№ п/п
Исследуемых хозяйств Показатели
температура, ºС влажность, % индекс теплового стресса
1 ИП «Каримов» 32,6 ± 1,24 33,8±0,80 80
2 СПК «ПЗ Алматы» 32,8 ± 1,05 33,6±0,50 80
3 ТОО «Какпатас-Кордай» 34,6 ± 1,05 37,4 ±0,50 82
При определении индекса теплового стресса в трех хозяйствах уровень теплового стресса достиг порогового значения (80-89). То есть ИП «Каримов» - 80, СПК «ПЗ Алматы» - 80, ТОО «Какпатас-Кордай» - 82. Эти показатели способствуют к возникновению у животных теплового стресса.
Выводы
1. Таким образом, в хозяйстве ИП «Каримов» в летний период неблагоприятными по основным параметрам микроклимата были все зоны, но в центральной зоне наблюдалось сочетание высокой температуры, недостаточной влажности и скорости движения воздуха.
В зимний период в северной и южной зонах отмечалась низкая температура и высокая скорость движения воздуха.
Во втором хозяйстве СПК «ПЗ Алматы» южная зона отмечена как неблагополучная в холодное время года по температуре, относительной влажности и скорости движения воз- духа. В теплое время года во всех зонах наблюдался неоптимальный микроклимат: высокая температура, низкая влажность и скорость движения воздуха.
В третьем хозяйстве ТОО «Какпатас-Кордай» центральная зона в течение всего года более загазованная, чем остальные зоны корпуса. Неблагоприятной по комплексу параметров оказалась южная зона: зимой отмечалась низкая температура, высокая влажность и скорость движения воздуха, в переходные периоды - при относительно высокой температуре и влажности - недостаточная подвижность воздуха.
2. При определении индекса теплового стресса в трех хозяйствах уровень теплового стресса достиг порогового значения (80-89). То есть ИП «Каримов» - 80, СПК «ПЗ Алматы» - 80, ТОО «Какпатас-Кордай» - 82. Эти показатели свидетельствуют о том, что приводит к возникновению теплового стресса. Температуру воздуха всегда следует рассматривать на фоне влажности. Если высокая температура в помещении или на пастбище сочетается с низкой влажностью и повышенной скоростью движения воздуха, организму гораздо проще обеспечить теплоотдачу за счет испарения пота или учащения дыхания.
Список литературы
1. Иванов Ю.А. Направления технической модернизации при производстве продукции животноводства // Вестник ВНИИМЖ. 2015. №1. С. 3-8.
2. Пат. 161235 РФ. Устройство контроля параметров микроклимата в помещениях для содержания с.-х. животных / Вторый В.Ф. и др. Опубл. 10.04.16
3. Вторый В.Ф., Гордеев В.В., Вторый С.В., Ланцова Е.О. Оценка состояния температурно-влажностного режима в коровнике с использованием графического информационного моделирования // Вестник ВНИИМЖ №4(24), 2016 г. С. 67-72.
4. Токаева М.О., Тлеубайкызы А., Əділбекова А.А., Кудайбергенова Ж.Н. Сиырдың сүттілігі мен сүттің санитариялық сапасына желінсаудың əсері // «Ізденістер, нəтижелер- Исследования, результаты» №2(78) 2018 г. Алматы. ISSN 2304-334-02.
63
5. Польховская Н. Тепловой стресс и его влияние на продуктивность дойных коров //
Ценовик. 2015 г. №7.
6. Мыскина О., Казусь А. Под зонтиком. Тентовая архитектура: конструкции, форма и образ // Эволюция кровли. - М: [б.н.], 2004 г.. - №3.
ЖЫЛ МАУСЫМЫНА БАЙЛАНЫСТЫ СИЫР ҚОРАЛАРЫНЫҢ ƏР ТҮРЛІ НҮКТЕЛЕРІНДЕГІ МИКРОКЛИМАТ КӨРСЕТКІШТЕРІНІҢ ДИНАМИКАСЫ
Мырзабеков Ж.Б., Барахов Б.Б., Алпысбаева Г.Е., Алиханов К.Д.
Қазақ ұлттық аграрлық университеті Аңдатпа
Мал шаруашылығы қоралары микроклиматының динамикасын бақылау-шаруашылық мамандарының басты міндеттерінің бірі, сондай-ақ, сауын табындағы сиырларға арналған микроклиматтың негізгі параметрлерінің нормативтеріне (бокстарда) назар аудару.
Кейінгі зерттеушілердің нəтижелерінде зерттелетін шаруашылықтардың аймақтары мен нүктелері бойынша жылдың əр түрлі маусымдарындағы микроклимат параметрлерінің белгілі бір динамикасын анықтайды.
Жоғарыда келтірілген мəселелерге байланысты, біздің зерттеулеріміздің мақсаты – мал шаруашылығы қорасыныңəртүрлі нүктелерінде микроклимат параметрлерінің арасындағы өзара байланысты анықтау. Температура-ылғалдылық индексі сиырлар үшін қолайлы жағдайлардың болуын немесе болмауын көрсетеді жəне құрғақ жəне ылғалды термометрлердің көрсеткіштері бойынша анықталады. Егер ТЫИ кейбір шекті мəннен асып кетсе, малдарға қолайсыз жағдай туындайды деп саналады. Бұл индекс тек температуралық көрсеткіштерге қарағанда дəл болып табылады, ол жануарлардың салқындау қажеттілігін дұрыс бағалауға, яғни, жылу стресс мəселесін шешуге тиімді шараларды қабылдауға мүмкіндік береді.
Бұл мақалада зерттелетін шаруашылықтардың микроклиматының көрсеткіштері анықталып, жылу стресстің көрсеткіштері жоғары болатындығы анықталды. Жазғы кезеңде микроклимат көрсеткіштері нормадан ауытқитындығы анықталды.
Кілт сөздер: микроклимат, жыл мезгілдері, жылулық стресс, THI индексі, сүт өндіріс кешендері.
DYNAMICS OF MICROCLIMATE INDICATORS IN DIFFERENT AREAS OF COWS DEPENDING ON THE SEASON OF THE YEAR
Myrzabekov J.B., Barakhov B.B., Alpysbayeva G.E., Alihanov K.D.
Kazakh national agrarian university Abstract
Observation of the dynamics of the microclimate of livestock premises is one of the main tasks of specialists of farms, it is adopted to focus on the standards of the main parameters of the microclimate for cows of milking herd at careless content (in boxes).
Subsequent studies reveal certain dynamics of microclimate parameters in different seasons of the year by zones and points of studied farms.
In connection with the above, the purpose of our research is to determine the relationship between microclimate parameters at certain points of the livestock room. The temperature and humidity index shows the presence or absence of comfortable conditions for cows and is determined by the readings of dry and wetted thermometers. It is considered that if TVI exceeds some limit value, discomfort occurs. This index is more accurate than just temperature indicators, it
64
allows to reliably assess the need of animals for cooling, and therefore to take measures that can solve the problem of heat stress.
This article defines the microclimate indicators of the farms under study and identifies high rates of heat stress. When determining microclimate indicators in the summer period deviate from the norm.
Keywords: microclimate, seasons of the year, temperature stress, THI index, dairy complexes.
УДК 619:615.375:578.821:578.56
ИСПЫТАНИЕ БЕЗВРЕДНОСТИ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ НОДУЛЯРНОГО ДЕРМАТИТА Нисанова Р.К., Копеев С.К., Рыстаева Р.А., Тулендибаев А.Б., Орынбаев М.Б.
РГП на ПХВ «Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности»
КН МОН РК, п.г.т. Гвардейский Аннотация
В статье представлены результаты оценки безвредности вакцины против нодулярного дерматита КРС из штамма «Neethling-RIBSP». Испытание показало, что вакцина безвредна для КРС, кроликов и белых мышей. После иммунизации в дозе 100000 ТЦД50см3
вакцинированные КРС оставались клинически здоровыми. В крови и назальных смывах КРС вирус не обнаруживался. Кролики, вакцинированные внутримышечно в заднюю ногу в дозе 0,5 см3 и белые мыши, иммунизированные внутрибрюшинно в дозе 0,1 см3 в течение 21 суток не выявлено каких-либо клинических проявлений болезни. Патологоанатомические изменения у подопытных кроликов и белых мышей не были зафиксированы. Путем пяти слепых последовательных пассажей на КРС показано, что вирус используемый в составе вакцины не реверсибелен.
Ключевые слова: вирус, нодулярный дерматит, вакцина, безвредность, ревер- сибельность.
Введение
Нодулярный дерматит (НД) эмерджентная трансграничная болезнь крупного рогатого скота (КРС) распространена во многих странах Африки, в настоящее время получил широкое распространение в ближнем востоке, Европе и Азии [1]. В июле 2016 г. впервые зарегистрирована среди поголовья крупного рогатого скота в Атырауской области Республики Казахстан (OIE). Существует огромный риск рапространения заболевания в другие регионы страны.
Вакцинация животных остается наиболее эффективным способом борьбы с НД КРС, где данная болезнь является эндемичной. Отсутствие вариантов лечения вируса комковидной кожной болезни подчеркивает необходимость использования эффективной вакцинации для предотвращения заболевания [2]. В настоящее время для профилактики НД КРС в мире применяют ряд живых вакцин изготовленных из гомологичного и гетерологичных штаммов отличающихся различной степенью реактогенности и продолжительностью создаваемого у КРС иммунитета [3].
Гетерологичные вирусы наряду с положительными качествами имеют ряд недостатков:
иммунитет у животных формируется сроком на 5-6 месяцев, поэтому необходима двукратная иммунизация их в течение года. Эффективность использования данных штаммов для профилактики НД КРС составляла 50-60%. В связи с этим предпочтение отдавали культуральным вакцинам из гомологичного вируса [4].
Аттенурованные штаммы используемые в вакцинах против НД КРС получены классическим методом т.е. мутированы случайным образом, применяются во многих странах и обеспечивают стойкий иммунитет. Однако существующие вакцины вызывают у
65
вакцинированных животных поствакцинальные осложнения (до 10%), которое проявляется местной реакцией с образованием небольших уплотнений на месте введения, повышением температуры тела, снижением надоев молока, появлением сыпи по всему телу и др. [5]. Еще одна проблема существующих вакцин против НД это выделение вакцинного вируса. Из всего вышесказанного, очевидно, что вакцины против НД КРС на основе гомологичных и гетерологичных штаммов нуждаются в дальнейшем улучшении.
На территории Казахстана разрешены к использованию вакцины только из гомологичного штамма. Отечественных вакцин из гомологичных штаммов в Республике Казахстан нет, тем не менее научные заделы имеются [6]. Поэтому получение отечественной вакцины из гомологичного вируса является актуальной задачей. В связи с этим существует необходимость в создании безопасной и иммуногенной вакцины против бугорчатки, обеспечивающей защиту от данной вирусной инфекции.
Цель данного исследования определение безвредности живой аттенуированной вакцины против НД КРС из штамма «Neethling-RIBSP».
Материалы и методы 2.1. Вакцина
В работе использовали вакцину, приготовленная согласно инструкции по изготовлению и контролю вакцины против нодулярного дерматита из штамма «Neethling-RIBSP»
утверждённой 25.04.2018 г. Биологическая активность вакцин составляла 5,5 ТЦД50/см3. 2.2. Животные
Для определения безвредности вакцины использовали 4 КРС в возрасте 6 месяцев, 4 КРС в возрасте 18 месяцев, 4 кролика весом 1,5-2 кг и 6 нелинейных белых мышей массой 18-22 грамма.
Реверсибельность вируса изучали на 6 КРС в возрасте 7-9 месяцев.
2.3. Дизайн эксперимента
Испытания безвредности вакцины на соответствие СТ 405-1919-04ГП-106–2018 проводились согласно календарного плана и рабочей программы.
Перед проведением опыта у КРС были отобраны сыворотки крови и исследовали на наличие антител к вирусу нодулярного дерматита КРС.
КРС вакцину вводили подкожно в среднюю треть шеи по 2 мл в дозе 100 000 ТЦД50. Кроликам вакцину вводили внутримышечно по 0,5 см3 в заднюю ногу, а белым мышам вакцину вводили внутрибрюшинно в дозе 0,1 см3.
КРС подвергали ежедневному клиническому осмотру с регистрацией данных на протяжении 30 суток. За кроликами и белыми мышами вели клиническое наблюдение в течение 21 суток.
Вакцина считалась безвредной, если после вакцинации все привитые КРС в течение срока наблюдения оставались клинически здоровыми. Лабораторные животные на 21 сутки после вакцинации усыплялись и проводили патологоанатомическое вскрытие животных.
Вакцину считали безвредной, если во внутренних органах лабораторных животных отсутствовали какие-либо патологоанатомические изменения.
Для определения реверсибельности вакцинного вируса проводили пяти слепых последовательных пассажа на КРС.
У вакцинированных телят на 1-21 сутки отбирали кровь и назальные смывы.
Собранные образцы исследовали в ПЦР на наличие вируса нодулярного дерматита КРС.
2.4 ПЦР исследование
Исследование цельной крови, смывов из слизистых верхних дыхательных путей на виремию и вирусовыделение в окружающую среду проводили со специфическими праймерами (Ireland and Binepal 1998 F 5’-TCC-GAG-CTC-TTT-CCT-GAT-TTT-TCT-TAC- TAT-3’ R 5’-TAT-GGT-ACC-TAA-ATT-ATA-TAC-GTA-AAT-AAC-3’), детектируя ПЦР- продукт на 1,5% агарозном геле, размером 192 пары оснований. Постановку ПЦР осуществляли с помощью набора Силекс.
66
Денатурацию ДНК в исследуемой пробе проводили при температуре 950С, гибридизацию специфических олигонуклеотидных затравок, при температуре 590С и синтез с них комплементарных цепей ДНК с помощью термостабильной ДНК-полимеразы при температуре 720С. Амплификация проводилась в течение 35 циклов.
2.5 Реакция диффузной преципитации
Реакцию диффузной преципитации по стандартной методике. Реакцию проводили в 1.0% агаре Дифко на физиологическом растворе. Культуральный концентрированный специфический и нормальный антигены, специфическую и нормальную сыворотки получали из лаборатории Диагностика инфекционных болезней РГП НИИПББ.
2.6 Определение титра вируснейтрализующих антител
Реакцию нейтрализации с определением титра вируснейтрализующих антител проводили с маркерным вирусом НД со вставкой GFP, активность которого в первичной культуре ТЯ составляла 5,75 lg ТЦД50/см3, который развели до рабочей дозы вируса (РДВ) – 100 ТЦД. Инактивированную при 56оС сыворотку развели до 1:32, затем каждое разведение сыворотки в соотношении 1:1 (500 мкл + 500 мкл) смешивали с 2-кратной рабочей дозой вируса и ставили на контакт при +6 (+2)оС на ночь. Затем в 4 повторностях заражали пробирки с 1-2 суточным монослоем ТЯ. Оценку результатов проводили на 8-10 сутки в люминесцентном микроскопе Люмам по ярко-зеленой флюоресценции.
Результаты и их обсуждение
Одним из главных параметров вакцинных препаратов является безвредность используемого в его составе штамма вируса для естественно восприимчивых и лабораторных животных. Согласно требованиям МЭБ «Руководство по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных (2019)» вирус, используемый в составе вакцины против НД КРС должен быть безопасным для всех пород КРС, включая молодых и стельных животных. Штамм используемый в составе вакцины не должен передаваться от вакцинированного животного интактным, а также не должен быть реверсибельным.
Сотрудниками НИИПББ КН МОН РК во время эпизоотии в Атырауской области в 2016 году от больных животных был выделен вирус и депонирован в коллекции института под названием «Dermatitis nodulares/2016/Atyrau/KZ» вируса нодулярного дерматита КРС. Из эпизоотического вируса путем последовательных и перемежающихся пассажей на различных видах культур клеток и развивающихся куриных эмбрионах нами был получен аттену- ированный штамм вируса нодулярного дерматита КРС. Полученный штамм был адаптирован на первично-трипсинизированной культуре клеток тестикулы ягнят (ТЯ) и перевиваемой культуре клеток почки быка (МДВК). Биологическая активность аттенуированного вируса составила 5,5-6,0 lg TCD50/см3.
С целью определения безвредности аттенуированный вирус вводили КРС, кроликам и белым мышам. До начала опыта у всех подопытных животных были собраны сыворотки крови и исследованы на наличие антител к вирусу НД КРС. Исследование сывороток крови опытных животных в реакции нейтрализации и реакции диффузионной преципитации до введения вакцины показало, что животные свободны от антител к вирусу НД КРС.
Клиническое наблюдение за вакцинированными КРС срок наблюдения показало, что все вакцинированные животные оставались клинически здоровыми. На 6 сутки месте введения вируса у одного животного 6 месячного возраста было выявлено небольшое уплотнение размером 1 см, которое рассосалось на 17 сутки. Температура тела у всех животных была в пределах физиологической нормы (рис.1, 2).
67