KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING
FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK ETANOL DARI BEBERAPA JENIS KULIT
JERUK
SKRIPSI
OLEH:
DEWY CHITRA BR GINTING
NIM 101524012
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING
FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK ETANOL DARI BEBERAPA JENIS KULIT
JERUK
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
DEWY CHITRA BR GINTING
NIM 101524012
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING
FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK ETANOL DARI BEBERAPA JENIS KULIT
JERUK
OLEH:
DEWY CHITRA BR GINTING
NIM 101524012
Dipertahankan dihadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : Juli 2012
Pembimbing I, Panitia Penguji,
Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt. NIP 194909061980032001 NIP 195108161980031002
Pembimbing II, Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt. NIP 194909061980032001
Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt. NIP 195304031983032001 NIP 195406281983031002
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt NIP 195107231982032001 Medan, Juli 2012
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Dekan,
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat kasih dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul ”Karakterisasi Simplisia, Skrining Fitokimia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol dari Beberapa Jenis Kulit Jeruk”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan fasilitas selama masa pendidikan. Ibu Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt., dan Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan nasehat selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Ibu Dra. Sudarmi, M.Si., Apt., selaku penasehat akademis yang memberikan bimbingan kepada penulis selama ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah mendidik selama perkuliahan. Bapak dan Ibu Kepala Laboratorium Penelitian dan Farmakognosi yang telah memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penelitian. Bapak Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt., Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt., dan Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang memberikan masukan, kritik, arahan dan saran dalam penyusunan skripsi ini.
pengorbanannya dengan tulus dan ikhlas, untuk adik tersayang, dan teman-teman yang selalu setia memberi doa, dorongan dan semangat.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangannya, oleh karena itu sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.
Medan, Juli 2012 Penulis,
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DARI BEBERAPA
JENIS KULIT JERUK
ABSTRAK
Pemanfaatan kulit buah jeruk belum dikenal secara luas oleh masyarakat, sedangkan kulit buah jeruk masih dimungkinkan mempunyai manfaat lain. Pada penelitian ini yang diteliti adalah kulit buah dari jeruk kesturi (Citrus microcarpa
Bunge), jeruk lemon (Citrus limon (L.) Osbeck), jeruk purut (Citrus hystrix DC.), dan jeruk bali (Citrus maxima (Burm.) Osbeck) yang kesemuanya termasuk famili
Rutaceae. Kulit buah jeruk memiliki kandungan kimia yang berpotensi sebagai antioksidan yang dapat menetralkan radikal bebas. Tujuan penelitian ini adalah untuk melakukan karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, dan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol simplisia kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali.
Ekstrak etanol simplisia kulit buah jeruk tersebut diatas dapat diperoleh secara maserasi dengan pelarut etanol 96%. Selanjutnya, ekstrak dipekatkan menggunakan alat penguap vakum putar dan dikeringkan menggunakan freeze dryer sehingga diperoleh ekstrak kental. Uji aktivitas antioksidan terhadap ekstrak etanol simplisia kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali dilakukan dengan metode pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH) setelah didiamkan selama 60 menit pada suhu kamar dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 516 nm.
buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali sangat lemah dibandingkan dengan vitamin C.
SIMPLEX CHARACTERIZATION AND PHYTOCHEMICAL SCREENING WITH ANTIOXIDANT ACTIVITIES TEST OF ETHANOL EXTRACT OF SOME SPECIES CITRUS PEEL
ABSTRACT
The utilization of citrus peels is not yet widely known by the public, while the peel of citrus fruits is still possible to have other benefits. In this research, which examined are musk lime (Citrus microcarpa Bunge), citrus limon (Citrus limon (L.) Osbeck), kaffir lime (Citrus hystrix DC.), and grapefruit (Citrus maxima (Burm.) Osbeck) all of which belong to the family Rutaceae. Citrus peels contain chemicals that are potentially as antioxidants that can neutralize free radicals. The aim of this research is to do simplex characterization, phytochemical screening, and the antioxidant activity of ethanol extract of musk peel, limon peel, kaffir peel, and grapefruit peel.
Ethanol extract of citrus peels were produced by maceration method with 96% ethanol solvent. After extraction, extracts were concentrated using rotary evaporatot and dried by freeze dryer. Then, the antioxidant activity of extracts were tested using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH) radical scavenging method after incubated for 60 minutes at room temperature and a wavelength of 516 nm.
The result of simplex characteristization of kaffir peel meet the requirements of Materia Medika Indonesia, while the result of simplex characteristization of musk peel, limon peel, and grapefruit peel not listed on Materia Medika Indonesia. Kaffir peel simplex have the water content value 5.99%, the water soluble extract value were 22.33%, the ethanol soluble extract value were 21.52%, the total ash of simplex value was 7.75%, and the acid insoluble of simplex ash value was 0.56%. Musk peel simplex have the water content value 7.99%, the water soluble extract value were 27.15%, the ethanol soluble extract value were 10.68%, the total ash of simplex value was 7.81%, and the acid insoluble of simplex ash value was 0.90%. Limon peel simplex have the water content value 7.96%, the water soluble extract value were 21.17%, the ethanol soluble extract value were 17.44%, the total ash of simplex value was 4.57%, and the acid insoluble of simplex ash value was 0.38%. Grapefruit peel simplex have the water content value 8.99%, the water soluble extract value were 17.52%, the ethanol soluble extract value were 16.25%, the total ash of simplex value was 4.27%, and the acid insoluble of simplex ash value was 0.26%. Based on phytochemical screening, a whole simplex of citrus peels contains flavonoid, glycosides, tannin, and steroid/triterpenoid. The result of antioxidant activity test using DPPH radical scavenging method shows that the IC50 of ethanol extract of musk peel simplex is 206.595 ppm, the IC50 of ethanol extract of limon peel simplex is 210.330 ppm, the IC50 of ethanol extract of kaffir peel simplex is 258.640 ppm, the IC50 of ethanol extract of grapefruit peel simplex is 342.98 ppm and the IC50 of vitamin C is 4.025 ppm. The result of antioxidant activity test all of ethanol extract of citrus peels simplex were very weak than vitamin C.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
HALAMAN JUDUL ... ii
HALAMAN PENGESAHAN SKRIPSI ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... viii
DAFTAR ISI ... ix
DAFTAR TABEL ... xiv
DAFTAR GAMBAR ... xv
DAFTAR LAMPIRAN ... xvi
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Perumusan Masalah ... 3
1.3 Hipotesis ... 3
1.4 Tujuan Penelitian ... 4
1.5 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Uraian Tumbuhan ... 5
2.1.1 Jeruk Kesturi ... 5
2.1.2 Jeruk Lemon ... 6
2.1.4 Jeruk Bali ... 9
2.2 Ekstraksi ... 11
2.3 Radikal Bebas ... 13
2.4 Antioksidan ... 14
2.4.1 Vitamin C ... 15
2.4.2 Flavonoid ... 16
2.5 Spektrofotometri UV- Visible ... 17
2.6 Metode Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH ... 18
2.6.1 Pelarut ... 20
2.6.2 Pengukuran absorbansi- panjang gelombang ... 20
2.6.3 Waktu pengukuran ... 20
BAB III METODE PENELITIAN ... 22
3.1 Alat ... 22
3.2 Bahan ... 22
3.3 Penyiapan Bahan Tumbuhan ... 23
3.3.1 Pengumpulan bahan tumbuhan ... 23
3.3.2 Identifikasi tumbuhan ... 23
3.3.3 Pembuatan simplisia ... 23
3.4 Pembuatan Pereaksi ... 24
3.4.1 Pereaksi Bouchardat ... 24
3.4.2 Pereaksi Mayer ... 24
3.4.3Pereaksi Dragendroff ... 24
3.4.4 Pereaksi Molish ... 24
3.4.6 Pereaksi asam sulfat 2 N ... 25
3.4.7 Pereaksi natrium hidroksida 2 N ... 25
3.4.8 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ... 25
3.4.9 Pereaksi besi (III) klorida 1% ... 25
3.4.10 Pereaksi kloralhidrat ... 25
3.4.11 Pereaksi Liebermann-Burchard ... 25
3.4.12 Larutan DPPH 0,5 mM ... 25
3.5 Pemeriksaan Makroskopik dan Mikroskopik Kulit Buah Jeruk Segar ... 26
3.5.1 Pemeriksaan makroskopik ... 26
3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 26
3.6 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ... 26
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik ... 26
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 27
3.6.3 Penetapan kadar air ... 27
a. Penjenuhan toluen ... 27
b. Penetapan kadar air simplisia ... 27
3.6.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air ... 28
3.6.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol ... 28
3.6.6 Penetapan kadar abu total ... 28
3.6.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam ... 29
3.7 Skrining Fitokimia ... 29
3.7.1 Pemeriksaan alkaloid ... 29
3.7.2 Pemeriksaan glikosida ... 30
3.7.4 Pemeriksaan flavonoid ... 31
3.7.5 Pemeriksaan tanin ... 31
3.7.6 Pemeriksaan saponin ... 31
3.7.7 Pemeriksaan antrakinon ... 31
3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Jeruk Kesturi, Lemon, Purut, dan Bali ... 32
3.9 Pengujian Kemampuan Antioksidan Secara Spektrofotometer UV-visible ... 32
3.9.1 Prinsip metode pemerangkapan radikal bebas DPPH .... 32
3.9.2 Pembuatan larutan blanko ... 32
3.9.3 Pembuatan larutan induk ... 33
3.9.3.1 Pembuatan larutan induk sampel uji ... 33
3.9.3.2 Pembuatan larutan induk vitamin C ... 33
3.9.4 Pembuatan larutan uji ... 33
3.9.4.1 Larutan uji ekstrak etanol kulit buah jeruk ... 33
3.9.4.2 Larutan Uji Vitamin C ... 33
3.9.5 Analisis persen pemerangkapan radikal bebas DPPH ... 34
3.9.6 Analisis nilai IC50 ... 34
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 35
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 35
4.2 Hasil Pemeriksaan Makroskopik dan Mikroskopik Kulit Buah Jeruk Segar ... 35
4.3 Hasil Karakteristik Simplisia ... 37
4.4 Hasil Skrining Fitokimia ... 40
4.6 Hasil Analisis Nilai IC50 ... 44
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 47
5.1 Kesimpulan ... 47
5.2.Saran ... 48
DAFTAR PUSTAKA ... 49
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia kulit buah jeruk
purut ... 39 Tabel 4.2 Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia kulit buah jeruk
kesturi, lemon, bali ... 39 Tabel 4.3 Hasil skrining fitokimia ... 41 Tabel 4.4 Penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan ekstrak
etanol kulit buah jeruk ... 42 Tabel 4.5 Penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Struktur kimia vitamin C ... 16
Gambar 2.2 Kerangka flavonoid ... 17
Gambar 2.3 Struktur dasar flavonoid ... 17
Gambar 2.4 Struktur kimia radikal bebas DPPH ... 18
Gambar 2.5 Resonansi DPPH ... 19
Gambar 2.6 Reaksi antara DPPH dengan atom H dari antioksidan ... 20
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Hasil identifikasi tumbuhan ... 51
Lampiran 2 Gambar tumbuhan jeruk, kulit buah jeruk, simplisia dan serbuk simplisia kulit buah jeruk ... 52
Lampiran 3 Gambar mikroskopik kulit buah jeruk ... 60
Lampiran 4 Gambar alat spektrofotometer ... 68
Lampiran 5 Bagan kerja pembuatan ekstrak etanol ... 69
Lampiran 6 Perhitungan pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia ... 70
Lampiran 7 Hasil uji antioksidan ... 84
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DARI BEBERAPA
JENIS KULIT JERUK
ABSTRAK
Pemanfaatan kulit buah jeruk belum dikenal secara luas oleh masyarakat, sedangkan kulit buah jeruk masih dimungkinkan mempunyai manfaat lain. Pada penelitian ini yang diteliti adalah kulit buah dari jeruk kesturi (Citrus microcarpa
Bunge), jeruk lemon (Citrus limon (L.) Osbeck), jeruk purut (Citrus hystrix DC.), dan jeruk bali (Citrus maxima (Burm.) Osbeck) yang kesemuanya termasuk famili
Rutaceae. Kulit buah jeruk memiliki kandungan kimia yang berpotensi sebagai antioksidan yang dapat menetralkan radikal bebas. Tujuan penelitian ini adalah untuk melakukan karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, dan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol simplisia kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali.
Ekstrak etanol simplisia kulit buah jeruk tersebut diatas dapat diperoleh secara maserasi dengan pelarut etanol 96%. Selanjutnya, ekstrak dipekatkan menggunakan alat penguap vakum putar dan dikeringkan menggunakan freeze dryer sehingga diperoleh ekstrak kental. Uji aktivitas antioksidan terhadap ekstrak etanol simplisia kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali dilakukan dengan metode pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH) setelah didiamkan selama 60 menit pada suhu kamar dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 516 nm.
buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali sangat lemah dibandingkan dengan vitamin C.
SIMPLEX CHARACTERIZATION AND PHYTOCHEMICAL SCREENING WITH ANTIOXIDANT ACTIVITIES TEST OF ETHANOL EXTRACT OF SOME SPECIES CITRUS PEEL
ABSTRACT
The utilization of citrus peels is not yet widely known by the public, while the peel of citrus fruits is still possible to have other benefits. In this research, which examined are musk lime (Citrus microcarpa Bunge), citrus limon (Citrus limon (L.) Osbeck), kaffir lime (Citrus hystrix DC.), and grapefruit (Citrus maxima (Burm.) Osbeck) all of which belong to the family Rutaceae. Citrus peels contain chemicals that are potentially as antioxidants that can neutralize free radicals. The aim of this research is to do simplex characterization, phytochemical screening, and the antioxidant activity of ethanol extract of musk peel, limon peel, kaffir peel, and grapefruit peel.
Ethanol extract of citrus peels were produced by maceration method with 96% ethanol solvent. After extraction, extracts were concentrated using rotary evaporatot and dried by freeze dryer. Then, the antioxidant activity of extracts were tested using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH) radical scavenging method after incubated for 60 minutes at room temperature and a wavelength of 516 nm.
The result of simplex characteristization of kaffir peel meet the requirements of Materia Medika Indonesia, while the result of simplex characteristization of musk peel, limon peel, and grapefruit peel not listed on Materia Medika Indonesia. Kaffir peel simplex have the water content value 5.99%, the water soluble extract value were 22.33%, the ethanol soluble extract value were 21.52%, the total ash of simplex value was 7.75%, and the acid insoluble of simplex ash value was 0.56%. Musk peel simplex have the water content value 7.99%, the water soluble extract value were 27.15%, the ethanol soluble extract value were 10.68%, the total ash of simplex value was 7.81%, and the acid insoluble of simplex ash value was 0.90%. Limon peel simplex have the water content value 7.96%, the water soluble extract value were 21.17%, the ethanol soluble extract value were 17.44%, the total ash of simplex value was 4.57%, and the acid insoluble of simplex ash value was 0.38%. Grapefruit peel simplex have the water content value 8.99%, the water soluble extract value were 17.52%, the ethanol soluble extract value were 16.25%, the total ash of simplex value was 4.27%, and the acid insoluble of simplex ash value was 0.26%. Based on phytochemical screening, a whole simplex of citrus peels contains flavonoid, glycosides, tannin, and steroid/triterpenoid. The result of antioxidant activity test using DPPH radical scavenging method shows that the IC50 of ethanol extract of musk peel simplex is 206.595 ppm, the IC50 of ethanol extract of limon peel simplex is 210.330 ppm, the IC50 of ethanol extract of kaffir peel simplex is 258.640 ppm, the IC50 of ethanol extract of grapefruit peel simplex is 342.98 ppm and the IC50 of vitamin C is 4.025 ppm. The result of antioxidant activity test all of ethanol extract of citrus peels simplex were very weak than vitamin C.
BAB I PENDAHULUAN
1.1Latar Belakang
Antioksidan adalah zat yang dapat menetralisir radikal bebas. Radikal bebas adalah molekul atau atom yang memiliki elektron yang tidak berpasangan sehingga menjadi radikal bebas reaktif. Radikal bebas reaktif ini sangat berbahaya sekali karena akan menangkap elektron dari senyawa lain seperti protein, lipid, karbohidrat, dan juga DNA, yang mengakibatkan kerusakan seperti katarak, kanker, dan penyakit degeneratif. Oleh karena itu maka tubuh kita membutuhkan suatu substansi penting yakni antioksidan yang dapat membantu melindungi tubuh dari serangan radikal bebas. Antioksidan mempunyai struktur molekul yang dapat memberikan elektronnya kepada molekul radikal bebas sehingga atom dengan elektron yang tidak berpasangan mendapat pasangan elektron. Antioksidan berperan dalam pencegahan berbagai penyakit seperti penyakit degeneratif dan kanker. Antioksidan alami yang berasal dari makanan, seperti sayur-mayur antara lain bayam, brokoli, wortel dan berbagai buah-buahan antara lain apel, jeruk dan suplemen makanan termasuk vitamin A, vitamin E, vitamin C dan betakaroten yang apabila dikonsumsi memberi manfaat yang baik, mempertahankan tubuh dari gangguan kesehatan baik yang berasal dari dalam maupun dari luar tubuh (Kumalaningsih, 2006; Kosasih, dkk., 2004).
mengandung komponen penting seperti flavonoid. Secara umum dapat dikatakan bahwa kegunaan zat-zat yang terkandung dalam kulit buah jeruk dapat mencegah kanker, mencegah kebutaan akibat lanjut usia, menurunkan kolesterol, dan juga menjaga kesehatan jantung. Beberapa diantara kulit buah jeruk yang dimanfaatkan oleh masyarakat adalah kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali. Dalam literatur yang tertera hanya karakterisasi simplisia dan skrining fitokimia untuk kulit buah jeruk purut sedangkan karakterisasi simplisia dan skrining fitokimia untuk kulit buah jeruk kesturi, lemon, dan bali belum tertera dalam literatur (Kumalaningsih, 2006; Nuraini, 2011).
Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah Radical 1,1-diphenyl -2-picrylhydrazil (DPPH) Scavenging Method atau Metode pemerangkapan radikal DPPH, merupakan metode yang paling sederhana, cepat dan murah untuk mengukur kemampuan antioksidan yang terdapat pada makanan, buah-buahan dan sayur-sayuran dalam meredam radikal bebas (Prakash, 2001).
Pada metode DPPH sebaiknya digunakan standard atau kontrol positif. Standard yang umum digunakan adalah asam askorbat (vitamin C). Standard ini digunakan untuk memastikan bahwa prosedur yang dilakukan telah sesuai dengan metode (Molyneux, 2004).
1.2Perumusan Masalah
1. Apakah simplisia kulit buah jeruk purut memenuhi persyaratan karakterisasi simplisia yang tertera pada Materia Medika Indonesia?
2. Apakah simplisia kulit buah jeruk kesturi, lemon, dan bali dapat diketahui karakteristik simplisianya sesuai dengan metode yang tertera pada Materia Medika Indonesia?
3. Apakah ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali memiliki aktivitas antioksidan?
4. Bagaimana perbedaan aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali?
5. Bagaimana aktivitas antioksidan ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, purut, lemon, dan bali jika dibandingkan dengan aktivitas antioksidan dari vitamin C?
1.3Hipotesis
1. Simplisia kulit buah jeruk purut memenuhi persyaratan karakterisasi simplisia yang tertera pada Materia Medika Indonesia.
2. Simplisia kulit buah jeruk kesturi, lemon, dan bali dapat diketahui karakteristik simplisianya sesuai dengan metode yang tertera pada Materia Medika Indonesia.
3. Ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali memiliki aktivitas antioksidan.
5. Aktivitas antioksidan ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali lebih lemah dibandingkan aktivitas antioksidan vitamin C.
1.4 Tujuan Penelitian
1. Untuk mengetahui karakteristik simplisia kulit buah jeruk purut apakah memenuhi persyaratan sesuai dengan yang tertera pada Materia Medika Indonesia.
2. Untuk mengetahui karakteristik simplisia kulit buah jeruk kesturi, lemon, dan bali.
3. Untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali.
4. Untuk mengetahui perbedaan aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali.
5. Untuk mengetahui sejauh mana kekuatan antioksidan ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali dibandingkan vitamin C.
1.5 Manfaat Penelitian
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan
Uraian tumbuhan meliputi daerah tumbuh, sistematika tumbuhan, sinonim tumbuhan, nama daerah, nama asing, morfologi tumbuhan, kandungan kimia dan kegunaan dari tumbuhan.
2.1.1 Jeruk Kesturi
2.1.1.1 Sistematika Tumbuhan
Divisi : Spermatophyta Subdivisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Rutales
Suku : Rutaceae
Genus : Citrus
Spesies : Citrus microcarpa Bunge (Nuraini, 2011). 2.1.1.2 Sinonim Tumbuhan
Sinonim Citrus mitis
Citrus fortunella (Setiadi dan Parimin, 2004). 2.1.1.3 Nama Daerah
Indonesia: Jeruk kesturi, jeruk potong, jeruk peras (Setiadi dan Parimin, 2004).
2.1.1.4 Nama Asing
2.1.1.5 Daerah Tumbuh
Jeruk peras atau jeruk kesturi tumbuh baik di daerah dataran rendah beriklim panas dengan curah hujan rata-rata 1500-2000 mm3/tahun. Tanah tempat tumbuhnya mengandung bahan organik, bisa berupa tanah liat-berlempung, tanah berkapur, atau tanah berpasir. Derajat keasaman (pH) tanah antara 5,5-7,0. Meskipun toleran terhadap kekeringan, jeruk peras tidak begitu tahan terhadap terpaan angin kencang (Setiadi dan Parimin, 2004).
2.1.1.6 Morfologi Tumbuhan
Buah jeruk kesturi berbentuk bulat dan bergaris tengah 4,5 cm. Bagian atas buah memipih atau rata (bulat menggepeng). Kulit buah kuning kehijau-hijauan sampai jingga (buah tua). Bobot buah kurang lebih sama dengan jeruk nipis, yaitu antara 20-30 buah per kg (Setiadi dan Parimin, 2004).
2.1.1.7 Kandungan Kimia
Kulit buah jeruk kesturi memiliki rasa pahit yang disebabkan oleh adanya kandungan naringin. Flavedo mengandung senyawa steroid, sedangkan albedo kaya akan senyawa fenolik (Anonima, 2008).
2.1.1.8 Kegunaan
Kulit buah jeruk kesturi biasanya diolah menjadi manisan, sari buah sirup, selai, dan konsentrat (Anonima, 2008).
2.1.2 Jeruk Lemon
2.1.2.1 Sistematika Tumbuhan
Ordo : Rutales
Suku : Rutaceae
Genus : Citrus
Spesies : Citrus limon (L.) Osbeck (Nuraini, 2011). 2.1.2.2 Sinonim Tumbuhan
Sinonim Citrus medica L. (Nuraini, 2011). 2.1.2.3 Nama Daerah
Indonesia: Jeruk tangan, jeruk honje (Sunda), jeruk sitrun (Jawa), jeruk lemon, dan jeruk sikade (Nuraini, 2011).
2.1.2.4 Nama Asing
Citroen (Belanda) (Nuraini, 2011). 2.1.2.5 Daerah Tumbuh
Tumbuhan ini cocok untuk daerah beriklim kering dengan musim dingin yang relatif hangat. Suhu ideal untuk jeruk lemon agar dapat tumbuh dengan baik adalah antara 15-30оC. Pada tanah yang subur, jeruk lemon dapat berbuah sepanjang tahun. Setelah berumur tiga tahun, jeruk lemon mulai berbuah (Nuraini, 2011; Setiadi dan Parimin, 2004).
2.1.2.6 Morfologi Tumbuhan
2.1.2.7 Kandungan Kimia
Kulit buah jeruk lemon mengandung tangerine yaitu jenis antioksidan kuat yang disebut super-flavonoids, yang bisa mengurangi kadar kolesterol jahat secara signifikan, tanpa menurunkan kadar kolesterol baiknya (Anonimb, 2012).
2.1.2.8 Kegunaan
Kulit buah jeruk lemon digunakan dalam membuat roti, manisan, dan untuk menambah rasa makanan. Selain itu, kulit buah ini juga berfungsi untuk mencegah kanker (Nuraini, 2011).
2.1.3 Jeruk Purut
2.1.3.1 Sistematika Tumbuhan
Divisi : Spermatophyta Subdivisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Rutales
Suku : Rutaceae
Genus : Citrus
Spesies : Citrus hystrix DC. (Nuraini, 2011). 2.1.3.2 Sinonim Tumbuhan
Sinonim Citrus paeda Miq. (Nuraini, 2011). 2.1.3.3 Nama Daerah
2.1.3.4 Nama Asing
Kaffir lime leaf and zest (Inggris), bai magrut, kabuyao, percupin orange, citron combara (Nuraini, 2011).
2.1.3.5 Daerah Tumbuh
Jeruk purut bisa tumbuh pada daerah dengan ketinggian antara 0-1000 dpl. Jeruk tersebut bisa ditanam didaerah sangat basah atau daerah basah (Setiadi dan Parimin, 2004).
2.1.3.6 Morfologi Tumbuhan
Citrus hystrix D.C. termasuk tumbuhan berkayu, merupakan pohon
dengan tinggi 5-7,5 m. Batang tegak, bulat, berduri, hijau kotor. Daun tunggal, berseling, lonjong, tepi beringgit, ujung meruncing, pangkal membulat, panjang 4-5,5 cm, lebar 2-2,5 cm. Buah bulat, diameter 4-5 cm, permukaan berkerut, hujau. Biji bulat telur, putih. Daging buah hijau, rasanya sangat asam sangat pahit (Nuraini, 2011).
2.1.3.7 Kandungan Kimia
Kandungan flavonoid pada kulit jeruk purut, terutama naringenin dan hesperidin bersifat sebagai antioksidan (Anonimc, 2012).
2.1.3.8 Kegunaan
Kulit buah jeruk purut dapat digunakan sebagai penyedap masakan dan antiseptik (Nuraini, 2011).
2.1.4 Jeruk Bali
2.1.4.1 Sistematika Tumbuhan
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Rutales
Suku : Rutaceae
Genus : Citrus
Spesies : Citrus maxima (Burm.) Osbeck (Nuraini, 2011). 2.1.4.2 Sinonim Tumbuhan
Sinonim Citrus Celebia Citrus decumanus L.
Citrus grandis (Nuraini, 2011). 2.1.4.3 Nama Daerah
Indonesia: Jeruk bali, jeruk besar, jeruk cikoneng, jeruk limau makan, jeruk limau besar, dan jeruk pamelo (Nuraini, 2011).
2.1.4.4 Nama Asing
Pomelo (Inggris) (Nuraini, 2011). 2.1.4.5 Daerah Tumbuh
Jeruk ini tumbuh dengan baik di dataran rendah hingga ketinggian 1000 ml dpl (Nuraini, 2011).
2.1.4.6 Morfologi Tumbuhan
daging buah merah muda. Daging buah memiliki tekstur keras sampai lunak, rasa manis sampai sedikit asam, dan berbiji sedikit (Nuraini, 2011).
2.1.4.7 Kandungan Kimia
Kulit buah jeruk bali mengandung likopen yang dapat menghambat proses oksidasi (Nuraini, 2011).
2.1.4.8 Kegunaan
Kulit buah jeruk bali berkhasiat mengobati luka, menghentikan batuk, gangguan pencernaan. Kulit buah jeruk bali dapat dimanfaatkan sebagai manisan (Nuraini, 2011).
2.2 Ekstraksi
Ekstraksi adalah suatu proses pemisahan kandungan senyawa kimia dari jaringan tumbuhan maupun hewan. Sebelum ekstraksi dilakukan biasanya bahan-bahan dikeringkan terlebih dahulu kemudian dihaluskan pada derajat kehalusan tertentu (Harborne, 1987).
Menurut Depkes RI (2000), beberapa metode ekstraksi yang sering digunakan dalam berbagai penelitian antara lain yaitu:
A. Cara dingin 1. Maserasi
dilakukan penyaringan terhadap maserat pertama dan seterusnya disebut remaserasi.
2. Perkolasi
Perkolasi adalah proses penyarian simplisia dengan pelarut yang selalu baru sampai terjadi penyarian sempurna yang umumnya dilakukan pada temperatur kamar. Proses perkolasi terdiri dari tahap pelembaban bahan, tahap perendaman antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak) terus-menerus sampai diperoleh perkolat yang jumlahnya 1-5 kali bahan.
B. Cara panas 1. Refluks
Refluks adalah proses penyarian simplisia dengan menggunakan alat pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik.
2. Digesti
Digesti adalah proses penyarian dengan pengadukan kontinu pada temperatur lebih tinggi daripada temperatur ruangan, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50°C.
3. Sokletasi
Sokletasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut yang selalu baru, dilakukan dengan menggunakan alat soklet sehingga menjadi ekstraksi kontinu dengan pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik.
4. Infudasi
5. Dekoktasi
Dekoktasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada temperatur 90°C selama 30 menit.
2.3 Radikal Bebas
Radikal bebas adalah setiap molekul yang mengandung satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan. Radikal bebas sangat reaktif dan dengan mudah menjurus ke reaksi yang tidak terkontrol, menghasilkan ikatan silang pada DNA, protein, lipida, atau kerusakan oksidatif pada gugus fungsional yang penting pada biomolekul ini. Perubahan ini akan menyebabkan proses penuaan. Radikal bebas juga terlibat dan berperan dalam penyebab dari berbagai penyakit degeneratif, yakni kanker, aterosklerosis, jantung koroner, katarak, dan penyakit degenerasi saraf seperti Parkinson (Silalahi, 2006).
Sifat radikal bebas yang tidak stabil menyebabkan reaksi menerima atau memberikan elektron dengan molekul sekitarnya. Kebanyakan molekul ini bukan radikal bebas melainkan makromolekul biologi seperti lipid, protein, asam nukleat, dan karbohidrat. Dengan reaksi ini timbullah reaksi radikal bebas beruntun yaitu terbentuknya radikal bebas baru yang bereaksi lagi dengan makromolekul lain (Kosasih, dkk., 2004).
Secara umum tahapan reaksi pembentukan radikal bebas adalah sebagai berikut:
I. Inisiasi
RH + initiator → R●
II. Propagasi
R● + O2 → ROO●
ROO● + RH → ROOH + R● III. Terminasi
R● + R●→ RR
ROO● + R●→ ROOR
Tahap inisiasi adalah tahap awal terbentuknya radikal bebas. Tahap propagasi adalah tahap perpanjangan radikal berantai, dimana terjadi reaksi antara suatu radikal dengan senyawa lain dan menghasilkan radikal baru. Tahap terminasi adalah tahap akhir, terjadinya pengikatan suatu radikal bebas dengan radikal bebas yang lain sehingga menjadi tidak reaktif lagi. Ketika proses tersebut terjadi maka siklus reaksi radikal telah berakhir (Kumalaningsih, 2006; McMurry, 2008).
2.4 Antioksidan
Antioksidan adalah senyawa yang mempunyai struktur molekul yang dapat memberikan elektronnya kepada molekul radikal bebas tanpa terganggu sama sekali dan dapat memutus reaksi berantai dari radikal bebas (Kumalaningsih, 2006).
Terdapat tiga macam antioksidan yaitu:
b. antioksidan alami yang dapat diperoleh dari tanaman atau hewan, yaitu tokoferol, vitamin C, betakaroten, flavonoid dan senyawa fenolik.
c. antioksidan sintetik, yang dibuat dari bahan-bahan kimia yaitu Butylated
Hydroxyanisole (BHA) dan Butylated Hydroxytoluen (BHT) yang
ditambahkan dalam makanan untuk mencegah kerusakan lemak (Kumalaningsih, 2006).
Antioksidan dalam tubuh dibedakan atas tiga kelompok, yaitu (1) antioksidan primer yang bekerja dengan cara mencegah terbentuknya radikal bebas yang baru dan mengubah radikal bebas menjadi molekul yang tidak merugikan; (2) antioksidan sekunder yang berfungsi untuk menangkap radikal bebas dan menghalangi terjadinya reaksi berantai dan (3) antioksidan tertier yang bermanfaat untuk memperbaiki kerusakan biomolekuler yang disebabkan oleh radikal bebas (Silalahi, 2006).
2.4.1 Vitamin C
Struktur kimia vitamin C dapat dilihat pada Gambar 2.1 berikut:
Gambar 2.1 Struktur kimia vitamin C
Vitamin C merupakan suatu antioksidan penting yang larut dalam air. Vitamin C mempunyai potensi sebagai antioksidan dengan mendonorkan hidrogen dari gugus hidroksilnya kepada radikal bebas. Vitamin C juga dapat meningkatkan kekebalan tubuh terhadap infeksi dan virus. Aktivitas sistem kekebalan yang optimum memerlukan keseimbangan antara pembentukan radikal bebas dan proteksi antioksidan (Silalahi, 2006).
2.4.2 Flavonoid
Flavonoid memiliki sifat antioksidan. Senyawa ini berperan sebagai penangkap radikal bebas karena mengandung gugus hidroksil. Karena bersifat sebagai reduktor, flavonoid dapat bertindak sebagai donor hidrogen terhadap radikal bebas (Silalahi, 2006).
Kerangka flavonoid dapat dilihat pada Gambar 2.2 berikut:
Gambar 2.2 Kerangka flavonoid
Flavonoid terdapat dalam tumbuhan sebagai campuran dari flavonoid yang berbeda golongan dan jarang sekali dijumpai hanya flavonoid tunggal. Flavonoid pada tumbuhan terdapat dalam berbagai bentuk struktur molekul dengan beberapa bentuk kombinasi glikosida. Untuk menganalisis flavonoid lebih baik memeriksa aglikon yang telah terhidrolisis daripada dalam bentuk glikosida dengan strukturnya yang rumit dan kompleks. Flavonoid dapat berkhasiat sebagai antioksidan, antibakteri dan antiinflamasi (Harborne, 1984).
Struktur dasar dan sistem penomoran untuk turunan flavonoid dapat dilihat pada Gambar 2.3 berikut:
Gambar 2.3 Struktur dasar flavonoid
2.5 Spektrofotometri UV-Visible
elektromagnetik pada panjang gelombang tertentu, yang diserap zat (Depkes RI, 1979).
Berdasarkan panjang gelombang spektrofotometri dibagi dua yaitu spektrofotometri ultraviolet dengan panjang gelombang 200-400 nm, digunakan untuk senyawa yang tidak berwarna dan spektrofotometri visibel (sinar tampak) dengan panjang gelombang 400-750 nm, digunakan untuk senyawa yang berwarna (Rohman, 2007).
2.6Metode Pemerangkapan Radikal 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH) pertama kali ditemukan pada tahun 1922 oleh Goldschmidt dan Renn. DPPH berwarna ungu pekat seperti KMnO4, bersifat tidak larut dalam air (Ionita, 2005).
Struktur kimia radikal bebas DPPH dapat dilihat pada Gambar 2.4 berikut ini:
Gambar 2.4 Struktur kimia radikal bebas DPPH
molekul DPPH memberikan serapan maksimum pada panjang gelombang tertentu, berwarna ungu. Warna akan berubah dari ungu menjadi kuning lemah apabila elektron ganjil tersebut berpasangan dengan atom hidrogen yang disumbangkan senyawa antioksidan. Perubahan warna ini berdasarkan reaksi kesetimbangan kimia (Prakash, 2001).
DPPH merupakan radikal bebas yang stabil karena resonansi yang dialaminya. Resonansi juga menyebabkan peningkatan kepekatan warna ungu (Molyneux, 2004).
Resonansi DPPH dapat dilihat pada Gambar 2.5 berikut ini:
Gambar 2.5 Resonansi DPPH
Gambar 2.6 Reaksi antara DPPH dengan atom H dari senyawa antioksidan
2.6.1 Pelarut
Metode pemerangkapan radikal 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) akan memberi hasil yang baik dengan menggunakan pelarut metanol atau etanol dan kedua pelarut ini tidak mempengaruhi dalam reaksi antara sampel uji sebagai antioksidan dengan DPPH sebagai radikal bebas (Molyneux, 2004).
2.6.2 Pengukuran absorbansi – panjang gelombang
Panjang gelombang maksimum (λmaks) yang digunakan dalam pengukuran
sampel uji sangat bervariasi. Menurut beberapa literatur panjang gelombang maksimum untuk DPPH antara lain 515 nm, 516 nm, 517 nm, 518 nm, 519 nm dan 520 nm. Apabila pengukuran menghasilkan tinggi puncak maksimum, maka itulah panjang gelombangnya yaitu sekitar panjang gelombang yang disebutkan di atas. Nilai absorbansi yang mutlak tidaklah penting, karena panjang gelombang dapat diatur untuk memberikan absorbansi maksimum sesuai dengan alat yang digunakan (Molyneux, 2004).
2.6.3 Waktu pengukuran
BAB III
METODE PENELITIAN
Metode penelitian yang dilakukan adalah penelitian eksperimental. Penelitian meliputi pengumpulan dan penyiapan bahan, karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak etanol kulit buah jeruk, pengujian aktivitas antioksidan kulit buah jeruk dan vitamin C dengan metode peredaman radikal bebas DPPH dengan menggunakan alat spektrofotometer visible.
3.1 Alat
Alat-alat yang digunakan terdiri dari alat-alat gelas laboratorium, spektrofotometer UV-Visible (Shimadzu 1800), rotary evaporator (Heidolph VV 2000), oven listrik (Strok), neraca kasar (Ohaus), neraca analitis (Vibra), blender (National), penangas air (Yenaco), seperangkat alat penetapan kadar air, desikator, cawan porselin, mikroskop, object glass, gelas penutup, lemari pengering, krus tang dan pisau.
3.2 Bahan
kalium iodida, kloralhidrat, asam asetat anhidrida, natrium hidroksida, amil alkohol, natrium sulfat anhidrat, serbuk magnesium. Bahan kimia berkualitas teknis; etanol 96%.
3.3 Penyiapan Bahan Tumbuhan
Penyiapan bahan tumbuhan meliputi pengambilan bahan kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali., identifikasi kulit buah jeruk, dan pembuatan simplisia kulit buah jeruk.
3.3.1 Pengumpulan bahan tumbuhan
Metode pengumpulan bahan kulit buah jeruk dilakukan secara purposif
yaitu tanpa membandingkan dengan bahan kulit buah jeruk yang sama dari daerah lain. Bahan yang digunakan adalah kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali yang diperoleh dari Supermarket Brastagi, Jln. Gatot Subroto, Medan.
3.3.2 Identifikasi tumbuhan
Identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Bogoriense, Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-LIPI Bogor.
3.3.3 Pembuatan simplisia
3.4. Pembuatan Pereaksi 3.4.1 Pereaksi Bouchardat
Sebanyak 4 g kalium iodida ditimbang, dilarutkan dalam air suling secukupnya, lalu ditambahkan 2 g iodium kemudian ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.2 Pereaksi Mayer
Sebanyak 1,4 g raksa (II) klorida dilarutkan dalam air suling hingga 60 ml, pada wadah lain ditimbang sebanyak 5 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 10 ml air suling, kedua larutan dicampurkan dan ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.3 Pereaksi Dragendorff
Sebanyak 0,8 g bismut (III) nitrat ditimbang, dilarutkan dalam 20 ml asam nitrat pekat, pada wadah lain ditimbang sebanyak 27,2 g kalium iodida, dilarutkan dalam 50 ml air suling, kemudian kedua larutan dicampurkan dan didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan yang jernih diambil dan diencerkan dengan air suling hingga volume larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.4 Pereaksi Molish
Sebanyak 3 g α-naftol ditimbang, dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.5 Pereaksi asam klorida 2 N
3.4.6 Pereaksi asam sulfat 2 N
Sebanyak 5,4 ml larutan asam sulfat pekat ditambahkan air suling sampai 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.7 Pereaksi natrium hidroksida 2 N
Sebanyak 8 g kristal natrium hidroksida dilarutkan dengan air suling sebanyak 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.8 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M
Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air suling bebas karbon dioksida sebanyak 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.9 Pereaksi besi (III) klorida 1%
Sebanyak 1 g besi (III) klorida ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air secukupnya hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.10 Pereaksi kloralhidrat
Sebanyak 8 gram kristal kloralhidrat ditimbang lalu dilarutkan dalam 10 ml air suling (Depkes RI, 1995).
3.4.11 Pereaksi Liebermann-Burchard
Sebanyak 20 bagian asam asetat anhidrida dicampur dengan 1 bagian asam sulfat pekat. Larutan pereaksi ini harus dibuat baru (Harborne, 1984).
3.4.12 Larutan DPPH 0,5 mM
3.5 Pemeriksaan Makroskopik dan Mikroskopik Kulit Buah Jeruk Segar 3.5.1 Pemeriksaan Makroskopik
Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan memperhatikan bentuk, ukuran, bau, rasa dan warna kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali.
3.5.2 Pemeriksaan Mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik jaringan segar dilakukan sebagai acuan terhadap fragmen-fragmen yang terdapat pada simplisia kulit buah jeruk. Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap penampang melintang jaringan segar dari kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali dengan cara, 2-3 tetes larutan kloralhidrat diteteskan di atas kaca objek lalu sayatan jaringan segar diletakkan diatasnya, kemudian ditutup dengan kaca penutup, lalu diamati di bawah mikroskop.
3.6 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
Pemeriksaan karakteristik simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik, pemeriksaan mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari yang larut dalam air, penetapan kadar sari yang larut dalam etanol, penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam.
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap simplisia kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali dengan cara, 2-3 tetes larutan kloralhidrat diteteskan di atas kaca objek lalu serbuk simplisia diletakkan diatasnya, kemudian ditutup dengan kaca penutup, lalu diamati di bawah mikroskop.
3.6.3 Penetapan kadar air
Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi. Alat terdiri dari labu alas bulat 500 ml, alat penampung dan pendingin, tabung penyambung dan penerima 10 ml. Cara kerja:
a. Penjenuhan toluen
Sebanyak 200 ml toluen dan 2 ml air suling dimasukkan ke dalam labu alas bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml.
b. Penetapan kadar air simplisia
volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (v/b) (WHO, 1998).
3.6.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air
Sebanyak 5 g serbuk yang telah dikeringkan dimaserasi selama 24 jam dengan 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air sampai 1 liter) menggunakan labu bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah ditara dan dipanaskan pada suhu 105ºC sampai bobot tetap. Kadar sari yang larut dalam air dihitung dalam persen terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995). 3.6.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
Sebanyak 5 g serbuk yang telah dikeringkan dimaserasi selama 24 jam dengan 100 ml etanol 95% menggunakan labu bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah ditara dan dipanaskan pada suhu 105ºC sampai bobot tetap. Kadar sari yang larut dalam etanol dihitung dalam persen terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).
3.6.6 Penetapan kadar abu total
diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).
3.6.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam
Abu yang diperoleh dalam penetapan kadar abu dididihkan dalam 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring dipijarkan sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).
3.7 Skrining Fitokimia
Skirining fitokimia meliputi pemeriksaan senyawa golongan alkaloida, glikosida, flavonoid, steroid/triterpenoid, saponin, tannin dan antrakinon.
3.7.1 Pemeriksaan alkaloid
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia ditimbang, ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring, filtrat dipakai untuk uji alkaloida. Diambil 3 tabung reaksi, lalu ke dalam masing-masing tabung reaksi dimasukkan 0,5 ml filtrat.
Pada tabung I : ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer, akan terbentuk endapan menggumpal berwarna putih atau kuning
Pada tabung II : ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff, akan terbentuk endapan berwarna coklat atau jingga kecoklatan.
Alkaloid disebut positif jika terjadi endapan atau kekeruhan pada dua atau tiga dari percobaan di atas (Depkes RI, 1995).
3.7.2 Pemeriksaan glikosida
Sebanyak 3 g serbuk simplisia ditimbang, disari dengan 30 ml campuran dari 7 bagian etanol 95% dengan 3 bagian air suling (7:3) dan 10 ml asam klorida 2N. Kemudiaan direfluks selama 10 menit, didinginkan, lalu disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M dikocok, didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:3), perlakuan ini diulangi sebanyak 3 kali. Sari air dikumpulkan kemudiaan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 500C, sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sisa digunakan untuk percobaan berikut, 0,1 ml larutan percobaan dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian diuapkan di atas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes larutan pereaksi Molish, lalu ditambahkan dengan perlahan-lahan 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuk cincin ungu pada batas kedua cairan, menunjukkan adanya ikatan gula (glikon) atau glikosida (Depkes RI, 1995).
3.7.3 Pemeriksaan steroid/triterpenoid
3.7.4 Pemeriksaan flavonoid
Sebanyak 10 g serbuk simplisia ditimbang, dilarutkan 100 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah atau kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966). 3.7.5 Pemeriksaaan tanin
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia ditimbang, disari dengan 10 ml air suling lalu disaring, filtratnya diencerkan dengan air sampai tidak berwarna. Larutan diambil sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Depkes RI, 1995).
3.7.6 Pemeriksaan saponin
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia ditimbang, dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan, kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik. Saponin positif jika terbentuk busa yang stabil tidak kurang dari 10 menit setinggi 1 sampai 10 cm dan dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2 N buih tidak hilang (Depkes RI, 1995).
3.7.7 Pemeriksaan antrakinon
3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Jeruk Kesturi, Lemon, Purut, dan Bali
Pembuatan ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali dilakukan dengan cara maserasi. Prosedur pembuatan ekstrak: sebanyak 150 g serbuk simplisia dimasukkan ke dalam bejana tertutup, dituangi dengan 1125 ml etanol 96%, ditutup, dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk. Setelah 5 hari campuran tersebut diserkai. Ampas dicuci dengan etanol 96% secukupnya sehingga diperoleh 1500 ml maserat. Pindahkan dalam bejana tertutup dan dibiarkan di tempat sejuk terlindung dari cahaya selama 2 hari kemudian di enaptuang. Maserat diuapkan dengan bantuan alat penguap vakum putar sampai diperoleh ekstrak kental kemudian ekstrak dikeringkan dengan
freeze dryer (Depkes RI, 1979). Bagan ekstraksi dapat dilihat pada Lampiran 5, halaman 69.
3.9 Pengujian Kemampuan Antioksidan dengan Spektrofotometer UV- visible
3.9.1 Prinsip metode pemerangkapan radikal bebas DPPH
Kemampuan sampel uji dalam meredam proses oksidasi radikal bebas DPPH dalam larutan metanol (sehingga terjadi perubahan warna DPPH dari ungu menjadi kuning) dengan nilai IC50 (konsentrasi sampel uji yang memerangkap radikal bebas 50%) sebagai parameter menentukan aktivitas antioksidan sampel. 3.9.2 Pembuatan larutan blanko
3.9.3 Pembuatan larutan induk
3.9.3.1 Pembuatan larutan induk sampel uji
Sebanyak 25 mg sampel uji (ekstrak kental) ditimbang, dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dilarutkan dengan metanol lalu volumenya dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda (konsentrasi 1000 ppm).
3.9.3.2 Pembuatan larutan induk vitamin C
Sebanyak 25 mg serbuk vitamin C ditimbang, dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dilarutkan dengan metanol lalu volumenya dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda (konsentrasi 1000 ppm).
3.9.4 Pembuatan larutan uji
3.9.4.1 Larutan uji ekstrak kulit jeruk
Larutan induk dipipet sebanyak 1,25 ml; 2,5 ml; 5 ml; 10 ml ke dalam labu ukur 25 ml untuk mendapatkan konsentrasi larutan uji 50 ppm, 100 ppm, 200 ppm, 400 ppm kedalam masing-masing labu ukur ditambahkan 5 ml larutan DPPH 0,5 mM (konsentrasi 40 ppm) lalu volumenya dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda. Diamkan selama 60 menit, lalu diukur serapannya menggunakan spektrofotometer UV-visible, panjang gelombang 516 nm.
3.9.4.2 Larutan uji vitamin C
3.9.5 Analisis persen pemerangkapan radikal bebas DPPH
Penentuan persen pemerangkapan radikal bebas oleh sampel uji, ekstrak etanol kulit buah jeruk dengan vitamin C sebagai kontrol positif, menggunakan metode pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH), yaitu dihitung dengan rumus:
% inhibisi = x 100%
kontrol A
sampel A -kontrol A
Keterangan: Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel Asampel = Absorbansi sampel
3.9.6 Analisis nilai IC50
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan
Hasil identifikasi yang dilakukan di Herbarium Bogoriense, Bidang Botani, Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor terhadap tumbuhan jeruk kesturi, jeruk lemon, jeruk purut, dan jeruk bali adalah Citrus microcarpa Bunge, Citrus limon (L.) Osbeck, Citrus hystrix DC., dan Citrus maxima (Burm.) Osbeck dari suku Rutaceae. Hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1, halaman 51.
4.2 Hasil Pemeriksaan Makroskopik dan Mikroskopik Kulit Buah Jeruk Segar
4.2.1 Hasil Pemeriksaan Makroskopik
kulit buah; panjang kira-kira 5-7 cm, lebar 1,5-2,5 cm dan berbau khas. Gambar kulit buah jeruk segar dapat dilihat pada Lampiran 2, halaman 52, 54, 56, 58. 4.2.2 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik
Hasil pemeriksaan mikroskopik kulit buah jeruk kesturi. Pada penampang melintang kulit segar tampak kutikula, bagian sel epidermis, dibawah epidermis terdapat flavedo, rongga skizolisigen, kelenjar minyak, albedo, dan berkas pembuluh.
Hasil pemeriksaan mikroskopik kulit buah jeruk lemon. Pada penampang melintang kulit segar tampak sisik kelenjar, kutikula, bagian sel epidermis, dibawah epidermis terdapat flavedo, rongga skizolisigen, kelenjar minyak, albedo, dan berkas pembuluh.
Hasil pemeriksaan mikroskopik kulit buah jeruk purut. Pada penampang melintang kulit segar tampak kutikula, bagian sel epidermis, dibawah epidermis terdapat, flavedo, rongga skizolisigen, kelenjar minyak, albedo, dan berkas pembuluh.
4.3 Hasil Karakteristik Simplisia 4.3.1 Hasil Pemeriksaan Makroskopik
Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia kulit buah jeruk kesturi kering dicirikan dengan kulit buah berwarna hijau kecoklatan, bagian dalam berwarna coklat, menggulung ke dalam, berupa potongan-potongan kecil kulit buah yang telah dikeringkan; panjang kira-kira 2-2,5 cm, lebar 1-1,5 cm dan berbau khas. Serbuk simplisia kulit buah jeruk kesturi dicirikan dengan serbuk berwarna hijau kecoklatan dan berbau khas.
Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia kulit buah jeruk lemon kering dicirikan dengan kulit buah berwarna kuning kecoklatan, bagian dalam berwarna putih kecoklatan, berupa potongan-potongan kecil kulit buah yang telah dikeringkan; panjang kira-kira 3,5-4,5 cm, lebar 1-2 cm dan berbau khas. Serbuk simplisia kulit buah jeruk lemon dicirikan dengan serbuk berwarna kuning kecoklatan dan berbau khas.
Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia kulit buah jeruk purut kering dicirikan dengan kulit buah berwarna hijau kecoklatan, bagian dalam berwarna putih kecoklatan, menggulung ke dalam, berupa potongan-potongan kecil kulit buah yang telah dikeringkan; panjang kira-kira 4-5 cm, lebar 1-1,5 cm dan berbau khas. Serbuk simplisia kulit buah jeruk purut dicirikan dengan serbuk berwarna hijau kecoklatan dan berbau khas.
simplisia kulit buah jeruk bali dicirikan dengan serbuk berwarna kuning kecoklatan dan berbau khas. Gambar simplisia dan serbuk simplisia kulit jeruk dapat dilihat pada Lampiran 2, halaman 53, 55, 57, 59.
4.3.2 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik
Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia kulit buah jeruk kesturi warna hijau kecoklatan, terdapat epidermis, stomata tipe anomositik, fragmen rongga skizolisigen, kristal kalsium oksalat bentuk prisma dan berkas pembuluh dengan penebalan spiral. Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia kulit buah jeruk lemon warna kuning kecoklatan, terdapat epidermis, stomata tipe anomositik, fragmen rongga skizolisigen, kristal kalsium oksalat bentuk prisma dan berkas pembuluh dengan penebalan spiral. Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia kulit buah jeruk purut warna hijau kecoklatan, terdapat epidermis, stomata tipe anomositik, fragmen rongga skizolisigen, kristal kalsium oksalat bentuk prisma dan berkas pembuluh dengan penebalan spiral. Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia kulit buah jeruk bali warna kuning kecoklatan, terdapat epidermis, stomata tipe anomositik, fragmen rongga skizolisigen, kristal kalsium oksalat bentuk prisma dan berkas pembuluh dengan penebalan spiral. Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia dapat dilihat pada Lampiran 3, halaman 61, 63, 65, 67.
4.3.3 Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia
Tabel 4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia kulit buah jeruk purut
No. Penetapan Hasil (%) Persyaratan
Karakterisasi Simplisia Menurut
MMI Jilid VI Kulit Buah Jeruk
Purut
1 Penetapan kadar air 5,99 <10%
2 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
21,52 >5%
3 Penetapan kadar sari yang larut dalam air
22,33 >22%
4 Penetapan kadar abu total 7,75 <8%
5 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam
0,56 <1%
Tabel 4.2 Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia kulit buah jeruk kesturi, lemon, dan bali
No. Penetapan Hasil (%)
2 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
10,68 17,44 16,25
3 Penetapan kadar sari yang larut dalam air
27,15 21,17 17,52
4 Penetapan kadar abu total 7,81 4,57 4,27
5 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam
0,90 0,38 0,26
namun sebagian besar hasil yang diperoleh mendekati persyaratan karakterisasi simplisia kulit buah jeruk purut.
Penetapan kadar air dilakukan berhubungan dengan mutu simplisia agar tidak mudah ditumbuhi mikroorganisme. Kadar air simplisia kulit buah jeruk kesturi, purut, lemon, dan bali berturut-turut yaitu 7,99; 5,99; 7,96; 8,99 memenuhi persyaratan Materia Medika Indonesia yaitu tidak lebih dari 10% (Depkes RI,1995).
Penetapan kadar sari dilakukan terhadap sari larut air dan sari larut etanol. Penetapan kadar sari menyatakan jumlah zat yang tersari dalam air atau etanol (Depkes RI,1995).
Penetapan kadar abu dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa anorganik dalam simplisia misalnya Mg, Ca, Na dan K. Kadar abu tidak larut asam untuk mengetahui kadar senyawa anorganik yang tidak larut dalam asam misalnya silika (WHO, 1998).
4.4 Hasil Skrining Fitokimia
Tabel 4.3 Hasil skrining fitokimia
No. Pemeriksaan Hasil
Kulit Jeruk Kesturi
Kulit Jeruk Purut
Kulit Jeruk Lemon
Kulit Jeruk Bali
1 Alkaloida - - - -
2 Flavonoida + + + +
3 Glikosida + + + +
4 Antrakinon - - - -
5 Saponin - - - -
6 Tanin + + + +
7 Steroid/Triterpenoid + + + +
Keterangan: (+): mengandung golongan senyawa (-): tidak mengandung golongan senyawa
Hasil di atas menunjukkan bahwa simplisia kulit buah jeruk kesturi, purut, lemon, dan bali memiliki potensi sebagai antioksidan. Senyawa antioksidan alami dari tumbuhan, diantaranya senyawa polifenol yang dapat berupa golongan flavonoid. Senyawa-senyawa tersebut bertindak sebagai penangkap radikal bebas karena gugus hidroksil yang dikandungnya dalam hal ini disebut reduktor sehingga dapat mendonorkan hidrogen kepada radikal bebas (Kumalaningsih, 2006; Silalahi, 2006).
4.5 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Sampel Uji
Pengukuran aktivitas antioksidan terhadap sampel uji dilakukan secara spektrofotometri pada panjang gelombang 516 nm. Larutan DPPH dalam metanol menghasilkan serapan maksimum pada panjang gelombang 516 nm, termasuk dalam kisaran panjang gelombang sinar tampak (400-750 nm) (Rohman, 2007).
No. P/V Wavelength Abs. Description
1 516.00 1.144
A
bs
. 1
2.000
1.500
1.000
0.500
0.000
400.00 500.00 600.00 700.00 800.00 nm.
Gambar 4.1 Kurva serapan maksimum larutan DPPH 40 ppm dalam metanol secara spektrofotometri visible
Hasil uji aktivitas antioksidan diperoleh dari hasil pengukuran absorbansi DPPH dengan penambahan larutan uji dengan konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 200 ppm, dan 400 ppm yang dibandingkan dengan larutan kontrol DPPH (tanpa penambahan larutan uji). Pada hasil analisis aktivitas antioksidan ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali dapat dilihat adanya penurunan nilai absorbansi DPPH yang diberi larutan uji terhadap kontrol pada setiap kenaikan konsentrasi. Untuk melihat penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali dapat dilihat pada Tabel 4.4 dan penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan vitamin C dapat dilihat pada Tabel 4.5 berikut:
Tabel 4.4 Penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan ekstrak etanol kulit buah jeruk
No. Larutan uji
Konsentrasi (ppm)
Absorbansi % Peredaman
I II III I II III
1. Ekstrak etanol
kulit buah jeruk kesturi
0 1,131 1,142 1,064 - - -
2. Ekstrak
Tabel 4.5 Penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan vitamin C
Larutan uji
Konsentrasi (ppm)
Absorbansi % Peredaman
I II III I II II
pemerangkapan terjadi karena adanya transfer elektron atom hidrogen antioksidan kepada DPPH (Molyneux, 2004).
4.6 Hasil Analisis Nilai IC50 (Inhibitory Concentration) Sampel Uji
Nilai IC50 diperoleh berdasarkan perhitungan persamaan regresi linier, di mana konsentrasi larutan uji (ppm) sebagai absis (sumbu X) dan nilai persen peredaman sebagai ordinat (sumbu Y). Hasil persamaan regresi linier yang diperoleh untuk ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi memiliki persamaan regresi linier Y = 0,2101X + 6,6090, hasil analisis IC50 diperoleh 206,595 ppm. Ekstrak etanol kulit buah jeruk purut memiliki persamaan regresi linier Y = 0,1786X + 3,9740, hasil analisis IC50 diperoleh 258,64 ppm. Ekstrak etanol kulit buah jeruk lemon memiliki persamaan regresi linier Y = 0,2172X + 4,4680, hasil analisis IC50 diperoleh 210,33 ppm. Ekstrak etanol kulit buah jeruk bali memiliki persamaan regresi linier Y = 0,1379X + 2,9990, hasil analisis IC50 diperoleh 342,98 ppm. Vitamin C mempunyai persamaan regresi linier Y = 11,7970X + 3,0380 hasil analisis IC50 diperoleh 4,025 ppm.
Tabel 4.6 Kategori kekuatan aktivitas antioksidan
No. Kategori Konsentrasi (µg/ml)
1. Sangat kuat <50
2. Kuat 50-100
3. Sedang 101-150
4. Lemah 151-200
Dikutip dari Mardawati, dkk., 2008.
Kemampuan sampel uji dalam memerangkap 1,1-diphenyl-2 -picrylhidrazyl (DPPH) sebagai radikal bebas dalam larutan metanol dengan nilai IC50 (konsentrasi sampel uji yang mampu memerangkap radikal bebas sebesar 50%) digunakan sebagai parameter untuk menentukan aktivitas antioksidan sampel uji tersebut (Prakash, 2001).
Tabel 4.7 Nilai IC50 ekstrak etanol sampel uji dan vitamin C
No. Sampel IC50 (ppm)
1 Ekstrak etanol kulit jeruk kesturi 206,595 2 Ekstrak etanol kulit jeruk lemon 210,33 3 Ekstrak etanol kulit jeruk purut 258,64 4 Ekstrak etanol kulit jeruk bali 342,98
5 Vitamin C 4,025
antioksidan yang dapat larut (terekstraksi) dalam pelarut seperti senyawa golongan fenol, flavonoid, dan vitamin C.
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1Kesimpulan
1. Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia kulit buah jeruk purut memenuhi persyaratan karakterisasi simplisia yang tertera pada Materia Medika Indonesia. Hasil yang diperoleh yaitu kadar air 5,99%, kadar sari yang larut dalam air 22,33%, kadar sari yang larut dalam etanol 21,52%, kadar abu total 7,75%, dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,56%.
2. Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia kulit buah jeruk kesturi diperoleh kadar air 7,99%, kadar sari yang larut dalam air 27,15%, kadar sari yang larut dalam etanol 10,68%, kadar abu total 7,81%, dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,90%.
Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia kulit buah jeruk lemon diperoleh kadar air 7,96%, kadar sari yang larut dalam air 21,17%, kadar sari yang larut dalam etanol 17,44%, kadar abu total 4,57%, dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,38%.
Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia kulit buah jeruk bali diperoleh kadar air 8,99%, kadar sari yang larut dalam air 17,52%, kadar sari yang larut dalam etanol 16,25%, kadar abu total 4,27%, dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,26%.
4. Hasil pengukuran aktivitas antioksidan dengan menggunakan spektrofotometer visible pada panjang gelombang 516 nm mulai dari yang terendah sampai yang tertinggi berturut-turut adalah ekstrak etanol kulit buah jeruk bali, purut, lemon, dan kesturi.
5. Hasil pengukuran aktivitas antioksidan dengan menggunakan spektrofotometer visible pada panjang gelombang 516 nm dari ekstrak etanol kulit buah jeruk kesturi, lemon, purut, dan bali menunjukkan kekuatan antioksidan yang sangat lemah dibanding aktivitas antioksidan vitamin C (kontrol positif) yang sangat kuat.
5.2 Saran
DAFTAR PUSTAKA Anonima. (2008). Calamansi. Diakses Tanggal: 27 Juni 2012.
Anonimb. (2012). Kulit Buah Bisa untuk Antikanker dan Cegah Katarak. Diakses
Tanggal: 29 Juni 2012.
Anonimc. (2012). Kulit Jeruk Purut Kurangi Efek Kemo. Diakses Tanggal: 29 Juni
2012.
Departemen Kesehatan RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Depkes. Hal. 32-33.
Departemen Kesehatan RI. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi Keempat. Jakarta: Depkes. Hal. 39.
Departemen Kesehatan RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Depkes RI. Hal. 297-303, 321-325, 333-337.
Departemen Kesehatan RI. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Cetakan Pertama. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 9-11.
Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screening of Plants. Journal of Pharmaceutical Sciences. 55(3): 263.
Harborne, J.B. (1984). Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Terbitan Kedua. Bandung: Penerbit ITB. Hal. 35, 147.
Ionita, P. (2005). Is DPPH Stable Free Radical a Good Scavenger for Oxygen Active Species?. Bucharest. Chemical Paper. 59(1): 11-16.
Kosasih, E.N., Setiabudhi, T., dan Heryanto, H. (2004). Peranan Antioksidan pada Lanjut Usia. Jakarta: Pusat Kajian Nasional Masalah Lanjut Usia. Hal. 56-57. Kumalaningsih, S. (2006). Antioksidan Alami, Penangkal Radikal Bebas: Sumber,
manfaat, cara penyediaan dan pengolahan. Surabaya: Trubus Agrisana. Hal. 4-5, 16, 21, 24, 43.
Markham, K.R. (1988). Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Diterjemahkan Oleh: Kosasih Padmawinata. Bandung: Penerbit ITB. Hal. 1-16.
McMurry, J. (2008). Organic Chemistry. Edisi Ketujuh. USA: Physical Sciences. Hal. 140-141.
Molyneux, P. (2004). The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J. Sci. Technol, 26(2): 212.
Nuraini, D.N. (2011). Aneka Manfaat Kulit Buah dan Sayuran: Manfaat dan cara pemakaian. Yogyakarta: Andi Offset. Hal. 55, 63-67, 76-78.
Prakash, A. (2001). Antioxidant Activity. Analytical Progress. 19(2): 1-4.
Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal. 222. Rosidah., Yam, M.F., Sadikun, A., dan Asmawi, M.Z. (2008). Antioxidant Potential
of Gynura procumbens. Pharmaceutical Biology 46(9): 616-625.
Setiadi dan Parimin. (2004). Budi Daya Jeruk Asam di Kebun dan di Pot. Jakarta: Penebar Swadaya. Hal. 18-19, 24, 31.
Silalahi, J. (2006). Makanan Fungsional. Yogyakarta: Kanisius. Hal. 40-41, 47, 51-52, 54.
Lampiran 1. Hasil identifikasi tumbuhan
Gambar 2.1 Tanaman kulit jeruk kesturi yang diambil dari internet pada 10 Mei 2012
Gambar 2.3 Simplisia kulit jeruk kesturi
Gambar 2.5 Tanaman jeruk purut yang diambil dari internet pada 10 Mei 2012
