of aflatoxin B1 on montmorillonite. Poultry Science 2005;84(6):959-961.
6-Rao SBN and RC Chopra. Influence of sodium bentonite and activated charcoal on aflatoxin M 1 excretion in milk of goats. Small Ruminant Research 2001;41(3):203-213.
7-Thom DC, JE Davies, JP Santerre, and S Friedman. The hemolytic and cytotoxic properties of a zeolite- containing root filling material in vitro. Oral Surgery, Oral Medicine, Oral Pathology, Oral Radiology, and Endodontology 2003;95(1):101-108.
8-Jebali A, SH Hekmatimoghaddam, A Behzadi, and I Rezapor. Antimicrobial activity of nanocellulose conjugated with allicin and lysozyme. cellulose 2013;20:2897–2907.
9-Charreau H, ML Foresti, and A Vazquez. Nanocellulose patents trends: a comprehensive review on patents on cellulose nanocrystals, microfibrillated and bacterial cellulose. Recent Pat Nanotechnol 2013;7(1):56-80.
10-Payne RJ, AM Daines, BM Clark, and AD Abell. Synthesis and protein conjugation studies of vitamin K analogues. Bioorg Med Chem 2004;12(22):5785-91.
11-Sperling RA and WJ Parak. Surface modification, functionalization and bioconjugation of colloidal inorganic nanoparticles. Philos Trans A Math Phys Eng Sci 2010;368(1915):1333-83.
12-Bueno DJ, CH Casale, RP Pizzolitto, MA Salvano, and G Oliver. Physical adsorption of aflatoxin B1 by lactic acid bacteria and Saccharomyces cerevisiae: a theoretical model. J Food Prot 2007;70(9):2148- 54.
13-Desheng Q, L Fan, Y Yanhu, and Z Niya. Adsorption of aflatoxin B1 on montmorillonite. Poult Sci 2005;84(6):959-61.
14-Hekmatimoghaddam S, A Jebali, and K Daliri. MgO-SiO2 Nanocomposite Can Adsorb Aflatoxin in Wheat Flour. J. Mater. Sci. Eng. B 2012;2(1):40-44.
15-Rao SBN and RC Chopra. Influence of sodium bentonite and activated charcoal on aflatoxin M1 excretion in milk of goats. Small Ruminant Research 2001;41(3):203-213.
16-Velasco J. Fluorometric measurement of aflatoxin adsorbed on florisil in minicolumns. J Assoc Off Anal Chem 1975;58(4):757-63.
17-Beljaars PR, FH Fabry, MM Pickott, and MJ Peeters. Quantitative fluorodensitometric measurement of aflatoxin B1 with a flying-spot densitometer. II. Comparative study of B1 measurements in spiked and naturally contaminated peanut products. J Assoc Off Anal Chem٥.-١٣١٠:(٦)٥٥;١٩٧٢
18-Farber P, I Brost, R Adam, and W Holzapfel. HPLC based method for the measurement of the reduction of aflatoxin B1 by bacterial cultures isolated from different African foods. Mycotoxin Res 2000;16 Suppl 2:141.
19-Febrianto J, AN Kosasiha, J Sunarsob, Y Jua, N Indraswati, and S Ismadji. Equilibrium and kinetic studies in adsorption of heavy metals using biosorbent: A summary of recent studies. J Hazard Mater 2009;162:616–645.
acidic, alkali, and Neutral Conditions
Mirdehghan T (MSc) 1, Hekmatimoghaddam SH (MD) 2, Jebali A (PhD) 3
1. MSc Student in Biochemistry, Payamnoor University, Taft, Yazd, Iran
2. Associate Professor, Department of Laboratory Sciences,Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran
3. Corresponding Author: Assistant Professor, Department of Advanced Medical Sciences and Technologies, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran
Abstract
Introduction: Aflatoxin leads to liver cancer, its removal in the foodstuff is very important. The aim of this study is to investigate the adsorption of aflatoxin B1 by nanocellulose conjugated with aptamer in acidic, alkali, and neutral conditions.
Methods: First, nanocellulose was synthesized by acid hydrolysis and then conjugated with aptamer by cross-linker. Then, serial concentrations of conjugated nanocellulose (0.6, 1.25, 2.5, 5, and 10 mg/mL) were separately mixed with aflatoxin solution (1000µg/mL), and incubated at 37 °C for 0.5 h at pH of 1, 7, and 13. Then, the percentage of aflatoxin adsorption was measured at 340 nm.
Results: The decrease of pH led to increase of adsorption up to 40%. Statistically, there was significant difference between the quantity of adsorption at acidic condition and the quantity of adsorption at alkali and neutral conditions (P<0.05).
Conclusion: Aflatoxin could be adsorbed by conjugated nanocellulose, and this power of adsorption is increased at acidic condition.
Keywords: Adsorption, Aflatoxin B1, Nanocellulose, Aptamer
